هذه التقنية تمثل استراتيجية عملية وفعالة بطبيعتها لاستخراج المنتجات الطبيعية في الكيمياء العزل. ونعتقد أنها أداة استخراج مفيدة ومجانية. لأن هذه هي عملية تدفق سريع، يتم تسخين استخراج فقط لفترة قصيرة واستخراج أصباغ النبات المستعصية التي غالبا ما تعقد تنقية يتم تقليل.
ونحن نعتقد أن هذه التقنية مناسبة تماما لتمكين أخذ العينات الكيميائية التصنيفية بالإضافة إلى الكيمياء الطبية عن طريق تسهيل التنقيب البيولوجي الذي هو البحث عن جزيئات قيمة في الطبيعة. المرئية توضيحية من هذا الأسلوب مهم كما إعداد عينة في خطوات الاستخراج يتم شرحها بصرياً بشكل أكثر فعالية. وهذا يعزز أيضا بساطة استخراج واستخدامها المناسب في بيئة مختبر المرحلة الجامعية.
ضع 12.5 جرام من القرنفل المطحون الخشن في كوب 250 ملليلتر. إضافة 12.5 غرام من الرمال واخلط جيدا. المقبل، وجمع portafilter وتحميل السلة مع القرنفل بأكملها والرمال خليط.
استخدام تلاعب لضغط طفيفة على العينة مع التأكد من عدم ضغط عليه أكثر من اللازم مما من شأنه أن يمنع السوائل من التدفق. تحميل portafilter في آلة اسبرسو ووضع واضحة 250 ملليمتر منقار تحته. إضافة محلول يحتوي على 30 في المئة الإيثانول في الماء إلى خزان المياه.
باستخدام آلة إسبرسو، وجمع 100 ملليلتر من استخراج. دع portafilter ينتهي من يقطر ثم قم بإزالته من آلة الإسبريسو. استخدام ملعقة لإزالة القرنفل يطحن من portafilter والتخلص منها في حاوية النفايات الصلبة.
شطف أي المواد الصلبة المتبقية مع مياه الصنبور في الحوض. نقل القارص التي تحتوي على مستخلصات القرنفل إلى حمام جليدي والسماح لها تبرد حتى تنخفض درجة الحرارة إلى ما لا يقل عن 30 درجة مئوية. في غطاء الدخان، صب استخراج المبردة في قمع فاصل 250 ملليلتر.
إضافة 30 ملليلتر من الهيكسين ويخلط عن طريق هز بلطف. ضع القمع الفاصل في مشبك حلقة مثبت على حامل معوج، واسمح لفصل الطبقات مائي وعضوية. يمكن أن يستغرق ما يصل إلى 10 دقيقة لفصل الطبقات لذلك نوصي بتنفيذ تحسين المذيبات من TLCs أثناء الانتظار.
جمع طبقة مائي مرة أخرى إلى 250 ملليمتر منقار. نقل الطبقة العضوية التي تحتوي على المنتج إلى قارورة مخروطية 250 ملليلتر نظيفة. ثم صب حزمة الوجه مائي في قمع فاصل.
استخراج طبقة مائي مرتين إضافية مع الهيكسان. باستخدام 30 ملليلتر من الهيكسين في كل مرة. الجمع بين الطبقات العضوية في نفس 250 ملليلتر قارورة مخروطية بعد كل استخراج.
بعد استخراج السائل الثالث صب استخراج العضوية مجتمعة في قمع فاصل. غسل مستخلص العضوية بإضافة 100 ملليلتر من الماء وتهتز بقوة. جمع طبقة العضوية في قارورة مخروطية 250 ملليلتر نظيفة.
ثم جففه بإضافة كبريتات المغنيسيوم ودوامة. تصفية الخليط المجفف من خلال ورقة مرشح مخدّر الواردة في قمع الزجاج في قارورة القاع الجولة. باستخدام المبخر الدوار ، يتبخر المذيب من الترشيحات التي تم جمعها.
ثم وزن قارورة تحتوي على النفط الناتج. إضافة 10 ملليلتر من الهيكسان إلى قارورة أسفل جولة تحتوي على الأوجينول الخام التي تحتوي على استخراج. صب الحل الناتج في قمع فاصل 250 ملليلتر.
شطف قارورة أسفل مستديرة مع 10 ملليلتر من الهيكسين وإضافة هذا إلى قمع فاصل. استخراج محلول الهيكسان مرتين مع ثلاثة هيدروكسيد الصوديوم المائي المولي عن طريق استخراج السائل السائل. باستخدام 25 ملليلتر من هيدروكسيد الصوديوم لكل عملية استخراج.
جمع الطبقات مائي من كل استخراج والجمع بينها في قارورة مخروطية 250 ملليلتر. جمع طبقة العضوية في قارورة مخروطية 50 ملليلتر. ثم جففه بإضافة كبريتات المغنيسيوم إلى القارورة ويحوم عليه.
تصفية الحل من خلال ورقة مرشح مخدد الواردة في قمع الزجاج في 100 ملليلتر قبل وزن قارورة أسفل مستديرة. تخلص من البقايا الصلبة ثم استخدم المبخر الدوار لإزالة المذيب. بعد هذا تزن قارورة أسفل الجولة التي تحتوي الآن على النفط الناتجة على توازن عموم أعلى.
المكان التالي قارورة المخروطية التي تحتوي على طبقات مائي مجتمعة في حمام الماء المثلج. دوامة قارورة في حين يضيف ببطء حل 10 المول من حمض الهيدروكلوريك حتى يتم تشكيل مستحلب أبيض. استخدام ماصة لنقل قطرة من هذا الحل على ورقة حمراء الكونغو لاختبار حموضة لها.
يجب أن تتحول الورقة إلى اللون الأزرق. بعد هذا نقل مستحلب مائي حليبي إلى 250 ملليلتر فصل قارورة. تأكد من أن مستحلب في درجة حرارة الغرفة ومن ثم إجراء استخراج السائل السائل مرتين باستخدام 30 ملليلتر من الهيكسان لكل استخراج.
الجمع بين اثنين من مستخلصات الهيكسان في قارورة مخروطية 100 ملليلتر نظيفة. إضافة كبريتات المغنيسيوم لتجفيف الحل. تصفية الحل من خلال ورقة مرشح مخدد الواردة في قمع الزجاج في 100 ملليلتر قبل وزن قارورة أسفل مستديرة.
ثم استخدام المبخر الدوار لإزالة المذيبات. بعد هذا تزن قارورة أسفل الجولة التي تحتوي الآن على النفط الناتجة على توازن عموم أعلى. باستخدام طاحونة التوابل الكهربائية طحن 10 غراما من أوراق كوريا ريفكا لمدة 20 إلى 30 ثانية.
نقل المواد النباتية الأرض إلى منقار 250 ملليلتر. إضافة ما يقرب من غرامين من الرمال الخشنة. اخلطي الرمل و المواد النباتية معاً ثم قم بنقلها إلى سلة البورتافلت.
استخدام تلاعب لضغط طفيفة العينة مع التأكد من عدم ضغط عليه أكثر من اللازم. إضافة حوالي 300 ملليلتر من 35 في المئة الإيثانول في الماء إلى خزان آلة إسبرسو. تحميل portafilter في آلة إسبرسو ووضع منقار 250 ملليلتر تحته.
ثم جمع ما يقرب من 100 ملليلتر من استخراج. الانتظار لمدة دقيقة واحدة تقريبا ثم جمع آخر 100 ملليلتر من استخراج. نقل هذا الخليط إلى حمام الجليد لتبرد.
استخدام المبخر الدوارة مع درجة حرارة حمام مائي من 40 درجة مئوية لتبخر الإيثانول. نقل المقبل استخراج مائي إلى قمع فصلي. استخراج الحل مرتين مع خلات الإيثيل باستخدام 50 ملليلتر من خلات الإيثيل لكل استخراج.
الجمع بين مستخلصات العضوية. إضافة كبريتات المغنيسيوم ودوامة قارورة لتجفيف الحل. ثم استخدم قمع الزجاج المركز لتصفية الحل واستخدام المبخر الدوارة للحصول على استخراج الخام.
في هذا الإجراء يتم تخصيص الطلاب نسبة المذيبات TLC من الأسيتون والسيكلوهيكسان وتقدم مع معايير نقية من الأوجينول وأسيتيل-الأوجينول. يتم إجراء تحليل TLC ويتم النظر في آثار تكوين المذيبات على عامل الاحتفاظ. وينظر إلى تكوينات المذيبات المثلى تتراوح عادة بين خمسة و 20 في المئة الأسيتون cyclohexane.
مع معامل الاحتفاظ دلتا من 0.1 إلى 0.2. ثم يتم استغلال الخصائص المختلفة القائمة على الحمض من اثنين من الجزيئات العضوية الرئيسية لفصلها عن طريق استخراج السائل السائل. وعادة ما تم عزل الأوجينول في عائد من 45 إلى 65 في المئة من استخراج الخام في حين تم عزل الأسيتيل يوجينول في عائد من خمسة إلى 10 في المئة.
ثم استخدم الطلاب eluant الأمثل لتحديد نجاح استخراج السائل السائل من خلال مقارنة مقتطفاتهم إلى عينات مرجعية نقية من قبل TLC. الطلاب المتقدمين ثم تخضع نصف النفط الخام المعزولة إلى اللوني العمود فلاش. في حين أن الفصل الكامل للأوجينول من أسيتيل-أوجينول نادرا ما يتحقق بسبب عوامل الاحتفاظ بهم قريبة، يتم جمعها عموما بضعة أجزاء تحتوي على الأوجينول النقي.
بعد هذا الإجراء، يمكن تنفيذ أساليب مثل التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي النووي وقياس الطيف الكتلي الكروماتوغرافيا للغاز تتميز بالمركبات المعزولة. لا تنس، العمل مع السوائل الساخنة، الضغوط العالية نسبيا والسوائل المسببة للتآكل يمكن أن تكون خطرة لذلك ينبغي اتخاذ الاحتياطات مثل ارتداء معدات الحماية الشخصية.
