Bu proje, Doğa Bilimleri ve Mühendislik Araştırma Kanada Konseyi (355.881) ve Yenilik Kanada Vakfı hibe ile desteklenmiştir.

* En önemli adımlar. 1. Ekipman ve Yazılım <ol><li> Eğitim ve test bir gıda yuvası her iki tarafında (bkz. Tablo 1) yerleştirilmiş iki ultra hafif, katlanabilir kolları 1 ile donatılmış fare edimsel odalarında yapılır. Bir uyarıcı ışık her kolu üzerinde bulunan ve kafesin üstünde bir evde ışık yoktur. A pelet dağıtıcı odasının dışında yer alır. Her odası havalandırma fanı olan bir ses-azaltıcı kabin içinde yer alır. Chambers, &quot;Akıllı Kontrol&quot; arayüzü kabine ile MedPC IV yazılımına sahip bir PC bilgisayara bağlanır. </li></ol> Not: ultra-hafif kolları bulunmayan zaman burun açıkta fare çalışmaları için edimsel yanıt olarak kullanılması tavsiye edilir. Ancak, mevcut her iki seçeneği ile biz bu burun açıkta tepkiler olabilir b verilen motivasyon daha güvenilir bir tedbir olarak ultra-hafif kolları seçimi öneririme keşif koklama tarafından tetiklenen. <ol start="2"><li> Edimsel görevleri çalıştırmak için kullanılan MedPC programları, bir kullanıcı sağlanan programlama kılavuzu yardımı ile öğrenebilirsiniz Medstate notasyon kod yazılmıştır. Programlama mevcut kodları değiştirmek veya benzersiz bir deney parametreleri oluşturmak için kullanıcı için esneklik sağlar. Bazı kodlar Med Associates &quot;Medstate Notasyonu Repository&quot; ücretsiz olarak temin edilebilir <a href="http://www.mednr.com" target="_blank">http://www.mednr.com</a> . Ek kodlar Med Associates satın alınabilir. </li></ol> 2. Fare aklimasyonu ve Gıda Kısıtlama <ol><li> Varış fareleri üzerinde olan bir ters 12 saat aydınlık / karanlık döngüsüne alışmak için en az 10 gün boyunca grubu yerleştirilmiştir ve standart bir yem ve suya ad libitum erişim sağlanır. Bizim durumumuzda bu Charles River (St Sabit, QC) satın yetişkin C57BL / 6 farelerde kullanın. Tüm fare manipülasyonlar ve davranışsal deneyler karanlık döngüsü sırasında yapılır. Tüm prohayvanların kullanımını içeren prosedürler CRCHUM Hayvan Bakım Komitesi tarafından onaylandı. </li><li> Fareler daha sonra tek başına-muhafaza ve gıda kısıtlı (günlük besin alımının% 70) ulaşana kadar% 90-95 serbest besleme kolu-basın yanıt iktisap kolaylaştırmak için vücut ağırlıkları. Edilir Fareler oturumun sona ermesinden sonra evde kafes içinde gıda günlük kota verilmiştir. % 5-10 kilo kaybı ulaştıktan sonra, tahsis edilen günlük besin eğitim süresinin geri kalanı için düşük vücut ağırlıkları stabilize etmek için ayarlanır. Sonra fareler (aşağıya bakınız) onlar bir ad libitum yemleme programı geri konur satın kriterleri ulaşmış. Fareler hakkında 3-4 gün içinde kaybolur vücut ağırlığı yeniden. </li><li> Fareler ilk antrenman öncesinde 3 gün boyunca test odasında ele alınır. 10-15 (HFHS) yüksek yağlı ve yüksek şeker topakları edimsel performan gıda neophobia potansiyel etkisini önlemek için ev kafesin içine yerleştirilir eğitim başlamadan önce günce. Biz 20 mg HFHS, tozsuz, hassas gıda pelet (ayrıca 14 mg kullanılabilir) yağ olarak% 48.9 Kcal içeren (Bio Serv, Frenchtown, NJ) kullanın. </li></ol> 3. Edimsel Eğitim <ol><li> Fareler başlangıçta sabit bir oranı (FR), tek bir kolu basın yuvasına bir gıda pelet teslim elicits sayede -1 takviye programa kola basın için eğitilmiştir. Sadece bir kolu &quot;aktif&quot; (gıda ödül teslim tetikleme) ve sağ ve sol kolları tahsisi fareler arasındaki gevşetilebilir olarak belirlenmiştir. Bu, FR1 programı (FR1/TO-5) en az bir 5 saniyelik zaman aşımı süresi (TO) eklemek için önemli olan sırasında ek kolu-basarak bir gıda pelet teslim yol açmaz. Bu İÇİN dönemi deneyci onların fare modeli için gerekli görürse, gıda pelet tüketmeye fareler için zaman, ancak daha uzun zaman Muhalifler kullanılabilir sağlar. Her FR antrenmandan 1 saat veya 50 pelet teslim edilmiştir sürer. </li><li> * Toplama Kriterleri: &lt;/ Strong&gt; yanıt gıda muhafaza edimsel iktisap belirlemek için kullanılan ölçütleri içermektedir: (1) aktif cevapları ve ödülleri en az sayıda kazandı; (2) aktif ve aktif olmayan kolları arasında ayrım ölçüsü, ve (3) arasında-oturumu performans dengesi. Aktif ve inaktif kolu için ≥ 3:1 ayrımcılık sergileyen ve üst üste üç seans üzerinden oturum başına ≥ 20 ödülleri elde Fareler satın kriterleri 10 ulaşmak için kabul edilir. Biz C57BL6 farelerin çoğunluğu (~% 75) eğitim hakkında 7-10 gün satın kriterlerine ulaşmak için gerekli olduğunu gözlemledim. Bu zamana kadar satın alma kriterleri ulaşamayan Fareler ek bir 5-7 gün daha ileri eğitime tabi tutulurlar. Ekstra 5. eğitimi gündüz hiçbir ilerleme olduğunda Biz test (olguların ~% 5) fareleri dahil değildir. Bu bozulmuş edimsel edinimi bazı farmakolojik ve genetik müdahalelerin bir sonucu olabilir ve bu nedenle belgelendirilmesi gerekir akılda tutmak önemlidir. &lt;/ Li&gt; <li> ≥ 20 pelet elde izleyen üç seans sonra, program 5 aktif kolu presler gıda pelet teslim tetiklemek hangi FR5/TO-5 saniye artar. FR5 programında eğitim üç gün sürer. </li><li> * Farelerin daha sonra takviye ilerici oranı (PR) programında eğitilmiştir. PR test sırasında yanıt oranı çizelgesi aşağıdaki formül (en yakın tam sayıya yuvarlanır) kullanarak Richardson ve Roberts (1996) 11&#39;e göre hesaplanır: = [5 e (R * 0.2)] - 5 R gıda zaten kazanılan ödülleri artı 1 sayısı (yani, sonraki güçlendiricidir) eşit olduğu. Böylece, bir gıda mükâfat sırayla aşağıdaki kazanmak için gerekli yanıtların sayısı: 1, 2, 4, 6, 9, 12, 15, 20, 25, 32, 40, 50, 62, 77, 95 ve benzerleri. Tamamlanan son oranın kesim noktasıdır. </li><li> Bir PR oturumu 1 saat en fazla sürer. Oturumun sona ermesi herhangi bir 10 dakikalık sürenin sonuçları kolu basın başarısızlık. Perforödülleri sayısı en az 3 gün üst üste ≤% 10 1 saatlik oturumda sapma kazanılan zaman donatı PR zamanlamaya mance sağlam sayılır. </li></ol> 4. Aşamalı Oranı Test ve Doğrulama <ol><li> Doğrulamak için PR görev yanıt edimsel gıda muhafaza, bir gıda ödül modüle bilinen kesme yanıt şu manipülasyonlar değerlendirebilir. Yürütmek için nispeten kolay bir test gıda için fare motivasyon durumu artırmak ve böylece kesme artacak gıda yoksunluğu olduğunu. Istikrarlı, temel performans elde edilinceye kadar Fareler ilk ad libitum besleme bir dönemde PR görev test edilmelidir. Son &quot;temel&quot; günlük gıda ertesi günü evde kafes kaldırılır ve fareler daha sonra 24 saat hızlı başladıktan sonra PR görev test edilmektedir. </li><li> Ayrıca leptinin anorektik hormonunun periferik uygulanması kesme noktası üzerinde ters bir etkiye sahip olup olmadığı araştırıldıeşikleri. (AF Parlow, National Hormone ve Peptid Program, NIDDK) leptin steril PBS içinde eritildi. PR testi bir gün PBS bir IP enjeksiyonu takiben ve sonra leptin (5 mg / kg), ertesi gün enjeksiyonu takiben gerçekleştirildi. Leptin PR testinden önce bir saat enjekte edildi. Breakpoints eşleştirilmiş t-testi (GraphPad Prism) kullanılarak karşılaştırıldı. </li></ol> 5.. Temsilcisi Sonuçlar Donatı bir PR programı yanıt kesme modüle gıda yoksunluğu yeteneğini test ederken, biz Şekil 1&#39;de gösterildiği gibi önemli kırılma noktalarını artırmak için bekliyoruz. Bu deneyde yiyecek yoksunluğu bir 24 saatlik dönemde, böylece gıda yoksunluğu gıda ödüllendirici etkisini artırır düşündüren serbest besleme bazal durumda elde edilenlere göre kesme bir ~ 3.6 kat artış sağladılar. T anorectic hormonunun aksine, periferik uygulanması leptin (5 mg / kg, ip) bir saat önceTestler, Şekil 2&#39;de gösterildiği gibi yanıt kesme azaltılması gerekir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3754/3754fig1.jpg" /> Şekil 1. Açlık gıda faydalı etkileri arttırır. Bir 24 saat hızlı anlamlı farelerde takviye ilerleyici bir oranı (PR) programı (n = 4) kesme noktaları artmıştır. Ortalama ± SEM; * p &lt;.05. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3754/3754fig2.jpg" /> Şekil 2. Leptin farelerde gıda ödül azalır. Periferal leptin idaresi (5 mg / kg) farelere (n = 4) PR kesme tepkisi eşik azalmıştır. Ortalama ± SEM; * p &lt;0.05.

<ol>
	<li>Fulton, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Appetite+and+reward.">Appetite and reward.</a> Front. Neuroendocrinol. 31, 85-103 (2010).</li><li>Zheng, H., Lenard, N. R., Shin, A. C., Berthoud, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Appetite+control+and+energy+balance+regulation+in+the+modern+world:+reward-driven+brain+overrides+repletion+signals.">Appetite control and energy balance regulation in the modern world: reward-driven brain overrides repletion signals.</a> International journal of Obesity. 33, S8-S13 (2009).</li><li>Skinner, B. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Behavior of Organisms: An Experimental Analysis. , (1938).</li><li>Hodos, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+ratio+as+a+measure+of+reward+strength.">Progressive ratio as a measure of reward strength.</a> Science. 134, 943-944 (1961).</li><li>Hodos, W., Kalman, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+increment+size+and+reinforcer+volume+on+progressive+ratio+performance.">Effects of increment size and reinforcer volume on progressive ratio performance.</a> J. Exp. Anal. Behav. 6, 387-392 (1963).</li><li>Stafford, D., LeSage, M. G., Glowa, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive-ratio+schedules+of+drug+delivery+in+the+analysis+of+drug+self-administration:+a+review.">Progressive-ratio schedules of drug delivery in the analysis of drug self-administration: a review.</a> Psychopharmacology. , 139-169 (1998).</li><li>Glass, M. J., O'Hare, E., Cleary, J. P., Billington, C. J., Levine, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+naloxone+on+food-motivated+behavior+in+the+obese+Zucker+rat.">The effect of naloxone on food-motivated behavior in the obese Zucker rat.</a> Psychopharmacology (Berl). 141, 378-384 (1999).</li><li>Brennan, K., Roberts, D. C., Anisman, H., Merali, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Individual+differences+in+sucrose+consumption+in+the+rat:+motivational+and+neurochemical+correlates+of+hedonia.">Individual differences in sucrose consumption in the rat: motivational and neurochemical correlates of hedonia.</a> Psychopharmacology (Berl). 157, 269-276 (2001).</li><li>Vaughan, C., Moore, M., Haskell-Luevano, C., Rowland, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+motivated+behavior+of+melanocortin-4+receptor+knockout+mice+under+a+progressive+ratio+schedule.">Food motivated behavior of melanocortin-4 receptor knockout mice under a progressive ratio schedule.</a> Peptides. 27, 2829-2835 (2006).</li><li>Haluk, D. M., Wickman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+study+design+variables+and+their+impact+on+food-maintained+operant+responding+in+mice.">Evaluation of study design variables and their impact on food-maintained operant responding in mice.</a> Behav. Brain Res. 207, 394-401 (2010).</li><li>Richardson, N. R., Roberts, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+ratio+schedules+in+drug+self-administration+studies+in+rats:+a+method+to+evaluate+reinforcing+efficacy.">Progressive ratio schedules in drug self-administration studies in rats: a method to evaluate reinforcing efficacy.</a> J. Neurosci. Methods. 66, 1-11 (1996).</li><li>Jewett, D. C., Cleary, J., Levine, A. S., Schaal, D. W., Thompson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+neuropeptide+Y,+insulin,+2-deoxyglucose,+and+food+deprivation+on+food-motivated+behavior.">Effects of neuropeptide Y, insulin, 2-deoxyglucose, and food deprivation on food-motivated behavior.</a> Psychopharmacology (Berl). 120, 267-271 (1995).</li><li>Fulton, S., Woodside, B., Shizgal, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+brain+reward+circuitry+by+leptin.">Modulation of brain reward circuitry by leptin.</a> Science. 287, 125-128 (2000).</li><li>Figlewicz, D. P., Bennett, J. L., Naleid, A. M., Davis, C., Grimm, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraventricular+insulin+and+leptin+decrease+sucrose+self-administration+in+rats.">Intraventricular insulin and leptin decrease sucrose self-administration in rats.</a> Physiol. Behav. 89, 611-616 (2006).</li></ol>

Üretim ve bu video-makale Ücretsiz Erişim Med Associates, Inc tarafından desteklenmektedir

Edimsel Koşullanma görevleri gıda motivasyonel özelliklerinde değişiklikleri değerlendirmek için etkili bir araç sağlar. Gıda senin için kolu basına yazıda izni eğitim farelerde ve istikrarlı bir şekilde ayrıntılı deneysel prosedürleri donatı bir PR zamanlamaya tepki. Tüketilen gıdanın miktarı ölçülerek gıda alımını etkileyen tüm faktörler gıda ödüllendirici etkisini modüle değil beri çaba tabanlı tepki önlemleri aynı okuma sağlamaz. Örneğin, sıçanlarda periferik 2-deoksiglukoz yönetimi tarafından kullanılabilecek glukoz tüketen tüketilen serbestçe mevcut gıda miktarını artırır ama gıda için 12 PR görev mola noktaları değiştirmek için başarısız olur. Yanıt PR kesme ayrıca gıda ödülleri kalitesini değişiklikleri yansıtabilir. Örneğin, mola noktaları olumlu tatlı tadı 8 aşağıdaki şekilde sakaroz artışı için motivasyon gösteren sukroz konsantrasyonu ile ilişkilidir </s&gt; kadar. İşte biz bu 24 saat gıda yoksunluğu önemli ölçüde farelerde HFHS gıda için PR kesme artırır göstermektedir. Bunun aksine olarak, leptin anorectic hormonunun periferik uygulanması önemli ölçüde farelerde HFHS yiyecek için noktalarını azaldığı bulunmuştur. Bu bulgular sıçanlarda 12-14 gıda yoksunluğu ve ödül eşikleri üzerinde leptin daha önce bildirilen eylemleri ile uyumludur. Bu protokol kullanılarak zaman akılda tutulması gereken önemli olduğunu edinimi gıda muhafaza yanıt edimsel önemli ölçüde düzenli eğitim (her 1-2 gün) ve bir yiyecek kısıtlaması rejimi uygulayarak fare motivasyonel devlet artırarak geliştirilmiştir. Ayrıca, farelerde daha karmaşık programları (örneğin, FR1 için FR5) için test sırasında değişken performans aza indirmek için önemli olan geçmeden önce takviye zamanında yanıt nispeten istikrarlı sergilerler sağlamak. Bu adımların uygulanması rağmen bazı değişkenliği elde etmek anormal değildirÖzellikle farklı fareler arasında. Bu nedenle, son derece tabi değişkenliği üzerinden kaldırmak mümkün olduğunda bir süre içinde-konular (tekrarlanan ölçümler) tasarım kullanılması önerilir. Içinde-konu testi stabil genetik modifikasyon (örn., nakavt karşı kontrol fareleri) araştırmak için mümkün olmasa da bu ilaçlar, lezyon veya akut (örneğin, optogenetic) genetik manipülasyon etkisini incelemek için kullanılabilir. Şişmanlık ve obezite ile ilişkili hastalıklar dahil molekülleri ve nöral yolları tanımlamak için aciliyet arttı büyüyen bir sorun vardır. Biriken deliller, gıda özlem beynin ödül devrelerini önemli rolü vurgulamaktadır kalori alımı ve kilo artışı. PR görev gıda ödüllendirici etkileri, nörobiyolojik genetik veya farmakolojik manipülasyonlar etkisini ölçmek için değerli bir araçtır.

<html><table border="1"><tbody><tr><td> Madde </td><td> Katalog Numarası </td><td> Şirket </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Fare edimsel odaları </td><td> ENV-009A </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">Med Associates, Inc</a> </td><td> Med Associates Inc PO Box 319 St Albans, Vermont 05.478, Amerika Birleşik Devletleri Telefon: (802) 527-2343 </td></tr><tr><td> 8 inputs/16 giriş Akıllı Kontrol Bağlantı Paneli </td><td> SG-716B </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">Med Associates, Inc</a> </td><td></td></tr><tr><td> Çekilebilir Ultra hafif Fare kolu </td><td> ENV-312 </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">Med Associates, Inc</a> </td><td></td></tr><tr><td> Pelet Dispenser </td><td> ENV-203 </td><td>. Med-associates.com / &quot;target =&quot; _blank &quot;&gt; Med Associates, Inc </td><td></td></tr><tr><td> Evi Işık </td><td> ENV-215 </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">Med Associates, Inc</a> </td><td></td></tr><tr><td> Stimulus Işık </td><td> ENV-221 </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">Med Associates, Inc</a> </td><td></td></tr><tr><td> Tozsuz Hassas 20 mg yüksek yağlı ve yüksek şeker pelet </td><td> F-06.649 </td><td> Bio-Serv </td><td> Bio-Serv Bir 8th Street, Suite 1 Frenchtown, NJ 08825, USA Telefon: (800) -996-9908 </td></tr></tbody></table> Tablo 1. Özel ekipman ve malzeme.

progressive-ratio responding for palatable high-fat and high-sugar food in mice

Yağ ve şeker bakımından zengin olan gıdalar belirgin obezite aşırı yeme ve tırmanan oranlarına katkıda bulunmaktadır. Lezzetli gıdaların tüketimi eylem-sonuç ilişkileri güçlendirir ve bu gıdaları elde yönelik gelecekteki davranışlarını pekiştiriyor ödüllendirici bir etkisi üretebilir. Enerji-yoğun yiyecek ödüllendirici etkisini overeating ve obezite gelişiminde derin bir rol oynadığını göstermiştir gıda ödül 1,2 düzenleyen genler, moleküller ve sinir devresi okuyor artan ilgi vardır. Farklı uyaranların ödüllendirici etkisi böyle edimsel koşullanma görevler 3 olarak elde etmek için çalışmaya istekli ölçerek ele alınabilir. Gıda ödül ölçü Edimsel model edinilen ve gıda alma yöneliktir gönüllü davranışsal tepkileri. Ödül gücü Yaygın olarak kullanılan bir ölçü ilerici oranı (PR) donatı planı olarak bilinen bir edimsel bir işlemdir. PR t 4,5sormak, bu konuda birbirini izleyen her ödül için edimsel tepkiler giderek artan sayıda yapmak için gereklidir. Hodos (1961) öncü çalışma son mükâfat elde etmek için yapılan yanıtların sayısı, mükâfat mukavemeti 4 indeksi olarak hizmet eder, kesme adlandırılan olduğunu göstermiştir. Tek başına cevap oranı ölçü değişiklikleri performans kapasitesi değişiklikler mükâfat gücü değişiklikler ayıramam ki edimsel işlemleri yaparken, PR programı türetilen kesme gıda ödüllendirici etkisini bir geçerliliği iyi önlemdir. PR görev sıçanlar (örneğin, 6-8) kötü muamele ve gıda ilaçların ödüllendirici etkisini değerlendirmek, ancak fare 9 daha az bir ölçüde yaygın şekilde kullanılmaktadır. Genetiğiyle oynanmış farelerin ve diyete bağlı obez fare modellerinin kullanımının artması farelerde gıda ödül davranışsal önlemleri taleplerini artırmıştır. Bu yazıda detaylı bir yüksek yağ için (kol-basın) cevap farelerin eğitmek için kullanılan malzemeler ve prosedürlerve takviye bir PR programı üzerinde yüksek şeker gıda topakları. Biz kesme tepki eşikleri takiben akut gıda yoksunluğu artırmak ve leptin anorektik hormonunun periferik uygulanması ile azaltmak ve böylece farelerde bu gıda-edimsel paradigma kullanımını geçerli göstermektedir.

Watch this Scientific Journal Video about Progressive-ratio Responding for Palatable High-fat and High-sugar Food in Mice at JoVE.com

Progressive-ratio Responding for Palatable High-fat and High-sugar Food in Mice

Bu rapor detayları farelerin yüksek yağlı yiyecek ödüllendirici etkisini ölçmek için kullanılan protokol ilerici bir oranı edimsel koşullanma görev kullanarak.

Aşamalı-oranı Farelerde Palatable Yüksek yağ ve yüksek şeker Gıda tepki

Foods that are rich in fat and sugar significantly contribute to over-eating and escalating rates of obesity. The consumption of palatable foods can ...

progressive-ratio-responding-for-palatable-high-fat-high-sugar-food

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Neuroscience

22.0K Görüntüleme.  University of Montreal. Bu rapor detayları farelerin yüksek yağlı yiyecek ödüllendirici etkisini ölçmek için kullanılan protokol ilerici bir oranı edimsel koşullanma görev kullanarak.

Video: Progressive-ratio Responding for Palatable High-fat and High-sugar Food in Mice

T-maze Forced Alternation and Left-right Discrimination Tasks for Assessing Working and Reference Memory in Mice

Forced alternation and left-right discrimination tasks using the T-maze have been widely used to assess working and reference memory, respectively, in rodents. In our laboratory, we evaluated the two types of memory in more than 30 strains of genetically engineered mice using the automated version of this apparatus. Here, we present the modified T-maze apparatus operated by a computer with a video-tracking system and our protocols in a movie format. The T-maze apparatus consists of runways partitioned off by sliding doors that can automatically open downward, each with a start box, a T-shaped alley, two boxes with automatic pellet dispensers at one side of the box, and two L-shaped alleys. Each L-shaped alley is connected to the start box so that mice can return to the start box, which excludes the effects of experimenter handling on mouse behavior. This apparatus also has an advantage that in vivo microdialysis, in vivo electrophysiology, and optogenetics techniques can be performed during T-maze performance because the doors are designed to go down into the floor. In this movie article, we describe T-maze tasks using the automated apparatus and the T-maze performance of &alpha;-CaMKII+/- mice, which are reported to show working memory deficits in the eight-arm radial maze task. Our data indicated that &alpha;-CaMKII+/- mice showed a working memory deficit, but no impairment of reference memory, and are consistent with previous findings using the eight-arm radial maze task, which supports the validity of our protocol. In addition, our data indicate that mutants tended to exhibit reversal learning deficits, suggesting that &alpha;-CaMKII deficiency causes reduced behavioral flexibility. Thus, the T-maze test using the modified automatic apparatus is useful for assessing working and reference memory and behavioral flexibility in mice.

This article presents the protocol of T-maze tests using a modified automated apparatus for assessing the learning and memory functions in mice.

T-labirent Zorla Değişim ve Çalışma ve Fareler Referans Bellek değerlendirilmesi için sağ-sol Ayrımcılık Görevler

Forced alternation and left-right discrimination tasks using the T-maze have been widely used to assess working and reference memory, respectively, in ...

Nörobilim

Measuring Oral Fatty Acid Thresholds, Fat Perception, Fatty Food Liking, and Papillae Density in Humans

Emerging evidence from a number of laboratories indicates that humans have the ability to identify fatty acids in the oral cavity, presumably via fatty acid receptors housed on taste cells. Previous research has shown that an individual&#39;s oral sensitivity to fatty acid, specifically oleic acid (C18:1) is associated with body mass index (BMI), dietary fat consumption, and the ability to identify fat in foods. We have developed a reliable and reproducible method to assess oral chemoreception of fatty acids, using a milk and C18:1 emulsion, together with an ascending forced choice triangle procedure. In parallel, a food matrix has been developed to assess an individual&#39;s ability to perceive fat, in addition to a simple method to assess fatty food liking. As an added measure tongue photography is used to assess papillae density, with higher density often being associated with increased taste sensitivity.

Oral chemoreception of fatty acids and the association with diet and fatty food preferences may enable the identification of mechanisms involved with the development of obesity and why dietary changes may be difficult for many individuals.

Oral Yağ Asidi eşikleri, Fat Algı, Yağ Gıda sevme, ve İnsanlardaki Papillalar Yoğunluğu Ölçme

Emerging evidence from a number of laboratories indicates that humans have the ability to identify fatty acids in the oral cavity, presumably via fatty ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life. The cold plantar assay allows the objective and inexpensive assessment of cold sensitivity in mice, and can quantify both analgesia and hypersensitivity. Mice are acclimated on a glass plate, and a compressed dry ice pellet is held against the glass surface underneath the hindpaw. The latency to withdrawal from the cooling glass is used as a measure of cold sensitivity.
Cold sensation is also important for survival in regions with seasonal temperature shifts, and in order to maintain sensitivity animals must be able to adjust their thermal response thresholds to match the ambient temperature. The Cold Plantar Assay (CPA) also allows the study of adaptation to changes in ambient temperature by testing the cold sensitivity of mice at temperatures ranging from 30 &#176;C to 5 &#176;C. Mice are acclimated as described above, but the glass plate is cooled to the desired starting temperature using aluminum boxes (or aluminum foil packets) filled with hot water, wet ice, or dry ice. The temperature of the plate is measured at the center using a filament T-type thermocouple probe. Once the plate has reached the desired starting temperature, the animals are tested as described above.
This assay allows testing of mice at temperatures ranging from innocuous to noxious. The CPA yields unambiguous and consistent behavioral responses in uninjured mice and can be used to quantify both hypersensitivity and analgesia. This protocol describes how to use the CPA to measure cold hypersensitivity, analgesia, and adaptation in mice.

The Cold Plantar Assay (CPA) measures cold responsiveness between 30 &#176;C and 5 &#176;C, and can also measure cold adaptation. This protocol describes how to use the CPA to measure cold hypersensitivity, analgesia, and adaptation in mice.

Fareler Soğuk Hassasiyeti ve Uyum belirlenmesi için Basit ve ucuz Yöntem

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of the right type and quantity of food therefore has a major influence on quality of life. Research on feeding behavior focuses on the underlying processes that ensure actual feeding and unravels the role of factors regulating internal energy homeostasis and the neuronal bases of decision-making. The model organism Drosophila melanogaster, with its great variety of genetically traceable tools for labeling and manipulating single neurons, allows mapping of neuronal networks and identification of molecular signaling cascades involved in the regulation of food intake. This report demonstrates the CApillary FEeder assay (CAFE) and shows how to measure food intake in a group of flies for time spans ranging from hours to days. This easy-to-use assay consists of glass capillaries filled with liquid food that flies can freely access and feed on. Food consumption in the assay is accurately determined using simple measurement tools. Herein we describe step-by-step the method from setup to successful execution of the CAFE assay, and provide practical examples to analyze the food intake of a group of flies under controlled conditions. The reader is guided through possible limitations of the assay, and advantages and disadvantages of the method compared to other feeding assays in D. melanogaster are evaluated.

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

The CApillary FEeder (CAFE) assay is a simple, budget-friendly, highly reliable method for investigating mechanisms underlying food intake. Used with the highly versatile genetic model organism Drosophila melanogaster, it provides a powerful means of gaining new insights into regulatory mechanisms of food intake.

Kılcal Besleyici Testi Gıda Alımını içinde Tedbirler<em&gt; Drosophila melanogaster</em

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of ...

Assessment of Dopaminergic Homeostasis in Mice by Use of High-performance Liquid Chromatography Analysis and Synaptosomal Dopamine Uptake

Dopamine (DA) is a modulatory neurotransmitter controlling motor activity, reward processes and cognitive function. Impairment of dopaminergic (DAergic) neurotransmission is strongly associated with several central nervous system-associated diseases such as Parkinson&#39;s disease, attention-deficit-hyperactivity disorder and drug addiction1,2,3,4. Delineating disease mechanisms involving DA imbalance is critically dependent on animal models to mimic aspects of the diseases, and thus protocols that assess specific parts of the DA homeostasis are important to provide novel insights and possible therapeutic targets for these diseases.
Here, we present two useful experimental protocols that when combined provide a functional read-out of the DAergic system in mice. Biochemical and functional parameters on DA homeostasis are obtained through assessment of DA levels and dopamine transporter (DAT) functionality5. When investigating the DA system, the ability to reliably measure endogenous levels of DA from adult brain is essential. Therefore, we present how to perform high-performance liquid chromatography (HPLC) on brain tissue from mice to determine levels of DA. We perform the experiment on tissue from dorsal striatum (dStr) and nucleus accumbens (NAc), but the method is also suitable for other DA-innervated brain areas.
DAT is essential for reuptake of DA into the presynaptic terminal, thereby controlling the temporal and spatial activity of released DA. Knowing the levels and functionality of DAT in the striatum is of major importance when assessing DA homeostasis. Here, we provide a protocol that allows to simultaneously deduce information on surface levels and function using a synaptosomal6 DA uptake assay.
Current methods combined with standard immunoblotting protocols provide the researcher with relevant tools to characterize the DAergic system.

Synaptosomal dopamine uptake and high-performance liquid chromatography analysis represent experimental tools to investigate dopamine homeostasis in mice by assessing the function of the dopamine transporter and levels of dopamine in striatal tissue, respectively. Here we present protocols to measure dopamine tissue content and assess the functionality of the dopamine transporter.

Dopaminerjik Homeostasis farelerde yüksek performanslı sıvı Kromatografi analizi ve Synaptosomal dopamin alımı kullanımı tarafından değerlendirilmesi

Dopamine (DA) is a modulatory neurotransmitter controlling motor activity, reward processes and cognitive function. Impairment of dopaminergic (DAergic) ...

An In Ovo Model for Testing Insulin-mimetic Compounds

Elevated blood glucose levels in type 2 diabetes mellitus (T2DM), a complex and multifactorial metabolic disease, are caused by insulin resistance and &#946;-cell failure. Various strategies, including the injection of insulin or the usage of insulin-sensitizing drugs, were pursued to treat T2DM or at least reduce the symptoms. In addition, the application of herbal compounds has attracted increasing attention. Thus, it is necessary to find efficient test systems to identify and characterize insulin-mimetic compounds. Here we developed a modified chick embryo model, which enables testing of synthetic compounds and herbal extracts with insulin-mimetic properties. Using a fluorescence microscopy-based primary screen, which quantifies the translocation of Glucose transporter 4 (Glut4) to the plasma membrane, we were able to identify compounds, mainly herbal extracts, which lead to an increase of intracellular glucose concentrations in adipocytes. However, the efficacy of these substances requires further verification in a living organism. Thus, we used an in-ovo approach to identify their blood glucose-reducing properties. The approval by an ethics committee is not needed since the use of chicken embryos during the first two-thirds of embryonic development is not considered an animal experiment. Here, the application of this model is described in detail.

An In Ovo Model for Testing Insulin-mimetic Compounds

In this study, we describe an in-ovo system as a promising tool to test insulin-mimetic compounds in a living organism. The main advantages include adequate throughput rates and acceptable costs, which enable the identification of phytochemicals with insulin-mimetic properties.

İnsülin mimetic bileşikler test etmek için bir Ovo içinde modeli

Elevated blood glucose levels in type 2 diabetes mellitus (T2DM), a complex and multifactorial metabolic disease, are caused by insulin resistance and ...

Optogenetic Entrainment of Hippocampal Theta Oscillations in Behaving Mice

Extensive data on relationships of neural network oscillations to behavior and organization of neuronal discharge across brain regions call for new tools to selectively manipulate brain rhythms. Here we describe an approach combining projection-specific optogenetics with extracellular electrophysiology for high-fidelity control of hippocampal theta oscillations (5-10 Hz) in behaving mice. The specificity of the optogenetic entrainment is achieved by targeting channelrhodopsin-2 (ChR2) to the GABAergic population of medial septal cells, crucially involved in the generation of hippocampal theta oscillations, and a local synchronized activation of a subset of inhibitory septal afferents in the hippocampus. The efficacy of the optogenetic rhythm control is verified by a simultaneous monitoring of the local field potential (LFP) across lamina of the CA1 area and/or of neuronal discharge. Using this readily implementable preparation we show efficacy of various optogenetic stimulation protocols for induction of theta oscillations and for the manipulation of their frequency and regularity. Finally, a combination of the theta rhythm control with projection-specific inhibition addresses the readout of particular aspects of the hippocampal synchronization by efferent regions.

We describe the use of optogenetics and electrophysiological recordings for selective manipulations of hippocampal theta oscillations (5-10 Hz) in behaving mice. The efficacy of the rhythm entrainment is monitored using local field potential. A combination of opto- and pharmacogenetic inhibition addresses the efferent readout of hippocampal synchronization.

Hipokampal teta salınımlarını fareler davranışlar içinde Optogenetic sürüklenme

Extensive data on relationships of neural network oscillations to behavior and organization of neuronal discharge across brain regions call for new tools ...

A Protocol for Transcranial Photobiomodulation Therapy in Mice

Transcranial photobiomodulation is a potential innovative noninvasive therapeutic approach for improving brain bioenergetics, brain function in a wide range of neurological and psychiatric disorders, and memory enhancement in age-related cognitive decline and neurodegenerative diseases. We describe a laboratory protocol for transcranial photobiomodulation therapy (PBMT) in mice. Aged BALB/c mice (18 months old) are treated with a 660 nm laser transcranially, once daily for 2 weeks. Laser transmittance data shows that approximately 1% of the incident red light on the scalp reaches a 1 mm depth from the cortical surface, penetrating the dorsal hippocampus. Treatment outcomes are assessed by two methods: a Barnes maze test, which is a hippocampus-dependent spatial learning and memory task evaluation, and measuring hippocampal ATP levels, which is used as a bioenergetics index. The results from the Barnes task show an enhancement of the spatial memory in laser-treated aged mice when compared with age-matched controls. Biochemical analysis after laser treatment indicates increased hippocampal ATP levels. We postulate that the enhancement of memory performance is potentially due to an improvement in hippocampal energy metabolism induced by the red laser treatment. The observations in mice could be extended to other animal models since this protocol could potentially be adapted to other species frequently used in translational neuroscience, such as rabbit, cat, dog, or monkey. Transcranial photobiomodulation is a safe and cost-effective modality which may be a promising therapeutic approach in age-related cognitive impairment.

Photobiomodulation therapy is an innovative noninvasive modality for the treatment of a wide range of neurological and psychiatric disorders and can also improve healthy brain function. This protocol includes a step-by-step guide to performing brain photobiomodulation in mice by transcranial light delivery, which can be adapted for use in other laboratory rodents.

Farelerde Transkraniyal Photobiomodulation tedavisi için bir iletişim kuralı

Transcranial photobiomodulation is a potential innovative noninvasive therapeutic approach for improving brain bioenergetics, brain function in a wide ...

Data Acquisition and Analysis In Brainstem Evoked Response Audiometry In Mice

Brainstem evoked response audiometry (BERA) is of central relevance in the clinical neurophysiology. As other evoked potential (EP) techniques, such as visually evoked potentials (VEPs) or somatosensory evoked potentials (SEPs), the auditory evoked potentials (AEPs) are triggered by the repetitive presentation of identical stimuli, the electroencephalographic (EEG) response of which is subsequently averaged resulting in distinct positive (p) and negative (n) deflections. In humans, both the amplitude and the latency of individual peaks can be used to characterize alterations in synchronization and conduction velocity in the underlying neuronal circuitries. Importantly, AEPs are also applied in basic and preclinical science to identify and characterize the auditory function in pharmacological and genetic animal models. Even more, animal models in combination with pharmacological testing are utilized to investigate for potential benefits in the treatment of sensorineural hearing loss (e.g., age- or noise-induced hearing deficits). Here we provide a detailed and integrative description of how to record auditory brainstem-evoked responses (ABRs) in mice using click and tone-burst application. A specific focus of this protocol is on pre-experimental animal housing, anesthesia, ABR recording, ABR filtering processes, automated wavelet-based amplitude growth function analysis, and latency detection.

Brainstem evoked response audiometry is an important tool in clinical neurophysiology. Nowadays, brainstem evoked response audiometry is also applied in the basic science and preclinical studies involving both pharmacological and genetic animal models. Here we provide a detailed description of how auditory brainstem responses can be successfully recorded and analyzed in mice.

Farelerde beyin sapı uyarılmış yanıt odyometrisi veri edinme ve Analizi

Brainstem evoked response audiometry (BERA) is of central relevance in the clinical neurophysiology. As other evoked potential (EP) techniques, such as ...

Quantitative Measurement of Intrathecally Synthesized Proteins in Mice

Cerebrospinal fluid (CSF), a fluid found in the brain and the spinal cord, is of great importance to both basic and clinical science. The analysis of the CSF protein composition delivers crucial information in basic neuroscience research as well as neurological diseases. One caveat is that proteins measured in CSF may derive from both intrathecal synthesis and transudation from serum, and protein analysis of CSF can only determine the sum of these two components. To discriminate between protein transudation from the blood and intrathecally produced proteins in animal models as well as in humans, CSF protein profiling measurements using conventional protein analysis tools must include the calculation of the albumin CSF/serum quotient (Qalbumin), a marker of the integrity of the blood-brain interface (BBI), and the protein index (Qprotein/Qalbumin), an estimate of intrathecal protein synthesis. This protocol illustrates the entire procedure, from CSF and blood collection to quotients and indices calculations, for the quantitative measurement of intrathecal protein synthesis and BBI impairment in mouse models of neurological disorders.

Elevated spinal fluid protein levels can either be the result of diffusion of plasma protein across an altered blood-brain barrier or intrathecal synthesis. An optimized testing protocol is presented in this article that helps to discriminate both cases and provides quantitative measurements of intrathecally synthesized proteins.

Farelerde İntrathecally Sentezlenmiş Proteinlerin Kantitatif Ölçümü

Cerebrospinal fluid (CSF), a fluid found in the brain and the spinal cord, is of great importance to both basic and clinical science. The analysis of the ...