يصف البروتوكول طريقة فعالة وقابلة لإعادة إنتاجها للاختبار الحيوي الأوتار الماوس من خلال إعادة الاستخدام المخصصة تناسب 3D تركيبات المطبوعة. الأساليب الجديدة تقليل الوقت المطلوب لاختبار العينة من ساعات إلى دقائق والقضاء على القطع الأثرية الرئيسية التي تجتاح كانت مشكلة شائعة في الأساليب السابقة. لا يقتصر هذا الأسلوب على الأوتار فوق مستوى و أخيل.
ويمكن بسهولة تكييفها لاختبار الأوتار والأوتار الماوس الأخرى من الحيوانات الكبيرة. لضمان إعادة إنتاج وكفاءة النهج، قد تكون هناك حاجة إلى دورات متعددة من البرمجة الأولية للتصميم والتحقق من صحة لمواعيد المباريات غير الموصوفة هنا. للبدء، إجراء التصوير المقطعي microcomputed فحص العظام بأكملها في هلام agarose.
بعد إعادة إنشاء إلى صور المقطع عرضي، حدد الأمر فتح الملف لفتح مجموعة البيانات الملف. افتح تفضيلات ملف الحوار وحدد علامة التبويب خيارات متقدمة. استخدم خوارزمية التقديم المتكيفة لإنشاء النماذج ثلاثية الأبعاد التي توفر تفاصيل سطحية أكثر سلاسة.
استخدم 10 كمعلمة محلية التي تحدد المسافة بالبكسل إلى النقطة المجاورة المستخدمة في البحث عن حد الكائن. تقليل التفاوت إلى 0.1 لتقليل حجم الملف. لتحديد حجم الاهتمام، حدد صورتين يدويًا لتعيينهما على أنهما الجزء العلوي والسفلي لنطاق VOI المحدد، ثم انتقل إلى الصفحة الثانية، منطقة الاهتمام.
حدد منطقة الاهتمام يدويًا على صورة مقطع واحد. كرر تحديد عائد الاستثمار لكل 10 إلى 15 صورة مقطعي. بعد ذلك، انتقل إلى الصفحة الثالثة، "تحديد ثنائي".
في القائمة المدرج التكراري، انقر فوق من مجموعة البيانات لإظهار توزيع الرسم البياني للسطوع من كافة صور مجموعة البيانات. أيضاً في القائمة المدرج التكراري، انقر على القائمة إنشاء ملف نموذج ثلاثي الأبعاد. حفظ نموذج 3D من العظام في تنسيق ملف STL.
في برنامج Meshmixer، قم باستيراد شبكة وحدد الكل للتحرير. اختر إنتاج من تحرير مجموعة الأدوات، ثم حدد مثلث الميزانية من مجموعة الأدوات الهدف تقليل. تقليل عدد مرات الثلاث وقبول التغييرات.
إعادة حفظ الملف خفضت حديثا في شكل STL عن طريق اختيار تصدير As.To تصميم عظم الوتر الوتر فوق مستوى، استخدم برنامج تصميم بمساعدة الكمبيوتر الصلبة النمذجة لإنشاء نموذج مخصص تناسب من لاعبا اساسيا العضدات التي تجتاح. افتح ملف تنسيق STL لعظم العضد في برنامج النمذجة الصلبة وحفظ كملف جزئي بتنسيق SLDPRT. ثم افتح ملف جزء لإنشاء ثلاثة مستويات ذات الصلة تشريحيا يدويا، على سبيل المثال، القوس، والإكليلية، ومنطوق.
انقر على ملف جديد لإنشاء الجزء مكون كتلة صلبة. انقر على ملف جديد لإنشاء نموذج تجميع مع اثنين من المكونات ، كتلة صلبة وإما اليمين أو اليسار عظم العضد. تحديد اتجاه العظام داخل الكتلة لضمان الزاوية بين الوتر والعظام لتكون 180 درجة.
تأكد من أن حجم العظام بأكمله يناسب داخل الكتلة. في إطار التجميع، حدد الكتلة وانقر فوق تحرير مكون من شريط الأدوات التجميع. انقر فوق إدراج، ميزات، تجويف.
حدد القياس الموحد وأدخل 0٪ كقيمة للتحجيم في كافة الاتجاهات. قمع جزء العظام وحفظ الجمعية كجزء. فتح الاسطوانة مع تجويف جزء.
إنشاء رسم، وضمان ترك فقط 0.5 ملليمتر فوق رأس humeral. من الميزات، حدد قص مقذوف. قطع الجمعية على طول الطائرة القوس لخلق اثنين من المكونات المتماثلة التي تناسب العظام في وقت ما قبليا و اللاحقة.
قطع جزء الجمعية على طول الطائرة القوس لخلق اثنين من المكونات المتماثلة التي تناسب العظام في وقت ما قبليا و اللاحقة. من الأهمية بمكان ضمان رأس العرمر لمنع فشل لوحة النمو وتحديد إزالة ضيقة تتجنب فك ارتباط العرم عن النموذج أثناء الاختبار. المضي قدما كما هو موضح في المخطوطة لإنهاء المكون الأمامي والمكون الأمامي.
حفظ كلا المكونات كملفات جزء منفصلة. الآن اضغط على إدراج نمط، مرآة، وحدد مرآة لإنشاء نماذج مرآة 3D لكل عنصر من عناصر لاعبا اساسيا للطرف الآخر. حدد الوجه الأمامي كوجه مرآة عادي.
حدد الجزء كجسد لتعكس. حدد مستوى المرآة وقم بإنشاء رسم يتضمن جميع المواد. من الميزات، حدد قص مقذوف لإزالة الجزء الأصلي والاحتفاظ بالجزء معكوس فقط.
انقر على الجزء السفلي من الجزء واستخدامها على أنها طائرة لجعل رسم. انقر على نص رسم وإضافة L أو R.This يضيف حفر على الجزء السفلي من المباريات للتمييز بين الجانبين الأيسر والأيمين. حفظ جميع أجزاء لاعبا اساسيا في STL تنسيق الملف القياسي استعدادا للطباعة 3D.
لتشريح وتر العضلات supraspinatus ، عينة عظم العضد ، ضع الفأر القتل الرحيم أولاً في وضع عرضة لعمل شق في الجلد من فوق مرفق الرخوة نحو الكتف. استخدام ملقط لإزالة بعناية الجلد مع تشريح حادة بحيث العضلات من الكتف مرئية. إزالة الأنسجة المحيطة humerus حتى العظام يتعرض.
عقد الزومبي مع ملقط وإزالة بعناية عضلات deltoid و trapezius لفضح قوس coracoacromial. تحديد مفصل AC وفصل الترقوة بعناية من acromion مع شفرة مشرط. مع الحرص على عدم تلف وتر supraspinatus ومرفقه العظمي، وإزالة العضلات من مرفقها الكتفي باستخدام شفرة مشرط.
فصل رأس humeral من glenoid وتهز كبسولة مشتركة وinfraspinatus subscapularis وترخيصات طفيفة. تفكيك مفصل الكوع لفصل الزمر من الزنا ونصف القطر. عزل العينة العضلات وتر العضدية ونظيف الأنسجة الرخوة الزائدة على العضد ورأس العضد.
لتشريح وتر أخيل، عظم الكالكانيوس، وضع فأر القتل الرحيم في موقف عرضة. مع الحرص على عدم تلف وتر أخيل ومرفقه العظمي، وإزالة الجلد مع تشريح حادة بحيث يتم الكشف عن العضلات حول مفاصل الكاحل والركبة. باستخدام شفرة مشرط، بدءا من مرفق وتر أخيل-calcaneus، فصل بعناية العضلات gastrocnemius من المرفقات القريبة لها.
إزالة بعناية calcaneus من مختلف العظام المجاورة وعزل العينة وتر أخيل calcaneus وتنظيف قبالة الأنسجة الرخوة الزائدة. لتحديد منطقة المقطع المقطعي من وتر، إدراج العظام رأسا على عقب لتعليق العينة في التبريد مليئة هلام agarose مع العظام في هلام agarose والوتر والعضلات خارج. بعد الفحص باستخدام التصوير المقطعي المجهري، قم بإزالة العضلات بلطف من الوتر باستخدام شفرة مشرط.
أدخل العظم في التركيبة المطبوعة ثلاثية الأبعاد وأرفقها بشبكات الاختبار. إدراج والغراء وتر بين ورقة من الأنسجة رقيقة مطوية ومشابك ذلك باستخدام قبضة رقيقة فيلم. أدخل العينة والسيطرة في حمام اختبار من برنامج تلفزيوني في 37 درجة مئوية وإجراء اختبار ميكانيكي.
في هذه الدراسة، وذلك باستخدام إعادة الاستخدام 3D تركيبات مطبوعة لقبضة العظام، تم تخفيض وقت إعداد العينة من ساعات إلى دقائق. ممثل تحميل منحنيات تشوه لاختبار الشد من وتر supraspinatus باستخدام الطرق الحالية القضاء على القطع الأثرية الرئيسية التي تجتاح مثل فشل لوحة النمو. وتبين الخصائص الميكانيكية والاات فوق ال غوبينات وأخيل تأثير كبير للجنس استناداً إلى اختبارات T غير المُزَوَّرة بقيمة P أقل من 0.05.
الدقيقة CT بنجاح قياس منطقة مقطعي على طول وتر supraspinatus على طول وتر أخيل. من المهم أن نتذكر أن كل موقع التشريحي لديه معايير تصميم محددة ضرورية لتجتاح فعالة. لذلك، ينبغي تكييف تصميم كل لاعبا اساسيا وفقا لذلك.
بالإضافة إلى اختبار الشد إلى الفشل، يمكن استخدام هذه المباريات لاختبارات التحميل الدورية، والتي توفر معلومات حول التعب الأوتار وخصائص اللزجة. وصف الخصائص الميكانيكية من الأوتار مورين غير شائع في الأدب لعدد من الأسباب، بما في ذلك صعوبة في تجتاح هذه الأنسجة الصغيرة، شاقة ومضيعة للوقت أساليب إعداد العينة، وكسور لوحة النمو. يقدم هذا البروتوكول طريقة فعالة من حيث الوقت وقابلة لإعادة إنتاجها لاختبار الأوتار الماوس التي قضت على فشل قبضة artifactual وتضاعفت ثلاثة أضعاف عدد العينات التي يمكن اختبارها في يوم واحد.