This work has been financially supported by Grants-in-Aid for Scientific Research from the Ministry of Education, Culture, Sports, Science, and Technology (No. 25248027 to M.S.).

التحضير 1. عينة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنقية أحادية استجابة درجات الحرارة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حل 20 غراما من N -isopropylacrylamide (NIPA) في 100 مل من التولوين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تصفية حل تحت الشفط لإزالة الغبار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خلط الراشح مع 500 مل من الأثير البترول. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع وعاء التفاعل في حمام الماء المثلج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحريك الحل حتى يتم ترسيب أحادية (عادة 30 دقيقة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تصفية حل تحت شفط للحصول على أحادية المترسبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجفيف أحادية تحت ضغط منخفض (100 باسكال) بين عشية وضحاها. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحضير محلول البوليمر استجابة درجات الحرارة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ديغا 20 مل من الماء منزوع الأيونات ل 1.0 دقيقة باستخدام مضخة الحجاب الحاجز. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حل 780.8 ملغ من NIPA تنقيته في 9.5 مل من الماء نزع الغاز ومنزوع الأيونات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع وعاء التفاعل في حمام الماء المثلج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> درع رد فعل منضوء من خلال تغطية الجهاز مع رقائق الألومنيوم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحريك الحل بلطف لمدة 10 دقيقة في حين قدم تدفق معتدلة من الغاز هارون بلطف عن طريق طرف ماصة تعلق على اسطوانة غاز مع أنبوب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 11.9 ميكرولتر من N، N، N &#39;، N&#39; -tetramethylethylenediamine إلى حل عن طريق micropipette. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحريك حل ل1.0 دقيقة في حين قدم غاز هارون، كما ذكر في الخطوة 1.2.5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع التحريك العينة، ويحل 4.0 ملغ من فوق كبريتات الأمونيوم في 0.5 مل من الماء نزع الغاز ومنزوع الأيونات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مزيج من محلول العينة (من الخطوة 1.2.7) والحل فوق كبريتات الأمونيوم (من الخطوة 1.2.8). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحريك الحل لمدة 30 ثانية في حين قدم غاز AR، كما ذكر في الخطوة 1.2.5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغطية الحل مع رقائق الألومنيوم والاحتفاظ بها في الثلاجة (4 درجة مئوية) بين عشية وضحاها. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد يتصاعد عينة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع 60 ميكرولتر من محلول العينة (منخطوة 1.2.11) في شريحة تجويف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغطية الحل مع غطاء زجاجي دائري. يجب الحرص على عدم فقاعات فخ الهواء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحل إزالة الزائدة باستخدام micropipette ومختبر مناديل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ختم العينة مع الغراء. اسمحوا الجافة الغراء في درجة حرارة الغرفة (عادة 6 ساعات). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد شريحة أخرى مليئة اتكس 0.1٪ بالوزن البوليسترين (100 نانومتر الجسيمات القطر) تعليق باتباع الخطوات 1.3.1-1.3.4. يستخدم هذه الشريحة كمعيار. </li></ol></li></ol> 2. حجم الجسيمات قياس مع الإنارة الديناميكي التشتت مجهر <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعظيم الاستفادة من أداة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع الشريحة تعليق البوليسترين اللاتكس (من الخطوة 1.3.5) على مسرح المجهر المقلوب. الجانب غطاء زجاجي يجب ان يواجه الهبوط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع المثبط شعاع أمام كاشف (وهو الضوئي الانهيار وautocorrelator). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق شعاع الليزر (ليزر الحالة الصلبة، λ = 488 نانومتر، 30 ميغاواط، مستمرةموجة) لعينة من خلال العدسة الشيئية (10 ×). جزء من الضوء المنعكس يمر عبر مرآة إطلاق المجهر ولوحظ بواسطة كاميرا CCD التي شنت في ميناء جانب المجهر (الشكل 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضبط ارتفاع عدسة موضوعية لتحديد نقطة محورية في تعليق عينة عن طريق تحويل ارتفاع عدسة الهدف من موقع منخفض إلى مرتفع. خلال هذا الإجراء، يتم تركيز الصورة ينعكس ثلاث مرات: في سطح الزجاج غطاء، في واجهة بين الزجاج غطاء والعينة، وعلى واجهة بين العينة والزجاج ثقب الشرائح. تعيين نقطة الوصل بين النقاط الثانية والثالثة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخفيف شدة الضوء المتناثرة من خلال تغيير قوة الليزر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدخال الضوء المتناثرة في كاشف عن طريق إزالة المثبط شعاع أمام كاشف. هذه الوحدة يقيس العلاقة وقت شدة الضوء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعيين الثقب (φ = 50 ميكرون) betwالتابعين المجهر وكاشف لتحقيق التأثير متحد البؤر. ضبط الموقف من الثقب إلى تحقيق أقصى قدر من شدة الضوء في كاشف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس وظيفة ارتباط وقت شدة الضوء المتناثرة لمدة 30 ثانية قبل بدء تشغيل خاسسرح عن طريق الكمبيوتر. وكثيرا ما أعرب عن وظيفة ارتباط يقاس ز (2) (ر) - 1، حيث t هي المرة ارتباط 4 و <img alt="المعادلة 1" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq1.jpg" /> . هنا، الأول (ر) هو شدة الضوء المتناثرة في الوقت t و (•••) T حان الوقت المتوسط. الوقت تسوس سيكون ما يقرب من 0.1 مللي ثانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضبط نقطة محورية للحصول على مجموعة واسعة من أجل السعة الأولية وظيفة الوقت الارتباط (ز (2) (ر = 0) - 1). ملاحظة: إن السعة الأولية تتأثر بشدة من كمية الضوء المنعكسة. عن طريق تحريك سحب نقطة البؤريايه ار دى واجهة بين الزجاج غطاء والعينة، وكمية ضوء الزيادات ينعكس. لعدسات ضوء قوي، مثل اللاتكس البوليسترين، واتساع الأولية يمكن تغييرها من 0 إلى 1. ومع ذلك، فإنه من الصعب تحديد السعة الأولية وثيقة إلى 1 لحلول البوليمر أكثر شيوعا بسبب شدة الضوء المنعكس هو أعلى بكثير من أن من الضوء المتناثرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق معكوس لابلاس تحول (باستخدام برنامج تنظيم مقيدة CONTIN 13،14) إلى وظيفة الوقت الارتباط التي تم الحصول عليها للحصول على وظيفة حجم التوزيع. في الحالات التي يتم فيها تعيين السعة الأولية إلى أقل من 0.2، فإن وظيفة توزيع نصف قطرها الهيدروديناميكية تظهر ذروة حادة نحو 100 نانومتر، وهو ضعف نصف قطر الفعلي (انظر مناقشة للحصول على التفاصيل). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس عينة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضبط درجة الحرارة مرحلة إلى 25 درجة مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع شريحة أعدت مع بولي NIPA (PNIPA) solutأيون (الخطوة 1.3.4) على مسرح المجهر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس وظيفة الوقت علاقة لشدة الضوء المتناثرة باتباع الخطوات 2.1.4-2.1.8. إذا كانت السعة الأولية أكبر من 0.2، وضبط نقطة محورية لجعل السعة الأولية وظيفة الوقت ارتباط أقل من 0.2 باتباع الخطوة 2.1.9. والسعة الأولية صغيرة يبسط تحليل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضبط درجة الحرارة مرحلة إلى 35 درجة مئوية، والانتظار حتى يتحول الحل العكرة. درجة حرارة المحلول أقل الحرجة (LCST) من حل PNIPA 32 درجة مئوية (15). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس وظيفة ارتباط الوقت عن طريق الخطوات التالية 2.1.4-2.1.8. إذا كان ذلك ممكنا، وضبط الموقف من النقطة المحورية لجعل السعة الأولية وظيفة الوقت ارتباط أقل من 0.2. عن حلول العكرة، تميل سعة الأولية إلى زيادة، لأن شدة الزيادات الضوء المتناثرة في حين أن الضوء الذي ينعكس يزال مستمرا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق معكوس لابلاس transformatiإلى وظائف ارتباط وقت الحصول عليها للحصول على وظائف حجم التوزيع. لاحظ أن الحجم الفعلي هو نصف قيمة تم الحصول عليها في الحالات التي يكون فيها السعة الأولية هي أقل من 0.2. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Hiroi, T., Shibayama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+Light+Scattering+Microscope:+Accessing+Opaque+Samples+with+High+Spatial+Resolution.">Dynamic Light Scattering Microscope: Accessing Opaque Samples with High Spatial Resolution.</a> Opt. Express. 21, 20260-20267 (2013).</li><li>Barth, H. G., Flippen, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Particle+Size+Analysis.">Particle Size Analysis.</a> Anal. Chem. 67, 257-272 (1995).</li><li>Liu, Y., Wang, Z., Zhang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+supramolecular+polymers.">Characterization of supramolecular polymers.</a> Chem. Soc. Rev. 41, 5922-5932 (2012).</li><li>Berne, B. J., Pecora, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Dynamic Light Scattering with Applications to Chemistry, Biology and Physics. , (2000).</li><li>Phillies, G. D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+demonstration+of+ruultiple-scattering+suppression+in+quasielastic-light-scattering+spectroscopy+by+homodyne+coincidence+techniques.">Experimental demonstration of ruultiple-scattering suppression in quasielastic-light-scattering spectroscopy by homodyne coincidence techniques.</a> Phys. Rev. A. 24, 1939-1943 (1981).</li><li>Phillies, G. D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+multiple+scattering+effects+in+quasielastic+light+scattering+by+homodyne+crosscorrelation+techniques.">Suppression of multiple scattering effects in quasielastic light scattering by homodyne crosscorrelation techniques.</a> J. Chem. Phys. 74, 260-262 (1981).</li><li>Ishii, K., Yoshida, R., Iwai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-scattering+spectroscopy+for+extremely+dense+colloidal+suspensions+by+use+of+a+low-coherence+interferometer.">Single-scattering spectroscopy for extremely dense colloidal suspensions by use of a low-coherence interferometer.</a> Opt. Lett. 30, 555-557 (2005).</li><li>Xia, H., Ishi, K., Iwai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrodynamic+Radius+Sizing+of+Nanoparticles+in+Dense+Polydisperse+Media+by+Low-Coherence+Dynamic+Light+Scattering.">Hydrodynamic Radius Sizing of Nanoparticles in Dense Polydisperse Media by Low-Coherence Dynamic Light Scattering.</a> Jpn. J. Appl. Phys. 44, 6261-6264 (2005).</li><li>Maret, G., Wolf, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+light+scattering+from+disordered+media.+The+effect+of+brownian+motion+of+scatterers.">Multiple light scattering from disordered media. The effect of brownian motion of scatterers.</a> Z. Phys. B. 65, 409-413 (1987).</li><li>Pine, D. J., Weitz, D. A., Chaikin, P. M., Herbolzheimer, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffusing+wave+spectroscopy.">Diffusing wave spectroscopy.</a> Phys. Rev. Lett. 60, 1134-1137 (1988).</li><li>Cerbino, R., Trappe, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+Dynamic+Microscopy:+ProbingWave+Vector+Dependent+Dynamics+with+a+Microscope.">Differential Dynamic Microscopy: ProbingWave Vector Dependent Dynamics with a Microscope.</a> Phys. Rev. Lett. 108, 188102 (2012).</li><li>Lu, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterizing+Concentrated,+Multiply+Scattering,+and+Actively+Driven+Fluorescent+Systems+with+Confocal+Differential+Dynamic+Microscopy.">Characterizing Concentrated, Multiply Scattering, and Actively Driven Fluorescent Systems with Confocal Differential Dynamic Microscopy.</a> Phys. Rev. Lett. 108, 218103 (2012).</li><li>Provencher, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+constrained+regularization+method+for+investing+data+represented+by+linear+algebraic+or+integral+equations.">A constrained regularization method for investing data represented by linear algebraic or integral equations.</a> Comp. Phys. Comm. 27, 213-227 (1982).</li><li>Provencher, S. W., Stepanek, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+analysis+of+dynamic+light+scattering+autocorrelation+functions.">Global analysis of dynamic light scattering autocorrelation functions.</a> Part. Part. Syst. Charact. 13, 291 (1996).</li><li>Takata, S., Norisuye, T., Shibayama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small-angle+Neutron+Scattering+Study+on+Preparation+Temperature+Dependence+of+Thermosensitive+Gels.">Small-angle Neutron Scattering Study on Preparation Temperature Dependence of Thermosensitive Gels.</a> Macromolecules. 35, 4779-4784 (2002).</li><li>Pusey, P. N., van Megen, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+Light+Scattering+by+Non-Ergodic+Media.">Dynamic Light Scattering by Non-Ergodic Media.</a> Physica A. 157, 705-741 (1989).</li><li>Chu, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Laser Light Scattering. 2nd Ed. , (1991).</li><li>Shibayama, M., Tanaka, T., Han, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small-Angle+Neutron-Scattering+Study+on+Poly(N-Isopropyl+Acrylamide)+Gels+near+Their+Volume-Phase+Transition-Temperature.">Small-Angle Neutron-Scattering Study on Poly(N-Isopropyl Acrylamide) Gels near Their Volume-Phase Transition-Temperature.</a> J. Chem. Phys. 97, 6829-6841 (1992).</li><li>Tanaka, T., Sato, E., Hirokawa, Y., Hirotsu, S., Peetermans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+Kinetics+of+Volume+Phase+Transition+of+Gels.">Critical Kinetics of Volume Phase Transition of Gels.</a> Phys. Rev. Lett. 55, 2455-2458 (1985).</li><li>Hiroi, T., Ata, S., Shibayama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transitions+of+Aggregation+States+for+Concentrated+Carbon+Nanotube+Dispersion.">Transitions of Aggregation States for Concentrated Carbon Nanotube Dispersion.</a> J. Phys. Chem. C. 120, 5776-5782 (2016).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

السعة الأولية للدالة الارتباط الوقت يعتمد بشكل كبير على نقطة محورية، كما هو مبين في الشكل 2 (أ). هذا على ما يبدو يتناقض مع حقيقة أن الحل هو متجانس (باستثناء طبقة رقيقة على واجهة) 8. ويعزى هذا الاختلاف في السعة الأولية إلى التباين في كمية الضوء المنعكسة. جزئية نظرية مغايرة 16 تتنبأ بأن السعة الأولية، A، شدة الضوء المتناثرة، والصورة، وشدة الضوء المنعكس، وص، تلبية المعادلة التالية 1 <img alt="المعادلة 2" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq2.jpg" /> وتظهر هذه المعادلة أن أكبر I ص يصبح، يصبح أصغر حجما. لذلك، ويتم تقليل من خلال تحديد موقف البؤري على مقربة من واجهة. نشر الواضح D المستمر وكاليفورنيان الحصول عليها عن طريق تركيب دالة الارتباط الوقت في حالة حلول monodisperse: <img alt="المعادلة 3" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq3.jpg" /> أين <img alt="المعادلة 4" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq4.jpg" /> . هنا، n هو معامل الانكسار من المذيب (الماء، 1.33)، θ هي الزاوية متفرقة (180 درجة)، وλ هو الطول الموجي للضوء (514.5 نانومتر). منذ طبقنا الهندسة ارتداد مبعثر، ويحدد قيمة ف. ومع ذلك، يتم حل هذه النقطة باستخدام موجات مختلفة من الضوء. يرجى ملاحظة أن أي نوع من مصدر ليزر الموجة المستمرة متاح لبناء المجهر DLS. بفضل حجم المشع صغير، ويقدر عامل تماسك 17 أن يكون أكثر من 0.99 ولا يكاد يذكر. عن حلول polydisperse، يتم الحصول على وظيفة توزيع D A عن طريق معكوس تحويل لابلاس. عشر مغايرة جزئيةيتوقع eory أيضا أن D وليس هو نفسه كما نشر الفعلي D المستمر. هذه الثوابت نشر اثنين من تلبية المعادلة التالية: <img alt="المعادلة 5" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq5.jpg" /> يتم تحويل D ثابت نشر في الهيدروديناميكية دائرة نصف قطرها R ح باستخدام معادلة اينشتاين ستوكس 4. عندما أ = 1، تصبح هذه العلاقة D A = D. في هذه الحالة، فإن عملية تحويل البيانات هي نفسها التي لتشتت الضوء الديناميكي المشترك. الخط الأحمر هو مبين في الشكل 2 (ب) يتوافق مع هذه الحالة. في المقابل، تصبح هذه العلاقة D A = 0.5 D في الحد من A → 0. لذلك، ويقدر حجم ليكون ضعفي حجم الفعلي عندما وصغيرة (أي عمليا وأقل من 0.2)، كما هو موضح من قبل الخط الأزرق في الشكل 2 (ب) </sترونج&gt;. إذا علمنا أن (أ) هو صغير إلى حد كبير، والمحور الأفقي يمكن تحويل، كما هو مبين في الشكل 2 (ج). من حيث المبدأ، يمكننا تحويل D وإلى D لأي قيمة A. في الممارسة العملية، ومع ذلك، فمن الأفضل لتعيين السعة الأولية أصغر من 0.2، منذ بسيط تقريب D A ~ 0.5 D يصدق. وقد أظهرت السمات البارزة للتقنية نثر المجهر دينامية الخفيفة باستخدام محلول PNIPA. وقد تمت دراسة التشكل من PNIPA أسفل وأعلى LCST على نطاق واسع باستخدام النيوترونات زاوية صغيرة نثر 15،18. في المقابل، لم تستغل تشتت الضوء الحيوي لتحليل PNIPA فوق LCST بسبب تعكر 19 منه. يتم حل هذه المشكلة عن طريق الحيوي المجهر تشتت الضوء، كما هو مبين في الشكلين 3 (أ) و (ب). حجم هذه المجاميع هو عدة و# 181؛ م، والتي لا يمكن الحصول عليها إما صغيرة زاوية الأشعة السينية / تشتت النيوترونات أو تقنيات تشتت الضوء التقليدية. قياسات وقت حل باستخدام هذا النظام يعطي معلومات عن عملية التجميع خلال التغير في درجة الحرارة. ويتضح العيب من الحيوي المجهر تشتت الضوء أيضا في الشكل (3). للنتيجة دون LCST، وظيفة ارتباط الوقت يتأثر بشدة كمية صغيرة جدا من الغبار الحاضر (الخطوط السوداء في الشكل 3). على سبيل المثال، فإن وظيفة ارتباط الوقت لا يتحلل تماما، حتى في زمن ارتباط في ترتيب 1.0 ثانية. وذلك لأن حجم المشع مع هذا الجهاز (ما يقرب من 1.0 ميكرون) هو أصغر بكثير من أن المشع مع جهاز تشتت الضوء الحيوي المعتاد (حوالي 100 ميكرون). في الحالات التي يكون فيها شدة الضوء المتناثرة ضعيفة، تحجب إشارة من الضوضاء، مثل تلك التي تسببها الصورةكميات مول الغبار في الحل. ولذلك، فإن القمم الثلاث هو مبين في الشكل (3) (ب) لا يجوز أن يكون الأهمية الكمية على الرغم من أن النظام العام للحجم هو مفيد. لاحظ أن هذا المشتت الضعيف يمكن أن يقاس جهاز تشتت الضوء الحيوي التقليدي. لقد أثبتنا أن دينامية المجهر تشتت الضوء تمكننا من قياس العينات سواء شفافة وعكر مع نفس الإعداد. ومنذ مدة مسار بصري في العينات غير قصيرة، ويمكن تطبيق هذه التقنية لعينات امتصاص الضوء القوية، مثل تعليق أنابيب الكربون 20. وبالإضافة إلى ذلك، نظرا لدقة مكانية عالية، ويمكن تطبيق هذه التقنية على الخلايا البيولوجية. لتطبيقه على الأحياء، ويمكن أيضا هذه الطريقة تكون جنبا إلى جنب مع تقنيات التصوير الأخرى، مثل مضان والتصوير رامان. وبالتالي، فإننا نعتقد أن دينامية المجهر تشتت الضوء هو أداة قوية لمجموعة واسعة من المجالات البحثية.

Particle size is one of the most fundamental properties of colloidal and polymer solutions. Numerous techniques are used to measure the particle size. Particle sizes of 1.0 &#181;m or larger can be measured directly using an optical microscope. For smaller particles, alternative techniques, such as laser diffraction, electron microscopy, or atomic force microscopy, are used2,3. Dynamic light scattering is a commonly-used technique for the measurement of particle size distributions in solutions4. The results obtained using this technique are not derived from images of the particles but from the characteristic time of the fluctuations in scattered light intensity. These fluctuations originate from Brownian motion, which is characterized by a diffusion constant. The size distribution is obtained from the distribution of diffusion constants using the Einstein-Stokes equation. Due to its simplicity, dynamic light scattering is widely used for the routine assessment of solutions, such as paints and food colloids.
Pretreatment is required for most of the techniques used for the particle size measurement of solution samples. In the case of electron microscopy and atomic force microscopy, the sample must be analyzed under vacuum conditions. Therefore, it is difficult to observe the samples in their native forms. Furthermore, for laser diffraction and dynamic light scattering, only diluted samples that are free from multiple scattering and light absorption can be measured. To overcome this difficulty, several new techniques have been proposed for the measurement of dynamic light scattering from undiluted, concentrated solutions, such as cross-correlation spectroscopy5,6, low-coherence dynamic light scattering7,8, diffusing-wave spectroscopy9,10, and differential dynamic microscopy11,12.
We have developed a new apparatus called a dynamic light scattering microscope1. This apparatus enables us to measure turbid samples without dilution by means of a confocal optical system in which multiple scattering is eliminated using a pinhole. However, the measurement procedure and data analysis are slightly more complicated than those of commercially-available instruments. This video explains the measurement procedure and data analysis in detail using the analysis of the temperature-responsive polymer, poly(N-isopropylacrylamide), as an example.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="591">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="76">
			<td height="76" style="height:76px;width:216px;">N-isopropylacrylamide, 98%</td>
			<td style="width:89px;">Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.</td>
			<td style="width:119px;">I0401</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="76">
			<td height="76" style="height:76px;width:216px;">toluene, 99%</td>
			<td style="width:89px;">Wako Pure Chemical Industries, Ltd.</td>
			<td style="width:119px;">201-01876</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="76">
			<td height="76" style="height:76px;width:216px;">petroleum ether, distillation temperature 30 ~ 60 &#176;C</td>
			<td style="width:89px;">Wako Pure Chemical Industries, Ltd.</td>
			<td style="width:119px;">169-22565</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="57">
			<td height="57" style="height:57px;width:216px;">N,N,N&#39;,N&#39;-tetramethylethylenediamine, 99%</td>
			<td style="width:89px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">T9281</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:216px;">ammonium persulfate, 98%</td>
			<td style="width:89px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">248614</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="57">
			<td height="57" style="height:57px;width:216px;">polystyrene latex suspension, 1 wt%</td>
			<td style="width:89px;">Duke Scientific Corporation</td>
			<td style="width:119px;">3500A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="57">
			<td height="57" style="height:57px;width:216px;">argon</td>
			<td style="width:89px;">Koike Sanso Kogyo Co., Ltd.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>purity &#62; 99.999 vol.%</td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:216px;"></td>
			<td style="width:89px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="57">
			<td height="57" style="height:57px;width:216px;">cavity slide</td>
			<td style="width:89px;">Matsunami Glass Ind.,Ltd.</td>
			<td style="width:119px;">83-0336</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="57">
			<td height="57" style="height:57px;width:216px;">inverted microscope</td>
			<td style="width:89px;">Nikon Instech Co., Ltd.</td>
			<td style="width:119px;">ECLIPSE Ti-U</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:216px;">Thermo Plate</td>
			<td style="width:89px;">Tokai Hit CO.,Ltd</td>
			<td style="width:119px;">TP-108R-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:216px;">Ar-Kr ion laser</td>
			<td style="width:89px;">Spectra-Physics</td>
			<td style="width:119px;">Stabilite 2018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="57">
			<td height="57" style="height:57px;width:216px;">avalanche photodiode</td>
			<td style="width:89px;">ALV-GmbH</td>
			<td style="width:119px;">ALV-High Q.E. Avalanche Photo Diode</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:216px;">correlator</td>
			<td style="width:89px;">ALV-GmbH</td>
			<td style="width:119px;">ALV-5000/EPP</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measurement of particle size distribution in turbid solutions by dynamic light scattering microscopy

A protocol for measuring polydispersity of concentrated polymer solutions using dynamic light scattering is described. Dynamic light scattering is a technique used to measure the size distribution of polymer solutions or colloidal particles. Although this technique is widely used for the assessment of polymer solutions, it is difficult to measure the particle size in concentrated solutions due to the multiple scattering effect or strong light absorption. Therefore, the concentrated solutions should be diluted before measurement. Implementation of the confocal optical component in a dynamic light scattering microscope1 helps to overcome this barrier. Using such a microscopic system, both transparent and turbid systems can be analyzed under the same experimental setup without a dilution. As a representative example, a size distribution measurement of a temperature-responsive polymer solution was performed. The sizes of the polymer chains in an aqueous solution were several tens of nanometers at a temperature below the lower critical solution temperature (LCST). In contrast, the sizes increased to more than 1.0 &#181;m when above the LCST. This result is consistent with the observation that the solution turned turbid above the LCST.

تم قياس في نقاط الاتصال المختلفة، كما هو مبين في الشكل 2 (أ): وظائف وقت الارتباط من شدة الضوء المتناثرة لتعليق البوليسترين اللاتكس (50 نانومتر الجسيمات دائرة نصف قطرها). تم تحويل هذه الوظائف ارتباط في وظائف توزيع نصف قطرها الهيدروديناميكية بواسطة معكوس تحويل لابلاس (انظر الشكل 2 (ب) و (ج)). باستخدام نفس الإجراء، تم الحصول على وظائف علاقة الوقت وظائف توزيع نصف قطرها الهيدروديناميكية من الحل PNIPA عند 25 درجة مئوية و 35 درجة مئوية، على التوالي. الأرقام 3 (أ) و (ب) تظهر وظائف الساعة ارتباط من شدة الضوء المتناثرة وظائف توزيع حجم المقابلة من الحل PNIPA أدناه (25 درجة مئوية) وفوق (35 درجة مئوية) وLCST. تم الحصول على وظائف توزيع حجم من قبل معكوس لابلاس تحول تليهاتصحيح مغايرة جزئي. متوسط ​​نصف قطر الهيدروديناميكية تحت LCST هو عدة عشرات من نانومتر، وهو الأمر المعهود عن حلول البوليمر. في المقابل، فإن نصف قطر الهيدروديناميكية فوق LCST حوالي 1.0 ميكرون. هذه النتيجة تتفق مع حقيقة أن الحل هو عكر فوق LCST. الخطوط الحمراء والزرقاء في الشكل (3) تمثل توزيع حجم حلول PNIPA التي تم الحصول عليها مباشرة بعد و20 دقيقة بعد الحل أصبح العكرة، على التوالي. الشكل (3) (ب) يشير بوضوح الى نمو التجميع. <img alt="شكل 1" src="/files/ftp_upload/54885/54885fig1.jpg" /> الشكل 1. مخططات من الحيوي المجهر تشتت الضوء. الثقب (PH)، شعاع الخائن (BS)، المستقطب (بولندا)، والثنائي الضوئي سيل (الهادئ). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54885/54885fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض</a>نسخة أكبر من هذا الرقم. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/54885/54885fig2.jpg" /> الشكل 2. ممثل النتائج لتعليق البوليسترين اللاتكس. (أ) وظائف ارتباط وقت شدة الضوء المتناثرة لتعليق البوليسترين اللاتكس. في دائرة نصف قطرها الاسمي هو 50 نانومتر، وتركيز 0.1٪ بالوزن. تم الحصول على مجموعتين من البيانات من نقاط نثر مختلفة. (ب) و (ج) المقابلة وظائف توزيع حجم لتعليق البوليسترين اللاتكس التي حصل عليها معكوس لابلاس تحول من (أ). الخط الأحمر يتوافق مع وظيفة الارتباط الوقت الذي ما يقرب من 1.0 السعة الأولي، والخط الأزرق يقابل ذلك مع اتساع الأولية أن ما يقرب من 0.2. تم حساب المحور الأفقي دون (ب) و مع (ج) النظر في تأثير heterodyning جزئية (PHD) عندما و&lt;&lt;<html> . 1. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54885/54885fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/54885/54885fig3.jpg" /> الشكل 3. ممثل النتائج عن حل PNIPA. (أ) وظائف ارتباط وقت شدة الضوء المتناثرة من أجل حل PNIPA. (ب) المقابلة وظائف توزيع حجم من أجل حل PNIPA التي حصل عليها معكوس لابلاس تحول من (أ). تم حساب المحور الأفقي النظر في تأثير heterodyning جزئية لكل مجموعة البيانات. يمثل خط أسود على البيانات التي تم الحصول عليها عند 25 درجة مئوية. يمثل خطا أحمر البيانات التي تم الحصول عليها بعد تحول حل عكر (35 درجة مئوية). يمثل الخط الأزرق البيانات التي تم الحصول عليها بعد قياس 20 دقيقة من الخط الأحمر./54885/54885fig3large.jpg &quot;الهدف =&quot; _ فارغة &quot;&gt; الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Watch this Scientific Journal Video about Measurement of Particle Size Distribution in Turbid Solutions by Dynamic Light Scattering Microscopy at JoVE.com

Measurement of Particle Size Distribution in Turbid Solutions by Dynamic Light Scattering Microscopy

ويرد بروتوكول للقياس المباشر لتوزيع حجم الجسيمات في الحلول المركزة باستخدام ديناميكية المجهر تشتت الضوء.

قياس توزيع حجم الجسيمات في عكر حلول كتبها الإنارة الديناميكي التشتت المجهر

A protocol for measuring polydispersity of concentrated polymer solutions using dynamic light scattering is described. Dynamic light scattering is a ...

measurement-particle-size-distribution-turbid-solutions-dynamic-light

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Electrical Engineering

Chemistry

Unit 1

The Laplace Transform

SCIENTISTS IN ACTION

14.0K Views.  University of Tokyo.  ويرد بروتوكول للقياس المباشر لتوزيع حجم الجسيمات في الحلول المركزة باستخدام ديناميكية المجهر تشتت الضوء. 

Video: Measurement of Particle Size Distribution in Turbid Solutions by Dynamic Light Scattering Microscopy

Quantitative and Qualitative Examination of Particle-particle Interactions Using Colloidal Probe Nanoscopy

Colloidal Probe Nanoscopy (CPN), the study of the nano-scale interactive forces between a specifically prepared colloidal probe and any chosen substrate using the Atomic Force Microscope (AFM), can provide key insights into physical interactions present within colloidal systems. Colloidal systems are widely existent in several applications including, pharmaceuticals, foods, paints, paper, soil and minerals, detergents, printing and much more.1-3 Furthermore, colloids can exist in many states such as emulsions, foams and suspensions. Using colloidal probe nanoscopy one can obtain key information on the adhesive properties, binding energies and even gain insight into the physical stability and coagulation kinetics of the colloids present within. Additionally, colloidal probe nanoscopy can be used with biological cells to aid in drug discovery and formulation development. In this paper we describe a method for conducting colloidal probe nanoscopy, discuss key factors that are important to consider during the measurement, and show that both quantitative and qualitative data that can be obtained from such measurements.

Colloidal probe nanoscopy can be used within a variety of fields to gain insight into the physical stability and coagulation kinetics of colloidal systems and aid in drug discovery and formulation sciences using biological systems. The method described within provides a quantitative and qualitative means to study such systems.

فحص الكمية والنوعية من التفاعلات الجسيمات الجسيمات الغروية عن طريق مسبار Nanoscopy

Colloidal Probe Nanoscopy (CPN), the study of the nano-scale interactive forces between a specifically prepared colloidal probe and any chosen substrate ...

Dynamic Electrochemical Measurement of Chloride Ions

This protocol describes the dynamic measurement of chloride ions using the transition time of a silver silver chloride (Ag/AgCl) electrode. Silver silver chloride electrode is used extensively for potentiometric measurement of chloride ions concentration in electrolyte. In this measurement, long-term and continuous monitoring is limited due to the inherent drift and the requirement of a stable reference electrode. We utilized the chronopotentiometric approach to minimize drift and avoid the use of a conventional reference electrode. A galvanostatic pulse is applied to an Ag/AgCl electrode which initiates a faradic reaction depleting the Cl&#713; ions near the electrode surface. The transition time, which is the time to completely deplete the ions near the electrode surface, is a function of the ion concentration, given by the Nernst equation. The square root of the transition time is in linear relation to the chloride ion concentration. Drift of the response over two weeks is negligible (59 &#181;M/day) when measuring 1 mM [Cl&#713;]using a current pulse of 10 Am-2. This is a dynamic measurement where the moment of transition time determines the response and thus is independent of the absolute potential. Any metal wire can be used as a pseudo-reference electrode, making this approach feasible for long-term measurement inside concrete structures.

Dynamic measurement of chloride ions is presented. Transition time of an Ag/AgCl electrode, during a chronopotentiometric technique, can give the concentration of chloride ions in electrolyte. This method does not require a stable conventional reference electrode.

ديناميكية الكهروكيميائية قياس كلوريد الأيونات

This protocol describes the dynamic measurement of chloride ions using the transition time of a silver silver chloride (Ag/AgCl) electrode. Silver silver ...

Dissolution Dynamic Nuclear Polarization Instrumentation for Real-time Enzymatic Reaction Rate Measurements by NMR

The main limitation of NMR-based investigations is low sensitivity. This prompts for long acquisition times, thus preventing real-time NMR measurements of metabolic transformations. Hyperpolarization via dissolution DNP circumvents part of the sensitivity issues thanks to the large out-of-equilibrium nuclear magnetization stemming from the electron-to-nucleus spin polarization transfer. The high NMR signal obtained can be used to monitor chemical reactions in real time. The downside of hyperpolarized NMR resides in the limited time window available for signal acquisition, which is usually on the order of the nuclear spin longitudinal relaxation time constant, T1, or, in favorable cases, on the order of the relaxation time constant associated with the singlet-state of coupled nuclei, TLLS. Cellular uptake of endogenous molecules and metabolic rates can provide essential information on tumor development and drug response. Numerous previous hyperpolarized NMR studies have demonstrated the relevancy of pyruvate as a metabolic substrate for monitoring enzymatic activity in vivo. This work provides a detailed description of the experimental setup and methods required for the study of enzymatic reactions, in particular the pyruvate-to-lactate conversion rate in presence of lactate dehydrogenase (LDH), by hyperpolarized NMR.

The sensitivity enhancement provided by dissolution dynamic nuclear polarization (DNP) enables following metabolic processes in real time by NMR and MRI. The characteristics and performances of a dedicated dissolution DNP setup designed for study enzymatic reactions are discussed.

حل الحيوي النووية الاستقطاب الأجهزة لفي الوقت الحقيقي القياسات الأنزيمية ردود الفعل قيم وNMR

The main limitation of NMR-based investigations is low sensitivity. This prompts for long acquisition times, thus preventing real-time NMR measurements of ...

A Simple, Low-cost, and Robust System to Measure the Volume of Hydrogen Evolved by Chemical Reactions with Aqueous Solutions

There is a growing research interest in the development of portable systems which can deliver hydrogen on-demand to proton exchange membrane (PEM) hydrogen fuel cells. Researchers seeking to develop such systems require a method of measuring the generated hydrogen. Herein, we describe a simple, low-cost, and robust method to measure the hydrogen generated from the reaction of solids with aqueous solutions. The reactions are conducted in a conventional one-necked round-bottomed flask placed in a temperature controlled water bath. The hydrogen generated from the reaction in the flask is channeled through tubing into a water-filled inverted measuring cylinder. The water displaced from the measuring cylinder by the incoming gas is diverted into a beaker on a balance. The balance is connected to a computer, and the change in the mass reading of the balance over time is recorded using data collection and spreadsheet software programs. The data can then be approximately corrected for water vapor using the method described herein, and parameters such as the total hydrogen yield, the hydrogen generation rate, and the induction period can also be deduced. The size of the measuring cylinder and the resolution of the balance can be changed to adapt the setup to different hydrogen volumes and flow rates.

The study of methods to generate on-demand hydrogen for fuel cells continues to grow in importance. However, systems to measure hydrogen evolution from the reaction of chemicals with water can be complicated and expensive. This article details a simple, low-cost, and robust method to measure the evolution of hydrogen gas.

A، منخفضة التكلفة وبسيطة، ونظام دقيق لقياس حجم الهيدروجين المتصاعد من التفاعلات الكيميائية مع المحاليل المائية

There is a growing research interest in the development of portable systems which can deliver hydrogen on-demand to proton exchange membrane (PEM) ...

Fabrication and Testing of Photonic Thermometers

In recent years, a push for developing novel silicon photonic devices for telecommunications has generated a vast knowledge base that is now being leveraged for developing sophisticated photonic sensors. Silicon photonic sensors seek to exploit the strong confinement of light in nano-waveguides to transduce changes in physical state to changes in resonance frequency. In the case of thermometry, the thermo-optic coefficient, i.e., changes in refractive index due to temperature, causes the resonant frequency of the photonic device such as a Bragg grating to drift with temperature. We are developing a suite of photonic devices that leverage recent advances in telecom compatible light sources to fabricate cost-effective photonic temperature sensors, which can be deployed in a wide variety of settings ranging from controlled laboratory conditions, to the noisy environment of a factory floor or a residence. In this manuscript, we detail our protocol for the fabrication and testing of photonic thermometers.

We describe the process of fabrication and testing of photonic thermometers.

تصنيع واختبار الحرارة الضوئية

In recent years, a push for developing novel silicon photonic devices for telecommunications has generated a vast knowledge base that is now being ...

Nanosponge Tunability in Size and Crosslinking Density

We describe a protocol for the synthesis of linear polyesters containing pendant epoxide functionality and their incorporation into a nanosponge with controlled dimensions. This approach begins with synthesis of a functionalized lactone which is key to the pendant functionalization of the resulting polymer. Valerolactone (VL) and allyl-valerolactone (AVL) are then copolymerized using ring-opening polymerization. Post-polymerization modification is then used to install an epoxide moiety on some or all of the pendant allyl groups. Epoxy-amine chemistry is employed to form nanoparticles in a dilute solution of both polymer and small molecule diamine crosslinker based on the desired nanosponge size and crosslinking density. Nanosponge sizes can be characterized by transmission electron microscopy (TEM) imaging to determine the dimension and distribution. This method provides a pathway by which highly tunable polyesters can create tunable nanoparticles, which can be used for small molecule drug encapsulation. Due to the nature of the backbone, these particles are hydrolytically and enzymatically degradable for a controlled release of a wide range of hydrophobic small molecules.

This article describes a process for tuning the size and crosslinking density of covalently crosslinked nanoparticles from linear polyesters containing pendant functionality. By tailoring synthesis parameters (polymer molecular weight, pendant functionality incorporation, and crosslinker equivalents), a desired nanoparticle size and crosslinking density can be achieved for drug delivery applications.

ألواح نانوسبونجي في حجم وكثافة كروسلينكينج

We describe a protocol for the synthesis of linear polyesters containing pendant epoxide functionality and their incorporation into a nanosponge with ...

DNA-magnetic Particle Binding Analysis by Dynamic and Electrophoretic Light Scattering

Isolation of DNA using magnetic particles is a field of high importance in biotechnology and molecular biology research. This protocol describes the evaluation of DNA-magnetic particles binding via dynamic light scattering (DLS) and electrophoretic light scattering (ELS). Analysis by DLS provides valuable information on the physicochemical properties of particles including particle size, polydispersity, and zeta potential. The latter describes the surface charge of the particle which plays major role in electrostatic binding of materials such as DNA. Here, a comparative analysis exploits three chemical modifications of nanoparticles and microparticles and their effects on DNA binding and elution. Chemical modifications by branched polyethylenimine, tetraethyl orthosilicate and (3-aminopropyl)triethoxysilane are investigated. Since DNA exhibits a negative charge, it is expected that zeta potential of particle surface will decrease upon binding of DNA. Forming of clusters should also affect particle size. In order to investigate the efficiency of these particles in isolation and elution of DNA, the particles are mixed with DNA in low pH (~6), high ionic strength and dehydration environment. Particles are washed on magnet and then DNA is eluted by Tris-HCl buffer (pH = 8). DNA copy number is estimated using quantitative polymerase chain reaction (PCR). Zeta potential, particle size, polydispersity and quantitative PCR data are evaluated and compared. DLS is an insightful and supporting method of analysis that adds a new perspective to the process of screening of particles for DNA isolation.

This protocol describes the synthesis of magnetic particles and evaluation of their DNA-binding properties via dynamic and electrophoretic light scattering. This method focuses on monitoring changes in particle size, their polydispersity and zeta potential of particle surface which play major role in binding of materials such as DNA.

الحمض النووي-المغناطيسي الجسيمات ربط التحليل بتشتت الضوء الديناميكي والغرواني الكهربي

Isolation of DNA using magnetic particles is a field of high importance in biotechnology and molecular biology research. This protocol describes the ...

Microfluidic Chips for In Situ Crystal X-ray Diffraction and In Situ Dynamic Light Scattering for Serial Crystallography

This protocol describes fabricating microfluidic devices with low X-ray background optimized for goniometer based fixed target serial crystallography. The devices are patterned from epoxy glue using soft lithography and are suitable for in situ X-ray diffraction experiments at room temperature. The sample wells are lidded on both sides with polymeric polyimide foil windows that allow diffraction data collection with low X-ray background. This fabrication method is undemanding and inexpensive. After the sourcing of a SU-8 master wafer, all fabrication can be completed outside of a cleanroom in a typical research lab environment. The chip design and fabrication protocol utilize capillary valving to microfluidically split an aqueous reaction into defined nanoliter sized droplets. This loading mechanism avoids the sample loss from channel dead-volume and can easily be performed manually without using pumps or other equipment for fluid actuation. We describe how isolated nanoliter sized drops of protein solution can be monitored in situ by dynamic light scattering to control protein crystal nucleation and growth. After suitable crystals are grown, complete X-ray diffraction datasets can be collected using goniometer based in situ fixed target serial X-ray crystallography at room temperature. The protocol provides custom scripts to process diffraction datasets using a suite of software tools to solve and refine the protein crystal structure. This approach avoids the artefacts possibly induced during cryo-preservation or manual crystal handling in conventional crystallography experiments. We present and compare three protein structures that were solved using small crystals with dimensions of approximately 10-20 &#181;m grown in chip. By crystallizing and diffracting in situ, handling and hence mechanical disturbances of fragile crystals is minimized. The protocol details how to fabricate a custom X-ray transparent microfluidic chip suitable for in situ serial crystallography. As almost every crystal can be used for diffraction data collection, these microfluidic chips are a very efficient crystal delivery method.

Microfluidic Chips for In Situ Crystal X-ray Diffraction and In Situ Dynamic Light Scattering for Serial Crystallography

This protocol describes in detail how to fabricate and operate microfluidic devices for X-ray diffraction data collection at room temperature. Additionally, it describes how to monitor protein crystallization by dynamic light scattering and how to process and analyze obtained diffraction data.

رقائق موائع جزيئية لنثر الخفيفة الديناميكية في الموقع حيود الأشعة السينية كريستال و في الموقع لعلم البلورات المسلسل

This protocol describes fabricating microfluidic devices with low X-ray background optimized for goniometer based fixed target serial crystallography. The ...

Elemental-sensitive Detection of the Chemistry in Batteries through Soft X-ray Absorption Spectroscopy and Resonant Inelastic X-ray Scattering

Energy storage has become more and more a limiting factor of today's sustainable energy applications, including electric vehicles and green electric grid based on volatile solar and wind sources. The pressing demand of developing high-performance electrochemical energy storage solutions, i.e., batteries, relies on both fundamental understanding and practical developments from both the academy and industry. The formidable challenge of developing successful battery technology stems from the different requirements for different energy-storage applications. Energy density, power, stability, safety, and cost parameters all have to be balanced in batteries to meet the requirements of different applications. Therefore, multiple battery technologies based on different materials and mechanisms need to be developed and optimized. Incisive tools that could directly probe the chemical reactions in various battery materials are becoming critical to advance the field beyond its conventional trial-and-error approach. Here, we present detailed protocols for soft X-ray absorption spectroscopy (sXAS), soft X-ray emission spectroscopy (sXES), and resonant inelastic X-ray scattering (RIXS) experiments, which are inherently elemental-sensitive probes of the transition-metal 3d and anion 2p states in battery compounds. We provide the details on the experimental techniques and demonstrations revealing the key chemical states in battery materials through these soft X-ray spectroscopy techniques.

Here, we present a protocol for typical experiments of soft X-ray absorption spectroscopy (sXAS) and resonant inelastic X-ray scattering (RIXS) with applications in battery material studies.

الكشف عن عنصري المراعية لمادة الكيمياء في البطاريات عن طريق التحليل الطيفي امتصاص الأشعة السينية اللينة، وتبعثر الأشعة السينية غير مرن رنانة

Energy storage has become more and more a limiting factor of today's sustainable energy applications, including electric vehicles and green electric grid ...

Application of Voltage in Dynamic Light Scattering Particle Size Analysis

Dynamic light scattering (DLS) is a common method for characterizing the size distribution of polymers, proteins, and other nano- and microparticles. Modern instrumentation permits measurement of particle size as a function of time and/or temperature, but currently there is no simple method for performing DLS particle size distribution measurements in the presence of applied voltage. The ability to perform such measurements would be useful in the development of electroactive, stimuli-responsive polymers for applications such as sensing, soft robotics, and energy storage. Here, a technique using applied voltage coupled with DLS and a temperature ramp to observe changes in aggregation and particle size in thermoresponsive polymers with and without electroactive monomers is presented. The changes in aggregation behavior observed in these experiments were only possible through the combined application of voltage and temperature control. To obtain these results, a potentiostat was connected to a modified cuvette in order to apply voltage to a solution. Changes in polymer particle size were monitored using DLS in the presence of constant voltage. Simultaneously, current data were produced, which could be compared with particle size data, to understand the relationship between current and particle behavior. The polymer poly(N-isopropylacrylamide) (pNIPAM) served as a test polymer for this technique, as pNIPAM's response to temperature is well-studied. Changes in the lower-critical solution temperature (LCST) aggregation behavior of pNIPAM and poly(N-isopropylacrylamide)-block-poly(ferrocenylmethyl methacrylate), an electrochemically active block-copolymer, in the presence of applied voltage are observed. Understanding the mechanisms behind such changes will be important when trying to achieve reversible polymer structures in the presence of applied voltage.

Here, a protocol to apply voltage to solution during dynamic light scattering particle size measurements with the intent to explore the effect of voltage and temperature changes on polymer aggregation is presented.

تطبيق الجهد في الضوء الديناميكي التشتت تحليل حجم الجسيمات

Dynamic light scattering (DLS) is a common method for characterizing the size distribution of polymers, proteins, and other nano- and microparticles. ...