الكتاب تود أن أكنووليدجي الزملاء والشعب المعنية في الخطوات المختلفة للمشروع. الزملاء في كارلسروه ثمة تصميم المكتب، السيدين ديتريش كنوش وارنست فولكمار، في مركز البحوث المشتركة كارلسروه حلقة العمل المسيحي السادة Diebold يواكيم Küst للتصميم والتصنيع للمختبر في مشعب صمام (LOV) ورينجوالد GmbH تنفيذ برامج تقنية وضع الكشف عن توقف تدفق.

ملاحظة: تم إعداد الحلول من المياه عالية النقاء (18.2 MΩ سم) باستخدام أجهزة مصممة لتحليل أولتراتريس. وكان تنقية حمض النيتريك استخدام كوارتز دون غلى وحدة التقطير. كانت تعمل نظام لتنقية المياه ووحدة التقطير دون الغليان في غرفة نظيفة.
تنبيه: 90ريال حادة السمية والمسببة للسرطان. ممارسات السلامة المناسبة ضرورية عند إجراء هذه التجارب، بما في ذلك نظم الرقابة الهندسية ومعدات الحماية الشخصية.
1-تجربة إعداد
ملاحظة: وصف مفصل فيما يتعلق بهندسة البرمجيات ووظائفه يمكن الاطلاع على أماكن أخرى23.
<ol><li>ربط ميناء خروج "وحدات صمام الموقف" إلى منفذ دخول كاشف تدفق الإذاعة.</li>
	<li>قم بتوصيل خط الزناد الكاشف المحدد.</li>
	<li>تأكد من أن المنافذ LOV موصولة بشكل صحيح. التأكد من أن كميات كافية من حلول العمل متاحة للبروتوكول بأكملها وأن تظل أنابيب أخذ العينات السائلة المغمورة.</li>
	<li>ضمان أوتوسامبلير على، بدء تشغيل البرنامج أوتوسامبلير، وعن طريق واجهة البرنامج، تهيئة أوتوسامبلير. انقر فوق الزر تهيئة لإنشاء الاتصال بين الجهاز والكمبيوتر.</li>
	<li>ضمان تم بدء تشغيل البرنامج أوتوراد والتحقق من منافذ الاتصال باستخدام علامة التبويب خيارات وتهيئة البرنامج عن طريق واجهة المستخدم. الرجوع إلى قسم النقاش لمزيد من التفاصيل بشأن البرمجيات واجهة رسومية.</li>
	<li>ضمان أن تسلسل تحليل مبرمجة في الكشف عن البرمجيات. برنامج vew تسلسل باستخدام علامة التبويب محرر أسلوب في برنامج أوتوراد، بإدخال عدد الخطوات اللازمة والمهام والسرعة لكل جهاز. ملاحظة: يمكن الاطلاع على وصف تفصيلي لتشغيل البرامج في المنشور السابق23.</li>
	<li>استشارة موظف يستعين المحلية وتوظيف قياسات الإشعاع اللازمة لإكمال الإجراء باستخدام 90ريال.</li>
</ol>2-نظام التنظيف
<ol><li>تحميل 10 مل MΩ 18.2 سم المياه من قارورة للمحاقن في 90 mL·min-1. تأكد من تعيين موضع صمام حقنه في موقف لهذه الخطوة. في هذا الموقف، يحدث التحميل مباشرة للمحاقن وليس عن طريق الحب.</li>
	<li>قطره الماء للنفايات عن طريق اللولب القابضة بمعدل تدفق من 90 mL·min-1.</li>
	<li>تحميل 3 مل إيثانول بلفائف القابضة بمعدل تدفق mL·min 3-1. تعيين موضع صمام حقنه الخروج.</li>
	<li>إسقاط الإيثانول بلفائف الكاشف بمعدل تدفق mL·min 3-1.</li>
</ol>3-تحميل الراتنج للحب
<ol><li>بينما إثارة تعليق الراتنج في الماء (mg·mL 12-1)، تلتقط 3 مل عبر الحب. ضبط التدفق إلى mL·min 3-1
</li>
	<li>إسقاط تعليق الراتنج في قناة العمود بمعدل تدفق 1.2 mL·min-1
</li>
	<li>تنظيف لفائف القابضة وإسقاط بقايا الراتنج على القناة العمود. ولهذا الغرض، تحميل مل 9 MΩ 18.2 سم المياه من قارورة لحقنه بمعدل تدفق من 90 mL·min-1. ضمان أن موقف صمام حقنه في الموضع . قطره الماء للنفايات عن طريق اللولب القابضة بمعدل تدفق mL·min 3-1.</li>
</ol>4-تحليل تسلسل
<ol><li>تكييف العمود<ol>
<li>تحميل 2 مل HNO3 (م 4) عن طريق الحب للفائف عقد. ضبط التدفق إلى mL·min 6-1.</li>
		<li>إسقاط HNO3 على العمود بمعدل تدفق mL·min 1، 2-1.</li>
	</ol>
</li>
	<li>تحميل عينة والقضاء على التدخلات<ol>
<li>تحميل عينة (1.3 مل) من أوتوسامبلير إلى اللولب القابضة بمعدل تدفق mL·min 6-1.</li>
		<li>إسقاط العينة على العمود بمعدل تدفق mL·min 1، 2-1.</li>
		<li>تحميل 0.5 مل من HNO3 (م 4) إلى اللولب القابضة بمعدل تدفق mL·min 6-1.</li>
		<li>شطف العمود مع 0.5 مل من HNO3 (م 4) الوت تداخلات مصفوفة بمعدل تدفق mL·min 1، 2-1.</li>
	</ol>
</li>
	<li>شطف العينة وقياس<ol>
<li>تحميل 5 مل MΩ 18.2 سم مياه للفائف القابضة بمعدل تدفق mL·min 6-1.</li>
		<li>تحريك الجهاز. تعيين معدل تدفق السائل التﻷلؤ mL·min 2-1 في الكشف عن البرامج. تعيين يسكن إلى 10 ق. الملف عينة بحجم 2 مل.</li>
		<li>شطف العمود.</li>
	</ol>
</li>
	<li>شطف من التحقيق عينة وعقد لفائف<ol>
<li>تحميل 0.6 مل HNO3 (1%) للفائف القابضة بمعدل تدفق mL·min 6-1.</li>
		<li>تحميل 0.6 مل هواء للفائف القابضة بمعدل تدفق mL·min 6-1.</li>
		<li>تصريف 1.2 مل المخلوط للنفايات.</li>
	</ol>
</li>
	<li>استبدال الراتنج<ol>
<li>تحميل 0.2 مل إيثانول بلفائف القابضة بمعدل تدفق mL·min 3-1.</li>
		<li>شطف العمود مع 0.2 مل إيثانول بمعدل تدفق mL·min 1، 2-1.</li>
		<li>مسح القناة العمود مع 0.5 مل مياه بمعدل تدفق 0.45 mL·min-1.</li>
		<li>تصريف الراتنج المستخدمة للنفايات.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Zapata-Garc&#237;a, D., Wershofen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+radiochemical+analysis+strategies+for+decommissioning+activities.">Development of radiochemical analysis strategies for decommissioning activities.</a> Applied Radiation and Isotopes. 126, 204-207 (2017).</li><li>Hou, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiochemical+analysis+of+radionuclides+difficult+to+measure+for+waste+characterization+in+decommissioning+of+nuclear+facilities.">Radiochemical analysis of radionuclides difficult to measure for waste characterization in decommissioning of nuclear facilities.</a> Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry. 273 (1), 43-48 (2007).</li><li>Chung, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+determination+of+radiostrontium+in+milk+using+automated+radionuclides+separator+and+liquid+scintillation+counter.">Rapid determination of radiostrontium in milk using automated radionuclides separator and liquid scintillation counter.</a> Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry. 304 (1), 293-300 (2015).</li><li>Desmartin, P., Kopajtic, Z., Haerdi, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiostrontium-90+(90Sr)+Ultra-Traces+Measurements+by+Coupling+Ionic+Chromatography+(HPIC)+and+on+Line+Liquid+Scintillation+Counting+(OLLSC).">Radiostrontium-90 (90Sr) Ultra-Traces Measurements by Coupling Ionic Chromatography (HPIC) and on Line Liquid Scintillation Counting (OLLSC).</a> Environmental Monitoring and Assessment. 44 (1), 413-423 (1997).</li><li>Grate, J. W., Strebin, R., Janata, J., Egorov, O., Ruzicka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+Analysis+of+Radionuclides+in+Nuclear+Waste:+Rapid+Determination+of+90Sr+by+Sequential+Injection+Analysis.">Automated Analysis of Radionuclides in Nuclear Waste: Rapid Determination of 90Sr by Sequential Injection Analysis.</a> Analytical Chemistry. 68 (2), 333-340 (1996).</li><li>Holmgren, S., Tovedal, A., Bj&#246;rnham, O., Rameb&#228;ck, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+optimization+of+90Sr+measurements:+Sequential+measurement+of+multiple+samples+during+ingrowth+of+90Y.">Time optimization of 90Sr measurements: Sequential measurement of multiple samples during ingrowth of 90Y.</a> Applied Radiation and Isotopes. 110, 150-154 (2016).</li><li>Kavasi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+90Sr+in+soil+samples+affected+by+the+Fukushima+Daiichi+Nuclear+Power+Plant+accident.">Measurement of 90Sr in soil samples affected by the Fukushima Daiichi Nuclear Power Plant accident.</a> Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry. 303 (3), 2565-2570 (2015).</li><li>Ko&#322;aci&#324;ska, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automation+of+sample+processing+for+ICP-MS+determination+of+90Sr+radionuclide+at+ppq+level+for+nuclear+technology+and+environmental+purposes.">Automation of sample processing for ICP-MS determination of 90Sr radionuclide at ppq level for nuclear technology and environmental purposes.</a> Talanta. 169, 216-226 (2017).</li><li>Lazare, L., Crestey, C., Bleistein, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+90Sr+in+primary+coolant+of+pressurized+water+reactor.">Measurement of 90Sr in primary coolant of pressurized water reactor.</a> Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry. 279 (2), 633-638 (2009).</li><li>Mola, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+90Sr+and+210Pb+in+sludge+samples+using+a+LOV-MSFIA+system+and+liquid+scintillation+counting.">Determination of 90Sr and 210Pb in sludge samples using a LOV-MSFIA system and liquid scintillation counting.</a> Applied Radiation and Isotopes. 86, 28-35 (2014).</li><li>Plionis, A. A., Gonzales, E. R., Landsberger, S., Peterson, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+flow+scintillation+analysis+for+the+determination+of+Sr-90+in+bioassay+samples.">Evaluation of flow scintillation analysis for the determination of Sr-90 in bioassay samples.</a> Applied Radiation and Isotopes. 67 (1), 14-20 (2009).</li><li>Temba, E. S. C., Reis J&#250;nior, A. S., Amaral, &. #. 1. 9. 4. ;. M., Monteiro, R. P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Separation+and+determination+of+90Sr+in+low-+and+intermediate-level+radioactive+wastes+using+extraction+chromatography+and+LSC.">Separation and determination of 90Sr in low- and intermediate-level radioactive wastes using extraction chromatography and LSC.</a> Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry. 290 (3), 631-635 (2011).</li><li>Tomita, J., Yamamoto, M., Nozaki, T., Tanimura, Y., Oishi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+low-level+radiostrontium,+with+emphasis+on+in+situ+pre-concentration+of+Sr+from+large+volume+of+freshwater+sample+using+Powdex+resin.">Determination of low-level radiostrontium, with emphasis on in situ pre-concentration of Sr from large volume of freshwater sample using Powdex resin.</a> Journal of Environmental Radioactivity. 146, 88-93 (2015).</li><li>Egorov, O., Grate, J. W., Ruzicka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automation+of+radiochemical+analysis+by+flow+injection+techniques:+Am-Pu+separation+using+TRU-resin&#8482;+sorbent+extraction+column.">Automation of radiochemical analysis by flow injection techniques: Am-Pu separation using TRU-resin&#8482; sorbent extraction column.</a> Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry. 234 (1), 231-235 (1998).</li><li>Rodr&#237;guez, R., Avivar, J., Leal, L. O., Cerd&#224;, V., Ferrer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+for+automating+solid-phase+extraction+and+liquid-liquid+extraction+in+radiochemical+analysis.">Strategies for automating solid-phase extraction and liquid-liquid extraction in radiochemical analysis.</a> TrAC Trends in Analytical Chemistry. 76, 145-152 (2016).</li><li>Mir&#243;, M., Oliveira, H. M., Segundo, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analytical+potential+of+mesofluidic+lab-on-a-valve+as+a+front+end+to+column-separation+systems.">Analytical potential of mesofluidic lab-on-a-valve as a front end to column-separation systems.</a> TrAC Trends in Analytical Chemistry. 30 (1), 153-164 (2011).</li><li>Ko&#322;aci&#324;ska, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automation+of+sample+processing+for+ICP-MS+determination+of+90Sr+radionuclide+at+ppq+level+for+nuclear+technology+and+environmental+purposes.">Automation of sample processing for ICP-MS determination of 90Sr radionuclide at ppq level for nuclear technology and environmental purposes.</a> Talanta. , (2016).</li><li>Rodr&#237;guez, R., Avivar, J., Ferrer, L., Leal, L. O., Cerd&#224;, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+total+and+radioactive+strontium+separation+and+preconcentration+in+samples+of+environmental+interest+exploiting+a+lab-on-valve+system.">Automated total and radioactive strontium separation and preconcentration in samples of environmental interest exploiting a lab-on-valve system.</a> Talanta. 96, 96-101 (2012).</li><li>Rodr&#237;guez, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automation+of+99Tc+extraction+by+LOV+prior+ICP-MS+detection:+Application+to+environmental+samples.">Automation of 99Tc extraction by LOV prior ICP-MS detection: Application to environmental samples.</a> Talanta. 133, 88-93 (2015).</li><li>Villar, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+and+Simple+Method+for+99Tc+Determination+Using+a+Selective+Resin+and+Liquid+Scintillation+Detection+Applied+to+Urine+Samples.">Automatic and Simple Method for 99Tc Determination Using a Selective Resin and Liquid Scintillation Detection Applied to Urine Samples.</a> Analytical Chemistry. 85 (11), 5491-5498 (2013).</li><li>L'Annunziata, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Handbook of Radioactivity Analysis. , 1117-1178 (2012).</li><li>Roane, J. E., DeVol, T. A., Leyba, J. D., Fjeld, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+extraction+chromatography+resins+to+concentrate+actinides+and+strontium+from+soil+for+radiochromatographic+analyses.">The use of extraction chromatography resins to concentrate actinides and strontium from soil for radiochromatographic analyses.</a> Journal of Environmental Radioactivity. 66 (3), 227-245 (2003).</li><li>Barbesi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+LabVIEW&#174;-based+software+for+the+control+of+the+AUTORAD+platform:+a+fully+automated+multisequential+flow+injection+analysis+Lab-on-Valve+(MSFIA-LOV)+system+for+radiochemical+analysis.">A LabVIEW&#174;-based software for the control of the AUTORAD platform: a fully automated multisequential flow injection analysis Lab-on-Valve (MSFIA-LOV) system for radiochemical analysis.</a> Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry. 313 (1), 217-227 (2017).</li><li>Barbesi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+LabVIEW&#174;-based+software+for+the+control+of+the+AUTORAD+platform:+a+fully+automated+multisequential+flow+injection+analysis+Lab-on-Valve+(MSFIA-LOV)+system+for+radiochemical+analysis.">A LabVIEW&#174;-based software for the control of the AUTORAD platform: a fully automated multisequential flow injection analysis Lab-on-Valve (MSFIA-LOV) system for radiochemical analysis.</a> Journal of Radioanalytical and Nuclear. , 1-11 (2017).</li><li>Strahlenschutz, F. f. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Moderne Routine- und Schnellmethoden zur Bestimmung von SR-89 und SR-90 bei der Umwelt&#252;berwachung : Bericht einer Ad-hoc-Arbeitsgruppe des Arbeitskreises Umwelt&#252;berwachung (AKU). , (2008).</li><li>Currie, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limits+for+qualitative+detection+and+quantitative+determination.+Application+to+radiochemistry.">Limits for qualitative detection and quantitative determination. Application to radiochemistry.</a> Analytical Chemistry. 40 (3), 586-593 (1968).</li></ol>

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

توصيف الإشعاعية وحماية هي القضايا الحرجة أثناء جميع مراحل دورة الحياة منشأة نووية. الحاجة إلى تحديد النويدات المشعة خلال وقف تشغيل المرافق النووية يتطلب التحسين المستمر للإجراءات التحليلية. وهذا يستلزم تعزيز الانتقائية وحساسية، وتقصير وقت التحليل. نموذج أوتوراد يفي بهذه المتطلبات. وباﻹضافة إلى ذلك، النموذج هو المحمولة ويسمح تصميم الموقع. بنجاح تم تطبيق الأسلوب الآلي على الخط المقترح لتحديد 90ريال النشاط في العينات المائية.
ويبين الشكل 1 الرسم تخطيطي للنظام أوتوراد. وقد تحقق التواصل مع النموذج الأولى باستخدام لغة برمجة رسومية التجاري 2014 ابفيف. وتم نشر وضع هندسة البرمجيات الصك الظاهري (فيزا) لتكوين وبرمجة ومراقبة الواجهات. ويبين الشكل 2 الشاشة واجهة المستخدم الرسومية حيث يمكن التحقق من تكوين المنفذ قبل تهيئة النظام. وضع تأشيرة مستقلة عن نظام التشغيل وبرنامج البيئة، حيث أنه يوفر مرونة استثنائية. وقد نوقشت على نطاق واسع في السابق نشر24البنية الأساسية وميزات البرامج المتقدمة. تحققت تحسينات عن طريق التحكم بورتيس بجهاز الكمبيوتر باستخدام واجهة RS232، مما يتيح تعزيز مراقبة كلا بورتيس في وقت واحد، وإمكانية لإجراء قياسات في وقف تدفق الوضع. وفي المقابل، الاتصال RS232 يتفاعل بسرعة عندما يزيد من باكبريسوري النظام. وهذا يمكن أن يؤدي إلى خطأ في النظام والقياس وقف. ولذلك، اهتماما خاصا قد تدفع عملية تحميل الراتنج والقوة الأيونية للعينات.
تحقيق الاستغلال الأمثل للظروف التجريبية في مجموعة من التجارب باستخدام النظائر المستقرة السترونتيوم 86ريال كبديل ل المشعة 90ريال، واقتران هذا النظام أوتوراد لبرنامج المقارنات الدولية-ماجستير بدلاً من ديتكتكور بيتا النظام. ويبين الشكل 3 برنامج المقارنات الدولية--مرض التصلب العصبي المتعدد 86ريال شطف التشكيلات الجانبية. حصل على 86خصم ريال شطف التشكيلات الجانبية في اتفاق تام مع النتائج المبلغ عنها سابقا لمجموع السترونتيوم استخدام ضغط منخفض فصل الأجهزة25، وكانت فارغة. تم استخدام أسلوب الانحدار الخطي المربعات لتوليد نوبة لمنحنى الغرض الذي لا يدخل عنصر إضافي من عدم يقين. الخطي حصل كان 0.995، مع فقيم أقل من مستوى الأهمية. كان يحددها في اللد pg·g 2-1القياسات المتكررة للفراغ حسب كوري26. إمكانية تكرار نتائج الأسلوب، استناداً إلى الانحراف المعياري النسبي لمنطقة الذروة محسوبة على أساس ثلاث تشغيلات المتكررة، كانت دائماً أقل من 4 في المائة في النطاق من 10 إلى 120 pg·g-1. كتف شهد في التشكيلات الجانبية شطف على الأرجح الحرفية سبب التعبئة غير الأمثل للعمود في التكوين أوتوراد الآلي.
يبين الشكل 4 90ريال الشخصية باستخدام الكشف عن تدفق الإذاعة. نظام أوتوراد غير قادرة على فصل 90ريال سعودي في عينات مائي فعال.
يبين الشكل 5 الاعتماد على 90ريال تركيز مع الإشارة الخطي في نطاق الاهتمام. حد الكشف المشتقة في جي. ز-1 النطاق، تمكين، دون مزيد من التعديل، تحديد راديوسترونتيوم في التفكيك النووي وعينات توصيف النفايات. إمكانية تكرار نتائج الأسلوب، استخدام كاشف التﻷلؤ تدفق واستنادا إلى الانحراف المعياري النسبي لمنطقة الذروة، وهو حوالي 30% في نطاق التركيز قيد الدرس. بيد أن الوضع الراهن للنموذج، يحد تطبيقه على عينات بيئية، أساسا بسبب ضيق الوقت العد في الجهاز. وعلاوة على ذلك، قد تشبع المصفوفات المعقدة الراتنج في العمود مصغرة.
هذه التقنية توقف التدفق، حيث توقفت مضخة للكشف عن تدفق هاملتون والإذاعة أثناء أخذ القياس، ستنفذ. هذه الميزة سوف تحسين الحساسية بتمديد فترة الإقامة في الجزء الأكبر من منطقة العينة داخل الخلية التدفق. وهكذا، إشارة ذات مغزى إحصائيا أككولاتيد قبل إنهاء العينة الكاشف. هذا النهج سوف تحسين إحصاءات العد وحدود الاكتشاف. وباﻹضافة إلى ذلك، يجري تطبيق جديد بما في ذلك عمود مصغرة إضافية من تبادل الأيوني لإزالة عناصر المصفوفة التي يمكن أن تؤثر على الاحتفاظ والفصل بين مختلف النويدات المشعة في العينات الدارسة المعقدة.

محطات الطاقة النووية التجارية حوالي 150 الحزب التقدمي الوطني يخضعون لسحب الترخيص، ولكن العدد الإجمالي للمرافق النووية أكبر بكثير إذا أخذت في الاعتبار1البحوث مرافق التخصيب وإعادة المعالجة. وقف تشغيل المنشآت النووية مكلف للغاية وتنطوي على النقل وإيقاف موقع قياس المواد الملوثة. وفورات من الممكن باعتماد تقنيات القياس في الموقع ومرنة1. ولذلك هناك حاجة ملحة للسريع على الأساليب التحليلية موقع دعم وقف تشغيل المرافق النووية القديمة. غاما-بواعث يمكن بسهولة وبشكل انتقائي تحديد استخدام مطيافية أشعة غاما، ولكن هناك نقص في أساليب تحليلية في الموقع الثابت لقياس النويدات المشعة (HTM)2. بين HTM، 90ريال من اهتمام كبير بسبب سميتها وانبعاث الطاقة العالية. تصميمها تستغرق وقتاً طويلاً ويتطلب فصل عن التدخلات والقياس الكمي باستخدام المهارات أو الطرق الطيفية3،4،5،،من67، 8،،من910،11،،من1213.
أساليب الكيمياء الإشعاعية القياسية هي مضيعة للوقت، وغالباً ما تتطلب التكرار الحصول غلة كافية من السترونتيوم. ولذلك، هناك حاجة ملحة إلى طرق أسرع ودقة. بالإضافة إلى البروتوكولات القياسية الانفصال، تطبق تقنيات حقن التدفق في تنقية و/أو قبل تركيز النظائر المشعة5،،من1415. مختبر في الصمام (LOV) الأجهزة مزيد من تنمية في تقنيات التدفق. وهي منصات قابلة للبرمجة، والقائم على التدفق مع وسائط مختلفة اقتران والمعرض براعة عالية16. تسمح هذه الأجهزة فصل تلقائي وقبل تركيز تحليلها قبل الكشف، مما يزيد من إمكانية تكرار نتائج والتكرار8،17،،من1819. نظم LOV بالإضافة إلى مضخات التدفق مولتيسيرينجي قد استخدمت على نطاق واسع للكشف عن النويدات المشعة، نظراً لتقليل استهلاك الكاشف والنفايات الجيل8،،من1017، 18 , 19 , 20-على الرغم من ذلك، أفادت الدراسات المتعلقة بالكشف على الإنترنت على مستويات فائقة-تتبع هي متفرق8،17.
القياسات في الموقع من مواد مشعة لها العديد من الفوائد والمزايا، ولكن لا يوجد تطبيق التﻷلؤ تدفق لرصد 90ريال. أساسا، هو يتحقق القياس الكمي باستخدام كشف على إنترنت أن يمزج النذرة قادمة من الجهاز LOV مع متألقاً كوكتيل11،،من2122. ثم يتم ضخ الخليط من خلال خلية العد والقياس باستخدام فوتومولتيبليرس المزدوجة. نظراً لصغر حجم الخلية، يتم قياس الوقت في الجدول ثانية.
والهدف من هذا البحث هو تطوير طريقة مؤتمتة بالكامل للكشف عن السترونتيوم على الخط أكثر من مجموعة عمل كبيرة، تغطي كل التركيزات ذات الصلة بيئياً وأيضا تلك الموجودة في مجاري النفايات السائلة في الصناعة النووية. المنصة متحركة ويمكن تركيبة في سيارة لإجراء تحليل العينات المائية في الموقع.

<table><tbody><tr><td>microLAB 600 series</td><td>Hamilton</td><td>ML600EE6910</td><td>Two dual syringe pump system, equiped with two 10 mL glass syringes. The instruments are interconnected using the CAN port (daisy chain).</td></tr><tr><td>FlowLogic U</td><td>LabLogic</td><td>SG-BXX-05</td><td>Liquid scintillator with high flash point</td></tr><tr><td>&amp;szlig;-RAM 5</td><td>LabLogic</td><td></td><td>flow detector, 2000 &amp;mu;L coiled Teflon flow cell.Software Laura 4.2.8 (LabLogic, England) run on desktop PC and connected to the detector via USB</td></tr><tr><td>SC-&amp;mu; DX Autosampler</td><td>Elemental Scientific Instruments (ESI)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cheminert selector</td><td>Valco Instruments Co. Inc.</td><td></td><td>in-house made Lab-on-Valve has been mounted on this selector</td></tr><tr><td>Modular Valve&lt;br/&gt; Positioner (MVP)</td><td>Hamilton</td><td></td><td></td></tr><tr><td>mini magnetic stirrer</td><td>IKA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nitric Acid Suprapur 65%</td><td>Merck</td><td>1.00441.1000</td><td>purified using quartz sub-boiling distillation unit</td></tr><tr><td>Sr-resin</td><td>Eichchrom Tecnologies, Inc</td><td>SR-B100-A</td><td>particle size 100-150 &amp;micro;m</td></tr><tr><td>Water system Elix 3 in combination with Mili-Q Element A10</td><td>Millipore</td><td></td><td>high-purity water (18.2 M&amp;Omega; cm)</td></tr><tr><td>Sr-90 standard</td><td>Eckert &amp;amp; Ziegler</td><td>7090</td><td>Sr-90 concentration 1.915 kBq/g &amp;plusmn; 3.0%, reference date 15-May-2016 12:00 PST</td></tr><tr><td>MLS quartz sub-boiling distillation unit</td><td>MLS GmbH</td><td></td><td>Subboiling unit for the purification of HCl and nitric acid</td></tr></tbody></table>

automated 90sr separation and preconcentration in a lab-on-valve system at ppq level

وقد تم وضع نظام سريعة وتلقائية والمحمولة لفصل وتحديد راديوسترونتيوم في العينات المائية، باستخدام تحليل حقن التدفق المتسلسل راتنج ريال ومتعددة،. وقد تحددت التركيزات السترونتيوم المشعة عن طريق تدفق التﻷلؤ العد، السماح للتصميم على الإنترنت وفي الموقع أيضا. يمكن تحديد النظام المقترح الاسترونتيوم المشعة على المستويات الصناعية ذات الصلة دون مواصلة تعديل استخدام وقت التحليل الكلي لأقل من 10 دقيقة لكل عينة مائي. هو الحد الأقصى للكشف عن 320 fg·g-1 (1.7 بكريل/g).

منصة أوتوراد مؤتمتة بالكامل التي تشغلها البرامج المستندة إلى ابفيف محلية الصنع تم وضعها وتنفيذها (الشكل 1). البرنامج يتيح قدرا كافياً من المرونة للعمليات اليومية في بيئة سهلة الاستخدام (الشكل 2). براعة المنهاج اتضح أيضا باقتران ذلك بكشف مختلفة (الشكل 3). تطبيق الأسلوب قد تجلى في العينات المائية ارتفعت مع 90ريال القياسية (الشكل 4). معلمات الخطي، مجموعة الخطي، الحد من الكشف عن (اللد) والتكرار قد تم تقييمها (الشكل 5).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57722/57722fig1.jpg"> رقم 1. التمثيل التخطيطي للنظام أوتوراد عرض تكوين المنفذ والكواشف المستخدمة. المنفذ الرئيسي متصلاً بمضخة الحقن عن طريق اللولب القابضة (10 مل)؛ كانت مختلقة ميثاكريلات LOV في البيت. <a href="/files/ftp_upload/57722/57722fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57722/57722fig2.jpg"> رقم 2. برامج أوتوراد خيارات القائمة- منطقة الزاوية اليمنى السفلي يظهر المنافذ المعينة. عن طريق التمرير إلى أسفل القائمة، المستخدم قادراً على إجراء تغييرات في التعيين. <a href="/files/ftp_upload/57722/57722fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57722/57722fig3.jpg"> الشكل 3. 86 ريال شطف قمم استخدام الحث يقترن بلازما الكتلي (برنامج المقارنات الدولية-MS) كجهاز للكشف عن- السترونتيوم هو التيد كمياً من العمود من خلال 100 الأولى s شطف. <a href="/files/ftp_upload/57722/57722fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57722/57722fig4.jpg"> الشكل 4. ريال (6.6 pg·g-1) 90بكريل 34.5 ± 1 شطف ذروة استخدام ß الرام 5 ككاشف. كانت فترة الإقامة في اللولب 40 ثانية. هو معدل الانتعاش العام للمنهجية المقترحة ل 90ريال 70% ± 5%. <a href="/files/ftp_upload/57722/57722fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57722/57722fig5.jpg"> الرقم 5. منحنى المعايرة لمعدل العد مقابل تركيز راديوسترونتيوم. تم الحصول عليها من الخطي جيدة (ص2 = 0.997). وحسب حد الكشف ك fg·g 320-1 ± 5 (1.7 بكريل) بثلاثة نقطة الثلاث مرات الانحراف المعياري للفراغ. <a href="/files/ftp_upload/57722/57722fig5large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>

Watch this Scientific Journal Video about Automated 90Sr Separation and Preconcentration in a Lab-on-Valve System at Ppq Level at JoVE.com

Automated 90Sr Separation and Preconcentration in a Lab-on-Valve System at Ppq Level

الفصل الآلي 90ريال وبريكونسينتريشن في نظام المعمل على صمام المستوى بك

نقدم هنا، أوتوراد المحمولة منهاج الفصل الإشعاعي السريع وتحديد 90ريال، منتج انشطار هامة جداً ذات صلة بالنفايات النووية.

A quick, automated and portable system for the separation and determination of radiostrontium in aqueous samples, using Sr-resin and multi sequential flow ...

automated-90sr-separation-preconcentration-lab-on-valve-system-at-ppq

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Chemistry

Automated 90Sr Separation and Preconcentration in a Lab-on-Valve System at Ppq Level

Atoms and Elements

SCIENTISTS IN ACTION

7.9K Views.  European Commission, DG Joint Research Centre - JRC. نقدم هنا، أوتوراد المحمولة منهاج الفصل الإشعاعي السريع وتحديد 90ريال، منتج انشطار هامة جداً ذات صلة بالنفايات النووية.

Video: Automated 90Sr Separation and Preconcentration in a Lab-on-Valve System at Ppq Level

Deep Proteome Profiling by Isobaric Labeling, Extensive Liquid Chromatography, Mass Spectrometry, and Software-assisted Quantification

Many exceptional advances have been made in mass spectrometry (MS)-based proteomics, with particular technical progress in liquid chromatography (LC) coupled to tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) and isobaric labeling multiplexing capacity. Here, we introduce a deep-proteomics profiling protocol that combines 10-plex tandem mass tag (TMT) labeling with an extensive LC/LC-MS/MS platform, and post-MS computational interference correction to accurately quantitate whole proteomes. This protocol includes the following main steps: protein extraction and digestion, TMT labeling, 2-dimensional (2D) LC, high-resolution mass spectrometry, and computational data processing. Quality control steps are included for troubleshooting and evaluating experimental variation. More than 10,000 proteins in mammalian samples can be confidently quantitated with this protocol. This protocol can also be applied to the quantitation of post translational modifications with minor changes. This multiplexed, robust method provides a powerful tool for proteomic analysis in a variety of complex samples, including cell culture, animal tissues, and human clinical specimens.

We present a protocol to accurately quantitate proteins with isobaric labelling, extensive fractionation, bioinformatics tools, and quality control steps in combination with liquid chromatography interfaced to a high-resolution mass spectrometer.

التنميط البروتين العميق بوسم إيسوباريك وواسعة النطاق اللوني السائل والطيف الكتلي وساعدت برامج القياس الكمي

Many exceptional advances have been made in mass spectrometry (MS)-based proteomics, with particular technical progress in liquid chromatography (LC) ...

Biochemistry

Radiolabeling and Quantification of Cellular Levels of Phosphoinositides by High Performance Liquid Chromatography-coupled Flow Scintillation

Phosphoinositides (PtdInsPs) are essential signaling lipids responsible for recruiting specific effectors and conferring organelles with molecular identity and function. Each of the seven PtdInsPs varies in their distribution and abundance, which are tightly regulated by specific kinases and phosphatases. The abundance of PtdInsPs can change abruptly in response to various signaling events or disturbance of the regulatory machinery. To understand how these events lead to changes in the amount of PtdInsPs and their resulting impact, it is important to quantify PtdInsP levels before and after a signaling event or between control and abnormal conditions. However, due to their low abundance and similarity, quantifying the relative amounts of each PtdInsP can be challenging. This article describes a method for quantifying PtdInsP levels by metabolically labeling cells with 3H-myo-inositol, which is incorporated into PtdInsPs. Phospholipids are then precipitated and deacylated. The resulting soluble 3H-glycero-inositides are further extracted, separated by high-performance liquid chromatography (HPLC), and detected by flow scintillation. The labeling and processing of yeast samples is described in detail, as well as the instrumental setup for the HPLC and flow scintillator. Despite losing structural information regarding acyl chain content, this method is sensitive and can be optimized to concurrently quantify all seven PtdInsPs in cells.

Phosphoinositides are signaling lipids whose relative abundance rapidly changes in response to various stimuli. This article describes a method to measure the abundance of phosphoinositides by metabolically labeling cells with 3H-myo-inositol, followed by extraction and deacylation. Extracted glycero-inositides are then separated by high-performance liquid chromatography and quantified by flow scintillation.

Radiolabeling والكمي لمستويات الخلايا من Phosphoinositides التي كتبها التلألؤ تدفق عالية الأداء اللوني السائل الديناميكي

Phosphoinositides (PtdInsPs) are essential signaling lipids responsible for recruiting specific effectors and conferring organelles with molecular ...

Quantitative and Qualitative Method for Sphingomyelin by LC-MS Using Two Stable Isotopically Labeled Sphingomyelin Species

We present a method of analyzing sphingomyelin (SM) qualitatively and quantitatively by liquid chromatography-electrospray Ionization-tandem mass spectrometry (LC-ESI-MS/MS). SM is a common sphingolipid composed of a phosphorylcholine and a ceramide as the hydrophilic and hydrophobic component, respectively. A number of SM species are present in mammalian cells due to a variety in the sphingoid long chain base (LCB) and an N-acyl moiety in the ceramide. In this report, we show a method of estimating the number of carbon and double bonds in a LCB and an N-acyl moiety based on their corresponding product ions in MS/MS/MS (MS3) experiments. In addition, we present a quantitative analysis method for SM using two stable isotopically labeled SM species, which facilitates determining the range used in SM quantitation. The present method will be useful in characterizing a variety of SM species in biological samples and industrial products such as cosmetics.

Here, we present a protocol to quantify and qualify each sphingomyelin species using multiple reaction monitoring and MS/MS/MS mode, respectively.

الأسلوب الكمي والنوعي سفينجوميلين من LC-MS استخدام اثنين مستقرة نظير المسمى الأنواع سفينجوميلين

We present a method of analyzing sphingomyelin (SM) qualitatively and quantitatively by liquid chromatography-electrospray Ionization-tandem mass ...

Preparation of Human Tissues Embedded in Optimal Cutting Temperature Compound for Mass Spectrometry Analysis

Sphingolipids are cellular components that have well-established roles in human metabolism and disease. Mass spectrometry can be used to determine whether sphingolipids are altered in a disease and investigate whether sphingolipids can be targeted clinically. However, properly powered prospective studies that acquire tissues directly from the surgical suite can be time consuming, and technically, logistically, and administratively challenging. In contrast, retrospective studies can take advantage of cryopreserved human specimens already available, usually in large numbers, at tissue biorepositories. Other advantages of procuring tissues from biorepositories include access to information associated with the tissue specimens including histology, pathology, and in some instances clinicopathological variables, all of which can be used to examine correlations with lipidomics data. However, technical limitations related to the incompatibility of optimal cutting temperature compound (OCT) used in the cryopreservation and mass spectrometry is a technical barrier for the analysis of lipids. However, we have previously shown that OCT can be easily removed from human biorepository specimens through cycles of washes and centrifugation without altering their sphingolipid content. We have also previously established that sphingolipids in human tissues cryopreserved in OCT are stable for up to 16 years. In this report, we outline the steps and workflow to analyze sphingolipids in human tissue specimens that are embedded in OCT, including washing tissues, weighing tissues for data normalization, the extraction of lipids, preparation of samples for analysis by liquid chromatography electrospray ionization tandem mass spectrometry (LC-ESI-MS/MS), mass spectrometry data integration, data normalization, and data analysis.

Sphingolipids are bioactive metabolites with well-established roles in human disease. Characterizing alterations in tissues with mass-spectrometry can reveal roles in disease etiology or identify therapeutic targets. However, the OCT-compound used for cryopreservation in biorepositories interferes with mass-spectrometry. We outline methods to analyze sphingolipids in human tissues embedded in OCT with LC-ESI-MS/MS.

تحضير الأنسجة البشرية المضمنة في مركب درجة حرارة القطع الأمثل لتحليل مطياف الكتلة

Sphingolipids are cellular components that have well-established roles in human metabolism and disease. Mass spectrometry can be used to determine whether ...

Cancer Research

A Microfluidic Platform for Precision Small-volume Sample Processing and Its Use to Size Separate Biological Particles with an Acoustic Microdevice

A major advantage of microfluidic devices is the ability to manipulate small sample volumes, thus reducing reagent waste and preserving precious sample. However, to achieve robust sample manipulation it is necessary to address device integration with the macroscale environment. To realize repeatable, sensitive particle separation with microfluidic devices, this protocol presents a complete automated and integrated microfluidic platform that enables precise processing of 0.15&#8211;1.5 ml samples using microfluidic devices. Important aspects of this system include modular device layout and robust fixtures resulting in reliable and flexible world to chip connections, and fully-automated fluid handling which accomplishes closed-loop sample collection, system cleaning and priming steps to ensure repeatable operation. Different microfluidic devices can be used interchangeably with this architecture. Here we incorporate an acoustofluidic device, detail its characterization, performance optimization, and demonstrate its use for size-separation of biological samples. By using real-time feedback during separation experiments, sample collection is optimized to conserve and concentrate sample. Although requiring the integration of multiple pieces of equipment, advantages of this architecture include the ability to process unknown samples with no additional system optimization, ease of device replacement, and precise, robust sample processing.

This protocol describes a system architecture for performing automated small volume (0.15&#8211;1.5 ml) particle separations using a microfluidic device, and discusses methods to optimize acoustofluidic device performance and operation.

A منصة ميكروفلويديك لتجهيز الدقة الصغيرة الحجم عينة واستخدامها لحجم الجسيمات البيولوجية منفصلة مع Microdevice الصوتية

A major advantage of microfluidic devices is the ability to manipulate small sample volumes, thus reducing reagent waste and preserving precious sample. ...

Bioengineering

Preparing an Isotopically Pure 229Th Ion Beam for Studies of 229mTh

A methodology is described to generate an isotopically pure 229Th ion beam in the 2+ and 3+ charge states. This ion beam enables one to investigate the low-lying isomeric first excited state of 229Th at an excitation energy of about 7.8(5) eV and a radiative lifetime of up to 104 seconds. The presented method allowed for a first direct identification of the decay of the thorium isomer, laying the foundations to study its decay properties as prerequisite for an optical control of this nuclear transition. High energy 229Th ions are produced in the &#945;&#160;decay of a radioactive 233U source. The ions are thermalized in a buffer-gas stopping cell, extracted and subsequently an ion beam is formed. This ion beam is mass purified by a quadrupole-mass separator to generate a pure ion beam. In order to detect the isomeric decay, the ions are collected on the surface of a micro-channel plate detector, where electrons, as emitted in the internal conversion decay of the isomeric state, are observed.

Preparing an Isotopically Pure 229Th Ion Beam for Studies of 229mTh

We present a protocol for the generation of an isotopically purified low-energy 229Th ion beam from a 233U source. This ion beam is used for the direct detection of the 229mTh ground-state decay via the internal-conversion decay channel. We also measure the internal conversion lifetime of 229mTh as well.

إعداد شعاع ايون نقي 229للدراسات من 229mال

A methodology is described to generate an isotopically pure 229Th ion beam in the 2+ and 3+ charge states. This ion beam enables one to investigate the ...

Engineering

Carrier-assisted One-pot Sample Preparation for Targeted Proteomics Analysis of Small Numbers of Human Cells

Protein analysis of small numbers of human cells is primarily achieved by targeted proteomics with antibody-based immunoassays, which have inherent limitations (e.g., low multiplex and unavailability of antibodies for new proteins). Mass spectrometry (MS)-based targeted proteomics has emerged as an alternative because it is antibody-free, high multiplex, and has high specificity and quantitation accuracy. Recent advances in MS instrumentation make MS-based targeted proteomics possible for multiplexed quantification of highly abundant proteins in single cells. However, there is a technical challenge for effective processing of single cells with minimal sample loss for MS analysis. To address this issue, we have recently developed a convenient protein carrier-assisted one-pot sample preparation coupled with liquid chromatography (LC) - selected reaction monitoring (SRM) termed cLC-SRM for targeted proteomics analysis of small numbers of human cells. This method capitalizes on using the combined excessive exogenous protein as a carrier and low-volume one-pot processing to greatly reduce surface adsorption losses as well as high-specificity LC-SRM to effectively address the increased dynamic concentration range due to the addition of exogeneous carrier protein. Its utility has been demonstrated by accurate quantification of most moderately abundant proteins in small numbers of cells (e.g., 10-100 cells) and highly abundant proteins in single cells. The easy-to-implement features and no need for specific devices make this method readily accessible to most proteomics laboratories. Herein we have provided a detailed protocol for cLC-SRM analysis of small numbers of human cells including cell sorting, cell lysis and digestion, LC-SRM analysis, and data analysis. Further improvements in detection sensitivity and sample throughput are needed towards targeted single-cell proteomics analysis. We anticipate that cLC-SRM will be broadly applied to biomedical research and systems biology with the potential of facilitating precision medicine.

A protein carrier-assisted one-pot sample preparation coupled with liquid chromatography (LC) - selected reaction monitoring (SRM) termed cLC-SRM is a convenient method for multiplexed targeted proteomics analysis of small numbers of cells, including single cells. It capitalizes on using excessive exogenous protein as a carrier and high-specificity LC-SRM for targeted quantification.

Protein analysis of small numbers of human cells is primarily achieved by targeted proteomics with antibody-based immunoassays, which have inherent ...

Technical Aspect of the Automated Synthesis and Real-Time Kinetic Evaluation of [11C]SNAP-7941

Positron emission tomography (PET) is an essential molecular imaging technique providing insights into pathways and using specific targeted radioligands for in vivo investigations. Within this protocol, a robust and reliable remote-controlled radiosynthesis of [11C]SNAP-7941, an antagonist to the melanin-concentrating hormone receptor 1, is described. The radiosynthesis starts with cyclotron produced [11C]CO2 that is subsequently further reacted via a gas-phase transition to [11C]CH3OTf. Then, this reactive intermediate is introduced to the precursor solution and forms the respective radiotracer. Chemical as well as the radiochemical purity are determined by means of RP-HPLC, routinely implemented in the radiopharmaceutical quality control process. Additionally, the molar activity is calculated as it is a necessity for the following real-time kinetic investigations. Furthermore, [11C]SNAP-7941 is applied to MDCKII-WT and MDCKII-hMDR1 cells for evaluating the impact of P-glycoprotein (P-gp) expression on cell accumulation. For this reason, the P-gp expressing cell line (MDCKII-hMDR1) is either used without or with blocking prior to experiments by means of the P-gp substrate (&#177;)-verapamil and the results are compared to the ones observed for the wildtype cells. The overall experimental approach demonstrates the importance of a precise time-management that is essential for every preclinical and clinical study using PET tracers radiolabelled with short-lived nuclides, such as carbon-11 (half-life: 20 min).

Technical Aspect of the Automated Synthesis and Real-Time Kinetic Evaluation of [11C]SNAP-7941

Here, we represent a protocol for the fully automated radiolabelling of [11C]SNAP-7941 and the analysis of the real-time kinetics of this PET-tracer on P-gp expressing and non-expressing cells.

الجانب التقني من التوليف الآلي والتقييم الحركي في الوقت الحقيقي من [11C] SNAP-7941

Positron emission tomography (PET) is an essential molecular imaging technique providing insights into pathways and using specific targeted radioligands ...

Automated Preparation of [68Ga]Ga-3BP-3940 on a Synthesis Module for PET Imaging of the Tumor Microenvironment

A fast, efficient method has been developed on the GAIA synthesis module for automated gallium-68 radiolabeling of 3BP-3940, a molecular imaging probe targeting the fibroblast activation protein for positron emission tomography imaging of the tumor microenvironment. The reaction conditions involved acetate buffer (final concentration: 0.1 M), methionine as an anti-radiolysis agent (final concentration: 5.4 mg/mL), and 30 &#181;g of 3BP-3940, with heating for 8 min at 98 &#176;C. A final purification step on a C18 cartridge was necessary to obtain a radiolabeled product of high purity. In contrast, the generator-produced 68Ga was used directly without a concentration step on a cation exchange cartridge. The production of three validation batches confirmed the method&#39;s reliability, allowing the synthesis of [68Ga]Ga-3BP-3940 in 22.3 &#177; 0.6 min with high radiochemical purity (RCP), as determined by both radio-HPLC (99.1% &#177; 0.1%) and radio-TLC (99.2% &#177; 0.1%). The average radiochemical yield, based on RCP values measured by radio-HPLC, was 74.4% &#177; 3.3%. The stability of the radiolabeled product was demonstrated for up to 4 h after preparation. This protocol provides a reliable, rapid, and efficient methodology for the preparation of [68Ga]Ga-3BP-3940, which can easily be transposed to a clinical setting.

This research describes the automated process for [68Ga]Ga-3BP-3940 production with the GAIA V2 synthesizer, for PET imaging of fibroblast activation protein. The results of quality control tests performed on three test batches are also presented.

A fast, efficient method has been developed on the GAIA synthesis module for automated gallium-68 radiolabeling of 3BP-3940, a molecular imaging probe ...

Prion Safety Laboratory Swipe Test

Transmission of iatrogenic prion disease has occurred from contaminated neurosurgical tools, transplant materials, and occupational exposure to prion-contaminated laboratory tools. Prions cause disease by the templated misfolding of the normal cellular form of the prion protein, PrPC, into the misfolded and pathogenic form PrPSc and are invariably fatal. Reducing iatrogenic and occupational prion transmission is challenging. First, prions can bind to and persist on surfaces for long periods of time. Second, prions are highly resistant to inactivation. Given this, surfaces can retain infectivity for long periods of time following ineffective decontamination. Not only can this pose a potential occupational risk for prion laboratory workers, but it could potentially cross-contaminate laboratory experiments utilizing sensitive prion amplification techniques. The protocol described here for a prion safety laboratory swipe test includes steps for the identification and documentation of high-traffic laboratory areas, recommended swabbing controls to ensure the validity of results, steps to identify proper responses to positive surface swabbing sites, representative results from prion swipe testing, as well as potential artifactual results. Overall, the prion safety laboratory swipe test can be implemented as part of a broader prion safety program to assess decontamination of surfaces, monitor common spaces for prion contamination, and implement the documentation of prion decontamination status.

A method to assess commonly used areas in laboratory settings for prion contamination and effective decontamination is lacking. The protocol described here provides key fundamentals for implementing a laboratory prion safety swipe test that can easily be modified to meet the individual needs of specific laboratories.

الفصل الآلي ⁹⁰ريال وبريكونسينتريشن في نظام المعمل على صمام المستوى بك

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

التنميط البروتين العميق بوسم إيسوباريك وواسعة النطاق اللوني السائل والطيف الكتلي وساعدت برامج القياس الكمي

Radiolabeling والكمي لمستويات الخلايا من Phosphoinositides التي كتبها التلألؤ تدفق عالية الأداء اللوني السائل الديناميكي

الأسلوب الكمي والنوعي سفينجوميلين من LC-MS استخدام اثنين مستقرة نظير المسمى الأنواع سفينجوميلين

تحضير الأنسجة البشرية المضمنة في مركب درجة حرارة القطع الأمثل لتحليل مطياف الكتلة

A منصة ميكروفلويديك لتجهيز الدقة الصغيرة الحجم عينة واستخدامها لحجم الجسيمات البيولوجية منفصلة مع Microdevice الصوتية

إعداد شعاع ايون نقي ²²⁹للدراسات من ^229mال

Carrier-assisted One-pot Sample Preparation for Targeted Proteomics Analysis of Small Numbers of Human Cells

الجانب التقني من التوليف الآلي والتقييم الحركي في الوقت الحقيقي من [¹¹C] SNAP-7941

Automated Preparation of [⁶⁸Ga]Ga-3BP-3940 on a Synthesis Module for PET Imaging of the Tumor Microenvironment

اختبار التمرير المختبري للسلامة Prion