פרוטוקול זה מאפשר לחקור את השלכות הגירוי על רשתות עצביות המסייעות לפענח את האניגמה סביב DBS. וכדי לקבוע את ההשפעה של גירוי על הדינמיקה במוח. היתרון העיקרי של שימוש בתיקון FD במהלך גירוי הוא שאנו יכולים לדמיין את ההשלכות in vivo של הגירוי החריף על הדינמיקה המוחית ולאחר מכן לחדד in vivo את פרוטוקולי הגירוי.
שיטה זו רלוונטית במיוחד בתחומי הנוירולוגיה והפסיכיאטריה. כפי שהוא בהתמחויות רפואיות אלה שבהן DBS יש את ההשפעה העיקרית שלה כאסטרטגיה אנתרופונוטית. כדי להתחיל, להניח את החיה מורדמת שכיבה על מיטת CT.
להדמיית CT, הצמידו את מסכת הפנים או חרוט האף לחולדה. אתר את הראש במרכז שדה הראייה של סורק ה- CT. המשך לרכוש את תמונת ה- CT באמצעות פרמטרי רכישה בהתאם למפרט הסורק.
עבור הדמיית MR, השכיבו את החיה על מיטת ה-MRI. כדי למנוע תזוזות במהלך רכישת MRI, הצמידו את הראש למסגרת סטריאוטקטית המונחת על מיטת הסורק. כמו כן, לאבטח את שאר הגוף חולדה עם סרט משי.
ברגע שהמיקום נכון, רכשו את תמונת ה- MRI. השתמש בתוכנת עיבוד תמונה כדי לנרמל מרחבית CT ו- MRI באמצעות אלגוריתם רישום קשיח אוטומטי המבוסס על מידע הדדי. לוקליזציה של קו הברגמה בתמונה שנרשמה במשותף.
ולמדוד את המרחק בגישה של AP, ML ו-DV מברגמה לקליפת המוח הקדם-מצחית המדיאלית על פי אטלס המוח של Paxinos ו-Watson Rat. לגלח את האזור שבין האוזניים לעיניים. מקם את החיה במצב נוטה על המסגרת הסטריאוטקטית.
הקפידו על חוסר תנועה של הראש על ידי שימוש במוטות האוזניים של החולדה. היזהרו לא להכניס את מוטות האוזניים עמוק מדי, שכן הדבר עלול לגרום נזק לעור התוף. השתמש במתאם החזקת הראש לחולדות כדי לשמור על החיה בתנוחה הנכונה במהלך הניתוח.
החל ג'ל סיכה אתימי על עיני החולדה כדי למנוע יובש במהלך הניתוח ולכסות אותם עם גזה סטרילית. לעשות חתך אורכי בעור מעל הגולגולת בין האוזניים. משתרע על 1.5 עד שני סנטימטרים מלמבדה לברגמה.
חשוף את הגולגולת בעזרת שניים או שלושה מלחציים. הסר את periosteum עם מספריים ולנקות את הדם עם תמיסת מלח כדי לחשוף bregma ואת התפרים sagittal. הסר את תמיסת מלח עודף עם גזה.
לפני מיקום האלקטרודות, יישרו אותן עם פינצטה פלסטית כדי להבטיח את המיקום הנכון במהלך הניתוח. הנח אלקטרודה אחת על מחזיק הזרוע הימנית של המסגרת הסטריאוטקטית. הזז את זרוע ימין המחזיקה את האלקטרודה דרך המסגרת הסטריאוטקטית.
ומניחים את קצה האלקטרודה בדיוק מעל ברגמה. נסה להביא את קצה האלקטרודה קרוב ככל האפשר לגולגולת מבלי לגעת בה כדי למנוע עיוות אלקטרודה. שים לב לקואורדינטות המתקבלות עבור bregma המסופקות על ידי המסגרת הסטריאוטקסית.
באמצעות עט כירורגי, לעשות סימן על הגולגולת המציין את המיקום הראשוני של האלקטרודה. העבר את המחזיק לקואורדינטות AP ו- ML שהתקבלו קודם לכן. ולעשות סימן על הגולגולת עם עט כירורגי המציין את המיקום של המטרה אלקטרודה.
הסר את הזרוע הימנית של המסגרת הסטריאוטקטית המחזיקה את האלקטרודה. היזהר לא לגעת בשום דבר עם האלקטרודה. באמצעות מקדחה חשמלית קטנה, לעשות חור דרך הגולגולת במצב המטרה עד dura גלוי.
השתמש בצמר גפן כדי לעצור את הדימום. קדחו ארבעה חורים לאורך הגולגולת כדי למקם ארבעה ברגים. להגדיל את שטח הפנים של המלט הדנטלי ולאתר את הקרקע.
לאחר מכן חבר את הברגים. אתר את הזרוע הימנית של המסגרת הסטריאוטקטית עם האלקטרודה הימנית. הזיזו את הזרוע למצב המחושב שאמור לעלות בקנה אחד עם החור.
לאחר מכן הורידו את האלקטרודה עד שהיא נוגעת בדורה מאטר. עמדה זו תשמש כרמת אפס בכיוון DV. באמצעות קואורדינטות DV שהתקבלו קודם לכן, הכנס את קצה האלקטרודה בכיוון DV.
חברו את הקרקע לאחד הברגים הקרובים ביותר לאלקטרודה והניחו מלט דנטלי סביב האלקטרודה והברגים. חזור על אותו הליך מיקום אלקטרודות עבור ההמיספרה השנייה של המוח. יש למרוח יותר מלט דנטלי כדי ליצור מכסה מבלי לכסות את האלקטרודה ולהמתין עד שהיא תתקשה.
השתמש בפתרון יודופובידון כדי לחטא את אזור הניתוח. הסר את החולדה מהמסגרת הסטריאוטקטית והמשך בהדמיית CT כפי שהודגם קודם לכן כדי להעריך את המיקום הנכון של האלקטרודות. צמו את החולדה במשך שמונה עד 12 שעות לפני כל סריקת PET.
מלאו מזרק של 27 מדים בכ-37 מגה-בקרל של תמיסת FDG בנפח הנמוך ביותר האפשרי כפי שנמדד במפעיל מטר. הניחו כרית חימום מתחת לזנב החיה או השתמשו באור אינפרא אדום כדי להרחיב את ורידי הזנב. להזריק את תמיסת FDG דרך אחד הורידי הזנב לרוחב.
החזירו את החיה לכלוב ואפשרו 45 דקות לקליטת מעקב רדיו לפני תחילת סשן רכישת התמונה. עבור מחקר D2, נמסר DBS במהלך תקופת ספיגת FDG. הכינו את הגירוי המבודד ואת החוטים הנדרשים בחדר עצום ושקט עם מספיק מקום לכלובים של בעלי החיים והשפעה מינימלית של גירויים שעלולים להטריד.
חבר את חוטי הגירוי לסיבובים כדי לאפשר לבעלי חיים לנוע בחופשיות בתוך הכלובים ולמגרה. הגדר את פרמטרי הגירוי כמתואר בכתב היד של הטקסט. השתמש באוסצילוסקופ כדי לבדוק את המצב הנוכחי, התדר ורוחב הפולס.
אשר את צורת הגל הדו-פאזית עם צורת פולס מלבנית. תמונת ה-CT דמיינה בבירור את האלקטרודה שהוכנסה למוח החולדה. שיטת ההדמיה ששימשה במחקר זה סיפקה גם מידע אנטומי טוב והקלה על רישום תמונות FDG-PET.
תמונת PET-CT מתמזגת של אותה חיה הרשומה מרחבית באותו מרחב סטריאוטקסי. ההבדלים המטבוליים במוח נצפו בין מפגשי PET כאשר מפות T הונחו על גבי פרוסות מוח של מילימטר אחד רציף מ-MRI שנרשם לתמונת ה-CT הייחוס. הבדלים אלה כללו עליות וירידות בספיגת FDG שהוצגו כצבעים חמים וקרים בהתאמה.
סיכום מפורט של התוצאות הסטטיסטיות שהתקבלו מהניתוח הצביע על אזור המוח המווסת ועל ההמיספרה המוחית שבה נצפתה המודולציה. סטטיסטיקת T, גודל האשכול, כיוון המודולציה וערכי P המתקבלים ברמות השיא והאשכולות. חשוב לשמור על רמה אסתטית נאותה של הראש במהלך הניתוח.
יתר על כן, חישוב קואורדינטות וישרות של האלקטרודות הם חיוניים. למפעילים חדשים מומלץ להקפיד ולבצע את כל השלבים. לאחר השלמת ההליך כולו בעלי חיים יכולים להיות נתונים למבחן התנהגותי כדי להעריך את השפעת הגירוי על תחומים קוגניטיביים שונים.
בנוסף, ניתן לבצע מספר מחקרי תמונה כדי להעריך את השלכות ה-DBS ברמה התאית.
