حجم وشكل جزيئات الحمأة المنشطة أمر بالغ الأهمية لكفاءة معالجة مياه الصرف الصحي. ومع ذلك فإن قياسها غالباً ما يكون مخصصاً. يوفر هذا البروتوكول قياس قابل للتكرار، ومحددة جيدا، وشبه تلقائية لقياسها.
والميزة الرئيسية لهذا البروتوكول هي أنه يمكن قياس مجموعة كبيرة من الجسيمات على مدى مجموعة واسعة من morphologies مع الحد من التحيز الذاتي والمنهجي. في حين أن هذه التقنية تركز على الحمأة المنشطة ، يمكن قياس أي شيء من الناحية الفنية يحتوي على نفس مورفولوجيا الجسيمات مثل microplastics باستخدام هذه الطريقة. عند محاولة هذه التقنية للمرة الأولى ، حاول صنع لوحة واحدة في كل مرة وممارسة الحركات المادية لصنع ذلك لوحة واحدة.
أيضا، تأخذ وقتك مع المجهر. إصدار الفيديو من هذه المقالة مهم لأن أخذ العينات وإعداد لوحة تتطلب الكثير من التقنيات الصغيرة التي يتم توصيلها بشكل أفضل بصريا. أيضا، عرض ورؤية صور جيدة من لوحات مهمة لضمان إعادة التكاثر.
إظهار هذا البروتوكول اليوم هو جوزيف ويفر، مرشح دكتوراه في مختبري. للبدء، الحصول على عينة تمثيلية من جزء مختلط جيدا من المفاعل. اخلط العينة بلطف ثم صب على الفور حجم العينة المحدد في أنبوب طرد مركزي 15 ملليلتر.
التالي إضافة خمسة ميكروليتر من واحد في المئة الميثيلين الأزرق لكل عينة. اِكِلَ العينة وخلطها عن طريق قلب الأنبوب برفق ثلاث مرات على الأقل. السماح للعينات لطخة لمدة لا تقل عن خمسة ولكن لا أكثر من 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة.
بمجرد أن تلطخ، نقل كمية كافية من 7.5 في المئة أجار والمياه ديون إلى أنبوب الطرد المركزي من أجل جعل حجم الأنبوب الإجمالي إلى ما بين 6.5 و 9 ملليلتر. ثم استخرج خلاصة أنابيب الطرد المركزي وعكسها بلطف ثلاث مرات على الأقل لخلط العينة في أجار. بينما يشير الغطاء بعيدا عن نفسه، فتح الغطاء.
صب محتويات أنبوب كل أنبوب في طبق بتري البلاستيكية 100 ملليلتر الخاصة بهم في حين هزاز بلطف الطبق لتحقيق كامل، وطلاء سلس وتوزيع موحد بصريا من الجسيمات. السماح للألواح لتبرد في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق على الأقل، حتى يقوي أغار. ضع لوحة مكشوفة الوجه حتى على مرحلة المجهر من المجهر ستيريو التي هي قادرة على 10 إلى 20 مرات التكبير.
تضيء العينة من الأسفل مع الضوء المنتشر حتى، وذلك باستخدام معدات مثل حامل ضوئي LED أو لوحة ضوء. افتح برنامج التقاط الصور وتأكد من تعيين مسار ضوء المجهر على الصورة. ثم حدد الكاميرا المناسبة من قائمة الكاميرا.
اضبط المجهر بحيث تظهر جسيمات متعددة في المستوى البؤري مع حواف كبيرة ومحددة جيداً. استخدام التكبير من 10 إلى 20 مرة لقياس الجسيمات مع الحفاظ على مستوى بؤري عميق نسبيا. إزالة مؤقتا لوحة أجار ووضع ميكرومتر على خشبة المسرح.
ضبط التركيز غرامة حتى تظهر التخريجات على ميكرومتر تركيزا حادا في برنامج التقاط الصور. ومعايرة نسبة بكسل إلى ميكرون. بعد ذلك، قم بتعيين التكبير إلى 100 في المائة بالنقر على العرض وتحديد الحجم الفعلي.
ثم حدد الخيارات والذهاب إلى معايرة. هنا، قم بمحاذاة شريط المعايرة الأحمر في منفذ العرض الرئيسي على طول المحور الطويل للميكرومتر. مع الحانات العمودية تركزت على الصفر و 200 ميكرون التخرج.
في مربع حوار المعايرة، أدخل مستوى التكبير الحالي والطول الفعلي لـ 200 ميكرون. إذا تم معايرته بالفعل، حدد التكبير من شريط القوائم ثم حدد مستوى التكبير الحالي لتأكيد المعايرة. في قائمة القياسات، انتقل إلى الخط وحدد خطًا عشوائيًا.
انقر على تقاطع الصفر التخرج والمحور الطويل من ميكرومتر. ثم انقر مرة أخرى على تقاطع في خط 200 ميكرون والمحور الطويل. وينبغي أن تظهر المعايرة الصحيحة على أنها 200 ميكرون تقريبا.
احذف السطر بالنقر على زر تحديد الكائن، والنقر على الخط، والضغط على الحذف، والضغط على نعم في مربع التأكيد. بعد ذلك، استبدل لوحة agar وضبط التركيز الدقيق لتحقيق أقصى قدر من التفاصيل في برنامج التصوير. لتحقيق ذلك، قم أولاً بزيادة عمق البتة من القيمة القصوى المسموح بها عن طريق تحديد زر الاختيار في لوحة عمق بت من الشريط الجانبي للكاميرا.
أيضا، تعيين البرنامج للحصول على الصور الرمادية عن طريق تحديد زر الاختيار المناسب في لوحة الصف اللون من الشريط الجانبي الكاميرا. الآن، قم بطي أي لوحات الشريط الجانبي المفتوحة بين التعرض والدرج التكراري. تقليل الربح إلى واحد وزيادة التعرض حتى تظهر صورة واضحة في منفذ العرض وحتى يظهر الرسم البياني كتوزيع غير مقصوص بأي من طرفي مربع المدرج التكراري.
اضبط الرسم البياني لتجنب التعرض. في لوحة المدرج التكراري للشريط الجانبي للكاميرا، قم بزلاقة الحدود اليسرى للم مدرج التكراري إلى خارج القيم الأدنى فقط والحدود اليمنى إلى خارج القيم العليا. حفظ الصورة كملف TIF غير مضغوط.
قم بتضمين معلومات التكبير في بيانات تعريف الصورة عن طريق التحقق من مربع الحفظ مع معلومات المعايرة عند الحفظ. حدد منطقة أخرى لا تتداخل مع الصور السابقة باتباع مسار الذي يتناوب بين اليسار إلى اليمين واليسار بينما يتحرك المرء لأسفل اللوحة. التقاط ما لا يقل عن 500 الجسيمات المقدرة بصريا للتحليل.
الحصول على رمز تحليل الجسيمات عن طريق استنساخ مستودع GIT. في سطر الأوامر، استرداد أحدث إصدار من التعليمات البرمجية عن طريق كتابة في الأمر المعروض هنا. تثبيت رمز التحليل بعد الإرشادات الموجودة في ملف نصي قراءة لي وجدت في دليل المستوى الأعلى من مستودع المستنسخة.
بعد ذلك، قم بتحرير ملف نصي يسرد الدلائل التي ستتم معالجتها مع معلمات اختيارية. راجع الأمثلة و الدليل الفرعي للتحليل لقائمة من المعلمات والأمثلة. الآن، قم بتشغيل التحليل على سطر الأوامر بكتابة الأمر الموضح هنا.
مسار فيجي هو الدليل الذي imageJ-win64. exe موجود. و paramsfile موقع الملف النصي الذي يصف إعداد التحليل.
قد يختلف اسم الملف التنفيذي حسب نظام التشغيل الذي تم تثبيت فيجي عليه. سيتم تشغيل التحليل تلقائيًا وسيستغرق بضع دقائق إلى بضع ساعات اعتمادًا على حجم وعدد الصور. بعد ذلك، تفحص ملفات التحكم في الجودة الموجودة في دليل فرعي تراكب من دليل الإخراج المحدد.
لاحظ الصور ذات الضباب الزائف أو الجسيمات التي تم التقاطها بشكل سيئ ، وكلها واضحة كالخطوط العريضة المظللة التي لم تتطابق مع الخلفية. هذا هو. البيانات جاهزة الآن لتحليل محدد للتجربة وتوليد الرقم.
على الرغم من عدم وجود طريقة عتبة الجسيمات هو الكمال، وهنا مثال على النتائج المقبولة. عند تقييم صور مراقبة الجودة، هناك ثلاثة أخطاء شائعة تم العثور عليها. عدم التوافق بدقة مع حدود الجسيمات ، وعدم تحديد الجسيمات ، وإدراج القطع الأثرية.
هنا، يتم عرض توزيع الجسيمات بين مفاعلين تجريبيين مع مرور الوقت وجنبا إلى جنب مع البيانات الوصفية النوعية التي لاحظها الباحث. ويبين هذا الرسم البياني أن المفاعلات في هذه الحالة كانت لها توزيعات متماثلة عموما لحجم الجسيمات التي كانت تميل نحو متوسط أكبر وانتشار أوسع مع تقدم الزمن. عند تنفيذ هذا الإجراء ، من المهم أن تغلف اللوحة بالتساوي بطبقة رقيقة من الأجار تحتوي على جزيئات موزعة بشكل موحد.
تأكد من ممارسة وتأخذ وقتك. بعد هذا الإجراء، يمكن استئصال الجسيمات المثيرة للاهتمام من الأجار ودراستها. من حيث البيانات ، والملفات الناتجة من هذا البروتوكول هي محددة جيدا والسماء هو الحد التحليلي.
مهدت هذه التقنية الطريق إلى تقديم رؤى جديدة في الحمأة الحبيبية الهوائية. انها مورفولوجيا مهم جدا وسمح لنا لقياس ذلك بطريقة قياسية. مياه الصرف الصحي نشطة بيولوجيا.
يتم تشجيع مستوى السلامة الحيوية الممارسات الأولى. أيضا، كيف يمكن أن أجار فقاعة أكثر من عندما الميكروويف ويمكن رش قطرات الساخنة عند فتح أنبوب الطرد المركزي.