وأيد هذا العمل من قبل معهد كارولينسكا KID التمويل، السويدية الإشعاع هيئة حماية، معهد كارولينسكا مؤسسة أبحاث العيون، بندقية اوتش برتيل Stohnes Stiftelse، وسانت إريك في مستشفى العيون مؤسسة أبحاث، Ögonfonden، Konung غوستاف V: S اوتش Drottning Viktorias Frimurarstiftelse.

1. التعرض للأشعة فوق البنفسجية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 15 دقيقة قبل التعرض، تخدير الأنثى سبراغ داولي الفئران بمزيج من 90 ملغ / كغ Ketalar (الكيتامين) و 10 ملغ / كغ Rompun (زيلازين) عن طريق الحقن داخل الصفاق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الحيوانات في restrainer الفئران وتشديد الأحزمة حتى تجميد الفئران دون التسبب في أزمة الجذع 13. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غرس Mydriacyl (تروبيكاميد)، 10 ملغ / مل، في كلتا العينين من الفئران للحث على توسيع حدقة العين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الحيوان بحيث يتم وضع ذلك عين واحدة ضد حزمة ضيقة من الأشعة فوق البنفسجية في 300 نانومتر 14 مع عرض 10 نانومتر كامل في نصف الحد الأقصى وحماية العين المقابل مع شريط أسود. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كشف الفئران من جانب واحد دون العتبة جرعة 1 كج / م 2 للأشعة فوق البنفسجية-B في 300 نانومتر لمدة 15 15 دقيقة. </li></ol> 2. تشريح <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد آخر محدد مسبقا الفاصلة التعرض (1، 5، 24 و ساعة 120)، التضحية الفئران لمدة ستة أسابيع من العمر (الوزن &lt;200 غ) من كاربون الاختناق وثاني أكسيد خلع في فقرات عنق الرحم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استأصل العينين. بعد ذلك، وضع القرنية العين إلى أسفل، حتى الجانب الخلفي. ثم، لكمة ثقب الحد الأدنى من خلال تطبيق مقياس قنية 27 و دفع عرضية إلى الصلبة لتجنب إتلاف العدسة التي هي قريبة جدا من الصلبة. ثم استخدم مقصا لقطع جراحات العيون محيطي خلف حوف حتى يمكن رفع الجزء الخلفي من خارج الصلبة. ثم، رفع العدسة مع ملقط منحني حادة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة بقايا الجسم الهدبي من خط الاستواء تحت المجهر عدسة، والحفاظ على العدسة في محلول ملحي متوازن لم يعد من 5-10 دقيقة. </li></ol> 3. RT-PCR الكمي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع العدسة في مزيج من 350 ميكرولتر العازلة تحلل RA1 (RNA NucleoSpin II مجموع RNA العزلة طقم) و 3.5 ميكرولتر β-المركابتويثانول في أنبوب إيبندورف 2 مل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تبقي العدسة في هذا المزيج خلال 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التجانس مع العدسةويترك حتى إبرة النواة الصلبة فقط للعدسة من عدسة (والقشرة هي lysed وكبسولة للعدسة في المخزن المؤقت تحلل). إزالة النواة من هذا المزيج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عينات متجر على الفور في -70 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ذوبان الجليد العينات واتباع البروتوكول &quot;تنقية الحمض النووي الريبي مجموع من الخلايا والأنسجة مثقف&quot; (RNA NucleoSpin II مجموع RNA العزلة عدة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> متجر عينات الحمض النووي الريبي في -70 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للتحقق من إزالة كافية من الحمض النووي من كل عينة، تشغيل PCR وفقا للشروط التالية (الخطوة 1: 95 ° C لمدة 2 دقيقة، الخطوة 2 لمدة 40 دورات: 95 درجة مئوية لمدة 20 ثانية و 55 درجة مئوية لمدة 20 ثانية، 72 ° C لمدة 20 ثانية؛ الخطوة 3: 72 ° C لمدة 7 دقائق) مع الاشعال DNA P53 محددة، إلى الأمام 5&#39;-ACCCTCTGACCTTTTTCCCA-3 &quot;وعكس 5&#39;-TGCTGGGATCTTAGGCACTC-3 &#39;طق بوليميريز وDNA (dNTPack)، وفقا لتصنيع البروتوكول. المنتج PCR المتوقعة هي أزواج قاعدة 243. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشغيل هلام الاغاروز 1.5٪ الكهربائي للكشف عن الحمض النووي PCR المنتج محددة من أزواج قاعدة 243. لإعداد1.5٪ الاغاروز هلام العازلة في اتخاذ TBE 3،75 غرام من الاغاروز وحلها في 250 مل من TBE العازلة. إضافة بروميد إيثيديوم (0.5 ملغ / مل) 500 ميكرولتر في 500 مل من محلول 1.5٪ هلام الاغاروز. تسخين الخليط في الميكروويف أوين ويقلب لحل الاغاروز. </li></ol> أي من العينات أن تكشف أي DNA محددة منتجات PCR على 1.5٪ الكهربائي للهلام الاغاروز. <ol start="9" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس تركيز عينات الحمض النووي الريبي (1 ميكرولتر) ونسبة امتصاص العينة في 260 نانومتر (RNA) و 280 نانومتر (البروتين) في الطيف ND-1000 NanoDrop. إذا كان البروتين RNA نسبة لعينة من الحمض النووي الريبي الامتصاصية هو 2.0 أو أكثر ثم عينة الحمض النووي الريبي هو محض. إذا كانت نسبة الامتصاص عينة الحمض النووي الريبي هو أقل من 2.0، إعادة RNA خطوة تنقية 3.5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اتخاذ حجم العينة RNA الموافق 1 ميكروغرام وتوليف [كدنا] ستراند بعد بروتوكول ST 1 التوليف [كدنا] كيت (1 شارع ستراند التوليف [كدنا] كيت RT-PCR ل). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخزين العينات في -20 درجة [كدنا] C(لمدة 1 و سنوات أخرى، المحل في -70 درجة مئوية). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشغيل الكمي في الوقت الحقيقي PCR على MyiQ iCycler واحدة لون نظام الوقت الحقيقي الكشف PCR. تحميل ثلاث مكرارت على لوحة 96-بشكل جيد مع نموذج 1 ميكرولتر [كدنا]، TaqMan التعبير الجيني ماجستير ميكس، TaqMan الفحص التعبير الجيني لكاسباس 3، وفقا لتعليمات تصنيع. تحميل ثلاث مكرارت على آخر لوحة 96-بشكل جيد مع نموذج 1 ميكرولتر [كدنا]، TaqMan التعبير الجيني ماجستير ميكس، TaqMan الفحص التعبير الجيني ل18S، وفقا لتعليمات تصنيع (TaqMan الفحص الجيني التعبير البروتوكول). تمييع في سلسلة جزء من [كدنا] من ثلاث عدسات غير مكشوفة اختيارها عشوائيا. تشغيل التخفيفات المسلسل مع [كدنا] من عينات في لوحة 96-أيضا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام الأسلوب الكمي لمعيار منحنى النتائج. يتم استخدام عدد من الدورات في مضان عتبة كما القياس في برامج MyiQ. A منحنى القياسية التعبير عن عدد من الدورات في عتبة وظيفة التركيز النسبي للتدريج هو EStablished لالتخفيفات المسلسل في كل لوحة. وقد استخدم [كدنا] من ثلاث عينات غير المعالجة لعدسة المعايرة. ربط عدد من الدورات عتبة لكل عينة لمنحنى القياسية للحصول على التركيز النسبي للعينة [كدنا] قياس. وأخيرا، والحصول على مستوى التعبير عن الجينات المستهدفة عن طريق ربط تركيز النسبية للهدف [كدنا] إلى [كدنا] 18S الرقابة الداخلية. </li></ol> 4. المناعى تلوين <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تثبيت <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح العين في PBS (الفوسفات مخزنة المالحة؛ درجة الحموضة 7.4). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع العين في أنبوب مملوء بارافورمالدهيد 4٪ (PFA) في الجليد الباردة لمدة 20 دقيقة. إعداد PFA 4٪ في اليوم السابق. مخزن +4 ° C في استخدام حتى. PFA هو جديد لمدة أسبوع واحد تقريبا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة PFA مع micropipette. ثم، يغسل مع الثلج الباردة PBS لمدة 20 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع العين في 30٪ سكروز +4 ° C في أكثر من ليلة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع العين في كأس مليئة درجة الحرارة المثلى للقطع (OCT)-المتوسطة (الأنسجةتك). وضع العين في وضع مناسب لتقطيع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجميد في OCT-المتوسطة أكثر من الثلج الجاف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المحل في -70 درجة مئوية حتى الاستخدام. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باجتزاء <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع العين في البرد تقطيع طائرة المناسب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثلاث قطع 5 ميكرون سميكة منتصف السهمي أقسام من الجزء المركزي من كل عدسة. تجاهل ما لا يقل عن 6 أقسام بين أبواب متسلسلة لتجنب تلطيخ نواة نفسها في أقسام مختلفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة وقد تم قطع الجزء، ضع شريحة بلطف على أعلى من ذلك. ينبغي لقسم عصا ثم إلى الشريحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ترك الشرائح إلى الهواء الجاف قبل الاستخدام. ويمكن تخزين الشرائح في -20 درجة مئوية حتى المطلوبة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مضان المناعية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اسمحوا عينات تحقيق درجة حرارة الغرفة (5-10 دقيقة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رسم حواف حول العينات باستخدام قلم-PAP (إينفيتروجن). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اسمحوا الحدود الجافة لفترة من الوقت (10 دقيقة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسمية الشرائح المجهر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ترطيب في 1 × PBS لمدة 15 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Permeabilize في حل كتلة القياسية لمدة 30 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة الأجسام المضادة الأولية (أرنب بولكلونل، كاسباس-3 المشقوق الأجسام المضادة Asp175 9661؛ الخليوي التكنولوجيا تشوير، المؤتمر الوطني العراقي) المخفف في حل 1:3،000 كتلة القياسية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مخزن في غرفة مرطب C ° +4 في أكثر من ليلة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يغسل في برنامج تلفزيوني من قبل pipetting (3 × 5 دقائق) أو عن طريق غمر في حمام كبيرة (&gt; 15 دقيقة، 1-2 التغييرات). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة الأجسام المضادة الثانوية (الأجسام المضادة لمكافحة الأرانب الثانوية مع طيف الامتصاص / الانبعاثات المحددة) المخفف في 1:300 الحل كتلة القياسية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يغسل في برنامج تلفزيوني من قبل pipetting (3 × 5 دقائق) أو عن طريق غمر في حمام كبيرة (&gt; 15 دقيقة، 1-2 التغييرات). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تمحو PAP من ركلة جزاء التناسلية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في غرفة تخزين في درجة حرارة الغرفة مرطب لمدة 3 ساعة. تجنب التعرض للضوء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة قطرة من Vectashield ووضع زلة غطاء على الشريحة. تجنب الوقوع في فقاعات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> السماح للتصلب Vectashield (~ 20 دقيقة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على القسمين الأولن الظلام حتى التحليل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تتم معالجة كافة أقسام التحكم في غياب الأجسام المضادة الأولية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> البحث عن النتائج في غضون بضع ساعات تحت المجهر مضان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عد نوى الخلايا الظهارية &quot;من جانب واحد القوس القوس النووية لالجانب الآخر النووية من كل عدسة. تطبيق عامل التصفية القياسية الزرقاء لمشاهدة كافة نواة العدسة الظهارية في الزرقاء ومرشح القياسية التي تناسب الانبعاثات من الأجسام المضادة الثانوية لرؤية نوى كاسباس-3 الإيجابية باللون الأخضر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسجيل عدد من النوى كل عدسة الظهارية وعدد النوى إيجابية. عد الخلايا ثلاث مرات لكل قسم. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Brian, G., Taylor, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cataract+blindness:+challenge+for+the+21+st+century.">Cataract blindness: challenge for the 21 st century.</a> Bulletin of the World Health Organization. 79, 249-256 (2001).</li><li>Jose, J. G., Pitts, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wavelength+dependency+of+cataracts+in+albino+mice+following+chronic+exposure.">Wavelength dependency of cataracts in albino mice following chronic exposure.</a> Experimental Eye Research. 41, 545-563 (1985).</li><li>S&#246;derberg, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+cataract+in+the+rat+after+exposure+to+radiation+in+the+300+nm+wavelength+region.+A+study+of+the+macro-,+micro-+and+ultrastructure.">Acute cataract in the rat after exposure to radiation in the 300 nm wavelength region. A study of the macro-, micro- and ultrastructure.</a> Acta Ophthalmol. (Copenh). 66, 141-152 (1988).</li><li>Meyer, L., Dong, X., Wegener, A., S&#246;derberg, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dose+dependent+cataractogenesis+and+Maximum+Tolerable+Dose+(MTD+2.3:16)+for+UVR+-+B+induced+cataract+in+C57BL/6J+mice.">Dose dependent cataractogenesis and Maximum Tolerable Dose (MTD 2.3:16) for UVR - B induced cataract in C57BL/6J mice.</a> Experimental Eye Research. 86, 282-289 (2008).</li><li>McCarty, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+lifetime+ocular+exposure+to+UV-B:+the+Melbourne+visual+impairment+project.">Assessment of lifetime ocular exposure to UV-B: the Melbourne visual impairment project.</a> Developments in Ophthalmology. 27, 9-13 (1997).</li><li>Sasaki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localization+of+cortical+cataract+in+subjects+of+diverse+races+and+latitude.">Localization of cortical cataract in subjects of diverse races and latitude.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 44, 4210-4214 (2003).</li><li>S&#246;derberg, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+cataract+induced+by+ultraviolet+radiation.">Experimental cataract induced by ultraviolet radiation.</a> Acta Ophthalmol. (Copenh. 68, 1-77 (1990).</li><li>Galichanin, K., L&#246;fgren, S., Bergmanson, J., S&#246;derberg, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+damage+in+the+lens+after+in+vivo+close+to+threshold+exposure+to+UV-B+radiation:+cytomorphological+study+of+apoptosis.">Evolution of damage in the lens after in vivo close to threshold exposure to UV-B radiation: cytomorphological study of apoptosis.</a> Exp. Eye Res. 91, 369-377 (2010).</li><li>McCarty, C. A., Taylor, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+the+epidemiologic+evidence+linking+ultraviolet+radiation+and+cataracts.">A review of the epidemiologic evidence linking ultraviolet radiation and cataracts.</a> Dev. Ophthalmol. 35, 21-31 (2002).</li><li>Li, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lens+epithelial+cell+apoptosis+appears+to+be+a+common+cellular+basis+for+non-congenital+cataract+development+in+humans+and+animals.">Lens epithelial cell apoptosis appears to be a common cellular basis for non-congenital cataract development in humans and animals.</a> Journal of Cell Biology. 130, 169-181 (1995).</li><li>Michael, R., Vrensen, G., van Marle, J., Gan, L., S&#246;derberg, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+in+the+rat+lens+after+in+vivo+threshold+dose+ultraviolet+irradiation.">Apoptosis in the rat lens after in vivo threshold dose ultraviolet irradiation.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 13, 2681-2687 (1998).</li><li>Ayala, M. N., Strid, H., Jacobsson, U., S&#246;derberg, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=p53+Expression+and+Apoptosis+In+The+Lens+After+Ultraviolet+Radiation+Exposure.">p53 Expression and Apoptosis In The Lens After Ultraviolet Radiation Exposure.</a> Investigative ophthalmology of visual science. 48, 4187-4191 (2007).</li><li>Galichanin, K., Wang, J., Lofgren, S., Soderberg, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+universal+rat+restrainer+for+ophthalmic+research.">A new universal rat restrainer for ophthalmic research.</a> Acta Ophthalmol. 89 (1), (2011).</li><li>Ayala, M. N., Michael, R., S&#246;derberg, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+cataract+after+repeated+exposure+to+ultraviolet+radiation.">In vivo cataract after repeated exposure to ultraviolet radiation.</a> Experimental Eye Research. 70, 451-456 (2000).</li><li>S&#246;derberg, P. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicity+of+ultraviolet+radiation+exposure+to+the+lens+expressed+by+maximum+tolerable+dose+(MTD).">Toxicity of ultraviolet radiation exposure to the lens expressed by maximum tolerable dose (MTD).</a> Developments in Ophthalmology. 35, 70-75 (2002).</li><li>Michael, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+repair+of+cataract+induced+by+ultraviolet+radiation.">Development and repair of cataract induced by ultraviolet radiation.</a> Ophthalmic Research. 32, 1-45 (2000).</li><li>L&#246;fgren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cataract from ultraviolet radiation. , (2001).</li><li>Ayala, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Influence of exposure patterns and oxidation in UVR induced Cataract. , (2005).</li><li>Dong, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Safety limit estimation for cataract induced by ultraviolet radiation. , (2005).</li><li>L&#246;fgren, S., Michael, R., S&#246;derberg, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+age+and+sex+in+ultraviolet+radiation+cataract+in+the+rat.">Impact of age and sex in ultraviolet radiation cataract in the rat.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 44, 1629-1633 (2003).</li><li>Ayala, M. N., Michael, R., S&#246;derberg, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+exposure+time+for+UV+radiation-induced+cataract.">Influence of exposure time for UV radiation-induced cataract.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 41, 3539-3543 (2000).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

<html> وتصف هذه الورقة دراسة الأساليب التي تمكن الأحداث الجزيئية التي تحدث أثناء الساد الناجم عن الأشعة فوق البنفسجية-B. النظر، التي تم اشتقاق معظم المعلومات المتاحة للفي الجسم الحي الناجم عن الأشعة فوق البنفسجية الساد من التج?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> التعليقات (اختياري) </td></tr><tr><td> Ketalar </td><td> شركة فايزر </td><td> 150086 </td><td> 50 ملغ / مل </td></tr><tr><td> Rompun </td><td> باير </td><td> 022545 </td><td> 20 ملغ / مل </td></tr><tr><td> مرهم عيني البسيط </td><td> Apoteket، السويد </td><td> 336164 </td><td> 5 غ </td></tr><tr><td> Mydriacyl </td><td> ألكون </td><td> 00352 </td><td> 10 ملغ / مل </td></tr><tr><td> حل متوازن الملح </td><td> ألكون </td><td> 0007950055 </td><td></td></tr><tr><td> 3.5-UL β المركابتويثانول </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> NucleoSpin RNA RNA II مجموع العزلة عدة </td><td> Macherey-ناجل شركة محدودة وشركاه، دورين، ألمانيا </td><td> 740955،50 </td><td></td></tr><tr><td> الاشعال DNA محددة P53 </td><td> biomers.net شركة محدودة </td><td> والعرف </td><td></td></tr><tr><td> طق بوليميريز الحمض النووي، dNTPack </td><td> روش </td><td> 04 728 866 001 </td><td></td></tr><tr><td> الاغاروز </td><td> سيجما </td><td> A5093 </td><td></td></tr><tr><td> إيثيديوم بروميد الحل 0.5 ملغ / مل </td><td> سيجما </td><td> E1385 </td><td></td></tr><tr><td> نانو إسقاط ND-1000 طيفي </td><td> NanoDrop المنتجات </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 1 ش التوليف [كدنا] ستراند عدة لRT-PCR (AMV) </td><td> روش تشخيص محدودة </td><td> 11 483 188 001 </td><td></td></tr><tr><td> iCycler MyiQ اللون الحقيقي PCR واحدة الكشف وقت النظام </td><td> بيو راد مختبرات </td><td></td><td></td></tr> &lt;TR&gt; <td> 96-وحة جيدا </td><td> Sarstedt </td><td> 72.1979.202 </td><td></td></tr><tr><td> ماجستير TaqMan التعبير الجيني ميكس </td><td> النظم البيولوجية التطبيقية </td><td> 4369016 </td><td></td></tr><tr><td> TaqMan الفحص التعبير الجيني لكاسباس 3 </td><td> النظم البيولوجية التطبيقية </td><td> Rn00563902_m1 </td><td></td></tr><tr><td> TaqMan الفحص التعبير الجيني ل18S </td><td> النظم البيولوجية التطبيقية </td><td> Hs99999901_s1 </td><td></td></tr><tr><td> MyiQ البرمجيات </td><td> بيو راد مختبرات </td><td></td><td></td></tr><tr><td> المشقوق كاسباس-3 (Asp175) </td><td> تكنولوجيا الخلايا مما يشير </td><td> 9661 </td><td></td></tr><tr><td> أرنب المضادة مفتش الحكومة </td><td> Abcam </td><td> Ab6798 </td><td></td></tr><tr><td> سكر القصب </td><td> سيغما الدريتش </td><td> 84097 </td><td></td></tص&gt; <tr><td> Vectashield </td><td> ناقلات المختبرات </td><td></td><td></td></tr><tr><td> مجهر عالمي Axioplan 2 التصوير </td><td> كارل زايس </td><td></td><td></td></tr><tr><td> بارافورمالدهيد </td><td> سيغما الدريتش </td><td> 441244 </td><td></td></tr><tr><td> TBE العازلة 10X </td><td> Promega </td><td> V4251 </td><td></td></tr></tbody></table>

characterization of molecular mechanisms of in vivo uvr induced cataract

ساد هو السبب الرئيسي للعمى في العالم 1. وتعرف منظمة الصحة العالمية الساد كما تغيم عدسة العين مما يعوق نقل الضوء. ساد هو مرض متعدد مضروب المرتبطة والسكري الإشعاع، والتدخين فوق البنفسجية (الأشعة فوق البنفسجية)، والكحول، والإشعاع المؤين، والمنشطات وارتفاع ضغط الدم. هناك أدلة قوية التجريبية 2-4 والوبائية للأشعة فوق البنفسجية يتسبب 5،6 التي الساد. وضعنا نموذج حيواني لالناجم عن الأشعة فوق البنفسجية B في كل من الساد 7 تخدير الحيوانات وغير تخدير 8. العلاج الوحيد للساد هو عملية جراحية ولكن هذا العلاج ليس في متناول الجميع. وتشير التقديرات إلى أن التأخير لبداية ساد لمدة 10 سنوات يمكن أن تقلل من الحاجة إلى جراحة الساد بنسبة 50٪ 9. لتأخير حدوث المياه الزرقاء في العين، وهناك حاجة لفهم آليات تشكيل الساد والوقاية تجد فعالة STRATegies. بين آليات التنمية الساد، موت الخلايا المبرمج يلعب دورا حاسما في بدء الساد في البشر والحيوانات 10. ولقد انصب اهتمامنا في الآونة الأخيرة موت الخلايا المبرمج في عدسة كآلية للتنمية الساد 8،11،12. من المتوقع أن التوصل إلى فهم أفضل لتأثير الأشعة فوق البنفسجية على مسار موت الخلايا المبرمج سوف توفر إمكانيات اكتشاف أدوية جديدة لمنع إعتام عدسة العين. في هذه المقالة، ونحن تصف كيفية الساد يمكن أن يتسبب في التعرض تجريبيا من الجسم الحي للأشعة فوق البنفسجية-B. يتم عرض مزيد RT-PCR والمناعية كأدوات لدراسة الآليات الجزيئية للأشعة فوق البنفسجية من الساد الناجم-B.

وقدرت مصادر مختلفة من التباين في القياسات مع تحليل التباين ووجد أن ثلاثة قياسات النظر لكل حيوان التباين للقياسات كان بناء على أمر من 15٪ من تلك الحيوانات. وبالتالي، معتبرا كله تحليل العدسة، فإنه من غير الممكن لزيادة الدقة. توضيح الاختبار متعامد على النقيض ذات دلالة إ?...

Watch this Scientific Journal Video about Characterization of Molecular Mechanisms of In vivo UVR Induced Cataract at JoVE.com

Characterization of Molecular Mechanisms of In vivo UVR Induced Cataract

ساد هو السبب الرئيسي للعمى في العالم. الطاقة الشمسية الأشعة فوق البنفسجية (الأشعة فوق البنفسجية) هو عامل الخطر الرئيسي للتنمية الساد. تم تطوير نموذج حيواني من الأشعة فوق البنفسجية التي يسببها حتى الساد-B. في هذه المادة ونحن تصف أساليب التحقيق في تشكيل الساد: التعرض ل، الأشعة فوق البنفسجية الكمية RT-PCR والمناعية.

توصيف الآليات الجزيئية لل<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; الأشعة فوق البنفسجية المستحثة الساد

Cataract is the leading cause of blindness in the world 1. The World Health Organization defines cataract as a clouding of the lens of the eye which ...

characterization-molecular-mechanisms-vivo-uvr-induced

Research

JoVE Journal

Medicine

Characterization of Molecular Mechanisms of In vivo UVR Induced Cataract

9.8K Views.  Karolinska Institutet. ساد هو السبب الرئيسي للعمى في العالم. الطاقة الشمسية الأشعة فوق البنفسجية (الأشعة فوق البنفسجية) هو عامل الخطر الرئيسي للتنمية الساد. تم تطوير نموذج حيواني من الأشعة فوق البنفسجية التي يسببها حتى الساد-B. في هذه المادة ونحن تصف أساليب التحقيق في تشكيل الساد: التع?...

Video: Characterization of Molecular Mechanisms of In vivo UVR Induced Cataract

In vivo Near Infrared Fluorescence (NIRF) Intravascular Molecular Imaging of Inflammatory Plaque, a Multimodal Approach to Imaging of Atherosclerosis

The vascular response to injury is a well-orchestrated inflammatory response triggered by the accumulation of macrophages within the vessel wall leading to an accumulation of lipid-laden intra-luminal plaque, smooth muscle cell proliferation and progressive narrowing of the vessel lumen. The formation of such vulnerable plaques prone to rupture underlies the majority of cases of acute myocardial infarction. The complex molecular and cellular inflammatory cascade is orchestrated by the recruitment of T lymphocytes and macrophages and their paracrine effects on endothelial and smooth muscle cells.1
Molecular imaging in atherosclerosis has evolved into an important clinical and research tool that allows in vivo visualization of inflammation and other biological processes. Several recent examples demonstrate the ability to detect high-risk plaques in patients, and assess the effects of pharmacotherapeutics in atherosclerosis.4 While a number of molecular imaging approaches (in particular MRI and PET) can image biological aspects of large vessels such as the carotid arteries, scant options exist for imaging of coronary arteries.2 The advent of high-resolution optical imaging strategies, in particular near-infrared fluorescence (NIRF), coupled with activatable fluorescent probes, have enhanced sensitivity and led to the development of new intravascular strategies to improve biological imaging of human coronary atherosclerosis.
Near infrared fluorescence (NIRF) molecular imaging utilizes excitation light with a defined band width (650-900 nm) as a source of photons that, when delivered to an optical contrast agent or fluorescent probe, emits fluorescence in the NIR window that can be detected using an appropriate emission filter and a high sensitivity charge-coupled camera. As opposed to visible light, NIR light penetrates deeply into tissue, is markedly less attenuated by endogenous photon absorbers such as hemoglobin, lipid and water, and enables high target-to-background ratios due to reduced autofluorescence in the NIR window. Imaging within the NIR 'window' can substantially improve the potential for in vivo imaging.2,5
Inflammatory cysteine proteases have been well studied using activatable NIRF probes10, and play important roles in atherogenesis. Via degradation of the extracellular matrix, cysteine proteases contribute importantly to the progression and complications of atherosclerosis8. In particular, the cysteine protease, cathepsin B, is highly expressed and colocalizes with macrophages in experimental murine, rabbit, and human atheromata.3,6,7 In addition, cathepsin B activity in plaques can be sensed in vivo utilizing a previously described 1-D intravascular near-infrared fluorescence technology6, in conjunction with an injectable nanosensor agent that consists of a poly-lysine polymer backbone derivatized with multiple NIR fluorochromes (VM110/Prosense750, ex/em 750/780nm, VisEn Medical, Woburn, MA) that results in strong intramolecular quenching at baseline.10 Following targeted enzymatic cleavage by cysteine proteases such as cathepsin B (known to colocalize with plaque macrophages), the fluorochromes separate, resulting in substantial amplification of the NIRF signal. Intravascular detection of NIR fluorescence signal by the utilized novel 2D intravascular NIRF catheter now enables high-resolution, geometrically accurate in vivo detection of cathepsin B activity in inflamed plaque.
In vivo molecular imaging of atherosclerosis using catheter-based 2D NIRF imaging, as opposed to a prior 1-D spectroscopic approach,6 is a novel and promising tool that utilizes augmented protease activity in macrophage-rich plaque to detect vascular inflammation.11,12 The following research protocol describes the use of an intravascular 2-dimensional NIRF catheter to image and characterize plaque structure utilizing key aspects of plaque biology. It is a translatable platform that when integrated with existing clinical imaging technologies including angiography and intravascular ultrasound (IVUS), offers a unique and novel integrated multimodal molecular imaging technique that distinguishes inflammatory atheromata, and allows detection of intravascular NIRF signals in human-sized coronary arteries.

In vivo Near Infrared Fluorescence NIRF Intravascular Molecular Imaging of Inflammatory Plaque, a Multimodal Approach to Imaging of Atherosclerosis

We detail a new near-infrared fluorescence (NIRF) catheter for 2-dimensional intravascular molecular imaging of plaque biology in vivo. The NIRF catheter can visualize key biological processes such as inflammation by reporting on the presence of plaque-avid activatable and targeted NIR fluorochromes. The catheter utilizes clinical engineering and power requirements and is targeted for application in human coronary arteries. The following research study describes a multimodal imaging strategy that utilizes a novel in vivo intravascular NIRF catheter to image and quantify inflammatory plaque in proteolytically active inflamed rabbit atheromata.

في الجسم الحي الأدنى الإسفار التصوير بالأشعة تحت الحمراء داخل الأوعية (NIRF) الجزيئية من البلاك التهابية ، وهو النهج المتعدد الوسائط إلى التصوير من تصلب الشرايين

The vascular response to injury is a well-orchestrated inflammatory response triggered by the accumulation of macrophages within the vessel wall leading ...

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

Muscle strains are one of the most common complaints treated by physicians. A muscle injury is typically diagnosed from the patient history and physical exam alone, however the clinical presentation can vary greatly depending on the extent of injury, the patient's pain tolerance, etc. In patients with muscle injury or muscle disease, assessment of muscle damage is typically limited to clinical signs, such as tenderness, strength, range of motion, and more recently, imaging studies. Biological markers, such as serum creatine kinase levels, are typically elevated with muscle injury, but their levels do not always correlate with the loss of force production. This is even true of histological findings from animals, which provide a "direct measure" of damage, but do not account for all the loss of function. Some have argued that the most comprehensive measure of the overall health of the muscle in contractile force. Because muscle injury is a random event that occurs under a variety of biomechanical conditions, it is difficult to study. Here, we describe an in vivo animal model to measure torque and to produce a reliable muscle injury. We also describe our model for measurement of force from an isolated muscle in situ. Furthermore, we describe our small animal MRI procedure.

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

An in vivo animal model of injury is described. The method takes advantage of the subcutaneous position of the fibular nerve. Velocity, timing of muscle activation, and arc of motion are all pre-determined and synchronized using commercial software. Post injury changes are monitored in vivo using MR imaging/spectroscopy.

و في الجسم الحي النموذجي القوارض من الإصابات الناجمة عن انكماش ، وغير الغازية ورصد الانتعاش

Muscle strains are one of the most  common complaints treated by physicians. A muscle injury is typically diagnosed from the patient history and  physical ...

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. Here, we describe a general protocol for cell labeling, imaging, and image processing. The technique is applicable to various cell types and animal models, although here we focus on a typical mouse model for tracking murine immune cells. The most important issues for cell labeling are described, as these are relevant to all models. Similarly, key imaging parameters are listed, although the details will vary depending on the MRI system and the individual setup. Finally, we include an image processing protocol for quantification. Variations for this, and other parts of the protocol, are assessed in the Discussion section. Based on the detailed procedure described here, the user will need to adapt the protocol for each specific cell type, cell label, animal model, and imaging setup. Note that the protocol can also be adapted for human use, as long as clinical restrictions are met.

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

We describe a general protocol for in vivo cell tracking using MRI in a mouse model with ex vivo labeled cells. A typical protocol for cell labeling, image acquisition processing and quantification is included.

في الجسم الحي 19 F التصوير بالرنين المغناطيسي لتتبع الخليوي

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. ...

Molecular Profiling of the Invasive Tumor Microenvironment in a 3-Dimensional Model of Colorectal Cancer Cells and Ex vivo Fibroblasts

Invading colorectal cancer (CRC) cells have acquired the capacity to break free from their sister cells, infiltrate the stroma, and remodel the extracellular matrix (ECM). Characterizing the biology of this phenotypically distinct group of cells could substantially improve our understanding of early events during the metastatic cascade.

Tumor invasion is a dynamic process facilitated by bidirectional interactions between malignant epithelium and the cancer associated stroma. In order to examine cell-specific responses at the tumor stroma-interface we have combined organotypic co-culture and laser micro-dissection techniques.
Organotypic models, in which key stromal constituents such as fibroblasts are 3-dimentioanally co-cultured with cancer epithelial cells, are highly manipulatable experimental tools which enable invasion and cancer-stroma interactions to be studied in near-physiological conditions.

Laser microdissection (LMD) is a technique which entails the surgical dissection and extraction of the various strata within tumor tissue, with micron level precision.
By combining these techniques with genomic, transcriptomic and epigenetic profiling we aim to develop a deeper understanding of the molecular characteristics of invading tumor cells and surrounding stromal tissue, and in doing so potentially reveal novel biomarkers and opportunities for drug development in CRC.&#160;&#160;&#160;

Molecular Profiling of the Invasive Tumor Microenvironment in a 3-Dimensional Model of Colorectal Cancer Cells and Ex vivo Fibroblasts

Molecular profiling of laser microdissected cells and stroma from synthetic, tissue-engineered colorectal cancer models represents a novel and manipulatable approach to characterize and dissect the distinctive biology at the interface between tumor cells at the invasive front and cancer associated stromal cells. &#160;

التنميط الجزيئي للالمكروية ورم الغازية في نموذج 3 الأبعاد للخلايا سرطان القولون والمستقيم و<em&gt; خارج الحي</em&gt; الخلايا الليفية

Invading colorectal cancer (CRC) cells have acquired the capacity to break free from their sister cells, infiltrate the stroma, and remodel the ...

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

Certain classes of chemotherapies may exert acute vascular changes that may progress into long-term conditions that may predispose the patient to an increased risk of vascular morbidity.&#160;Yet, albeit&#160;the mounting clinical evidence, there is a paucity of clear studies of vascular toxicity and therefore the etiology of a heterogeneous group of vascular/cardiovascular disorders remains to be elucidated. Moreover, the mechanism that may underlie vascular toxicity can completely differ from the principles of chemotherapy-induced cardiotoxicity, which is related to direct myocyte injury. We have established a real-time, in vivo molecular imaging platform&#160;to evaluate&#160;the potential&#160;acute&#160;vascular toxicity of anti-cancer therapies.
We have set up a platform of in vivo, high-resolution molecular imaging&#160;in mice,&#160;suitable for visualizing vasculature within confined organs and reference blood vessels within the same individuals whereas each individual serve as its own control. Blood vessel walls were impaired after doxorubicin administration, representing a unique mechanism of vascular toxicity that may be the early event in end-organ injury. Herein, the method of fibered confocal fluorescent microscopy (FCFM) based imaging is described, which provides an innovative mode to understand physiological phenomena at the cellular and sub-cellular levels in animal subjects.

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

We herein describe the method of fibered confocal fluorescent microscopy (FCFM) based imaging, which provides an innovative mode to understand physiological phenomena at the cellular and sub-cellular levels in animal subjects.

الناجم عن العلاج الكيميائي الأوعية الدموية سمية - في الوقت الحقيقي<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; التصوير من سفينة انخفاض

Certain classes of chemotherapies may exert acute vascular changes that may progress into long-term conditions that may predispose the patient to an ...

Establishment and Characterization of UTI and CAUTI in a Mouse Model

Urinary tract infections (UTI) are highly prevalent, a significant cause of morbidity and are increasingly resistant to treatment with antibiotics. Females are disproportionately afflicted by UTI: 50% of all women will have a UTI in their lifetime. Additionally, 20-40% of these women who have an initial UTI will suffer a recurrence with some suffering frequent recurrences with serious deterioration in the quality of life, pain and discomfort, disruption of daily activities, increased healthcare costs, and few treatment options other than long-term antibiotic prophylaxis. Uropathogenic Escherichia coli (UPEC) is the primary causative agent of community acquired UTI. Catheter-associated UTI (CAUTI) is the most common hospital acquired infection accounting for a million occurrences in the US annually and dramatic healthcare costs. While UPEC is also the primary cause of CAUTI, other causative agents are of increased significance including Enterococcus faecalis. Here we utilize two well-established mouse models that recapitulate many of the clinical characteristics of these human diseases. For UTI, a C3H/HeN model recapitulates many of the features of UPEC virulence observed in humans including host responses, IBC formation and filamentation. For CAUTI, a model using C57BL/6 mice, which retain catheter bladder implants, has been shown to be susceptible to E. faecalis bladder infection. These representative models are being used to gain striking new insights into the pathogenesis of UTI disease, which is leading to the development of novel therapeutics and management or prevention strategies.

The ability to model urinary tract infections (UTI) is crucial in order to be able to understand bacterial pathogenesis and spawn the development of novel therapeutics. This work&#8217;s goal is to demonstrate mouse models of experimental UTI and catheter associated UTI that recapitulate and predict findings seen in humans.

إنشاء وتوصيف UTI وCAUTI في نموذج الفأر

Urinary tract infections (UTI) are highly prevalent, a significant cause of morbidity and are increasingly resistant to treatment with antibiotics. ...

Depletion of Mouse Cells from Human Tumor Xenografts Significantly Improves Downstream Analysis of Target Cells

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic patient tumors in different assays1. Human tumor xenografts represent the gold standard with respect to tumor biology, drug discovery, and metastasis research 2-4. Tumor xenografts can be derived from different types of material like tumor cell lines, tumor tissue from primary patient tumors4 or serially transplanted tumors. When propagated in vivo, xenografted tissue is infiltrated and vascularized by cells of mouse origin. Multiple factors such as the tumor entity, the origin of xenografted material, growth rate and region of transplantation influence the composition and the amount of mouse cells present in tumor xenografts. However, even when these factors are kept constant, the degree of mouse cell contamination is highly variable.
Contaminating mouse cells significantly impair downstream analyses of human tumor xenografts. As mouse fibroblasts show high plating efficacies and proliferation rates, they tend to overgrow cultures of human tumor cells, especially slowly proliferating subpopulations. Mouse cell derived DNA, mRNA, and protein components can bias downstream gene expression analysis, next-generation sequencing, as well as proteome analysis 5. To overcome these limitations, we have developed a fast and easy method to isolate untouched human tumor cells from xenografted tumor tissue. This procedure is based on the comprehensive depletion of cells of mouse origin by combining automated tissue dissociation with the benchtop tissue dissociator and magnetic cell sorting. Here, we demonstrate that human target cells can be can be obtained with purities higher than 96% within less than 20 min independent of the tumor type.

Human tumor xenografts are vascularized and infiltrated by cells of mouse origin during the growth phase in vivo. To circumvent the bias caused by these contaminating cells during downstream analysis, we developed a method allowing for comprehensive depletion of all mouse cells by magnetic cell sorting.

نضوب خلايا الفأر من Xenografts ورم الإنسان يحسن بشكل ملحوظ تحليل المصب من الخلايا المستهدفة

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic ...

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

Mitochondria are the powerhouses of cells and produce cellular energy in the form of ATP. Mitochondrial dysfunction contributes to biological aging and a wide variety of disorders including metabolic diseases, premature aging syndromes, and neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease (AD) and Parkinson's disease (PD). Maintenance of mitochondrial health depends on mitochondrial biogenesis and the efficient clearance of dysfunctional mitochondria through mitophagy. Experimental methods to accurately detect autophagy/mitophagy, especially in animal models, have been challenging to develop. Recent progress towards the understanding of the molecular mechanisms of mitophagy has enabled the development of novel mitophagy detection techniques. Here, we introduce several versatile techniques to monitor mitophagy in human cells, Caenorhabditis elegans (e.g., Rosella and DCT-1/ LGG-1 strains), and mice (mt-Keima). A combination of these mitophagy detection techniques, including cross-species evaluation, will improve the accuracy of mitophagy measurements and lead to a better understanding of the role of mitophagy in health and disease.

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

Mitophagy, the process of clearing damaged mitochondria, is necessary for mitochondrial homeostasis and health maintenance. This article presents some of the latest mitophagy detection methods in human cells, Caenorhabditis elegans, and mice.

في المختبر و في فيفو كشف ميتوفاجي في الخلايا البشرية، ايليجانس جيموالفئران

Mitochondria are the powerhouses of cells and produce cellular energy in the form of ATP. Mitochondrial dysfunction contributes to biological aging and a ...

A Doxorubicin-Induced Murine Model of Dilated Cardiomyopathy In Vivo

Dilated cardiomyopathy (DCM) refers to a spectrum of heterogeneous myocardial disorders characterized by ventricular dilation and depressed cardiac performance in the absence of hypertension, valvular, congenital, or ischemic heart diseases, and which may be related to infection, autoimmune or metabolic abnormalities, or family inheritance. It can progress into congestive heart failure with a poor prognosis. Doxorubicin (Dox) is widely employed as a chemotherapeutic drug, but its use is limited because it causes DCM-like changes of the myocardium. Its myocardial toxicity is attributed to oxidative stress, chronic inflammation, and cardiomyocyte apoptosis. A model of DCM exploiting these Dox-induced DCM symptoms has not been established.

Described is a protocol to establish a Doxorubicin-induced dilated cardiomyopathy (DCM) model in mice via long-term intraperitoneal injection of Doxorubicin.

نموذج مورين الناجم عن Doxorubicin لاعتلال عضلة القلب المتوسع في فيفو

Dilated cardiomyopathy (DCM) refers to a spectrum of heterogeneous myocardial disorders characterized by ventricular dilation and depressed cardiac ...

Generation and Characterization of Right Ventricular Myocardial Infarction Induced by Permanent Ligation of the Right Coronary Artery in Mice

Right ventricular infarction (RVI) is a common presentation in clinical practice. Severe RVI can lead to fatal hemodynamic dysfunction and arrhythmia. In contrast to the extensively used mouse myocardial infarction (MI) model generated by left coronary artery ligation, the RVI mouse model is rarely employed due to the difficulty associated with model generation. Research on the mechanisms and treatment of RVI-induced RV remodeling and dysfunction requires animal models to mimic the pathophysiology of RVI in patients. This study introduces a feasible procedure for RVI model generation in C57BL/6J mice. Further, this model was characterized based on the following: infarct size evaluation at 24 h after MI, assessment of cardiac remodeling and function with echocardiography, RV hemodynamics assessment, and histology of the infarct zone at 4 weeks after RVI. In addition, a coronary vasculature cast was performed to observe the coronary arterial arrangement in RV. This mouse model of RVI would facilitate the research on mechanisms of right heart failure and seek new therapeutic targets of RV remodeling.

There are several differences between the right and left ventricles. However, the pathophysiology of right ventricular infarction (RVI) has not been clarified. In the present protocol, a reproducible method for RVI mouse model generation is introduced, which may provide a means to explain the mechanism of RVI.

توليد وتوصيف احتشاء عضلة القلب البطيني الأيمن الناجم عن الربط الدائم للشريان التاجي الأيمن في الفئران

Right ventricular infarction (RVI) is a common presentation in clinical practice. Severe RVI can lead to fatal hemodynamic dysfunction and arrhythmia. In ...