この技術は、分離化学で天然物抽出のための本質的に実用的かつ効率的な戦略を表します。そして、私たちはそれが便利で無料の抽出ツールだと思います。これは急速な流れのプロセスであるため、抽出物は短時間だけ加熱され、しばしば精製を複雑にする難治性植物顔料の抽出が最小限に抑えられます。
この技術は、自然界の貴重な分子の探索であるバイオプロスペクティングを促進することによって、薬用化学に加えて化学分類法のサンプリングを可能にするのに適していると考えています。抽出ステップにおけるサンプル調製が最も効果的に視覚的に説明されるため、この方法の視覚的実証は重要である。これはまた、抽出のシンプルさと学部の研究室環境での適切な使用を強化します.
粗挽きクローブの12.5グラムを250ミリリットルビーカーに入れる。砂の12.5グラムを追加し、よく混ぜます。次に、ポルタフィルターを収集し、全体のクローブと砂の混合物でバスケットをロードします。
タンパーを使用してサンプルを軽く圧縮し、液体が流れないように圧縮しすぎないようにします。ポルタフィルターをエスプレッソマシンに積み込み、その下に250ミリリットルのビーカーを置きます。水槽に30%エタノールを含む溶液を水槽に加えます。
エスプレッソマシンを使用して、100ミリリットルの抽出物を収集します。ポルタフィルターを滴下し終え、エスプレッソマシンから取り外します。スパチュラを使用して、ポルタフィルターからクローブグラインドを取り除き、固形廃棄物容器に捨てます。
残りの固形分を、流しに水道水で洗い流します。クローブ抽出物を含むビーカーを氷浴に移し、温度が少なくとも摂氏30度に下がるまで冷まします。ヒュームフードで、冷却した抽出物を250ミリリットルのセパネル漏斗に注ぎます。
30ミリリットルのヘキサンを加え、軽く振って混ぜます。レトルトスタンドに取り付けられたリングクランプにセパレータ漏斗を置き、水層と有機層を分離させます。レイヤーが分離されるまでに最大 10 分かかる場合があるため、待機中に TLC の溶媒最適化を実行することをお勧めします。
水性層を250ミリリットルビーカーに回収します。製品を含む有機層を清潔な250ミリリットルの円錐形フラスコに移します。その後、水性フェースパックをセパレーター漏斗に注ぎます。
水層をヘキサンで2回追加で抽出します。毎回30ミリリットルのヘキサンを使用する。各抽出後、有機層を同じ250ミリリットルの円錐形フラスコに組み合わせます。
3回目の液体抽出後、結合した有機抽出物をセパネルに注ぎます。100ミリリットルの水を加えて、激しく振って有機抽出物を洗います。有機層を清潔な250ミリリットルの円錐形フラスコに集めます。
そして、硫酸マグネシウムを加えて旋回して乾燥させます。ガラス漏斗に含まれるフルートフィルターペーパーを通して乾燥混合物を丸底フラスコにフィルターします。ロータリーエバポレーターを使用して、回収した濾液から溶媒を蒸発させる。
次に、得られた油を含むフラスコの重量を量る。粗オイゲノール含有エキスを含む丸底フラスコに10ミリリットルのヘキサンを加える。得られた溶液を250ミリリットルのセパネル漏斗に注ぎます。
丸底フラスコを10ミリリットルのヘキサンですすいで、これをセパレーター漏斗に加えます。液体抽出を介して3モル水酸化ナトリウムでヘキサン溶液を2回抽出する。各抽出に25ミリリットルの水酸化ナトリウムを使用する。
各抽出から水層を収集し、250ミリリットル円錐形フラスコでそれらを組み合わせます。50ミリリットルの円錐形フラスコに有機層を収集します。その後、フラスコに硫酸マグネシウムを加えて乾燥させ、それを渦巻きます。
ガラス漏斗に含まれるフルートフィルターペーパーを通して、あらかじめ計量した100ミリリットルの丸い底フラスコに溶液をろ過します。固形残渣を捨て、次にロータリーエバポレーターを使用して溶媒を除去します。この後、ラウンドボトムフラスコの重量を量り、上のパンバランスに得られた油が含まれています。
次に、結合された水層を含む円錐形のフラスコを氷水浴に入れます。白色のエマルジョンが形成されるまで、塩酸の10モル溶液をゆっくりと加えながらフラスコを旋回させます。ピペットを使用して、この溶液の一滴をコンゴの赤い紙に移して酸味をテストします。
用紙が青くなるはずです。この後、乳白色の水性エマルジョンを250ミリリットル分離フラスコに移す。エマルジョンが室温であることを確認し、抽出ごとに30ミリリットルのヘキサンを使用して液体抽出を2回行います。
2つのヘキサン抽出物を100ミリリットルの角錐形フラスコに組み合わせます。溶液を乾燥させるために硫酸マグネシウムを加えます。ガラス漏斗に含まれるフルートフィルターペーパーを通して、あらかじめ計量した100ミリリットルの丸い底フラスコに溶液をろ過します。
その後、ロータリーエバポレーターを使用して溶媒を除去します。この後、ラウンドボトムフラスコの重量を量り、上のパンバランスに得られた油が含まれています。電気スパイスグラインダーを使用して、20〜30秒間コレア反射神経葉の10グラムを粉砕します。
250ミリリットルビーカーに地面の植物材料を移します。粗砂の約2グラムを追加します。砂と植物材料を混ぜ合わせ、ポルタフィルターのバスケットに移します。
タンパーを使用してサンプルを軽く圧縮し、サンプルをあまり圧縮しないようにします。エスプレッソマシンタンクに約35%のエタノールを水中に加えます。ポルタフィルターをエスプレッソマシンに積み込み、その下に250ミリリットルのビーカーを置きます。
その後、約100ミリリットルの抽出物を収集します。約1分間待ってから、別の100ミリリットルの抽出物を収集します。この混合物を氷浴に移して冷まします。
水浴温度40°Cのロータリーエバポレーターを使用してエタノールを蒸発させます。次に、水性抽出物をセペラトリーファネルに移します。抽出ごとに酢酸エチル50ミリリットルを用いて酢酸エチルで溶液を2回抽出する。
有機抽出物を組み合わせます。硫酸マグネシウムを加え、フラスコを旋回して溶液を乾燥させます。次に、中心ガラス漏斗を使用して溶液をろ過し、ロータリーエバポレーターを使用して粗抽出物を得ます。
この手順では、学生はアセトンとシクロヘキサンのTLC溶媒比を割り当てられ、ユージノールとアセチルオイゲノールの純粋な基準を提供しています。TLC分析が行われ、溶媒組成が保持因子に及ぼす影響が考慮される。最適な溶媒組成物は、典型的には5〜20%のアセトンシクロヘキサンの範囲に見られる。
0.1 から 0.2 のデルタ保持係数。2つの主要な有機分子の異なる酸ベースの特性は、液体抽出によってそれらを分離するために利用されます。典型的には、オイゲノールは、粗抽出物の45〜65パーセントの収率で単離され、アセチルオイゲノールは5〜10%の収率で単離された。
その後、最適化された溶出液を利用して、抽出物をTLCによる純粋な参照サンプルと比較して液体抽出の成功を判断しました。その後、上級学生は孤立した原油の半分をフラッシュカラムクロマトグラフィーに当ます。アセチル-オイゲノールからのオイゲノールの完全な分離は、それらの密接な保持因子のためにほとんど達成されないが、純粋なオイゲノールを含むいくつかの分画は、一般的に収集されます。
この手順に従って、核磁気共鳴分光法やガスクロマトグラフィー質量分析などの方法は、単離化合物を特徴付けて行うことができる。熱い液体、比較的高圧、腐食性の液体を扱うのも危険なので、個人用保護具の着用などの予防措置を講じるべきです。
