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Fertilization of <em>Xenopus oocytes</em> using the Host Transfer Method

Studying the contribution of maternally inherited molecules to vertebrate early development is often hampered by the time and expense necessary to ...

University of Iowa

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&#x80CC;&#x4FA7;&#x548C;&#x8179;&#x4FA7;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x4EA7;&#x5987; XTcf3 &#x7EC4;&#x7EC7;&#x8005;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x9547;&#x538B;&#x3002;

In the early Xenopus embryo, the dorsal axis is specified by a Wnt signal transduction pathway, involving the movement of beta-catenin into dorsal cell nuclei and its functional association with the LEF-type transcription factor XTcf3. The subsequent function of XTcf3 is uncertain. Overexpression data has suggested that it can be both an activator and repressor of downstream genes. XTcf3 mRNA is synthesized during oogenesis in Xenopus and is stored in the egg. To identify its role in dorsal axis specification, we depleted this maternal store in full-grown oocytes using antisense deoxyoligonucleotides, and fertilized them. The developmental effects of XTcf3 depletion, both on morphogenesis and the expression of marker genes, show that primarily, XTcf3 is an inhibitor, preventing both dorsal and ventral cells of the late blastula from expressing dorsal genes. We also show that simple relief from the repression is not the only factor required for dorsal gene expression. To demonstrate this, we fertilized eggs that had been depleted of both XTcf3 and the maternal transcription factor VegT. Dorsal genes normally repressed by XTcf3 are not activated in these embryos. These data show that normal dorsal gene expression in the embryo requires the transcriptional activator VegT, whilst XTcf3 prevents their inappropriate expression on the ventral side of the embryo.

Repression of organizer genes in dorsal and ventral Xenopus cells mediated by maternal XTcf3.

Dans l&#x26;#39;embryon de Xenopus, l&#x26;#39;axe dorsale est sp&#xE9;cifi&#xE9;e par une voie de transduction de signal Wnt, impliquant le d&#xE9;placement de la beta-cat&#xE9;nine dans le noyau des cellules dorsale et son association fonctionnelle avec le facteur de transcription LEF-type de XTcf3. La fonction ult&#xE9;rieure XTcf3 est incertain. La surexpression de donn&#xE9;es a sugg&#xE9;r&#xE9; qu&#x26;#39;il puisse &#xEA;tre &#xE0; la fois un activateur et r&#xE9;presseur des g&#xE8;nes en aval. XTcf3 ARNm est synth&#xE9;tis&#xE9; au cours de l&#x26;#39;ovogen&#xE8;se chez le X&#xE9;nope et est stock&#xE9;e dans l&#x26;#39;&#x153;uf. Pour identifier son r&#xF4;le dans la sp&#xE9;cification axe dorsal, nous appauvri ce magasin maternelle &#xE0; plein cultiv&#xE9;es en utilisant des ovocytes d&#xE9;soxyoligonucl&#xE9;otides antisens, et les f&#xE9;cond&#xE9;. Les effets sur le d&#xE9;veloppement de l&#x26;#39;&#xE9;puisement XTcf3, &#xE0; la fois sur la morphogen&#xE8;se et l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes marqueurs, principalement montrent que, XTcf3 est un inhibiteur, la pr&#xE9;vention de deux cellules dorsales et ventrales de la fin des ann&#xE9;es blastula de l&#x26;#39;expression de g&#xE8;nes dorsales. Nous montrons &#xE9;galement que l&#x26;#39;all&#xE9;gement de simple &#xE0; partir de la r&#xE9;pression n&#x26;#39;est pas le seul facteur n&#xE9;cessaire pour l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes dorsale. Pour d&#xE9;montrer cela, nous avons des &#x153;ufs f&#xE9;cond&#xE9;s qui avaient &#xE9;t&#xE9; &#xE9;puis&#xE9;s &#xE0; la fois XTcf3 et la transcription Vegt maternelle facteur. G&#xE8;nes dorsaux normalement r&#xE9;prim&#xE9;s par XTcf3 ne sont pas activ&#xE9;s dans ces embryons. Ces donn&#xE9;es montrent que l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes normale dorsale de l&#x26;#39;embryon exige l&#x26;#39;activateur transcriptionnel Vegt, tandis que XTcf3 emp&#xEA;che leur expression inappropri&#xE9;e sur la face ventrale de l&#x26;#39;embryon.

R&#xE9;pression des g&#xE8;nes dans les cellules de Xenopus Organisateur dorsale et ventrale M&#xE9;diation par XTcf3 maternelle

Die Repression von Genen Veranstalter in dorsalen und ventralen Xenopus-Zellen vermittelt durch m&#xFC;tterliche XTcf3.

Nell&#39;embrione di Xenopus precoce, l&#39;asse dorsale &egrave; specificato da un percorso trasduzione del segnale Wnt, che coinvolge il movimento di beta-catenina in nuclei delle cellule dorsale e la sua associazione funzionale con il fattore di trascrizione LEF-tipo XTcf3. La funzione successiva del XTcf3 &egrave; incerta. Dati di sovraespressione ha suggerito che pu&ograve; essere sia un attivatore e repressore dei geni a valle. XTcf3 mRNA &egrave; sintetizzato durante l&#39;ovogenesi in Xenopus e viene memorizzato nell&#39;uovo. Per identificare il proprio ruolo nella specifica di asse dorsale, impoverito questo negozio materno nell&#39;adulto ovociti mediante antisenso deoxyoligonucleotides e fecondato li. Gli effetti dello sviluppo della deplezione di XTcf3, sia sulla morfogenesi e l&#39;espressione dei geni marcatori, mostrano che, soprattutto, XTcf3 &egrave; un inibitore, impedendo l&#39;espressione dei geni dorsale dorsale e ventrale le cellule della blastula fine. Mostriamo anche che semplice sollievo dalla repressione non &egrave; l&#39;unico fattore richiesto per l&#39;espressione di gene dorsale. Per dimostrare questo, abbiamo fecondato le uova che erano state impoverite sia XTcf3 che il fattore di trascrizione materna VegT. Dorsale geni normalmente represse dal XTcf3 non vengono attivati in questi embrioni. Questi dati mostrano che espressione di gene normale dorsale nell&#39;embrione richiede l&#39;attivatore trascrizionale VegT, mentre XTcf3 impedisce la loro espressione inappropriata sul lato ventrale dell&#39;embrione.

Repressione di Organizzatore geni nelle cellule di Xenopus dorsale e ventrale mediate da XTcf3 materna.

&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x80CC;&#x5074;&#x8EF8;&#x306F;&#x80CC;&#x5074;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x3068;LEF&#x578B;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;XTcf3&#x3068;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x95A2;&#x9023;&#x306B;&#x3B2;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x79FB;&#x52D5;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6307;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; XTcf3&#x306E;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; XTcf3 mRNA&#x3092;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;&#x5375;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5408;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x5375;&#x306B;&#x683C;&#x7D0D;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x80CC;&#x8EF8;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3067;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x305F;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6BCD;&#x89AA;&#x306E;&#x5E97;&#x3092;&#x67AF;&#x6E07;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x53D7;&#x7CBE;&#x3002;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;XTcf3&#x67AF;&#x6E07;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3078;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x3001;XTcf3&#x306F;&#x80CC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3089;&#x9045;&#x304F;&#x80DE;&#x80DA;&#x306E;&#x80CC;&#x5074;&#x3068;&#x8179;&#x5074;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3002;&#x8868;&#x793A;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x6291;&#x5727;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x6551;&#x6E08;&#x304C;&#x80CC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;XTcf3&#x3068;&#x6BCD;&#x6027;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;VegT&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x67AF;&#x6E07;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x5375;&#x3092;&#x53D7;&#x7CBE;&#x3002;&#x901A;&#x5E38;XTcf3&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6291;&#x5236;&#x80CC;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x80DA;&#x3067;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x80DA;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x80CC;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;VegT&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x306A;&#x304C;&#x3089;XTcf3&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x306E;&#x8179;&#x5074;&#x306B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x4E0D;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6BCD;&#x4F53;XTcf3&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x80CC;&#x8179;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30AC;&#x30CA;&#x30A4;&#x30B6;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5F3E;&#x5727;

&#xCD08;&#xAE30; Xenopus &#xBC30;&#xC544; &#xC9C0; &#xCD95; Wnt &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xD1B5;&#xB85C;, &#xC9C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xD575;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5F0;&#xAD00; LEF &#xD615; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; Xtcf3&#xC73C;&#xB85C; &#xBCA0;&#xD0C0;-catenin&#xC758; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC9C0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Xtcf3&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD88;&#xD22C;&#xBA85; &#xD558;&#xB2E4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Overexpression &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xD65C;&#xC131; &#xC81C; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC9C4;&#xC555; &#xB420; &#xC218; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. XTcf3 mRNA Xenopus&#xC5D0;&#xC11C; oogenesis &#xC911; &#xD569;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xACC4;&#xB780;&#xC5D0; &#xC800;&#xC7A5; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C0; &#xCD95; &#xC0AC;&#xC591; &#xD558;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0;&#xAC08; &#xC13C;&#xC2A4; deoxyoligonucleotides&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC804;&#xCCB4; oocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xC131;&#xC774; &#xAC8C; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xC218;&#xC815; &#xB41C;. XTcf3 &#xACE0;&#xAC08;, &#xBAA8;&#xB450; morphogenesis &#xB9C8;&#xCEE4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0;&#xC758; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC8FC;&#xB85C;, XTcf3 &#xB4F1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2A6;&#xC740; blastula&#xC758; &#xB4F1; &#xCABD;&#xACFC; &#xBCF5; &#xBD80; &#xC140;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC5B5;&#xC555;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xAD6C;&#xD638; &#xB4F1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C;&#xAC00; &#xC544;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC; Xtcf3&#xACFC; &#xBAA8;&#xC131; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; VegT &#xACE0;&#xAC08; &#xB418;&#xC5B4; &#xD588;&#xB2E4; &#xACC4;&#xB780; &#xC218;&#xC815; &#xB41C;. &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; Xtcf3&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5B5;&#xC555; &#xD558;&#xB294; &#xB4F1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD45C;&#xC2DC; XTcf3 &#xD0DC;&#xC544;&#xC758; &#xBCF5; &#xBD80; &#xCABD;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBD80;&#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xD45C;&#xD604;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD0DC;&#xC544;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC9C0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; transcriptional &#xD65C;&#xC131;&#xAE30; VegT, &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB4F1; &#xCABD;&#xACFC; &#xBCF5; &#xBD80; Xenopus &#xC140; &#xBAA8;&#xC131; Xtcf3&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xCD5C;&#xC790; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;.

A principios de los embriones de Xenopus, el eje dorsal se especifica por una v&#xED;a de transducci&#xF3;n de se&#xF1;ales Wnt, que implica el movimiento de la beta-catenina en los n&#xFA;cleos celulares dorsal y su relaci&#xF3;n funcional con el factor de transcripci&#xF3;n LEF tipo XTcf3. La funci&#xF3;n posterior de XTcf3 es incierta. Datos sobreexpresi&#xF3;n ha sugerido que puede ser tanto un activador y represor de genes abajo. XTcf3 ARNm se sintetiza durante la ovog&#xE9;nesis en Xenopus y se almacena en el huevo. Para identificar su papel en la especificaci&#xF3;n del eje dorsal, que agota esta tienda materna en plena crecido ovocitos utilizando desoxioligonucle&#xF3;tidos antisentido, y se fertilizan ellos. Los efectos sobre el desarrollo de XTcf3 agotamiento, tanto en la morfog&#xE9;nesis y la expresi&#xF3;n de los genes marcadores, muestran que en primer lugar, XTcf3 es un inhibidor, la prevenci&#xF3;n de las dos c&#xE9;lulas dorsal y ventral de la bl&#xE1;stula tard&#xED;a de la expresi&#xF3;n de genes dorsales. Tambi&#xE9;n muestran que el alivio de simple a partir de la represi&#xF3;n no es el &#xFA;nico factor necesario para la expresi&#xF3;n del gen dorsal. Para demostrar esto, los huevos fertilizados que se hab&#xED;a agotado de tanto XTcf3 y el factor de transcripci&#xF3;n Vegt materna. Genes dorsales normalmente reprimidos por XTcf3 no se activan en los embriones. Estos datos muestran que la expresi&#xF3;n de gen normal dorsal en el embri&#xF3;n requiere el activador transcripcional vEGT, mientras XTcf3 impide su expresi&#xF3;n inapropiada en el lado ventral del embri&#xF3;n.

La represi&#xF3;n de los genes en las c&#xE9;lulas del organizador de Xenopus dorsal y ventral mediada por la madre XTcf3

(Wg) Wingless / Wnt &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x8C03;&#x8282;&#x8BB8;&#x591A;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FDB;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x79CD;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x72B0;&#x72F3; (Arm) / &#x8FDE;&#x73AF;&#x548C;&#x82F1;&#x56FD;&#x653F;&#x5E9C;&#x6846;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684; Tcf &#x5BB6;&#x5EAD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF0C;Pygopus (Pygo) Wg/Wnt &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x4E2D;&#x8D77;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x751F;&#x548C; pygo &#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x5F62;&#x8C61;&#x6027;&#x5149;&#x76D8;&#x53D1;&#x5C55;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x671F;&#x95F4;&#x51CF;&#x5C11; Wg &#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;Pygo &#x884C;&#x4E3A;&#x4E0B;&#x6E38;&#x6216;&#x5E76;&#x884C;&#x81C2;&#x4EE5;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x624B;&#x81C2;&#x86CB;&#x767D;&#x6838;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;pygo &#x5C06;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x548C;&#x8F74;&#x627F;&#x662F;&#x5176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x7684;&#x535A;&#x58EB;&#x624B;&#x6307;&#x7684;&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8868;&#x660E; Pygo &#x53EF;&#x4EE5;&#x5F62;&#x6210;&#x81C2;&#x4F53;&#x5185;&#x4E00;&#x4E2A;&#x590D;&#x6742;&#x548C;&#x5177;&#x6709;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x57DF;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x5206;&#x79BB; pygo (Xpygo) &#x7684;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x3002;&#x4EA7;&#x5987;&#x7684;&#x53CD;&#x4E49; deoxyoligonucleotides Xpygo &#x7684;&#x67AF;&#x7AED;&#x5BFC;&#x81F4; ventralized &#x80DA;&#x80CE;&#x7578;&#x5F62;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11; Wnt &#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; Pygo &#x662F; Wg/Wnt &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x9014;&#x5F84;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x662F;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6838;&#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x624B;&#x81C2;&#x8FDE;&#x73AF;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6210;&#x866B;&#x3002;

pygopus &#x5C06;&#x7F16;&#x7801;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6838;&#x7FFC;&#x5F0F;/wnt &#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;

The Wingless (Wg)/Wnt signal transduction pathway regulates many developmental processes through a complex of Armadillo(Arm)/beta-catenin and the HMG-box transcription factors of the Tcf family. We report the identification of a new component, Pygopus (Pygo), that plays an essential role in the Wg/Wnt signal transduction pathway. We show that Wg signaling is diminished during embryogenesis and imaginal disc development in the absence of pygo activity. Pygo acts downstream or in parallel with Arm to regulate the nuclear function of Arm protein. pygo encodes a novel and evolutionarily conserved nuclear protein bearing a PHD finger that is essential for its activity. We further show that Pygo can form a complex with Arm in vivo and possesses a transcription activation domain(s). Finally, we have isolated a Xenopus homolog of pygo (Xpygo). Depletion of maternal Xpygo by antisense deoxyoligonucleotides leads to ventralized embryonic defects and a reduction of the expression of Wnt target genes. Together, these findings demonstrate that Pygo is an essential component in the Wg/Wnt signal transduction pathway and is likely to act as a transcription co-activator required for the nuclear function of Arm/beta-catenin.

pygopus Encodes a nuclear protein essential for wingless/Wnt signaling.

La voie de signalisation Wingless (Wg) / Wnt transduction r&#xE9;glemente de nombreux processus de d&#xE9;veloppement gr&#xE2;ce &#xE0; un complexe de Armadillo (Arm) / beta-cat&#xE9;nine et les facteurs de transcription de l&#x26;#39;HMG-box de la famille Tcf. Nous rapportons l&#x26;#39;identification d&#x26;#39;un nouveau composant, Pygopus (Pygo), qui joue un r&#xF4;le essentiel dans la Wg / Wnt voie de transduction du signal. Nous montrons que Wg signalisation est diminu&#xE9; au cours de l&#x26;#39;embryogen&#xE8;se et le d&#xE9;veloppement des disques imaginaux en l&#x26;#39;absence de l&#x26;#39;activit&#xE9; pygo. Pygo agit en aval ou en parall&#xE8;le avec le bras pour r&#xE9;guler la fonction nucl&#xE9;aire de la prot&#xE9;ine Arm. pygo code pour un roman et de l&#x26;#39;&#xE9;volution conserv&#xE9; prot&#xE9;ine nucl&#xE9;aire portant un doigt PHD qui est essentiel pour son activit&#xE9;. Nous montrons en outre que Pygo peut former un complexe avec Arm in vivo et poss&#xE8;de un domaine d&#x26;#39;activation de la transcription (s). Enfin, nous avons isol&#xE9; un homologue de Xenopus de pygo (Xpygo). L&#x26;#39;&#xE9;puisement des Xpygo maternelle d&#xE9;soxyoligonucl&#xE9;otides antisens conduit &#xE0; ventralized d&#xE9;fauts embryonnaires et une r&#xE9;duction de l&#x26;#39;expression de g&#xE8;nes cibles de Wnt. Ensemble, ces r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que Pygo est une composante essentielle au sein du GT / Wnt voie de transduction du signal et est susceptible d&#x26;#39;agir comme un co-activateur de la transcription requis pour la fonction nucl&#xE9;aire de bras / beta-cat&#xE9;nine.

Pygopus code pour une prot&#xE9;ine nucl&#xE9;aire essentielle pour Wingless / Wnt Signaling

Pygopus Kodiert einen nuklearen Protein essentiell f&#xFC;r fl&#xFC;gellose / Wnt-Signalweg.

Gabrile (Wg) / pathway di trasduzione segnale Wnt regola molti processi di sviluppo attraverso un complesso di Armadillo (Arm) / beta-catenina e i fattori di trascrizione HMG-box della famiglia Tcf. Riportiamo l&#39;identificazione di un nuovo componente, Pygopus (Pygo), che svolge un ruolo essenziale nella via di trasduzione del segnale Wnt/Wg. Mostriamo che segnalazione Wg &egrave; diminuito durante l&#39;embriogenesi e sviluppo disco immaginale in assenza di attivit&agrave; pygo. Pygo agisce a valle o in parallelo con il braccio per regolare la funzione nucleare della proteina del braccio. pygo codifica un romanzo ed evolutivamente conservata proteina nucleare tenendo un dito di dottorato di ricerca che &egrave; essenziale per la sua attivit&agrave;. Mostriamo ulteriormente che Pygo pu&ograve; formare un complesso con il braccio in vivo e possiede un dominio di attivazione trascrizione. Infine, abbiamo isolato un omologo di Xenopus di pygo (Xpygo). Svuotamento della materna Xpygo di deoxyoligonucleotides antisenso conduce alla ventralized difetti embrionali e una riduzione dell&#39;espressione dei geni bersaglio di Wnt. Insieme, questi risultati dimostrano che Pygo &egrave; un componente essenziale nella via di trasduzione del segnale Wnt/Wg e rischia di agire come un coattivatore di trascrizione necessari per la funzione di braccio/beta-catenina nucleare.

pygopus codifica per una proteina nucleare essenziale per segnalazione wingless/Wnt.

&#x9060;&#x8FD1;&#x8EF8;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x305F;&#xFF08;WG&#xFF09;/ Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Armadillo&#xFF08;&#x30A2;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF09;/&#x3B2;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;&#x3068;TCF&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;HMG-box&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x904E;&#x7A0B;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;WG / Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3001;Pygopu&#x200B;&#x200B;s&#xFF08;Pygo&#xFF09;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;WG&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;pygo&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x80DA;&#x3068;&#x6210;&#x866B;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; Pygo&#x306F;&#x3001;ARM&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6838;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x4E0B;&#x6D41;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4E26;&#x5217;&#x306B;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; pygo&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;PHD&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x3092;&#x51A0;&#x3057;&#x305F;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3084;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6838;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;Pygo&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF08;s&#xFF09;&#x3092;&#x6709;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;pygo&#xFF08;Xpygo&#xFF09;&#x306E;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x3092;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6BCD;&#x4F53;Xpygo&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x306F;ventralized&#x80DA;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3084;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;Pygo&#x306F;&#x3001;WG / Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5FC5;&#x9808;&#x6210;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x30A2;&#x30FC;&#x30E0;/&#x3B2;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x6838;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x5171;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

Pygopu&#x200B;&#x200B;s&#x306F;&#x3001;Wnt /&#x9060;&#x8FD1;&#x8EF8;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x305F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;

Wingless (Wg) / &#xC544; &#xB974; &#xB9C8; &#xB51C; (&#xD314;)&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB9CE;&#xC740; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; Wnt &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD658; &#xD1B5;&#xB85C; / &#xBCA0;&#xD0C0;-catenin &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; Tcf &#xAC00;&#xC871;&#xC758; HMG &#xC0C1;&#xC790; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC0C8; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;, Pygopus (Pygo), Wg/Wnt &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; embryogenesis &#xBC0F; pygo &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; imaginal &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; Wg &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC740; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Pygo&#xB294; &#xD558;&#xB958; &#xB610;&#xB294; &#xD314; &#xD314; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD575; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC791;&#xB3D9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. pygo &#xC18C;&#xC124;&#xACFC; &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xD575; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4; &#xBC15;&#xC0AC; &#xC190;&#xAC00;&#xB77D; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; Pygo &#xD314; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC591;&#xC2DD; &#xC218; &#xBC0F; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xBCF4;&#xC720; &#xD558; &#xACE0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; pygo (Xpygo)&#xC758; Xenopus &#xCCB4;&#xB97C; &#xD30C;&#xC545; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC13C;&#xC2A4; deoxyoligonucleotides&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBAA8;&#xC131; Xpygo&#xC758; &#xACE0;&#xAC08; &#xB9AC;&#xB4DC; ventralized &#xBC30;&#xC544; &#xACB0;&#xD568;&#xACFC; Wnt &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xC815; &#xAC10;&#xC18C;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC785;&#xC99D; Pygo Wg/Wnt &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC774;&#xBA70;, &#xD314;/&#xBCA0;&#xD0C0;-catenin&#xC758; &#xD575; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1;&#xC73C;&#xB85C; &#xB192;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

pygopus &#xB0A0;&#xAC1C;/Wnt &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xD575; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La v&#xED;a de transducci&#xF3;n de se&#xF1;ales sin alas (GT) / Wnt regula muchos procesos de desarrollo a trav&#xE9;s de un complejo de Armadillo (Brazo) / beta-catenina y los factores de transcripci&#xF3;n de la HMG-caja de la familia TCF. Se presenta la identificaci&#xF3;n de un nuevo componente, Pygopus (Pygo), que desempe&#xF1;a un papel esencial en el GT / v&#xED;a Wnt de transducci&#xF3;n de se&#xF1;ales. Se demuestra que la se&#xF1;alizaci&#xF3;n Wg se reduce durante la embriog&#xE9;nesis y el desarrollo del disco imaginal de la ausencia de actividad Pygo. Pygo act&#xFA;a aguas abajo o en paralelo con el brazo para regular la funci&#xF3;n nuclear de la prote&#xED;na del brazo. Pygo codifica una nueva prote&#xED;na y evolutivamente conservado nuclear teniendo un dedo PHD que es esencial para su actividad. Adem&#xE1;s, muestran que Pygo puede formar un complejo con el brazo en vivo y posee un dominio de activaci&#xF3;n de la transcripci&#xF3;n (s). Por &#xFA;ltimo, hemos aislado un hom&#xF3;logo de Xenopus Pygo (Xpygo). El agotamiento de los Xpygo materna desoxioligonucle&#xF3;tidos antisentido conduce a defectos ventralized embrionarias y una reducci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n de los genes diana de Wnt. En conjunto, estos hallazgos demuestran que Pygo es un componente esencial en el GT / v&#xED;a Wnt de transducci&#xF3;n de se&#xF1;ales y es probable que act&#xFA;e como un co-activador de la transcripci&#xF3;n necesario para la funci&#xF3;n nuclear del brazo / beta-catenina.

Pygopus codifica una prote&#xED;na esencial para la nuclear sin alas / Wnt de se&#xF1;alizaci&#xF3;n

&#x7531; LRP5 &#x548C; LRP6 &#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x53D7;&#x4F53;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x4E9A;&#x79D1;&#x4F5C;&#x4E3A; co-receptors Wnt &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x8D77;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B; LRP5 &#x8D1F;&#x8D23;&#x9AA8;&#x8D28;&#x758F;&#x677E;&#x75C7;&#x5047;&#x6027;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x548C;&#x5C0F;&#x9F20; Lrp6 &#x7684;&#x4E2D;&#x65AD;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x51E0;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; Wnt &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x514B;&#x9686;&#x722A;&#x87FE;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684; Lrp5 &#x548C; Lrp6 Xlrp6 Xlrp5&#xFF09; &#x548C;&#x5BA1;&#x67E5;&#x5176;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x6BCD;&#x4F53;&#x548C;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x901A;&#x8FC7;&#x65E9;&#x671F;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x5728;&#x7A0D;&#x540E;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;Xlrp5 &#x662F;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x773C;&#x775B;&#x3001; &#x524D;&#x8111;&#x3001; &#x540E;&#x8111;&#x3001; &#x9CC3;&#x5F13;&#x548C;&#x5C3E;&#x5DF4;&#x82BD;&#x7684;&#x63D0;&#x793A;&#x3002;&#x6574;&#x4E2A;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x9CC3;&#x5F13;&#xFF0C;&#x773C;&#x548C;&#x8033;&#x56CA;&#x6CE1;&#x4E2D;&#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x662F; Xlrp6&#x3002;&#x5728; intersomitic &#x7684;&#x8FB9;&#x754C;&#x5904;&#x4E5F;&#x8868;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; Wnt &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7; LRP &#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;

&#x514B;&#x9686;&#x548C;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE; Lrp5 &#x548C; Lrp6 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

LRP5 and LRP6 comprise a subfamily of lipoprotein-receptor related proteins that function as co-receptors for Wnt proteins. Mutation of human LRP5 is responsible for osteoporosis-pseudoglioma syndrome and disruption of Lrp6 in mice causes similar effects to mutation of several different Wnt genes. We have cloned Xenopus homologues of Lrp5 and Lrp6 (Xlrp5, Xlrp6) and examined their expression during embryogenesis. Both genes are expressed maternally and ubiquitously through early development. At later stages, Xlrp5 is found in the eye, forebrain, hindbrain, branchial arches and the tip of the tail bud. Xlrp6 is expressed throughout the central nervous system, branchial arches, in the eye and otic vesicle. Both genes are also expressed at the intersomitic boundary. These results suggest roles for Wnt signaling via LRP proteins in these tissues.

Cloning and expression of Xenopus Lrp5 and Lrp6 genes.

LRP5 et LRP6 comprennent une sous-famille de la lipoprot&#xE9;ine-r&#xE9;cepteur des prot&#xE9;ines associ&#xE9;es qui fonctionnent comme des co-r&#xE9;cepteurs pour les prot&#xE9;ines Wnt. La mutation de LRP5 humain est responsable de l&#x26;#39;ost&#xE9;oporose pseudogliome syndrome et la perturbation des LRP6 chez la souris provoque des effets similaires &#xE0; la mutation de plusieurs g&#xE8;nes diff&#xE9;rents Wnt. Nous avons clon&#xE9; homologues de Xenopus de LRP5 et LRP6 (Xlrp5, Xlrp6) et a examin&#xE9; leur expression au cours de l&#x26;#39;embryogen&#xE8;se. Les deux g&#xE8;nes sont exprim&#xE9;s de fa&#xE7;on ubiquitaire et la m&#xE8;re par le biais du d&#xE9;veloppement pr&#xE9;coce. Aux stades ult&#xE9;rieurs, Xlrp5 se trouve dans l&#x26;#39;&#x153;il, du cerveau ant&#xE9;rieur, cerveau post&#xE9;rieur, arcs branchiaux et la pointe du bourgeon de queue. Xlrp6 est exprim&#xE9; dans le syst&#xE8;me nerveux central, des arcs branchiaux, dans l&#x26;#39;&#x153;il et de la v&#xE9;sicule otique. Les deux g&#xE8;nes sont &#xE9;galement exprim&#xE9;s &#xE0; la limite intersomitic. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent des r&#xF4;les pour la signalisation Wnt via prot&#xE9;ines LRP dans ces tissus.

Clonage et expression de Xenopus LRP5 et LRP6 g&#xE8;nes

Klonierung und Expression von Xenopus LRP5 und LRP6 Gene.

LRP5 e LRP6 costituiscono una sottofamiglia di lipoproteine-recettore relativa proteine che fungono da corecettori per le proteine Wnt. Mutazione di LRP5 umano &egrave; responsabile della sindrome Osteoporosi pseudoglioma e turbativa di Lrp6 nei topi provoca effetti simili alla mutazione di diversi geni differenti Wnt. Noi abbiamo clonato Xenopus omologhi di Lrp5 e Lrp6 (Xlrp5, Xlrp6) e ha esaminato la loro espressione durante l&#39;embriogenesi. Entrambi i geni sono espressi per via materna e ubiquitously attraverso lo sviluppo precoce. Nelle fasi successive, Xlrp5 &egrave; trovato nell&#39;occhio, proencefalo, hindbrain, gli archi branchiali e la punta del germoglio di coda. Xlrp6 &egrave; espresso in tutto il sistema nervoso centrale, gli archi branchiali, nell&#39;occhio e la vescicola otic. Entrambi i geni sono espressi anche al contorno di intersomitic. Questi risultati suggeriscono ruoli per segnalazione Wnt tramite proteine LRP in questi tessuti.

Clonazione ed espressione di geni Xenopus Lrp5 e Lrp6.

LRP5&#x3068;LRP6&#x306F;&#x3001;Wnt&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5171;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x95A2;&#x9023;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;LRP5&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;LRP6&#x306E;&#x9AA8;&#x7C97;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x75C7; - &#x507D;&#x795E;&#x7D4C;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x3068;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;Wnt&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;LRP5&#x304A;&#x3088;&#x3073;LRP6&#xFF08;Xlrp5&#x3001;Xlrp6&#xFF09;&#x306E;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x3092;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x3001;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x6642;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x6BCD;&#x4F53;&#x3068;&#x904D;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F8C;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x3001;Xlrp5&#x306F;&#x3001;&#x773C;&#x3001;&#x8133;&#x3001;&#x5F8C;&#x8133;&#x3001;&#x9C13;&#x5F13;&#x3068;&#x5C3E;&#x82BD;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Xlrp6&#x306F;&#x3001;&#x76EE;&#x3068;&#x8033;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x3001;&#x9C13;&#x5F13;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x4E21;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;intersomitic&#x5883;&#x754C;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;LRP&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;LRP5&#x304A;&#x3088;&#x3073;LRP6&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x767A;&#x73FE;

LRP5 &#xBC0F; LRP6 &#xAD6C;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAD00;&#xB828; &#xC544; Wnt &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; co-receptors &#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC778;&#xAC04; lrp5&#xC758; &#xACE8;&#xB2E4;&#xACF5;&#xC99D; pseudoglioma &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC740; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; lrp6&#xC758; &#xC911;&#xB2E8; &#xD558;&#xBA74; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xB97C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB2E4;&#xB978; Wnt &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;. &#xC6B0;&#xB9AC; Xenopus homologues lrp5&#xC640; lrp6&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C; (Xlrp5, Xlrp6) embryogenesis &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC784;&#xC0B0;&#xBD80;&#xC640; &#xD3B8; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB098;&#xC911; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; Xlrp5 &#xB208;, &#xAC1C;, hindbrain, branchial &#xC544;&#xCE58;&#xC640; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xAF43; &#xBD09; &#xC624;&#xB9AC; &#xB05D;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C;&#xB2E4;. Xlrp6 &#xC911;&#xC559; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;, &#xB208;&#xACFC; otic &#xAE30; branchial &#xC544;&#xCE58;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB3C4; intersomitic &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; LRP &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; Wnt &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBCF5;&#xC81C; &#xBC0F; Xenopus lrp5&#xC640; Lrp6 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;.

LRP5 y LRP6 comprenden una subfamilia de receptores de lipoprote&#xED;nas de prote&#xED;nas relacionadas que funcionan como co-receptores para las prote&#xED;nas Wnt. La mutaci&#xF3;n de los derechos humanos LRP5 es responsable del s&#xED;ndrome de la osteoporosis y los trastornos de la seudoglioma LRP6 en ratones provoca efectos similares a la mutaci&#xF3;n de varios genes Wnt diferentes. Hemos clonado hom&#xF3;logos de Xenopus Lrp5 y LRP6 (Xlrp5, Xlrp6) y examin&#xF3; su expresi&#xF3;n durante la embriog&#xE9;nesis. Ambos genes se expresan a trav&#xE9;s de la madre y el ubicuo desarrollo temprano. En etapas posteriores, Xlrp5 se encuentra en el ojo, cerebro anterior, cerebro posterior, arcos branquiales y la punta de la yema de cola. Xlrp6 se expresa a trav&#xE9;s del sistema nervioso central, los arcos branquiales, en el ojo y la ves&#xED;cula &#xF3;tica. Ambos genes se expresan tambi&#xE9;n en el l&#xED;mite intersomitic. Estos resultados sugieren roles para la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de Wnt a trav&#xE9;s de las prote&#xED;nas de la PRL en estos tejidos.

Clonaci&#xF3;n y expresi&#xF3;n de los genes LRP5 y Xenopus LRP6

&#x6536;&#x655B;&#x6269;&#x5C55;&#x884C;&#x4E3A;&#x5BF9;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x4F53;&#x8F74;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#xFF0C;Wnt &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x8868;&#x660E;&#x6536;&#x655B;&#x5EF6;&#x957F;&#x8FD0;&#x52A8;&#x6240;&#x9700;&#xFF0C;&#x4F46;&#x7EC6;&#x80DE;&#x547D;&#x8FD0;&#x4E0E;&#x5F62;&#x6001;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x5F88;&#x5C11;&#x4E86;&#x89E3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x635F;&#x5931; Xnr3 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x901A;&#x8FC7; FGFR1 Xbra &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; eFGF &#x6D3B;&#x52A8;&#x4E0D;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x548C;&#x539F;&#x7164;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7684; Xnr3 &#x5E76;&#x4E0D;&#x5728;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5E73;&#x884C;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E3A;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;-&#x6C1F;&#x6C2F;&#x5316;&#x78B3;&#x86CB;&#x767D; FRL1&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5EFA;&#x8BAE; pro-domain &#x7684; Xnr3 &#x53EF;&#x80FD;&#x9700;&#x8981;&#x4E3A;&#x5176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E; Xnr3 &#x662F;&#x4EA7;&#x5987; betacatenin/XTcf3 &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x5B83;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x521D;&#x59CB;&#x3001; &#x6BCD;&#x7CFB;&#x53D7;&#x63A7;&#xFF0C;&#x5206;&#x914D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#x548C;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x8005;&#x4ECE;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x94FE;&#x63A5;&#x76F4;&#x63A5;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

&#x65B0;&#x578B;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x8282;&#x70B9;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; &#xFF1B;Xnr3 &#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86; FGF &#x53D7;&#x4F53;&#x901A;&#x8FC7;&#x6536;&#x655B;&#x63A8;&#x5E7F;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3002;

Convergent extension behaviour is critical for the formation of the vertebrate body axis. In Xenopus, components of the Wnt signaling pathway have been shown to be required for convergent extension movements but the relationship between cell fate and morphogenesis is little understood. We show by loss of function analysis that Xnr3 activates Xbra expression through FGFR1. We show that eFGF activity is not essential in the pathway, and that dishevelled acts downstream of Xnr3 and not in a parallel pathway. We provide evidence for the involvement of the EGF-CFC protein FRL1, and suggest that the pro-domain of Xnr3 may be required for its activity. Since Xnr3 is a direct target of the maternal betacatenin/XTcf3 signaling pathway, it provides the link between the initial, maternally controlled, allocation of cell fate, and the morphogenetic movements of cells derived from the organizer.

A novel role for a nodal-related protein; Xnr3 regulates convergent extension movements via the FGF receptor.

Comportement extension convergente est cruciale pour la formation de l&#x26;#39;axe du corps des vert&#xE9;br&#xE9;s. En Xenopus, les composants de la voie de signalisation Wnt a &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; que n&#xE9;cessaire pour les mouvements d&#x26;#39;extension convergentes, mais la relation entre le destin des cellules et la morphogen&#xE8;se est peu comprise. Nous montrons par la perte de l&#x26;#39;analyse de fonction que l&#x26;#39;expression Xbra Xnr3 active par le biais FGFR1. Nous montrons que l&#x26;#39;activit&#xE9; eFGF n&#x26;#39;est pas indispensable dans la voie, et que &#xE9;chevel&#xE9;e actes en aval de Xnr3 et non pas dans une voie parall&#xE8;le. Nous apportons des preuves de l&#x26;#39;implication de la prot&#xE9;ine EGF-CFC FRL1, et sugg&#xE8;rent que le domaine de la pro-Xnr3 peut &#xEA;tre n&#xE9;cessaire pour son activit&#xE9;. Depuis Xnr3 est une cible directe de la maternelle betacatenin/XTcf3 voie de signalisation, il assure le lien entre l&#x26;#39;&#xE9;tat initial, la m&#xE8;re contr&#xF4;l&#xE9;e, la r&#xE9;partition du destin cellulaire, et les mouvements morphog&#xE9;n&#xE9;tiques de cellules d&#xE9;riv&#xE9;es de l&#x26;#39;organisateur.

Un nouveau r&#xF4;le pour une prot&#xE9;ine Nodal-connexe; Xnr3 r&#xE9;glemente les mouvements extension convergente via le r&#xE9;cepteur FGF

Eine neue Rolle f&#xFC;r einen Knotenpunkt-related protein; Xnr3 regelt konvergenten Extension Bewegungen &#xFC;ber den FGF-Rezeptor.

Comportamento estensione convergente &egrave; fondamentale per la formazione dell&#39;asse corporeo vertebrati. In Xenopus, componenti della via di segnalazione Wnt hanno dimostrati di essere richiesto per i movimenti di estensione convergente, ma il rapporto tra il destino delle cellule e la morfogenesi &egrave; poco capito. Mostriamo da perdita di analisi di funzione che Xnr3 attiva l&#39;espressione Xbra attraverso FGFR1. Mostriamo che le attivit&agrave; extra non &egrave; essenziale per il percorso e che scomposto agisce a valle di Xnr3 e non in un percorso parallelo. Forniamo prove del coinvolgimento della proteina EGF-CFC FRL1 e suggeriscono che il pro-domain di Xnr3 pu&ograve; essere richiesto per la sua attivit&agrave;. Poich&eacute; Xnr3 &egrave; un bersaglio diretto del betacatenin/XTcf3 materna signaling pathway, che fornisce il collegamento tra l&#39;allocazione iniziale, maternamente controllata, del destino delle cellule e i movimenti morfogenetici di cellule derivate da parte dell&#39;organizzatore.

Un romanzo ruolo per una proteina nodal correlati; Xnr3 regola i movimenti convergenti estensione tramite il recettore FGF.

&#x53CE;&#x6582;&#x4F38;&#x9577;&#x306E;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x4F53;&#x8EF8;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x53CE;&#x6582;&#x4F38;&#x9577;&#x904B;&#x52D5;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x3068;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Xnr3&#x304C;FGFR1&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;Xbra&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x6A5F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;eFGF&#x6D3B;&#x52D5;&#x304C;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x4E0B;&#x6D41;Xnr3&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x4E26;&#x5217;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x884C;&#x70BA;&#x3092;&#x304F;&#x3057;&#x3083;&#x304F;&#x3057;&#x3083;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;EGF-CFC&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;FRL1&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;Xnr3&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; Xnr3&#x306F;&#x6BCD;&#x4F53;betacatenin/XTcf3&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x3001;&#x6BCD;&#x4F53;&#x5236;&#x5FA1;&#x3001;&#x5272;&#x308A;&#x5F53;&#x3066;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E3B;&#x50AC;&#x8005;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x8EE2;&#x79FB;&#x95A2;&#x9023;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;; Xnr3&#x306F;&#x3001;FGF&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x53CE;&#x6582;&#x4F38;&#x9577;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

&#xC9D1;&#xC911; &#xD655;&#xC7A5; &#xD589;&#xB3D9;&#xC740; &#xCC99;&#xCD94; &#xBAB8; &#xCD95; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Xenopus, Wnt &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC9D1;&#xC911; &#xD655;&#xC7A5; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC140; &#xC6B4;&#xBA85;&#xACFC; morphogenesis &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4; &#xC774;&#xD574; &#xC880;. &#xC6B0;&#xB9AC; Xnr3 Xbra &#xC2DD; FGFR1 &#xD1B5;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD568;&#xC218; &#xBD84;&#xC11D;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; eFGF &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xB85C;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8; &#xD750;&#xD2B8;&#xB7EC;&#xC9C4;&#xB41C; &#xD589;&#xC704; &#xD558;&#xB958; xnr3&#xC758; &#xBCD1;&#xB82C; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; FRL1, EGF CFC &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; xnr3&#xC758; pro-domain &#xAC83;&#xC740; &#xADF8; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Xnr3 &#xBAA8;&#xC131; betacatenin/XTcf3 &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C;, &#xC140; &#xC6B4;&#xBA85;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30;, &#xC784;&#xC0B0;&#xBD80; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD560;&#xB2F9; &#xBC0F; &#xC8FC;&#xCD5C;&#xC790; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC140;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4;&#xC801; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB9C1;&#xD06C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC0C1; &#xC774;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;.

&#xAFB8;&#xBC85;&#xAFB8;&#xBC85; &#xC878; &#xAE30; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5ED;&#xD560; Xnr3 FGF &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC9D1;&#xC911; &#xD655;&#xC7A5; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC744; &#xC870;&#xC808;.

Comportamiento de la extensi&#xF3;n convergente es cr&#xED;tico para la formaci&#xF3;n del eje del cuerpo vertebrado. En Xenopus, los componentes de la v&#xED;a de se&#xF1;alizaci&#xF3;n Wnt han demostrado ser necesarios para los movimientos de extensi&#xF3;n convergentes pero la relaci&#xF3;n entre el destino celular y la morfog&#xE9;nesis se entiende poco. Se demuestra por la p&#xE9;rdida de an&#xE1;lisis de la funci&#xF3;n que activa la expresi&#xF3;n Xnr3 Xbra trav&#xE9;s de FGFR1. Se demuestra que la actividad eFGF no es esencial en la v&#xED;a, y que act&#xFA;a dishevelled aguas abajo de Xnr3 y no en una v&#xED;a paralela. Ofrecemos pruebas de la implicaci&#xF3;n de la prote&#xED;na EGF-CFC FRL1, y sugieren que el dominio pro de Xnr3 puedan ser necesarios para su actividad. Desde Xnr3 es un objetivo directo de la madre betacatenin/XTcf3 v&#xED;a de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, que constituye el v&#xED;nculo entre la inicial, la madre controlada, la asignaci&#xF3;n de destino de la c&#xE9;lula, y los movimientos morfogen&#xE9;ticos de las c&#xE9;lulas derivadas de los organizadores.

Un nuevo papel de una prote&#xED;na relacionada con el Nodal; Xnr3 regula los movimientos convergentes de extensi&#xF3;n a trav&#xE9;s del receptor de FGF

&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x751F;&#x6700;&#x65E9;&#x7684;&#x6CBF;&#x88AD;&#x9650;&#x5236;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x4E4B;&#x4E00;&#x662F;&#x521D;&#x7EA7;&#x7684;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x89C4;&#x8303;&#xFF1A; &#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#x3001; &#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x548C;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x3002;&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#xFF0C;&#x53D1;&#x751F;&#x5728; gastrulation &#x4E4B;&#x524D;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x4E3B;&#x89C4;&#x8303;&#x7684;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x548C;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x9700;&#x8981;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; VegT &#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x80DA;&#x5C42;&#x89C4;&#x8303;&#x3002;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709; VegT &#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x6240;&#x6709;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5F62;&#x6210;&#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A; VegT &#x8017;&#x5C3D;&#x690D;&#x7269;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x51C6;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;) &#x884C;&#x4E3A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x6392;&#x5E8F;&#x5316;&#x9A8C;&#x548C; ectopically &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#x65E9;&#x671F;&#x6807;&#x5FD7;&#x3002;&#x8981;&#x6DF1;&#x5165;&#x4E86;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x6307;&#x5B9A;&#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BFB;&#x627E;&#x5019;&#x9009;&#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#x7279;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;ectopically &#x8868;&#x793A; VegT &#x8017;&#x5C3D;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x800C;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E2D;&#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684; LIM &#x540C;&#x6E90;&#x76D2;&#x57FA;&#x56E0; Xlim5&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x9884;&#x671F;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; Xlim5 &#x662F;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x635F;&#x5BB3;&#x6392;&#x5E8F;&#x4ECE;&#x690D;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F46;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x591F; &#xFF08;&#x5728;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x5242;&#x91CF;) &#x8BF1;&#x4F7F;&#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;Xlim5 &#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x690D;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0D;&#x6070;&#x5F53;&#x5730;&#x5411;&#x5176;&#x4ED6;&#x80DA;&#x5C42;&#x9694;&#x79BB;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8868;&#x793A;&#x540E;&#x671F;&#x5206;&#x5316;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#xFF0C;&#x80DA;&#x5C42;&#x3002;&#x6784;&#x9020;&#x51FD;&#x6570;&#x4F7F;&#x7528;&#x952F;&#x9F7F;&#x7684;&#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x7684; Xlim5 &#x6216; morpholino &#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x6291;&#x5236;&#x4F7F;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x6216;&#x795E;&#x7ECF;&#x8936;&#x76B1;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x5EF6;&#x8BEF;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x5206;&#x522B;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x663E;&#x8457;&#x5F71;&#x54CD;&#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684; Xlim5 &#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x4E13;&#x95E8;&#x89C4;&#x8303;&#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x9274;&#x522B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x884C;&#x4E3A;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE; LIM homeodomain &#x86CB;&#x767D;&#x8D28; Xlim5 &#x53EF;&#x8C03;&#x8282;&#x5FAE;&#x5206;&#x7C98;&#x63A5;&#x6027;&#x80FD;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

One of the earliest lineage restriction events in embryogenesis is the specification of the primary germ layers: ectoderm, mesoderm and endoderm. In Xenopus, germ layer specification occurs prior to gastrulation and requires the transcription factor VegT both for the cell-autonomous specification of endoderm and the generation of mesoderm-inducing signals. In the absence of VegT, ectoderm is formed in all regions of the embryo. In this work, we show that VegT-depleted vegetal cells (prospective endoderm) behave like animal cells in sorting assays and ectopically express early markers of ectoderm. To gain insight into how ectoderm is specified, we looked for candidate ectoderm-specific genes that are ectopically expressed in VegT-depleted embryos, and examined the role of one of these, the LIM homeobox gene Xlim5, in ectoderm development. We show that overexpression of Xlim5 in prospective endoderm cells is sufficient to impair sorting of animal cells from vegetal cells but is not sufficient (at similar doses) to induce ectoderm-specific genes. In whole embryos, Xlim5 causes vegetal cells to segregate inappropriately to other germ layers and express late differentiation markers of that germ layer. Inhibition of Xlim5 function using an Engrailed repressor construct or a morpholino oligonucleotide causes loss of animal cell adhesion or delay in neural fold morphogenesis, respectively, without significantly affecting early ectoderm gene expression. Taken together, our results provide evidence that a primary role for Xlim5 is to specifically regulate differential cell adhesion behaviour of the ectoderm.

The Xenopus LIM-homeodomain protein Xlim5 regulates the differential adhesion properties of early ectoderm cells.

Un des premiers &#xE9;v&#xE9;nements de restriction dans la lign&#xE9;e embryogen&#xE8;se est la sp&#xE9;cification des couches germinales primaires: l&#x26;#39;ectoderme, m&#xE9;soderme et l&#x26;#39;endoderme. Dans Xenopus, Sp&#xE9;cification de la couche de germe se produit avant la gastrulation et n&#xE9;cessite l&#x26;#39;Vegt facteur de transcription &#xE0; la fois pour la sp&#xE9;cification des cellules-autonome de l&#x26;#39;endoderme et la g&#xE9;n&#xE9;ration de signaux d&#x26;#39;induction du m&#xE9;soderme. En l&#x26;#39;absence de Vegt, l&#x26;#39;ectoderme est form&#xE9; dans toutes les r&#xE9;gions de l&#x26;#39;embryon. Dans ce travail, nous montrons que Vegt appauvries cellules v&#xE9;g&#xE9;tales (endoderme prospective) se comportent comme des cellules animales dans le tri des dosages et ectopique exprimer des marqueurs pr&#xE9;coces de l&#x26;#39;ectoderme. Pour mieux comprendre comment l&#x26;#39;ectoderme est sp&#xE9;cifi&#xE9;, nous avons cherch&#xE9; des candidats ectoderme des g&#xE8;nes sp&#xE9;cifiques qui sont exprim&#xE9;s de mani&#xE8;re ectopique dans Vegt appauvries embryons, et a examin&#xE9; le r&#xF4;le d&#x26;#39;un d&#x26;#39;entre eux, la MFR g&#xE8;ne hom&#xE9;otique Xlim5, dans le d&#xE9;veloppement ectoderme. Nous montrons que la surexpression de Xlim5 dans les cellules endodermiques potentiels est suffisante pour affecter le tri des cellules animales &#xE0; partir de cellules v&#xE9;g&#xE9;tales, mais n&#x26;#39;est pas suffisante (&#xE0; des doses similaires) pour induire l&#x26;#39;ectoderme des g&#xE8;nes sp&#xE9;cifiques. Dans les embryons entiers, Xlim5 provoque cellules v&#xE9;g&#xE9;tales de s&#xE9;parer de fa&#xE7;on inappropri&#xE9;e aux couches germinales d&#x26;#39;autres et expriment des marqueurs de diff&#xE9;renciation fin de cette couche de germe. Inhibition de la fonction Xlim5 utilisant une construction Engrailed r&#xE9;presseur ou un oligonucl&#xE9;otide morpholino provoque une perte de l&#x26;#39;adh&#xE9;rence cellulaire animale ou de retard dans la morphogen&#xE8;se pliage neuronal, respectivement, sans affecter sensiblement l&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne pr&#xE9;coce ectoderme. Pris dans leur ensemble, nos r&#xE9;sultats fournissent des preuves que le r&#xF4;le principal pour Xlim5 consiste pr&#xE9;cis&#xE9;ment &#xE0; r&#xE9;glementer le comportement des cellules adh&#xE9;sion diff&#xE9;rentielle de l&#x26;#39;ectoderme.

Le Xenopus LIM-hom&#xE9;odomaine prot&#xE9;ines Xlim5 R&#xE9;glemente les propri&#xE9;t&#xE9;s d&#x26;#39;adh&#xE9;rence diff&#xE9;rentielle de cellules ectodermiques premiers

Das Xenopus-LIM-Protein Hom&#xF6;odom&#xE4;ne Xlim5 regelt die Differential Hafteigenschaften der fr&#xFC;hen Ectodermzellen.

Uno dei primi eventi restrizione lignaggio in embriogenesi &egrave; la specifica degli strati germinali primarie: ectoderma, mesoderma ed endoderma. In Xenopus, germe layer specification si verifica prima della gastrulazione e richiede il fattore di trascrizione VegT entrambi per la specifica cella autonoma dell&#39;endoderma e la generazione di segnali che inducono mesoderma. In assenza di VegT, ectoderma &egrave; formata in tutte le regioni dell&#39;embrione. In questo lavoro, mostriamo che cellule vegetali impoverito VegT (endoderma futuro) si comportano come cellule animali nell&#39;ordinamento dosaggi ed ectopically express marker precoce dell&#39;ectoderma. Per ottenere l&#39;intuizione come ectoderma &egrave; specificato, abbiamo cercato di geni specifici dell&#39;ectoderma che ectopically sono espressi in embrioni VegT impoverito e ha esaminato il ruolo di uno di questi, il gene homeobox LIM Xlim5, nello sviluppo di ectoderma. Mostriamo che sovraespressione di Xlim5 nelle cellule endoderma prospettico &egrave; sufficiente ad alterare l&#39;ordinamento delle cellule animali da cellule vegetali, ma non &egrave; sufficiente (a dosi simili) per indurre l&#39;ectoderma specifici geni. In interi embrioni, Xlim5 induce le cellule vegetali a segregare impropriamente ad altri strati germinali ed esprimono marcatori di differenziazione tardiva di quello strato di germe. L&#39;inibizione della funzione utilizzando un repressore Engrailed costruisce Xlim5 o un oligonucleotide oligonucleotides provoca perdita di adesione delle cellule animali o ritardo nella morfogenesi piega neurale, rispettivamente, senza alterare significativamente precoce espressione del gene ectoderma. Presi insieme, i nostri risultati forniscono prove che un ruolo primario per Xlim5 &egrave; specificamente regolare comportamento adesione differenziale delle cellule dell&#39;ectoderma.

La proteina di Xenopus LIM-homeodomain Xlim5 regola le propriet&agrave; di adesione differenziale delle prime cellule ectoderma.

&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x306E;&#x65E9;&#x3044;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x80DA;&#x82BD;&#x5C64;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3067;&#x3059;&#xFF1A;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x3001;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x3068;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x3002;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x82BD;&#x5C64;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x539F;&#x8178;&#x9665;&#x5165;&#x524D;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x81EA;&#x5F8B;&#x7684;&#x306A;&#x4ED5;&#x69D8;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;VegT&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; VegT&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x3001;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x306F;&#x80DA;&#x306E;&#x5168;&#x3066;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x200B;&#x200B;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;VegT&#x6B20;&#x4E4F;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#xFF09;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x969B;&#x306B;&#x52D5;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x632F;&#x308B;&#x821E;&#x3046;&#x3068;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x304C;&#x6307;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x7570;&#x6240;VegT&#x67AF;&#x6E07;&#x80DA;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3001;LIM&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;Xlim5&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5019;&#x88DC;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x63A2;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;Xlim5&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x52D5;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9078;&#x5225;&#x304C;&#x640D;&#x306A;&#x308F;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#xFF08;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x7528;&#x91CF;&#x3067;&#x306F;&#xFF09;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x80DA;&#x3067;&#x3001;Xlim5&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x80DA;&#x82BD;&#x5C64;&#x306B;&#x4E0D;&#x9069;&#x5207;&#x306B;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x80DA;&#x82BD;&#x5C64;&#x306E;&#x5F8C;&#x671F;&#x5206;&#x5316;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x690D;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7E01;&#x3092;&#x30AE;&#x30B6;&#x30AE;&#x30B6;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x69CB;&#x9020;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30E2;&#x30EB;&#x30DB;&#x30EA;&#x30CE;&#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x7528;&#x3044;&#x3066;Xlim5&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x4E0E;&#x3048;&#x305A;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x500D;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x52D5;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x3084;&#x9045;&#x5EF6;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;Xlim5&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x5DEE;&#x52D5;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x6319;&#x52D5;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;LIM-&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;Xlim5&#x306F;&#x521D;&#x671F;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5DEE;&#x63A5;&#x7740;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

Embryogenesis&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xD608;&#xD1B5; &#xC81C;&#xD55C; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xC8FC;&#xC694; &#xC138;&#xADE0; &#xCE35;&#xC758; &#xC0AC;&#xC591;: ectoderm, mesoderm &#xBC0F; endoderm. Xenopus, &#xC138;&#xADE0; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4; &#xC0AC;&#xC591; gastrulation &#xC804;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558; &#xACE0; endoderm &#xC140; &#xC790;&#xCE58; &#xC0AC;&#xC591; &#xBC0F; mesoderm &#xC720;&#xB3C4; &#xC2E0;&#xD638; &#xC0DD;&#xC131;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778; VegT &#xBAA8;&#xB450; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. VegT &#xBD80;&#xC7AC; ectoderm &#xD0DC;&#xC544;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC791;&#xD488;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; VegT &#xACE0;&#xAC08; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC131; &#xC140; (&#xC7A0;&#xC7AC; endoderm) &#xC815;&#xB82C; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC; &#xCC98;&#xB7FC; &#xD589;&#xB3D9; &#xD558; &#xACE0; ectopically &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; ectoderm&#xC758; &#xC870;&#xAE30; &#xD45C;&#xC2DD; &#xD45C;&#xC2DC;. Ectoderm&#xB97C; &#xC9C0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC5BB;&#xC73C;&#xB824;&#xBA74;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; ectopically &#xBC30;&#xC544; VegT &#xACE0;&#xAC08;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xACE0; &#xC784; homeobox &#xC720;&#xC804;&#xC790; Xlim5, ectoderm &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC774;&#xB4E4; &#xC77C; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xD6C4;&#xBCF4; ectoderm &#xD2B9;&#xC815; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; endoderm &#xC140;&#xC5D0; xlim5&#xC758; &#xD574;&#xB2F9; overexpression &#xD45C;&#xC2DC; &#xC190;&#xC0C1; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC815;&#xB82C; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; ectoderm &#xD2B9;&#xC815; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; (&#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xCCB4; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; Xlim5 &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xADE0; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;&#xB97C; &#xBD80;&#xC801;&#xC808; &#xD558; &#xAC8C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xC138;&#xADE0; &#xCE35;&#xC758; &#xB2A6;&#xC740; &#xBD84;&#xD654; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xD45C;&#xD604; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC131; &#xC140;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Engrailed &#xC9C4;&#xC555;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; Xlim5 &#xB610;&#xB294; morpholino oligonucleotide&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xCD08;&#xAE30; ectoderm &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xAC01;&#xAC01; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xB610;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBC30; morphogenesis &#xC9C0;&#xC5F0;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; xlim5&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC8FC;&#xC694; &#xC5ED;&#xD560;&#xC740; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; ectoderm&#xC758; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xD589;&#xB3D9;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;.

Xenopus &#xC784; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Xlim5 &#xCD08;&#xAE30; ectoderm &#xC140;&#xC758; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC811;&#xCC29; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xC870;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Uno de los eventos m&#xE1;s antiguos del linaje de restricci&#xF3;n en la embriog&#xE9;nesis es la especificaci&#xF3;n de las capas germinales primarias: ectodermo, mesodermo y endodermo. En Xenopus, la especificaci&#xF3;n de germen de capa se produce antes de la gastrulaci&#xF3;n y requiere que el factor de transcripci&#xF3;n vEGT tanto para la especificaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas aut&#xF3;noma de endodermo y la generaci&#xF3;n de se&#xF1;ales que inducen mesodermo. En ausencia de vEGT, ectodermo se forma en todas las regiones del embri&#xF3;n. En este trabajo, mostramos que Vegt-agotadas las c&#xE9;lulas vegetales (endodermo prospectiva) se comportan como las c&#xE9;lulas animales en la clasificaci&#xF3;n de los ensayos y la ect&#xF3;pica expresar marcadores tempranos de ectodermo. Para tener una idea de c&#xF3;mo ectodermo se especifica, buscamos candidatos espec&#xED;ficos ectodermo-genes que se expresan en ect&#xF3;pica Vegt depleci&#xF3;n de embriones, y se examina el papel de uno de ellos, el gen homeobox LIM Xlim5, en el desarrollo del ectodermo. Nos muestran que la sobreexpresi&#xF3;n de Xlim5 en las c&#xE9;lulas del endodermo posibles es suficiente para poner en peligro la clasificaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas animales a partir de c&#xE9;lulas vegetales, pero no es suficiente (en dosis similares) para inducir los genes espec&#xED;ficos ectodermo. En embriones en su conjunto, hace que las c&#xE9;lulas vegetales Xlim5 para separar indebidamente a otras capas germinales y expresan marcadores de diferenciaci&#xF3;n a finales de esa capa germinal. La inhibici&#xF3;n de la funci&#xF3;n utilizando un Xlim5 construcci&#xF3;n Engrailed represor o un oligonucle&#xF3;tido morfolino causa la p&#xE9;rdida de adherencia de c&#xE9;lulas animales o la demora en la morfog&#xE9;nesis neural veces, respectivamente, sin afectar significativamente la expresi&#xF3;n del gen temprano ectodermo. En conjunto, nuestros resultados proporcionan evidencia de que un papel principal para Xlim5 tiene por objeto regular espec&#xED;ficamente el comportamiento diferencial de c&#xE9;lulas adhesi&#xF3;n del ectodermo.

La Xenopus LIM-homeodominio Xlim5 Regula las propiedades de adhesi&#xF3;n diferencial de las c&#xE9;lulas del ectodermo primeros

&#x5728;&#x722A;&#x87FE;&#x3001; &#x4EA7;&#x5987;&#x5206;&#x6CCC;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x65E9;&#x671F;&#x9635;&#x5217;&#x4E8B;&#x4EF6; &#xFF08;&#x5982;&#x4EB2;&#x8F74;&#x548C;&#x4E3B;&#x80DA;&#x5C42;&#x89C4;&#x683C;&#x7684;&#x86CB;&#x76F4;&#x63A5;&#x5B58;&#x50A8;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x5728;&#x8868;&#x8FBE;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4E2D;&#x4EE5;&#x627E;&#x51FA;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x4EA7;&#x5987;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5B64;&#x7ACB;&#x88AB;&#x622A;&#x65AD;&#x7684; cDNA &#x4E3A;&#x4EA7;&#x5987; Zic2 (tZic2)&#xFF0C;&#x950C;&#x6307;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684; tZic2 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7F3A;&#x4E4F; N &#x7AEF;&#x533A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4FDD;&#x7559;&#x7684;&#x950C;&#x6307;&#x57DF;&#x3002;&#x5F53;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;tZic2 &#x6291;&#x5236;&#x5934;&#x548C;&#x8F74;&#x5411;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x548C;&#x963B;&#x6B62;&#x8BF1;&#x53D1;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x57FA;&#x56E0;&#x5168;&#x957F; Zic2 &#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x4EA7;&#x5987; Zic2 &#x4ECE;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#xFF0C;&#x6D88;&#x8017;&#x9020;&#x6210; exogastrulation &#x524D;, &#x8DEF;&#x622A;&#x65AD;&#x548C;&#x8F74;&#x5411;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x5B55;&#x4EA7;&#x5987; Zic2 &#x635F;&#x5931;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6301;&#x4E45;&#x6027;&#x548C;&#x589E;&#x52A0;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x8282;&#x70B9;-&#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; &#xFF08;Xnr&#xFF09;&#xFF0C;&#x9664;&#x4E86; Xnr4&#xFF0C;&#x548C;&#x603B;&#x4F53;&#x589E;&#x52A0;&#x8282;&#x70B9;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x6CE8;&#x5C04;&#x7ED3;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#xFF0C;Cerberus-&#x77ED;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11; Zic2 &#x8017;&#x5C3D;&#x80DA;&#x80CE;&#x5934;&#x90E8;&#x548C;&#x8F74;&#x5411;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;Zic2 &#x6D88;&#x8017;&#x4E0D;&#x80FD;&#x5230;&#x53E6;&#x5916;&#x67AF;&#x7AED;&#x7684; VegT&#x3001; T &#x57DF;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C; Xnr &#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x8FD8;&#x539F; Xnr &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x4EA7;&#x5987; Zic2 Xnr &#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x65E9;&#x671F;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E2D;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;ZIC2 &#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x53D1;&#x5E03; &#xFF08;HPE&#xFF09;&#xFF0C;&#x5728;&#x5927;&#x8111;&#x534A;&#x7403;&#x5206;&#x79BB;&#xFF0C;&#x4E25;&#x91CD;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x52A0;&#x5F3A;&#x7684;&#x5EFA;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0; Nodal &#x76F8;&#x5173;&#x6D3B;&#x52A8;&#x662F; HPE &#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;

&#x4EA7;&#x5987;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE; Zic2 &#x6D88;&#x6781;&#x8C03;&#x8282;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x524D;&#x540E;&#x56FE;&#x6848; Nodal &#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

During the development of Xenopus laevis, maternal mRNAs and proteins stored in the egg direct early patterning events such as the specification of the dorsoventral axis and primary germ layers. In an expression screen to identify maternal factors important for early development, we isolated a truncated cDNA for maternal Zic2 (tZic2), encoding a zinc-finger transcription factor. The predicted tZic2 protein lacked the N-terminal region, but retained the zinc-finger domain. When expressed in embryos, tZic2 inhibited head and axial development, and blocked the ability of full-length Zic2 to induce neural crest genes. Depletion of maternal Zic2 from oocytes, using antisense oligonucleotides, caused exogastrulation, anterior truncations and axial defects. We show that loss of maternal Zic2 results in persistent and increased expression of Xenopus nodal-related (Xnr) genes, except for Xnr4, and overall increased Nodal signaling. Injection of a Nodal antagonist, Cerberus-short, reduced the severity of head and axial defects in Zic2-depleted embryos. Depletion of Zic2 could not restore Xnr expression to embryos additionally depleted of VegT, a T-domain transcription factor and an activator of Xnr gene transcription. Taken together, our results suggest a role for maternal Zic2 in the suppression of Xnr genes in early development. ZIC2 is mutated in human holoprosencephaly (HPE), a severe defect in brain hemisphere separation, and these results strengthen the suggestion that increased Nodal-related activity is a cause of HPE.

Maternal Xenopus Zic2 negatively regulates Nodal-related gene expression during anteroposterior patterning.

Au cours du d&#xE9;veloppement de Xenopus laevis, des ARNm maternels et des prot&#xE9;ines stock&#xE9;es dans les &#x153;ufs directs des &#xE9;v&#xE9;nements de structuration d&#xE9;but telles que la sp&#xE9;cification de l&#x26;#39;axe dorso-ventral et les couches germinales primaires. Dans un &#xE9;cran d&#x26;#39;expression d&#x26;#39;identifier les facteurs maternels importants pour le d&#xE9;veloppement au d&#xE9;but, nous avons isol&#xE9; un ADNc tronqu&#xE9; de la sant&#xE9; maternelle ZIC2 (tZic2), codant pour un facteur de transcription &#xE0; doigt de zinc. Le pr&#xE9;dit tZic2 prot&#xE9;ines manquait la r&#xE9;gion N-terminale, mais a conserv&#xE9; le nom de domaine &#xE0; doigt de zinc. Lorsqu&#x26;#39;il est exprim&#xE9; dans les embryons, tZic2 inhib&#xE9; la t&#xEA;te et du d&#xE9;veloppement axial, et a bloqu&#xE9; la capacit&#xE9; de pleine longueur ZIC2 pour induire les g&#xE8;nes de la cr&#xEA;te neurale. L&#x26;#39;&#xE9;puisement des ZIC2 maternelle &#xE0; partir d&#x26;#39;ovocytes, en utilisant des oligonucl&#xE9;otides antisens, exogastrulation caus&#xE9;, troncatures ant&#xE9;rieures et les d&#xE9;fauts axiaux. Nous montrons que la perte de la m&#xE8;re ZIC2 r&#xE9;sultats dans l&#x26;#39;expression persistante et accrue de Xenopus nodal-connexes (XNR) g&#xE8;nes, sauf pour Xnr4, et dans l&#x26;#39;ensemble augment&#xE9; de signalisation Nodal. L&#x26;#39;injection d&#x26;#39;un antagoniste de Nodal, Cerberus-court, r&#xE9;duit la gravit&#xE9; des d&#xE9;fauts de la t&#xEA;te et axiale dans ZIC2 appauvries embryons. L&#x26;#39;&#xE9;puisement des ZIC2 ne pouvait pas restaurer XNR expression pour les embryons de plus appauvri de Vegt, un facteur de transcription T-domaine et un activateur de la transcription du g&#xE8;ne XNR. Pris dans leur ensemble, nos r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent un r&#xF4;le pour ZIC2 maternelle &#xE0; la r&#xE9;pression des g&#xE8;nes dans le d&#xE9;veloppement pr&#xE9;coce XNR. ZIC2 est mut&#xE9; chez l&#x26;#39;homme holoprosenc&#xE9;phalie (HPE), un d&#xE9;faut grave dans la s&#xE9;paration h&#xE9;misph&#xE8;re c&#xE9;r&#xE9;bral, et ces r&#xE9;sultats renforcent l&#x26;#39;id&#xE9;e que l&#x26;#39;augmentation de l&#x26;#39;activit&#xE9; li&#xE9;e Nodal est une cause de HPE.

Maternelle Xenopus ZIC2 r&#xE9;gule n&#xE9;gativement l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique Nodal li&#xE9;e Pendant Mod&#xE9;lisation ant&#xE9;ro-post&#xE9;rieure

Bei der Entwicklung von Xenopus Laevis, m&uuml;tterliche mRNAs und Proteinen, die in das Ei direkt fr&uuml;h Musterung Ereignisse wie die Angabe der dorsoventral Achse und prim&auml;re Keim Schichten gespeichert. Ein Ausdruck Bildschirm m&uuml;tterliche Faktoren wichtig f&uuml;r die fr&uuml;he Entwicklung identifizieren wir eine abgeschnittene cDNA f&uuml;r m&uuml;tterlichen Zic2 isoliert (tZic2), einen Transkriptionsfaktor Zinkfinger Codierung. Das vorhergesagte tZic2 Protein fehlte die N-terminalen Region, aber behielt die Zinkfinger Dom&auml;ne. Wenn Embryonen ausgedr&uuml;ckt, tZic2 Kopf und axiale Entwicklung gehemmt und blockiert die F&auml;higkeit in Zic2, Neuralleiste Genen induzieren. Ersch&ouml;pfung der m&uuml;tterlichen Zic2 von Eizellen, mit antisense Oligonucleotides, verursacht Exogastrulation, anterior K&uuml;rzungen und axiale M&auml;ngel. Wir zeigen, dass Verlust der m&uuml;tterlichen Zic2 persistent und erh&ouml;hte Expression von Xenopus nodal-bezogene (Xnr) Gene, mit Ausnahme der Xnr4, und insgesamt Nodal signalisieren erh&ouml;ht. Injektion von ein Nodal Antagonist, Cerberus-kurz, reduziert die Schwere der Kopf und axiale Defekte in Zic2-abgereichertem Embryonen. Ersch&ouml;pfung der Zic2 wiederhergestellt Xnr Ausdruck Embryonen zus&auml;tzlich ausgelaugt verrottet, einen Transkriptionsfaktor T-Dom&auml;ne und Aktivator Xnr gen Transkription nicht. Zusammen genommen, weisen unsere Ergebnisse eine Rolle f&uuml;r m&uuml;tterliche Zic2 an der Niederschlagung des Xnr Gene in der fr&uuml;hen Entwicklung. ZIC2 ist mutiert in menschliches Holoprosenzephalie (HPE), einen schweren Defekt im Gehirn-Hemisph&auml;re-Trennung, und diese Ergebnisse st&auml;rken die Anregung, die erh&ouml;hte Nodal-bezogene Aktivit&auml;t ist eine Ursache f&uuml;r HPE.

M&uuml;tterliche Xenopus Zic2 regelt negativ Nodal-bezogene Genexpression w&auml;hrend der anteroposterioren Musterung.

Durante lo sviluppo di Xenopus laevis, proteine e materna mRNAs memorizzati nell&#39;uovo eventi patterning primi diretti come la specifica l&#39;asse dorsoventral e strati germinali primarie. In uno schermo di espressione per identificare fattori materni importante per lo sviluppo precoce, abbiamo isolato un cDNA troncato per Zic2 materna (tZic2), codifica per un fattore di trascrizione zinc-finger. La proteina tZic2 predetto mancava la regione N-terminale, ma mantenne il dominio zinc-finger. Quando espresso in embrioni, tZic2 inibito testa e sviluppo assiale e bloccato la capacit&agrave; di indurre la cresta neurale geni Zic2 full-length. Deplezione di materna Zic2 da ovociti, utilizzando oligonucleotidi antisenso, causato exogastrulation, difetti assiali e troncamenti anteriori. Mostriamo che perdita di Zic2 materna provoca persistenti e aumentata espressione di Xenopus nodale correlati (Xnr) geni, ad eccezione di Xnr4 e complessivo aumentato nodale di segnalazione. Iniezione di un antagonista nodale, Cerberus-breve, riduce la gravit&agrave; dei difetti assiali e testa in embrioni Zic2-esaurito. Deplezione di Zic2 potrebbe non ripristinare Xnr espressione embrioni ulteriormente impoveriti VegT, un fattore di trascrizione T-dominio e un attivatore della trascrizione del gene Xnr. Presi insieme, i nostri risultati suggeriscono un ruolo per la materna Zic2 nella soppressione dei geni Xnr nello sviluppo iniziale. ZIC2 &egrave; mutato in umano oloprosencefalia (HPE), un grave difetto nella separazione di emisfero del cervello, e questi risultati rafforzare il suggerimento che aumentato Nodal relative attivit&agrave; &egrave; delle cause della HPE.

Materna Xenopus Zic2 regola negativamente l&#39;espressione di Nodal-related gene durante anteroposteriore patterning.

&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x3001;&#x6BCD;&#x6027;&#x306E;mRNA&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x80CC;&#x8179;&#x8EF8;&#x3068;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x80DA;&#x82BD;&#x5C64;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5375;&#x76F4;&#x63A5;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x683C;&#x7D0D;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6BCD;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5F0F;&#x306E;&#x753B;&#x9762;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B8;&#x30F3;&#x30AF;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x6BCD;&#x6027;Zic2&#xFF08;tZic2&#xFF09;&#x306E;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;cDNA&#x3092;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x3002; tZic2&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;N&#x672B;&#x7AEF;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x30B8;&#x30F3;&#x30AF;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x3066;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x80DA;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3001;tZic2&#x982D;&#x3068;&#x8EF8;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x767A;&#x5C55;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;Zic2&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x305F;exogastrulation&#x3001;&#x524D;&#x65B9;&#x306E;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x3068;&#x8EF8;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x6BCD;&#x4F53;Zic2&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Xnr4&#x3092;&#x9664;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x7BC0;&#x95A2;&#x9023;&#xFF08;Xnr&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6C38;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x767A;&#x73FE;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x6BCD;&#x4F53;Zic2&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;Nodal&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x7BC0;&#x70B9;&#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x306E;&#x6CE8;&#x5165;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30FC;&#x30D9;&#x30E9;&#x30B9;&#xB7;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x30C8;&#x3001;Zic2&#x67AF;&#x6E07;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x982D;&#x90E8;&#x3068;&#x8EF8;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x91CD;&#x75C7;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002; Zic2&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;VegT&#x3001;T-&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;Xnr&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x67AF;&#x6E07;&#x80DA;&#x306B;Xnr&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Xnr&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x6BCD;&#x4F53;Zic2&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; ZIC2&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x5168;&#x524D;&#x8133;&#x75C7;&#xFF08;HPE&#xFF09;&#x3001;&#x8133;&#x534A;&#x7403;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x306B;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x3067;&#x5909;&#x7570;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x8EE2;&#x79FB;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;&#x6D3B;&#x52D5;&#x304C;HPE&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x63D0;&#x6848;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6BCD;&#x89AA;&#x306E;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;Zic2&#x306B;&#x60AA;&#x5F71;&#x97FF;&#x524D;&#x5F8C;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x8EE2;&#x79FB;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

Xenopus laevis, &#xBAA8;&#xC131; mRNAs &#xC77C;&#xCC0D; dorsoventral &#xCD95; &#xBC0F; &#xC8FC;&#xC694; &#xC138;&#xADE0; &#xCE35;&#xC758; &#xC0AC;&#xC591; &#xB4F1;&#xC758; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xACC4;&#xB780; &#xC9C1;&#xC811;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC800;&#xC7A5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC0B0; &#xBAA8; zic2&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC798;&#xB9B0;&#xB41C; cDNA &#xACE0;&#xB9BD; &#xBAA8;&#xC131; &#xC694;&#xC778;&#xC740; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD; &#xC2A4;&#xD06C;&#xB9B0; (tZic2), &#xC544;&#xC5F0; &#xC190;&#xAC00;&#xB77D; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;. &#xC608;&#xCE21;&#xB41C; tZic2 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; N &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xBD80;&#xC871; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC544;&#xC5F0; &#xC190;&#xAC00;&#xB77D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC30;&#xC544;&#xB97C; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; tZic2 &#xBA38;&#xB9AC;&#xC640; &#xCD95; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC800;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; zic2&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8;. &#xACE0;&#xAC08; &#xC13C;&#xC2A4; oligonucleotides &#xC0AC;&#xC6A9; oocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xC131; zic2&#xC758; exogastrulation, &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xC798;&#xB9BC; &#xBC0F; &#xCD95; &#xACB0;&#xD568; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBAA8;&#xC790; zic2&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC; &#xC601;&#xAD6C; Xenopus &#xAFB8;&#xBC85;&#xAFB8;&#xBC85; &#xC878; &#xAE30; &#xAD00;&#xB828; (Xnr) &#xC720;&#xC804;&#xC790;, Xnr4, &#xC81C;&#xC678; &#xD558; &#xACE0; &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xAC00; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xAFB8;&#xBC85;&#xAFB8;&#xBC85; &#xC878; &#xAE30; &#xC2E0;&#xD638; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC0AC;&#xCD9C; &#xAFB8;&#xBC85;&#xAFB8;&#xBC85; &#xC878; &#xAE30; &#xC801;&#xC5D0; &#xAC8C;&#xC758; &#xCF08;&#xBCA0;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC9E7;&#xC740; Zic2 &#xACE0;&#xAC08; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xBA38;&#xB9AC;&#xC640; &#xCD95; &#xACB0;&#xD568;&#xC758; &#xC2EC;&#xAC01;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C;. Zic2&#xC758; &#xC18C;&#xBAA8; &#xB610;&#xD55C; VegT, T &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xC640; Xnr &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xAE30;&#xC758; &#xACE0;&#xAC08; &#xBC30;&#xC544;&#xB97C; Xnr &#xC2DD;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xBAA8;&#xC131; Zic2 &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0;&#xC11C; Xnr &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAD8C;&#xD574; &#xB4DC;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;. ZIC2 &#xC778;&#xAC04; holoprosencephaly (HPE) &#xB1CC; &#xBC18;&#xAD6C; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xACB0;&#xD568;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC0F; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC15;&#xD654; Nodal &#xAD00;&#xB828; &#xC99D;&#xAC00; &#xC81C;&#xC548; &#xD65C;&#xB3D9; HPE&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xBAA8;&#xC131; Xenopus Zic2 anteroposterior &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; Nodal &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC870;&#xC808;.

Durante el desarrollo de Xenopus laevis, mRNAs maternos y prote&#xED;nas almacenadas en los huevos directos acontecimientos tempranos de modelado tales como la especificaci&#xF3;n del eje dorsoventral y capas germinales primarias. En una pantalla de expresi&#xF3;n para identificar los factores maternos importantes para el desarrollo temprano, hemos aislado un ADNc truncado por la madre ZIC2 (tZic2), que codifica un factor de transcripci&#xF3;n de zinc-finger. Las previsiones de tZic2 prote&#xED;nas carec&#xED;an de la regi&#xF3;n N-terminal, pero conserv&#xF3; el dominio zinc-finger. Cuando se expresa en los embriones, tZic2 inhibe la cabeza y el desarrollo axial, y se bloquea la capacidad de larga duraci&#xF3;n ZIC2 de inducir los genes de la cresta neural. El agotamiento de los ZIC2 materna a partir de ovocitos, utilizando oligonucle&#xF3;tidos antisentido, exogastrulation causado, truncamientos anteriores y defectos axiales. Se demuestra que la p&#xE9;rdida de la madre ZIC2 resultados en la expresi&#xF3;n persistente y creciente de Xenopus nodales relacionados (RNX) los genes, a excepci&#xF3;n de Xnr4, y un aumento general de se&#xF1;alizaci&#xF3;n nodal. La inyecci&#xF3;n de un antagonista de la Nodal, Cerberus-corto, redujo la severidad de los defectos de cabeza y axial en ZIC2-agotado embriones. El agotamiento de los ZIC2 no pod&#xED;a restaurar la RNX expresi&#xF3;n a los embriones, adem&#xE1;s, agotado de Vegt, un factor de transcripci&#xF3;n T-dominio y un activador de la transcripci&#xF3;n de genes RNX. En conjunto, nuestros resultados sugieren un papel de ZIC2 materna en la supresi&#xF3;n de los genes de la RNX en el desarrollo temprano. ZIC2 se encuentra mutado en humanos holoprosencefalia (HPE), un defecto grave en la separaci&#xF3;n de hemisferio cerebral, y estos resultados refuerzan la sugerencia de que el aumento de la actividad relacionada con nodal es una causa de HPE.

Materna ZIC2 Xenopus regula negativamente nodal relacionados con la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica durante Patrones anteroposterior

&#x5DE6;-&#x53F3;&#x8F74;&#x7684;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x6B63;&#x5E38;&#x5668;&#x5B98;&#x5F62;&#x6001;&#x4E0E;&#x529F;&#x80FD;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x7ECF;&#x4FE1;&#x53F7;&#x548C;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x529F;&#x80FD;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x541E;&#x566C;&#x6CE1; (KV) &#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684;&#x4E00;&#x4FA7;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD; KV &#x548C;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x5F62;&#x6210;&#x4E4B;&#x524D;&#x7684; KV &#x524D;&#x4F53; &#xFF08;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x80CC;&#x5148;&#x884C;&#x8005;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x8D37;&#xFF09;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x5730;&#x533A;&#x5185;&#x751F;&#x7ECF;&#x91CA;&#x653E;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x7ECF;&#x91CA;&#x653E;&#x6270;&#x4E71;&#x672C;&#x521D;&#x901A;&#x64CD;&#x4F5C;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x4F53;&#x8282;&#x9636;&#x6BB5;&#x65E9;&#x671F;&#x7684; DFC &#x89C4;&#x8303;&#xFF0C;&#x4F46;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E2D;&#x6539;&#x53D8; DFC &#x8FC1;&#x79FB;&#x6216;&#x5728; tailbud &#x4E2D;&#x7684;&#x51DD;&#x805A;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E2D;&#x65AD;&#x7684; KV &#x5F62;&#x6210;&#x8DDF;&#x53CC;&#x8FB9;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4E0D;&#x5BF9;&#x79F0;&#xFF0C;&#x5E76;&#x968F;&#x673A;&#x5668;&#x5B98;&#x4E00;&#x4FA7;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4F5C;&#x4E3A; Ca(2+) &#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x8FDE;&#x73AF;&#x6291;&#x5236;&#x548C;&#x8BC1;&#x660E;&#x7684; DFC &#x533A;&#x5185;&#x7ECF;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x6216;&#x7279;&#x5B9A; DFC &#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x8FDE;&#x73AF;&#x662F;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x6539;&#x53D8;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x4E00;&#x4FA7;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x7684;&#x4EE5;&#x524D;&#x672A;&#x77E5;&#x7684; DFC &#x6837;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EBA;&#x53E3;&#x548C;&#x8BC1;&#x660E;&#x7C7B;&#x4F3C; Ca(2+) &#x654F;&#x611F;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x4E00;&#x6837;&#xFF0C;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x7ECF;&#x64CD;&#x7EB5;&#x91CA;&#x653E;&#x5F02;&#x4F4D;&#x6838;&#x8FDE;&#x73AF;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x6539;&#x53D8;&#x4E00;&#x4FA7;&#x3002;&#x603B;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x7ECF;&#x8981;&#x6C42;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x548C;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x7684; DFC &#x6837;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

&#x9499;&#x901A;&#x80CC;&#x5148;&#x9A71;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x6297;&#x8FDE;&#x73AF;&#x548C;&#x6539;&#x53D8;&#x5DE6;-&#x53F3;&#x9635;&#x5217;&#x3002;

Establishment of the left-right axis is essential for normal organ morphogenesis and function. Ca(2+) signaling and cilia function in the zebrafish Kuppfer's Vesicle (KV) have been implicated in laterality. Here we describe an endogenous Ca(2+) release event in the region of the KV precursors (dorsal forerunner cells, DFCs), prior to KV and cilia formation. Manipulation of Ca(2+) release to disrupt this early flux does not impact early DFC specification, but results in altered DFC migration or cohesion in the tailbud at somite stages. This leads to disruption of KV formation followed by bilateral expression of asymmetrical genes, and randomized organ laterality. We identify beta-catenin inhibition as a Ca(2+)-signaling target and demonstrate that localized loss of Ca(2+) within the DFC region or DFC-specific activation of beta-catenin is sufficient to alter laterality in zebrafish. We identify a previously unknown DFC-like cell population in Xenopus and demonstrate a similar Ca(2+)-sensitive stage. As in zebrafish, manipulation of Ca(2+) release results in ectopic nuclear beta-catenin and altered laterality. Overall, our data support a conserved early Ca(2+) requirement in DFC-like cell function in zebrafish and Xenopus.

Calcium fluxes in dorsal forerunner cells antagonize beta-catenin and alter left-right patterning.

Mise en place de l&#x26;#39;axe gauche-droite est essentiel pour la morphogen&#xE8;se d&#x26;#39;organes et la fonction normales. Ca (2 +) de signalisation et la fonction des cils dans les v&#xE9;sicules de la Kuppfer poisson-z&#xE8;bre de (KV) ont &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9;s dans la lat&#xE9;ralit&#xE9;. Nous d&#xE9;crivons ici un d&#xE9;veloppement endog&#xE8;ne Ca (2 +) &#xE9;v&#xE9;nement de rel&#xE2;chement dans la r&#xE9;gion des pr&#xE9;curseurs des cellules pr&#xE9;curseurs (KV dorsales, SFD), avant de KV et la formation de cils. Manipulation de Ca (2 +) la lib&#xE9;ration de perturber ce flux d&#xE9;but n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;incidence sp&#xE9;cification pr&#xE9;coce DFC, mais les r&#xE9;sultats dans la migration DFC alt&#xE9;r&#xE9; ou la coh&#xE9;sion dans le bourgeon caudal &#xE0; des stades de somites. Cela conduit &#xE0; une perturbation de la formation suivie par l&#x26;#39;expression KV bilat&#xE9;rale de g&#xE8;nes asym&#xE9;triques, et de la lat&#xE9;ralit&#xE9; organe randomis&#xE9;e. Nous identifions la b&#xEA;ta-cat&#xE9;nine inhibition en Ca (2 +)-cible et de signalisation d&#xE9;montrer que la perte localis&#xE9;e de Ca (2 +) dans la r&#xE9;gion DFC ou DFC activation sp&#xE9;cifique de b&#xEA;ta-cat&#xE9;nine est suffisant pour modifier la lat&#xE9;ralit&#xE9; chez le poisson z&#xE8;bre. Nous identifions une population de cellules jusque-l&#xE0; inconnue DFC-comme chez le X&#xE9;nope et d&#xE9;montrer une semblable Ca (2 +) sensible &#xE0; la sc&#xE8;ne. Comme chez le poisson z&#xE8;bre, la manipulation de Ca (2 +) des r&#xE9;sultats de lib&#xE9;ration dans la lat&#xE9;ralit&#xE9; ectopique b&#xEA;ta-cat&#xE9;nine et une alt&#xE9;ration de nucl&#xE9;aire. Dans l&#x26;#39;ensemble, nos donn&#xE9;es confirment conserv&#xE9; Ca d&#xE9;but (2 +) exigence dans la fonction des cellules PLC-like chez le poisson z&#xE8;bre et x&#xE9;nope.

Les flux de calcium dans les cellules Forerunner dorsaux antagoniser B&#xEA;ta-cat&#xE9;nine et Alter gauche-droite Mod&#xE9;lisation

Einrichtung der Links-Rechts-Achse ist f&uuml;r normale Orgel Morphogenese und Funktion. Ca(2+) Signalisierung und Zilien-Funktion in der Zebrafisch Kuppfer Vesikel (KV) haben in Lateralit&auml;ts verwickelt worden. Hier beschreiben wir eine endogene Ca(2+) Release-Ereignis in der Region der KV-Vorl&auml;ufer (dorsal Vorl&auml;ufer Zellen, DFCs), vor der KV und Zilien Bildung. Manipulation von Ca(2+) Version dieser fr&uuml;hen Flussmittel zu st&ouml;ren hat keinen Einfluss auf fr&uuml;hen DFC-Spezifikation, aber f&uuml;hrt zu ver&auml;nderten DFC-Migration oder Zusammenhalt in der Tailbud in Somiten Phasen. Dies f&uuml;hrt zur St&ouml;rung der KV-Formation gefolgt von bilateralen Expression von Genen, die asymmetrische und randomisiert Orgel Lateralit&auml;ts. Wir identifizieren Beta-Catenin-Hemmung als Ziel Ca(2+)-Signalisierung und zeigen, dass lokalisierte Verlust des Ca(2+) innerhalb der DFC-Region oder DFC-spezifische Aktivierung des Beta-Catenin Lateralit&auml;ts im Zebrafisch ver&auml;ndern ausreicht. Wir identifizieren eine bisher unbekannten DFC-wie Zellpopulation in Xenopus und eine vergleichbare Ca(2+)-Sensitive Phase zu demonstrieren. Wie im Zebrafisch Manipulation von Ca(2+) lassen Sie Ergebnisse in ektopische nukleare Beta-Catenin und Lateralit&auml;ts ver&auml;ndert. Insgesamt st&uuml;tzen unsere Daten eine konservierte fr&uuml;he Ca(2+)-Anforderung im DFC-wie Zelle-Funktion im Zebrafisch und Xenopus.

Kalzium Str&ouml;me in den dorsalen Vorl&auml;ufer Zellen ver&auml;rgern Beta-Catenin und Links-rechts-Muster ver&auml;ndern.

Istituzione dell&#39;asse sinistra-destra &egrave; essenziale per la funzione e la morfogenesi organo normale. Funzione di segnalazione e le ciglia CA(2+) in vescicola di Kuppfer di zebrafish (KV) sono stati implicati in lateralit&agrave;. Qui descriviamo un evento di rilascio Ca(2+) endogeno nella regione dei precursori KV (cellule del precursore dorsale, profondit&agrave;), prima formazione KV e le ciglia. Manipolazione del Ca(2+) rilascio di interrompere questo flusso precoce non impatto precoce DFC specifica, ma risultati in migrazione DFC alterati o coesione nella tailbud in fasi somite. Questo conduce alla rottura del KV formazione seguirono da bilaterale espressione dei geni asimmetrici e randomizzati lateralit&agrave; organo. Individuiamo l&#39;inibizione della beta-catenina come destinazione Ca(2+)-segnalazione e dimostrare che la perdita localizzata di Ca(2+) all&#39;interno della regione di DFC o attivazione DFC-specifica della beta-catenina &egrave; sufficiente per alterare la lateralit&agrave; in zebrafish. Individuiamo una popolazione precedentemente sconosciuto DFC-come cella di Xenopus e dimostrare una simile fase Ca(2+)-sensibili. Come in zebrafish, manipolazione di Ca(2+) rilasciare risultati in beta-catenina nucleare ectopica e alterato la lateralit&agrave;. Nel complesso, i nostri dati supportano un requisito di Ca(2+) primo conservato nella funzione cella DFC-come in zebrafish e Xenopus.

Flussi di calcio nelle cellule del precursore dorsale antagonizzare beta-catenina e alterano patterning di sinistra-destra.

&#x5DE6;&#x53F3;&#x8EF8;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x81D3;&#x5668;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;Kuppfer&#x306E;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3068;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x6A5F;&#x80FD;&#xFF08;KV&#xFF09;&#x304C;&#x5DE6;&#x53F3;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x524D;&#x306E;KV&#x3068;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x3001;KV&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#xFF08;&#x80CC;&#x5148;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;DFC&#x306E;&#xFF09;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Ca&#x306E;&#x64CD;&#x4F5C;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3059;&#x308B;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x521D;&#x671F;&#x306E;DFC&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x4F53;&#x7BC0;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;tailbud&#x306B;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;DFC&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3084;&#x51DD;&#x96C6;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x884C;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x4E8C;&#x56FD;&#x9593;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7121;&#x4F5C;&#x70BA;&#x81D3;&#x5668;&#x5DE6;&#x53F3;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;KV&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x5D29;&#x58CA;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;Ca&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x3B2;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;&#x6291;&#x5236;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;DFC&#x5730;&#x57DF;&#x5185;&#x306E;Ca&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x640D;&#x5931;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3B2;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;DFC-&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x5DE6;&#x53F3;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;DFC&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x7279;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x6BB5;&#x968E;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x7570;&#x6838;&#x306E;&#x3B2;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;&#x3068;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5DE6;&#x53F3;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3001;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;DFC&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x65E9;&#x671F;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x8981;&#x4EF6;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x80CC;&#x30D5;&#x30A9;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x3B2;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;&#x306B;&#x62EE;&#x6297;&#x3057;&#x3001;&#x5DE6;&#x304B;&#x3089;&#x53F3;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;

&#xC88C;&#xC6B0; &#xCD95;&#xC758; &#xC124;&#xB9BD; &#xC815;&#xC0C1; &#xC7A5;&#xAE30; morphogenesis &#xBC0F; &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ca(2+) &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xC18D;&#xB208;&#xC379; &#xD568;&#xC218; zebrafish Kuppfer &#xAE30; (KV) &#xCE58;&#xB7EC;&#xC57C;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; KV &#xBC0F; &#xC18D;&#xB208;&#xC379; &#xD615;&#xC131; &#xC774;&#xC804; KV &#xC120;&#xAD6C;&#xC790; (DFCs &#xC9C0; &#xC804;&#xC2E0;&#xC778; &#xC140;) &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD; Ca(2+) &#xCD9C;&#xC2DC; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD08;&#xAE30; &#xC720;&#xB3D9;&#xC774; &#xBC29;&#xD574;&#xB97C; Ca(2+) &#xC790;&#xB8CC;&#xC758; &#xC870;&#xC791; somite &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD08;&#xAE30; DFC &#xC0AC;&#xC591; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; DFC &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB610;&#xB294; &#xC751;&#xC9D1;&#xB825; &#xC788;&#xB294; tailbud &#xC601;&#xD5A5; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. KV &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC7A5;&#xC560;&#xB97C;&#xC774; &#xB9AC;&#xB4DC; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xB300;&#xCE6D; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC30D;&#xBB34; &#xC2DD; &#xBC0F; &#xC7A5;&#xAE30; &#xCE58;&#xB7EC;&#xC57C; &#xBB34;&#xC791;&#xC704;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Ca(2+) &#xC2E0;&#xD638; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCA0;&#xD0C0;-catenin &#xC800;&#xD574;&#xB97C; &#xD30C;&#xC545; &#xD558; &#xACE0; DFC &#xC9C0;&#xC5ED; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; ca(2+)&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; &#xC190;&#xC2E4; &#xB610;&#xB294; &#xBCA0;&#xD0C0;-catenin&#xC758; DFC &#xD2B9;&#xC815; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; zebrafish&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE58;&#xB7EC;&#xC57C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Xenopus&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C0;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; DFC &#xAC19;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; Ca(2+) &#xAD6C;&#xBD84; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Zebrafish&#xB85C; ca(2+)&#xC758; &#xC870;&#xC791; &#xACB0;&#xACFC; &#xC18C;&#xC131; &#xD575; &#xBCA0;&#xD0C0;-catenin&#xC5D0; &#xB193;&#xACE0; &#xCE58;&#xB7EC;&#xC57C; &#xBCC0;&#xACBD;. &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; zebrafish Xenopus&#xC5D0; DFC &#xAC19;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xCD08;&#xAE30; Ca(2+) &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D; &#xC9C0;&#xC6D0;.

&#xB4F1; &#xC804;&#xAD6C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE7C;&#xC298; &#xC6A9; &#xBCA0;&#xD0C0;-catenin &#xB300;&#xD56D;&#xD558; &#xACE0; &#xC88C;&#xC6B0; &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xB97C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Establecimiento del eje izquierda-derecha es esencial para la morfog&#xE9;nesis de &#xF3;rganos y la funci&#xF3;n normal. Ca (2 +) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n y la funci&#xF3;n de los cilios en la ves&#xED;cula de Kupffer del pez cebra (KV) se han implicado en la lateralidad. Aqu&#xED; describimos una end&#xF3;gena Ca (2 +) evento de lanzamiento en la regi&#xF3;n de los precursores de las c&#xE9;lulas (KV dorsales precursor, CFD), antes de KV y la formaci&#xF3;n de los cilios. La manipulaci&#xF3;n de Ca (2 +) la liberaci&#xF3;n de interrumpir este flujo principios de no especificaci&#xF3;n de los primeros impactos DFC, pero los resultados en la alteraci&#xF3;n de la migraci&#xF3;n DFC ni a la cohesi&#xF3;n en el tailbud en las etapas somite. Esto conduce a la disrupci&#xF3;n de la formaci&#xF3;n KV seguido por la expresi&#xF3;n de genes bilaterales asim&#xE9;tricas, y lateralidad &#xF3;rgano aleatorio. Identificamos la inhibici&#xF3;n de la beta-catenina como Ca (2 +) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n de destino y demostrar que la p&#xE9;rdida localizada de Ca (2 +) en la regi&#xF3;n de DFC o DFC espec&#xED;fico de activaci&#xF3;n de la beta-catenina es suficiente para alterar la lateralidad en el pez cebra. Se identific&#xF3; una previamente desconocida DFC-como poblaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas en Xenopus y demuestran una similar Ca (2 +)-sensible etapa. Al igual que en el pez cebra, la manipulaci&#xF3;n de Ca (2 +) en los resultados de liberaci&#xF3;n ect&#xF3;pica lateralidad nuclear de beta-catenina y alterado. En general, nuestros datos apoyan una conservadas Ca principios de (2 +) en la exigencia de la funci&#xF3;n celular DFC-al igual que en el pez cebra y Xenopus.

Los flujos de calcio en c&#xE9;lulas precursoras dorsales antagonizar Beta-catenina y Alter izquierda-derecha con patr&#xF3;n

&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#xFF0C;&#x4EA7;&#x5987;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; VegT &#x662F;&#x5FC5;&#x8981;&#x548C;&#x8DB3;&#x591F;&#x542F;&#x52A8;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8282;&#x70B9;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x65E9;&#x671F;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#x7684; VegT &#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x4EA7;&#x5987;&#x529F;&#x80FD;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5B55;&#x4EA7;&#x5987;&#x7684; homeoprotein&#xFF0C;Tgif1&#xFF0C;VegT &#x62EE;&#x6297;&#x548C;&#x524D;&#x540E;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D88;&#x6781;&#x8C03;&#x8282;&#x8282;&#x70B9;&#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B50;&#x96C6;&#x9635;&#x5217;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x6838;&#x5FC3;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;Tgif1 &#x7684;&#x67AF;&#x7AED;&#x5BFC;&#x81F4;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684; anteriorization &#x548C;&#x8282;&#x70B9; paralogues nr5 nr6 &#x7684;&#x4E0A;&#x8C03;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;Tgif1 &#x6291;&#x5236; nr5 &#x7531; VegT &#x9700;&#x8981; C &#x7EC8;&#x7AEF; Sin3 corepressor &#x4EA4;&#x4E92;&#x57DF;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;Tgif1 &#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684;&#x8F6C;&#x5316;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;-&beta; (TGFbeta) &#x548C;&#x7EF4;&#x7532;&#x9178;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684; corepression &#x4E2D;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; Tgif1 &#x4E0D;&#x4F1A;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x59A8;&#x788D;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65E9;&#x671F;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x786E;&#x5B9A;&#x63A7;&#x5236;&#x8282;&#x70B9;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E3A; Tgif1 &#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6D1E;&#x5BDF; Tgif1 &#x51FD;&#x6570;&#x548C;&#x63A7;&#x5236; VegT &#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x4EA7;&#x5987; Tgif1 &#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86;&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x7684;&#x8282;&#x70B9;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

In Xenopus, the maternal transcription factor VegT is necessary and sufficient to initiate the expression of nodal-related genes, which are central to many aspects of early development. However, little is known about regulation of VegT activity. Using maternal loss-of-function experiments, we show that the maternal homeoprotein, Tgif1, antagonizes VegT and plays a central role in anteroposterior patterning by negatively regulating a subset of nodal-related genes. Depletion of Tgif1 causes the anteriorization of embryos and the up-regulation of nodal paralogues nr5 and nr6. Furthermore, Tgif1 inhibits activation of nr5 by VegT in a manner that requires a C-terminal Sin3 corepressor-interacting domain. Tgif1 has been implicated in the transcriptional corepression of transforming growth factor-beta (TGFbeta) and retinoid signaling. However, we show that Tgif1 does not inhibit these pathways in early development. These results identify an essential role for Tgif1 in the control of nodal expression and provide insight into Tgif1 function and mechanisms controlling VegT activity.

Maternal Tgif1 regulates nodal gene expression in Xenopus.

En Xenopus, la transcription Vegt maternelle facteur est n&#xE9;cessaire et suffisante pour initier l&#x26;#39;expression de g&#xE8;nes li&#xE9;s &#xE0; nodale, qui sont au c&#x153;ur de nombreux aspects du d&#xE9;veloppement pr&#xE9;coce. Cependant, on sait peu sur la r&#xE9;glementation de l&#x26;#39;activit&#xE9; Vegt. Utilisation de la m&#xE8;re de perte de fonction des exp&#xE9;riences, nous montrons que l&#x26;#39;hom&#xE9;oprot&#xE9;ine maternelle, Tgif1, antagonise Vegt et joue un r&#xF4;le central dans la structuration ant&#xE9;ro-post&#xE9;rieur en r&#xE9;gulant n&#xE9;gativement un sous-ensemble de g&#xE8;nes li&#xE9;s &#xE0; nodale. L&#x26;#39;&#xE9;puisement des Tgif1 provoque l&#x26;#39;ant&#xE9;riorisation d&#x26;#39;embryons et de la r&#xE9;gulation &#xE0; la hausse des paralogues nodaux NR5 et NR6. En outre, Tgif1 inhibe l&#x26;#39;activation d&#x26;#39;nr5 par Vegt d&#x26;#39;une mani&#xE8;re qui n&#xE9;cessite une extr&#xE9;mit&#xE9; C-terminale Sin3 cor&#xE9;presseur interagissant domaine. Tgif1 a &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9; dans la transcription de corepression facteur de croissance transformant b&#xEA;ta (TGFbeta) et la signalisation des r&#xE9;tino&#xEF;des. Cependant, nous montrons que Tgif1 n&#x26;#39;inhibe pas ces voies dans le d&#xE9;veloppement pr&#xE9;coce. Ces r&#xE9;sultats mettent en &#xE9;vidence un r&#xF4;le essentiel pour Tgif1 dans le contr&#xF4;le de l&#x26;#39;expression nodal et donner un aper&#xE7;u de Tgif1 fonction et les m&#xE9;canismes contr&#xF4;lant l&#x26;#39;activit&#xE9; Vegt.

Tgif1 maternelle r&#xE9;gule l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique chez Xenopus Nodal

In Xenopus ist die m&uuml;tterliche &Uuml;bertragungfaktor verrottet notwendig und ausreichend, um den Ausdruck der nodal-bezogenen Gene, zu initiieren, die viele Aspekte der fr&uuml;hen Entwicklung im Mittelpunkt stehen. &Uuml;ber Regelung der verrottet T&auml;tigkeit ist jedoch wenig bekannt. Mit m&uuml;tterlichen Verlust der Funktion Experimente, wir zeigen, dass die m&uuml;tterlichen Homeoprotein, Tgif1, antagonizes verrottet und spielt eine zentrale Rolle im anteroposterioren Musterung durch negativ auf eine Teilmenge der nodal-bezogenen Gene regulieren. Ersch&ouml;pfung der Tgif1 bewirkt, dass die Anteriorization von Embryonen und der bis-Regulierung des nodal Paralogues nr5 und nr6. Dar&uuml;ber hinaus hemmt Tgif1 Aktivierung von nr5 von verrottet in einer Weise, die eine C-terminale Sin3 Corepressor-Interaktion-Domain ben&ouml;tigt. Tgif1 hat in die transkriptionelle Corepression der Transformation von Wachstumsfaktor-Beta (TGFbeta) und Retinoid Signalisierung verwickelt. Wir zeigen jedoch, dass Tgif1 nicht diese Pfade in der fr&uuml;hen Entwicklung hemmen wird. Diese Ergebnisse eine wesentliche Rolle bei der Kontrolle der nodal Ausdruck f&uuml;r Tgif1 zu identifizieren und einen Einblick in die Tgif1-Funktion und Mechanismen verrottet Aktivit&auml;t steuern.

M&uuml;tterlichen Tgif1 regelt nodal Genexpression in Xenopus.

In Xenopus, il fattore di trascrizione materna VegT &egrave; necessario e sufficiente per avviare l&#39;espressione di geni correlati a nodale, che sono al centro di molti aspetti dello sviluppo precoce. Tuttavia, poco &egrave; noto sulla regolamentazione dell&#39;attivit&agrave; VegT. Tramite esperimenti di perdita della funzione materni, ci mostrano che la materna homeoprotein, Tgif1, antagonizza VegT e svolge un ruolo centrale in anteroposteriore creazione regolando negativamente un sottoinsieme dei geni correlati a nodale. Deplezione di Tgif1 provoca la anteriorization degli embrioni e la up-regolazione di nodale paralogues nr5 e nr6. Inoltre, Tgif1 inibisce la attivazione di nr5 da VegT in un modo che richiede un dominio C-terminale Sin3 corepressor interagenti. Tgif1 &egrave; stato implicato nella corepression transcriptional di trasformare growth factor-beta (TGFbeta) e retinoidi di segnalazione. Tuttavia, ci mostrano che Tgif1 non inibire questi percorsi nello sviluppo iniziale. Questi risultati identificano un ruolo essenziale per Tgif1 nel controllo dell&#39;espressione nodali e forniscono informazioni in funzione Tgif1 e meccanismi di controllo attivit&agrave; VegT.

Tgif1 materna regola l&#39;espressione genica nodale in Xenopus.

&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6BCD;&#x6027;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;VegT&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x65E9;&#x671F;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x8EE2;&#x79FB;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5C11;&#x3057;&#x306F;VegT&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x6BCD;&#x4F53;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x55AA;&#x5931;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6BCD;&#x4F53;homeoprotein&#x3001;Tgif1&#x306F;&#x3001;VegT&#x306B;&#x62EE;&#x6297;&#x3057;&#x3001;&#x8CA0;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x524D;&#x5F8C;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Tgif1&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x306F;&#x80DA;&#x306E;anteriorization&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30ED;&#x30B0;NR5&#x3068;NR6&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;Tgif1&#x306F;&#x3001;C&#x672B;&#x7AEF;SIN3&#x30B3;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;VegT&#x3067;NR5&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3002; Tgif1&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;-&#x3B2;&#xFF08;TGFbeta&#xFF09;&#x3068;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x5909;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;corepression&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Tgif1&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x8EE2;&#x79FB;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;Tgif1&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;Tgif1&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;VegT&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6BCD;&#x6027;Tgif1&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x8EE2;&#x79FB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

Xenopus, &#xBAA8;&#xC131; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; VegT &#xD544;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xCE21;&#xBA74;&#xC740; &#xAFB8;&#xBC85;&#xAFB8;&#xBC85; &#xC878; &#xAE30; &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC57D;&#xAC04; VegT &#xD65C;&#xB3D9; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xC131; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC190;&#xC2E4; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBAA8;&#xC131; homeoprotein Tgif1, VegT &#xBC18;&#xAC10; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xACE0; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xAFB8;&#xBC85;&#xAFB8;&#xBC85; &#xC878; &#xAE30; &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xC5EC; &#xD328;&#xD134;&#xD654; anteroposterior&#xC5D0; &#xC911;&#xC2EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Tgif1&#xC758; &#xACE0;&#xAC08; &#xD558;&#xBA74; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; anteriorization&#xC640; &#xAFB8;&#xBC85;&#xAFB8;&#xBC85; &#xC878; &#xAE30; paralogues nr5 &#xBC0F; nr6&#xC758; &#xC5C5; &#xADDC;&#xC81C;. &#xB610;&#xD55C;, Tgif1 C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; Sin3 corepressor &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; VegT &#xD558; &#xC5EC; nr5&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;. Tgif1 &#xBCC0;&#xD615; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;-&#xBCA0;&#xD0C0; (TGFbeta)&#xC640; retinoid &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC758; transcriptional corepression&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Tgif1 &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACBD;&#xB85C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAFB8;&#xBC85;&#xAFB8;&#xBC85; &#xC878; &#xAE30; &#xC2DD;&#xC758; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; tgif1&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; Tgif1 &#xAE30;&#xB2A5;&#xACFC; VegT &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;.

&#xBAA8;&#xC131; Tgif1 Xenopus&#xC5D0;&#xC11C; &#xAFB8;&#xBC85;&#xAFB8;&#xBC85; &#xC878; &#xAE30; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC870;&#xC808;.

En Xenopus, el factor de transcripci&#xF3;n Vegt materna es necesaria y suficiente para iniciar la expresi&#xF3;n de genes relacionados con el nodo, que son fundamentales para muchos aspectos del desarrollo temprano. Sin embargo, poco se sabe acerca de la regulaci&#xF3;n de la actividad Vegt. Uso de la madre la p&#xE9;rdida de la funci&#xF3;n de los experimentos, se muestra que la homeoprotein materna, Tgif1, antagoniza Vegt y desempe&#xF1;a un papel central en los patrones anteroposterior, regulando negativamente un subconjunto de genes relacionados con el nodo. El agotamiento de los Tgif1 hace que la anteriorizaci&#xF3;n de embriones y la regulaci&#xF3;n de paralogues nodales NR5 y NR6. Adem&#xE1;s, inhibe la activaci&#xF3;n de Tgif1 NR5 por vEGT de una manera que requiere un C-terminal Sin3 correpresor-que interact&#xFA;an dominio. Tgif1 ha sido implicado en la corepression transcripcional de factor de crecimiento transformante-beta (TGFbeta) y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de retinoides. Sin embargo, nos muestran que Tgif1 no inhibe estas v&#xED;as en el desarrollo temprano. Estos resultados identifican un papel esencial para Tgif1 en el control de la expresi&#xF3;n ganglionar y dar una idea de Tgif1 funci&#xF3;n y mecanismos de control de la actividad Vegt.

Tgif1 materna regula la expresi&#xF3;n del gen nodal en Xenopus

&#x65E9;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x6CBF;&#x88AD;&#x548C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5F62;&#x6001; blastula &#x8868;&#x9762;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E3B;&#x8981;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x76AE; (PSE) &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#x5404;&#x4E0D;&#x76F8;&#x540C;&#xFF0C;&#x548C;&#x76EE;&#x524D;&#x5C1A;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#xFF0C;&#x662F;&#x5426;&#x6267;&#x653F;&#x7684;&#x5375;&#x88C2;&#x7403; PSE &#x6CBF;&#x88AD;&#x5230;&#x9694;&#x79BB;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x5747;&#x53D7;&#x5230;&#x4FDD;&#x80B2;&#x3002;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x63A7;&#x56E0;&#x5B50; 6 (IRF6) &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x662F;&#x4E0E;&#x4E2D;&#x533B;&#x8BC1;&#x5019;&#x53CA;&#x975E;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x578B;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x5507;&#x88C2;&#x548C;&#x816D;&#x88C2;&#xFF0C;&#x7B26;&#x5408; Irf6 &#x7684;&#x53E3;&#x8154;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x9F20;&#x6807; Irf6 &#x9488;&#x5BF9; null &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x80DA;&#x80CE;&#x663E;&#x793A;&#x5F02;&#x5E38;&#x5206;&#x5316;&#x53E3;&#x8154;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CA;&#x76AE;&#x80A4;&#x3002;&#x5728;&#x8868;&#x8FBE;&#x5E8F;&#x5217;&#x6807;&#x7B7E;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; (&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;) &#x548C;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE; &#xFF08;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x7684;&#x86D9;) &#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x5408;&#x5B50; irf6 &#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x8BB8;&#x591A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#x7684;&#x63A8;&#x5B9A;&#x7684; PSE &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#x5E76;&#x4E14;&#x4EA7;&#x5987; irf6 &#x6210;&#x7EE9;&#x5355; blastula &#x9636;&#x6BB5;&#x5B58;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x6270;&#x4E71; irf6 &#x8A8A;&#x672C;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x4E0E;&#x6CE8;&#x5C04;&#x5F15;&#x8D77;&#x5BF9;&#x53D1;&#x5C55;&#x5F88;&#x5C11;&#x6216;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x6CE8;&#x5C04;&#x7684; RNA &#x7F16;&#x7801;&#x6307;&#x8BA4;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F; Irf6 &#x9020;&#x6210;&#x5916;&#x5305;&#x902E;&#x6355;&#xFF0C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7279;&#x6027; EVL&#xFF0C;&#x635F;&#x5931;&#x548C;&#x7834;&#x88C2;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x540E;&#x671F;&#x539F;&#x80A0;&#x3002;&#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x7684;&#x6D88;&#x6781; Irf6 &#x7834;&#x574F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x4E3B;&#x65F6;&#x5C1A; EVL &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; Irf6 &#x7FFB;&#x8BD1;&#x5728;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x672A;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x65E9;&#x671F;&#x53D1;&#x5C55;&#x4FBF;&#x5DF2;&#x8DB3;&#x591F;&#x3002;&#x652F;&#x6301;&#x4EA7;&#x5987; Irf6 &#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x5341;.&#x87FE;&#x80DA;&#x80CE;&#x5B55;&#x4EA7;&#x5987; irf6 &#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x7684;&#x67AF;&#x7AED;&#x5BFC;&#x81F4; gastrulation &#x7F3A;&#x9677;&#x548C;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7834;&#x88C2;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E3A;&#x5341;.&#x87FE;&#x548C; D.&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E2D;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x6BCD;&#x7CFB;&#x7F16;&#x7801; Irf6 &#x5C55;&#x73B0;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4E0A;&#x76AE;&#x6784;&#x6210;&#xFF0C;&#x7528;&#x6765;&#x63A2;&#x7D22; Irf6 &#x8C03;&#x63A7;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x6A21;&#x578B;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;

&#x4EA7;&#x5987;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x63A7;&#x56E0;&#x5B50; 6 &#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x4E3B;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x5E8F;&#x5217;&#x6807;&#x7B7E;&#x548C;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x80DA;&#x80CE;&#x5206;&#x5316;&#x3002;

Early in the development of animal embryos, superficial cells of the blastula form a distinct lineage and adopt an epithelial morphology. In different animals, the fate of these primary superficial epithelial (PSE) cells varies, and it is unclear whether pathways governing segregation of blastomeres into the PSE lineage are conserved. Mutations in the gene encoding Interferon Regulatory Factor 6 (IRF6) are associated with syndromic and non-syndromic forms of cleft lip and palate, consistent with a role for Irf6 in development of oral epithelia, and mouse Irf6 targeted null mutant embryos display abnormal differentiation of oral epithelia and skin. In Danio rerio (zebrafish) and Xenopus laevis (African clawed frog) embryos, zygotic irf6 transcripts are present in many epithelial tissues including the presumptive PSE cells and maternal irf6 transcripts are present throughout all cells at the blastula stage. Injection of antisense oligonucleotides with ability to disrupt translation of irf6 transcripts caused little or no effect on development. By contrast, injection of RNA encoding a putative dominant negative Irf6 caused epiboly arrest, loss of gene expression characteristic of the EVL, and rupture of the embryo at late gastrula stage. The dominant negative Irf6 disrupted EVL gene expression in a cell autonomous fashion. These results suggest that Irf6 translated in the oocyte or unfertilized egg suffices for early development. Supporting the importance of maternal Irf6, we show that depletion of maternal irf6 transcripts in X. laevis embryos leads to gastrulation defects and rupture of the superficial epithelium. These experiments reveal a conserved role for maternally-encoded Irf6 in differentiation of a simple epithelium in X. laevis and D. rerio. This epithelium constitutes a novel model tissue in which to explore the Irf6 regulatory pathway.

Maternal Interferon Regulatory Factor 6 is required for the differentiation of primary superficial epithelia in Danio and Xenopus embryos.

T&#xF4;t dans le d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;embryons d&#x26;#39;animaux, les cellules superficielles de la forme blastula une lign&#xE9;e distincte et adoptent une morphologie &#xE9;pith&#xE9;liale. Chez les animaux diff&#xE9;rents, le sort de ces primaires &#xE9;pith&#xE9;liales superficielles (PSE) des cellules varie, et il est difficile de savoir si les voies r&#xE9;gissant la s&#xE9;paration des blastom&#xE8;res dans la lign&#xE9;e PSE sont conserv&#xE9;es. Des mutations dans le g&#xE8;ne du facteur interf&#xE9;ron encodage r&#xE9;glementaire 6 (IRF6) sont associ&#xE9;s &#xE0; des formes syndromiques et non syndromiques de fente labio-palatine, en accord avec un r&#xF4;le &#xE0; jouer dans le d&#xE9;veloppement de IRF6 orale &#xE9;pith&#xE9;liums, et de la souris IRF6 cibl&#xE9;es nulles embryons mutants afficher une diff&#xE9;renciation anormale des &#xE9;pith&#xE9;lium oral et la peau. En Danio rerio (poisson z&#xE8;bre) et Xenopus laevis (Afrique grenouille &#xE0; pattes) embryons, zygotiques IRF6 transcriptions sont pr&#xE9;sents dans de nombreux tissus &#xE9;pith&#xE9;liaux, y compris les cellules pr&#xE9;sum&#xE9;es d&#x26;#39;EPS et maternels IRF6 transcriptions sont pr&#xE9;sents dans toutes les cellules au stade blastula. Injection d&#x26;#39;oligonucl&#xE9;otides antisens avec la capacit&#xE9; de perturber la traduction de IRF6 transcriptions caus&#xE9; peu ou aucun effet sur le d&#xE9;veloppement. En revanche, l&#x26;#39;injection d&#x26;#39;ARN codant une putative IRF6 dominant n&#xE9;gatif caus&#xE9; &#xE9;pibolie arrestation, la perte de la caract&#xE9;ristique de l&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne de l&#x26;#39;EVL, et la rupture de l&#x26;#39;embryon au stade gastrula tardive. Le IRF6 dominant n&#xE9;gatif perturb&#xE9; l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes dans un mode EVL cellule autonome. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que IRF6 traduit dans l&#x26;#39;ovocyte non f&#xE9;cond&#xE9; ou suffit d&#x26;#39;&#x153;ufs pour le d&#xE9;veloppement pr&#xE9;coce. Soutenir l&#x26;#39;importance de IRF6 maternelle, nous montrons que l&#x26;#39;&#xE9;puisement des maternelles IRF6 transcriptions dans les embryons de X. laevis conduit &#xE0; des d&#xE9;fauts de gastrulation et la rupture de l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium superficiel. Ces exp&#xE9;riences r&#xE9;v&#xE8;lent un r&#xF4;le conserv&#xE9;e pour la m&#xE8;re-cod&#xE9; IRF6 dans la diff&#xE9;renciation des un &#xE9;pith&#xE9;lium simple dans X. laevis et D. rerio. Cet &#xE9;pith&#xE9;lium constitue un tissu nouveau mod&#xE8;le dans lequel d&#x26;#39;explorer la voie r&#xE9;glementaire IRF6.

Maternelle interf&#xE9;ron facteur de r&#xE9;gulation 6 est requis pour la diff&#xE9;renciation des &#xE9;pith&#xE9;liums superficiel primaire dans des embryons de Danio et Xenopus

Fr&uuml;h in der Entwicklung von tierischen Embryonen oberfl&auml;chliche Zellen von der Blastula bilden eine eigene &Uuml;bertragungslinie und verabschieden eine epitheliale Morphologie. Bei verschiedenen Tieren das Schicksal dieser prim&auml;ren oberfl&auml;chliche epitheliale (PSE) Zellen variiert, und es ist unklar, ob Wege, die f&uuml;r die Trennung von Blastomeren in der PSE-Linie konserviert werden. Mutationen im Gen f&uuml;r Interferon Regulatory Factor 6 (IRF6) sind syndromale und nicht-syndromale Formen der Lippen- und Gaumenspalte, mit eine Rolle f&uuml;r Irf6 bei der Entwicklung der m&uuml;ndlichen Epithelien, zugeordnet und Maus Irf6 gezielte null Mutante Embryonen zeigen abnorme Differenzierung der m&uuml;ndlichen Epithelien und Haut. Danio Rerio (Zebrab&auml;rbling) und Xenopus Laevis (afrikanische trifft Frosch) Embryonen zygotic irf6 Abschriften vorhanden in vielen epithelialen Geweben, einschlie&szlig;lich die vermutliche PSE-Zellen und m&uuml;tterlichen irf6 Abschriften sind in allen Zellen im Stadium der Blastula pr&auml;sent. Injektion von antisense Oligonucleotides mit F&auml;higkeit zur &Uuml;bersetzung der irf6 Abschriften st&ouml;ren verursacht wenig oder keine Auswirkungen auf die Entwicklung. Im Gegensatz dazu Injektion von RNS-Kodierung ein mutma&szlig;liches dominierenden negativen Irf6 verursacht Epibolie verhaften, Verlust der Genexpression, die charakteristisch f&uuml;r die EVL und Bruch des Embryos in sp&auml;ten Gastrula-Stadium. Die dominierenden negativen Irf6 gest&ouml;rt EVL-Genexpression in eine autonome Zelle-Mode. Diese Ergebnisse legen nahe, dass Irf6 in der Eizelle &uuml;bersetzt oder unbefruchteten Ei f&uuml;r fr&uuml;he Entwicklung gen&uuml;gt. Die Bedeutung der m&uuml;tterlichen Irf6 zu unterst&uuml;tzen, zeigen wir, dass die Ersch&ouml;pfung der m&uuml;tterlichen irf6 Abschriften in X. Laevis Embryonen zu Gastrulation M&auml;ngel und Bruch von der oberfl&auml;chlichen Epithel f&uuml;hrt. Diese Experimente zeigen eine konservierte Rolle f&uuml;r Maternal-codierte Irf6 in Differenzierung von einer einfachen Epithel in X. Laevis und D. Rerio. Dieses Epithel bildet ein neuartiges Modell Gewebe in die Erkundung den Irf6 rechtlichen Weg.

M&uuml;tterliche Interferon Regulatory Factor 6 ist f&uuml;r die Differenzierung der prim&auml;ren oberfl&auml;chlichen Epithelien Danio und Xenopus Embryonen erforderlich.

All&#39;inizio lo sviluppo degli embrioni animali, cellule superficiali della blastula formano un lineage distinto e adottano una morfologia epiteliale. In diversi animali, il destino di queste cellule (PSE) epiteliali superficiali primarie varia, e non &egrave; chiaro se sono conservate percorsi che disciplinano la segregazione dei blastomeri nel lignaggio PSE. Mutazioni nel gene che codifica Interferon Regulatory Factor 6 (IRF6) sono associate con forme sindromiche e non sindromiche di schisi del labbro e del palato, coerenza con un ruolo nello sviluppo dell&#39;epitelio orale, Irf6 e Irf6 mirati null mutanti embrioni del mouse visualizzare anomala differenziazione dell&#39;epitelio orale e la pelle. Danio rerio (zebrafish) e gli embrioni di Xenopus laevis (African artigliante rana), zygotic irf6 trascrizioni sono presenti in molti tessuti epiteliali tra cui cellule del PSE presuntiva e materna irf6 trascrizioni sono presenti in tutte le cellule allo stadio di blastula. Iniezione di oligonucleotidi antisenso con possibilit&agrave; di disturbare traduzione di trascrizioni irf6 causato poco o nessun effetto sullo sviluppo. Al contrario, iniezione di RNA che codifica un putativo dominante negativo Irf6 causato epiboly arresto, la perdita di espressione genica caratteristico dell&#39;EVL e rottura dell&#39;embrione all&#39;ultimo stadio di gastrula. La dominante negativa Irf6 perturbato espressione genica EVL in maniera autonoma delle cellule. Questi risultati suggeriscono che Irf6 tradotto nell&#39;ovocita o uova non fecondata &egrave; sufficiente per lo sviluppo precoce. Sostenere l&#39;importanza della materna Irf6, mostriamo che svuotamento delle trascrizioni irf6 materna in embrioni di X. laevis conduce alla gastrulazione difetti e rottura dell&#39;epitelio superficiale. Questi esperimenti rivelano un ruolo conservato per Irf6 maternamente codificato nella differenziazione di un epitelio semplice in X. laevis e d. rerio. Questo epitelio costituisce un tessuto modello romanzo in cui esplorare il percorso normativo Irf6.

Materna Interferon Regulatory Factor 6 &egrave; necessaria per la differenziazione dell&#39;epitelio superficiale primario negli embrioni Danio e Xenopus.

&#x52D5;&#x7269;&#x80DA;&#x3001;&#x80DE;&#x80DA;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x8868;&#x5C64;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x3002;&#x5225;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#xFF08;PSE&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x304C;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;PSE&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306B;&#x5272;&#x7403;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x5236;&#x5FA1;&#x56E0;&#x5B50;6&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#xFF08;IRF6&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x53E3;&#x8154;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;IRF6&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3001;&#x53E3;&#x5507;&#x53E3;&#x84CB;&#x88C2;&#x306E;&#x75C7;&#x5019;&#x3068;&#x975E;&#x75C7;&#x5019;&#x6027;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;IRF6&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x30CC;&#x30EB;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x80DA;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x7570;&#x5E38;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x53E3;&#x8154;&#x4E0A;&#x76AE;&#x3068;&#x76AE;&#x819A;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#xFF08;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#xFF09;&#x3068;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#xFF08;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#xFF09;&#x306E;&#x80DA;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;IRF6&#x8EE2;&#x5199;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x80DE;&#x80DA;&#x671F;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5168;&#x4F53;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;PSE&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6BCD;&#x4F53;IRF6&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; IRF6&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3092;&#x59A8;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5099;&#x3048;&#x305F;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x6CE8;&#x5165;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x307E;&#x3063;&#x305F;&#x304F;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;IRF6&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;RNA&#x306E;&#x6CE8;&#x5165;&#x306F;&#x3001;&#x88AB;&#x5305;&#x902E;&#x6355;&#x3001;EVL&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x539F;&#x8178;&#x80DA;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x80DA;&#x306E;&#x7834;&#x88C2;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;IRF6&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x81EA;&#x5F8B;&#x7684;&#x306B;EVL&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x59A8;&#x5BB3;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;IRF6&#x306F;&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x65E9;&#x671F;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5375;&#x306F;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x672A;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6BCD;&#x6027;IRF6&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x652F;&#x63F4;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6BCD;&#x6027;IRF6&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x304C;&#x539F;&#x8178;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3084;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x7834;&#x58CA;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;X. laevis&#x3068;D.&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x6BCD;&#x4F53;&#x3067;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;IRF6&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306F;IRF6&#x8ABF;&#x7BC0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x63A2;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6BCD;&#x65B9;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;6&#x306F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x3068;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x8868;&#x5728;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;

&#xB3D9;&#xBB3C; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCD08;&#xAE30;&#xC5D0; blastula&#xC758; &#xD45C;&#xBA74; &#xC140; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xACC4;&#xBCF4;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xC0C1;&#xD53C; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xCC44;&#xD0DD; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xD45C;&#xBA74; &#xC0C1;&#xD53C; (PSE) &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6B4;&#xBA85;&#xC740; &#xB2E4;&#xB974;&#xBA70; PSE &#xD608;&#xD1B5;&#xC73C;&#xB85C; blastomeres&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD1B5;&#xCE58; &#xACBD;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874; &#xC5EC;&#xBD80; &#xD655;&#xC2E4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C; 6 (IRF6) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xAC08;&#xB77C;&#xC9C4;&#xB41C; &#xC785;&#xC220; &#xBC0F; &#xAD6C;&#xAC1C;, &#xAD6C;&#xAC15; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; irf6&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;&#xC758; syndromic &#xBC0F; syndromic &#xBE44; &#xD615;&#xD0DC;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xBA70; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; Irf6 &#xB300;&#xC0C1; null &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC30;&#xC544; &#xD45C;&#xC2DC; &#xAD6C;&#xAC15; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC640; &#xD53C;&#xBD80;&#xC758; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;. Danio rerio (zebrafish) Xenopus laevis (&#xC544;&#xD504;&#xB9AC;&#xCE74; &#xBC1C;&#xD1B1;&#xB41C; &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC;) &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; zygotic irf6 &#xC131;&#xC801; &#xCD94;&#xC815; PSE &#xC140;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9CE;&#xC740; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xC0B0; &#xBAA8; irf6 &#xC131;&#xC801;&#xD45C;&#xB294; blastula &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD55C;&#xB2E4;. Irf6 &#xC131;&#xC801;&#xD45C;&#xC758; &#xBC88;&#xC5ED;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC13C;&#xC2A4; oligonucleotides &#xC0AC;&#xCD9C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xAC70;&#xC758; &#xB610;&#xB294; &#xC804;&#xD600; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC8FC;&#xC785; putative &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC778; Irf6 epiboly &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xD558;&#xB294; RNA&#xC758; &#xCCB4;&#xD3EC;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;, EVL&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xBC0F; &#xD0DC;&#xC544;&#xC758; &#xD30C;&#xC5F4; gastrula &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; Irf6 &#xC140; &#xC790;&#xC728; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; EVL &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xBC29;&#xD574;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; oocyte Irf6 &#xBC88;&#xC5ED; &#xB610;&#xB294; unfertilized &#xACC4;&#xB780; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCDA9;&#xBD84; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xC131; irf6&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; X. laevis &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xC131; irf6 &#xC131;&#xC801;&#xD45C;&#xC758; &#xACE0;&#xAC08; gastrulation &#xACB0;&#xD568; &#xBC0F; &#xD45C;&#xBA74; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; &#xD30C;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8; X. laevis &#xB514; rerio&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xC784;&#xC0B0;&#xBD80; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; irf6&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xACC4;&#xC2DC; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC0C1;&#xD53C; Irf6 &#xADDC;&#xC81C; &#xD1B5;&#xB85C;&#xAC00; &#xD0D0;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBAA8;&#xB378; &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xAD6C;&#xC131; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xBAA8;&#xC131; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C; 6 Danio &#xBC0F; Xenopus &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xD45C;&#xBA74; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;.

Temprano en el desarrollo de los embriones de los animales, las c&#xE9;lulas superficiales de la forma de bl&#xE1;stula un linaje distinto y adoptar una morfolog&#xED;a epitelial. En los diferentes animales, el destino de estas primarias epiteliales superficiales (PSE), las c&#xE9;lulas var&#xED;a, y no est&#xE1; claro si las v&#xED;as que regulan la segregaci&#xF3;n de los blast&#xF3;meros en el linaje del PSE se conservan. Las mutaciones en el gen que codifica el factor regulador de interfer&#xF3;n 6 (IRF6) est&#xE1;n asociados a formas sindr&#xF3;micas y no sindr&#xF3;micas-de labio leporino y el paladar, en consonancia con el papel de IRF6 en el desarrollo del epitelio bucal, y el rat&#xF3;n IRF6 dirigidos embriones mutantes nulos grados de diferenciaci&#xF3;n anormal de epitelios oral y la piel. En Danio rerio (pez cebra) y Xenopus laevis (rana africana) embriones, IRF6 cig&#xF3;ticos transcripciones est&#xE1;n presentes en muchos tejidos epiteliales como las presuntas c&#xE9;lulas madre del PSE y transcripciones IRF6 est&#xE1;n presentes en todas las c&#xE9;lulas en la fase de bl&#xE1;stula. La inyecci&#xF3;n de oligonucle&#xF3;tidos antisentido con capacidad de alterar la traducci&#xF3;n de las transcripciones IRF6 caus&#xF3; poco o ning&#xFA;n efecto sobre el desarrollo. Por el contrario, la inyecci&#xF3;n de ARN que codifica una supuesta IRF6 dominante negativo causado epibolia arresto, la p&#xE9;rdida de la expresi&#xF3;n de genes caracter&#xED;sticos de la EVL, y la ruptura del embri&#xF3;n en la etapa de g&#xE1;strula tard&#xED;a. El IRF6 dominante negativo interrumpe la expresi&#xF3;n de genes EVL de una forma aut&#xF3;noma de la c&#xE9;lula. Estos resultados sugieren que IRF6 traduce en el ovocito fecundado o huevo es suficiente para el desarrollo temprano. Destacar la importancia de IRF6 materna, nos muestran que el agotamiento de la madre IRF6 transcripciones de X. laevis embriones conduce a defectos gastrulaci&#xF3;n y la rotura del epitelio superficial. Estos experimentos revelan un papel conservado de la madre codificado IRF6 en la diferenciaci&#xF3;n de un epitelio simple en X. laevis y D. rerio. Este epitelio constituye un tejido nuevo modelo en el que explorar la v&#xED;a IRF6 reglamentario.

Materna interfer&#xF3;n factor regulador 6 es necesario para la diferenciaci&#xF3;n de los epitelios superficial primaria en embriones de Xenopus y Danio

&#x52A8;&#x7269;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x65B9;&#x9762;&#x90FD;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x52A8;&#x6001;&#x91CA;&#x653E;&#x9499; (Ca2 +) &#x79BB;&#x5B50;&#x3002;&#x867D;&#x7136; Ca2 + &#x91CA;&#x653E;&#x5185;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x5230;&#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#xFF0C;&#x5982;&#x4F55;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x4EA7;&#x51FA;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CA;&#x653E;&#x52A8;&#x6001;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E0D;&#x592A;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x836F;&#x7406;&#x5B66;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x9057;&#x4F20;&#x7814;&#x7A76;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x548C;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x4F53;&#x5185;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x4E00;&#x4F53;&#x5316;&#x5DF2;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; Ca2 + &#x91CA;&#x653E;&#x6302;&#x94A9; Wnt &#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x8F93;&#x7F51;&#x7EDC;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x4E0D;&#x540C; Ca2 + &#x91CA;&#x653E;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x5BFC;&#x81F4;&#x53D1;&#x80B2;&#x91CD;&#x8981; Wnt &#x8FDE;&#x73AF;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x800C; Ca2 + &#x7F13;&#x91CA;&#x8C03;&#x8282;&#x4E24;&#x6781;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3002;

&#x9499;&#x91CA;&#x653E;&#x52A8;&#x6001;&#x56FE;&#x50CF;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Many aspects of animal development are dependent on the dynamic release of calcium (Ca2+) ions. Although Ca2+ release within a cell is tightly controlled, how the release dynamics result in a specific biological output in embryonic development is less clear. The integration of pharmacological and molecular-genetic studies with in vivo imaging in zebrafish and Xenopus has linked endogenous Ca2+ release to the Wnt signaling network. Our data suggests that distinct Ca2+ release dynamics lead to antagonism of the developmentally important Wnt/beta-catenin pathway while sustained Ca2+ release modulates polarized cell movements.

Image analysis of calcium release dynamics.

De nombreux aspects du d&#xE9;veloppement animal sont tributaires de la dynamique de la lib&#xE9;ration de calcium (Ca2 +) des ions. Bien que Ca2 + communiqu&#xE9; dans une cellule est &#xE9;troitement contr&#xF4;l&#xE9;, comment le r&#xE9;sultat communiqu&#xE9; dynamique dans une sortie biologique sp&#xE9;cifique dans le d&#xE9;veloppement embryonnaire est moins claire. L&#x26;#39;int&#xE9;gration des &#xE9;tudes pharmacologiques et de g&#xE9;n&#xE9;tique mol&#xE9;culaire avec l&#x26;#39;imagerie in vivo chez le poisson z&#xE8;bre et x&#xE9;nope a li&#xE9; endog&#xE8;ne lib&#xE9;ration de Ca 2 + pour le r&#xE9;seau de signalisation Wnt. Nos donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que distincte Ca2 + dynamique du relargage conduire &#xE0; l&#x26;#39;antagonisme des troubles du d&#xE9;veloppement important de la signalisation Wnt / beta-cat&#xE9;nine alors Ca2 + soutenue communiqu&#xE9; module mouvements cellulaires polaris&#xE9;es.

Analyse d&#x26;#39;images de la dynamique de calcium de sortie

Viele Aspekte der tierischen Entwicklung sind abh&auml;ngig von der dynamischen Ver&ouml;ffentlichung von Kalziumionen (Ca2 +). Obwohl Ca2 + release innerhalb ist eine Zelle streng kontrolliert, wie Freigabe Dynamik eine spezifische biologische Produktion in den embryonalen Entwicklung weniger klar entsteht. Die Integration der pharmakologischen und molekulargenetische Studien mit in-vivo Bildgebung im Zebrafisch und Xenopus hat endogene Ca2 + Release mit dem Wnt Signalling-Netzwerk verbunden. Unsere Daten zeigen, dass unterschiedliche Ca2 +-Freigabe-Dynamik zu Antagonismus der entwicklungspolitisch wichtige Wnt/Beta-Catenin-Signalweg f&uuml;hren, w&auml;hrend dauerhafte Ca2 + Release polarisierten Zelle Bewegungen moduliert.

Bildanalyse der Kalzium-Freigabe-Dynamik.

Molti aspetti dello sviluppo degli animali dipendono il rilascio dinamico degli ioni calcio (Ca2 +). Sebbene Ca2 + release all&#39;interno di una cella &egrave; strettamente controllato, come il risultato di dinamiche di rilascio in un output specifico biologico dello sviluppo embrionale &egrave; meno chiaro. L&#39;integrazione di studi farmacologici e genetici-molecolari con imaging in vivo in zebrafish e Xenopus ha collegato endogeno Ca2 + release per la rete di segnalazione Wnt. I nostri dati suggeriscono che dinamiche distinte Ca2 + release portano all&#39;antagonismo del percorso evolutivo importante Wnt/beta-catenina mentre sostenuta Ca2 + release modula movimenti delle cellule polarizzate.

Analisi di immagini dinamiche di rilascio di calcio.

&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#xFF08;Ca2 +&#x306E;&#xFF09;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;Ca2 +&#x653E;&#x51FA;&#x304C;&#x53B3;&#x5BC6;&#x306B;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x51FA;&#x529B;&#x306B;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x307B;&#x3069;&#x660E;&#x78BA;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3084;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;in vivo&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x5B50;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x306F;&#x3001;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;Ca2 +&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;Ca2 +&#x653E;&#x51FA;&#x306F;&#x5206;&#x6975;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x500B;&#x5225;&#x306E;Ca2 +&#x653E;&#x51FA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x304C;&#x767A;&#x9054;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3B2;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;/ Wnt&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x653E;&#x51FA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x753B;&#x50CF;&#x89E3;&#x6790;

&#xB3D9;&#xBB3C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xCE21;&#xBA74; &#xCE7C;&#xC298; (Ca2 +) &#xC774;&#xC628;&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xBC84;&#xC804;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xB85D; Ca2 + &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xB0B4;&#xC5D0; &#xC140; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xBC30;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xC815; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xCD9C;&#xB825;&#xC5D0; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xC5ED;&#xD559; &#xACB0;&#xACFC; &#xB35C; &#xBD84;&#xBA85; &#xD558;&#xB2E4;. Zebrafish Xenopus&#xC5D0; in vivo &#xC601;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC57D;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xD1B5;&#xD569;&#xC740; Wnt &#xC2E0;&#xD638; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC5D0; &#xB0B4; Ca2 + &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; Ca2 + &#xCD9C;&#xC2DC; &#xBCC0;&#xC870; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xC140; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; Ca2 + &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xC5ED;&#xD559; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; Wnt/&#xBCA0;&#xD0C0;-catenin &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC;&#xC744; &#xC774;&#xB04C;&#xC5B4; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;.

&#xCE7C;&#xC298; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xC5ED;&#xD559;&#xC758; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xBD84;&#xC11D;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Muchos aspectos del desarrollo animal dependen de la din&#xE1;mica de la liberaci&#xF3;n de calcio (Ca2 +) iones. A pesar de la liberaci&#xF3;n de Ca2 + dentro de una c&#xE9;lula est&#xE1; estrechamente controlada, como el resultado de la liberaci&#xF3;n en la din&#xE1;mica de una producci&#xF3;n biol&#xF3;gica espec&#xED;fica en el desarrollo embrionario es menos clara. La integraci&#xF3;n de los estudios farmacol&#xF3;gicos y de gen&#xE9;tica molecular, con im&#xE1;genes in vivo en el pez cebra y Xenopus ha vinculado la liberaci&#xF3;n end&#xF3;gena de Ca2 + a la red de se&#xF1;alizaci&#xF3;n de Wnt. Nuestros datos sugieren que la din&#xE1;mica distinta de Ca2 + liberaci&#xF3;n de plomo al antagonismo de la importante para el desarrollo de Wnt / beta-catenina, mientras que Ca2 + liberaci&#xF3;n sostenida modula los movimientos celulares polarizados.

An&#xE1;lisis de Imagen Din&#xE1;mica del calcio de lanzamiento

&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x4E2D;&#x4EB2;&#x8F74;&#x7684;&#x89C4;&#x683C;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x91CD;&#x6392;&#x540E;&#x65BD;&#x80A5;&#x3001; &#x4F34; Wnt &#x8FDE;&#x73AF;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x86CB;&#x690D;&#x7269;&#x6027;&#x76AE;&#x8D28;&#x3002;&#x5982;&#x4F55;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x6346;&#x7ED1;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x5E76;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5DF2;&#x77E5; RNAs &#x5728;&#x5375;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x4E3A;&#x690D;&#x7269;&#x6027;&#x7684;&#x76AE;&#x8D28;&#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#xFF0C;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x51E0;&#x4E2A; vegetally &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684; RNAs&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x65B0;&#x9896;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316; mRNA&#xFF0C;trim36&#xFF0C;&#x9274;&#x5B9A;&#x548C;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5176;&#x529F;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x4EA7;&#x5987;&#x529F;&#x80FD;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;trim36 &#x4EE5;&#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x79CD;&#x8D28;&#x548C;&#x7F16;&#x7801;&#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x7684;&#x4E09;&#x65B9;&#x6BCD;&#x9898;&#x5305;&#x542B; (Trim) &#x5BB6;&#x5EAD;&#x3002;Ventralized &#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x8005;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7ED3;&#x679C;&#x67AF;&#x7AED;&#x7684;&#x4EA7;&#x5987; trim36 &#x4F7F;&#x7528;&#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x6CE8;&#x5C04; wnt11 mRNA &#x8425;&#x6551;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; Trim36 &#x51FD;&#x6570;&#x4E0A;&#x6E38;&#x7684; Wnt &#x8FDE;&#x73AF;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x53D1;&#x73B0;&#x690D;&#x7269;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x805A;&#x5408;&#x548C;&#x76AE;&#x8D28;&#x65CB;&#x8F6C;&#x4E2D;&#x65AD;&#x5728; trim36 &#x8017;&#x5C3D;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; Trim36 &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x80DA;&#x80CE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6551;&#x8D77;&#x7FFB;&#x86CB;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x52A8;&#x7269;&#x690D;&#x7269;&#x6027;&#x8F74; 90 &#x5EA6;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4F5C;&#x7528; Trim36 &#x5728;&#x63A7;&#x5236;&#x671F;&#x95F4;&#x76AE;&#x8D28;&#x65CB;&#x8F6C;&#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x8F74;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x3002;

&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE; trim36 vegetally &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x89C4;&#x8303;&#x76AE;&#x8D28;&#x65CB;&#x8F6C;&#x548C;&#x80CC;&#x8F74;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;

Specification of the dorsoventral axis in Xenopus depends on rearrangements of the egg vegetal cortex following fertilization, concomitant with activation of Wnt/beta-catenin signaling. How these processes are tied together is not clear, but RNAs localized to the vegetal cortex during oogenesis are known to be essential. Despite their importance, few vegetally localized RNAs have been examined in detail. In this study, we describe the identification of a novel localized mRNA, trim36, and characterize its function through maternal loss-of-function experiments. We find that trim36 is expressed in the germ plasm and encodes a ubiquitin ligase of the Tripartite motif-containing (Trim) family. Depletion of maternal trim36 using antisense oligonucleotides results in ventralized embryos and reduced organizer gene expression. We show that injection of wnt11 mRNA rescues this effect, suggesting that Trim36 functions upstream of Wnt/beta-catenin activation. We further find that vegetal microtubule polymerization and cortical rotation are disrupted in trim36-depleted embryos, in a manner dependent on Trim36 ubiquitin ligase activity. Additionally, these embryos can be rescued by tipping the eggs 90 degrees relative to the animal-vegetal axis. Taken together, our results suggest a role for Trim36 in controlling the stability of proteins regulating microtubule polymerization during cortical rotation, and subsequently axis formation.

Vegetally localized Xenopus trim36 regulates cortical rotation and dorsal axis formation.

Sp&#xE9;cification de l&#x26;#39;axe dorso-ventral chez Xenopus d&#xE9;pend des r&#xE9;arrangements de la f&#xE9;condation des oeufs cortex v&#xE9;g&#xE9;tale suivant, concomitante avec l&#x26;#39;activation de la signalisation Wnt / beta-cat&#xE9;nine. Comment ces processus sont li&#xE9;s entre eux n&#x26;#39;est pas clair, mais ARN localis&#xE9;es dans le cortex v&#xE9;g&#xE9;tale cours de l&#x26;#39;ovogen&#xE8;se sont connues pour &#xEA;tre essentielles. Malgr&#xE9; leur importance, peu ARN vegetally localis&#xE9;es ont &#xE9;t&#xE9; examin&#xE9;s en d&#xE9;tail. Dans cette &#xE9;tude, nous d&#xE9;crivons l&#x26;#39;identification d&#x26;#39;un ARNm roman localis&#xE9;e, trim36, et de caract&#xE9;riser sa fonction par le biais maternels perte de fonction des exp&#xE9;riences. Nous constatons que trim36 est exprim&#xE9; dans le plasma germinatif et code pour une ubiquitine ligase de la Tripartite motif-contenant (Trim) de la famille. L&#x26;#39;appauvrissement de la m&#xE8;re en utilisant trim36 oligonucl&#xE9;otides antisens r&#xE9;sultats dans des embryons de ventralized et r&#xE9;duit l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes organisateur. Nous montrons que l&#x26;#39;injection de l&#x26;#39;ARNm wnt11 sauvetages cet effet, ce qui sugg&#xE8;re que Trim36 fonctions en amont de l&#x26;#39;activation de signalisation Wnt / beta-cat&#xE9;nine. Nous constatons en outre que la polym&#xE9;risation des microtubules v&#xE9;g&#xE9;tale et de la rotation corticale sont perturb&#xE9;s dans des embryons de trim36-&#xE9;puis&#xE9;s, d&#x26;#39;une mani&#xE8;re d&#xE9;pendante de Trim36 activit&#xE9; ubiquitine ligase. En outre, ces embryons ne peuvent &#xEA;tre sauv&#xE9;s par le basculement des oeufs 90 degr&#xE9;s par rapport &#xE0; l&#x26;#39;axe animal-v&#xE9;g&#xE9;tatif. Pris dans leur ensemble, nos r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent un r&#xF4;le pour Trim36 dans le contr&#xF4;le de la stabilit&#xE9; des prot&#xE9;ines r&#xE9;gulatrices polym&#xE9;risation des microtubules lors de la rotation corticale, et la formation par la suite l&#x26;#39;axe.

Vegetally Localis&#xE9; Xenopus Trim36 R&#xE9;gule rotation corticale et de la Formation axe dorsal

Spezifikation der dorsoventral Achse in Xenopus h&auml;ngt von Umlagerungen des pflanzlichen Cortex Ei nach Befruchtung, gleichzeitige mit Aktivierung des Wnt/Beta-Catenin signalisieren. Wie diese Prozesse miteinander verbunden sind, ist nicht klar, aber RNAs, die w&auml;hrend der Oogenese auf die pflanzliche Kortex lokalisiert sind bekannterma&szlig;en unerl&auml;sslich. Trotz ihrer Bedeutung sind einige vegetally lokalisierte RNAs ausf&uuml;hrlich untersucht worden. In dieser Studie haben wir beschreiben die Identifizierung von einer neuartigen lokalisierte mRNA, trim36, und seine Funktion durch m&uuml;tterliche Verlust der Funktion Experimente zu charakterisieren. Wir finden dieses trim36 dr&uuml;ckt sich in den Keim Plasm und kodiert ein Ubiquitin Ligase der dreigliedrigen Motiv-haltigen (Trim) Familie. Ersch&ouml;pfung der m&uuml;tterlichen trim36 mit antisense Oligonucleotides ventralized Embryonen und reduzierte Veranstalter Genexpression f&uuml;hrt. Wir zeigen, dass die Injektion von wnt11 mRNA rettet diesen Effekt, was darauf hindeutet, dass Trim36 stromaufw&auml;rts Funktionen der Wnt/Beta-Catenin-Aktivierung. Wir finden, dass pflanzliche Microtubule Polymerisierung und kortikale Rotation in trim36-abgereichertem Embryonen, in gewissem Sinne Trim36 Ubiquitin Ligase T&auml;tigkeit abh&auml;ngig unterbrochen werden. Dar&uuml;ber hinaus k&ouml;nnen diese Embryos durch Ablagerung der Eier 90 Grad relativ zur Tier-pflanzliche Achse gerettet werden. Zusammen genommen, weisen unsere Ergebnisse eine Rolle f&uuml;r Trim36 bei der Kontrolle der Stabilit&auml;t der Proteine regulieren Microtubule Polymerisierung w&auml;hrend kortikale Drehung und anschlie&szlig;end Achse Bildung.

Vegetally lokalisierte Xenopus-trim36 regelt kortikale Rotation und dorsale Achse Bildung.

Specificazione dell&#39;asse dorsoventral in Xenopus dipende da riarrangiamenti della corteccia vegetale uovo dopo la fecondazione, concomitante con l&#39;attivazione di segnalazione Wnt/beta-catenina. Non &egrave; chiaro come questi processi sono legati insieme, ma localizzato alla corteccia vegetale durante l&#39;ovogenesi RNAs sono noti per essere essenziale. Nonostante la loro importanza, pochi RNAs pregiata localizzate sono state esaminate in dettaglio. In questo studio, ci descrivono l&#39;identificazione di un romanzo mRNA localizzata, trim36 e caratterizzano la sua funzione attraverso esperimenti di perdita della funzione materni. Troviamo che trim36 &egrave; espresso nel plasma del germe e codifica per una ligasi di ubiquitin tripartito contenenti motif (Trim) famiglia. Deplezione di trim36 materno utilizzando oligonucleotidi antisenso risultati in embrioni ventralized e organizzatore ridotta espressione del gene. Ci mostrano che l&#39;iniezione del mRNA di wnt11 Salva questo effetto, suggerendo che Trim36 funzioni a monte dell&#39;attivazione di Wnt/beta-catenina. Troviamo inoltre che polimerizzazione dei microtubuli vegetali e rotazione corticali sono interrotti in embrioni trim36 impoverito, in maniera dipendente su attivit&agrave; di Trim36 ubiquitina ligasi. Inoltre, questi embrioni possono essere salvati da ribaltamento le uova di 90 gradi rispetto all&#39;asse animale-vegetale. Presi insieme, i nostri risultati suggeriscono un ruolo per Trim36 nel controllare la stabilit&agrave; delle proteine che regolano la polimerizzazione dei microtubuli durante la rotazione corticale e successivamente formazione di asse.

Pregiata localizzata Xenopus trim36 regola la rotazione corticale e formazione asse dorsale.

&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;&#x80CC;&#x8179;&#x8EF8;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5375;&#x690D;&#x7269;&#x6027;&#x76AE;&#x8CEA;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306F;&#x3001;Wnt /&#x3B2;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x306E;&#x4F75;&#x7528;&#x306E;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x660E;&#x78BA;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5375;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;RNA&#x304C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;vegetally&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;RNA&#x306F;&#x3001;&#x8A73;&#x7D30;&#x306B;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;trim36&#x3001;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3001;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;mRNA&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3057;&#x3001;&#x6BCD;&#x6027;&#x6A5F;&#x80FD;&#x55AA;&#x5931;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x305D;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;trim36&#x306F;&#x751F;&#x6B96;&#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x52B4;&#x4F7F;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3092;&#x542B;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#xFF08;&#x30C8;&#x30EA;&#x30E0;&#xFF09;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; ventralized&#x80DA;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x30AA;&#x30FC;&#x30AC;&#x30CA;&#x30A4;&#x30B6;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x6BCD;&#x4F53;trim36&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x793A;&#x5506;wnt11 mRNA&#x306E;&#x6CE8;&#x5165;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;/&#x3B2;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x4E0A;&#x6D41;Trim36&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x91CD;&#x5408;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;&#x56DE;&#x8EE2;&#x304C;Trim36&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3001;trim36&#x67AF;&#x6E07;&#x80DA;&#x3067;&#x7834;&#x58CA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x80DA;&#x306F;&#x5375;&#x306E;&#x52D5;&#x7269; - &#x690D;&#x7269;&#x8EF8;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;90&#x5EA6;&#x50BE;&#x3051;&#x3066;&#x6551;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;&#x56DE;&#x8EE2;&#x6642;&#x306B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x8EF8;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;Trim36&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

Vegetally&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;Trim36&#x306F;&#x3001;&#x76AE;&#x8CEA;&#x56DE;&#x8EE2;&#x3068;&#x80CC;&#x8EF8;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;

Xenopus dorsoventral &#xCD95; &#xC0AC;&#xC591; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC131; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC774; &#xC218;&#xC815;, Wnt/&#xBCA0;&#xD0C0;-catenin &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC218; &#xBC18;&#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xC74C; &#xB2EC;&#xAC40;&#xC758; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB294; &#xD568;&#xAED8; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC740; &#xBD84;&#xBA85; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; RNAs oogenesis &#xC911; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC131; &#xD53C; &#xC9C8; &#xD654; &#xB41C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; vegetally &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; RNAs &#xC790;&#xC138;&#xD558;&#xAC8C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC18C;&#xC124; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; mRNA, trim36, &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD558; &#xACE0; &#xBAA8;&#xC131; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC190;&#xC2E4; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xADF8; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; trim36 &#xC138;&#xADE0; &#xD608;&#xC7A5; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xCC3E;&#xC544; &#xB178;&#xC0AC; &#xC815; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; (Trim) &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC13C;&#xC2A4; oligonucleotides&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0B0; &#xBAA8; trim36&#xC758; &#xACE0;&#xAC08; &#xACB0;&#xACFC; ventralized &#xBC30;&#xC544; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xAC10;&#xC18C; &#xC8FC;&#xCD5C;&#xC790;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; wnt11 Mrna&#xC758; &#xC8FC;&#xC785;&#xC774;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC; &#xAD6C;&#xCD9C; Trim36 &#xC0C1;&#xB958; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC81C;&#xC548; Wnt/&#xBCA0;&#xD0C0;-catenin &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB354; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC131; microtubule &#xC911; &#xD569; &#xBC0F; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xD68C;&#xC804; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; Trim36 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; trim36 &#xACE0;&#xAC08; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xB2E8; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC774;&#xB4E4;&#xC774; &#xBC30;&#xC544; &#xD301; &#xACC4;&#xB780; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC131; &#xCD95; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; 90&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC81C;&#xC548; &#xC5ED;&#xD560; trim36&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xD68C;&#xC804; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xD6C4; &#xCD95; &#xD615;&#xC131; &#xB3D9;&#xC548; microtubule &#xD569;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4;.

Vegetally &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; Xenopus trim36 &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xD68C;&#xC804;&#xACFC; &#xC9C0; &#xCD95; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC870;&#xC808;.

La especificaci&#xF3;n del eje dorsoventral en Xenopus depende de reordenamiento de la fertilizaci&#xF3;n del &#xF3;vulo vegetal, corteza siguiente, concomitante con la activaci&#xF3;n de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n Wnt / beta-catenina. &#xBF;C&#xF3;mo estos procesos est&#xE1;n unidos entre s&#xED; no est&#xE1; claro, pero ARN localizadas en la corteza vegetal, durante la ovog&#xE9;nesis se sabe que son esenciales. A pesar de su importancia, son pocos los ARNs vegetally localizadas han sido examinados en detalle. En este estudio, se describe la identificaci&#xF3;n de una novela de mRNA localizada, trim36, y caracterizar su funci&#xF3;n a trav&#xE9;s de la madre la p&#xE9;rdida de la funci&#xF3;n de los experimentos. Encontramos que trim36 se expresa en el plasma germinal y codifica una ubiquitina ligasa de la Comisi&#xF3;n Tripartita motivo que contiene (Trim) de la familia. El agotamiento de los trim36 materna utilizando oligonucle&#xF3;tidos antisentido resultados en embriones ventralized y la expresi&#xF3;n reducida del gen organizador. Se demuestra que la inyecci&#xF3;n de ARNm wnt11 rescata a este efecto, lo que sugiere que las funciones Trim36 aguas arriba de la activaci&#xF3;n de Wnt / beta-catenina. Constatamos adem&#xE1;s que la polimerizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos vegetal y la rotaci&#xF3;n de cortical se interrumpen en los embriones trim36-empobrecido, en una forma dependiente de la actividad Trim36 ubiquitina ligasa. Adem&#xE1;s, estos embriones puede ser rescatado por el dep&#xF3;sito de los huevos 90 grados con relaci&#xF3;n al eje animal-vegetal. En conjunto, nuestros resultados sugieren un papel de Trim36 en el control de la estabilidad de las prote&#xED;nas que regulan la polimerizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos durante la rotaci&#xF3;n cortical, y la formaci&#xF3;n posteriormente eje.

Localizado Vegetally Xenopus Trim36 Regula la rotaci&#xF3;n cortical y la formaci&#xF3;n del eje dorsal

&#x80FD;&#x529B;&#x64CD;&#x7EB5;&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x751F;&#x6210;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5230;&#x4E3B;&#x673A;&#x5973;&#x6027;&#x53D7;&#x5B55;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5DF2;&#x8FC5;&#x901F;&#x5B9A;&#x6027;&#x4EA7;&#x5987;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E2D;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x4EA7;&#x5987;&#x5206;&#x6CCC;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x67AF;&#x7AED;&#x4F7F;&#x7528;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178;&#x9176; H &#x6D3B;&#x6027;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x53CD;&#x4E49; deoxyoligonucleotides (&#x770B;)&#x3002;&#x81EA;&#x53CD;&#x4E49;&#x8BD5;&#x5242;&#x6216;&#x5206;&#x6CCC;&#x6CE8;&#x5C04;&#x9E21;&#x86CB;&#x65BD;&#x80A5;&#x5F80;&#x5F80;&#x672A;&#x80FD;&#x5F71;&#x54CD;&#x5230;&#x4EA7;&#x5987;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;mRNA &#x8017;&#x5C3D;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x540E;&#x7279;&#x522B;&#x9002;&#x5408;&#x7528;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4EA7;&#x5987;&#x7684;&#x804C;&#x80FD;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x6B21;&#x5BA1;&#x67E5;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x53CD;&#x4E49;&#x7684;&#x4F18;&#x52BF;&#x7A81;&#x51FA;&#x548C;&#x63CF;&#x8FF0;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x548C;&#x9009;&#x62E9;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x770B;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x603B;&#x7ED3;&#x65BD;&#x80A5;&#x4E3B;&#x673A;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x548C;&#x89E3;&#x91CA;&#x7684;&#x53CD;&#x4E49;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x6280;&#x672F;&#x4E0A;&#x8981;&#x6C42;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x5728;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x53CD;&#x4E49;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x89E3;&#x51B3;&#x751F;&#x7269;&#x662F;&#x5176;&#x4ED6;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x4E2D;&#x68D8;&#x624B;&#x7684;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;

&#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;

The ability to manipulate gene expression in Xenopus oocytes and then generate fertilized embryos by transfer into host females has made it possible to rapidly characterize maternal signaling pathways in vertebrate development. Maternal mRNAs in particular can be efficiently depleted using antisense deoxyoligonucleotides (oligos), mediated by endogenous RNase-H activity. Since the microinjection of antisense reagents or mRNAs into eggs after fertilization often fails to affect maternal signaling pathways, mRNA depletion in the Xenopus oocyte is uniquely suited to assessing maternal functions. In this review, we highlight the advantages of using antisense in Xenopus oocytes and describe basic methods for designing and choosing effective oligos. We also summarize the procedures for fertilizing cultured oocytes by host-transfer and interpreting the specificity of antisense effects. Although these methods can be technically demanding, the use of antisense in oocytes can be used to address biological questions that are intractable in other experimental settings.

The use of antisense oligonucleotides in Xenopus oocytes.

La capacit&#xE9; de manipuler l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes dans les ovocytes de Xenopus, puis g&#xE9;n&#xE9;rer des embryons f&#xE9;cond&#xE9;s par transfert dans des femelles d&#x26;#39;accueil a permis de caract&#xE9;riser rapidement maternels voies de signalisation dans le d&#xE9;veloppement des vert&#xE9;br&#xE9;s. ARNm maternels en particulier, peuvent &#xEA;tre efficacement appauvri en utilisant d&#xE9;soxyoligonucl&#xE9;otides antisens (oligos), sous la m&#xE9;diation endog&#xE8;ne RNase-H activit&#xE9;. Depuis la micro-injection de r&#xE9;actifs antisens ou ARNm dans des &#x153;ufs apr&#xE8;s la f&#xE9;condation &#xE9;choue souvent &#xE0; affecter maternels voies de signalisation, l&#x26;#39;appauvrissement de l&#x26;#39;ARNm dans l&#x26;#39;ovocyte de Xenopus est particuli&#xE8;rement bien adapt&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;valuation des fonctions maternelles. Dans cette revue, nous mettons en &#xE9;vidence les avantages de l&#x26;#39;utilisation antisens dans les ovocytes de Xenopus et d&#xE9;crire les m&#xE9;thodes de base pour la conception et le choix des oligos efficaces. Nous r&#xE9;sumons &#xE9;galement les proc&#xE9;dures de fertilisation des ovocytes en culture par l&#x26;#39;h&#xF4;te de transfert et l&#x26;#39;interpr&#xE9;tation de la sp&#xE9;cificit&#xE9; des effets antisens. Bien que ces m&#xE9;thodes peuvent &#xEA;tre techniquement difficile, l&#x26;#39;utilisation de antisens dans les ovocytes peut &#xEA;tre utilis&#xE9; pour r&#xE9;pondre &#xE0; des questions biologiques qui sont insolubles dans d&#x26;#39;autres contextes exp&#xE9;rimentaux.

L&#x26;#39;utilisation d&#x26;#39;oligonucl&#xE9;otides antisens dans les ovocytes de Xenopus

Genexpression in Xenopus Oocytes zu manipulieren und anschlie&szlig;end generieren befruchtete Embryonen durch &Uuml;bertragung in Host Frauen machte es m&ouml;glich, m&uuml;tterliche Signalwege in vertebrate Entwicklung rasch zu charakterisieren. M&uuml;tterliche mRNAs k&ouml;nnen besonders effizient mit antisense Deoxyoligonucleotides (Oligos), vermittelt durch endogene RNase H-Aktivit&auml;t ersch&ouml;pft sein. Seit dem Microinjection der antisense Reagenzien oder mRNAs in Eier nach Befruchtung oft nicht m&uuml;tterlichen Signalwege beeinflussen eignet mRNA Ersch&ouml;pfung in der Eizelle Xenopus eindeutig zur Bewertung der m&uuml;tterlicher Funktionen. In diesem Bericht wir markieren die Vorteile der Verwendung von &quot;Antisense&quot; in Xenopus Oocytes und beschreiben die grundlegende Methoden f&uuml;r die Gestaltung und effektive Oligos ausw&auml;hlen. Wir fassen auch die Verfahren zur D&uuml;ngung kultivierten Eizellen von Host-Transfer und Spezifit&auml;t der antisense-Effekte zu interpretieren. Obwohl diese Methoden technisch anspruchsvoll sein k&ouml;nnen, kann die Verwendung von &quot;Antisense&quot; in Eizellen, biologische Fragen behandeln, die auf dem anderen experimentellen therapieresistente sind verwendet werden.

Die Verwendung von antisense Oligonucleotides in Xenopus Oocytes.

La capacit&agrave; di manipolare l&#39;espressione genica in ovociti di Xenopus e quindi generare embrioni fecondati dal trasferimento in femmine host ha reso possibile caratterizzare rapidamente materne segnalazione percorsi nello sviluppo vertebrato. Materna mRNAs in particolare pu&ograve; essere efficientemente impoverito utilizzando deoxyoligonucleotides antisenso (oligos), mediato da attivit&agrave; endogena di RNAsi H. Poich&eacute; la microiniezione di reagenti antisenso o mRNAs in uova dopo fecondazione spesso non riesce a incidere materna signaling pathways, deplezione di mRNA in ovocita Xenopus &egrave; univocamente adatta a valutare le funzioni materne. In questa recensione, abbiamo evidenziare i vantaggi dell&#39;utilizzo di antisenso in ovociti di Xenopus e descrivere i metodi di base per la progettazione e scegliendo i oligos efficaci. Abbiamo anche riassumere le procedure per fecondare gli ovociti colti da host-trasferimento e interpretare la specificit&agrave; degli effetti antisenso. Sebbene questi metodi possono essere tecnicamente impegnative, l&#39;uso di antisenso di ovociti pu&ograve; essere utilizzato per affrontare questioni biologiche che sono intrattabile in altre impostazioni sperimentali.

L&#39;uso di oligonucleotidi antisenso in ovociti di Xenopus.

&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x96CC;&#x3078;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80DA;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x6BCD;&#x65B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x6BCD;&#x6027;mRNA&#x304C;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;RNase H&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#xFF08;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x67AF;&#x6E07;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5F8C;&#x306E;&#x5375;&#x306B;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x8A66;&#x85AC;&#x3084;mRNA&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x6BCD;&#x89AA;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x3066;&#x4EE5;&#x6765;&#x3001;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x4E2D;&#x306E;mRNA&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x304C;&#x4E00;&#x610F;&#x306B;&#x6BCD;&#x4F53;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x5229;&#x70B9;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3057;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x8EE2;&#x9001;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x57F9;&#x990A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5375;&#x5B50;&#x3092;&#x53D7;&#x7CBE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;&#x89E3;&#x91C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x3092;&#x307E;&#x3068;&#x3081;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x6280;&#x8853;&#x7684;&#x306B;&#x53B3;&#x3057;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3067;&#x306F;&#x96E3;&#x6CBB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x554F;&#x984C;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;

Xenopus oocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC870;&#xC791; &#xD558; &#xACE0; &#xC804;&#xC1A1; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC5EC;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC218;&#xC815; &#xB41C; &#xBC30;&#xC544;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xBAA8;&#xC131; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xCC99;&#xCD94; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558; &#xAC8C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xC131; mRNAs &#xD2B9;&#xD788; &#xC218; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xACE0;&#xAC08; &#xB420; &#xC13C;&#xC2A4; deoxyoligonucleotides (oligos) &#xC0DD; RNase H &#xD65C;&#xB3D9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xACC4;&#xB780;&#xC5D0; &#xC13C;&#xC2A4; &#xC2DC; &#xC57D; &#xB610;&#xB294; Mrnas&#xC758; microinjection &#xC774;&#xD6C4; &#xBAA8;&#xC131; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC885;&#xC885; &#xC218;&#xC815; &#xC2E4;&#xD328; &#xD55C; &#xD6C4; Xenopus oocyte&#xC5D0;&#xC11C; mRNA &#xACE0;&#xAC08; &#xACE0;&#xC720; &#xD558; &#xAC8C; &#xBAA8;&#xC131; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD3C9;&#xAC00;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD558;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC80;&#xD1A0; &#xC6B0;&#xB9AC; Xenopus oocytes&#xC5D0;&#xC11C; antisense&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC758; &#xC7A5;&#xC810; &#xAC15;&#xC870; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC124;&#xACC4; &#xBC0F; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; oligos&#xB97C; &#xC120;&#xD0DD; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; oocytes&#xB97C; &#xBE44; &#xC625; &#xD558; &#xACE0; &#xC13C;&#xC2A4; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC758; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; &#xD574;&#xC11D; &#xC808;&#xCC28; &#xC694;&#xC57D;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAE30;&#xC220;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC694;&#xAD6C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC124;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xACF5; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC9C8;&#xBB38; antisense oocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Xenopus oocytes &#xC13C;&#xC2A4; oligonucleotides &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La capacidad de manipular la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica en ovocitos de Xenopus y luego generar embriones fecundados mediante la transferencia de las hembras de acogida ha permitido caracterizar con rapidez materna v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n en el desarrollo de los vertebrados. MRNAs maternos, en particular, pueden ser eficientemente agotado con desoxioligonucle&#xF3;tidos antisentido (oligos), mediadas por el sistema end&#xF3;geno de RNasa H actividad. Dado que la microinyecci&#xF3;n de ARNm antisentido o reactivos en los huevos despu&#xE9;s de la fecundaci&#xF3;n no suele afectar a la madre las v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, el agotamiento de ARNm en el ovocito de Xenopus es especialmente adecuado para la evaluaci&#xF3;n de las funciones maternas. En esta revisi&#xF3;n, se destacan las ventajas de utilizar antisentido en ovocitos de Xenopus y describir los m&#xE9;todos b&#xE1;sicos para el dise&#xF1;o y la elecci&#xF3;n de oligos eficaces. Tambi&#xE9;n se resumen los procedimientos de fertilizaci&#xF3;n de ovocitos cultivados por el anfitri&#xF3;n de transferencia y la interpretaci&#xF3;n de la especificidad de los efectos antisentido. Aunque estos m&#xE9;todos pueden ser t&#xE9;cnicamente exigentes, el uso de antisentido en oocitos se puede utilizar para tratar cuestiones biol&#xF3;gicas que son insolubles en otros par&#xE1;metros experimentales.

El uso de oligonucle&#xF3;tidos antisentido en oocitos de Xenopus

RNA &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5171;&#x540C;&#x673A;&#x5236;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684; RNAs &#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x65E9;&#x671F;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x751F;&#x6B96;&#x89C4;&#x8303;&#x79CD;&#x8D28;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x672C;&#x5730;&#x5316; RNAs &#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x5927;&#x7EA6; 25 &#x5DF2;&#x67E5;&#x660E;&#x548C;&#x66F4;&#x5C11;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x82AF;&#x7247;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x4ECE;&#x690D;&#x7269;&#x6027;&#x7684;&#x76AE;&#x8D28;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316; RNAs &#x5927;&#x5957;&#x3002;&#x603B;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x81F3;&#x5C11; 275 &#x672C;&#x5730;&#x5316; RNAs &#x5728;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216; 2-3%&#x7684;&#x4EA7;&#x5987;&#x7684;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#xFF0C;&#x5927;&#x81F4;&#x4E0A;&#x4E0E;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8FBE;&#x6210;&#x534F;&#x8BAE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x690D;&#x7269;&#x6027;&#x56FD;&#x4EA7;&#x5316;&#x7684; 24 &#x540D;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7279;&#x70B9;&#x8868;&#x8FBE;&#x79CD;&#x8D28;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x79CD; 3.1&#x3001; exd2 &#x65B0;&#x578B;&#x79CD;&#x8D28;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F; &#xFF08;&#x65B0;&#x578B;&#x5916;&#x5207;&#x57DF;&#x7F16;&#x7801;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF09;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5047;&#x5B9A;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x975E;&#x7F16;&#x7801; RNA&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x5206;&#x6790;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684; RNAs &#x53EF;&#x80FD;&#x5C06;&#x67E5;&#x660E;&#x65B0;&#x804C;&#x80FD;&#x7684;&#x79CD;&#x8D28;&#x548C;&#x63A8;&#x52A8;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x4EE3;&#x7406; RNA &#x5B9A;&#x4F4D;&#x5143;&#x7D20;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;

&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x690D;&#x7269;&#x6027;&#x76AE;&#x8D28; RNA &#x57FA;&#x56E0;&#x82AF;&#x7247;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x79CD;&#x8D28;&#x76F8;&#x5173;&#x7B14;&#x5F55;&#x7684;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;

RNA localization is a common mechanism for regulating cell structure and function. Localized RNAs in Xenopus oocytes are critical for early development, including germline specification by the germ plasm. Despite the importance of these localized RNAs, only approximately 25 have been identified and fewer are functionally characterized. Using microarrays, we identified a large set of localized RNAs from the vegetal cortex. Overall, our results indicate a minimum of 275 localized RNAs in oocytes, or 2-3% of maternal transcripts, which are in general agreement with previous findings. We further validated vegetal localization for 24 candidates and further characterized three genes expressed in the germ plasm. We identified novel germ plasm expression for reticulon 3.1, exd2 (a novel exonuclease-domain encoding gene), and a putative noncoding RNA. Further analysis of these and other localized RNAs will likely identify new functions of germ plasm and facilitate the identification of cis-acting RNA localization elements.

Identification of germ plasm-associated transcripts by microarray analysis of Xenopus vegetal cortex RNA.

La localisation d&#x26;#39;ARN est un m&#xE9;canisme commun de r&#xE9;glementation de la structure et les fonctions cellulaires. ARN localis&#xE9;es dans des ovocytes de Xenopus sont essentiels pour le d&#xE9;veloppement pr&#xE9;coce, y compris la sp&#xE9;cification lign&#xE9;e germinale par le plasma germinatif. Malgr&#xE9; l&#x26;#39;importance de ces ARN localis&#xE9;s, seulement environ 25 ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s et moins elles ont &#xE9;t&#xE9; caract&#xE9;ris&#xE9;es. Utilisation de puces &#xE0; ADN, nous avons identifi&#xE9; un grand nombre d&#x26;#39;ARN localis&#xE9;es du cortex v&#xE9;g&#xE9;tale. Dans l&#x26;#39;ensemble, nos r&#xE9;sultats indiquent un minimum de 275 ARN localis&#xE9;es dans les ovocytes, ou 2-3% des transcriptions maternels, qui sont en g&#xE9;n&#xE9;ral d&#x26;#39;accord avec les conclusions pr&#xE9;c&#xE9;dentes. Nous avons en outre valid&#xE9; la localisation v&#xE9;g&#xE9;tale pour 24 candidats et caract&#xE9;ris&#xE9; en outre trois g&#xE8;nes exprim&#xE9;s dans le plasma germinatif. Nous avons identifi&#xE9; roman d&#x26;#39;expression plasma germinatif pour reticulon 3.1, exd2 (un g&#xE8;ne codant pour roman-exonucl&#xE9;ase de domaine), et un ARN non codantes putatives. Une analyse plus pouss&#xE9;e de ces ARN et d&#x26;#39;autres localis&#xE9;s probablement d&#x26;#39;identifier de nouvelles fonctions de plasma germinatif et de faciliter l&#x26;#39;identification des &#xE9;l&#xE9;ments agissant en cis de localisation d&#x26;#39;ARN.

Identification de plasma germinatif associ&#xE9;s Transcriptions par analyse de Microarray de Xenopus Vegetal ARN Cortex

RNA-Lokalisierung ist ein gemeinsamer Mechanismus f&uuml;r die Regulierung der Zellenstruktur und Funktion. Lokalisierte RNAs in Xenopus Oocytes sind entscheidend f&uuml;r fr&uuml;he Entwicklung, einschlie&szlig;lich der Keimbahn-Spezifikation durch den Keim Plasm. Trotz der Bedeutung dieser lokalisierten RNAs nur ca. 25 wurden identifiziert und weniger funktional charakterisiert werden. Mit Microarrays, haben wir eine gro&szlig;e Anzahl von lokalisierten RNAs aus pflanzlichen Cortex identifiziert. Unsere Ergebnisse zeigen insgesamt mindestens 275 lokalisierte RNAs in Eizellen oder 2-3 % der m&uuml;tterlichen Abschriften, die im Allgemeinen mit fr&uuml;here Ergebnisse sind. Wir weiter validiert pflanzlichen Lokalisierung f&uuml;r 24 Kandidaten und weitere drei Gene in der Keim Plasm ausgedr&uuml;ckt gekennzeichnet. Wir identifizierten Roman Keim Plasm Ausdruck f&uuml;r Reticulon 3.1, exd2 (eine neuartige Exonuklease-Dom&auml;ne Kodierung Gene), und eine vermeintliche nichtkodierende RNA. Weitere Analyse dieser und andere lokalisierte RNAs werden Beschreibung der neue Funktionen der Keim Plasm und erleichtern die Identifizierung von Cis wirkende RNA Lokalisierung Elemente.

Kennung der Keim Plasm-assoziierte Transkripte von Microarray-Analyse von Xenopus pflanzlicher Kortex RNA.

Localizzazione di RNA &egrave; un meccanismo comune per la regolazione della funzione e struttura delle cellule. RNAs localizzata in ovociti di Xenopus sono critici per sviluppo precoce, inclusa germline specifica dal plasma del germe. Nonostante l&#39;importanza di questi RNAs localizzata, solo circa 25 sono stati identificati e funzionalmente meno caratterizzati. Usando i microarrays, abbiamo identificato un grande insieme di RNAs localizzata dalla corteccia vegetale. Nel complesso, i nostri risultati indicano un minimo di 275 RNAs localizzata in ovociti, o 2-3% delle trascrizioni materne, che sono in generale accordo con risultati precedenti. Abbiamo ulteriormente convalidato vegetali localizzazione per 24 candidati e ulteriormente caratterizzato tre geni espressi nel plasma del germe. Abbiamo identificato romanzo germe plasm espressione per reticulon 3.1, exd2 (un romanzo exonuclease-dominio codifica gene) e un RNA non codificante putativo. Un&#39;ulteriore analisi di questi e altri RNAs localizzato probabilmente identificare nuove funzioni del germe plasm ed agevolare l&#39;individuazione di elementi di localizzazione RNA cis-acting.

Article	Year
Repression of organizer genes in dorsal and ventral Xenopus cells mediated by maternal XTcf3. Development (Cambridge, England)\| PubMed ID: 12163405	2002
pygopus Encodes a nuclear protein essential for wingless/Wnt signaling. Development (Cambridge, England)\| PubMed ID: 12163411	2002
Cloning and expression of Xenopus Lrp5 and Lrp6 genes. Mechanisms of development\| PubMed ID: 12204281	2002
A novel role for a nodal-related protein; Xnr3 regulates convergent extension movements via the FGF receptor. Development (Cambridge, England)\| PubMed ID: 12668633	2003
The Xenopus LIM-homeodomain protein Xlim5 regulates the differential adhesion properties of early ectoderm cells. Development (Cambridge, England)\| PubMed ID: 12736213	2003
Maternal Xenopus Zic2 negatively regulates Nodal-related gene expression during anteroposterior patterning. Development (Cambridge, England)\| PubMed ID: 16207750	2005
Calcium fluxes in dorsal forerunner cells antagonize beta-catenin and alter left-right patterning. Development (Cambridge, England)\| PubMed ID: 18045845	2008
Maternal Tgif1 regulates nodal gene expression in Xenopus. Developmental dynamics : an official publication of the American Association of Anatomists\| PubMed ID: 18816846	2008
Maternal Interferon Regulatory Factor 6 is required for the differentiation of primary superficial epithelia in Danio and Xenopus embryos. Developmental biology\| PubMed ID: 19013452	2009
Image analysis of calcium release dynamics. Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)\| PubMed ID: 19099252	2008
Vegetally localized Xenopus trim36 regulates cortical rotation and dorsal axis formation. Development (Cambridge, England)\| PubMed ID: 19675128	2009
The use of antisense oligonucleotides in Xenopus oocytes. Methods (San Diego, Calif.)\| PubMed ID: 20045732	2010
Identification of germ plasm-associated transcripts by microarray analysis of Xenopus vegetal cortex RNA. Developmental dynamics : an official publication of the American Association of Anatomists\| PubMed ID: 20503379	2010
Use of fully modified 2'-O-methyl antisense oligos for loss-of-function studies in vertebrate embryos. Genesis (New York, N.Y. : 2000)\| PubMed ID: 21069798	2010
Use of fully modified 2'-O-methyl antisense oligos for loss-of-function studies in vertebrate embryos. Genesis (New York, N.Y. : 2000)\| PubMed ID: 21442720	2011

Douglas W. Houston

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