يصف هذا البروتوكول طريقة لقياس الضغط داخل الجمجمة ، ومتوسط الضغط الشرياني ، وضغط التروية الدماغية بعد النزف داخل البطيني غير الرضحي في القوارض. يمكن قياس الضغوط الشريانية داخل الجمجمة والمتوسط بدقة وموثوقية باستخدام مستشعر الألياف البصرية الذي يتم إدخاله في قشرة الفئران والشريان الفخذي على التوالي. تتم ترجمة التقنيات الموضحة هنا إلى الإعداد السريري عندما يحتاج المرضى الذين يعانون من نزيف داخل البطيني إلى مراقبة الضغط داخل الجمجمة الغازية.
كانت أهداف هذه الدراسة هي إنشاء نموذج حيواني IVH مع مراقبة موضوعية ل ICPs و MAPs و CCPs بعد IVH داخل البطيني ، بحيث يمكن للمؤلفين تطبيق ذلك بشكل أكبر في التجارب المستقبلية التي ستركز على تأثيرات ICPs التي يسببها IVH على ضعف الذاكرة اللاحق. قد تشمل النضالات الرئيسية الدقة ، حيث أن مستشعرات الألياف الضوئية صغيرة. يمكن أن يشكل تشريح الشريان الفخذي أيضا تحديا للبعض ، خاصة أولئك الذين لا يستخدمون في مهارات الجراحة المجهرية.
بعد تخدير الفئران ، أدخل مقياس حرارة المستقيم لمراقبة درجة الحرارة بشكل مستمر. قص الشعر على الرأس ومنطقة الفخذ ، وقم بإعداد الجلد بثلاثة مقشرات متناوبة من Betadine و 70٪ كحول قبل الجراحة. استنشاق أي إفرازات تنفسية متراكمة عن طريق إزالة الفئران مؤقتا من جهاز التنفس الصناعي واستنشاق الإفرازات باستخدام أنبوب PE-50 متصل بحقنة سعة 10 ملليلتر.
حماية العينين مع مرهم العين الدموع الاصطناعية المعقمة. قبل شق فروة الرأس ، حقن بوبيفاكايين المحلي في الجلد والأنسجة تحت الجلد. ضع الجرذ في وضعية الانبطاح على إطار تجسيمي وشريط الأذن.
قم بعمل شق في فروة الرأس بطول 1.5 سم على طول خط الوسط باستخدام مشرط مكون من 15 شفرة. تطبيق ضغط خفيف مع الشاش للإرقاء. باستخدام قضيب طرف قطني معقم ، افصل السمحاق عن الجمجمة حتى يصبح معلم bregma مرئيا.
حدد موقع bregma وقم بتمييزه باستخدام الصور المجسمة ، وحدد موقع فتحتين ثنائيتين 1.4 ملم جانبية وسالبة 0.9 ملم خلف البريغما. باستخدام مثقاب محمول باليد ، قم بإنشاء هذين الثقبين الصغيرين في نصفي الكرة الأيمن والأيسر. قم بري أي رقائق عظمية زائدة بمحلول رينغر المعقم.
في نصف الكرة الأيمن، ضع قنية توجيه بقياس 22 على مستوى ثقب النتوء لإدخال الإبرة ذات المقياس 28 عبر القنية إلى عمق البطين الجانبي الأيمن لإحداث نزيف داخل البطيني. قم بتوصيل مستشعر ضغط الألياف الضوئية بوحدة القراءة. قم بتشغيل وحدة القراءة ، وتأكد من أن الوحدات المحددة بالمليمترات من الزئبق.
ثم قم بتجهيز المستشعر عن طريق غمر طرفه في دورق صغير بمحلول Ringer المرضع حتى تقرأ وحدة القراءة الصفر وتكون جاهزة للاستخدام. في نصف الكرة الأيسر ، أدخل مستشعر الضغط برفق على عمق 2 إلى 3 ملليمترات في القشرة لمراقبة برنامج المقارنات الدولية في الوقت الفعلي. بعد إدخال جهاز مراقبة برنامج المقارنات الدولية ، أدر الجذع السفلي للفأر لسهولة الوصول إلى منطقة الفخذ والفخذ الأيسر.
بعد التحضير المعقم وإدارة البوبيفاكايين المحلي ، قم بعمل شق جلدي بطول 1.5 سم فوق الطرف الخلفي بمشرط 15 شفرة. تشريح الشريان الفخذي الأيسر بشكل سطحي مع مرقئ ثم طبقات أعمق باستخدام ملقط مع نصائح دقيقة تحت المجهر. حدد الوريد الفخذي الأزرق العميق للمساعدة في تحديد موقع الشريان المجاور.
اربط الشريان الفخذي البعيد باستخدام خياطة حريرية 3-0 وضع مشبكا معدنيا مؤقتا على الجزء القريب من الشريان الفخذي. احصل على مستشعر ضغط ثان من الألياف الضوئية متصل بوحدة القراءة معدة بالفعل. أدخل مستشعر الضغط في أنبوب PE-50 ، والذي يتم إدخاله في Tuohy Borst الذي يتم إغلاقه بعد ذلك.
قم بتوصيل Tuohy Borst بمحبس ثلاثي الاتجاهات متصل بحقنة ملليمتر واحد في أحد طرفيها وإبرة قياس 22 مع أنبوب PE-50 في الطرف الآخر. تحت المجهر ، قم بعمل بضع شريان الفخذ بقطر 2 ملم باستخدام مقص دقيق ، وقم بتثبيته باستخدام أنبوب PE-50 متصل ببقية الإعداد. قم بشفط 500 ميكرولتر من الدم باستخدام حقنة بحجم ملليمتر واحد ، وقم بتدوير المحبس ثلاثي الاتجاهات لجعل مستشعر الضغط يقرأ MAP.
قم بتجهيز الإبرة داخل البطينية ذات 28 مقياسا متصلة بأنبوب PE-50 بالدم المستنشق لحيوانات IVH و Ringer المرضعة لحيوانات التحكم في السيارة. ثم أدخل هذه الإبرة في قنية التوجيه إلى عمق البطين الجانبي الأيمن. باستخدام معدل 100 ميكرولتر في الدقيقة ، قم بحقن الدم ، أو محلول رينغر المعقم 200 ميكرولتر في البطين الجانبي الأيمن عن طريق ضخ حقنة ملليمتر واحد بالإبهام.
مراقبة وتسجيل برنامج المقارنات الدولية وضغط الدم الشرياني ودرجة حرارة المستقيم. مراقبة وتسجيل قيم ICP و MAP بعد الحقن. بعد الانتهاء من الحقن داخل البطيني ، اسحب أنبوب PE-50 الذي يحتوي على مستشعر الضغط الذي تم إدخاله في الشريان الفخذي ، وقم بتطبيق المشبك المؤقت على الشريان الفخذي لمنع النزيف.
اربط الجزء القريب من الشريان الفخذي باستخدام خياطة الحرير 3-0 وأغلق شق الفخذ بطريقة متقطعة باستخدام حرير 3-0. قم بإزالة قنية التوجيه باستخدام الإبرة داخل البطينية في جهاز مراقبة برنامج المقارنات الدولية. أغلق ثقوب الأزيز بشمع العظام.
وأغلق شق الجمجمة بخياطة حريرية 3-0 بشكل متقطع. ضع البوبيفاكايين الموضعي على الشق ، وحقن 0.5 ملليغرام لكل كيلوغرام من الكاربروفين. لا تترك الحيوانات دون مراقبة حتى تستعيد وعيها الكافي للحفاظ على راقد القص.
السماح للفئران بالتعافي التام بعد الجراحة تحت الإشراف وإعادتها إلى أقفاصها المنزلية مع حرية الوصول إلى الطعام والماء بعد الشفاء. باستثناء المجموعة الوهمية ، زادت ICPs بشكل ملحوظ أثناء الحقن داخل البطيني في IVH ومجموعات التحكم في المركبات. كانت ICPs أعلى في مجموعة IVH مقارنة بالتحكم في السيارة.
ثم انخفضت ICPs بسرعة وتطبيع في غضون خمس دقائق بعد الحقن داخل البطيني في تلك المجموعات الحيوانية. وقد لوحظ أن MAPs ظلت متشابهة طوال الإجراء ، في حين انخفضت CPPs أثناء الحقن داخل البطيني إما في الدم ، أو محلول رينغر المرضع. تشمل الخطوات الحيوية للجراحة الموقع الصحيح وحفر ثقوب النتوءات وبضع الشرايين الفخذية.
يجب اتباع الخطوات المذكورة أعلاه عن كثب للتأكد من أن المستشعرات تؤدي وظيفتها في قراءة تغيرات الضغط بدقة.
