وجاء هذا المنشور الفيديو ممكن عن طريق تمويل من المعهد الوطني للسكري وأمراض الجهاز الهضمي والكلى (جوائز كبيرة) ل&quot;البيولوجيا المرضية للنظام المعوية&quot; مشروع برنامج منح DK 68055. وأيد كريستوفر T. Creedon من برنامج روشستر العامة توجيهي المدارس. نشكر السيد غاري ستولتز للمساعدة التقنية، والسيدة كريستي Zodrow للمساعدة السكرتارية والدكتور دوغلاس من باير لوس قطط البحوث، وشركة (ماونتن فيو، كاليفورنيا).

1. التدريب والتعويد من الفئران <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل التحليل، ووضع كل الفئران في غرف اختبار لمدة 2-4 ساعة مع تدفق الهواء المستمر من أجل روض لهم الظروف الاختبار. هذا يقلل بشكل ملحوظ من مستويات التوتر التي قد تسبب خلاف ذلك الكشف الشاذة من تأخر إفراغ المعدة. علاج الفئران بنفس الطريقة كما لو أن التجربة تم تشغيل إفراغ المعدة. إعداد صفار البيض (انظر كذلك) دون إضافة حمض الأوكتانويك وإطعام 0.2 جم لكل الماوس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر هذه العملية حتى يتم تدريب الفئران على نحو كاف (عادة 2-3 مرات). الفئران عادة ما اعتادوا بسهولة طالما يتم الاحتفاظ الظروف البيئية نفسها. </li></ol> ملاحظة: غير متعود الفئران مواصلة التحرك في جميع أنحاء لحوالي 1 ساعة بعد نقل إلى غرفة، والتبرز والتبول بشكل متكرر، في حين اعتادوا تسوية الفئران بسرعة في بيئتهم الجديدة وبقية بهدوء. لاالشركة المصرية للاتصالات: خلال التجربة: الحيوانات مراقبة لدلائل على فقدان التعود مثل كثرة التبول، التبرز، وعدم الاهتمام في تناول البيض. إذا كانت هذه هي الحالة إعادة النظر في التعود في غرفة فارغة 1-2 مرات قبل الحصول على البيانات المعدة إفراغ. الاتساق هو في غاية الأهمية أثناء القيام بهذه التجربة. فعل الأشياء بنفس الطريقة تماما في كل مرة هو السبيل الوحيد للحصول على نتائج موثوقة وقابلة للتكرار. وهذا يشمل إعطاء العلاج (مثل الأنسولين) كل يوم في نفس الوقت، لا يفصل بين الفئران من الاصحاب قفص الا للضرورة القصوى، صيام الفئران والبدء في اختبار إفراغ المعدة في نفس الوقت، والتعامل مع الفئران بنفس الطريقة. 2. إعداد وجبة تحتوي على النظير اختبار <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تبدأ وزنها إلى 5 غ من صفار البيض في أنبوب 50 مل الصقر. كرر هذه الخطوات كل يوم التجريبية لإعداد وجبة اختبار جديدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 10 ميكرولتر من حمض octanoic مع concentrأوجه من 2 ميكرولتر / ز إلى أنبوب 50 مل الصقر تحتوي على البيض ويخلط بقوة لمدة 1 دقيقة مع ملعقة في أنبوب الصقر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم نقل البويضة إلى كأس زجاجي وتسخن أكثر من ناسخ بنسن حتى يتخثر واتساقه هو مناسبة لجعل كرات صغيرة. هذا عادة ما يستغرق حوالي 30 ثانية. </li></ol> ملاحظة: كرات من صفار البيض يجب أن تزن 0.2 غرام في الماوس. هذا مهم للحفاظ على جرعة تراكمية مستمرة في جميع الفئران. 3. بدء التجربة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة مدربة وجاهزة للإفراغ المعدة، سرعة الفئران بين عشية وضحاها (12 ساعة) على رف معدني &quot;شبكة القاع&quot; الصيام لمنع أكل البراز. تأكد لديهم حرية الوصول إلى المياه الصالحة للشرب. منذ تستخدم الفئران من السكري في التجربة الحالية، لا ينبغي أن صام لأكثر من 16 ساعة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تبدأ من خلال إنشاء دوائر المعدة إفراغ. استخدام غرف نظيفة وأغطية التي كانت المجفف في الهواء. أيضا، أييجب أنابيب يربط بين الدوائر إلى محلل أو توريد الهواء 2 CO تكون خالية الرطوبة والمياه يمكن أن تتداخل مع إشارة قراءة من قبل محلل </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توصيل الدوائر إلى مدخل أنابيب التي توفر تدفق الهواء المستمر. ثم قم بتوصيل منفذ أنابيب من غرف إلى الجهاز. إغلاق أنابيب وتشغيل تدفق الهواء. </li></ol> ملاحظة: ضع كمية صغيرة جدا من الفازلين في نهاية الجفن غطاء حتى إغلاق بسهولة ومغلقة بإحكام. هذا الختم هو ضيق اللازمة لجمع كل ثاني أكسيد الكربون التي تنتجها الفئران. 4. إجراءات تجريبية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تبدأ بها كل وزنها الماوس. وزن الجسم هو مقياس لصحتهم جيدة مستمرة. ثم ضع الماوس في كل غرفة المناسبة. ومن المهم بطبيعة الحال أن الهواء المتدفقة إلى غرف في هذا الوقت. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لبدء القياس، والسماح للفئران حتى يتأقلم إلى غرف قبل ضبطجي مستويات الهواء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وبمجرد أن الفئران تظهر الهدوء، والتي قد يستغرق بضع دقائق، وضبط معدل تدفق الهواء لكل غرفة الماوس. وهذا قد يكون مختلفا عن كل الماوس. عادة، يتم ضبط تدفق الهواء في بداية التجربة للتأكد من أن الزفير CO 2 إلى مستويات يمكن كشفها بأي المعدات المستخدمة، والتأكد من أن مستوى يبقى منخفضة بما فيه الكفاية لضمان دوران الهواء صحية. نستخدم الأولية مستويات CO 2 بين 1،000 و 1،500 جزء في المليون. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا كان وجود صعوبة مع تعديلات، والتحقق من وجود تسرب الهواء. ثم كرر العملية لكل دائرة من الدوائر ومشاهدة لجولة أخرى من قياسات لمعرفة ما إذا التعديلات التي أدخلت على تدفق الهواء وتصحيح مستوى CO 2. من المهم للحصول على خط الأساس ثابت القراءة قبل إطعام الفئران. نستخدم جهاز مع ميزة معايرة الذاتي. يجب إذا لم يكن ذلك يتم فحص المعايرة القضية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عندما يتحقق هذا، وجبة البيض إدارةلأول مرة الماوس وسجل كل الماوس يتلقى الطعام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نحن تشغيل الإجراء لمدة 4 ساعة للحصول على ما يكفي من القيم لتركب ال 13 منحنى CO 2 لكل تخصيب الماوس. اطمئنان على الفئران كل دقيقة 30-60 للتأكد من أن مستويات CO 2 لا تزال آمنة للالفئران. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد صناديق جديدة تحتوي على المواد الغذائية قبل نهاية الاختبار لذلك يمكن البدء في تناول الفئران مباشرة بعد الاختبار قد انتهت. </li></ol>

<ol>
	<li>Yeung, C. K., McCurrie, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+to+investigate+the+inhibitory+effects+of+drugs+on+gastric+emptying+in+the+mouse+in+vivo.">A simple method to investigate the inhibitory effects of drugs on gastric emptying in the mouse in vivo.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 45, 235-240 (2001).</li><li>Osinski, M. A., Seifert, T. R., Cox, B. F., Gintant, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+method+of+evaluation+of+drug-evoked+changes+in+gastric+emptying+in+mice.">An improved method of evaluation of drug-evoked changes in gastric emptying in mice.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 47, 115-120 (2002).</li><li>Ghoos, Y. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+gastric+emptying+rate+of+solids+by+means+of+a+carbon-labeled+octanoic+acid+breath+test.">Measurement of gastric emptying rate of solids by means of a carbon-labeled octanoic acid breath test.</a> Gastroenterology. 104, 1640-1647 (1993).</li><li>Symonds, E., Butler, R., Omari, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+breath+tests+can+detect+alterations+in+gastric+emptying+in+the+mouse.">Noninvasive breath tests can detect alterations in gastric emptying in the mouse.</a> Eur. J. Clin. Invest. 32, 341-344 (2002).</li><li>Symonds, E. L., Butler, R. N., Omari, T. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+gastric+emptying+in+the+mouse+using+the+[13C]-octanoic+acid+breath+test.">Assessment of gastric emptying in the mouse using the [13C]-octanoic acid breath test.</a> Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 27, 671-675 (2000).</li><li>Verhulst, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+ghrelin+in+the+relationship+between+hyperphagia+and+accelerated+gastric+emptying+in+diabetic+mice.">Role of ghrelin in the relationship between hyperphagia and accelerated gastric emptying in diabetic mice.</a> Gastroenterology. 135, 1267-1276 (2008).</li><li>Schoonjans, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+13C-octanoic+acid+breath+test:+validation+of+a+new+noninvasive+method+of+measuring+gastric+emptying+in+rats.">The 13C-octanoic acid breath test: validation of a new noninvasive method of measuring gastric emptying in rats.</a> Neurogastroenterol. Motil. 14, 287-293 (2002).</li><li>Choi, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+gastric+emptying+in+nonobese+diabetic+mice.">Determination of gastric emptying in nonobese diabetic mice.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 293, 1039-1045 (2007).</li><li>Atkinson, M. A., Leiter, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+NOD+mouse+model+of+type+1+diabetes:+as+good+as+it+gets?.">The NOD mouse model of type 1 diabetes: as good as it gets?.</a> Nat. Med. 5, 601-604 (1999).</li><li>Camilleri, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+practice.+Diabetic+gastroparesis.">Clinical practice. Diabetic gastroparesis.</a> N. Engl. J. Med. 356, 820-829 (2007).</li><li>Choi, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heme+oxygenase-1+protects+interstitial+cells+of+Cajal+from+oxidative+stress+and+reverses+diabetic+gastroparesis.">Heme oxygenase-1 protects interstitial cells of Cajal from oxidative stress and reverses diabetic gastroparesis.</a> Gastroenterology. 135, 2055-2064 (2008).</li><li>Kashyap, P. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carbon+monoxide+reverses+diabetic+gastroparesis+in+NOD+mice.">Carbon monoxide reverses diabetic gastroparesis in NOD mice.</a> Am. J. Physiol. GI. G298, G1013-G1019 (2010).</li></ol>

الكتاب تعلن أنه ليس لديهم المصالح المتنافسة المالية.

هذه التقنية تسمح صفها هنا للالمتكررة وغير الغازية في قياس الجسم الحي من إفراغ المعدة الصلبة في الفئران. هذا النظام له ميزة أنه لا تقييد الحيوانات في غرفة القياس، والسماح لهم للتحرك وتحويل بحرية. حيث أن هذه هي بيئة غير مألوفة، والفئران لا تزال بحاجة إلى تدري?...

يصف هذا المخطوط الاعتبارات التقنية والمنهجية المشاركة في غير الغازية قياس إفراغ المعدة في الفئران. باتباع بروتوكول الموصوفة هنا، يمكن المحققين موثوق وبتكاثر متابعة التغيرات في المعدة إفراغ بسبب تطور المرض، ودراسة تأثير العوامل الدوائية على إفراغ المعدة واتبع رد إفراغ المعدة لعلاج الأمراض أو العيوب الكامنة 6،8، 11،12. في المنشورات السابقة، وتطبيق 13 C وأظهرت الاختبارات التنفس حمض octanoic ليكون وسيلة مفيدة لقياس إفراغ المعدة في الإنسان والحيوان 3،8. وتصف هذه الورقة بالتفصيل، الإجراءات اللازمة للحصول على بيانات موثوق بها على مدى 8 6 إلى اللازمة لإجراء دراسة طولية من إفراغ المعدة في الفئران المصابين بداء السكري أشهر. مزايا هذا البروتوكول بعد بالمقارنة مع الأساليب التي تم نشرها مسبقا هي التي يمكن أكدت للمحقق obtaine البياناتسوف تكون موثوقة ود استنساخه. وبالإضافة إلى ذلك، فإن النظام الآلي لجمع وتحليل عينات الغاز الموصوفة هنا يزيد من عدد الحيوانات التي يمكن اتباعها في وقت واحد في الدراسة. وعموما، فإن الهدف من هذه الورقة هو تحديد العوامل الرئيسية التي تحافظ على التعود من الفئران لاختبار والتي تقلل من التباين في النتائج التي تم الحصول عليها. لفي قياس الجسم الحي من إفراغ المعدة، وصام بين عشية وضحاها الفئران ووضعها في غرف اختبار تدفق الهواء مع بلاستيكية شفافة ثابتة. بعد الحصول على اعتادوا على الفئران إلى أنابيب، خط الأساس الزفير 13 CO يتم تحديد 2 مستويات تدفق الهواء وتعديلها وفقا لذلك. المقبل، ونحن إدارة وجبة تتكون من اختبار صفار البيض مختلطة مع 13 حمض octanoic C-المسمى. لأن الفئران صام وتدريبهم، وأنهم يأكلون وجبة الاختبار عموما داخل 2 دقيقة. لا يمتص في إدارة حمض octanoic في المعدة ولكن سيتم تناولها في الاثني عشر علىسوف تحصل على استقلاب في الكبد د إلى 13 CO 2، الذي صدر والزفير، مما أسفر عن تخصيب من 13 CO 2 في الهواء المحيط. يتم جمع عينات من الهواء في فترات زمنية محددة ويتم تحليلها من قبل محلل الكربون النظير. معدل منظم للخطوة في هذه العملية كلها هو إفراغ المعدة وإفراز الرئوي من 13 CO 2 يتوافق مباشرة مع إفراغ المعدة من وجبة المسمى. <img src="/files/ftp_upload/50301/50301fig1.jpg" alt="الشكل 1" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50301/50301fig1highres.jpg"/> الشكل 1. التخطيطي لجهاز إفراغ المعدة. بعد الصيام بين عشية وضحاها، وضعت الفئران في غرف شفافة تسمح لهم بالانتقال وتحويل بحرية. مدخل أنبوب يسمح الطازجة ومستمر تدفق الهواء ومنفذا يؤدي إلى محلل لقياس النظائر 13 C-إلى-12الزفير C نسبة في التنفس. الدائرة لديها أيضا ميناء مركزي لتسليم الأغذية التي تحتوي على [13 C]-الأوكتانويك الحمض.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم </td><td> COMPANY </td><td> CAT رقم </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> وقال مصدر من تدفق مستمر والهواء الإمداد وكذلك تكوين </td><td> المركزية العرض الجوي في منشأة بحثية </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 130 غرفة أخذ العينات مل يحتوي على مدخل الهواء، منفذ الهواء، والغذاء افتتاح الإدارة البلاستيك أنابيب لتوريد الهواء </td><td> في منزل بني </td><td></td><td></td></tr><tr><td> حمض octanoic </td><td> كامبريدج النظائر مختبرات (اندوفر، MA) </td><td> CLM-293-1 </td><td></td></tr><tr><td> لإعداد وجبة البيض: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دورق صغير </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 50 مل أنبوب من البلاستيك </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بنسن الموقد </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بيضة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ملعقة الصيدلي </li></ul></td><td> أي مورد </td><td></td><td> محاولةأن تكون متسقة مع المورد البيض منذ المحتوى الغذائي واستساغة من البيض يمكن أن تؤثر على ابتلاع والمعدة إفراغ وجبة </td></tr><tr><td> محلل ثاني أكسيد الكربون النظير </td><td> لوس جاتوس مؤسسة بحوث (ماونتن فيو، كاليفورنيا) </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

assessment of gastric emptying in non-obese diabetic mice using a [13c]-octanoic acid breath test

واقتصرت الدراسات المعدة في الفئران عن طريق إفراغ عدم القدرة على تتبع التغيرات إفراغ المعدة في نفس الحيوان منذ أكثر التقنيات استخداما تتطلب قتل الحيوانات والانتعاش بعد الوفاة من 1،2 جبة. يمنع هذا النهج الدراسات الطولية لتحديد التغيرات في إفراغ المعدة مع التقدم في السن وتطور المرض. ويشيع استخدام [13 C]-الأوكتانويك تم تعديل حمض اختبار التنفس للبشر 3 للاستخدام في الفئران الفئران 4-6 و 7 و أظهرنا سابقا أن هذا الاختبار هو موثوق بها وتستجيب للتغيرات في إفراغ المعدة في الاستجابة للأدوية وخلال تطور المرض السكري 8. في هذا الفيديو عرض وشرح المبدأ والتطبيق العملي لهذا الاختبار تم تعديلها. كما هو الحال في الدراسة السابقة، يتم استخدام NOD الفئران LtJ، وهذا نموذج من مرض السكري نوع 1 9. وهناك نسبة من هذه الفئران أعراض تطوير خزل المعدة، ومضاعفات diabetتتميز ES من تأخر إفراغ المعدة دون عرقلة الميكانيكية المعدة 10. هذه الورقة يوضح كيفية تدريب الفئران لاختبار، وكيفية إعداد وجبة الاختبار والحصول على البيانات المعدة 4 ساعات تفريغ وكيفية تحليل البيانات التي تم الحصول عليها. محلل نظائر الكربون المستخدمة في هذه الدراسة مناسبة لأخذ العينات التلقائي للعينات الهواء من الفئران تصل إلى 12 في نفس الوقت. هذه التقنية تسمح للالطولية متابعة إفراغ المعدة من أكبر مجموعات من الفئران المصابين بداء السكري أو غيره من الأمراض طويلة الأمد.

ويرد ممثل تعيين البيانات من ثلاثة الفئران مختلفة في الشكل 2. الرسم البياني الأسود يمثل نقطة البيانات من الماوس العادي مع إفراغ المعدة. ويعرض جزء من 13 C التي يتم استردادها في الهواء الزفير معبرا عنها كنسبة مئوية من الجرعة المعطاة للساعة الواحدة أعرب بوص?...

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Gastric Emptying in Non-obese Diabetic Mice Using a [13C]-octanoic Acid Breath Test at JoVE.com

Assessment of Gastric Emptying in Non-obese Diabetic Mice Using a [13C]-octanoic Acid Breath Test

تحديد إفراغ المعدة مع الغازية غير [<sup&gt; 13</sup&gt; C]-الأوكتانويك حمض اختبار التنفس لتتبع خزل المعدة في الفئران الإناث NOD LtJ.

تقييم إفراغ المعدة في الفئران من السكري غير البدناء باستخدام [<sup&gt; 13</sup&gt; C]-الأوكتانويك اختبار التنفس حمض

Gastric emptying studies in mice have been limited by the inability to follow gastric emptying changes in the same animal since the most commonly used ...

assessment-gastric-emptying-non-obese-diabetic-mice-using-13c

Research

JoVE Journal

Medicine

Assessment of Gastric Emptying in Non-obese Diabetic Mice Using a [13C]-octanoic Acid Breath Test

13.5K Views.  Mayo Clinic. تحديد إفراغ المعدة مع الغازية غير [ 13 C]-الأوكتانويك حمض اختبار التنفس لتتبع خزل المعدة في الفئران الإناث NOD LtJ.

Video: Assessment of Gastric Emptying in Non-obese Diabetic Mice Using a [13C]-octanoic Acid Breath Test

Making Sense of Listening: The IMAP Test Battery

The ability to hear is only the first step towards making sense of the range of information contained in an auditory signal. Of equal importance are the abilities to extract and use the information encoded in the auditory signal. We refer to these as listening skills (or auditory processing AP). Deficits in these skills are associated with delayed language and literacy development, though the nature of the relevant deficits and their causal connection with these delays is hotly debated.
When a child is referred to a health professional with normal hearing and unexplained difficulties in listening, or associated delays in language or literacy development, they should ideally be assessed with a combination of psychoacoustic (AP) tests, suitable for children and for use in a clinic, together with cognitive tests to measure attention, working memory, IQ, and language skills. Such a detailed examination needs to be relatively short and within the technical capability of any suitably qualified professional. Current tests for the presence of AP deficits tend to be poorly constructed and inadequately validated within the normal population. They have little or no reference to the presenting symptoms of the child, and typically include a linguistic component. Poor performance may thus reflect problems with language rather than with AP. To assist in the assessment of children with listening difficulties, pediatric audiologists need a single, standardized child-appropriate test battery based on the use of language-free stimuli.
We present the IMAP test battery which was developed at the MRC Institute of Hearing Research to supplement tests currently used to investigate cases of suspected AP deficits. IMAP assesses a range of relevant auditory and cognitive skills and takes about one hour to complete. It has been standardized in 1500 normally-hearing children from across the UK, aged 6-11 years. Since its development, it has been successfully used in a number of large scale studies both in the UK and the USA. IMAP provides measures for separating out sensory from cognitive contributions to hearing. It further limits confounds due to procedural effects by presenting tests in a child-friendly game-format. Stimulus-generation, management of test protocols and control of test presentation is mediated by the IHR-STAR software platform. This provides a standardized methodology for a range of applications and ensures replicable procedures across testers. IHR-STAR provides a flexible, user-programmable environment that currently has additional applications for hearing screening, mapping cochlear implant electrodes, and academic research or teaching.

A test battery (IMAP) for performing an in-depth assessment of auditory and cognitive abilities contributing to listening skills is described. It is quick to administer, child-friendly and free from linguistic confounds. Stimulus generation and protocol management are controlled via a software platform (IHR-STAR) to ensure replicable procedures.

جعل الشعور الاستماع : البطارية اختبار IMAP

The ability to hear is only the first step towards making sense of the range of information contained in an auditory signal. Of equal importance are the ...

Fast and Accurate Exhaled Breath Ammonia Measurement

This exhaled breath ammonia method uses a fast and highly sensitive spectroscopic method known as quartz enhanced photoacoustic spectroscopy (QEPAS) that uses a quantum cascade based laser. The monitor is coupled to a sampler that measures mouth pressure and carbon dioxide. The system is temperature controlled and specifically designed to address the reactivity of this compound. The sampler provides immediate feedback to the subject and the technician on the quality of the breath effort. Together with the quick response time of the monitor, this system is capable of accurately measuring exhaled breath ammonia representative of deep lung systemic levels. 
Because the system is easy to use and produces real time results, it has enabled experiments to identify factors that influence measurements. For example, mouth rinse and oral pH reproducibly and significantly affect results and therefore must be controlled. Temperature and mode of breathing are other examples. As our understanding of these factors evolves, error is reduced, and clinical studies become more meaningful. This system is very reliable and individual measurements are inexpensive. 
The sampler is relatively inexpensive and quite portable, but the monitor is neither. This limits options for some clinical studies and provides rational for future innovations.

Ammonia is an important physiologic metabolite relevant to various disease and wellness states. It is also a difficult molecule to measure in breath, which demands particular precautions be taken to obtain accurate results. Not all factors influencing ammonia are known, but progress can be difficult without accounting for these factors.

بسرعة ودقة مزفور التنفس قياس الأمونيا

This exhaled breath ammonia method uses a fast and highly sensitive spectroscopic method known as quartz enhanced photoacoustic spectroscopy (QEPAS) that ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute respiratory distress syndrome (ARDS), characterized by neutrophilic alveolitis, and injury to both alveolar epithelium and vascular endothelium. Clinically, ARDS is defined by acute onset of hypoxemia, bilateral patchy pulmonary infiltrates and non-cardiogenic pulmonary edema. Human studies have provided us with valuable information about the physiological and inflammatory changes in the lung caused by ARDS, which has led to various hypotheses about the underling mechanisms. Unfortunately, difficulties determining the etiology of ARDS, as well as a wide range of pathophysiology have resulted in a lack of critical information that could be useful in developing therapeutic strategies.
Translational animal models are valuable when their pathogenesis and pathophysiology accurately reproduce a concept proven in both in vitro and clinical settings. Although large animal models (e.g., sheep) share characteristics of the anatomy of human trachea-bronchial tree, murine models provide a host of other advantages including: low cost; short reproductive cycle lending itself to greater data acquisition; a well understood immunologic system; and a well characterized genome leading to the availability of a variety of gene deletion and transgenic strains. A robust model of low pH induced ARDS requires a murine ALI that targets mainly the alveolar epithelium, secondarily the vascular endothelium, as well as the small airways leading to the alveoli. Furthermore, a reproducible injury with wide differences between different injurious and non-injurious insults is important.
The murine gastric acid aspiration model presented here using hydrochloric acid employs an open tracheostomy and recreates a pathogenic scenario that reproduces the low pH pneumonitis injury in humans. Additionally, this model can be used to examine interaction of a low pH insult with other pulmonary injurious entities (e.g., food particles, pathogenic bacteria).

This protocol induces acute lung injury in a mouse that has close fidelity to the pathogenesis of acid pneumonitis observed in humans. We generate a maximal acute nonlethal low pH lung injury and account for differences in rodent-human anatomic respiratory structure using an open tracheostomy coupled with circumferential pressure release.

فتح القصبة الهوائية المعدة حمض الطموح فأري موديل الحاد الرئة إصابة النتائج في القصوى الحاد غير قاتل الرئة الإصابات

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

A Blood-based Test for the Detection of ROS1 and RET Fusion Transcripts from Circulating Ribonucleic Acid Using Digital Polymerase Chain Reaction

We have developed novel methods for the isolation and characterization of tumor-derived circulating ribonucleic acid (cRNA) for blood-based liquid biopsy. Robust detection of cRNA recovered from blood represents a solution to a critical unmet need in clinical diagnostics. The test begins with the collection of whole blood into blood collection tubes containing preservatives that stabilize cRNA. Cell-free, exosomal, and platelet-associated RNA is isolated from plasma in this test system. The cRNA is reverse transcribed to complementary DNA (cDNA) and amplified using digital polymerase chain reaction (dPCR). Samples are evaluated for both the target biomarker as well as a control gene. Test validation included limit of detection, accuracy, and robustness studies with analytic samples. The method developed as a result of these studies reproducibly detect multiple fusion variants for ROS1 (C-Ros proto-oncogene 1; 8 variants) and RET (rearranged during transfection proto-oncogene; 8 variants). The sample processing workflow has been optimized so that test results can consistently be generated within 72 hours of sample receipt.

Detection of circulating ribonucleic acid (cRNA) from blood is an unmet need in clinical diagnostics. Here we describe methods that characterize cRNA from non-small cell lung cancer patients using sensitive and specific digital polymerase chain reaction. The tests meet design requirements to detect fusion variants within 72 hours.

الدم على أساس اختبار للكشف عن ROS1 و RET المستنسخات الانصهار من تعميم الحمض النووي الريبي استخدام الرقمية تفاعل البوليميراز المتسلسل

We have developed novel methods for the isolation and characterization of tumor-derived circulating ribonucleic acid (cRNA) for blood-based liquid biopsy. ...

Protocol to Create Chronic Wounds in Diabetic Mice

Chronic wounds develop as a result of defective regulation in one or more complex cellular and molecular processes involved in proper healing. They impact ~6.5M people and cost ~$40B/year in the US alone. Although a significant effort has been invested in understanding how chronic wounds develop in humans, fundamental questions remain unanswered. Recently, we developed a novel mouse model for diabetic chronic wounds that have many characteristics of human chronic wounds. Using db/db-/- mice, we can generate chronic wounds by inducing high levels of oxidative stress (OS) in the wound tissue immediately after wounding, using a one-time treatment with inhibitors specific to the antioxidant enzymes catalase and glutathione peroxidase. These wounds have high levels of OS, develop biofilm naturally, become fully chronic within 20 days after treatment and can remain open more for more than 60 days. This novel model has many features of diabetic chronic wounds in humans and therefore can contribute significantly to advancing fundamental understanding of how wounds become chronic. This is a major breakthrough because chronic wounds in humans cause significant pain and distress to patients and result in amputation if unresolved. Moreover, these wounds are very expensive and time-consuming to treat, and lead to significant loss of personal income to patients. Advancements in this field of study through the use of our chronic wound model can significantly improve health care for millions who suffer under this debilitating condition. In this protocol, we describe in great detail the procedure to cause acute wounds to become chronic, which has not been done before.

Chronic wounds are developed from acute wounds on a diabetic mouse model by inducing high levels of oxidative stress after a full-thickness cutaneous wound. The wound is treated with inhibitors for catalase and glutathione peroxidase, resulting in impaired healing and biofilm development by bacteria present in the skin microbiome.

بروتوكول لخلق الجروح المزمنة في الفئران السكري

Chronic wounds develop as a result of defective regulation in one or more complex cellular and molecular processes involved in proper healing. They impact ...

Non-invasive Assessment of Dorsiflexor Muscle Function in Mice

Assessment of skeletal muscle contractile function is an important measurement for both clinical and research purposes. Numerous conditions can negatively affect skeletal muscle. This can result in a loss of muscle mass (atrophy) and/or loss of muscle quality (reduced force per unit of muscle mass), both of which are prevalent in chronic disease, muscle-specific disease, immobilization, and aging (sarcopenia). Skeletal muscle function in animals can be evaluated by a range of different tests. All tests have limitations related to the physiological testing environment, and the selection of a specific test often depends on the nature of the experiments. Here, we describe an in vivo, non-invasive technique involving a helpful and easy assessment of force frequency-curve (FFC) in mice that can be performed on the same animal over time. This permits monitoring of disease progression and/or efficacy&#160;of a potential therapeutic treatment.

Measurement of rodent skeletal muscle contractile function is a useful tool that can be used to track disease progression as well as efficacy of therapeutic intervention. We describe here the non-invasive, in vivo assessment of the dorsiflexor muscles that can be repeated over time in the same mouse.

تقييم غير الغازية لوظيفة العضلات دورسيفليكسور في الفئران

Assessment of skeletal muscle contractile function is an important measurement for both clinical and research purposes. Numerous conditions can negatively ...

Using a Chemical Biopsy for Graft Quality Assessment

Kidney transplantation is a life-saving treatment for a large number of people with end-stage renal dysfunction worldwide. The procedure is associated with an increased survival rate and greater quality of patient&#8217;s life when compared to conventional dialysis. Regrettably, transplantology suffers from a lack of reliable methods for organ quality assessment. Standard diagnostic techniques are limited to macroscopic appearance inspection or invasive tissue biopsy, which do not provide comprehensive information about the graft. The proposed protocol aims to introduce solid phase microextraction (SPME) as an ideal analytical method for comprehensive metabolomics and lipidomic analysis of all low molecular compounds present in kidneys allocated for transplantation. The small size of the SPME probe enables performance of a chemical biopsy, which enables extraction of metabolites directly from the organ without any tissue collection. The minimum invasiveness of the method permits execution of multiple analyses over time: directly after organ harvesting, during its preservation, and immediately after revascularization at the recipient&#8217;s body. It is hypothesized that the combination of this novel sampling method with a high-resolution mass spectrometer will allow for discrimination of a set of characteristic compounds that could serve as biological markers of graft quality and indicators of possible development of organ dysfunction.

The protocol presents utilization of the chemical biopsy approach followed by comprehensive metabolomic and lipidomic analysis for quality assessment of kidney grafts allocated for transplantation.

استخدام خزعة كيميائية لتقييم جودة الكسب غير المشروع

Kidney transplantation is a life-saving treatment for a large number of people with end-stage renal dysfunction worldwide. The procedure is associated ...

A Protocol for Roux-en-Y Gastric Bypass in Rats using Linear Staplers

Roux-en-Y gastric bypass (RYGB) is commonly performed for the treatment of severe obesity and type 2 diabetes. However, the mechanism of weight loss and metabolic changes are not well understood. Multiple factors are thought to play a role, including reduced caloric intake, decreased nutrient absorption, increased satiety, the release of satiety-promoting hormones, shifts in bile acid metabolism, and alterations in the gut microbiota.
The rat RYGB model presents an ideal framework to study these mechanisms. Prior work on mouse models have had high mortality rates, ranging from 17 to 52%, limiting their adoption. Rat models demonstrate more physiologic reserve to surgical stimulus and are technically easier to adopt as they allow for the use of surgical staplers. One challenge with surgical staplers, however, is that they often leave a large gastric pouch which is not representative of RYGB in humans. 
In this protocol, we present a RYGB protocol in rats that result in a small gastric pouch using surgical staplers. Utilizing two stapler fires which remove the forestomach of the rat, we obtain a smaller gastric pouch similar to that following a typical human RYGB. Surgical stapling also results in better hemostasis than sharp division. Additionally, the forestomach of the rat does not contain any glands and its removal should not alter the physiology of RYGB.
Weight loss and metabolic changes in the RYGB cohort were significant compared to the sham cohort, with significantly lower glucose tolerance at 14 weeks. Furthermore, this protocol has an excellent survival of 88.9% after RYGB. The skills described in this protocol can be acquired without previous microsurgical experience. Once mastered, this procedure will provide a reproducible tool for studying the mechanisms and effects of RYGB.

Roux-en-Y gastric bypass (RYGB) is performed to treat obesity and diabetes. However, the mechanisms underlying RYGB's efficacy are not fully understood, and studies are limited by technical difficulty leading to high mortality in animal models. This article provides instructions on how to perform RYGB in rats with high success rates.

بروتوكول لتجاوز المعدة رو أون ص في الفئران باستخدام الدبابيس الخطية

Roux-en-Y gastric bypass (RYGB) is commonly performed for the treatment of severe obesity and type 2 diabetes. However, the mechanism of weight loss and ...

Providing Visual Biofeedback Using Brightness Mode Ultrasound During a Golf Swing

Using ultrasound biofeedback in conjunction with verbal cueing can increase muscle thickness more than verbal cueing alone and may augment traditional rehabilitation techniques in an athletic, physically active population. Brightness mode (B-mode) ultrasound can be applied using frame-by-frame analysis synchronized with video to understand muscle thickness changes during these dynamic tasks. Visual biofeedback with ultrasound has been established in static positions for the muscles of the lateral abdominal wall. However, by securing the transducer to the abdomen using an elastic belt and foam block, biofeedback can be applied during more specific tasks prevalent in lifetime sports, such as golf. To analyze muscle activity during a golf swing, muscle thickness changes can be compared. The thickness must increase throughout the task, indicating that the muscle is more active. This methodology allows clinicians to immediately replay ultrasound videos for patients as a visual tool to instruct proper activity of the muscles of interest. For example, ultrasound can be used to target the external and internal obliques, which play an important role in swinging a golf club or any other rotational sport or activity. This methodology aims to increase oblique muscle thickness during the golf swing. Additionally, the timing of muscle contraction can be targeted by instructing the patient to contract the abdominal muscles at specific time points, such as the beginning of the downswing, with the goal of improving muscle firing patterns during tasks.

Brightness mode ultrasound can be used to provide visual biofeedback of the muscles of the lateral abdominal wall during a golf swing. Post-swing visual and verbal instruction can increase the muscle activation and timing of the external and internal obliques.

توفير الارتجاع البيولوجي البصري باستخدام الموجات فوق الصوتية لوضع السطوع أثناء تأرجح الجولف

Using ultrasound biofeedback in conjunction with verbal cueing can increase muscle thickness more than verbal cueing alone and may augment traditional ...

تقييم الاحتياطي السنخي الشعري الرئوي أثناء التمرين

Dual Test Gas Pulmonary Diffusing Capacity Measurement During Exercise in Humans Using the Single-Breath Method

The combined single-breath measurement of the diffusing capacity of carbon monoxide (DL,CO) and nitric oxide (DL,NO) is a useful technique to measure pulmonary alveolar-capillary reserve in both healthy and patient populations. The measurement provides an estimate of the participant&#39;s ability to recruit and distend pulmonary capillaries. The method has recently been reported to exhibit a high test-retest reliability in healthy volunteers during exercise of light to moderate intensity. Of note, this technique permits up to 12 repeated maneuvers and only requires a single breath with a relatively short breath-hold time of 5 s. Representative data are provided showing the gradual changes in DL,NO and DL,CO from rest to exercise at increasing intensities&#160;of up to 60% of maximal workload. The measurement of diffusing capacity and evaluation of alveolar-capillary reserve is a useful tool to evaluate the lung&#39;s ability to respond to exercise both in the healthy population as well as in patient populations such as those with chronic lung disease.

تسليط الضوء على المؤلف: دمج قياسات الاحتياطي السنخي الشعري في التكيف مع التمارين والاستراتيجيات العلاجية

This protocol presents a method to assess pulmonary alveolar-capillary reserve measured by combined single-breath measurement of the diffusing capacity to carbon monoxide (DL,CO) and nitric oxide (DL,NO) during exercise. Assumptions and recommendations for using the technique during exercise form the foundation of this article.

اختبار مزدوج لقياس قدرة انتشار الغاز الرئوي أثناء التمرين في البشر باستخدام طريقة التنفس الواحد

The combined single-breath measurement of the diffusing capacity of carbon monoxide (DL,CO) and nitric oxide (DL,NO) is a useful technique to measure ...