التمويل المقدم من قبل الجامعة الغربية للعلوم الصحية كلية البصريات لDJC. شكر خاص لIrisa تام لتصميم الرسوم البيانية.

يجب الموافقة على جميع تربية الحيوانات والتجارب والتي تتم وفقا للمبادئ التوجيهية التي وضعتها اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام المؤسسة المعنية أو المتطلبات القانونية الأخرى. 1. رعاية الزرد <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على الزرد تحت الظروف القياسية في 28.5 درجة مئوية في دورة 10 ساعة داكنة 14 ساعة ضوء 16. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على الزرد الكبار في مناطق ذات كثافة خزان الأسماك حوالي 3 / L. </li></ol> 2. استجابة حركة العين (OKR) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بناء جهاز تسجيل OKR مخصصة باستخدام 14.5 سم القطر الدورية طبل، مجهر ستيريو مع إعدادات شدة الضوء قابل للتعديل (300-8،000 لوكس) وجهاز كمبيوتر (الشكل 1A). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إرفاق الكاميرا إلى المجهر من شأنها أن توفر البث المباشر على شاشة المجاورة والسماح لالتقاط الصور وتسجيل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> السيطرة على طبل الدورية باستخدام متحكم مرتبطة جهاز الكمبيوتر الذي سوف accommoتاريخ مختلف سرعة واتجاه التحديدات. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الأسماك في 0.016٪ تريكين لمدة 2-3 دقيقة ثم ضع السمك على منصة صغيرة مع العينين والخياشيم معلق فوق الحافة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع اسفنجة رقيقة / منشفة على جسم السمكة ويعلقون 2-3 قطع من الرغوة، وشكل لاستيعاب الأسماك، وأكثر من الأسماك للحفاظ على وظائفها. تم العثور على الحد من حركة ذيل السمكة أن يكون أحد الجوانب الهامة لتجميد دون أن تسبب إصابات للأسماك، وكان أفضل تحقيق ذلك باستخدام قطعة مسطحة من الرغوة. (الشكل 1B) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع السمك في خزان مملوء بالمياه أسطواني، التي تناسبها داخل البرميل الدورية للجهاز تسجيل OKR. استخدام مغناطيس على منصة لوضع الأسماك تستقيم، مع عيون حوالي 7.3 سم من على حافة البرميل. يجب الأسماك احياء من التخدير في غضون بضع دقائق - سوف تستأنف التنفس الطبيعي وينبغي مراعاة حركات العين العشوائية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع وباه صريف من 0.07 دورة في درجة (CPD) في طبلة الدورية وإشراك عناصر جهاز الكمبيوتر لبدء التناوب والتقاط الفيديو (تم استخدام سرعة 12 دورة في الدقيقة لهذه الورقة، ولكن ينبغي بسرعة 8-16 دورة في الدقيقة تعطي نتائج مماثلة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة يتم استخلاصها على OKR الأولي من قاعدة صريف، وقفة التناوب لفترة وجيزة، واستبدال صريف صريف مع أصغر (تردد أعلى المكاني). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر هذه العملية حتى لم يعد من الممكن استخلاصها على OKR. إعادة اختبار مع أصغر صريف التي تسبب OKR اتباع نهج درج تعديل ثم كرر باستخدام صريف التي فشلت في استثارة رد فعل للتحقق من فقدان OKR. ويمكن تكرار هذه العملية للتحقق من استجابة حقيقية لأصغر صريف كشفها إذا تغيرت صريف النهائية بالنسبة إلى الحدث الانقراض الأول. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحصول على قياسات حدة أحادي عن طريق وضع مطبق بلاستيكية سوداء على المشارب المجاورة للعين المعاكس. كرر الإجراء أعلاه (الخطوات 2،6-2،7). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl">الحصول على حدة من العين المعاكس من خلال تغيير موضع مطبق وتكرار الخطوات 2،6-2،7 مرة أخرى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لاحظ المسافة كل عين هو من المشارب أثناء إجراء الاختبار باستخدام شريط القياس المرجعية تحت خزان الأسماك بحيث يمكن حساب التدابير حدة دقيقة في الخطوات التالية. </li></ol> 3. حساب البصر <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحصول على حدة البصر عن طريق حساب وثيقة البرنامج القطري: <img alt="المعادلة 1" fo:content-width="0.7in" src="/files/ftp_upload/50832/50832eq1.jpg" width="70px" /> حيث هي المسافة من مركز العدسة إلى صريف، وساعة هي مدة دورة واحدة من أصغر صريف الذي لوحظ OKR (الشكل 1C). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لقياس حدة البصر مجتمعة، وبلغ متوسط ​​يتم استخدام قيمة من كل من اليسار والعين اليمنى. </li></ol>

<ol>
	<li>Brockerhoff, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+behavioral+screen+for+isolating+zebrafish+mutants+with+visual+system+defects.">A behavioral screen for isolating zebrafish mutants with visual system defects.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 92, 10545-10549 (1995).</li><li>Neuhauss, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+disorders+of+vision+revealed+by+a+behavioral+screen+of+400+essential+loci+in+zebrafish.">Genetic disorders of vision revealed by a behavioral screen of 400 essential loci in zebrafish.</a> J. Neurosci. 19, 8603-8615 (1999).</li><li>Schumann, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+objective+determination+of+visual+acuity+on+the+basis+of+the+optokinetic+nystagmus.">The objective determination of visual acuity on the basis of the optokinetic nystagmus.</a> Am. J. Optom. Arch. Am. Acad. Optom. 29, 575-583 (1952).</li><li>Gorman, J. J., Cogan, D. G., Gellis, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+apparatus+for+grading+the+visual+acuity+of+infants+on+the+basis+of+opticokinetic+nystagmus.">An apparatus for grading the visual acuity of infants on the basis of opticokinetic nystagmus.</a> Pediatrics. 19, 1088-1092 (1957).</li><li>Fulton, A. B., Manning, K. A., Dobson, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+behavioral+method+for+efficient+screening+of+visual+acuity+in+young+infants.+II.+Clinical+application.">A behavioral method for efficient screening of visual acuity in young infants. II. Clinical application.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 17, 1151-1157 (1978).</li><li>Huizinga, E., Van Der Meulen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vestibular+rotatory+and+optokinetic+reactions+in+the+pigeon.">Vestibular rotatory and optokinetic reactions in the pigeon.</a> Ann. Otol. Rhinol. Laryngol. 60, 927-947 (1951).</li><li>Tappeiner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+Acuity+and+Contrast+Sensitivity+of+Adult+Zebrafish.">Visual Acuity and Contrast Sensitivity of Adult Zebrafish.</a> Front. Zool. 9, 10 (2012).</li><li>Mueller, K. P., Schnaedelbach, O. D., Russig, H. D., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VisioTracker,+an+innovative+automated+approach+to+oculomotor+analysis.">VisioTracker, an innovative automated approach to oculomotor analysis.</a> J. Vis. Exp. (56), e3556 (2011).</li><li>Zou, S. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+the+optokinetic+response+to+study+visual+function+of+zebrafish.">Using the optokinetic response to study visual function of zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (36), e1742 (2010).</li><li>Mueller, K. P., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+measurements+of+the+optokinetic+response+in+adult+fish.">Quantitative measurements of the optokinetic response in adult fish.</a> J. Neurosci. Methods. 186, 29-34 (2010).</li><li>Li, L., Dowling, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dominant+form+of+inherited+retinal+degeneration+caused+by+a+non-photoreceptor+cell-specific+mutation.">A dominant form of inherited retinal degeneration caused by a non-photoreceptor cell-specific mutation.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 94, 11645-11650 (1997).</li><li>Ren, J. Q., McCarthy, W. R., Zhang, H., Adolph, A. R., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+visual+responses+of+wild-type+and+hypopigmented+zebrafish.">Behavioral visual responses of wild-type and hypopigmented zebrafish.</a> Vision Res. 42, 293-299 (2002).</li><li>Maaswinkel, H., Mason, B., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ENU-induced+late-onset+night+blindness+associated+with+rod+photoreceptor+cell+degeneration+in+zebrafish.">ENU-induced late-onset night blindness associated with rod photoreceptor cell degeneration in zebrafish.</a> Mech. Ageing Dev. 124, 1065-1071 (2003).</li><li>Stujenske, J. M., Dowling, J. E., Emran, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+bugeye+mutant+zebrafish+exhibits+visual+deficits+that+arise+with+the+onset+of+an+enlarged+eye+phenotype.">The bugeye mutant zebrafish exhibits visual deficits that arise with the onset of an enlarged eye phenotype.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 52, 4200-4207 (2011).</li><li>Veth, K. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+in+zebrafish+lrp2+result+in+adult-onset+ocular+pathogenesis+that+models+myopia+and+other+risk+factors+for+glaucoma.">Mutations in zebrafish lrp2 result in adult-onset ocular pathogenesis that models myopia and other risk factors for glaucoma.</a> PLoS Genet. 7, e1001310 (2011).</li><li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> THE ZEBRAFISH BOOK, A guide for the laboratory use of zebrafish (Danio rerio). , (2007).</li><li>Cagenello, R., Arditi, A., Halpern, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Binocular+enhancement+of+visual+acuity.">Binocular enhancement of visual acuity.</a> J. Opt. Soc. Am. A Opt. Image Sci. Vis. 10, 1841-1848 (1993).</li><li>Brockerhoff, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+the+optokinetic+response+of+zebrafish+larvae.">Measuring the optokinetic response of zebrafish larvae.</a> Nat. Protoc. 1, 2448-2451 (2006).</li><li>Hodel, C., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computer-based+analysis+of+the+optokinetic+response+in+zebrafish+larvae.">Computer-based analysis of the optokinetic response in zebrafish larvae.</a> CSH Protoc. 2008, pdb prot4961 (2008).</li><li>Huber-Reggi, S. P., Mueller, K. P., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+optokinetic+response+in+zebrafish+by+computer-based+eye+tracking.">Analysis of optokinetic response in zebrafish by computer-based eye tracking.</a> Methods Mol. Biol. 935, 139-160 (2013).</li><li>Tappeiner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+acuity+and+contrast+sensitivity+of+adult+zebrafish.">Visual acuity and contrast sensitivity of adult zebrafish.</a> Front. Zool. 9, 10 (2012).</li><li>Saszik, S., Bilotta, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+temperature+on+the+dark-adapted+spectral+sensitivity+function+of+the+adult+zebrafish.">The effects of temperature on the dark-adapted spectral sensitivity function of the adult zebrafish.</a> Vision Res. 39, 1051-1058 (1999).</li><li>Haug, M. F., Biehlmaier, O., Mueller, K. P., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+acuity+in+larval+zebrafish:+behavior+and+histology.">Visual acuity in larval zebrafish: behavior and histology.</a> Front. Zool. 7, 8 (2010).</li><li>Curcio, C. A., Sloan, K. R., Kalina, R. E., Hendrickson, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+photoreceptor+topography.">Human photoreceptor topography.</a> J. Comp. Neurol. 292, 497-523 (1990).</li><li>Kalloniatis, M., Luu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Visual Acuity. , (1995).</li></ol>

والكتاب ليس لديهم ما يكشف.

في بعض الأحيان قد الأسماك الهرب في خزان المياه. فمن الأهمية بمكان أن لشل حركة الذيل. بالإضافة إلى ذلك تم العثور على استخدام اسفنجة رقيقة / منشفة على جسم السمكة أيضا أنها لا تقدر بثمن لحفظ الأسماك مع وقف التنفيذ لفترات طويلة من الزمن. كنا قادرين على إبقاء الأسماك يجمد لأكثر من 30 دقيقة باستخدام هذا الإجراء دون الإضرار الأسماك. هذا القدر من الوقت أكثر من كافية للقيام مجهر وكلاهما أحادي البراعة. عرض صريف يمكن القيام به إما كما هو موضح هنا وفي أماكن أخرى باستخدام أسطوانة دوارة جسديا أو من خلال تقديم العرض الرقمي 18-22. كلا النوعين لها مزايا وعيوب محددة. اخترنا لاستخدام التناوب المادية على حد سواء لأسباب التكلفة والمواصفات الفنية. باستثناء الكمبيوتر ومعدات التصوير، وجهاز OKR الموصوفة هنا يمكن بناء لنحو 150 دولارا. وOKR هو وسيلة موضوعية لتحديد فيماالسياقية حدة في الزرد الكبار. بينما العديد من المقايسات visuomotor أخرى لرؤية استخدمت في التجارب السابقة وتم إنجازه حتى كهربية الشبكية بنجاح في عيون الزرد الكبار، على الرغم من أنه لم يتم الاستفادة منها بشكل كبير، يفتح OKR الزرد الكبار الباب أمام العديد من الظروف التجريبية الجديدة 22. وقد أثبتت هذه الدراسة فائدة في OKR في قياس التغيرات البصر مع مرور الوقت، وتحديد الفرق البصر في النماذج أمراض العين، والبصر في تحديد أحادي. ومن المثير للاهتمام، والكبار الرؤية الزرد بالمقارنة مع رؤية الإنسان (20/20) ما يقرب من 20/1، 000 (عندما يتم تحويل وثيقة البرنامج القطري ل0.60 -0.3 logMAR). على الرغم من أن هذا قد يبدو والفقراء، والعيون الزرد هي مناسبة بشكل جيد للغاية لبيئتها. على الرغم من المهمة البصرية من يبحث من خلال 6.5 سم من الماء، وبضعة ملليمترات من البولي، وآخر سنتيمتر من الهواء، والأسماك أداء جيدا جدا! وجدنا أن حدة الزرد الكبار هو أبوالتحرير 70٪ من ما يمكن توقعها نظرا تباعد مبصرة بهم. 23 التباين مع أن الأداء البشري الأمثل ~ 20/12، وهي عبارة عن 80٪ من توقع 20/10، وتقنية OKR لقياس القدرة البصرية في الزرد الكبار مثير للإعجاب 24 ، 25. إن تقنية قياس العين البراعة البصرية مستقلة تسمح للدراسات التي يمكن أن تعالج عين واحدة والأخرى المستخدمة كمجموعة تحكم. بالإضافة إلى ذلك، يمكن رصد الأسماك مع التنمية العين غير المتماثلة مثل lrp2/bugeye أو الأسماك التي تطور الساد بشكل أكثر دقة. تجدر الإشارة إلى أن الرعاية يجب أن يؤخذ لقياس بدقة المسافة من العيون إلى المشارب وتسد حقل كامل من الرؤية. هذه التقنية يجب أن تفتح الباب لتدابير أكثر دقة وتحديدا من وظيفة البصرية الزرد.

الزرد (دانيو rerio) هي نموذج جيد لدراسة علم وظائف الأعضاء البصرية نظرا لتشابه الشبكية لالفقاريات الأخرى، ودورة حياة قصيرة فيها، وتوافر المسوخ المعدلة وراثيا 1،2. وحركة العين العاكسة / استجابة / رأرأة (OKR) هو مزيج من السعي نحو سلس وحركات العين السريعة حركة العين. لأكثر من 60 عاما وقد أثبتت الأطباء أن OKR يمكن استخدامها لقياس موضوعي حدة البصر لدى المرضى ومفيد خاصة لتحديد قدرات الأطفال البصرية 3-5. استخدام سجلت أول من OKR في الحيوانات كان يستخدم الحمام في 6 1950S. في الآونة الأخيرة، أصبحت OKR أداة قيمة لتقييم وظيفة البصرية في الزرد اليرقات وغالبا ما تستخدم للكشف عن طفرات الجينية التي لديها 1،2 ضعف البصر. في حين أن OKR قد استخدمت على نطاق واسع لتحديد وظيفة البصرية في الزرد اليرقات، ومؤخرا فقط تم التدليل عليه في حمار وحشي الكبارالصيد 7-10. ورقة أعدها مؤخرا Tappeiner وآخرون. يستخدم نظام optomotor المتاحة تجاريا التي تستخدم عادة للفئران، OptoMotry، لإثبات أن البصر من الزرد الكبار يبقى ثابتا تماما، ~ 0.59 دورة في درجة (وثيقة البرنامج القطري)، حتى عبر مختلف السرعات الزاوي 7 . على الرغم من أن OKR وقد ثبت أن تكون مفيدة للغاية في الدراسات الزرد اليرقات، وقد استخدمت أساليب أخرى للسلوك البصرية في البالغين الزرد مع درجات متفاوتة من النجاح. أظهر فحص استجابة الهروب التي البيضاء وروبي الزرد، سواء المسوخ تصبغ، خفضت الاستجابات البصرية في ظروف الضوء الساطع 11،12. كما حددت هذه نفس الاستجابة الهروب الفحص بنجاح العمى الليلي د المسوخ، وإن كان في عمر 2 سنة من سن ال 13. ومع ذلك، فإن فحص استجابة الهروب لا يخلو من العيوب. فمن الصعب أن ينسب إلى وظيفة البصرية بالضبط وما هي إلا approximatio الإجمالين التغيرات البصرية - وهذا يعني أنه يأخذ تغيير كبير قبل أن يتم التعرف على التغيير. طريقة أخرى التي تم تطويرها لتحديد الزرد الكبار ذوي العاهات البصرية هو الرد optomotor (ريال عماني) 11. في هذا الاختبار، يتم وضع الأسماك في خزان دائري مع عمود مبهمة في المركز. خطوط سوداء وبيضاء تدور حول الخزان ويتم تكليف السمك مع السباحة في اتجاه الحركة شريطية. مثل استجابة الهروب، يركز على قدرات ريال عماني visuomotor من الزرد الكبار. ولكن تم استخدامه بنجاح لتحديد السمك يعانون من إعاقات بصرية، مثل المسوخ lrp2/bugeye 14. وlrp2/bugeye جسامة المقلة المعرض الزرد، ضغط العين المرتفع، تضاءلت ريال عماني، وتنكس الشبكية التدريجي 14،15. وقد استخدمت العديد من الدراسات قدرات visuomotor في الزرد الكبار، التي غالبا ما تكون ذاتية ولا يمكن أن يكون ضليع في الرياضياتتحليل itatively. باستخدام OKR، يمكن للمرء أن دراسة البصر من الأسماك البالغة أكثر موضوعية. بنينا لدينا جهاز OKR الخاصة، على غرار تلك المستخدمة في البداية لدراسات اليرقات 1. في هذه الدراسة علينا أن نظهر أن OKR يمكن استخدامها لحساب كل من أحادي وحدة البصر مجهر في الزرد.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="593">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:209px;">Super Low Light Black White Video Security Camera</td>
			<td style="width:143px;">Super Circuits</td>
			<td style="width:119px;">PC164CEX-2</td>
			<td style="width:124px;"> Any low light camera may be used</td>
		</tr>
		<tr height="106">
			<td height="106" style="height:106px;width:209px;">Arduino Duemilanove microcontroller</td>
			<td style="width:143px;">Adafruit Industries</td>
			<td style="width:119px;"> </td>
			<td style="width:124px;"> The Arduino Uno is also compatible with the speed control software.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tricaine Methanesulfonate</td>
			<td>VWR</td>
			<td>101107-950</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the optokinetic response as a quantitative measure of visual acuity in zebrafish

الزرد هي نموذج ثبت للبحوث الرؤية، ولكن العديد من الأساليب السابقة ركزت عموما على الأسماك اليرقات أو تظاهر استجابة بسيطة. في الآونة الأخيرة أصبح السلوك البصرية الكبار في الزرد من الفائدة، ولكن أساليب لقياس استجابات محددة هي الجديدة القادمة. لمعالجة هذه الفجوة، شرعنا في وضع منهجية للاستفادة مرارا وبدقة استجابة حركة العين (OKR) لقياس حدة البصر في الزرد الكبار. نحن هنا تبين أن حدة الزرد الكبار البصرية يمكن قياسها، بما في ذلك كل البراعة مجهر وأحادي. لأنه لم يتم المساس الأسماك أثناء الإجراء، وحدة البصر ويمكن قياس ومقارنة مدى فترات قصيرة أو طويلة من الزمن. ويمكن أيضا قياسات حدة الإبصار وصفها هنا أن يتم السماح بسرعة لإنتاجية عالية وإجراءات البصرية إضافية إذا لزم الأمر. هذا النوع من التحليل يفضي إلى دراسات التدخل المخدرات أو التحقيقات في تطور المرض.

OKR الأجهزة الوظيفية الجهاز OKR كما هو موضح أعلاه ومبين في الشكل 1 وظائف مع الحد الأدنى من الصيانة. كما لوحظ في الخطوة 2.3، شل حركة الذيل أمر بالغ الأهمية للحفاظ على الأسماك ضبط النفس أثناء التسجيل. يجمد بما فيه الكفاية، والأسماك يمكن أن تبقى في الجهاز OKR لفترات طويلة من الزمن. وبالتالي، ينبغي توخي الحذر خلال الخطوات الأولية الشلل، بحيث المزيد من البيانات التي يمكن جمعها عن كل فرد الأسماك. قياسات حدة الإبصار وأثارت OKR مجهر بسهولة في الأسماك البالغة العادية. باتباع الإجراء أعلاه يمكن للمرء أن يجد البراعة البصرية لالزرد العديد من الأعمار (الشكل 2). كان أفضل حدة مكانية مجهر سجلنا 0.74 ثيقة البرنامج القطري. كما لوحظ في الشكل 2، وحدة مجهر يزيد عموما مع التقدم في العمر (ن = 46، P = 0.002 ANOVA باستخدام SPSS V14)، ولكن مستويات قبالةبعد حوالي 12 شهرا من العمر. عندما قارنا قياس حدة البصر في 5 الشهر النوع البري القديم الأسماك العمر المتطابقة الأسماك lrp2/bugeye، وجدنا أن الأسماك lrp2/bugeye قد خفضت بشكل ملحوظ حدة (ع &lt;0.001؛ النوع البري: 0.49 ± 0.05 وثيقة البرنامج القطري، ن = 8؛ lrp2/bugeye: 0.35 ± 0.06، ن = 10، تي الطالب اختبار باستخدام Excel). قبل الاغلاق العين اليمنى والبصر للعين اليسرى ويمكن تحديد والعكس بالعكس. بالمقارنة مع حدة مجهر، لوحظ الجمع مجهر بالمثل لرؤية الإنسان 17 (الشكل 3). كانت حدة مجهر عموما 5-10٪ أفضل من أي حق (OD) أو اليسار (OS) البراعة تقاس بشكل مستقل. بالنسبة لبعض الأسماك الفردية كان الفارق تحسن 25٪. <img alt="الشكل 1" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50832/50832fig1.jpg" width="500px" /> الشكل 1. ريكو OKRrding. A) ويتكون الجهاز OKR من 14.5 سم القطر الدورية طبل والمجهر مع إعدادات شدة الضوء قابل للتعديل (300-8،000 لوكس). توفر كاميرا البث المباشر على شاشة المجاورة. يتم حساب طبل الدورية لديه مختلف ضبط السرعة في كل اتجاه عقارب الساعة وعكس عقارب الساعة الاتجاهات وتبادل حواجز شبكية التردد المكاني يتم إدراج وإزالة حسب الحاجة. يتم تأمينها ب) الأسماك ووضعها في وسط طبل بالتناوب. C) دورات لكل درجة (CPD) = باستخدام وثيقة البرنامج القطري <img alt="" src="img2.png" /> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50832/50832fig1highres.jpg" target="_blank">انقر هنا لمشاهدة صورة بشكل اكبر</a> . <img alt="الرقم 2" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50832/50832fig2.jpg" width="500px" /> الشكل 2. يتغير البصر مع تقدم العمر. ويبين الرسم البياني البراعة البصرية مستقلة قياس 5 -<html> 15 أشهر في العمر. يزيد من حدة البصر عادة على مدار السنة الأولى من التنمية ومن ثم ذيول قبالة قليلا في 15 شهرا من العمر (ع = 0.002 ANOVA باستخدام SPSS V14). كل نقطة قد تمثل إما 1 أو عدة الأسماك. يتم قياس حدة الإبصار في دورة / درجة (وثيقة البرنامج القطري). (ن = 46 المجموع؛ 8 في 5 أشهر، 4 في 6 أشهر و 7 في 8 أشهر و 6 في 9 أشهر، و 11 في 10 أشهر، 2 في 11 شهرا؛ 2 في 12 شهرا، و 6 في 15 شهرا). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50832/50832fig2highres.jpg" target="_blank">اضغط هنا لمشاهدة صورة بشكل اكبر</a> . <img alt="الرقم 3" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50832/50832fig3.jpg" width="500px" /> الرقم 3. مجهر البصر تأثير الجمع. مجهر (OU) البصر بشكل عام أعلى بالمقارنة مع حق (OD) أو اليسار (OS) البراعة العين. في هذه المجموعة خاصة كانت البراعة OS أقل من ذلك بكثير. (* ع = 0.006، N = 8)jove.com/files/ftp_upload/50832/50832fig3highres.jpg &quot;الهدف =&quot; _blank &quot;&gt; اضغط هنا لمشاهدة صورة أكبر.

Watch this Scientific Journal Video about The Optokinetic Response as a Quantitative Measure of Visual Acuity in Zebrafish at JoVE.com

The Optokinetic Response as a Quantitative Measure of Visual Acuity in Zebrafish

وقد الزرد أداة قيمة بالنسبة للعديد من المجالات البحثية. نحن هنا يبرهن على وجود طريقة للحصول على رد البصرية وحساب البصر وظيفية في الزرد الكبار.

استجابة حركة العين باعتبارها قياس الكمي لحدة البصر في الزرد

Zebrafish are a proven model for vision research, however many of the  earlier methods generally focused on larval fish or demonstrated a simple  ...

the-optokinetic-response-as-quantitative-measure-visual-acuity

Research

JoVE Journal

Neuroscience

20.3K Views.  Western University of Health Sciences.  وقد الزرد أداة قيمة بالنسبة للعديد من المجالات البحثية. نحن هنا يبرهن على وجود طريقة للحصول على رد البصرية وحساب البصر وظيفية في الزرد الكبار. 

Video: The Optokinetic Response as a Quantitative Measure of Visual Acuity in Zebrafish

Hyponeophagia: A Measure of Anxiety in the Mouse

Before the present day, when fast-acting and potent rodenticides such as alpha-chloralose were not yet in use, the work of pest controllers was often hampered by a phenomenon known as "bait shyness". Mice and rats cannot vomit, due to the tightness of the cardiac sphincter of the stomach, so to overcome the problem of potential food toxicity they have evolved a strategy of first ingesting only very small amounts of novel substances. The amounts ingested then gradually increase until the animal has determined whether the substance is safe and nutritious. So the old rat-catchers would first put a palatable substance such as oatmeal, which was to be the vehicle for the toxin, in the infested area. Only when large amounts were being readily consumed would they then add the poison, in amounts calculated not to affect the taste of the vehicle. The poisoned bait, which the animals were now readily eating in large amounts, would then swiftly perform its function.
Bait shyness is now used in the behavioural laboratory as a way of measuring anxiety. A highly palatable but novel substance, such as sweet corn, nuts or sweetened condensed milk, is offered to the mice (or rats) in a novel situation, such as a new cage. The latency to consume a defined amount of the new food is then measured.
Robert M.J. Deacon can be reach at <a href="mailto:robert.deacon@psy.ox.ac.uk">robert.deacon@psy.ox.ac.uk</a>

Mice and rats, due to their innate cautiousness, are initially slow in consuming a novel food, particularly in a novel place. This hyponeophagia can readily be measured in the laboratory, even though laboratory animals are much less anxious than their wild counterparts

Hyponeophagia : قياس القلق في الماوس

Before the present day, when fast-acting and potent rodenticides such as alpha-chloralose were not yet in use, the work of pest controllers was often ...

A Dual Tracer PET-MRI Protocol for the Quantitative Measure of Regional Brain Energy Substrates Uptake in the Rat

We present a method for comparing the uptake of the brain&#39;s two key energy substrates: glucose and ketones (acetoacetate [AcAc] in this case) in the rat. The developed method is a small-animal positron emission tomography (PET) protocol, in which&#160;11C-AcAc and 18F-fluorodeoxyglucose (18F-FDG) are injected sequentially in each animal. This dual tracer PET acquisition is possible because of the short half-life of 11C (20.4 min). The rats also undergo a magnetic resonance imaging (MRI) acquisition seven days before the PET protocol. Prior to image analysis, PET and MRI images are coregistered to allow the measurement of regional cerebral uptake (cortex, hippocampus, striatum, and cerebellum). A quantitative measure of 11C-AcAc and 18F-FDG brain uptake (cerebral metabolic rate; &#956;mol/100 g/min) is determined by kinetic modeling using the image-derived input function (IDIF) method. Our new dual tracer PET protocol is robust and flexible; the two tracers used can be replaced by different radiotracers to evaluate other processes in the brain. Moreover, our protocol is applicable to the study of brain fuel supply in multiple conditions such as normal aging and neurodegenerative pathologies such as Alzheimer&#39;s and Parkinson&#39;s diseases.

Small-animal positron emission tomography enables the assessment of the brain&#39;s two main energy substrates:&#160;glucose and ketones. In the present method, 11C-acetoacetate and 18F-fluorodeoxyglucose are injected sequentially in each animal, and their uptake is measured quantitatively in specific brain regions determined from the magnetic resonance images.

We present a method for comparing the uptake of the brain&#39;s two key energy substrates: glucose and ketones (acetoacetate [AcAc] in this case) in the ...

Electroretinogram Analysis of the Visual Response in Zebrafish Larvae

The electroretinogram (ERG) is a noninvasive electrophysiological method for determining retinal function. Through the placement of an electrode on the surface of the cornea, electrical activity generated in response to light can be measured and used to assess the activity of retinal cells in vivo. This manuscript describes the use of the ERG to measure visual function in zebrafish. Zebrafish have long been utilized as a model for vertebrate development due to the ease of gene suppression by morpholino oligonucleotides and pharmacological manipulation. At 5-10 dpf, only cones are functional in the larval retina. Therefore, the zebrafish, unlike other animals, is a powerful model system for the study of cone visual function in vivo. This protocol uses standard anesthesia, micromanipulation and stereomicroscopy protocols that are common in laboratories that perform zebrafish research. The outlined methods make use of standard electrophysiology equipment and a low light camera to guide the placement of the recording microelectrode onto the larval cornea. Finally, we demonstrate how a commercially available ERG stimulator/recorder originally designed for use with mice can easily be adapted for use with zebrafish. ERG of larval zebrafish provides an excellent method of assaying cone visual function in animals that have been modified by morpholino oligonucleotide injection as well as newer genome engineering techniques such as Zinc Finger Nucleases (ZFNs), Transcription Activator-Like Effector Nucleases (TALENs), and Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPR)/Cas9, all of which have greatly increased the efficiency and efficacy of gene targeting in zebrafish. In addition, we take advantage of the ability of pharmacological agents to penetrate zebrafish larvae to evaluate the molecular components that contribute to the photoresponse. This protocol outlines a setup that can be modified and used by researchers with various experimental goals.

We present a method for the electroretinographic (ERG) analysis of zebrafish larvae utilizing micromanipulation and electroretinography techniques. This is a simple and straightforward method for assaying visual function of zebrafish larvae in vivo.

تحليل مخطط كهربية الشبكية من الاستجابة البصرية في الزرد اليرقات

The electroretinogram (ERG) is a noninvasive electrophysiological method for determining retinal function. Through the placement of an electrode on the ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise from extra-retinal sources. Ex vivo ERG provides an efficient method to dissect the function of retinal cells directly from an intact isolated retina of animals or donor eyes. In addition, ex vivo ERG can be used to test the efficacy and safety of potential therapeutic agents on retina tissue from animals or humans. We show here how commercially available in vivo ERG systems can be used to conduct ex vivo ERG recordings from isolated mouse retinas. We combine the light stimulation, electronic and heating units of a standard in vivo system with custom-designed specimen holder, gravity-controlled perfusion system and electromagnetic noise shielding to record low-noise ex vivo ERG signals simultaneously from two retinas with the acquisition software included in commercial in vivo systems. Further, we demonstrate how to use this method in combination with pharmacological treatments that remove specific ERG components in order to dissect the function of certain retinal cell types.

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Ex vivo ERG can be used to record electrical activity of retinal cells directly from isolated intact retinas of animals or humans. We demonstrate here how common in vivo ERG systems can be adapted for ex vivo ERG recordings in order to dissect the electrical activity of retinal cells.

متزامنة<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; اختبار وظيفي اثنين من شبكية العين من قبل<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; نظام مخطط كهربية

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...

Drosophila Courtship Conditioning As a Measure of Learning and Memory

Many insights into the molecular mechanisms underlying learning and memory have been elucidated through the use of simple behavioral assays in model organisms such as the fruit fly, Drosophila melanogaster. Drosophila is useful for understanding the basic neurobiology underlying cognitive deficits resulting from mutations in genes associated with human cognitive disorders, such as intellectual disability (ID) and autism. This work describes a methodology for testing learning and memory using a classic paradigm in Drosophila known as courtship conditioning. Male flies court females using a distinct pattern of easily recognizable behaviors. Premated females are not receptive to mating and will reject the male&#39;s copulation attempts. In response to this rejection, male flies reduce their courtship behavior. This learned reduction in courtship behavior is measured over time, serving as an indicator of learning and memory. The basic numerical output of this assay is the courtship index (CI), which is defined as the percentage of time that a male spends courting during a 10 min interval. The learning index (LI) is the relative reduction of CI in flies that have been exposed to a premated female compared to na&#239;ve flies with no previous social encounters. For the statistical comparison of LIs between genotypes, a randomization test with bootstrapping is used. To illustrate how the assay can be used to address the role of a gene relating to learning and memory, the pan-neuronal knockdown of Dihydroxyacetone phosphate acyltransferase (Dhap-at) was characterized here. The human ortholog of Dhap-at, glyceronephosphate O-acyltransferase (GNPT), is involved in rhizomelic chondrodysplasia punctata type 2, an autosomal-recessive syndrome characterized by severe ID. Using the courtship conditioning assay, it was determined that Dhap-at is required for long-term memory, but not for short-term memory. This result serves as a basis for further investigation of the underlying molecular mechanisms.

Drosophila Courtship Conditioning As a Measure of Learning and Memory

This protocol describes a Drosophila learning and memory assay called courtship conditioning. This classic assay is based on a reduction of male courtship behavior after sexual rejection by a non-receptive premated female. This natural form of behavioral plasticity can be used to test learning, short-term memory, and long-term memory.

تكييف قنبلة ذبابة الفاكهة كتدبير للتعلم والذاكرة

Many insights into the molecular mechanisms underlying learning and memory have been elucidated through the use of simple behavioral assays in model ...

Using Optical Coherence Tomography and Optokinetic Response As Structural and Functional Visual System Readouts in Mice and Rats

Optical coherence tomography (OCT) is a fast, non-invasive, interferometric technique allowing high-resolution retinal imaging. It is an ideal tool for the investigation of processes of neurodegeneration, neuroprotection and neuro-repair involving the visual system, as these often correlate well with retinal changes. As a functional readout, visually evoked compensatory eye and head movements are commonly used in experimental models involving the visual function. Combining both techniques allows a quantitative in vivo investigation of structure and function, which can be used to investigate the pathological conditions or to evaluate the potential of novel therapeutics. A great benefit of the presented techniques is the possibility to perform longitudinal analyses allowing the investigation of dynamic processes, reducing variability and cuts down the number of animals needed for the experiments. The protocol described aims to provide a manual for acquisition and analysis of high quality retinal scans of mice and rats using a low cost customized holder with an option to deliver inhalational anesthesia. Additionally, the proposed guide is intended as an instructional manual for researchers using optokinetic response (OKR) analysis in rodents, which can be adapted to their specific needs and interests.

A detailed protocol for the assessment of structural and visual readouts in rodents by optical coherence tomography and optokinetic response is presented. The results provide valuable insights for ophthalmologic as well as neurologic research.

استخدام التصوير المقطعي التماسك البصري والاستجابة أوبتوكينيتيك كقراءات النظام المرئي الهيكلية والوظيفية في الفئران والجرذان

Optical coherence tomography (OCT) is a fast, non-invasive, interferometric technique allowing high-resolution retinal imaging. It is an ideal tool for ...

A Scalable Model to Study the Effects of Blunt-Force Injury in Adult Zebrafish

Blunt-force traumatic brain injuries (TBI) are the most common form of head trauma, which spans a range of severities and results in complex and heterogenous secondary effects. While there is no mechanism to replace or regenerate the lost neurons following a TBI in humans, zebrafish possess the ability to regenerate neurons throughout their body, including the brain. To examine the breadth of pathologies exhibited in zebrafish following a blunt-force TBI and to study the mechanisms underlying the subsequent neuronal regenerative response, we modified the commonly used rodent Marmarou weight drop for the use in adult zebrafish. Our simple blunt-force TBI model is scalable, inducing a mild, moderate, or severe TBI, and recapitulates many of the phenotypes observed following human TBI, such as contact- and post-traumatic seizures, edema, subdural and intracerebral hematomas, and cognitive impairments, each displayed in an injury severity-dependent manner. TBI sequelae, which begin to appear within minutes of the injury, subside and return to near undamaged control levels within 7 days post-injury. The regenerative process begins as early as 48 hours post-injury (hpi), with the peak cell proliferation observed by 60 hpi. Thus, our zebrafish blunt-force TBI model produces characteristic primary and secondary injury TBI pathologies similar to human TBI, which allows for investigating disease onset and progression, along with the mechanisms of neuronal regeneration that is unique to zebrafish.

We modified the Marmarou weight drop model for adult zebrafish to examine a breadth of pathologies following blunt-force traumatic brain injury (TBI) and the mechanisms underlying subsequent neuronal regeneration. This blunt-force TBI model is scalable, induces a mild, moderate, or severe TBI, and recapitulates injury heterogeneity observed in human TBI.

نموذج قابل للتطوير لدراسة آثار إصابة القوة الحادة في سمك الحمار الوحشي البالغ

Blunt-force traumatic brain injuries (TBI) are the most common form of head trauma, which spans a range of severities and results in complex and ...

Shuttle Box Assay as an Associative Learning Tool for Cognitive Assessment in Learning and Memory Studies using Adult Zebrafish

Cognitive deficits, including impaired learning and memory, are a primary symptom of various developmental and age-related neurodegenerative diseases and traumatic brain injury (TBI). Zebrafish are an important neuroscience model due to their transparency during development and robust regenerative capabilities following neurotrauma. While various cognitive tests exist in zebrafish, most of the cognitive assessments that are rapid examine non-associative learning. At the same time, associative-learning assays often require multiple days or weeks. Here, we describe a rapid associative-learning test that utilizes an adverse stimulus (electric shock) and requires minimal preparation time. The shuttle box assay, presented here, is simple, ideal for novice investigators, and requires minimal equipment. We demonstrate that, following TBI, this shuttle box test reproducibly assesses cognitive deficit and recovery from young to old zebrafish. Additionally, the assay is adaptable to examine either immediate or delayed memory. We demonstrate that both a single TBI and repeated TBI events negatively affect learning and immediate memory but not delayed memory. We, therefore, conclude that the shuttle box assay reproducibly tracks the progression and recovery of cognitive impairment.

Learning and memory are potent metrics in studying either developmental, disease-dependent, or environmentally induced cognitive impairments. Most cognitive assessments require specialized equipment and extensive time commitments. However, the shuttle box assay is an associative learning tool that utilizes a conventional gel box for rapid and reliable assessment of adult zebrafish cognition.

المكوك مربع المقايسة كأداة التعلم النقابي للتقييم المعرفي في التعلم ودراسات الذاكرة باستخدام حمار وحشي الكبار

Cognitive deficits, including impaired learning and memory, are a primary symptom of various developmental and age-related neurodegenerative diseases and ...

تقييم الاستجابات المنعكسة الحركية البصرية في الفئران: بروتوكول جديد عالي الدقة

Quantification of Visual Feature Selectivity of the Optokinetic Reflex in Mice

The optokinetic reflex (OKR) is an essential innate eye movement that is triggered by the global motion of the visual environment and serves to stabilize retinal images. Due to its importance and robustness, the OKR has been used to study visual-motor learning and to evaluate the visual functions of mice with different genetic backgrounds, ages, and drug treatments. Here, we introduce a procedure for evaluating OKR responses of head-fixed mice with high accuracy. Head fixation can rule out the contribution of vestibular stimulation on eye movements, making it possible to measure eye movements triggered only by visual motion. The OKR is elicited by a virtual drum system, in which a vertical grating presented on three computer monitors drifts horizontally in an oscillatory manner or unidirectionally at a constant velocity. With this virtual reality system, we can systematically change visual parameters like spatial frequency, temporal/oscillation frequency, contrast, luminance, and the direction of gratings, and quantify tuning curves of visual feature selectivity. High-speed infrared video-oculography ensures accurate measurement of the trajectory of eye movements. The eyes of individual mice are calibrated to provide opportunities to compare the OKRs between animals of different ages, genders, and genetic backgrounds. The quantitative power of this technique allows it to detect changes in the OKR when this behavior plastically adapts due to aging, sensory experience, or motor learning; thus, it makes this technique a valuable addition to the repertoire of tools used to investigate the plasticity of ocular behaviors.

تسليط الضوء على المؤلف: نهج دقيق وكمي لدراسة انتقائية الميزة البصرية لمنعكس الحركة البصرية في الفئران 

Here, we describe a standard protocol for quantifying the optokinetic reflex. It combines virtual drum stimulation and video-oculography, and thus allows precise evaluation of the feature selectivity of the behavior and its adaptive plasticity.

القياس الكمي لانتقائية الميزة البصرية لمنعكس الحركة البصرية في الفئران

The optokinetic reflex (OKR) is an essential innate eye movement that is triggered by the global motion of the visual environment and serves to stabilize ...