وقد تم تمويل هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح CA113734 منحت لYull F وزارة شؤون المحاربين القدامى (TS بلاكويل).

تمت الموافقة على جميع التجارب على الحيوانات من قبل رعاية جامعة فاندربيلت الحيوان المؤسسية واللجنة الاستخدام. 1. إعداد الفئران المعدلة وراثيا <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وتستخدم الفئران الإناث، سواء كان إيجابيا لمراسل NGL التحوير (N-F-G كيلوبايت FP-L uciferase) (1 صفها سابقا) لهذا الإجراء. عندما تكون الإناث لا يقل عن 6 أسابيع من العمر، ورفيقة لهم مع ذكر نوع البرية FVB. تربية حريم ويمكن استخدام (تصل إلى 4 إناث في قفص مع 1 ذكر). (يرجى ملاحظة: تم استخدام سلالة الفئران FVB للدراسة الحالية ويمكن أيضا الفئران سلالة أغمق مثل C57Bl6 استخدامها، ولكن يجب أن حلق هذه الفئران قبل التصوير). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ابتداء من الساعة 15 يوما بعد التزاوج، والتحقق من الإناث بانتظام بحثا عن علامات على الحمل (كبير مقاس جاحظ). يجب فصل كل النساء الحوامل مرة واحدة وذكر إزالتها من القفص مرة واحدة تربية الأنثى مشاركة تصبح حاملا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مشاهدة الإناث وفصلد لاحظ تاريخ الميلاد عندما يظهر القمامة. مطلوب من القمامة على الأقل 6 الجراء لالرضاعة الكافية. بعد ثمانية أيام من ولادة من القمامة، والمضي قدما مع بروتوكول (انظر الشكل 1 لجدول زمني التخطيطي). </li></ol> 2. استعدادا لحقن <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حل E. LPS القولونية في برنامج تلفزيوني لتركيز النهائي من 0.1 ميكروغرام / ميكرولتر. 50 ميكرولتر من هذا الحل، أو ما مجموعه 5 ميكروغرام، سيتم حقنها في الغدة الثديية. إعداد أنبوب الثاني من وحده PBS لاستخدامها في حقن السيطرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انشاء نطاق تشريح ومعدات التخدير isoflurane. وينبغي تأمين جهاز الأنف المخروطية إلى مرحلة نطاق تشريح حيث سيتم وضع الماوس. مصدر ضوء جيد، وما إذا كان من نطاق نفسه أو من خارج الأضواء أيضا أن تكون مستعدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة في انشاء اكتمال بدء تشغيل الجهاز isoflurane وتدفق الهواء. </li></ol> 3. ينترادوكتال حقن LPS <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحميل حقنة إبرة قصيرة مع 50 ميكرولتر من محلول LPS. تعيين هذا جانبا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الماوس ليتم حقنه عن طريق وضع النساء لأول مرة إلى المربع isoflurane ملء ثم تباطأ بمجرد التنفس، نقل لها على خشبة المسرح ووضع أنفها داخل مخروط الأنف. استخدام قليل اصبع القدم لتأكيد الماوس للتخدير الكامل. مراقبة التنفس الماوس في جميع أنحاء الداخلي وضبط مستوى isoflurane فقا لذلك. وينبغي القفص الذي يحتوي على القمامة من الجراء التي اتخذت من مجموعة الأنثى بعناية جانبا حتى يمكن إرجاع السد بعد العملية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام قطرة صغيرة من الايثانول 70٪ لجعل معطف وضع مسطح وللمساعدة في تصور الحلمة تعلق على الغدة الثديية الحق رقم 4 الأربية على أسفل البطن الفأر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تركز نطاق تشريح للرأي الأمثل من الحلمة. استخدام بعناية مجموعة من ملقط غرامة لرسم مزيد من الحلمة بعيدا عن الجلد، ولكن لا تجرح أو ثقب الحلمة بأي شكل من الأشكال. اللا ينبغي أبدا أن فرضت ملقط بإحكام معا عند التعامل مع الأنسجة، ولكنها تستخدم مع على عقد النور الذي يتطلب الحد الأدنى من الضغط على الحلمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام ملقط في اليد اليسرى لعقد بلطف الحلمة في مكانها. جلب ببطء حقنة مسبقة في مجال الرؤية باستخدام اليد اليمنى. ينبغي أن تعقد الحقنة بحيث لا اعادة تموضع أن يحدث من أجل حقن محتويات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة في حقنة في طريقة العرض، وتهدف بعناية في افتتاح الأقنية الصغيرة داخل وسط الحلمة، وإدراج الحقنة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دون اعادة تموضع من جهة، وضخ محتويات الحقنة والإبرة إزالة من الحلمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحميل حقنة ثانية مع 50 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني لحقن السيطرة. إعادة وضع الماوس على المسرح وللحصول على أفضل عرض للرقم 4 الأربية اليسرى الحلمة الغدة الثديية على الجانب الآخر من أسفل البطن الفأر. كرر الخطوات 3،4 حتي 3،7 باستخدام حقنة PBS محملة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة كل الحقن كومبلمؤسسة التدريب الأوروبية، ووقف التخدير وتحريك الماوس إلى قفص الانتعاش. رصد الإناث لضمان أنها تصبح المحمول في غضون 5 دقائق. السماح الماوس لتبقى في قفص الانتعاش لمدة 1 ساعة. بعد 1 ساعة من الانتعاش، ضع الجزء الخلفي الإناث في قفص مع القمامة من الجراء لها. وينبغي أن الفئران رصد دوري لمدة 6 حقن آخر ساعة قبل الشروع في التصوير. في تجربتنا، لوحظت أي نتائج ضارة في الأنثى أو الجراء وخلال الفترة بين الحقن والتصوير. ومع ذلك، فإذا ما لاحظت علامات الضائقة في الإناث (التقوس في الجلوس على سبيل المثال، والعض أو حراسة للموقع الحقن، والخمول العام) أو الجراء (أي حركة أو اللون مزرق من الجلد) وقفها التجربة. </li></ol> 4. Bioluminescent التصوير لتصور NF-كيلوبايت نشاط <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة تم نقلها إلى مرفق الفئران والتصوير، والتصوير يبدأ الإجراء عن طريق فتح البرنامج وتهيئة الجهاز. بدوره على هوoflurane الجهاز وتدفق الهواء، وضمان أن يتم تخدير المتدفقة إلى كل من مربع وغرفة التصوير. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع الماوس تحت التخدير isoflurane في المربع التخدير واضحة. مرة واحدة قد تباطأ التنفس، استخدم قليل اصبع القدم لتأكيد الماوس للتخدير الكامل. ثم، وضخ 100 ميكرولتر من الركيزة وسيفيرين في الماوس عن طريق الحقن الرجعية المدارية 5 باستخدام محقنة معقمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل على الفور إلى غرفة الماوس التصوير ووضع أنفها في إطار isoflurane الأنف المخروطية الموجودة هناك. يجب أن يكون الماوس مستلق. تأمين كل قدم إلى خشبة المسرح مع الشريط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدخال الإعدادات المناسبة لبرنامج IVIS لاتخاذ كل الصور الفوتوغرافية بيضاء خفيفة وصورة من النشاط bioluminescent. يجب أن يكون التعرض الوقت 10 ثانية. الحصول على الصورة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بمجرد الحصول على الصور، والسماح الماوس لاسترداد ثم ضع ظهرها في قفص مع الجراء لها ورصد بصفة دورية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> والفوتوغرافية والانارةومضافين الصور تلقائيا وعرضها على الشاشة، كما في الشكل 2. تحليل الصور التي حصل عليها وضع المنطقة في المصالح أو &quot;ROI&quot; الدوائر متساوية في الحجم على كل جانب من أسفل البطن الماوس، (واحد على الغدة PBS حقن واحد على الغدة LPS حقن). تعيين قراءة إلى الفوتونات. يجب أن يتم عرض رقم يشير إلى الكشف عن التلألؤ في كل ROI (انظر الشكل 2B). استخدام هذا الرقم في التحليل الإحصائي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لعرض الصورة الأمثل، وضبط مزيد من عتبة إشارة عرضها. هذا لن يغير من إجمالي التلألؤ للقراءة بها ولكن سوف يسمح لك لإزالة إشارة الخلفية وتصور الاختلافات بين السيطرة والغدة LPS المعاملة. تقلل من كمية التلألؤ حتى يظهر الغدة PBS حقن خالية من إشارة الخلفية. وهذا ينبغي أن تترك الإشارة زيادة في الغدة LPS المعاملة لا تزال واضحة في الصورة، كما رأينا في الشكل 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Additionaيمكن أن تكتمل تحليل لتر، بما في ذلك البروتين والحمض النووي الريبي المقايسات، مع الأنسجة الثديية التي تم جمعها من الإناث بعد الوفاة 6. </li></ol> 5. ممثل النتائج للحصول على نتائج من تفسير هذه الأساليب، يجب أن أكسب LPS (أو PBS) فقط في القنوات الثديية، وترك الأنسجة المجاورة دون عائق. والحقن في النسيج تحت الجلد حول الحلمة يؤدي إلى التهاب بسبب الاصابة بدلا من محاكاة العدوى. التريبان الأزرق حقن صبغة مخففة في PBS مفيد عندما تعلم هذه التقنية. 3A يوضح الشكل غدة حقن بنجاح غرست مع 100 ميكرولتر من اللون الأزرق التريبان في برنامج تلفزيوني. كما هو موضح، ينبغي شغل فقط الشجرة الأقنية مع الحل حقن، ويجب ألا يكون هناك البلعة في موقع الحقن. A &quot;بلعة&quot; في هذا السياق هو تراكم السائل حقن في الحلمة أو في الأنسجة المحيطة بالحلمة دون ضخ في شجرة الأقنية. هذا هو SHفي الشكل 3B الخاصة. يرجى ملاحظة أنه تم الانتهاء من الحقن الممارسة هو موضح في الشكل 3 في الإناث في اليوم 21 من الرضاعة. في ذروة من الرضاعة (اليوم 8-10، المرحلة التي يتم حقن LPS باستخدام بروتوكول الحالية)، والحليب وفيرة، ومن الصعب تصور القنوات وتحديد ما إذا كان قد تم الانتهاء من حقن بشكل صحيح. لذلك، نقطة في وقت لاحق الرضاعة هي أفضل لحقن الممارسة. زيادة حقن الناجح لLPS في نتائج القنوات الثديية في NF-كيلوبايت النشاط داخل الغدة. هذا ينبغي أن يكون واضحا في الماوس على التصوير الصحفي IVIS، والغدة LPS حقن ينبغي أن يكون أعلى بكثير نشاط luciferase (قياسا إلى عدد الفوتون) من الغدة PBS حقن، كما هو مبين في الشكل 2 (في المتوسط، والغدة LPS يقرأ 200٪ من إشارة تحكم PBS). وهناك زيادة ذات دلالة إحصائية في التلألؤ داخل الغدد LPS-تعامل على أنها شركاتوقد تحقق ARED لسيطرة المقابل على الرغم من الانتهاء من مجموعة من 4 الفئران 4. وقد استخدمت إحدى الدراسات أيضا حقن إضافية الثديية ينترادوكتال إما E. القولونية أو نقل الجينات إلى LPS مراسل NF-كيلوبايت. ورأى هؤلاء المؤلفين مماثلة لعملنا، زيادة كبيرة في الموارد البشرية مراسل 6 النشاط بعد E. القولونية حقن 2. يرجى ملاحظة، وذلك بسبب النشاط NF-كيلوبايت التأسيسي في الدماغ وأعضاء البطن الأخرى، ورؤساء بطون من الفئران تظهر باستمرار مراسلنا إشارة عند تصويرها، حتى في الأساس قبل أي تلاعب. وبالتالي، ينبغي تجاهل هذه الإشارة فيما يتعلق بهذه التجربة. يجب أن تبقى إشارة واضحة داخل الغدة الثديية LPS حقن بعد تعديل الصورة للقراءة إلى تقليل التلألؤ الخلفية في الغدة PBS. ويبين الشكل 2 الصور مع خلفية تخفيض. سوف تنجح حقن للغدةالنتيجة المحتملة في معظم الأضرار التي لحقت الحلمة. سيؤدي ذلك أشار والجلد على مستوى الالتهاب الذي سوف يكون واضحا عند التصوير. وهذا النوع من اصابة إشارة تكون قوية جدا وتقتصر على منطقة الحلمة التي وقع فيها الضرر، وليس المنبثقة في جميع أنحاء الغدة، كما رأينا بعد حقن LPS الناجح في القنوات. <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/4030/4030fig1.jpg" /> الشكل 1. التخطيطي الداخلي. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/4030/4030fig2.jpg" /> الشكل 2. نتائج ممثلة من IVIS bioluminescent التصوير. (A) مع خلفية الصورة المكتسب خفض، وكشف عن زيادة نشاط luciferase في الغدة LPS حقن. (B) مع صورة من منطقة quantifications الفائدة المضافة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/4030/4030fig2large.jpg" target="_blank">اضغط هنا لمشاهدتها بشكل اكبر شخصية</a> . <img alر = &quot;الشكل 3&quot; SRC = &quot;/ files/ftp_upload/4030/4030fig3.jpg&quot; /&gt; الشكل 3 حقن الممارسة: تم حقن الغدة الثديية مع صبغة عن طريق الحقن ينترادوكتال لاختبار دقة التسليم عن طريق الحلمة، حقن ماوس في يوم 21 من الرضاعة مع 100 ميكرولتر من صبغة زرقاء التريبان مخففة في برنامج تلفزيوني. بعد التضحية، تعرضت للغدة التصور. (A) حقن ناجحة و(B) البلعة من الصبغة في الحلمة.

<ol>
	<li>Everhart, M. B., Han, W., Sherrill, T. P., Arutiunov, M., Polosukhin, V. V., Burke, J. R., Sadikot, R. T., Christman, J. W., Yull, F. E., Blackwell, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Duration+and+intensity+of+NF-&#954;B+activity+determine+the+severity+of+endotoxin-induced+acute+lung+injury.">Duration and intensity of NF-&#954;B activity determine the severity of endotoxin-induced acute lung injury.</a> The Journal of Immunology. 176, 4995-5005 (2006).</li><li>Notebaert, S., Carlsen, H., Janssen, D., Vandenabeele, P., Blomhoff, R., Meyer, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+NF-&#206;&#186;B+activity+during+Escherichia+coli-induced+mammary+gland+infection.">In vivo imaging of NF-&#206;&#186;B activity during Escherichia coli-induced mammary gland infection.</a> Cellular Microbiology. 10, 1249-1258 (2008).</li><li>Elazar, S., Gonen, E., Livneh-Kol, A., Rosenshine, I., Shpigel, N. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+recruitment+in+endotoxin-induced+murine+mastitis+is+strictly+dependent+on+mammary+alveolar+macrophages.">Neutrophil recruitment in endotoxin-induced murine mastitis is strictly dependent on mammary alveolar macrophages.</a> Veterinary Research. 41, 10 (2010).</li><li>Connelly, L., Barham, W., Pigg, R., Sait-Jean, L., Sherrill, T., Cheng, D. S., Chodosh, L. A., Blackwell, T. S., Yull, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+nuclear+factor+kappaB+in+mammary+epithelium+promotes+milk+loss+during+mammary+development+and+infection.">Activation of nuclear factor kappaB in mammary epithelium promotes milk loss during mammary development and infection.</a> J. Cell. Physiol. 222, 73-81 (2010).</li><li>Yardeni, T., Eckhaus, M., Morris, H. D., Huizing, M., Hoogstraten-Miller, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retro-orbital+injections+in+mice.">Retro-orbital injections in mice.</a> Lab Animal. 40, 155-160 (2011).</li><li>Plante, I., Stewart, M. K., Laird, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+mammary+gland+development+and+function+in+mouse+models.">Evaluation of mammary gland development and function in mouse models.</a> J. Vis. Exp. (21), e2828 (2011).</li><li>Behbod, F., Kittrell, F. S., LaMarca, H., Edwards, D., Kerbawy, S., Heestand, J. C., Young, E., Mukhopadhyay, P., Yeh, H., Allred, D. C., Hu, M., Polyak, K., Rosen, J. M., Medina, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+intraductal+human-in-mouse+transplantation+model+mimics+the+subtypes+of+ductal+carcinoma+in+situ.">An intraductal human-in-mouse transplantation model mimics the subtypes of ductal carcinoma in situ.</a> Breast Cancer Research. 11, R66 (2009).</li><li>Zheng, J., Watson, A. D., Kerr, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome-wide+expression+analysis+of+lipopolysaccharide-induced+mastitis+in+a+mouse+model.">Genome-wide expression analysis of lipopolysaccharide-induced mastitis in a mouse model.</a> Infection and Immunity. 74, 1907-1915 (2006).</li><li>Nguyen, D., Beeman, N., Lewis, M., Schaack, J., Neville, M. C., Ip, M. M., Asch, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Intraductal Injection into the Mouse Mammary Gland. Methods in Mammary Gland Biology and Breast Cancer Research. , 259-270 (2000).</li><li>Lee, J. W., Paape, M. J., Zhao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recombinant+bovine+soluble+CD14+reduces+severity+of+experimental+Escherichia+coli+mastitis+in+mice.">Recombinant bovine soluble CD14 reduces severity of experimental Escherichia coli mastitis in mice.</a> Veterinary Research. 34, 307-316 (2003).</li><li>Elazar, S., Gonen, E., Livneh-Kol, A., Rosenshine, I., Shpigel, N. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+role+of+neutrophils+but+not+mammary+alveolar+macrophages+in+a+murine+model+of+acute+Escherichia+coli+mastitis.">Essential role of neutrophils but not mammary alveolar macrophages in a murine model of acute Escherichia coli mastitis.</a> Veterinary Research. 41, 53 (2010).</li><li>Bannerman, D. D., Paape, M. J., Hare, W. R., Sohn, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+levels+of+LPS-binding+protein+in+bovine+blood+and+milk+following+bacterial+lipopolysaccharide+challenge.">Increased levels of LPS-binding protein in bovine blood and milk following bacterial lipopolysaccharide challenge.</a> Journal of Dairy Science. 86, 3128-3137 (2003).</li><li>Gonen, E., Vallon-Eberhard, A., Elazar, S., Harmelin, A., Brenner, O., Rosenshine, I., Jung, S., Shpigel, N. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+receptor+4+is+needed+to+restrict+the+invasion+of+Escherichia+coli+P4+into+mammary+gland+epithelial+cells+in+a+murine+model+of+acute+mastitis.">Toll-like receptor 4 is needed to restrict the invasion of Escherichia coli P4 into mammary gland epithelial cells in a murine model of acute mastitis.</a> Cellular Microbiology. 9, 2826-2838 (2007).</li><li>Notebaert, S., Demon, D., Vanden Berghe, ., Vandenabeele, T., P, ., Meyer, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+mediators+in+Escherichia+coli-induced+mastitis+in+mice.">Inflammatory mediators in Escherichia coli-induced mastitis in mice.</a> Comparative Immunology, Microbiology, and Infectious Diseases. 31, 551-565 (2008).</li><li>Osterman, K. L., Rahm, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lactation+mastitis:+bacterial+cultivation+of+breast+milk+symptoms,+treatment,+and+outcome.">Lactation mastitis: bacterial cultivation of breast milk symptoms, treatment, and outcome.</a> Journal of Human Lactation. 16, 297-302 (2000).</li><li>Sordillo, L. M., Streicher, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammary+Gland+Immunity+and+Mastitis+Susceptibility.">Mammary Gland Immunity and Mastitis Susceptibility.</a> Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia. 7, 135-146 (2002).</li><li>Blackwell, T. S., Yull, F. E., Chen, C. L., Venkatakrishnan, A., Blackwell, T. R., Hicks, D. J., Lancaster, L. H., Christman, J. W., Kerr, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+genetically+altered+mice+to+investigate+the+role+of+nuclear+factor-kappa+B+activation+and+cytokine+gene+expression+in+sepsis-induced+ARDS.">Use of genetically altered mice to investigate the role of nuclear factor-kappa B activation and cytokine gene expression in sepsis-induced ARDS.</a> Chest. 116, 73S-74S (1999).</li><li>Stathopoulos, G. T., Sherrill, T. P., Cheng, D. S., Scoggins, R. M., Han, W., Polosukhin, V. V., Connelly, L., Yull, F. E., Fingleton, B., Blackwell, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epithelial+NF-kappaB+activation+promotes+urethane-induced+lung+carcinogenesis.">Epithelial NF-kappaB activation promotes urethane-induced lung carcinogenesis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 104, 18514-18519 (2007).</li><li>Blackwell, T. S., Hipps, A. N., Yamamoto, Y., Han, W., Barham, W. J., Ostrowski, M. C., Yull, F. E., Prince, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NF-&#954;B+signaling+in+fetal+lung+macrophages+disrupts+airway+morphogenesis.">NF-&#954;B signaling in fetal lung macrophages disrupts airway morphogenesis.</a> The Journal of Immunology. 187, 2740-2747 (2011).</li><li>Chiang, S. H., Bazuine, M., Lumeng, C. N., Geletka, L. M., Mowers, J., White, N. M., Ma, J. T., Zhou, J., Qi, N., Westscott, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+protein+kinase+IKKepsilon+regulates+energy+balance+in+obese+mice.">The protein kinase IKKepsilon regulates energy balance in obese mice.</a> Cell. 138, 961-975 (2009).</li><li>Singh, M. V., Kapoun, A., Higgins, L., Kutschke, W., Thurman, J. M., Zhang, R., Singh, M., Yang, J., Guan, X., Lowe, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ca2+/calmodulin-dependent+kinase+II+triggers+cell+membrane+injury+by+inducing+complement+factor+B+gene+expression+in+the+mouse+heart.">Ca2+/calmodulin-dependent kinase II triggers cell membrane injury by inducing complement factor B gene expression in the mouse heart.</a> The Journal of Clinical Investigation. 119, 986-996 (2009).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

هنا علينا الاستفادة من الماوس المعدلة وراثيا NF-كيلوبايت مراسل وتقنية الحقن الأمثل لالتهاب الضرع نموذج، والتهاب أنسجة الثدي الأكثر شيوعا التي تسببها العدوى البكتيرية. الخطوة الأكثر أهمية في هذا الإجراء هو حقن ينترادوكتال نفسها. ...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> عديد السكاريد الشحمي من الإشريكية القولونية (LPS) </td><td> سيجما </td><td> L 2880 </td><td> النمط المصلي 055: B5 </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Mediatech، وشركة </td><td> 46-013-CM </td><td></td></tr><tr><td> 31 حقنة الأنسولين المقياس </td><td> بيكتون ديكنسون </td><td> 328438 </td><td> إبرة قصيرة </td></tr><tr><td> ملقط الجراح </td><td> أدوات الدقة العالم </td><td> 15908 </td><td></td></tr><tr><td> تشريح نطاق </td><td> لايكا </td><td> M3Z </td><td></td></tr><tr><td> تيريل Isoflurane، USP </td><td> شركة النخبة للMINRAD آر إكس </td><td> NDC 66794-011-25 </td><td></td></tr><tr><td> IVIS نظام التصوير 200 &lt;/ TD&gt; <td> الفرجار (Xenogen سابقا) </td><td> N / A </td><td></td></tr><tr><td> حقنة للحقن وسيفيرين </td><td> بيكتون ديكنسون </td><td> 309597 </td><td> 1cc؛ 26G5 / 8 </td></tr><tr><td> D-وسيفيرين اليراع، الصوديوم مونوهيدرات الملح (وسيفيرين الركيزة) </td><td> الكيمياء والبيولوجيا Biosynth </td><td> L-8240 </td><td> تمييع إلى 10 ملغ / مل </td></tr></tbody></table>

intraductal injection of lps as a mouse model of mastitis: signaling visualized via an nf-&kappa;b reporter transgenic

النماذج الحيوانية من الأمراض التي تصيب البشر هي ضرورية من أجل دراسة مراحل بدقة تطور المرض وآليات المرتبطة بها، وفي نهاية المطاف، ما قبل السريرية لاختبار نماذج التدخلات. في هذه الأساليب، نحن تصف تقنية في عديد السكاريد الشحمي الذي (LPS) تحقن في الغدة الثديية المرضعات الماوس عن طريق الحلمة، التهاب الضرع بشكل فعال النمذجة، أو التهاب، الغدة. هذه النتائج في زيادة الإصابة محاكاة النووي كابا عامل إشارات (NF-كيلوبايت) B، تصور من خلال التصوير bioluminescent من الماوس NF-كيلوبايت مراسل وسيفيراز 1. كان هدفنا النهائي في تطوير هذه الأساليب لدراسة التهاب المرتبطة التهاب الضرع في الغدة المرضعات، والتي غالبا ما تتضمن احمرار، تورم، وتسلل خلية المناعة 2،3. ولذلك، كنا ندرك تماما أن شق أو أي نوع من جرح في الجلد، الحلمة، أو الغدة من أجل تقديم LPS يمكنلا يمكن استخدامها في طرقنا منذ النهج من شأنه أن يشوش على الأرجح للقراءة من الالتهاب. نحن المطلوب أيضا طريقة مباشرة إلى الأمام التي لا تتطلب صنعت خصيصا مرسومة باليد ماصات أو استخدام micromanipulators لعقد هذه الأدوات المتخصصة في المكان. وهكذا، عازمون على استخدام حقنة الأنسولين المتاحة تجاريا وكيل لحقن في القناة الثديية من الحلمة سليمة. وكان هذا الأسلوب ناجحا وسمح لنا لدراسة التهاب المرتبطة حقن LPS دون أي آثار إضافية مضافين من قبل عملية الحقن. وبالإضافة إلى ذلك، وهذه الطريقة تستخدم أيضا NF-كيلوبايت وسيفيراز مراسل المعدلة وراثيا الماوس وbioluminescent تكنولوجيا التصوير لتظهر بصريا وكميا زيادة NF-كيلوبايت إشارة داخل الغدة LPS حقن 4. هذه الأساليب هي التي تهم الباحثين من العديد من التخصصات الذين يرغبون في نموذج المرض داخل الغدة الثديية المرضعات، كما في نهاية المطاف، والتقنيةويمكن الاستفادة هنا وصف للحقن عدد من المواد، وعلى سبيل المثال لا LPS فقط.

Watch this Scientific Journal Video about Intraductal Injection of LPS as a Mouse Model of Mastitis: Signaling Visualized via an NF-ÎºB Reporter Transgenic at JoVE.com

Intraductal Injection of LPS as a Mouse Model of Mastitis: Signaling Visualized via an NF-&amp;kappa;B Reporter Transgenic

الموصوفة هنا هو أسلوب يتم فيه حقن عديد السكاريد الشحمي في الغدة الثديية المرضعات الماوس عن طريق الحلمة لمحاكاة التهاب الضرع، وهي حالة تسبب عادة عن طريق العدوى البكتيرية. تصور نتائج حقن عديد السكاريد الشحمي في زيادة عامل النووية كابا إشارات (NF-كيلوبايت) B، من خلال التصوير bioluminescent من الماوس NF-كيلوبايت مراسل وسيفيراز.

تصور اشارة عبر مراسل المعدلة وراثيا NF-كيلوبايت: حقن ينترادوكتال من LPS ونموذج الفأر من التهاب الضرع

Animal models of human disease are necessary in order to rigorously study stages of disease progression and associated mechanisms, and ultimately, as ...

intraductal-injection-lps-as-mouse-model-mastitis-signaling

Research

JoVE Journal

Medicine

Intraductal Injection of LPS as a Mouse Model of Mastitis: Signaling Visualized via an NF-&kappa;B Reporter Transgenic

19.1K Views.  Vanderbilt University Medical Center. الموصوفة هنا هو أسلوب يتم فيه حقن عديد السكاريد الشحمي في الغدة الثديية المرضعات الماوس عن طريق الحلمة لمحاكاة التهاب الضرع، وهي حالة تسبب عادة عن طريق العدوى البكتيرية. تصور نتائج حقن عديد السكاريد الشحمي في زيادة عامل النووية كابا إشارات (NF-كيلوبايت) B، من خلا?...

Video: Intraductal Injection of LPS as a Mouse Model of Mastitis: Signaling Visualized via an NF-&kappa;B Reporter Transgenic

Mouse Bladder Wall Injection

Mouse bladder wall injection is a useful technique to orthotopically study bladder phenomena, including stem cell, smooth muscle, and cancer biology. Before starting injections, the surgical area must be cleaned with soap and water and antiseptic solution. Surgical equipment must be sterilized before use and between each animal. Each mouse is placed under inhaled isoflurane anesthesia (2-5% for induction, 1-3% for maintenance) and its bladder exposed by making a midline abdominal incision with scissors. If the bladder is full, it is partially decompressed by gentle squeezing between two fingers. The cell suspension of interest is intramurally injected into the wall of the bladder dome using a 29 or 30 gauge needle and 1 cc or smaller syringe. The wound is then closed using wound clips and the mouse allowed to recover on a warming pad. Bladder wall injection is a delicate microsurgical technique that can be mastered with practice.

Mouse bladder wall injection is a useful approach to orthotopically study bladder stem cell and cancer biology. This delicate microsurgical method can be mastered with careful technique and practice.

حقن المثانة الماوس الجدار

Mouse bladder wall injection is a useful technique to orthotopically study bladder phenomena, including stem cell, smooth muscle, and cancer biology. ...

Initiation of Metastatic Breast Carcinoma by Targeting of the Ductal Epithelium with Adenovirus-Cre: A Novel Transgenic Mouse Model of Breast Cancer

Breast cancer is a heterogeneous disease involving complex cellular interactions between the developing tumor and immune system, eventually resulting in exponential tumor growth and metastasis to distal tissues and the collapse of anti-tumor immunity. Many useful animal models exist to study breast cancer, but none completely recapitulate the disease progression that occurs in humans. In order to gain a better understanding of the cellular interactions that result in the formation of latent metastasis and decreased survival, we have generated an inducible transgenic mouse model of YFP-expressing ductal carcinoma that develops after sexual maturity in immune-competent mice and is driven by consistent, endocrine-independent oncogene expression. Activation of YFP, ablation of p53, and expression of an oncogenic form of K-ras was achieved by the delivery of an adenovirus expressing Cre-recombinase into the mammary duct of sexually mature, virgin female mice. Tumors begin to appear 6 weeks after the initiation of oncogenic events. After tumors become apparent, they progress slowly for approximately two weeks before they begin to grow exponentially. After 7-8 weeks post-adenovirus injection, vasculature is observed connecting the tumor mass to distal lymph nodes, with eventual lymphovascular invasion of YFP+ tumor cells to the distal axillary lymph nodes. Infiltrating leukocyte populations are similar to those found in human breast carcinomas, including the presence of &#945;&#946; and &#947;&#948; T cells, macrophages and MDSCs. This unique model will facilitate the study of cellular and immunological mechanisms involved in latent metastasis and dormancy in addition to being useful for designing novel immunotherapeutic interventions to treat invasive breast cancer.

Activation of latent mutations with adenovirus-Cre into the mammary ductal system results in a clinically relevant metastatic breast cancer. Incorporation of a YFP promoter allows tracking of distal metastatic tumor cells. This model is useful to study latent metastasis, anti-tumor immunity, and for designing novel immunotherapies to treat breast cancer.

بدء النقيلي سرطان الثدي عن طريق استهداف ظهارة الأقنية مع اتش، لجنة المساواة العرقية: رواية المعدلة وراثيا نموذج الفأر من سرطان الثدي

Breast cancer is a heterogeneous disease involving complex cellular interactions between the developing tumor and immune system, eventually resulting in ...

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As such, primary or &#39;neuronal-like&#39; cell culture systems are commonly utilized. While&#160;these systems are relatively easy to work with, and are useful model systems in which various functional outcomes (such as cell death) can be readily quantified, the examined outcomes and pathways in cultured immature neurons (such as excitotoxicity-mediated cell death pathways) are not necessarily the same as those observed in mature brain, or in intact tissue. Therefore, there is the need to develop models in which cellular mechanisms in mature neural tissue can be examined. We have developed an in vitro technique that can be used to investigate a variety of molecular pathways in intact nervous tissue. The technique described herein utilizes rat cortical tissue, but this technique can be adapted to use tissue from a variety of species (such as mouse, rabbit, guinea pig, and chicken) or brain regions (for example, hippocampus, striatum, etc.). Additionally, a variety of stimulations/treatments can be used (for example, excitotoxic, administration of inhibitors, etc.). In conclusion, the brain slice model described herein can be used to examine a variety of molecular mechanisms involved in excitotoxicity-mediated brain injury.

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

We have developed a brain slice model which can be used to examine molecular mechanisms involved in excitotoxicity-mediated brain injury.&#160;This technique generates viable mature brain tissue and reduces animal numbers required for experimentation, whilst keeping the neuronal circuitry, cellular interactions, and postsynaptic compartments partly intact.

excitotoxic المواد تحفيز الدماغ باعتبارها Microslices<em&gt; في المختبر</em&gt; نموذج من السكتة الدماغية

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As ...

Development of an Alpha-synuclein Based Rat Model for Parkinson's Disease via Stereotactic Injection of a Recombinant Adeno-associated Viral Vector

In order to study the molecular pathways of Parkinson&#39;s disease (PD) and to develop novel therapeutic strategies, scientific investigators rely on animal models. The identification of PD-associated genes has led to the development of genetic PD models. Most transgenic &#945;-SYN mouse models develop gradual &#945;-SYN pathology but fail to display clear dopaminergic cell loss and dopamine-dependent behavioral deficits. This hurdle was overcome by direct targeting of the substantia nigra with viral vectors overexpressing PD-associated genes. Local gene delivery using viral vectors provides an attractive way to express transgenes in the central nervous system. Specific brain regions can be targeted (e.g. the substantia nigra), expression can be induced in the adult setting and high expression levels can be achieved. Further, different vector systems based on various viruses can be used. The protocol outlines all crucial steps to perform a viral vector injection in the substantia nigra of the rat to develop a viral vector-based alpha-synuclein animal model for Parkinson&#39;s disease.

Development of an Alpha-synuclein Based Rat Model for Parkinson&#039;s Disease via Stereotactic Injection of a Recombinant Adeno-associated Viral Vector

This manuscript describes how viral vector-mediated local gene delivery provides an attractive way to express transgenes in the central nervous system. The protocol outlines all crucial steps to perform a viral vector injection in the substantia nigra of the rat to develop a viral vector-based animal model for Parkinson's disease.

تطوير وبناء الجرذ نموذج ألفا synuclein لمرض باركنسون عن طريق حقن المجسم من النواقل الفيروسية المؤتلف المرتبطة الغدة

In order to study the molecular pathways of Parkinson&#39;s disease (PD) and to develop novel therapeutic strategies, scientific investigators rely on ...

Induction and Micro-CT Imaging of Cerebral Cavernous Malformations in Mouse Model

Mutations in the CCM1 (aka KRIT1), CCM2, or CCM3 (aka PDCD10) gene cause cerebral cavernous malformation (CCM) in humans. Mouse models of CCM disease have been established by tamoxifen induced deletion of Ccm genes in postnatal animals. These mouse models provide invaluable tools to investigate molecular mechanism and therapeutic approaches for CCM disease. An accurate and quantitative method to assess lesion burden and progression is essential to harness the full value of these animal models. Here, we demonstrate the induction of CCM disease in a mouse model and the use of the contrast enhanced X-ray micro computed tomography (micro-CT) method to measure CCM lesion burden in mouse brains. At postnatal day 1 (P1), we used 4-hydroxytamoxifen (4HT) to activate Cre recombinase activity from the Cdh5-CreErt2 transgene to cleave the floxed allele of Ccm2. CCM lesions in mouse brains were analyzed at P8. For micro-CT, iodine based Lugol&#39;s solution was used to enhance contrast in brain tissue. We have optimized the scan parameters and utilized a voxel dimension of 9.5 &#181;m, which lead to a minimum feature size of approximately 25 &#181;m. This resolution is sufficient to measure CCM lesion volume and number globally and accurately, and provide high-quality 3-D mapping of CCM lesions in mouse brains. This method enhances the value of the established mouse models to study the molecular basis and potential therapies for CCM and other cerebrovascular diseases.

This protocol demonstrates the induction of cerebral cavernous malformation disease in a mouse model and uses contrast enhanced micro computed tomography to measure lesion burden. This method enhances the value of established mouse models to study the molecular basis and potential therapies for cerebral cavernous malformation and other cerebrovascular diseases.

التعريفي والصغرى-CT تصوير التشوهات مجوف الدماغي في طراز الماوس

Mutations in the CCM1 (aka KRIT1), CCM2, or CCM3 (aka PDCD10) gene cause cerebral cavernous malformation (CCM) in humans. Mouse models of CCM disease have ...

Puncture-Induced Iris Neovascularization as a Mouse Model of Rubeosis Iridis

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant for targeting neovascular glaucoma, a sight-threatening complication of diabetic retinopathy. This method is based on the induction of iris vascular response by a series of self-sealing uveal punctures on BALB/c mice and takes advantage of the postpartum maturation of mouse ocular vasculature. Mouse pups undergo uveal punctures from postnatal day 12.5, when the pups naturally open their eyes, until postnatal day 24.5. Due to the transparency of the cornea, iris vasculature can be analyzed easily through time by noninvasive in vivo methods. Furthermore, the semitransparent iris of BALB/c mice can be flatmounted for detailed immunohistologic analysis with minimal non-specific background staining. In this model, angiogenesis is mainly driven by the inflammatory and plasminogen activating systems. The puncture-induced model is the first to induce iris neovascularization in small rodents, and has the advantage of allowing direct noninvasive in vivo analysis of the angiogenic process. Moreover, the model can be combined with angiogenic modulating substances, which highlights its potential in the study of angiogenesis with an in vivo perspective.

Iris neovascularization, a common complication of ischemic retinal disease, may lead to sight-threatening neovascular glaucoma. Here, we describe a murine protocol for inducing experimental iris neovascularization that may be used for noninvasive evaluation of angiogenesis-modulating substances.

نيوفاسكولاريزيشن آيريس المستحثة بثقب كنموذج الفأر من إيريديس روبيوسيس

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant ...

Oleic Acid-Injection in Pigs As a Model for Acute Respiratory Distress Syndrome

The acute respiratory distress syndrome is a relevant intensive care disease with an incidence ranging between 2.2% and 19% of intensive care unit patients. Despite treatment advances over the last decades, ARDS patients still suffer mortality rates between 35 and 40%. There is still a need for further research to improve the outcome of patients suffering from ARDS. One problem is that no single animal model can mimic the complex pathomechanism of the acute respiratory distress syndrome, but several models exist to study different parts of it. Oleic acid injection (OAI)-induced lung injury is a well-established model for studying ventilation strategies, lung mechanics and ventilation/perfusion distribution in animals. OAI leads to severely impaired gas exchange, deterioration of lung mechanics and disruption of the alveolo-capillary barrier. The disadvantage of this model is the controversial mechanistic relevance of this model and the necessity for central venous access, which is challenging especially in smaller animal models. In summary, OAI-induced lung injury leads to reproducible results in small and large animals and hence represents a well-suited model for studying ARDS. Nevertheless, further research is necessary to find a model that mimics all parts of ARDS and lacks the problems associated with the different models existing today.

In this article, we present a protocol to induce acute lung injury in pigs by central-venous injection of oleic acid. This is an established animal model for studying the acute respiratory distress syndrome (ARDS).

حقن حمض الأولييك في الخنازير كنموذج لمتلازمة الضائقة التنفسية الحادة

The acute respiratory distress syndrome is a relevant intensive care disease with an incidence ranging between 2.2% and 19% of intensive care unit ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

متساوي القياس كونتراكتيليتي القياس الشريان المساريقي العلوي الماوس باستخدام أسلاك ميوجرافي

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Murine Precision-Cut Liver Slices as an Ex Vivo Model of Liver Biology

Understanding the mechanisms of liver injury, hepatic fibrosis, and cirrhosis that underlie chronic liver diseases (i.e., viral hepatitis, non-alcoholic fatty liver disease, metabolic liver disease, and liver cancer) requires experimental manipulation of animal models and in vitro cell cultures. Both techniques have limitations, such as the requirement of large numbers of animals for in vivo manipulation. However, in vitro cell cultures do not reproduce the structure and function of the multicellular hepatic environment. The use of precision-cut liver slices is a technique in which uniform slices of viable mouse liver are maintained in laboratory tissue culture for experimental manipulation. This technique occupies an experimental niche that exists between animal studies and in vitro cell culture methods. The presented protocol describes a straightforward and reliable method to isolate and culture precision-cut liver slices from mice. As an application of this technique, ex vivo liver slices are treated with bile acids to simulate cholestatic liver injury and ultimately assess the mechanisms of hepatic fibrogenesis.

This protocol provides a simple and reliable method for the production of viable precision-cut liver slices from mice. The ex vivo tissue samples can be maintained under laboratory tissue culture conditions for multiple days, providing a flexible model to examine liver pathobiology.

المورين الدقة قطع شرائح الكبد كنموذج السابق فيفو بيولوجيا الكبد

Understanding the mechanisms of liver injury, hepatic fibrosis, and cirrhosis that underlie chronic liver diseases (i.e., viral hepatitis, non-alcoholic ...

A Mouse Model for Chronic Pancreatitis via Bile Duct TNBS Infusion

Chronic pancreatitis (CP) is a complex disease involving pancreatic inflammation and fibrosis, glandular atrophy, abdominal pain and other symptoms. Several rodent models have been developed to study CP, of which the bile duct 2,4,6 -trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) infusion model replicates the features of neuropathic pain seen in CP. However, bile duct drug infusion in mice is technically challenging. This protocol demonstrates the procedure of bile duct TNBS infusion for generation of a CP mouse model. TNBS was infused into the pancreas through the ampulla of Vater in the duodenum. This protocol optimized drug volume, surgical techniques, and drug handling during the procedure. TNBS-treated mice showed features of CP as reflected by bodyweight and pancreas weight reductions, changes in pain-associated behaviors, and abnormal pancreatic morphology. With these improvements, mortality associated with TNBS injection was minimal. This procedure is not only critical in generating pancreatic disease models but is also useful in local pancreatic drug delivery.

Chronic pancreatitis (CP) is a disease characterized by inflammation and fibrosis of the pancreas, often associated with intractable abdominal pain. This article focuses on refining the technique to generate a mouse model of CP via bile duct infusion with 2,4,6 -trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS).

نموذج الماوس لالتهاب البنكرياس المزمن عن طريق ضخ القناة الصفراوية TNBS

Chronic pancreatitis (CP) is a complex disease involving pancreatic inflammation and fibrosis, glandular atrophy, abdominal pain and other symptoms. ...