نعترف الدكاترة. كاميلو Ricordi، Pileggi انتونيلو، R. Molano داماريس، Speier ستيفان ودانيال Nyqvist لإجراء مناقشات مثمرة. نشكر أيضا Eleut هرنانديز ودييجو اسبينوزا-Heidmann للمساعدة التقنية، ومايك فالديز وفورموسو مارجريت للمساعدة في تسجيل الفيديو. سجلت بايرون مالدونادو، تحرير، وإنتاج الفيديو النهائي. وقدم الدعم من قبل مؤسسة البحوث معهد بحوث السكري ( <a href="http://www.DiabetesResearch.org" target="_blank">www.DiabetesResearch.org</a> )، والمعاهد الوطنية للصحة / NIDDK / NIAID (F32DK083226 لMHA؛ NIH RO3DK075487 لAC؛ U01DK089538 لPO.B.). وقدم دعم إضافي من خلال البحوث لPO.B الأموال من معهد كارولينسكا، ومجلس البحوث السويدية ومؤسسة مرض السكري السويدية ومؤسسة الأسرة مؤسسة Erling-بيرسون، وكنوت الأسرة وأليس النبرغ، ومؤسسة التأمين سكانديا المحدودة، VIBRANT ( FP7-228933-2)، وبرنامج البحوث الاستراتيجية في مرض السكري في انست كارولينسكاitutet، ومؤسسة نوفو نورديسك، ومؤسسة فون للرصيف Kantzow.

يتم تنفيذ الإجراء التالي تحت المجسام في 2 خطوات، الخطوة الأولى تنطوي تحميل الجزر في قنية والخطوة الثانية هي زرع الفعلية في ACE. تمت الموافقة على جميع الإجراءات التي أجريت على الحيوانات عن طريق رعاية الحيوان واللجنة المؤسسية الاستخدام (IACUC) من جامعة ميامي. 1. تحميل الفشوت في قنية لزراعة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مركز الجزر في صحن الثقافة من خلال الدوران في حلقة مفرغة الطبق تضييق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فصل قنية من &quot;خزان&quot; ووضع قنية وأنابيب يربط على سطح نظيف. ويمكن إجراء الخزان من أصل 300 ميكرولتر المتاح تلميح ماصة بلاستيكية بدون فلتر (الشكل 1A). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> طرد فقاعات الهواء من الخزان لضمان تيار مستمر من الجزر عندما الشفط في الخزان. بيغ الخزان ويتم ذلك من قبل القيادة إلى الأمام أيدي خالية الآلية حقنة سائق باستخدام دواسة القدم(1B الشكل، ج). وهذا سيجعل أيضا في الفضاء الحقنة للسماح تطلع الجزر في المكمن (محملة مسبقا مع محلول معقم المالحة مثل وسائل الإعلام، أو الثقافة PBS). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نضح بلطف المبلغ المطلوب من الجزر في المكمن. سوف تميل إلى دوامة الجزر لأنها تدخل الخزان وستبقى معا نحو القاع. ويتم ذلك من قبل القيادة تطلع إلى الوراء والآلية حقنة سائق باستخدام دواسة القدم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أعد توصيل قنية إلى الخزان عبر أنابيب الاتصال. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع قنية تلميح مرة أخرى في طبق الثقافة وتدفق الجزر من الخزان إلى الأنبوب ثم إلى قنية. تأكد من أن الجزر البقاء معا كما كنت مرة أخرى ملء الأنبوب / قنية بواسطة بلطف &quot;عبها&quot; (التنصت) وأنابيب (1D الشكل). وقف إما قبل أو بعد كل فقاعات الهواء قبل الجزر ويخرجوا من قنية. إذا لم تكن متأكدا، كما وقف الجزر أدخل الجزء الخلفي من قنية والهواء المتبقيةيمكن الفقاعات قبل الجزر يساعد على منع ارتجاع (ارتجاعي) من الجزر من ACE. سوف تتبدد بين عشية وضحاها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في هذه المرحلة، كنت على استعداد لحقن الجزر في ACE (يرجى الاطلاع الخطوات التالية). </li></ol> 2. جزيرة زرع في الغرفة الأمامية للعين <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الماوس على وسادة تخدير دافئة تحت المجسام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع خطم من الفأرة إلى &quot;قناع&quot; التخدير متصلة الأكسجين / isoflurane آلة التخدير. يتكون القناع من أصل 1 مل ماصة الحافة البلاستيكية (بدون فلتر) وأنابيب متصلة التخدير حتى نهاية الضيقة (الشكل 2A، ب). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سحب بلطف الجفون للعين أن زرع باستخدام السبابة والإبهام من يدك حرة و&quot;البوب&quot; في العين لأفضل التعرض وسهولة الوصول (الشكل 2C). وهذا يتطلب بعض الممارسة لاتقان دون إعاقة التنفس من الماوس عن طريق الضغط الزائد علىالرقبة أو عرقلة تدفق الدم في الرأس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام حقنة الانسولين المتاح (29 - 31G)، ومشرط، اختراق بعناية سوى غيض في القرنية وجعل شق واحد الجانبية. جعل شق في منتصف الفترة الفاصلة بين قمة حوف القرنية والتقليل إلى أدنى حد من الجزر الجزر خلال حقن من ACE (الشكل 2D). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج بعناية قنية (مسبقة مع الجزر) من خلال شق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إخراج ببطء للخروج من الجزر قنية وإيداعها على رأس القزحية. لتجنب الجزر جزيرة بسبب تراكم الضغط المفرط في ACE، إخراج الجزر في التوجهات وجيزة في وحدة تخزين صغيرة (ق) ممكن في مقابل رباعي إلى شق. ويمكن ضمان هذه الجزر مزيد من ضغط في الأنبوب أثناء تحميل قنية (يرجى راجع الخطوة 1.6). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التراجع ببطء قنية من ACE. هذا هو خطوة حاسمة، وخاصة، إذا تم حقن كمية كبيرة من الجزر والجزر جزيرة بسبب بريهقد تأكد بناء داخل ACE أمرا لا مفر منه. للقضاء على / تقليل الجزر جزيرة، وتناوب بلطف بينما قنية داخل ACE للافراج عن الضغط الزائد من خلال شق حول قنية. تحقق من وجود علامات على الجزر وحاولت التراجع عن قنية، وإذا لزم الأمر، والانتظار حتى تهدأ الضغوط قبل التراجع تماما قنية من ACE. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> شطف العين المزروع مع PBS أو محلول ملحي معقم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن البوبرينورفين لتسكين بعد العملية (0،05-0،1 ملغ / كغ، تحت الجلد) لأول 48 ساعة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق مرهم الاريثروميسين العيون المضادات الحيوية للعين المزروع مباشرة بعد الزرع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الحيوانات في قفص مرة أخرى للسماح حرارة التعافي من التخدير. </li></ol>

<ol>
	<li>Weigert, R., Sramkova, M., Parente, L., Amornphimoltham, P., Masedunskas, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+microscopy:+a+novel+tool+to+study+cell+biology+in+living+animals.">Intravital microscopy: a novel tool to study cell biology in living animals.</a> Histochem. Cell Biol. 133 (5), 481-491 (2010).</li><li>Leibiger, I. B., Caicedo, A., Berggren, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+in+vivo+imaging+of+pancreatic+?-cell+function+and+survival+-+a+perspective.">Non-invasive in vivo imaging of pancreatic ?-cell function and survival - a perspective.</a> Acta Physiol. (Oxf). , (2011).</li><li>Wang, Y., Maslov, K., Kim, C., Hu, S., Wang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrated+photoacoustic+and+fluorescence+confocal+microscopy.">Integrated photoacoustic and fluorescence confocal microscopy.</a> IEEE Trans Biomed. Eng. 57 (10), 2576-2578 (2010).</li><li>Ntziachristos, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Going+deeper+than+microscopy:+the+optical+imaging+frontier+in+biology.">Going deeper than microscopy: the optical imaging frontier in biology.</a> Nat. Methods. 7, 603-614 (2010).</li><li>Aswathy, R. G., Yoshida, Y., Maekawa, T., Kumar, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+quantum+dots+for+deep+tissue+imaging.">Near-infrared quantum dots for deep tissue imaging.</a> Anal. Bioanal Chem. 397 (4), 1417-1435 (2010).</li><li>Ghoroghchian, P. P., Therien, M. J., Hammer, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+fluorescence+imaging:+a+personal+perspective.">In vivo fluorescence imaging: a personal perspective.</a> Wiley Interdiscip Rev. Nanomed Nanobiotechnol. 1 (2), 156-167 (2009).</li><li>Prescher, A., Mory, C., Martin, M., Fiedler, M., Uhlmann, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+FTY720+treatment+on+postischemic+pancreatic+microhemodynamics.">Effect of FTY720 treatment on postischemic pancreatic microhemodynamics.</a> Transplant Proc. 42 (10), 3984-3985 (2010).</li><li>Leblond, F., Davis, S., Vald&#233;s, P., Pogue, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-clinical+whole-body+fluorescence+imaging:+Review+of+instruments,+methods+and+applications.">Pre-clinical whole-body fluorescence imaging: Review of instruments, methods and applications.</a> J. Photochem. Photobiol. B. 98 (1), 77-94 (2010).</li><li>Toso, C., Vallee, J. P., Morel, P., Ris, F., Demuylder-Mischler, S., Lepetit-Coiffe, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+magnetic+resonance+imaging+of+pancreatic+islet+grafts+after+iron+nanoparticle+labeling.">Clinical magnetic resonance imaging of pancreatic islet grafts after iron nanoparticle labeling.</a> Am. J. Transplant. 8 (3), 701-706 (2008).</li><li>Denk, W., Strickler, J. H., Webb, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-photon+laser+scanning+fluorescence+microscopy.">Two-photon laser scanning fluorescence microscopy.</a> Science. 248 (4951), 73-76 (1990).</li><li>Wang, B. G., Konig, K., Halbhuber, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-photon+microscopy+of+deep+intravital+tissues+and+its+merits+in+clinical+research.">Two-photon microscopy of deep intravital tissues and its merits in clinical research.</a> J. Microsc. 238 (1), 1-20 (2010).</li><li>Denk, W., Delaney, K. R., Gelperin, A., Kleinfeld, D., Strowbridge, B. W., Tank, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomical+and+functional+imaging+of+neurons+using+2-photon+laser+scanning+microscopy.">Anatomical and functional imaging of neurons using 2-photon laser scanning microscopy.</a> J. Neurosci. Methods. 54 (2), 151-162 (1994).</li><li>Cahalan, M. D., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choreography+of+cell+motility+and+interaction+dynamics+imaged+by+two-photon+microscopy+in+lymphoid+organs.">Choreography of cell motility and interaction dynamics imaged by two-photon microscopy in lymphoid organs.</a> Annu. Rev. Immunol. 26, 585-626 (2008).</li><li>Khorshidi, M. A., Vanherberghen, B., Kowalewski, J. M., Garrod, K. R., Lindstrom, S., Andersson-Svahn, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+transient+migration+behavior+of+natural+killer+cells+imaged+in+situ+and+in+vitro.">Analysis of transient migration behavior of natural killer cells imaged in situ and in vitro.</a> Integr. Biol. (Camb). 3 (7), 770-778 (2011).</li><li>Matheu, M. P., Cahalan, M. D., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoimaging:+studying+immune+system+dynamics+using+two-photon+microscopy.">Immunoimaging: studying immune system dynamics using two-photon microscopy.</a> Cold Spring Harb. Protoc. 2011, pdb.top99 (2011).</li><li>Celli, S., Albert, M. L., Bousso, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+the+innate+and+adaptive+immune+responses+underlying+allograft+rejection+by+two-photon+microscopy.">Visualizing the innate and adaptive immune responses underlying allograft rejection by two-photon microscopy.</a> Nat. Med. , (2011).</li><li>Fan, Z., Spencer, J., Lu, Y., Pitsillides, C., Singh, G., Kim, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+tracking+of+'color-coded'+effector,+natural+and+induced+regulatory+T+cells+in+the+allograft+response.">In vivo tracking of 'color-coded' effector, natural and induced regulatory T cells in the allograft response.</a> Nat. Med. 16 (6), 718-722 (2010).</li><li>Sabek, O., Gaber, M. W., Wilson, C. M., Zawaski, J. A., Fraga, D. W., Gaber, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+human+islet+vascularization+using+a+dorsal+window+model.">Imaging of human islet vascularization using a dorsal window model.</a> Transplant Proc. 42 (6), 2112-2114 (2010).</li><li>Coppieters, K., Martinic, M. M., Kiosses, W. B., Amirian, N., von Herrath, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+for+the+in+vivo+imaging+of+autoimmune+diabetes+development+in+the+pancreas+by+two-photon+microscopy.">A novel technique for the in vivo imaging of autoimmune diabetes development in the pancreas by two-photon microscopy.</a> PLoS One. 5 (12), e15732 (2010).</li><li>Martinic, M. M., von Herrath, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+imaging+of+the+pancreas+during+development+of+diabetes.">Real-time imaging of the pancreas during development of diabetes.</a> Immunol Rev. 221, 200-213 (2008).</li><li>Mostany, R., Portera-Cailliau, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Method+for+2-Photon+Imaging+of+Blood+Flow+in+the+Neocortex+through+a+Cranial+Window.">A Method for 2-Photon Imaging of Blood Flow in the Neocortex through a Cranial Window.</a> J. Vis. Exp. (12), e678 (2008).</li><li>Palmer, G. M., Fontanella, A. N., Shan, S., Hanna, G., Zhang, G., Fraser, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+optical+molecular+imaging+and+analysis+in+mice+using+dorsal+window+chamber+models+applied+to+hypoxia,+vasculature+and+fluorescent.">In vivo optical molecular imaging and analysis in mice using dorsal window chamber models applied to hypoxia, vasculature and fluorescent.</a> 6 (9), 1355-1366 (2011).</li><li>Jain, R. K., Munn, L. L., Fukumura, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissecting+tumour+pathophysiology+using+intravital+microscopy.">Dissecting tumour pathophysiology using intravital microscopy.</a> Nat. Rev. Cancer. 2 (4), 266-276 (2002).</li><li>Taylor, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+response+of+capillary+endothelium+to+changes+in+intravascular+pressure,+as+seen+in+the+rabbit's+ear+chamber.">The response of capillary endothelium to changes in intravascular pressure, as seen in the rabbit's ear chamber.</a> Aust. J. Exp. Biol. Med. Sci. 31 (5), 533-543 (1953).</li><li>Shan, S., Sorg, B., Dewhirst, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+rodent+mammary+window+of+orthotopic+breast+cancer+for+intravital+microscopy.">A novel rodent mammary window of orthotopic breast cancer for intravital microscopy.</a> Microvasc. Res. 65 (2), 109-117 (2003).</li><li>Speier, S., Nyqvist, D., Cabrera, O., Yu, J., Molano, R. D., Pileggi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+in+vivo+imaging+of+pancreatic+islet+cell+biology.">Noninvasive in vivo imaging of pancreatic islet cell biology.</a> Nat. Med. 14 (5), 574-578 (2008).</li><li>Speier, S., Nyqvist, D., Kohler, M., Caicedo, A., Leibiger, I. B., Berggren, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+high-resolution+in+vivo+imaging+of+cell+biology+in+the+anterior+chamber+of+the+mouse+eye.">Noninvasive high-resolution in vivo imaging of cell biology in the anterior chamber of the mouse eye.</a> Nat. Protoc. 3 (8), 1278-1286 (2008).</li><li>Falck, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Site+of+production+of+oestrogen+in+the+ovary+of+the+rat.">Site of production of oestrogen in the ovary of the rat.</a> Nature. 184, 1082 (1959).</li><li>Bickford-Wimer, P., Granholm, A. C., Bygdeman, M., Hoffer, B., Olson, L., Seiger, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+fetal+cerebellar+and+cortical+tissue+transplanted+to+the+anterior+eye+chamber+of+athymic+rats:+electrophysiological+and+structural+studies.">Human fetal cerebellar and cortical tissue transplanted to the anterior eye chamber of athymic rats: electrophysiological and structural studies.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 84 (16), 5957-5961 (1987).</li><li>Adeghate, E., Donath, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+findings+in+long-term+pancreatic+tissue+transplants+in+the+anterior+eye+chamber+of+rats.">Morphological findings in long-term pancreatic tissue transplants in the anterior eye chamber of rats.</a> Pancreas. 5 (3), 298-305 (1990).</li><li>Abdulreda, M. H., Faleo, G., Molano, R. D., Lopez-Cabezas, M., Molina, J., Tan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution,+noninvasive+longitudinal+live+imaging+of+immune+responses.">High-resolution, noninvasive longitudinal live imaging of immune responses.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. , (2011).</li><li>Unutmaz, D., Xiang, W., Sunshine, M. J., Campbell, J., Butcher, E., Littman, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+primate+lentiviral+receptor+Bonzo/STRL33+is+coordinately+regulated+with+CCR5+and+its+expression+pattern+is+conserved+between+human+and+mouse.">The primate lentiviral receptor Bonzo/STRL33 is coordinately regulated with CCR5 and its expression pattern is conserved between human and mouse.</a> J. Immunol. 165 (6), 3284-3292 (2000).</li><li>Pileggi, A., Molano, R. D., Berney, T., Cattan, P., Vizzardelli, C., Oliver, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heme+oxygenase-1+induction+in+islet+cells+results+in+protection+from+apoptosis+and+improved+in+vivo+function+after+transplantation.">Heme oxygenase-1 induction in islet cells results in protection from apoptosis and improved in vivo function after transplantation.</a> Diabetes. 50 (9), 1983-1991 (2001).</li></ol>

PO.B. هي واحدة من مؤسسي شركة للتكنولوجيا الحيوية Biocrine، والتي سوف تستخدم الغرفة الأمامية للعين كمنصة الخدمات التجارية. AC على حماية براءة الاختراع هذه التكنولوجيا.

تم عزل الجزر البنكرياسية الفئران باستخدام الهضم كولاجيناز تليها تنقية على تدرجات الكثافة، كما هو موضح سابقا 33. تم زراعة الجزر المعزولة بين عشية وضحاها قبل الزرع. بينما قد لا تكون هناك حاجة هذا، فمن المستحسن أن تسمح الجزر للتعافي من إجراء العزل. هذا أمر بالغ الأ?...

وقد كشفت التطورات في المجهر intravital الظواهر الفسيولوجية لا تنبأ بها في الدراسات المختبرية 1. هذا يسلط الضوء على التحدي في ترجمة النتائج التي تم الحصول عليها عن طريق أساليب التقليدية في المختبر في الحيوانات الحية. في العقد الماضي، تحسنا كبيرا في التصور من أنسجة الحيوانات الحية من التقدم التكنولوجي في طرائق التصوير 2، 3، 4، 5، 6. وقد حفزت هذه في حاجة إلى نهج التصوير المجراة مع التطبيق ممكنا في النماذج الحيوانية التجريبية لتمكين التصور طولية من الأنسجة المستهدفة غير جراحية. وقد مكنت تقنيات التصوير مثل التصوير بالرنين المغناطيسي والتصوير المقطعي بوزيترون الانبعاثات أو تلألؤ بيولوجي غير الغازية تصوير الأعضاء / الأنسجة العميقة داخل الجسم 7-8، 9. ولكن يمكن لهذه التقنيات أن تحقق واحدة الخلية القرار بسبب الإشارات الخلفية عالية ومنخفضة القرار المكانية، على الرغم من استخدام سو المواد التباين العالي أو الأنسجة محددة 4 التلألؤ. وقد وجهت هذا مع ظهور المجهر ثنائي الفوتون مبائر مضان 10. تمكين ثنائي الفوتون المجهري دراسات التصوير intravital لتصور وقياس الأحداث الخلوية مع تفاصيل لم يسبق لها مثيل 11 و 12. وقد أدى هذا إلى توصيف العمليات البيولوجية الأساسية في الصحة والمرض 13 و 14 و 15 و 16. بينما الرائد دراسات التصوير وintravital في المقام الأول &quot;تحاكي&quot; في ظروف فيفو في الأنسجة رفعه (مثل العقد الليمفاوية)، استخدمت دراسات أخرى النهج الغازية إلى الأنسجة المستهدفة تتعرض الصور في الموقع 17، 18، 19، 20، 21. وقد استخدمت دراسات أخرى أيضا &quot;النماذج غرفة نافذة&quot; للتحايل على القيود المرتبطة النهج الغازية ومحدودة في الجسم الحي التصوير القرار 22، 23، 24، 25. في إطار نموذج الدائرة، هو مزروع جراحيا غرفة مع نافذة شفافة في الجلد في diffeإيجار (الجلد الظهرية أو الأذن، وسادة الثدي الدهون والكبد وغيرها) على الحيوان (مثل الجرذان والفئران، والأرانب). في حين أن هذا النهج يمكن بوضوح عالي الدقة في التصوير المجراة، يقتضي وجود جراحة لزرع الدائرة وربما لا تكون قادرة على استيعاب أكثر من الدراسات الطولية التصوير عدة أسابيع أو 22 شهرا. وقد تجلى مؤخرا أن الجمع بين عالية الدقة المجهر مبائر مع إجراء مينيملي، أي زرع في الغرفة الأمامية للعين (ACE) يوفر &quot;نافذة الجسم الطبيعية&quot; وذلك قوية وتنوعا في الجسم الحي التصوير منصة 26 و 27 وقد استخدم في زرع ACE في العقود القليلة الماضية لدراسة الجوانب البيولوجية من مجموعة متنوعة من الأنسجة 28، 29، 30، والأخيرة مع مزيج عالية الدقة التصوير تمكين دراسة علم وظائف الأعضاء من الجزر البنكرياسية مع خلية واحدة قرار غير وجراحية طوليا &lt;سوب&gt; 26 و 27. وقد استخدم هذا النهج لدراسة الاستجابات الذاتية خلال تطوير داء السكري نوع 1 في النماذج الحيوانية (بيانات غير منشورة). كما كان يستخدم لدراسة التنمية البنكرياس، وكذلك، في الدراسات وظائف الكلى عن طريق زرع البنكرياس في براعم ACE أو الكبيبات الكلوية الفردية، على التوالي (بيانات غير منشورة). A تقرير صدر مؤخرا باستخدام هذا النهج أثبت مزيد من تطبيقه لدراسة الاستجابات المناعية بعد زرع البنكرياس جزيرة 31. الأهم من ذلك، أظهرت هذه الدراسة أن زرع في الغرفة الأمامية من العين يوفر نافذة لأداء الجسم الطبيعية: (1) طولية، غير الغازية تصوير الأنسجة المزروعة في الجسم الحي، (2) في الجسم الحي cytolabeling لتقييم الجدوى والنمط الظاهري الخلوية في الموقع، (3) تتبع في الوقت الحقيقي من التسلل الخلايا المناعية في الأنسجة المستهدفة؛ و (4) المحلية عن طريق التدخل التطبيق الموضعي أو الحقن داخل العين. هنا، نحن Demonstrate كيفية تنفيذ زرع في الغرفة الأمامية للعين باستخدام الجزر البنكرياسية.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> وصف / تعليقات </td></tr><tr><td> IsoTHESIA (Isoflurane) </td><td> Buttler التموين صحة الحيوان </td><td> 11695-6775-2 </td><td> 99.9٪ Isoflurane / مل </td></tr><tr><td> Ketaset (الكيتامين HCL) </td><td> فورت دودج الصحة الحيوانية </td><td> 0856-2013-01 </td><td> حقن التخدير البديلة </td></tr><tr><td> Beprenex (البوبرينورفين HCL) </td><td> ريكيت بينكيزر الرعاية الصحية (UK) المحدودة </td><td> 12496-075-7-1 </td><td> 0.3 ملغم / مل </td></tr><tr><td> الاريثروميسين مرهم عيني USP، 0.5٪ </td><td> أكرون </td><td> 17478-070-35 </td><td> تطبيق لقائي العين المزروع </td></tr><tr><td> 0.9٪ كلوريد الصوديوم (المالحة) </td><td> هوسبيرا شركة </td><td> 0409-7983-03 </td><td> رابعا للحقن. معقم </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Gibco </td><td> 10010-023 </td><td> 1X. معقم </td></tr><tr><td> CMRL المتوسطة 1066 </td><td> Cellgro </td><td> 98-304-CV </td><td> تستكمل تعديل CIT. وسائل الإعلام المفضلة لجزر </td></tr></tbody></table>

transplantation into the anterior chamber of the eye for longitudinal, non-invasive in vivo imaging with single-cell resolution in real-time

وقد برزت Intravital التصوير كأداة لا غنى عنها في مجال البحوث البيولوجية. في هذه العملية، وقد وضعت العديد من تقنيات التصوير لدراسة العمليات البيولوجية المختلفة في الحيوانات غير جراحية. ومع ذلك، فإن القيود الرئيسية في التقنية الحالية طرائق التصوير intravital هو عدم القدرة على الجمع بين غير الغازية، والتصوير الطولي مع قدرات القرار وحيدة الخلية. نعرض هنا كيف زرع في الغرفة الأمامية من العين تلتف الحد يعتد توفير منصة تنوعا التجريبية التي تمكن غير الغازية، والتصوير الطولي للقرار الخلوية في الجسم الحي. علينا أن نبرهن الإجراء زرع في الماوس وتقديم نتائج ممثل باستخدام نموذج مع أهمية سريرية، وهي جزيرة البنكرياس الزرع. بالإضافة إلى تمكين التصور المباشر في مجموعة متنوعة من الأنسجة المزروعة في الغرفة الأمامية للعين، فإن هذا النهج يوفر منبرا لحصاةن المخدرات عن طريق أداء على المدى الطويل متابعة والرصد في الأنسجة المستهدفة. بسبب زرع الأنسجة في براعة / خلية، في الغرفة الأمامية للعين علاجات زرع ليس فقط الفوائد، فهي تمتد إلى غيرها من التطبيقات في الجسم الحي لدراسة العمليات الفسيولوجية المرضية في جسم المريض ومثل نقل الإشارة والسرطان أو المناعة الذاتية تطور المرض.

هناك عدد قليل من المعالم التي تحدد &quot;جيد&quot; الزرع. A زرع جيد واحد هو أن العائدات دون نزيف عند إجراء شق كما يتضح في الفيديو. يتم منع النزيف / التقليل من اختراق فقط غيض من مشرط (الإبرة) في ACE (الشكل 3A). وهذا سوف يساعد أيضا في منع الاتصال وثقب القزحية. فإنه سيتم أيضا ...

Watch this Scientific Journal Video about Transplantation into the Anterior Chamber of the Eye for Longitudinal, Non-invasive In vivo Imaging with Single-cell Resolution in Real-time at JoVE.com

Transplantation into the Anterior Chamber of the Eye for Longitudinal, Non-invasive In vivo Imaging with Single-cell Resolution in Real-time

نهج جديد يجمع بين العين وزرع المجهري متحد البؤر تمكن طولية، غير الغازية في الوقت الحقيقي التصوير مع وحيدة الخلية القرار داخل أنسجة المطعمة<em&gt; في الجسم الحي</em&gt;. نحن لشرح كيفية زرع البنكرياس الجزر في الغرفة الأمامية للعين الماوس.

زرع في الغرفة الأمامية للعين لالطولية، غير الغازية<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; التصوير مع وحيدة الخلية القرار في الوقت الحقيقي

Intravital imaging has emerged as an indispensable tool in biological research.  In the process, many imaging techniques have been developed to study ...

transplantation-into-anterior-chamber-eye-for-longitudinal-non

Research

JoVE Journal

Medicine

Transplantation into the Anterior Chamber of the Eye for Longitudinal, Non-invasive In vivo Imaging with Single-cell Resolution in Real-time

13.3K Views.  University of Miami Miller School of Medicine. نهج جديد يجمع بين العين وزرع المجهري متحد البؤر تمكن طولية، غير الغازية في الوقت الحقيقي التصوير مع وحيدة الخلية القرار داخل أنسجة المطعمة في الجسم الحي. نحن لشرح كيفية زرع البنكرياس الجزر في الغرفة الأمامية للعين الماوس.

Video: Transplantation into the Anterior Chamber of the Eye for Longitudinal, Non-invasive In vivo Imaging with Single-cell Resolution in Real-time

High-frequency High-resolution Echocardiography: First Evidence on Non-invasive Repeated Measure of Myocardial Strain, Contractility, and Mitral Regurgitation in the Ischemia-reperfused Murine Heart

Ischemia-reperfusion (IR) was surgically performed in murine hearts which were then subjected to repeated imaging to monitor temporal changes in functional parameters of key clinical significance. Two-dimensional movies were acquired at high frame rate (8 kHz) and were utilized to estimate high-quality myocardial strain. Two-dimensional elastograms (strain images), as well as strain profiles, were visualized. Results were powerful in quantitatively assessing IR-induced changes in cardiac events including left-ventricular (LV) contraction, LV relaxation and isovolumetric phases of both pre-IR and post-IR beating hearts in intact mice. In addition, compromised sector-wise wall motion and anatomical deformation in the infarcted myocardium were visualized.  The elastograms were uniquely able to provide information on the following parameters in addition to standard physiological indices that are known to be affected by myocardial infarction in the mouse: internal diameters of mitral valve orifice and aorta, effective regurgitant orifice, myocardial strain (circumferential as well as radial), turbulence in blood flow pattern as revealed by the color Doppler movies and velocity profiles, asynchrony in LV sector, and changes in the length and direction of vectors demonstrating slower and asymmetrical wall movement. This work emphasizes on the visual demonstration of how such analyses are performed. 

High-frequency High-resolution Echocardiography: First Evidence on Non-invasive Repeated Measure of Myocardial Strain, Contractility, and Mitral Regurgitation in the Ischemia-reperfused Murine Heart 

High frequency Doppler ultrasound is a novel technology for assessing regional myocardial function. This work presents first evidence demonstrating applicability of this versatile imaging platform for the repeated measure of myocardial strain, dp/dt, and mitral regurgitation in the ischemia-reperfused (IR) murine heart.

عالية التردد عالية الدقة ضربات القلب : أول دليل على عدم تكرار القياس الغازية من سلالة عضلة القلب ، انقباض ، وقلس التاجي في القلب الإسكيمية ، فأري إشباعها

Ischemia-reperfusion (IR) was surgically performed in murine hearts which were then subjected to repeated imaging to monitor temporal changes in ...

Multispectral Real-time Fluorescence Imaging for Intraoperative Detection of the Sentinel Lymph Node in Gynecologic Oncology

The prognosis in virtually all solid tumors depends on the presence or absence of lymph node metastases.1-3 Surgical treatment most often combines radical excision of the tumor with a full lymphadenectomy in the drainage area of the tumor. However, removal of lymph nodes is associated with increased morbidity due to infection, wound breakdown and lymphedema.4,5 As an alternative, the sentinel lymph node procedure (SLN) was developed several decades ago to detect the first draining lymph node from the tumor.6 In case of lymphogenic dissemination, the SLN is the first lymph node that is affected (Figure 1). Hence, if the SLN does not contain metastases, downstream lymph nodes will also be free from tumor metastases and need not to be removed. The SLN procedure is part of the treatment for many tumor types, like breast cancer and melanoma, but also for cancer of the vulva and cervix.7 The current standard methodology for SLN-detection is by peritumoral injection of radiocolloid one day prior to surgery, and a colored dye intraoperatively. Disadvantages of the procedure in cervical and vulvar cancer are multiple injections in the genital area, leading to increased psychological distress for the patient, and the use of radioactive colloid.
Multispectral fluorescence imaging is an emerging imaging modality that can be applied intraoperatively without the need for injection of radiocolloid. For intraoperative fluorescence imaging, two components are needed: a fluorescent agent and a quantitative optical system for intraoperative imaging. As a fluorophore we have used indocyanine green (ICG). ICG has been used for many decades to assess cardiac function, cerebral perfusion and liver perfusion.8 It is an inert drug with a safe pharmaco-biological profile. When excited at around 750 nm, it emits light in the near-infrared spectrum around 800 nm. A custom-made multispectral fluorescence imaging camera system was used.9.
The aim of this video article is to demonstrate the detection of the SLN using intraoperative fluorescence imaging in patients with cervical and vulvar cancer. Fluorescence imaging is used in conjunction with the standard procedure, consisting of radiocolloid and a blue dye. In the future, intraoperative fluorescence imaging might replace the current method and is also easily transferable to other indications like breast cancer and melanoma.

Fluorescence imaging is a promising innovative modality for image-guided surgery in surgical oncology. In this video we describe the technical procedure for detection of the sentinel lymph node using fluorescence imaging as showcased in gynecologic oncologicy. A multispectral fluorescence camera system, together with the fluorescent agent indocyanine green, is applied.

متعدد الأطياف في الوقت الحقيقي التصوير الإسفار عن الكشف عن جراحة داخلية من الحارس العقدة الليمفاوية في امراض النساء والاورام

The prognosis in virtually all solid tumors depends on the presence or absence of lymph node metastases.1-3 Surgical treatment most often combines radical ...

Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET

The number of patients with end-stage renal disease, and the number of kidney allograft recipients continuously increases. Episodes of acute cellular allograft rejection (AR) are a negative prognostic factor for long-term allograft survival, and its timely diagnosis is crucial for allograft function 1. At present, AR can only be definitely diagnosed by core-needle biopsy, which, as an invasive method, bares significant risk of graft injury or even loss. Moreover, biopsies are not feasible in patients taking anticoagulant drugs and the limited sampling site of this technique may result in false negative results if the AR is focal or patchy. As a consequence, this gave rise to an ongoing search for new AR detection methods, which often has to be done in animals including the use of various transplantation models.
Since the early 60s rat renal transplantation is a well-established experimental method for the examination and analysis of AR 2. We herein present in addition small animal positron emission tomography (PET) using 18F-fluorodeoxyglucose (FDG) to assess AR in an allogeneic uninephrectomized rat renal transplantation model and propose graft FDG-PET imaging as a new option for a non-invasive, specific and early diagnosis of AR also for the human situation 3. Further, this method can be applied for follow-up to improve monitoring of transplant rejection 4.

Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET

We herein present a rat renal transplantation model to non-invasively assess acute allograft rejection using positron emission tomography with 18F-fluorodeoxyglucose.

التصوير غير الغازية الحاد رفض طعم خيفي بعد الجرذ زراعة الكلى عن طريق<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG PET

The number of patients with end-stage renal  disease, and the number of kidney allograft recipients continuously increases.  Episodes of acute cellular ...

Development of an Audio-based Virtual Gaming Environment to Assist with Navigation Skills in the Blind

Audio-based Environment Simulator (AbES) is virtual environment software designed to improve real world navigation skills in the blind. Using only audio based cues and set within the context of a video game metaphor, users gather relevant spatial information regarding a building's layout. This allows the user to develop an accurate spatial cognitive map of a large-scale three-dimensional space that can be manipulated for the purposes of a real indoor navigation task. After game play, participants are then assessed on their ability to navigate within the target physical building represented in the game. Preliminary results suggest that early blind users were able to acquire relevant information regarding the spatial layout of a previously unfamiliar building as indexed by their performance on a series of navigation tasks. These tasks included path finding through the virtual and physical building, as well as a series of drop off tasks. We find that the immersive and highly interactive nature of the AbES software appears to greatly engage the blind user to actively explore the virtual environment. Applications of this approach may extend to larger populations of visually impaired individuals.

Audio-based Environment Simulator (AbES) is virtual environment software designed to improve real world navigation skills in the blind.

تطوير بيئة المستندة إلى الصوت الألعاب الافتراضية للمساعدة في مهارات التنقل في مكفوفين

Audio-based Environment Simulator (AbES) is virtual environment software designed to improve real world navigation skills in the blind. Using only audio ...

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

Certain classes of chemotherapies may exert acute vascular changes that may progress into long-term conditions that may predispose the patient to an increased risk of vascular morbidity.&#160;Yet, albeit&#160;the mounting clinical evidence, there is a paucity of clear studies of vascular toxicity and therefore the etiology of a heterogeneous group of vascular/cardiovascular disorders remains to be elucidated. Moreover, the mechanism that may underlie vascular toxicity can completely differ from the principles of chemotherapy-induced cardiotoxicity, which is related to direct myocyte injury. We have established a real-time, in vivo molecular imaging platform&#160;to evaluate&#160;the potential&#160;acute&#160;vascular toxicity of anti-cancer therapies.
We have set up a platform of in vivo, high-resolution molecular imaging&#160;in mice,&#160;suitable for visualizing vasculature within confined organs and reference blood vessels within the same individuals whereas each individual serve as its own control. Blood vessel walls were impaired after doxorubicin administration, representing a unique mechanism of vascular toxicity that may be the early event in end-organ injury. Herein, the method of fibered confocal fluorescent microscopy (FCFM) based imaging is described, which provides an innovative mode to understand physiological phenomena at the cellular and sub-cellular levels in animal subjects.

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

We herein describe the method of fibered confocal fluorescent microscopy (FCFM) based imaging, which provides an innovative mode to understand physiological phenomena at the cellular and sub-cellular levels in animal subjects.

الناجم عن العلاج الكيميائي الأوعية الدموية سمية - في الوقت الحقيقي<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; التصوير من سفينة انخفاض

Certain classes of chemotherapies may exert acute vascular changes that may progress into long-term conditions that may predispose the patient to an ...

Non-invasive Assessment of the Efficacy of New Therapeutics for Intestinal Pathologies Using Serial Endoscopic Imaging of Live Mice

Animal models of inflammatory bowel disease (IBD) and colorectal cancer (CRC) have provided significant insight into the cell intrinsic and extrinsic mechanisms that contribute to the onset and progression of intestinal diseases. The identification of new molecules that promote these pathologies has led to a flurry of activity focused on the development of potential new therapies to inhibit their function. As a result, various pre-clinical mouse models with an intact immune system and stromal microenvironment are now heavily used. Here we describe three experimental protocols to test the efficacy of new therapeutics in pre-clinical models of (1) acute mucosal damage, (2) chronic colitis and/or colitis-associated colon cancer, and (3) sporadic colorectal cancer. We also outline procedures for serial endoscopic examination that can be used to document the therapeutic response of an individual tumor and to monitor the health of individual mice. These protocols provide complementary experimental platforms to test the effectiveness of therapeutic compounds shown to be well tolerated by mice.

We describe methods for longitudinal monitoring of the efficacy of therapeutics for the treatment of colonic pathologies in mice using a rigid endoscope. This protocol can be readily used for the characterization of the therapeutic response of an individual tumor in live mice and also for monitoring potential disease relapse.

تقييم غير الغازية من فعالية العلاجات الجديدة لعلوم الأمراض المعوية عن طريق التصوير بالمنظار المسلسل من الفئران الحية

Animal models of inflammatory bowel disease (IBD) and colorectal cancer (CRC) have provided significant insight into the cell intrinsic and extrinsic ...

Encapsulation Thermogenic Preadipocytes for Transplantation into Adipose Tissue Depots

Cell encapsulation was developed to entrap viable cells within semi-permeable membranes. The engrafted encapsulated cells can exchange low molecular weight metabolites in tissues of the treated host to achieve long-term survival. The semipermeable membrane allows engrafted encapsulated cells to avoid rejection by the immune system. The encapsulation procedure was designed to enable a controlled release of bioactive compounds, such as insulin, other hormones, and cytokines. Here we describe a method for encapsulation of catabolic cells, which consume lipids for heat production and energy dissipation (thermogenesis) in the intra-abdominal adipose tissue of obese mice. Encapsulation of thermogenic catabolic cells may be potentially applicable to the prevention and treatment of obesity and type 2 diabetes. Another potential application of catabolic cells may include detoxification from alcohols or other toxic metabolites and environmental pollutants.

Here, we present a protocol for encapsulation of catabolic cells, which consume lipids for heat production in intra-abdominal adipose tissue and increase energy dissipation in obese mice.

التغليف حرارة Preadipocytes للزراعة إلى الدهنية مستودعات الأنسجة

Cell encapsulation was developed to entrap viable cells within semi-permeable membranes. The engrafted encapsulated cells can exchange low molecular ...

Extended Time-lapse Intravital Imaging of Real-time Multicellular Dynamics in the Tumor Microenvironment

In the tumor microenvironment, host stromal cells interact with tumor cells to promote tumor progression, angiogenesis, tumor cell dissemination and metastasis. Multicellular interactions in the tumor microenvironment can lead to transient events including directional tumor cell motility and vascular permeability. Quantification of tumor vascular permeability has frequently used end-point experiments to measure extravasation of vascular dyes. However, due to the transient nature of multicellular interactions and vascular permeability, the kinetics of these dynamic events cannot be discerned. By labeling cells and vasculature with injectable dyes or fluorescent proteins, high-resolution time-lapse intravital microscopy has allowed the direct, real-time visualization of transient events in the tumor microenvironment. Here we describe a method for using multiphoton microscopy to perform extended intravital imaging in live mice to directly visualize multicellular dynamics in the tumor microenvironment. This method details cellular labeling strategies, the surgical preparation of a mammary skin flap, the administration of injectable dyes or proteins by tail vein catheter and the acquisition of time-lapse images. The time-lapse sequences obtained from this method facilitate the visualization and quantitation of the kinetics of cellular events of motility and vascular permeability in the tumor microenvironment.

This protocol describes the use of multiphoton microscopy to perform extended time-lapse imaging of multicellular interactions in real time, in vivo at single cell resolution.

تمديد الوقت الفاصل بين حيوي داخلي تصوير في الوقت الحقيقي متعددة الخلايا حيوية في المكروية ورم

In the tumor microenvironment, host stromal cells interact with tumor cells to promote tumor progression, angiogenesis, tumor cell dissemination and ...

Longitudinal In Vivo Imaging of the Cerebrovasculature: Relevance to CNS Diseases

Remodeling of the brain vasculature is a common trait of brain pathologies. In vivo imaging techniques are fundamental to detect cerebrovascular plasticity or damage occurring overtime and in relation to neuronal activity or blood flow. In vivo two-photon microscopy allows the study of the structural and functional plasticity of large cellular units in the living brain. In particular, the thinned-skull window preparation allows the visualization of cortical regions of interest (ROI) without inducing significant brain inflammation. Repetitive imaging sessions of cortical ROI are feasible, providing the characterization of disease hallmarks over time during the progression of numerous CNS diseases. This technique accessing the pial structures within 250 &#956;m of the brain relies on the detection of fluorescent probes encoded by genetic cellular markers and/or vital dyes. The latter (e.g., fluorescent dextrans) are used to map the luminal compartment of cerebrovascular structures. Germane to the protocol described herein is the use of an in vivo marker of amyloid deposits, Methoxy-O4, to assess Alzheimer&#39;s disease (AD) progression. We also describe the post-acquisition image processing used to track vascular changes and amyloid depositions. While focusing presently on a model of AD, the described protocol is relevant to other CNS disorders where pathological cerebrovascular changes occur.

Longitudinal In Vivo Imaging of the Cerebrovasculature: Relevance to CNS Diseases

This manuscript describes a procedure to track the remodeling of the cerebrovasculature during amyloid plaque accumulation in vivo using longitudinal two-photon microscopy. A thinned-skull preparation enables the visualization of fluorescent dyes to assess the progression of cerebrovascular damage in a mouse model of Alzheimer&#39;s disease.

طولي<em&gt; في فيفو</em&gt; التصوير من Cerebrovasculature: الأقرب للأمراض الجهاز العصبي المركزي

Remodeling of the brain vasculature is a common trait of brain pathologies. In vivo imaging techniques are fundamental to detect cerebrovascular ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. To better understand the mechanism behind these surgical procedures, a rat partial liver transplantation (PLTx) model was established for relevant surgical studies. Because of the complexity of the rat PLTx model, a protocol with detailed descriptions is required. An article published previously reported a protocol in which ex vivo hepatectomy was used to achieve 50% rat PLTx. In contrast to this protocol, we introduced a re-arterialized PLTx with an in vivo 70% hepatectomy. An updated vessel-oriented hepatectomy was incorporated into the rat PLTx to refine the microsurgical procedure. The portal veins and hepatic arteries of the left lateral lobe and the median lobe were individually dissected and ligated before removal of the liver parenchyma, thereby decreasing the probability of bleeding in the remnant liver stump. Furthermore, an end-to-side vessel anastomosis between the common hepatic artery and the enlarged proper hepatic artery was introduced to re-arterialize the hepatic artery. By using this end-to-side vessel anastomosis technique, the diameter of the anastomosis was enlarged, thereby decreasing the difficulty of hand suture and maintaining a high rate of anastomotic patency. Moreover, the cuff anastomosis of the infrahepatic vena cava was slightly modified. A section of circumferential liver parenchyma around the vena cava of a recipient was preserved during cuff anastomosis to maintain the three-dimensional shape of the vascular lumen. This section of liver parenchyma was removed after completing the anastomosis. With this modification, the step involving placement of stay sutures was omitted, thereby further shortening the cuff anastomosis time. By using this protocol of rat PLTx, a low liver enzyme level, an intact liver lobular architecture and a high survival rate were achieved after microsurgery.

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Here, a protocol involving re-arterialized rat partial liver transplantation is presented. Specifically, 70% liver was resected in vivo by using an updated technique of vessel-oriented hepatectomy. The hepatic artery was reconstructed in an end-to-side manner. The cuff technique was modified to shorten the anastomosis time of the infrahepatic vena cava.

أرتيرياليزيد إعادة "زرع الكبد الجزئي الفئران" مع في فيفو المنحى السفينة 70% ظهرت

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...