يمكن أن يساعد هذا البروتوكول العلماء على دراسة النتائج بعد إصابة العصب الوجهي وطرق تحسين التجديد عبر العديد من المعايير المختلفة. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن تشريح الفئران يسمح بسهولة الوصول إلى عصب الوجه ، ونطاقه الواسع يسمح لنا بدراسة جميع أنماط الإصابات ذات الصلة. تطبيقات هذه التقنية تمتد نحو إعادة تأهيل المرضى بعد إصابة العصب الوجه.
كما إمكانات التجديد الجرذ يوفر نموذج تجريبي استنساخها وموجزة. ويمكن أن توفر هذه الطريقة نظرة ثاقبة العلاجات الجراحية والطبية لشلل العصب الوجهي أو الشلل. ويمكن ترجمته إلى نماذج أخرى من الرأس والرقبة أو الأعصاب الطرفية الأخرى.
يمكن أن يكون العمل تحت المجهر باستخدام كلتا اليدين تحديًا. أوصي ممارسة استخدام نسخة المناظير تحت المجهر قبل محاولة تشريح العصب الوجه. بعد التأكد من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع القارص، ضع مرهم على عيون الجرذ وحلق المنطقة الجراحية.
إنشاء طريقة لتحديد الفئران ووضع لفة من الشاش تحت الرقبة. تطهير الجلد المكشوف مع ثلاثة بالتناوب الكلورهيكسيدين و 70٪ الإيثانول الدعك ووضع الفئران تحت مجهر ستيريو. عالج الأذن الـ ipsilateral في اتجاه أمامي و خلفي لتحديد الطية الطبيعية للجلد بعد الظهر.
استخدم شفرة رقم 15 لعمل شق من 2 إلى 3 ملليمترات في تجعد ما بعد الظهر. التخطيط ووضع شق هي الخطوات الأكثر أهمية لضمان تحديد موثوق بها من العصب الوجه مع التقليل من حجم الجرح. تشريح بصراحة من خلال اللفافة تحت الجلد الفوري ووضع ناجر مايكرو Weitlaner لتعزيز التعرض للأنسجة.
تحديد العضلات الهدّيّة الأماميّة وهي تنتقل في اتجاه أدنى إلى متفوق نحو إدخالها على طول قاعدة الجمجمة. انتشار بلطف من خلال البطن العضلات على طول نقطة الإدراج العضلات للكشف عن وتر البطن الهجّري الأمامي. سوف تظهر وتر كعملية بيضاء فيلمية المنبثقة من العضلات مع الإدراج الصلبة على قاعدة الجمجمة.
بعد تحديد العضلة الهدرة الأمامية وترها، ضبط الداجر Weitlaner لسحب مزيد من البطن العضلات. المنطقة المكشوفة هي الفضاء ثلاثي الأبعاد الذي يكمن فيه الجذع الرئيسي للأعصاب الوجهية. تشريح على طول العصب في اتجاه أدنى distally من مخرج for the روامين.
للحث على نمط إصابة سحق، واستخدام الملباب صائغ على نحو سلس السطح لفهم بحزم وضغط العصب تطبيق الضغط المستمر وقابلة للاستنساخ لمدة 30 ثانية لضمان إصابة سحق المناسبة. للحصول على عملية نقل بسيطة، فهم epineurium فوري الإفراط في العصب مع ملقط ذات أسنان دقيقة، واستخدام microscissors حادة لتنقية نظيفة العصب في النقطة المطلوبة مع قطع واحد. لنموذج الفجوة العصبية، استخدم الفرجار القابلة للتعديل لتعيين طول فجوة العصب العصبي المطلوب لضمان أنماط إصابة مماثلة بين الحيوانات وعابرة العصب كما هو موضح للتو.
بعد أن يتم تسليم الإصابة التجريبية ، ري الجرح مع المالحة العقيمة وتجفيف الأنسجة مع الشاش العقيم. قبل إغلاق شق الجلد وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية. هنا، يظهر التصوير الحي للجذع الرئيسي للأعصاب الوجهية مع إصابة سحق ما يقرب من ملليمترين إلى ثلاثة ملليمترات إلى نقطة فرع من PES الأولى في فأر Thy1-GFP بالغ معدل وراثيا.
تقييم العودة التدريجية للفلوريسنس في واحد، اثنين، ثلاثة، وأربعة أسابيع بعد الإصابة يمكن استخدامها كعلامة لرصد تجديد الأعصاب في هذه الحيوانات المعدلة وراثيا. ويمكن استخدام التحليل الهسجتي للحصول على صور مقطعية مقطعية للتقسيم الحدي الحدي مما يسمح بالتحصين الكمي لقطر المحور المحوري، وكمية الحطام، والألياف العصبية، والنسبة المئوية للأعصاب، وقياسات الكثافة. من المهم أن تعدل بشكل متكرر موضع الداحض حسب الحاجة لضمان أن الأعصاب التشريحية ذات الصلة مرئية عند تحديد عصب الوجه.
بعد هذا الإجراء يمكن حصاد الأعصاب والعضلات ذات الصلة للتحليل المناعي الكيميائي لتقييم درجة التجدد بالنسبة للمجموعات التجريبية الأخرى. بعد تطورها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في دراسة النتائج الوظيفية بعد إصابة العصب الوجهي. على وجه التحديد ، وكيفية التأثير على ظاهرة synkinesis.
