يسمح هذا البروتوكول بدراسة عواقب التحفيز على الشبكات العصبية مما يساعد على كشف اللغز المحيط ب DBS. وتحديد تأثير التحفيز على ديناميكيات الدماغ. الميزة الرئيسية لاستخدام إصلاح FD أثناء التحفيز هي أنه يمكننا تصور العواقب في الجسم الحي للتحفيز الحاد على ديناميكيات الدماغ ثم تحسين بروتوكولات التحفيز في الجسم الحي.
هذه الطريقة ذات أهمية خاصة في مجالات علم الأعصاب والطب النفسي. كما هو الحال في هذه التخصصات الطبية التي يكون فيها DBS لها تأثيرها الرئيسي كاستراتيجية بشرية. للبدء ، ضع الحيوان المخدر على سرير التصوير المقطعي المحوسب.
للتصوير المقطعي المحوسب ، قم بتأمين قناع الوجه أو مخروط الأنف على الفئران. حدد موقع الرأس في وسط مجال رؤية الماسح الضوئي المقطعي. تابع للحصول على صورة CT باستخدام معلمات الاكتساب وفقا لمواصفات الماسح الضوئي.
بالنسبة للتصوير بالرنين المغناطيسي ، ضع الحيوان ضعيفا على سرير التصوير بالرنين المغناطيسي. لتجنب الحركات أثناء الحصول على التصوير بالرنين المغناطيسي ، قم بتثبيت الرأس على إطار جسيمي يوضع على سرير الماسح الضوئي. أيضا ، تأمين بقية جسم الفئران مع شريط الحرير.
بمجرد أن يصبح الموقف صحيحا ، احصل على صورة التصوير بالرنين المغناطيسي. استخدم برنامج معالجة الصور لتطبيع التصوير المقطعي المحوسب والتصوير بالرنين المغناطيسي مكانيا باستخدام خوارزمية تسجيل تلقائية جامدة تستند إلى المعلومات المتبادلة. ترجمة خط bregma في الصورة المسجلة بشكل مشترك.
وقياس المسافة في الوصول إلى AP و ML و DV من bregma إلى قشرة الفص الجبهي الإنسي وفقا لأطلس الدماغ Paxinos و Watson Rat Brain. حلق المنطقة بين الأذنين والعينين. ضع الحيوان في وضع الانبطاح على الإطار التجسيمي.
ضمان عدم حركة الرأس باستخدام قضبان أذن الفئران. احرص على عدم إدخال قضبان الأذن بعمق كبير لأن ذلك قد يؤدي إلى تلف طبلة الأذن. استخدم محول عقد الرأس للفئران للحفاظ على الحيوان في الموضع الصحيح أثناء الجراحة.
ضع جل التشحيم Athymic على عيون الفئران لمنع الجفاف أثناء الجراحة وقم بتغطيتها بشاش معقم. قم بعمل شق طولي في الجلد فوق الجمجمة بين الأذنين. تمتد من 1.5 إلى سنتيمترين من لامدا إلى بريغما.
كشف الجمجمة بمساعدة اثنين أو ثلاثة مشابك. إزالة السمحاق بمقص وتنظيف الدم بمحلول ملحي لفضح البريجما والغرز السهمية. إزالة المحلول الملحي الزائد مع الشاش.
قبل وضع الأقطاب الكهربائية ، قم بتصويبها باستخدام ملاقط بلاستيكية لضمان الموضع الصحيح أثناء الجراحة. ضع قطبا كهربائيا واحدا على حامل الذراع اليمنى للإطار التجسيمي. حرك الذراع اليمنى التي تحمل القطب الكهربائي عبر الإطار التجسيمي.
ووضع طرف القطب الكهربائي بالضبط فوق bregma. حاول تقريب طرف القطب الكهربائي قدر الإمكان من الجمجمة دون لمسه لتجنب تشوه القطب الكهربائي. لاحظ الإحداثيات الناتجة عن bregma التي يوفرها الإطار المجسم.
باستخدام قلم جراحي ، ضع علامة على الجمجمة تشير إلى الموضع الأولي للقطب الكهربائي. انقل الحامل إلى إحداثيات AP و ML التي تم الحصول عليها مسبقا. ووضع علامة على الجمجمة باستخدام قلم جراحي يشير إلى موضع هدف القطب الكهربائي.
قم بإزالة الذراع اليمنى للإطار التجسيمي الذي يحمل القطب الكهربائي. احرص على عدم لمس أي شيء بالقطب الكهربائي. باستخدام مثقاب كهربائي صغير ، قم بعمل ثقب من خلال الجمجمة في الموضع المستهدف حتى يصبح الجافية مرئيا.
استخدم برعم قطني لوقف النزيف. حفر أربعة ثقوب على طول الجمجمة لوضع أربعة مسامير. لزيادة مساحة سطح أسمنت الأسنان وتحديد موقع الأرض.
ثم نعلق مسامير. حدد موقع الذراع اليمنى للإطار التجسيمي باستخدام القطب الأيمن. حرك الذراع إلى الموضع المحسوب الذي يجب أن يتزامن مع الثقب.
ثم اخفض القطب الكهربائي حتى يلمس الأم الجافية. سيكون هذا الموقف بمثابة مستوى الصفر في اتجاه DV. باستخدام إحداثيات DV التي تم الحصول عليها في وقت سابق ، أدخل طرف القطب الكهربائي في اتجاه DV.
قم بتوصيل الأرض بأحد البراغي الأقرب إلى القطب الكهربائي وقم بتطبيق أسمنت الأسنان حول القطب الكهربائي والبراغي. كرر نفس إجراء وضع القطب الكهربائي لنصف الكرة الآخر من الدماغ. ضع المزيد من أسمنت الأسنان لتشكيل غطاء دون تغطية القطب الكهربائي وانتظر حتى يتصلب.
استخدم محلول يودوبوفيدون لتطهير المنطقة الجراحية. قم بإزالة الفئران من الإطار التجسيمي والمضي قدما في التصوير المقطعي المحوسب كما هو موضح سابقا لتقييم الموضع الصحيح للأقطاب الكهربائية. صوم الفئران لمدة ثماني إلى 12 ساعة قبل كل فحص PET.
املأ حقنة قياس 27 بحوالي 37 ميجابيكريل من محلول FDG بأقل حجم ممكن كما تم قياسه في مقياس النشاط. ضع وسادة تدفئة تحت ذيل الحيوان أو استخدم ضوء الأشعة تحت الحمراء لتوسيع عروق الذيل. حقن محلول FDG من خلال أحد عروق الذيل الجانبية.
ضع الحيوان مرة أخرى في القفص واسمح لمدة 45 دقيقة لامتصاص المقتفي اللاسلكي قبل بدء جلسة التقاط الصورة. بالنسبة لدراسة D2 ، تم تسليم DBS خلال فترة امتصاص FDG. قم بإعداد المحفز المعزول والأسلاك المطلوبة في غرفة واسعة وهادئة مع مساحة كافية لأقفاص الحيوانات والحد الأدنى من تأثير المحفزات المزعجة المحتملة.
قم بتوصيل أسلاك التحفيز بالدوارات للسماح للحيوانات بالتحرك بحرية داخل الأقفاص وإلى المحفز. اضبط معلمات التحفيز كما هو موضح في مخطوطة النص. استخدم منظار الذبذبات للتحقق من الوضع الحالي والتردد وعرض النبضة.
تأكد من شكل الموجة ثنائية الطور مع شكل نبضة مستطيلة. تصور صورة التصوير المقطعي المحوسب بوضوح القطب الكهربائي الذي تم إدخاله في دماغ الفئران. كما وفرت طريقة التصوير المستخدمة في هذه الدراسة معلومات تشريحية جيدة وسهلت تسجيل صور FDG-PET.
صورة PET-CT منصهرة لنفس الحيوان مسجلة مكانيا في نفس المساحة المجسمة. لوحظت الاختلافات الأيضية في الدماغ بين جلسات التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني حيث تم تركيب خرائط T على شرائح دماغية متسلسلة بحجم ملليمتر واحد من التصوير بالرنين المغناطيسي المسجل إلى صورة CT المرجعية. تألفت هذه الاختلافات من زيادات ونقصان في امتصاص FDG الموضح كألوان دافئة وباردة على التوالي.
وأشار ملخص مفصل للنتائج الإحصائية التي تم الحصول عليها من التحليل إلى منطقة الدماغ المعدلة ونصف الكرة المخية الذي لوحظ فيه التعديل. إحصائية T ، وحجم الكتلة ، واتجاه التشكيل ، وقيم P التي تم الحصول عليها عند مستويات الذروة والمجموعات. من الأهمية بمكان الحفاظ على مستوى جمالي كاف والرأس أثناء الجراحة.
علاوة على ذلك ، يعد حساب الإحداثيات واستقامة الأقطاب الكهربائية أمرا ضروريا. ينصح المشغلون الجدد بتوخي الدقة واتباع جميع الخطوات. بعد الانتهاء من الإجراء بأكمله ، يمكن أن تخضع الحيوانات لاختبار سلوكي لتقييم تأثير التحفيز على المجالات المعرفية المختلفة.
بالإضافة إلى ذلك ، يمكن إجراء عدد من دراسات الصور لتقييم عواقب DBS على المستوى الخلوي.
