이 프로토콜은 과학자들이 안면 신경 부상 과 많은 다른 매개 변수에 걸쳐 재생을 개선하는 방법 후 결과를 연구하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 쥐 해부학은 안면 신경에 쉽게 접근 할 수 있다는 것입니다, 그것의 큰 규모는 우리가 관련된 부상 패턴을 모두 연구 할 수 있습니다. 이 기술의 응용 프로그램은 안면 신경 부상 후 환자의 재활로 확장.
재생 가능성으로 쥐는 재현 가능한 실험 모델을 제공합니다. 그리고이 방법은 안면 신경 마비 또는 마비를 위한 외과 및 의학 치료에 대한 통찰력을 제공할 수 있습니다. 그리고 다른 머리와 목 모델 이나 다른 말 초 신경에 번역.
양손을 사용하여 현미경으로 작동하는 것은 어려울 수 있습니다. 안면 신경 해부를 시도하기 전에 현미경으로 쌍안경 버전을 사용하는 것이 좋습니다. 발가락 핀치에 대한 반응의 부족을 확인 한 후, 쥐의 눈에 연고를 적용하고 수술 영역을 면도.
쥐 식별 을위한 방법을 설정하고 목 아래에 거즈 롤을 배치합니다. 노출된 피부를 3개의 번갈아 클로르헨시딘과 70%에탄올 스크럽으로 소독하고 쥐를 스테레오 현미경 아래에 놓습니다. 전방 후방 방향으로 입시측 귀를 조작하여 후분 피부의 자연적인 접이식을 결정합니다.
숫자 15 블레이드를 사용하여 후경에 2~3밀리미터 절개를 합니다. 절개 계획 및 배치는 상처 크기를 최소화하면서 안면 신경의 신뢰할 수 있는 식별을 보장하는 가장 중요한 단계입니다. 즉각적인 피하 근막을 무뚝뚝하게 해부하고 조직 노출을 향상시키기 위해 마이크로 바이틀란어 리트랙터를 배치합니다.
두개골 기지를 따라 삽입을 향해 열등한 방향으로 이동할 때 전방 디거스컬 근육을 식별합니다. 근육 삽입 점을 따라 근육 배를 통해 부드럽게 퍼져 전방 디거스산 배의 힘줄을 드러냅니다. 힘줄은 두개골 베이스에 고체 삽입과 근육에서 방출 필름 흰색 과정으로 나타납니다.
전방 디거스트릭 근육과 힘줄을 식별한 후 Weitlaner 리트랙터를 조정하여 근육 배를 더 후퇴시킵니다. 노출된 부위는 안면 신경의 주요 트렁크가 있는 입체 공간입니다. 틸로마스토이드 포맨의 출구에서 열등한 방향으로 신경을 따라 해부한다.
호감 부상 패턴을 유도하려면 매끄러운 표면의 주얼러 의 집게를 사용하여 30 초 동안 일정하고 재현 가능한 압력을 가하는 신경을 단단히 잡고 압축하여 적절한 호감 부상을 보장하십시오. 간단한 절단을 위해 미세 한 이빨 집게로 신경을 덮는 즉각적인 에피뉴리움을 잡고 날카로운 미세 시체를 사용하여 원하는 지점에서 신경을 단 한 번 잘라 내어 깨끗하게 변형시니다. 신경 갭 모델의 경우 조절 가능한 캘리퍼를 사용하여 원하는 신경 신경 갭 길이를 설정하여 동물 간의 유사한 부상 패턴을 보장하고 방금 입증된 것처럼 신경을 트랜스펙트합니다.
실험적 부상이 전달된 후, 멸균 식염수로 상처를 관개하고 멸균 거즈로 조직을 건조시다. 기관 지침에 따라 피부 절개를 닫기 전에. 여기서, 호감 부상을 가진 안면 신경의 주요 트렁크의 라이브 이미징이 성인 트랜스제닉 Thy1-GFP 쥐에서 제1 PES의 분기지점에 약 2~3밀리미터 의 질반이 나타난다.
1, 2, 3 및 4 주 후 상해에서 형광의 점진적 반환의 평가는 이 형질전환 동물에 있는 신경 재생을 감시하기 위한 마커로 이용될 수 있습니다. 조직학적 분석은 축축경 직경, 이물질의 양, 신경 섬유, 신경 섬유, 신경 비율 및 밀도 측정의 정량화를 허용하는 한계 하악 분열의 단면 이미지를 얻는 데 사용될 수 있다. 안면 신경을 식별할 때 관련 해부학 신경이 보이는지 확인하기 위해 필요에 따라 re트랙터의 배치를 자주 조정하는 것이 중요합니다.
이 절차에 따라 관련 신경 및 근육은 다른 실험 군에 비해 재생 정도를 평가하기 위해 면역 조직화학 분석을 위해 수확될 수 있다. 그것의 발달 후에, 이 기술은 안면 신경 상해 후에 기능적인 결과를 공부하는 연구원을 위한 도로를 포장했습니다. 구체적으로, synkinesis의 현상을 미치는 방법.
