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Examination of the Telomere G-overhang Structure in <em>Trypanosoma brucei</em>

The telomere G-overhang structure has been identified in many eukaryotes including yeast, vertebrates, and Trypanosoma brucei. It serves as the substrate ...

Cleveland State University

&#x7AEF;&#x7C92;&#x7684;&#x957F;&#x5EA6;&#x662F;&#x90E8;&#x5206;&#x53D7;&#x9650;&#x5236;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x7AEF;&#x7C92;&#x5EF6;&#x957F;&#x7684;&#x987A;&#x5F0F;&#x8D1F;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x3002;&#x840C;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x8C03;&#x8282;&#x5668; scRap1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7AEF;&#x7C92; DNA &#x548C;&#x884C;&#x4E3A;&#x4EE5;&#x6291;&#x5236;&#x7AEF;&#x7C92;&#x5728;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x7684;&#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684; Rap1 ortholog hRap1 &#x6CA1;&#x6709;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7AEF;&#x7C92; DNA &#x76F4;&#x63A5;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5F81;&#x8058;&#x7531; TRF2 &#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7AEF;&#x7C92;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x5176;&#x5728;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x63A7;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6570;&#x636E;&#x7B26;&#x5408; hRap1 &#x6B63;&#x5728;&#x8D1F;&#x8C03;&#x8282;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x503C;&#x6307;&#x793A;&#x529F;&#x80FD;&#x4FDD;&#x62A4;&#x3002;&#x5220;&#x9664;&#x6620;&#x5C04;&#x8BC1;&#x5B9E;&#xFF0C;hRap1 &#x62F4;&#x7AEF;&#x7C92;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176; C &#x603B;&#x7AD9;&#x4E0E; TRF2 &#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x3002;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6; hRap1 &#x7A81;&#x53D8;&#x8868;&#x578B;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x57DF;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x8C03;&#x63A7;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684; BRCT &#x548C; Myb &#x57DF;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;scRap1 &#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5176; Myb &#x57DF;&#x4E0E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7AEF;&#x7C92;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4F7F;&#x7528;&#x5176; C &#x603B;&#x7AD9;&#x62DB;&#x8058; Rif1 &#x53CA; Rif2 &#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#x867D;&#x7136; Rap1 &#x5728;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7AEF;&#x7C92;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x6709;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x5F97;&#x5230;&#x4E86;&#x4FDD;&#x62A4;&#xFF0C;&#x662F; Rap1 &#x57DF;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6539;&#x53D8;&#x5728;&#x771F;&#x6838;&#x7684;&#x6F14;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;hRap1 &#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F3A;&#x4E4F; BRCT &#x57DF;&#x51CF;&#x5C11;&#x975E;&#x5747;&#x8D28;&#x6027;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7AEF;&#x7C92;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x8BE5; hRap1 &#x4E2D;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x5206;&#x5E03;&#x89C4;&#x7BA1;&#x4E5F;&#x6709;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Rap1 &#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x957F;&#x5EA6;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7AEF;&#x7C92;&#x7684;&#x5F02;&#x8D28;&#x6027;&#x3002;

Telomere length is controlled in part by cis-acting negative regulators that limit telomere extension by telomerase. In budding yeast, the major telomere length regulator scRap1 binds to telomeric DNA and acts to inhibit telomere elongation in cis. Because the human Rap1 ortholog hRap1 does not bind to telomeric DNA directly but is recruited to telomeres by TRF2, we examined its role in telomere length control. The data are consistent with hRap1 being a negative regulator of telomere length, indicating functional conservation. Deletion mapping confirmed that hRap1 is tethered to telomeres through interaction of its C terminus with TRF2. The telomere length phenotypes of hRap1 deletion mutants implicated both the BRCT and Myb domain as protein interaction domains involved in telomere length regulation. By contrast, scRap1 binds to telomeres with its Myb domains and uses its C terminus to recruit the telomere length regulators Rif1 and Rif2. Together, our data show that although the role of Rap1 at telomeres has been largely conserved, the domains of Rap1 have undergone extensive functional changes during eukaryotic evolution. Surprisingly, hRap1 alleles lacking the BRCT domain diminished the heterogeneity of human telomeres, indicating that hRap1 also plays a role in the regulation of telomere length distribution.

Rap1 affects the length and heterogeneity of human telomeres.

La longueur des t&#xE9;lom&#xE8;res est contr&#xF4;l&#xE9;e en partie par agissant en cis r&#xE9;gulateurs n&#xE9;gatifs qui limitent l&#x26;#39;extension des t&#xE9;lom&#xE8;res par la t&#xE9;lom&#xE9;rase. Dans la levure bourgeonnante, la majeure scRap1 t&#xE9;lom&#xE8;res r&#xE9;gulateur de longueur se lie &#xE0; l&#x26;#39;ADN t&#xE9;lom&#xE9;rique, et agit pour inhiber l&#x26;#39;allongement des t&#xE9;lom&#xE8;res en cis. Parce que l&#x26;#39;&#xEA;tre humain Rap1 hRap1 orthologue ne se lie pas directement l&#x26;#39;ADN t&#xE9;lom&#xE9;rique, mais est recrut&#xE9; pour t&#xE9;lom&#xE8;res par TRF2, nous avons examin&#xE9; son r&#xF4;le dans le contr&#xF4;le la longueur des t&#xE9;lom&#xE8;res. Les donn&#xE9;es sont compatibles avec hRap1 &#xE9;tant un r&#xE9;gulateur n&#xE9;gatif de la longueur des t&#xE9;lom&#xE8;res, ce qui indique une conservation fonctionnelle. Suppression de cartographie a confirm&#xE9; que hRap1 est attach&#xE9; &#xE0; t&#xE9;lom&#xE8;res gr&#xE2;ce &#xE0; l&#x26;#39;interaction de son extr&#xE9;mit&#xE9; C-terminale avec TRF2. Les ph&#xE9;notypes de la longueur des t&#xE9;lom&#xE8;res hRap1 mutants de d&#xE9;l&#xE9;tion impliqu&#xE9; &#xE0; la fois le BRCT et le domaine Myb comme des domaines d&#x26;#39;interaction de prot&#xE9;ines impliqu&#xE9;es dans la r&#xE9;gulation de la longueur des t&#xE9;lom&#xE8;res. En revanche, scRap1 se lie &#xE0; des t&#xE9;lom&#xE8;res avec ses domaines Myb et utilise son extr&#xE9;mit&#xE9; C-terminale de recruter les r&#xE9;gulateurs et la longueur des t&#xE9;lom&#xE8;res Rif1 Rif2. Ensemble, nos donn&#xE9;es montrent que, bien que le r&#xF4;le de Rap1 au t&#xE9;lom&#xE8;res a &#xE9;t&#xE9; en grande partie conserv&#xE9;, les domaines de Rap1 ont subi d&#x26;#39;importantes modifications fonctionnelles cours de l&#x26;#39;&#xE9;volution des eucaryotes. &#xC9;tonnamment, hRap1 all&#xE8;les qui n&#x26;#39;ont pas le domaine BRCT diminu&#xE9; l&#x26;#39;h&#xE9;t&#xE9;rog&#xE9;n&#xE9;it&#xE9; des t&#xE9;lom&#xE8;res humains, ce qui indique que hRap1 joue &#xE9;galement un r&#xF4;le dans la r&#xE9;gulation de la distribution la longueur des t&#xE9;lom&#xE8;res.

Rap1 influe sur la dur&#xE9;e et l&#x26;#39;h&#xE9;t&#xE9;rog&#xE9;n&#xE9;it&#xE9; des t&#xE9;lom&#xE8;res humains

Rap1 wirkt sich auf die L&#xE4;nge und die Heterogenit&#xE4;t der menschlichen Telomere.

Lunghezza dei telomeri &egrave; controllato in parte da cis-acting regolatori negativi che limitano l&#39;estensione dei telomeri di telomerasi. Nel lievito gemmante, il telomero principali lunghezza regolatore scRap1 si lega a telomerica DNA e atti a inibire allungamento telomeri in cis. Perch&eacute; l&#39;umano Rap1 ortholog hRap1 non legarsi al DNA telomeric direttamente ma &egrave; reclutato per telomeri di TRF2, abbiamo esaminato il suo ruolo nel controllo lunghezza telomeri. I dati sono coerenti con hRap1 essendo un regolatore negativo della lunghezza telomeri, che indica la conservazione funzionale. Soppressione mappatura ha confermato che hRap1 &egrave; legato ai telomeri attraverso l&#39;interazione del suo capolinea C con TRF2. I fenotipi di lunghezza telomeri di mutanti di delezione hRap1 implicato BRCT sia Myb dominio come domini di interazione di proteine coinvolte nella regolazione lunghezza telomeri. Al contrario, scRap1 si lega ai telomeri con i suoi domini Myb e utilizza il suo capolinea C per reclutare i regolatori di lunghezza telomeri Rif1 e Rif2. Insieme, i nostri dati mostrano che anche se il ruolo di Rap1 presso telomeri in gran parte conservato, i domini di Rap1 hanno subito vasti cambiamenti funzionali durante l&#39;evoluzione negli eucarioti. Sorprendentemente, gli alleli hRap1 manca il dominio BRCT diminuirono l&#39;eterogeneit&agrave; dei telomeri umani, che indica che hRap1 anche un ruolo nella regolazione della distribuzione di lunghezza telomeri.

Rap1 colpisce la lunghezza e l&#39;eterogeneit&agrave; dei telomeri umani.

&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306F;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x5B50;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B9;&#x4F5C;&#x7528;&#x8CA0;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;scRap1&#x306F;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;DNA&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3066;&#x30B7;&#x30B9;&#x3067;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x4F38;&#x9577;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;Rap1&#x306E;&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;hRap1&#x76F4;&#x63A5;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;DNA&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;TRF2&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x3078;&#x3068;&#x52D5;&#x54E1;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x9577;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;hRap1&#x304C;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4FDD;&#x5168;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x8CA0;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x524A;&#x9664;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;hRap1&#x304C;TRF2&#x3068;&#x306E;C&#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x305F;&#x3002; hRap1&#x6B20;&#x5931;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;&#x3001;BRCT&#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;MYB&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;scRap1&#x306F;MYB&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x5F53;&#x5C40;&#x306E;Rif1&#x3068;Rif2&#x3092;&#x52DF;&#x96C6;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;C&#x672B;&#x7AEF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Rap1&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;Rap1&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;BRCT&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x6B20;&#x304F;hRap1&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;hRap1&#x3082;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x7570;&#x8CEA;&#x6027;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;

Rap1&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x3068;&#x4E0D;&#x5747;&#x4E00;&#x6027;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;

Telomere &#xAE38;&#xC774; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; telomerase telomere &#xD655;&#xC7A5; &#xC81C;&#xD55C; cis &#xC5F0;&#xAE30; &#xB124;&#xAC70;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xC9C4; &#xD6A8; &#xBAA8;, &#xC8FC;&#xC694; telomere &#xAE38;&#xC774; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; scRap1 telomeric DNA&#xC640; &#xD589;&#xC704; cis&#xC5D0;&#xC11C; telomere &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; Rap1 ortholog hRap1 telomeric DNA&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xAE30; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; TRF2 telomeres&#xB97C; &#xBAA8;&#xC9D1;, &#xC870;&#xC0AC;&#xD55C; telomere &#xAE38;&#xC774; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560;. &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; Hrap1&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xB418; &#xACE0;, &#xAE30;&#xB2A5; &#xBCF4;&#xC874;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; telomere &#xAE38;&#xC774; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;. &#xC0AD;&#xC81C; &#xB9E4;&#xD551; &#xD655;&#xC778; &#xADF8; Hrap1&#xC758; C &#xB9D0;&#xB2E8;&#xC758; trf2&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; telomeres &#xB2FF;&#xB294; &#xACF3;. HRap1 &#xC0AD;&#xC81C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; telomere &#xAE38;&#xC774; &#xACE0;&#xAE30; telomere &#xAE38;&#xC774; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; BRCT Myb &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC5F0;&#xB8E8;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, scRap1 Myb &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xACFC; telomeres&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; C &#xB9D0;&#xB2E8;&#xC758;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; Rif1 &#xBC0F; Rif2 telomere &#xAE38;&#xC774; &#xADDC;&#xC81C;&#xB97C; &#xBAA8;&#xC9D1;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; telomeres Rap1 &#xC5ED;&#xD560; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xBCF4;&#xC874; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; Rap1 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC1B;&#xC740; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC9C4; &#xD575; &#xC9C4;&#xD654; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, hRap1 &#xB300;&#xB9BD; BRCT &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBD80;&#xC871; &#xAC10;&#xC18C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; telomeres&#xC774; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xD574;&#xB2F9; hRap1 &#xB610;&#xD55C; telomere &#xAE38;&#xC774; &#xBD84;&#xD3EC;&#xC758; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;.

Rap1 &#xAE38;&#xC774; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; telomeres&#xC758;&#xC774; &#xC9C8;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Longitud de los tel&#xF3;meros est&#xE1; controlado en parte por la acci&#xF3;n cis reguladores negativos que limitan la extensi&#xF3;n de los tel&#xF3;meros por la telomerasa. En la levadura en ciernes, el principal regulador de la longitud del tel&#xF3;mero scRap1 se une al ADN telom&#xE9;rico y act&#xFA;a para inhibir la elongaci&#xF3;n de los tel&#xF3;meros en cis. Debido a que el ser humano Rap1 hRap1 ortholog no se une al ADN telom&#xE9;rico directamente, sino que se recluta a los tel&#xF3;meros por la TRF2, hemos examinado su papel en el control de la longitud del tel&#xF3;mero. Los datos son consistentes con hRap1 ser un regulador negativo de la longitud de los tel&#xF3;meros, lo que indica la conservaci&#xF3;n funcional. Asignaci&#xF3;n de eliminaci&#xF3;n confirm&#xF3; que hRap1 est&#xE1; atado a los tel&#xF3;meros a trav&#xE9;s de la interacci&#xF3;n de su terminal C con TRF2. Los fenotipos de longitud de los tel&#xF3;meros de los mutantes de deleci&#xF3;n hRap1 implicados tanto el BRCT y el dominio Myb como dominios de interacci&#xF3;n de prote&#xED;nas involucradas en la regulaci&#xF3;n de la longitud del tel&#xF3;mero. Por el contrario, se une a los tel&#xF3;meros scRap1 con sus dominios Myb y utiliza su terminal C para reclutar a los reguladores de longitud de los tel&#xF3;meros y la Rif1 Rif2. En conjunto, nuestros datos muestran que aunque el papel de Rap1 en los tel&#xF3;meros se ha conservado en gran parte, los dominios de Rap1 ha sido sometido a cambios funcionales durante la evoluci&#xF3;n de los eucariotas. Sorprendentemente, hRap1 alelos que carecen del dominio BRCT disminuye la heterogeneidad de los tel&#xF3;meros humanos, lo que indica que hRap1 tambi&#xE9;n juega un papel en la regulaci&#xF3;n de la distribuci&#xF3;n de longitud de los tel&#xF3;meros.

Rap1 afecta a la longitud de los tel&#xF3;meros y la heterogeneidad Humanos

&#x5047;&#x5B9A; TTAGGG &#x91CD;&#x590D;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x56E0;&#x5B50; (&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;) &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x79CD;&#x9525;&#x4F53;&#x3001; &#x79CD;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x539F;&#x866B;&#x4E3B;&#x8981;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5728;&#x5176; C &#x7EC8;&#x7AEF; DNA &#x7ED3;&#x5408; myb &#x57DF;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176; N &#x7AEF;&#x57DF;&#x4E2D;&#x53EA;&#x5F31;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#x9AD8;&#x771F;&#x6838;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x91CD;&#x5927;&#x5E8F;&#x5217;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#x3002;T.&#x9525;&#x4F53;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355; (tbTRF) &#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x663E;&#x793A;&#x8981;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TTAGGG &#x91CD;&#x590D;&#x7684;&#x53CC;&#x9762;&#x6253;&#x5370;&#x3002;RNA &#x5E72;&#x6270;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x7684; tbTRF &#x902E;&#x6355;&#x90E8;&#x5206;&#x9636;&#x6BB5; S G (2) /M &#x548C; procyclic &#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x8840;&#x6DB2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5C31;&#x529F;&#x80FD;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;tbTRF &#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; TRF2 &#x8D85;&#x8FC7; TRF1&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x7AEF;&#x7C92;&#x5355;&#x7EDE; G &#x60AC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x51CF;&#x5F31;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; tbTRF&#xFF0C;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269; TRF2&#xFF0C;&#x50CF;&#x662F;&#x57FA;&#x672C;&#x7ED3;&#x675F;&#x4FDD;&#x62A4;&#x7AEF;&#x7C92;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x8FD9;&#x8FD8;&#x652F;&#x6301;&#x5047;&#x8BF4;&#x7684;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x5BC4;&#x800C;&#x4E0D; Rap1 &#x662F;&#x7AEF;&#x7C92;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x66F4;&#x53E4;&#x8001; DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A; T.&#x9525;&#x4F53;&#x7AEF;&#x7C92; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x548C;&#x8868;&#x5F81;&#x5176;&#x529F;&#x80FD;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65B0;&#x7684;&#x8DEF;&#x7EBF;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x63A2;&#x8BA8;&#x5728;&#x6B64;&#x673A;&#x4F53;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7AEF;&#x7C92;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x4E5F;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x6709;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x6A21;&#x578B;&#x5EFA;&#x7ACB; T.&#x9525;&#x4F53;&#x3002;

&#x514B;&#x6C0F;&#x9525;&#x866B;&#x7AEF;&#x7C92;&#x53D7;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; TRF2&#x3002;

Putative TTAGGG repeat-binding factor (TRF) homologues in the genomes of Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, and Leishmania major were identified. They have significant sequence similarity to higher eukaryotic TRFs in their C-terminal DNA-binding myb domains but only weak similarity in their N-terminal domains. T. brucei TRF (tbTRF) is essential and was shown to bind to duplex TTAGGG repeats. The RNA interference-mediated knockdown of tbTRF arrested bloodstream cells at G(2)/M and procyclic cells partly at S phase. Functionally, tbTRF resembles mammalian TRF2 more than TRF1, as knockdown diminished telomere single-stranded G-overhang signals. This suggests that tbTRF, like vertebrate TRF2, is essential for telomere end protection, and this also supports the hypothesis that TRF rather than Rap1 is the more ancient DNA-binding component of the telomere protein complex. Identification of the first T. brucei telomere DNA-binding protein and characterization of its function provide a new route to explore the roles of telomeres in pathogenesis of this organism. This work also establishes T. brucei as an attractive model for telomere biology.

Trypanosome telomeres are protected by a homologue of mammalian TRF2.

Putatifs TTAGGG r&#xE9;p&#xE9;tition de liaison des facteurs (TRF) homologues dans les g&#xE9;nomes de Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, et Leishmania major ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s. Ils ont une similarit&#xE9; de s&#xE9;quence significative &#xE0; la hausse des TRF eucaryotes dans leurs domaines liant l&#x26;#39;ADN C-terminales myb, mais de faible similarit&#xE9; dans leurs domaines N-terminaux. T. brucei TRF (tbTRF) est essentielle et a &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; pour se lier &#xE0; r&#xE9;p&#xE9;titions TTAGGG duplex. L&#x26;#39;ARN interf&#xE9;rence m&#xE9;di&#xE9;e par des cellules knock-down tbTRF sanguines arr&#xEA;t&#xE9;s &#xE0; G (2) / M et les cellules procycliques partie &#xE0; la phase S. Fonctionnellement, tbTRF ressemble mammif&#xE8;res TRF2 plus de TRF1, comme knockdown diminu&#xE9; t&#xE9;lom&#xE8;res simple brin G-surplombent signaux. Ceci sugg&#xE8;re que tbTRF, comme vert&#xE9;br&#xE9; TRF2, est essentiel pour la protection des t&#xE9;lom&#xE8;res fin, et cela appuie aussi l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se que TRF plut&#xF4;t que Rap1 est la plus ancienne liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN composant du complexe prot&#xE9;ique des t&#xE9;lom&#xE8;res. Identification de la premi&#xE8;re des t&#xE9;lom&#xE8;res de T. brucei DNA-binding protein et la caract&#xE9;risation de sa fonction de fournir un nouvel itin&#xE9;raire pour explorer les r&#xF4;les des t&#xE9;lom&#xE8;res dans la pathogen&#xE8;se de cet organisme. Ce travail &#xE9;tablit &#xE9;galement T. brucei comme un mod&#xE8;le int&#xE9;ressant pour la biologie des t&#xE9;lom&#xE8;res.

Les t&#xE9;lom&#xE8;res des trypanosomes sont prot&#xE9;g&#xE9;s par un homologue de TRF2 mammif&#xE8;res

Trypanosomen Telomere werden durch ein Homolog von S&#xE4;ugetieren TRF2 gesch&#xFC;tzt.

Sono stati identificati degli putativi TTAGGG repeat binding factor (TRF) omologhi in genomi di Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi e Leishmania major. Essi hanno somiglianza di sequenza significativa di TRFs eucarioti superiori nei loro domini myb C-terminale del DNA-binding ma solo debole somiglianza nei loro domini N-terminale. T. brucei TRF (tbTRF) &egrave; essenziale ed &egrave; stato mostrato da associare a duplex TTAGGG si ripete. L&#39;atterramento di RNA interference-mediata di tbTRF arrestato le cellule del sangue alle cellule m e prociclico G (2) parzialmente in fase S. Funzionalmente, tbTRF assomiglia a TRF2 dei mammiferi pi&ugrave; TRF1, come knockdown diminuita segnali G-sporgenza di telomeri single-stranded. Questo suggerisce che tbTRF, come TRF2 vertebrato, &egrave; essenziale per la protezione fine telomeri e questo supporta l&#39;ipotesi che TRF anzich&eacute; Rap1 &egrave; il componente di DNA-binding pi&ugrave; antico del complesso proteico telomeri. Identificazione del prima T. brucei telomeri DNA-proteina e caratterizzazione della sua funzione di fornire una nuova rotta per esplorare i ruoli dei telomeri nella patogenesi di questo organismo. Questo lavoro stabilisce anche il T. brucei come un modello attraente per la biologia dei telomeri.

Telomeri trypanosome sono protetti da un omologo di TRF2 dei mammiferi.

&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x3001;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5;&#x30DE;&#x30CB;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x3068;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;TTAGGG&#x30EA;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C8;&#x7D50;&#x5408;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;TRF&#xFF09;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x304C;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;C&#x672B;&#x7AEF;DNA&#x7D50;&#x5408;MYB&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x9AD8;&#x7B49;&#x771F;&#x6838;TRFs&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x914D;&#x5217;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;N&#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x306E;&#x307F;&#x5F31;&#x3044;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; T.&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;TRF&#xFF08;tbTRF&#xFF09;&#x304C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x4E8C;&#x91CD;TTAGGG&#x306E;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; G&#xFF08;2&#xFF09;/ M&#x3068;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;S&#x671F;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;tbTRF&#x902E;&#x6355;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8840;&#x6D41;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;RNA&#x5E72;&#x6E09;&#x5A92;&#x4ECB;&#x6027;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3002;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;tbTRF&#x306F;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x4E00;&#x672C;&#x9396;&#x306E;G-&#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;TRF1&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;TRF2&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;tbTRF&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;TRF2&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x672B;&#x7AEF;&#x4FDD;&#x8B77;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3082;&#x3080;&#x3057;&#x308D;Rap1&#x306E;&#x3088;&#x308A;TRF&#x304C;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x53E4;&#x4EE3;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x6210;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;T.&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x63A2;&#x6C42;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;T.&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306F;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;TRF2&#x306E;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x3067;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;

&#xC0C1; TTAGGG &#xBC18;&#xBCF5; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC778;&#xC790; (TRF) homologues Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi&#xC640; &#xC8FC;&#xC694; Leishmania&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; N &#xB9E8;&#xB05D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xB9CC; &#xC57D;&#xD55C; &#xC720;&#xC0AC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; myb &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC744; &#xB192;&#xC740; &#xC9C4; &#xD575; Trfs&#xC5D0; &#xC788;&#xB2E4;. T. brucei &#xC7AC;&#xB2E8; (tbTRF) &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xBA70; &#xC774;&#xC911; TTAGGG &#xBC18;&#xBCF5; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. Tbtrf&#xC758; RNA &#xAC04;&#xC12D; &#xC911;&#xC7AC; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; S &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; G (2) /M &#xBC0F; procyclic &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD608; &#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xCCB4;&#xD3EC;. &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, tbTRF TRF1, &#xCD5C;&#xC800;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; telomere &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; G &#xAC78;&#xB9AC;&#xB2E4; &#xC2E0;&#xD638; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; TRF2 &#xC720;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xCC99;&#xCD94; TRF2 &#xAC19;&#xC740; tbTRF telomere &#xCD5C;&#xC885; &#xBCF4;&#xD638;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4; &#xD558; &#xACE0; &#xB610;&#xD55C; &#xADF8; &#xC7AC;&#xB2E8; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; Rap1 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; telomere &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xACE0; &#xB300; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; T. brucei telomere DNA &#xBB36;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; telomeres&#xC774;&#xC774; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; pathogenesis&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD0D0;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xC0C8; &#xACBD;&#xB85C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC791;&#xD488;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; telomere &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xB825;&#xC801;&#xC778; &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; T. brucei&#xC744; &#xC124;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Trypanosome telomeres &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; TRF2 homologue&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCF4;&#xD638; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Putativos de uni&#xF3;n repetici&#xF3;n TTAGGG-factor (TRF) hom&#xF3;logos en el genoma de Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi y Leishmania major, fueron identificados. Tienen similitud de secuencia significativa al aumento de TRFs eucariotas en sus dominios C-terminales myb de uni&#xF3;n al ADN, pero s&#xF3;lo una d&#xE9;bil similitud en sus N-terminal de dominios. T. brucei TRF (tbTRF) es esencial y se demostr&#xF3; que se unen a repeticiones TTAGGG d&#xFA;plex. El ARN de interferencia mediada por el derribo de las c&#xE9;lulas del torrente sangu&#xED;neo tbTRF detenidas en G (2) / M y c&#xE9;lulas proc&#xED;clico en parte, en la fase S. Funcionalmente, se asemeja a los mam&#xED;feros tbTRF TRF2 m&#xE1;s de TRF1, como ca&#xED;da disminuido los tel&#xF3;meros de cadena simple voladizo G-se&#xF1;ales. Esto sugiere que tbTRF, al igual que los vertebrados TRF2, es esencial para la protecci&#xF3;n de los tel&#xF3;meros final, y esto tambi&#xE9;n apoya la hip&#xF3;tesis de que el TRF en lugar de Rap1 es la m&#xE1;s antigua de uni&#xF3;n al ADN componente del complejo de prote&#xED;na de los tel&#xF3;meros. Identificaci&#xF3;n de los primeros en T. brucei tel&#xF3;meros del ADN-prote&#xED;na de uni&#xF3;n y la caracterizaci&#xF3;n de su funci&#xF3;n de proporcionar una nueva v&#xED;a para explorar el papel de los tel&#xF3;meros en la patog&#xE9;nesis de este microorganismo. Este trabajo tambi&#xE9;n establece T. brucei como un atractivo modelo para la biolog&#xED;a de los tel&#xF3;meros.

Los tel&#xF3;meros de tripanosomas est&#xE1;n protegidos por un hom&#xF3;logo de mam&#xED;feros TRF2

&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x9176; (&#x53D4;) &#x7684;&#x7EC4;&#x6210;&#x548C;&#x5305;&#x542B;&#x7AEF;&#x7C92;&#x91CD;&#x590D;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x6A21;&#x677F;&#x7684; RNA&#x3002;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x9632;&#x6B62;&#x7AEF;&#x7C92;&#x4FB5;&#x8680;&#x548C;&#x5176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x6216;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x53D1;&#x751F;&#x548C;&#x8001;&#x9F84;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x5DF2;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x4E2D;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5728; kinetoplastid &#x539F;&#x751F;&#x52A8;&#x7269;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x79CD;&#x9525;&#x4F53;&#xFF0C;&#x975E;&#x6D32;&#x660F;&#x7761;&#x75C5;&#x7684;&#x75C5;&#x6E90;&#x4F53;&#x901A;&#x8FC7;&#x9891;&#x7E41;&#x66F4;&#x6539;&#x5176;&#x53D8;&#x4F53;&#x8868;&#x9762;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D; (&#x53EF;&#x89C6;&#x5E94;&#x529B;&#x7B49;&#x7EA7;) &#x9003;&#x907F;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x5355;&#x4E00;&#x8868;&#x793A;&#x53EF;&#x89C6;&#x5E94;&#x529B;&#x7B49;&#x7EA7;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4ECE;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5927;&#x7EA6; 20 &#x6742;&#x4EA4; &#39; &#x8868;&#x8FBE;&#x7F51;&#x7AD9; &#39;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728;&#x53EF;&#x89C6;&#x5E94;&#x529B;&#x7B49;&#x7EA7;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x8282;&#x65B9;&#x9762;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#x7AEF;&#x7C92;&#x548C;&#x5207;&#x6362;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x548C; T.brucei &#x53D4;&#x57FA;&#x56E0;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x3002;&#x5220;&#x53BB;&#x53D4;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6BCF;&#x4E00;&#x4EE3;&#x7684; 3-6 bp &#x7AEF;&#x7C92;&#x9010;&#x6E10;&#x7F29;&#x77ED;&#x3002;&#x5176;&#x4ED6;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x7F29;&#x77ED;&#x7387;&#x662F;&#x7EC8;&#x7AEF;&#xFF09; 3&#39; &#x5355;&#x94FE;&#x5EF6;&#x4F38;&#x7684;&#x957F;&#x5EA6;&#x6210;&#x6B63;&#x6BD4;&#x3002;&#x5728; T.brucei&#xFF0C;G &#x5EF6;&#x4F38;&#x662F;&#x65E0;&#x6CD5;&#x63A2;&#x6D4B; &#xFF08;&lt; 30 nt) &#x51DD;&#x80F6;&#x4E2D;&#x6742;&#x4EA4;&#x6CD5;&#x3002;&#x7AEF;&#x7C92;&#x7F29;&#x77ED;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x540C;&#x610F;&#x9884;&#x6D4B;&#x7F29;&#x77ED;&#x7531;&#x4E8E;&#x7ED3;&#x675F;&#x590D;&#x5236;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0E; G &#x5EF6;&#x4F38;&#x5F88;&#x77ED;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x662F;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x3002;&#x9525;&#x866B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x64CD;&#x7EB5;&#x5176;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E2D;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x53D8;&#x5F02;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7AEF;&#x7C92;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x7AEF;&#x7C92;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x4E2D;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x7F3A;&#x9677;&#x79CD;&#x9525;&#x4F53;&#x7F29;&#x77ED;&#x3002;

Telomerase consists of a reverse transcriptase (TERT) and an RNA that contains a template for telomere-repeat extension. Telomerase is required to prevent telomere erosion and its activity or lack thereof is important for tumorigenesis and ageing. Telomerase has been identified in numerous organisms but it has not been studied in kinetoplastid protozoa. Trypanosoma brucei, the causative agent of African sleeping sickness, evades the host immune response by frequently changing its variant surface glycoprotein (VSG). The single expressed VSG is transcribed from one of approximately 20 subtelomeric 'Expression Sites', but the role telomeres might play in regulating VSG transcription and switching is unknown. We identified and sequenced the T.brucei TERT gene. Deleting TERT resulted in progressive telomere shortening of 3-6 bp per generation. In other organisms, the rate of telomere shortening is proportional to the length of the terminal 3' single-strand overhang. In T.brucei, G-overhangs were undetectable (<30 nt) by in-gel hybridization. The rate of telomere shortening therefore, agrees with the predicted shortening due to the end replication problem, and is consistent with our observation that G-overhangs are short. Trypanosomes whose telomere length can be manipulated provide a new tool to investigate the role of telomeres in antigenic variation.

Telomere structure and shortening in telomerase-deficient Trypanosoma brucei.

T&#xE9;lom&#xE9;rase comprend une transcriptase inverse (TERT) et une ARN qui contient une matrice pour l&#x26;#39;extension de r&#xE9;p&#xE9;tition t&#xE9;lom&#xE8;re. La t&#xE9;lom&#xE9;rase est n&#xE9;cessaire pour pr&#xE9;venir l&#x26;#39;&#xE9;rosion des t&#xE9;lom&#xE8;res et de son activit&#xE9; ou de l&#x26;#39;absence de celui-ci est important pour la tumorigen&#xE8;se et le vieillissement. La t&#xE9;lom&#xE9;rase a &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;e dans de nombreux organismes, mais il n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9; chez les protozoaires kin&#xE9;toplastide. Trypanosoma brucei, l&#x26;#39;agent causal de la maladie du sommeil africaine, &#xE9;lude la r&#xE9;ponse immunitaire de l&#x26;#39;h&#xF4;te en changeant fr&#xE9;quemment de sa glycoprot&#xE9;ine de surface (VSG). Le VSG exprim&#xE9; unique est transcrit &#xE0; partir l&#x26;#39;une des quelque 20 &#x26;#39;sites d&#x26;#39;expression des subt&#xE9;lom&#xE9;riques, mais les t&#xE9;lom&#xE8;res r&#xF4;le que pourraient jouer dans la r&#xE9;gulation de la transcription VSG et de commutation est inconnue. Nous avons identifi&#xE9; et s&#xE9;quenc&#xE9; le g&#xE8;ne TERT T. brucei. Suppression TERT entra&#xEE;n&#xE9; le raccourcissement des t&#xE9;lom&#xE8;res progressive de 3-6 pb par g&#xE9;n&#xE9;ration. En d&#x26;#39;autres organismes, le taux de raccourcissement des t&#xE9;lom&#xE8;res est proportionnelle &#xE0; la longueur du terminal 3 &#x26;#39;simple brin en surplomb. Dans T. brucei, G-surplombs &#xE9;taient ind&#xE9;tectables (&#x26;lt;30 nt) par hybridation en gel. Le taux de raccourcissement des t&#xE9;lom&#xE8;res est donc d&#x26;#39;accord avec le raccourcissement pr&#xE9;vu en raison du probl&#xE8;me de r&#xE9;plication fin, et est compatible avec notre observation que le G-surplombs sont courts. Les trypanosomes dont la longueur des t&#xE9;lom&#xE8;res peut &#xEA;tre manipul&#xE9; de fournir un nouvel outil pour &#xE9;tudier le r&#xF4;le des t&#xE9;lom&#xE8;res dans la variation antig&#xE9;nique.

Structure des t&#xE9;lom&#xE8;res et la t&#xE9;lom&#xE9;rase dans Raccourcissement-d&#xE9;ficient Trypanosoma brucei

Telomere Struktur und die Verk&#xFC;rzung in Telomerase-defizienten Trypanosoma brucei.

La telomerasi &egrave; costituito da una trascrittasi inversa (TERT) e un RNA che contiene un modello per estensione dei telomeri-ripetizione. La telomerasi &egrave; necessaria per prevenire l&#39;erosione dei telomeri e sua attivit&agrave; o la loro mancanza &egrave; importante per la tumorigenesi e invecchiamento. La telomerasi &egrave; stata identificata in numerosi organismi, ma non &egrave; stato studiato in Kinetoplastea protozoi. Trypanosoma brucei, l&#39;agente eziologico della malattia del sonno africana, sfugge la risposta immunitaria cambiando frequentemente la glicoproteina di superficie variante (VSG). L&#39;unico espresso VSG &egrave; trascritto da uno dei circa 20 subtelomerica &#39;Espressione siti&#39;, ma potrebbero giocare dei telomeri ruolo nella regolazione della trascrizione VSG e commutazione &egrave; sconosciuto. Abbiamo identificato e sequenziato il gene T.brucei TERT. L&#39;eliminazione di TERT provocato accorciamento del telomero progressivo di 3-6 bp per generazione. In altri organismi, il tasso dei telomeri accorciamento &egrave; proporzionale alla lunghezza dello sbalzo terminale 3&#39; single-strand. In T.brucei, G-sporgenze erano rilevabili (&lt; 30 nt) tramite l&#39;ibridazione in gel. Il tasso di accorciamento dei telomeri pertanto, concorda con l&#39;accorciamento del previsto a causa del problema di replica end ed &egrave; coerenza con la nostra osservazione che G-sporgenze sono brevi. Tripanosomi cui lunghezza dei telomeri pu&ograve; essere manipolato forniscono un nuovo strumento per indagare il ruolo dei telomeri in variazione antigenica.

Struttura dei telomeri e accorciamento nella telomerasi-carenti Trypanosoma brucei.

&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x30EA;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C8;&#x62E1;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;&#x9175;&#x7D20;&#xFF08;TERT&#xFF09;&#x3068;RNA&#x304B;&#x3089;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x6D78;&#x98DF;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F;&#x6B20;&#x5982;&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x5F62;&#x6210;&#x3084;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x3067;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x30AD;&#x30CD;&#x30C8;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C8;&#x539F;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x7814;&#x7A76;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x7761;&#x7720;&#x75C5;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x5909;&#x7570;&#x8868;&#x9762;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;VSG&#xFF09;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5FCC;&#x907F;&#x3002;&#x5358;&#x4E00;&#x8868;&#x660E;VSG&#x306F;&#x3001;&#x7D04;20&#x30B5;&#x30D6;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2; &#x26;quot;&#x767A;&#x73FE;&#x90E8;&#x4F4D;&#x26;quot;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x304B;&#x3089;&#x8EE2;&#x5199;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5F79;&#x5272;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306F;VSG&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;T.brucei TERT&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; TERT&#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x4E16;&#x4EE3;&#x3054;&#x3068;&#x306B;3&#x304B;&#x3089;6 bp&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x7684;&#x306A;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x77ED;&#x7E2E;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x77ED;&#x7E2E;&#x7387;&#x306F;&#x3001;&#x7AEF;&#x672B;3 &#x26;#39;&#x4E00;&#x672C;&#x9396;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306B;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; T.brucei&#x3067;&#x306F;&#x3001;G-&#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x30B2;&#x30EB;&#x5185;&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#xFF08;&#x26;lt;30 NT&#xFF09;&#x306F;&#x691C;&#x77E5;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x77ED;&#x7E2E;&#x7387;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306E;&#x77ED;&#x7E2E;&#x306B;&#x540C;&#x610F;&#x3057;&#x3001;G-&#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x77ED;&#x3044;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x6B20;&#x640D;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;

Telomerase &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; (TERT)&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xBC0F; telomere &#xBC18;&#xBCF5; &#xD655;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; RNA. Telomerase telomere &#xCE68;&#xC2DD;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC774;&#xBA70; &#xD65C;&#xB3D9; &#xB610;&#xB294; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC740; tumorigenesis &#xBC0F; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;. &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; Telomerase &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; kinetoplastid &#xC6D0;&#xC0DD; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Trypanosoma brucei, &#xC544;&#xD504;&#xB9AC;&#xCE74; &#xC218; &#xBA74; &#xBCD1;&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;&#xC774; &#xB418;&#xB294; &#xB300;&#xB9AC;&#xC778;&#xC758; &#xBCC0;&#xD615; &#xD45C;&#xBA74; &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (VSG)&#xB97C; &#xC790;&#xC8FC; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558; &#xC5EC; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5; evades. &#xB2E8;&#xC77C; &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; VSG &#xC57D; 20 subtelomeric &#39; &#xC2DD; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#39; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC0AC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC5ED;&#xD560; telomeres VSG &#xC804;&#xC0AC; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC640; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE6D; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; T.brucei TERT &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xB300; &#xB2F9; 3-6 &#xD608;&#xC555;&#xC758; &#xC9C4;&#xBCF4;&#xC801;&#xC778; telomere &#xB2E8;&#xCD95; &#xACB0;&#xACFC; TERT &#xC0AD;&#xC81C;. &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; telomere &#xB2E8;&#xCD95;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4;&#xAC00; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; 3&#39; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; &#xB3CC;&#xCD9C;&#xBD80;&#xC758; &#xAE38;&#xC774;&#xC5D0; &#xBE44;&#xB840; &#xD55C;&#xB2E4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. T.brucei, G-&#xB3CC;&#xCD9C;&#xBD80; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; (&lt; 30 nt) &#xC824;&#xC5D0; &#xAD50; &#xC7A1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; telomere&#xC758; &#xB2E8;&#xCD95; &#xC18D;&#xB3C4; &#xCD5C;&#xC885; &#xBCF5;&#xC81C; &#xBB38;&#xC81C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xC608;&#xCE21;&#xB41C; &#xB2E8;&#xCD95; &#xB3D9;&#xC758; &#xD558; &#xACE0; G-&#xC624;&#xBC84;&#xD589;&#xC740; &#xC9E7;&#xC740; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAD00;&#xCC30;&#xACFC; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294;. Telomere &#xAE38;&#xC774; &#xC870;&#xC791;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; trypanosomes &#xD56D; &#xC6D0; &#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0; telomeres&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC;&#xD560; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Telomere &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; telomerase &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; Trypanosoma brucei&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xCD95;.

La telomerasa se compone de una transcriptasa inversa (TERT) y un ARN que contiene una plantilla para la extensi&#xF3;n de los tel&#xF3;meros de repetici&#xF3;n. La telomerasa es necesaria para evitar la erosi&#xF3;n del tel&#xF3;mero y su actividad o la falta del mismo es importante para la tumorig&#xE9;nesis y el envejecimiento. La telomerasa ha sido identificada en numerosos organismos, pero no ha sido estudiado en kinetopl&#xE1;stido protozoos. Trypanosoma brucei, el agente causal de la enfermedad africana del sue&#xF1;o, evade la respuesta inmune del hu&#xE9;sped al cambiar frecuentemente la glicoprote&#xED;na variante de superficie (VSG). La VSG sola expresado se transcribe a partir del uno de aproximadamente 20 &#x26;#39;sitios de expresi&#xF3;n de los subtelomeric, pero los tel&#xF3;meros papel que podr&#xED;an desempe&#xF1;ar en la regulaci&#xF3;n de la transcripci&#xF3;n de VSG y el cambio es desconocida. Hemos identificado y secuenciado el gen TERT T. brucei. Eliminaci&#xF3;n de TERT dio lugar a un acortamiento progresivo de los tel&#xF3;meros de 3-6 pb por generaci&#xF3;n. En otros organismos, la tasa de acortamiento de los tel&#xF3;meros es proporcional a la longitud del terminal 3 &#x26;#39;de una sola hebra voladizo. En T. brucei, G-voladizos fueron indetectables (&#x26;lt;30 nt) por hibridaci&#xF3;n en gel. La tasa de acortamiento de los tel&#xF3;meros por lo tanto, est&#xE1; de acuerdo con la reducci&#xF3;n prevista por el problema de replicaci&#xF3;n final, y es consistente con nuestra observaci&#xF3;n de que G-voladizos son cortos. Los tripanosomas cuya longitud de los tel&#xF3;meros puede ser manipulada proporcionar una nueva herramienta para investigar el papel de los tel&#xF3;meros en la variaci&#xF3;n antig&#xE9;nica.

Estructura de los tel&#xF3;meros y la telomerasa en la manteca con deficiencia de Trypanosoma brucei

&#x7AEF;&#x7C92;&#x662F;&#x4E13;&#x95E8;&#x7A33;&#x5B9A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x672B;&#x7AEF;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x62A4;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x514D;&#x53D7; nucleolytic &#x9000;&#x5316;&#x548C;&#x975E;&#x5A5A;&#x751F;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684; DNA-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x7AEF;&#x7C92;&#x5F62;&#x6210;&#x5F02;&#x8272;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x5B83;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6291;&#x5236;&#x76F8;&#x90BB;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x6784;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x79CD;&#x9525;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x89D2;&#x8272;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x8FBE;&#x5176;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x9636;&#x6BB5;&#x4ECE;&#x6742;&#x4EA4;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F4D;&#x70B9;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x9525;&#x866B;&#x4E0E;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#xFF0C;&#x5747;&#x53D7;&#x5230;&#x4FDD;&#x80B2;&#x548C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x589E;&#x957F;&#x548C;&#x7834;&#x635F;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x91CD;&#x590D;&#x4E86;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x89C4;&#x7BA1;&#x9525;&#x866B;&#x7684;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x53D8;&#x5F02;&#x7684;&#x5047;&#x8BF4;&#x3002;

&#x7AEF;&#x7C92;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x9525;&#x866B;&#xFF1A; &#x4E00;&#x9879;&#x63D0;&#x6848;&#x3002;

Telomeres are specialized DNA-protein complexes that stabilize chromosome ends, protecting them from nucleolytic degradation and illegitimate recombination. Telomeres form a heterochromatic structure that can suppress the transcription of adjacent genes. These structures might have additional roles in Trypanosoma brucei, as the major surface antigens of this parasite are expressed during its infectious stages from subtelomeric loci. We propose that the telomere protein complexes of trypanosomes and vertebrates are conserved and offer the hypothesis that growth and breakage of telomeric repeats has an important role in regulating parasite antigenic variation in trypanosomes.

Telomere structure and function in trypanosomes: a proposal.

Les t&#xE9;lom&#xE8;res sont sp&#xE9;cialis&#xE9;s ADN-prot&#xE9;ines complexes qui stabilisent les extr&#xE9;mit&#xE9;s des chromosomes, les prot&#xE9;geant de la d&#xE9;gradation de nucl&#xE9;olytique et recombinaison ill&#xE9;gitime. T&#xE9;lom&#xE8;res former une structure h&#xE9;t&#xE9;rochromatique qui peuvent supprimer la transcription des g&#xE8;nes adjacents. Ces structures pourraient avoir des r&#xF4;les suppl&#xE9;mentaires dans Trypanosoma brucei, comme les antig&#xE8;nes de surface majeures de ce parasite sont exprim&#xE9;s au cours de ses stades infectieux de loci subt&#xE9;lom&#xE9;riques. Nous proposons que les complexes prot&#xE9;iques des t&#xE9;lom&#xE8;res des trypanosomes et les vert&#xE9;br&#xE9;s sont conserv&#xE9;es et offrent l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se que la croissance et la rupture de r&#xE9;p&#xE9;titions t&#xE9;lom&#xE9;riques a un r&#xF4;le important dans la r&#xE9;gulation de la variation antig&#xE9;nique du parasite chez les trypanosomes.

Structure des t&#xE9;lom&#xE8;res et de la fonction chez les trypanosomes: une proposition

Telomere sind spezielle DNA-Protein-komplexe, die Chromosom-enden, sch&uuml;tzt sie vor Nucleolytic Abbau- und uneheliche Rekombination zu stabilisieren. Telomere bilden eine heterochromatic Struktur, die die Transkription von Genen, die angrenzenden unterdr&uuml;cken kann. Diese Strukturen m&ouml;glicherweise zus&auml;tzliche Rollen in Trypanosoma Brucei, m&uuml;ssen, wie die wichtigsten OBERFL&Auml;CHENANTIGENE der Parasit bei einem infekti&ouml;sen Stadium aus dei Loci ausgedr&uuml;ckt werden. Wir schlagen die Telomer-Proteinkomplexe der Trypanosomen und Wirbeltiere sind konserviert und bieten die Hypothese, dass Wachstum und Bruch der Telomerisches Wiederholungen spielt eine wichtige Rolle bei der Regulierung von Parasiten Antigene Variation in Trypanosomen.

Telomer-Struktur und Funktion in Trypanosomen: einen Vorschlag.

Telomeri sono specializzati complessi DNA-proteina che stabilizzano le estremit&agrave; cromosoma, proteggendoli dalla degradazione nucleolytic e ricombinazione illegittima. Telomeri formano una struttura eterocromatiche che pu&ograve; sopprimere la trascrizione dei geni adiacenti. Queste strutture potrebbero avere ruoli aggiuntivi in Trypanosoma brucei, gli antigeni di superfici principali di questo parassita sono espressi durante le fasi infettive da subtelomerica loci. Proponiamo che i complessi di proteine telomero dei tripanosomi e vertebrati sono conservati e offrono l&#39;ipotesi che la crescita e la rottura di ripetizioni telomeriche ha un ruolo importante nella regolazione della variazione antigenica parassita in tripanosomi.

Telomero struttura e funzione in tripanosomi: una proposta.

&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306F;&#x6838;&#x9178;&#x5206;&#x89E3;&#x3068;&#x975E;&#x5AE1;&#x51FA;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x304B;&#x3089;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3057;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x672B;&#x7AEF;&#x3092;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x7279;&#x6B8A;&#x306A;DNA-&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#x306F;&#x30B5;&#x30D6;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x5EA7;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x3068;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x304C;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x53CD;&#x5FA9;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3084;&#x7834;&#x640D;&#x304C;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x3067;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x6297;&#x539F;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x62C5;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#xFF1A;&#x63D0;&#x6848;

Telomeres &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xB05D;, nucleolytic &#xC800;&#xD558; &#xACE0; &#xBE44;&#xD569;&#xBC95;&#xC801;&#xC778; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xBCF4;&#xD638; &#xD558;&#xB294; &#xD2B9;&#xC218; DNA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC740;. Telomeres &#xC778;&#xC811; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; heterochromatic &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xD45C;&#xBA74; &#xD56D; &#xC6D0; subtelomeric loci&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xB2E8;&#xACC4; &#xD45C;&#xD604; &#xB418;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; Trypanosoma brucei&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xAC00; &#xC5ED;&#xD560; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC81C;&#xC548; telomere &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C; trypanosomes &#xBC0F; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xBCF4;&#xC874;&#xC740; &#xACE0; &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; telomeric &#xBC18;&#xBCF5;&#xC758; &#xD30C;&#xC190;&#xC740; trypanosomes&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xD56D; &#xC6D0; &#xBCC0;&#xC774; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Telomere &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; trypanosomes&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;: &#xC81C;&#xC548;.

Los tel&#xF3;meros son prote&#xED;nas especializadas complejos de ADN-que estabilizan los extremos de los cromosomas, protegi&#xE9;ndolos de la degradaci&#xF3;n nucleolytic y las recombinaciones ileg&#xED;timas. Los tel&#xF3;meros formar una estructura heterocrom&#xE1;tico que puede suprimir la transcripci&#xF3;n de los genes adyacentes. Estas estructuras pueden tener funciones adicionales en Trypanosoma brucei, ya que los ant&#xED;genos de superficie m&#xE1;s importantes de este par&#xE1;sito se expresan durante las etapas infecciosas de los loci subtelomeric. Proponemos que los complejos de prote&#xED;nas de los tel&#xF3;meros de los tripanosomas y los vertebrados se conservan y ofrecen la hip&#xF3;tesis de que el crecimiento y la rotura de repeticiones telom&#xE9;ricas tiene un papel importante en la regulaci&#xF3;n de la variaci&#xF3;n antig&#xE9;nica del par&#xE1;sito en los tripanosomas.

Estructura y funci&#xF3;n de los tel&#xF3;meros en los tripanosomas: una propuesta

&#x63A2;&#x8BA8; c erbB2 &#x57FA;&#x56E0;&#x53CD;&#x4E49;&#x63A2;&#x9488; (SPIO) &#x7684;&#x8D85;&#x987A;&#x78C1;&#x6027;&#x6C27;&#x5316;&#x94C1;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x5B50;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E3A;&#x76EE;&#x6807;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x5242;&#x5728;&#x78C1;&#x5171;&#x632F; (MR) &#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x5176;&#x5F62;&#x6001;&#x7684;&#x5F71;&#x50CF;&#x5B66;&#x6709;&#x4EBA;&#x7528;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C; &#xFF08;AFM&#xFF09;&#xFF0C;&#x548C;&#x5176;&#x6548;&#x7387;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x6210;&#x50CF;&#x68C0;&#x67E5;&#x3002;

&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x5728;&#x7528;&#x78C1;&#x6027;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x53CD;&#x4E49;&#x63A2;&#x9488;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x5B66;&#x89C2;&#x5BDF;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;

To explore the possibility of the c-erbB2 oncogene antisense probe labeled with superparamagnetic iron oxide (SPIO) nanoparticles as a target contrast agent for magnetic resonance (MR) imaging whose morphology was observed with atomic force microscopy (AFM), and its efficiency was examined by MR imaging.

Application of atomic force microscopy in morphological observation of antisense probe labeled with magnetism.

Pour explorer la possibilit&#xE9; de la sonde antisens c-erbB2 oncog&#xE8;ne &#xE9;tiquet&#xE9; avec de l&#x26;#39;oxyde de fer superparamagn&#xE9;tique (SPIO) des nanoparticules comme agent de contraste pour la r&#xE9;sonance cible (MR) l&#x26;#39;imagerie magn&#xE9;tique dont la morphologie a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9; par microscopie &#xE0; force atomique (AFM), et son efficacit&#xE9; a &#xE9;t&#xE9; examin&#xE9; par imagerie par r&#xE9;sonance magn&#xE9;tique.

Application de la microscopie &#xE0; force atomique dans l&#x26;#39;observation morphologique de la sonde antisens &#xC9;tiquet&#xE9; avec magn&#xE9;tisme

Um die M&ouml;glichkeit der c-erbB2-Onkogen antisense Sonde mit superparamagnetischen Eisenoxid (SPIO) Nanopartikel als ein Ziel-Kontrastmittel f&uuml;r Kernspintomographie (MRT) beschriftet deren Morphologie imaging mit Rasterkraftmikroskopie (AFM) beobachtet wurde, und seine Wirksamkeit wurde von MR-Tomographie untersucht.

Anwendung der Rasterkraftmikroskopie in morphologische Beobachtung der antisense-Sonde mit Magnetismus beschriftet.

Per esplorare la possibilit&agrave; della sonda antisenso del oncogene c-erbB2 etichettata con nanoparticelle di ossido di ferro superparamagnetico (SPIO) come un agente di contrasto di destinazione per la risonanza magnetica (MR) imaging la cui morfologia &egrave; stata osservata con microscopia a forza atomica (AFM), e la sua efficienza &egrave; stato esaminato da MR imaging.

Applicazione di microscopia a forza atomica in osservazione morfologica della sonda antisenso etichettato con magnetismo.

&#x5F62;&#x614B;&#x3001;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#xFF08;AFM&#xFF09;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x200B;&#x200B;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x78C1;&#x6C17;&#x5171;&#x9CF4;&#xFF08;MR&#xFF09;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x9020;&#x5F71;&#x5264;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x8D85;&#x5E38;&#x78C1;&#x6027;&#x9178;&#x5316;&#x9244;&#xFF08;SPIO&#xFF09;&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x3067;&#x6A19;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306E;c-erbB2&#x3092;&#x764C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x63A2;&#x6C42;&#x3059;&#x308B;MR&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3002;

&#x78C1;&#x6027;&#x3067;&#x6A19;&#x8B58;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306B;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;

Superparamagnetic &#xCCA0; &#xC0B0;&#xD654;&#xBB3C; (SPIO) &#xB098;&#xB178; &#xC785;&#xC790;&#xC640; &#xC790;&#xAE30; &#xACF5;&#xBA85; (MR) &#xB300;&#xC0C1; &#xB300;&#xBE44; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB85C; &#xBD84;&#xB958; c erbB2 oncogene &#xC13C;&#xC2A4; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xD0D0;&#xAD6C; &#xD558; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; (AFM)&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xCC30;&#xB294; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;&#xACFC; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131; &#xC528; &#xD654;&#xC0C1; &#xC9C4; &#xCC30;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xC13C;&#xC2A4; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xC790;&#xB825;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC; &#xAD00;&#xCC30;&#xC5D0; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;.

Para explorar la posibilidad de que la sonda antisentido oncog&#xE9;n c-erbB2 etiquetados con &#xF3;xido de hierro superparamagn&#xE9;tico (SPIO) nanopart&#xED;culas como un agente de contraste blanco de resonancia magn&#xE9;tica (RM) cuya morfolog&#xED;a se observ&#xF3; con el microscopio de fuerza at&#xF3;mica (AFM), y su eficiencia se examin&#xF3; por RM.

Aplicaci&#xF3;n de la Microscop&#xED;a de Fuerza At&#xF3;mica en la observaci&#xF3;n morfol&#xF3;gica de la sonda antisentido Etiquetada con magnetismo

&#x5206;&#x5B50;&#x5F71;&#x50CF;&#x5B66;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x53CD;&#x4E49;&#x57FA;&#x56E0;&#x6280;&#x672F;&#x5DF2;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x78C1;&#x5171;&#x632F; (MR) &#x57FA;&#x56E0;&#x6210;&#x50CF;&#x4E0E;&#x80BF;&#x7624;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x3001; &#x5408;&#x6210;&#x3001; &#x548C;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x63A2;&#x9488;&#xFF0C;&#x53CD;&#x4E49;&#x6838;&#x9178; &#xFF08;&#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#xFF09; &#x88AB;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E3A;&#x8D85;&#x987A;&#x78C1;&#x6027;&#x6C27;&#x5316;&#x94C1; (SPIO) &#x548C;&#x5B83;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x68C0;&#x67E5;&#x540E; SK-Br-3 &#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB; (oncocytes) &#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x6210;&#x50CF;&#x3002;SPIO &#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x63A2;&#x9488;&#x51C6;&#x5907;&#x901A;&#x8FC7;&#x8D85;&#x987A;&#x5171;&#x8F6D;&#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x5BF9;&#x4F7F;&#x7528;&#x5316;&#x5B66;&#x4EA4;&#x8054;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x5176;&#x5F62;&#x6001;&#x548C;&#x5927;&#x5C0F;&#x3001; &#x7C92;&#x5EA6;&#x5206;&#x5E03;&#x7684;&#x6FC0;&#x5149;&#x7C92;&#x5EA6;&#x4EEA;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3001; &#x7528;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x5171;&#x8F6D;&#x7387;&#x53CA;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x7531;&#x805A;&#x4E19;&#x70EF;&#x9170;&#x80FA;&#x51DD;&#x80F6;&#x7535;&#x6CF3;&#x3002;&#x4E4B;&#x540E;&#xFF0C;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x88AB;&#x67D3; SK-Br-3 oncocytes&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x94C1;&#x6444;&#x53D6;&#x4ECE;&#x8D28;&#x7684;&#x65B9;&#x9762;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x5149;&#x548C;&#x7535;&#x955C;&#x539F;&#x5B50;&#x5438;&#x6536;&#x6CD5;&#x5728;&#x91CF;&#x5316;&#x548C;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x53D8;&#x5316;&#x6709;&#x4EBA;&#x4F7F;&#x7528;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x6210;&#x50CF;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;SPIO &#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x63A2;&#x9488;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x5747;&#x5300;&#x6563;&#x5C04;&#xFF0C;&#x7403;&#x5F62;&#xFF0C;&#x76F4;&#x5F84;&#x4E4B;&#x95F4; 25 40 nm (95%) &#x7684;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x548C;&#x6FC0;&#x5149;&#x7C92;&#x5EA6;&#x4EEA;&#xFF0C;&#x5171;&#x8F6D;&#x63A2;&#x5934;&#x7387;&#x4E3A; 99%&#x3002;&#x800C;&#x4E14;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x4FDD;&#x6301;&#x5176;&#x5728;&#x751F;&#x7406;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x7684;&#x5171;&#x8F6D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5149;&#x955C;&#x53D1;&#x73B0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7684;&#x94C1;&#x6C27;&#x5316;&#x7269;&#x5438;&#x6536;&#x53CD;&#x4E49;&#x63A2;&#x9488;&#x7684;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x7814;&#x7A76;&#x63ED;&#x793A;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x8F6C;&#x67D3; SK-Br-3 oncocytes &#x4E2D;&#x94C1;&#x6C27;&#x5316;&#x7269;&#x7684;&#x6C89;&#x79EF;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E00;&#x4E9B;&#x6536;&#x96C6;&#x7684;&#x5806;&#x6808;&#xFF0C;&#x548C;&#x94C1;&#x542B;&#x91CF;&#x7684;&#x53CD;&#x4E49;&#x63A2;&#x9488;&#x8F6C;&#x67D3; SK-Br-3 oncocytes &#x96C6;&#x56E2;&#x662F;&#x663E;&#x8457;&#x8F83;&#x9AD8; (18.37 + /-0.42 pg&#xFF09; &#x6BD4;&#x5176;&#x4ED6;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x7EC4;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x6210;&#x50CF;&#x663E;&#x793A;&#x53CD;&#x4E49;&#x63A2;&#x9488;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7684; SK-Br-3 oncocytes &#x4E86;&#xFF0C;&#x6700;&#x4F4E;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;SPIO &#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x63A2;&#x9488;&#x663E;&#x793A;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5305;&#x62EC;&#x5747;&#x5300;&#x7403;&#x5F62;&#x5F62;&#x8C8C;&#xFF0C;&#x9AD8;&#x5171;&#x8F6D;&#x7387;&#x548C;&#x88C5;&#x8F7D;&#x6548;&#x7387;&#xFF0C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x7684;&#x8D85;&#x987A;&#x78C1;&#x6C27;&#x5316;&#x94C1;&#x6807;&#x8BB0;&#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x8F6C;&#x67D3; SK-Br-3 oncocytes &#x7684;&#x964D;&#x4F4E;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x6210;&#x50CF;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; SPIO &#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x63A2;&#x9488;&#x662F;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x9488;&#x5BF9;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x5EA6;&#x589E;&#x5F3A;&#x5242;&#x6765;&#x5177;&#x4F53;&#x8BCA;&#x65AD;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5; c erbB2 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8FC7;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x5148;&#x751F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x7528;&#x3002;

&#x8D85;&#x987A;&#x78C1;&#x6027;&#x6C27;&#x5316;&#x94C1;&#x7684;&#x5236;&#x5907;&#x53CA;&#x8D28;&#x91CF;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x6807;&#x8BB0;&#x53CD;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x63A2;&#x9488;&#xFF1A; &#x4E00;&#x9879;&#x521D;&#x6B65;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

Molecular imaging of tumor antisense gene techniques have been applied to the study of magnetic resonance (MR) gene imaging associated with malignant tumors. In this study, we designed, synthesized, and tested a novel molecular probe, in which the antisense oligodeoxynucleotide (ASODN) was labeled with superparamagnetic iron oxide (SPIO), and its efficiency was examined by in vitro MR imaging after SK-Br-3 mammary carcinoma cell lines (oncocytes) transfection. The SPIO-labeled ASODN probe was prepared through SPIO conjugated to ASODN using a chemical cross linking method. Its morphology and size were detected by atomic force microscope, size distribution were detected by laser granulometer, the conjugating rate and biological activity were determined by high performance liquid chromatography, and the stability was determined by polyacrylamide gel electrophoresis. After that, the probes were transfected into the SK-Br-3 oncocytes, cellular iron uptake was analyzed qualitatively at light and electron microscopy and was quantified at atomic absorption spectrometry, and the signal change of the transfected cells was observed and measured using MR imaging. The morphology of the SPIO-labeled ASODN probe was mostly spherical with well-distributed scattering, and the diameters were between 25 and 40 nm (95%) by atomic force microscope and laser granulometer, the conjugating rate of the probe was 99%. Moreover, this probe kept its activity under physiological conditions and could conjugate with antisense oligodeoxynucleotide. In addition, light microscopy revealed an intracellular uptake of iron oxides in the cytosol and electron microscopic studies revealed a lysosomal deposition of iron oxides in the transfected SK-Br-3 oncocytes by antisense probes, some of them gathered stacks, and the iron content of the group of transfected SK-Br-3 oncocytes by antisense probe is significantly higher (18.37 +/- 0.42 pg) than other contrast groups, the MR imaging showed that transfected SK-Br-3 oncocytes by antisense probe had the lowest signal of all. The SPIO-labeled ASODN probe shows unique features including well-distributed spherical morphology, high conjugating rate and loading efficiency, and the signal intensity of SPIO-labeled ASODN-transfected SK-Br-3 oncocytes is reduced in MR imaging. These results indicate that the SPIO-labeled ASODN probe is potentially useful as a MR targeting contrast enhancing agent to specifically diagnose tumors which had over-expression of the c-erbB2 oncogene at an early stage.

Preparation and quality test of superparamagnetic iron oxide labeled antisense oligodeoxynucleotide probe: a preliminary study.

Imagerie mol&#xE9;culaire de tumeurs des techniques g&#xE8;ne antisens ont &#xE9;t&#xE9; appliqu&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;tude de l&#x26;#39;imagerie par r&#xE9;sonance g&#xE8;ne magn&#xE9;tique (MR) associ&#xE9;s &#xE0; des tumeurs malignes. Dans cette &#xE9;tude, nous avons con&#xE7;u, synth&#xE9;tis&#xE9; et test&#xE9; une nouvelle sonde mol&#xE9;culaire, dans laquelle l&#x26;#39;oligod&#xE9;soxynucl&#xE9;otide antisens (ASODN) a &#xE9;t&#xE9; marqu&#xE9; avec l&#x26;#39;oxyde de fer superparamagn&#xE9;tique (SPIO), et son efficacit&#xE9; a &#xE9;t&#xE9; examin&#xE9; par imagerie par r&#xE9;sonance magn&#xE9;tique in vitro apr&#xE8;s SK-Br-3 lign&#xE9;es cellulaires de carcinome mammaire (oncocytes) la transfection. La SPIO sonde marqu&#xE9;e ASODN a &#xE9;t&#xE9; pr&#xE9;par&#xE9; gr&#xE2;ce &#xE0; ASODN conjugu&#xE9; SPIO utilisant une croix de liaison chimique m&#xE9;thode. Sa morphologie et la taille ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;s par microscope &#xE0; force atomique, la distribution de taille ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;s par granulom&#xE8;tre laser, le taux de conjugaison et l&#x26;#39;activit&#xE9; biologique ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9;es par chromatographie liquide haute performance, et la stabilit&#xE9; a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9;e par &#xE9;lectrophor&#xE8;se sur gel de polyacrylamide. Apr&#xE8;s cela, les sondes ont &#xE9;t&#xE9; transfect&#xE9;s dans les oncocytes SK-Br-3, l&#x26;#39;absorption du fer cellulaire a &#xE9;t&#xE9; analys&#xE9; qualitativement en microscopie optique et &#xE9;lectronique et a &#xE9;t&#xE9; quantifi&#xE9;e au spectrom&#xE9;trie d&#x26;#39;absorption atomique, et le changement de signal des cellules transfect&#xE9;es a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e et mesur&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;aide imagerie par r&#xE9;sonance magn&#xE9;tique . La morphologie de la SPIO sonde marqu&#xE9;e ASODN &#xE9;tait principalement sph&#xE9;rique avec bien r&#xE9;partie diffusion, et les diam&#xE8;tres &#xE9;taient entre 25 et 40 nm (95%) par microscope &#xE0; force atomique et granulom&#xE8;tre laser, le taux de conjugaison de la sonde &#xE9;tait de 99%. De plus, cette sonde maintenu son activit&#xE9; dans des conditions physiologiques et peut conjuguer avec oligod&#xE9;soxynucl&#xE9;otide antisens. En outre, la microscopie optique a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; une absorption intracellulaire des oxydes de fer dans les &#xE9;tudes de cytosol et microscope &#xE9;lectronique a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; un d&#xE9;p&#xF4;t lysosomale des oxydes de fer dans les transfect&#xE9;es SK-BR-3 oncocytes par des sondes antisens, certains d&#x26;#39;entre eux r&#xE9;unis piles, et la teneur en fer de le groupe de transfect&#xE9;es SK-BR-3 oncocytes par la sonde antisens est significativement plus &#xE9;lev&#xE9;e (18,37 + / - 0,42 pg) que des groupes de contraste autres, l&#x26;#39;imagerie MR a montr&#xE9; que les transfect&#xE9;es SK-BR-3 oncocytes par antisens sonde la plus faible du signal de tous . La SPIO marqu&#xE9; ASODN sonde pr&#xE9;sente des caract&#xE9;ristiques uniques, y compris bien r&#xE9;partie morphologie sph&#xE9;rique, un taux &#xE9;lev&#xE9; de conjugaison et de l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de chargement, et l&#x26;#39;intensit&#xE9; du signal de SPIO marqu&#xE9; ASODN transfect&#xE9;es SK-BR-3 oncocytes est r&#xE9;duite en imagerie par r&#xE9;sonance magn&#xE9;tique. Ces r&#xE9;sultats indiquent que le SPIO sonde marqu&#xE9;e ASODN est potentiellement utile en tant qu&#x26;#39;agent de contraste MR ciblage am&#xE9;liorer sp&#xE9;cifiquement le diagnostic des tumeurs qui avaient sur-expression de la oncog&#xE8;ne c-erbB2 &#xE0; un stade pr&#xE9;coce.

Pr&#xE9;paration et test de qualit&#xE9; d&#x26;#39;oxyde de fer superparamagn&#xE9;tique oligod&#xE9;soxynucl&#xE9;otide sonde antisens marqu&#xE9;e: une &#xE9;tude pr&#xE9;liminaire

Molekulare Bildgebung Tumor antisense-gen Techniken zum Studium der Magnetresonanz (MR) Gen Bildgebung Zusammenhang mit b&ouml;sartigen Tumoren angewendet wurden. In dieser Studie wir entworfen, synthetisiert und eine neuartige Molekulare Sonde, in der der antisense Oligodeoxynucleotide (ASODN) mit superparamagnetischen Eisenoxid (SPIO), beschriftet wurde getestet und seine Wirksamkeit wurde durch in-vitro-MR-Tomographie nach SK-Br-3 Mamma-Karzinom Zelltransfektion Linien (Oncocytes) untersucht. Die SPIO-markierten ASODN-Sonde wurde durch SPIO Konjugation mit ASODN mit eine Chemikalie Querverweise Methode zubereitet. Die Morphologie und die Gr&ouml;&szlig;e von Rasterkraftmikroskop erkannt wurden, Gr&ouml;&szlig;enverteilung von Laser-Granulometer erkannt wurden, die konjugierenenzym Rate und biologische Aktivit&auml;t waren durch Hochleistungs-Fl&uuml;ssigkeitschromatographie bestimmt und die Stabilit&auml;t wurde durch Polyacrylamidgelelektrophorese bestimmt. Danach waren die Sonden in die SK-Br-3-Oncocytes transfected zellul&auml;ren Eisen Aufnahme wurde bei Licht- und Elektronenmikroskopie qualitativ analysiert und war bei der Atomabsorptionsspektrometrie quantifiziert und die Signal-&Auml;nderung der transfizierte Zellen wurde beobachtet und gemessen mit MR-Tomographie. Die Morphologie der SPIO-markierten ASODN-Sonde war meist sph&auml;risch mit &auml;hnlich Streuung und die Durchmesser waren zwischen 25 und 40 nm (95 %) von Rasterkraft-Mikroskop und Laser-Granulometer, die konjugierenenzym, dass die Sonde 99 % lag. Dar&uuml;ber hinaus diese Sonde ihre T&auml;tigkeit unter physiologischen Bedingungen gehalten und konnte mit antisense Oligodeoxynucleotide Konjugat. Dar&uuml;ber hinaus Lichtmikroskopie offenbart eine intrazellul&auml;re Aufnahme von Eisenoxiden in das Zytosol Elektron mikroskopischen Studien belegten eine lysosomale Ablagerung von Eisenoxide in den transfizierte SK-Br-3-Oncocytes durch antisense-Sonden, einige von ihnen gesammelt Stacks und der Eisengehalt der Gruppe von transfizierte SK-Br-3 Oncocytes von antisense-Sonde ist deutlich h&ouml;her (18.37 +/-0,42 Pg) als andere Kontrast-Gruppen, die MR-Tomographie ergab, dass transfizierte SK-Br-3 Oncocytes von antisense-Sonde das niedrigste Signal von allen hatte. Der SPIO-markierten ASODN Sonde zeigt einzigartigen Funktionen wie &auml;hnlich sph&auml;rische Morphologie, hohe Rate und laden Effizienz und der Signalintensit&auml;t des SPIO-Label des ASODN transfected SK-Br-3 Oncocytes in MR-Tomographie sinkt. Diese Ergebnisse zeigen, dass die SPIO-markierten ASODN-Sonde potentiell n&uuml;tzlicher als ein Herr Zielgruppenadressierung Kontrast Verbesserung Agent ist um speziell Tumoren diagnostizieren die &Uuml;berexpression von der c-erbB2-Onkogen fr&uuml;hzeitig hatte.

Vorbereitung und Qualit&auml;t Test von superparamagnetischen Eisenoxid beschriftet antisense Oligodeoxynucleotide Sonde: eine Vorstudie.

Imaging molecolare delle tecniche di gene antisenso del tumore sono state applicate allo studio di imaging a risonanza magnetica (MR) gene associato a tumori maligni. In questo studio, abbiamo progettato, sintetizzato e testato una romanzo sonda molecolare, in cui il oligodeoxynucleotide antisenso (ASODN) &egrave; stato etichettato con ossido di ferro superparamagnetico (SPIO), e la sua efficienza &egrave; stato esaminato dal signor in vitro imaging dopo la trasfezione di SK-Br-3 carcinoma mammario cell lines (oncocytes). La sonda ASODN con etichetta SPIO &egrave; stata preparata attraverso SPIO coniugato a ASODN utilizzando un prodotto chimico cross linking Metodo. La morfologia e le dimensioni sono state rilevate da microscopio a forza atomica, distribuzione delle dimensioni sono state rilevate dal laser granulometer, il tasso di coniugazione e attivit&agrave; biologica sono stati determinati mediante cromatografia liquida ad alte prestazioni e la stabilit&agrave; &egrave; stata determinata tramite l&#39;elettroforesi del gel di poliacrilammide. Dopo di che, le sonde sono state transfected nella oncocytes SK-Br-3, uptake cellulare di ferro &egrave; stato analizzato qualitativamente alla luce e la microscopia elettronica ed &egrave; stato quantificato in spettrometria di assorbimento atomico e la modifica di segnale delle celle transfected &egrave; stata osservata e misurata usando MR imaging. La morfologia della sonda SPIO-etichetta ASODN era per lo pi&ugrave; sferica con dispersione ben distribuita, e i diametri sono stati tra 25 e 40 nm (95%) da granulometer laser e microscopio atomico della forza, la coniugazione tasso della sonda era 99%. Inoltre, questa sonda mantenuto la sua attivit&agrave; in condizioni fisiologiche e potrebbe coniugato con oligodeoxynucleotide antisenso. Inoltre, microscopia chiara ha rivelato un assorbimento intracellulare di ossidi di ferro nel citosol ed elettrone microscopici studi hanno rivelato una deposizione di ossidi di ferro nella oncocytes SK-Br-3 transfected lisosomiale da sonde antisense, alcuni di loro si sono riuniti gli stack e il contenuto di ferro del gruppo di transfected oncocytes SK-Br-3 dalla sonda antisenso &egrave; significativamente pi&ugrave; alto (18.37 + 0,42 pg) rispetto ad altri gruppi di contrasto, il signor imaging ha dimostrato che transfected oncocytes SK-Br-3 dalla sonda antisenso avuto il segnale pi&ugrave; basso di tutti. SPIO-etichetta ASODN sonda mostra caratteristiche uniche tra cui morfologia sferica ben distribuito, coniugando il tasso e l&#39;efficienza di caricamento e l&#39;intensit&agrave; di segnale di SPIO-etichetta alta transfected ASODN SK-Br-3 oncocytes &egrave; ridotto in MR imaging. Questi risultati indicano che la sonda ASODN con etichetta SPIO &egrave; potenzialmente utile come un signor targeting contrasto migliorare agente per diagnosticare in modo specifico i tumori che avevano sovraespressione dell&#39;oncogene c-erbB2 in una fase precoce.

Test di qualit&agrave; e preparazione di ossido di ferro superparamagnetico etichettati sonda antisenso oligodeoxynucleotide: uno studio preliminare.

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&#xBD84;&#xC790; &#xD654;&#xC0C1; &#xC9C4; &#xCC30;&#xC758; &#xC885;&#xC591; &#xC13C;&#xC2A4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAE30;&#xBC95; &#xC790;&#xAE30; &#xACF5;&#xBA85; (MR) &#xC9C4; &#xC601;&#xC0C1; &#xC545;&#xC131; &#xC885;&#xC591;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC124;&#xACC4;, &#xD569;&#xC131;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC13C;&#xC2A4; oligodeoxynucleotide (ASODN) superparamagnetic &#xCCA0; &#xC0B0;&#xD654;&#xBB3C; (SPIO)&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xB958; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xC18C;&#xC124; &#xBD84;&#xC790; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC0F; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131; &#xD6C4;&#xC5D0; SK-Br-3 &#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xC885; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; (oncocytes) transfection &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xCCB4; &#xC678; &#xC528;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. SPIO &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; ASODN &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; SPIO ASODN&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xAD50;&#xCC28; &#xD558;&#xB294; &#xC5F0;&#xACB0; &#xBC29;&#xBC95; &#xD654;&#xD559; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC900;&#xBE44; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xC640; &#xD06C;&#xAE30;&#xB294; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB41C; &#xD06C;&#xAE30; &#xBD84;&#xD3EC; &#xB808;&#xC774;&#xC800; granulometer&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C; conjugating &#xC18D;&#xB3C4; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xD65C;&#xB3D9; &#xACE0;&#xC131;&#xB2A5; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558; &#xACE0; &#xC548;&#xC815;&#xC131; polyacrylamide &#xC824; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xADF8; &#xD6C4;, &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; SK-Br-3 oncocytes&#xB85C; &#xD398; &#xD588;&#xB2E4;, &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xCCA0; &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00; &#xBE5B;&#xACFC; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C8;&#xC801; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4; &#xC6D0;&#xC790; &#xD761;&#xC218; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xB7C9; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; transfected &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558; &#xACE0; &#xBBF8;&#xC2A4;&#xD130; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCE21;&#xC815;. SPIO &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; ASODN &#xAC80;&#xC0AC;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xB294; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xAD6C;&#xD615; well-distributed &#xC0B0;&#xB780;&#xACFC; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC9C1;&#xACBD; &#xD0D0;&#xC0AC;&#xC120;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; 99% &#xC0AC;&#xC774;&#xB294; &#xB3D9;&#xC0B0; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xACFC; &#xB808;&#xC774;&#xC800; granulometer&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; 25, 40 nm (95%) &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;,&#xC774; &#xC870;&#xC0AC; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC13C;&#xC2A4; oligodeoxynucleotide&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31; &#xACB0;&#xD569; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xACF5;&#xAC1C;&#xB294; cytosol&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCA0; &#xC0B0;&#xD654;&#xBB3C;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00; &#xBC0F; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC13C;&#xC2A4; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; transfected SK-Br-3 oncocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCA0; &#xC0B0;&#xD654;&#xBB3C;&#xC758; lysosomal &#xC99D; &#xCC29;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C;, &#xADF8;&#xB4E4; &#xC911; &#xC77C;&#xBD80;&#xB294; &#xC2A4;&#xD0DD;, &#xC218;&#xC9D1; &#xBC0F; &#xC13C;&#xC2A4; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; transfected SK-Br-3 oncocytes &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xCCA0; &#xBD84; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20;&#xB294; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB192;&#xC740; (18.37 0.42 pg +) &#xB2E4;&#xB978; &#xB300;&#xC870; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;&#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC528; &#xC13C;&#xC2A4; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; transfected SK-Br-3 oncocytes &#xBAA8;&#xB450;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB0AE;&#xC740; &#xC2E0;&#xD638; &#xD588;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. SPIO &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; ASODN &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; well-distributed &#xAD6C;&#xD615; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC;, &#xB192;&#xC740; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB85C;&#xB529; &#xD6A8;&#xC728;&#xACFC; SPIO &#xD45C;&#xC2DC;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638; &#xAC15;&#xB3C4; &#xC5B4;&#xADFC; ASODN &#xD398; SK-Br-3 oncocytes &#xAC10;&#xC18C; MR &#xC601;&#xC0C1;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; SPIO &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; ASODN &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB300;&#xBE44; &#xAC15;&#xD654; &#xD2B9;&#xD788; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; c erbB2 oncogene&#xC758; over-expression&#xB294; &#xC885;&#xC591;&#xC744; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; MR&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Superparamagnetic &#xCCA0; &#xC0B0;&#xD654;&#xBB3C;&#xC758; &#xC900;&#xBE44; &#xBC0F; &#xD488;&#xC9C8; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB77C;&#xB294; &#xC13C;&#xC2A4; oligodeoxynucleotide &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;: &#xC608;&#xBE44; &#xC5F0;&#xAD6C;.

Imagen molecular de tumores t&#xE9;cnicas antisentido de genes se han aplicado al estudio de la formaci&#xF3;n de im&#xE1;genes gen resonancia magn&#xE9;tica (RM) asociado con tumores malignos. En este estudio, hemos dise&#xF1;ado, sintetizado y probado una sonda molecular nuevo, en el que se marc&#xF3; el oligodesoxinucle&#xF3;tido antisentido (ASODN) con &#xF3;xido de hierro superparamagn&#xE9;tico (SPIO), y su eficacia se examin&#xF3; por in vitro RM despu&#xE9;s de SK-BR-3 mamarias l&#xED;neas celulares de carcinoma (oncocitos) transfecci&#xF3;n. El SPIO sonda marcada ASODN fue preparado a trav&#xE9;s de conjugado SPIO ASODN con una cruz enlace qu&#xED;mico m&#xE9;todo. Su morfolog&#xED;a y tama&#xF1;o fueron detectados por microscopio de fuerza at&#xF3;mica, distribuci&#xF3;n de tama&#xF1;o fueron detectados por granul&#xF3;metro l&#xE1;ser, la tasa de conjugaci&#xF3;n y la actividad biol&#xF3;gica se determin&#xF3; por cromatograf&#xED;a l&#xED;quida de alto rendimiento, y la estabilidad se determin&#xF3; por electroforesis en gel de poliacrilamida. Despu&#xE9;s de eso, las sondas fueron transfectadas en las oncocitos SK-Br-3, aumenta la captaci&#xF3;n celular de hierro se analiz&#xF3; cualitativamente en el microscopio &#xF3;ptico y electr&#xF3;nico, y se cuantific&#xF3; en espectrometr&#xED;a de absorci&#xF3;n at&#xF3;mica, y el cambio de la se&#xF1;al de las c&#xE9;lulas transfectadas se observ&#xF3; y midi&#xF3; utilizando la RM . La morfolog&#xED;a de la sonda marcada con SPIO ASODN era sobre todo esf&#xE9;rica con buena distribuci&#xF3;n de dispersi&#xF3;n, y los di&#xE1;metros de entre 25 y 40 nm (95%) de microscopio de fuerza at&#xF3;mica y la granulometr&#xED;a l&#xE1;ser, el tipo de conjugaci&#xF3;n de la sonda fue de 99%. Adem&#xE1;s, esta sonda mantuvo su actividad en condiciones fisiol&#xF3;gicas y podr&#xED;a conjugar con oligodesoxinucle&#xF3;tido antisentido. Adem&#xE1;s, microscop&#xED;a &#xF3;ptica revel&#xF3; una absorci&#xF3;n intracelular de &#xF3;xidos de hierro en los estudios microsc&#xF3;picos citosol y electr&#xF3;nica revel&#xF3; una deposici&#xF3;n lisosomal de &#xF3;xidos de hierro en las transfectadas SK-BR-3 oncocitos por sondas antisentido, algunos de ellos se reunieron las pilas, y el contenido de hierro de el grupo de transfectadas SK-BR-3 oncocitos por la sonda antisentido es significativamente mayor (18,37 + / - 0,42 pg) de grupos de contraste de otro modo, la RM mostr&#xF3; que transfectadas SK-BR-3 oncocitos por antisentido sonda ten&#xED;a la se&#xF1;al m&#xE1;s baja de todos . El SPIO marcado ASODN sonda muestra caracter&#xED;sticas &#xFA;nicas, como bien distribuida morfolog&#xED;a esf&#xE9;rica, la alta tasa de conjugaci&#xF3;n y la eficiencia de carga y la intensidad de la se&#xF1;al de SPIO marcado ASODN transfectadas SK-Br-3 oncocitos se reduce en la RM. Estos resultados indican que la sonda marcada con SPIO ASODN es potencialmente &#xFA;til como un agente de contraste MR focalizaci&#xF3;n mejora para diagnosticar espec&#xED;ficamente tumores que ten&#xED;an sobre-expresi&#xF3;n de la c-erbB2 oncog&#xE9;n en una etapa temprana.

Preparaci&#xF3;n y prueba de calidad del hierro superparamagn&#xE9;tico &#xF3;xido sonda marcada oligodesoxirribonucle&#xF3;tido: un estudio preliminar

&#x79CD;&#x9525;&#x4F53;&#x8868;&#x793A;&#x53D8;&#x4F53;&#x8868;&#x9762;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D; (&#x53EF;&#x89C6;&#x5E94;&#x529B;&#x7B49;&#x7EA7;) &#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4E25;&#x683C; monoallelic &#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x76EE;&#x524D;&#x5C1A;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x91CD;&#x8981;&#x81F4;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x5982;&#x4F55;&#x5F3A;&#x5236;&#x6267;&#x884C;&#x3002;&#x7AEF;&#x7C92;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x7684;&#x73B0;&#x8C61;&#xFF0C;&#x63D0;&#x51FA;&#x5728;&#x53EF;&#x89C6;&#x5E94;&#x529B;&#x7B49;&#x7EA7;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x6CA1;&#x6709;&#x7AEF;&#x7C92;&#x86CB;&#x767D;&#x5C1A;&#x672A;&#x786E;&#x5B9A;&#x5176;&#x4E2D;&#x65AD;&#x5BFC;&#x81F4;&#x53EF;&#x89C6;&#x5E94;&#x529B;&#x7B49;&#x7EA7; derepression&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x786E;&#x5B9A; tbRAP1 T.&#x9525;&#x4F53;&#x7C92;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x548C;&#x4E3B;&#x8981;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x7684;&#x6C89;&#x9ED8;&#x53EF;&#x89C6;&#x5E94;&#x529B;&#x7B49;&#x7EA7;&#x8868;&#x8FBE;&#x7AD9;&#x70B9; (ESs)&#x3002;TbRAP1 &#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x6240;&#x6709; VSGs &#x4E2D;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684; ESs&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x5176;&#x4ED6;&#x4F4D;&#x7F6E;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5BFC;&#x81F4;&#x66F4;&#x5F3A;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7AEF;&#x7C92;&#x6BD4;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0A;&#x6E38;&#x8FD8;&#x6709;&#x4ECE; 10 kb derepression VSGs derepression&#x3002;&#x8FD9;&#x6BD5;&#x4E1A;&#x7684;&#x6C89;&#x9ED8;&#x6A21;&#x5F0F;&#x8868;&#x660E;&#x7AEF;&#x7C92;&#x5B8C;&#x6574; tbRAP1 &#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x6C89;&#x9ED8;&#x548C;&#x53EF;&#x89C6;&#x5E94;&#x529B;&#x7B49;&#x7EA7;&#x8C03;&#x8282;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

RAP1 &#x662F;&#x79CD;&#x9525;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x53D8;&#x4F53;&#x8868;&#x9762;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;

Trypanosoma brucei expresses variant surface glycoprotein (VSG) genes in a strictly monoallelic fashion in its mammalian hosts, but it is unclear how this important virulence mechanism is enforced. Telomere position effect, an epigenetic phenomenon, has been proposed to play a critical role in VSG regulation, yet no telomeric protein has been identified whose disruption led to VSG derepression. We now identify tbRAP1 as an intrinsic component of the T. brucei telomere complex and a major regulator for silencing VSG expression sites (ESs). Knockdown of tbRAP1 led to derepression of all VSGs in silent ESs, but not VSGs located elsewhere, and resulted in stronger derepression of genes located within 10 kb from telomeres than genes located further upstream. This graduated silencing pattern suggests that telomere integrity plays a key role in tbRAP1-dependent silencing and VSG regulation.

RAP1 is essential for silencing telomeric variant surface glycoprotein genes in Trypanosoma brucei.

Trypanosoma brucei exprime glycoprot&#xE9;ine variable de surface (VSG) d&#x26;#39;une fa&#xE7;on strictement monoall&#xE9;lique dans ses h&#xF4;tes mammif&#xE8;res, mais on ne sait pas comment ce m&#xE9;canisme de virulence importante est appliqu&#xE9;e. Effet de position des t&#xE9;lom&#xE8;res, un ph&#xE9;nom&#xE8;ne &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique, a &#xE9;t&#xE9; propos&#xE9; de jouer un r&#xF4;le crucial dans la VSG la r&#xE9;glementation, mais aucune prot&#xE9;ine t&#xE9;lom&#xE9;rique a &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9; dont la perturbation conduit &#xE0; d&#xE9;r&#xE9;pression VSG. Nous identifions maintenant tbRAP1 comme une composante intrins&#xE8;que du complexe T. brucei t&#xE9;lom&#xE8;res et un r&#xE9;gulateur majeur pour faire taire les sites d&#x26;#39;expression de VSG (ESS). Knockdown de tbRAP1 conduit &#xE0; d&#xE9;r&#xE9;pression de tous les VSG en ES silencieuse, mais pas VSG situ&#xE9; ailleurs, et a abouti &#xE0; plus forte d&#xE9;r&#xE9;pression des g&#xE8;nes situ&#xE9;s dans les 10 ko de t&#xE9;lom&#xE8;res que les g&#xE8;nes situ&#xE9;s plus en amont. Ce mod&#xE8;le silencieux est dipl&#xF4;m&#xE9; sugg&#xE8;re que l&#x26;#39;int&#xE9;grit&#xE9; des t&#xE9;lom&#xE8;res joue un r&#xF4;le cl&#xE9; dans tbRAP1-d&#xE9;pendante silence et de la r&#xE9;glementation VSG.

RAP1 est essentielle &#xE0; la r&#xE9;pression t&#xE9;lom&#xE9;riques g&#xE8;nes variants de surface des glycoprot&#xE9;ines chez Trypanosoma brucei

Trypanosoma Brucei dr&uuml;ckt variant Oberfl&auml;che Glykoprotein (VSG) Gene in streng monoallelisches Weise bei seinen S&auml;ugetier-, aber es ist unklar, wie dieser wichtige Virulenz-Mechanismus erzwungen wird. Telomer-Position, die Wirkung, eine epigenetische Ph&auml;nomen vorgeschlagen wurde eine kritische Rolle in VSG-Verordnung, bisher kein Telomerisches Protein identifiziert, deren Unterbrechung zu VSG Derepression gef&uuml;hrt. Wir erkennen jetzt tbRAP1 als intrinsische Bestandteil der T. Brucei Telomer-komplex und ein wichtiger Regulator zum Schweigen zu VSG Ausdruck Websites (ESs). Niederschlag des tbRAP1 f&uuml;hrte zu der alle VSGs in Stille ESs, aber nicht die VSGs liegt anderswo, und f&uuml;hrte zu st&auml;rkeren Derepression Gene innerhalb 10 kb von Telomere als Gene liegt weiter flussaufw&auml;rts derepression. Dieses abgestufte silencing Muster zufolge Telomer-Integrit&auml;t spielt eine Schl&uuml;sselrolle im tbRAP1-abh&auml;ngige zum Schweigen und VSG-Verordnung.

RAP1 unbedingt Unterdr&uuml;ckender Telomerisches variant Oberfl&auml;che Glykoprotein Gene in Trypanosoma Brucei.

Trypanosoma brucei esprime geni variante superficie glicoproteina (VSG) in un modo rigorosamente monoallelic nei suoi ospiti mammiferi, ma non &egrave; chiaro come viene applicato questo meccanismo di virulenza importante. Posizione di telomeri effetto, un fenomeno epigenetico, &egrave; stato proposto di svolgere un ruolo critico nella regolazione VSG, eppure nessuna proteina telomerica &egrave; stato identificato cui perturbazione ha portato a derepression VSG. Identifichiamo ora tbRAP1 come componente intrinseca del complesso T. brucei telomeri e un regolatore importante per silenziare siti di espressione VSG (ESs). Atterramento di tbRAP1 ha portato alla derepression di tutti VSGs in ESs silenziosa, ma non VSGs si trova altrove e portato a derepression pi&ugrave; forte dei geni che si trova all&#39;interno di 10 kb da telomeri pi&ugrave; geni situati pi&ugrave; a monte. Questo modello di silenziamento graduato suggerisce che l&#39;integrit&agrave; telomeri gioca un ruolo chiave nel silenziamento tbRAP1-dipendente e regolamento VSG.

RAP1 &egrave; essenziale per il silenziamento di geni telomerica glicoproteina di superficie variante in Trypanosoma brucei.

&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x53B3;&#x5BC6;&#x306B;monoallelic&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x5909;&#x7570;&#x8868;&#x9762;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;VSG&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304C;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x52B9;&#x679C;&#x3001;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x73FE;&#x8C61;&#x306F;&#x3001;&#x898F;&#x5236;&#x3092;VSG&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6DF7;&#x4E71;VSG&#x6291;&#x5236;&#x89E3;&#x9664;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4ECA;&#x3001;T.&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3068;VSG&#x767A;&#x73FE;&#x90E8;&#x4F4D;&#xFF08;ESS&#xFF09;&#x3092;&#x9ED9;&#x3089;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;tbRAP1&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; tbRAP1&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;ES&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;VSGs&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x89E3;&#x9664;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x306B;VSGs&#x3066;&#x304A;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3088;&#x308A;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x304B;&#x3089;10 kb&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x6291;&#x5236;&#x89E3;&#x9664;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5352;&#x696D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x6574;&#x5408;&#x6027;tbRAP1&#x4F9D;&#x5B58;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;VSG&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

RAP1&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x3067;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x5909;&#x7570;&#x8868;&#x9762;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

Trypanosoma brucei &#xBCC0;&#xD615; &#xD45C;&#xBA74; &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (VSG) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5C4;&#xACA9; &#xD558; &#xAC8C; monoallelic &#xD328;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC;&#xC774; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB3C5;&#xC131; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC801;&#xC6A9; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBA85;&#xD655; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB2E4;. Telomere &#xC704;&#xCE58; &#xD6A8;&#xACFC;, epigenetic &#xD604;&#xC0C1; &#xC5C6;&#xC74C; telomeric &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC544;&#xC9C1; VSG &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4; &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; &#xC911;&#xB2E8; VSG derepression&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC81C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; T. brucei telomere&#xC758; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB85C; tbRAP1 &#xBC0F; VSG &#xC2DD; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; (ESs) &#xC785;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC8FC;&#xC694; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Tbrap1&#xC758; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC790;&#xB3D9; Ess&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; VSGs &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB2E4;&#xB978; &#xACF3;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC704;&#xCE58; &#xD558; &#xACE0; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4; &#xB354; &#xC0C1;&#xB958;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCF4;&#xB2E4; telomeres&#xC5D0;&#xC11C; 10 kb &#xB0B4;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAC15;&#xD55C; derepression &#xD558;&#xC9C0; Vsgs&#xC758; derepression&#xB97C; &#xC774;&#xB04C;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC878;&#xC5C5;&#xB41C; silencing &#xD328;&#xD134;&#xC740; telomere &#xBB34;&#xACB0;&#xC131; tbRAP1 &#xC885;&#xC18D; &#xC785; &#xBC0F; VSG &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD575;&#xC2EC;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;.

RAP1 Trypanosoma brucei&#xC758; &#xD45C;&#xBA74; &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; telomeric &#xBCC0;&#xD615; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;.

Trypanosoma brucei variante expresa la glicoprote&#xED;na de superficie (VSG) los genes de una forma estrictamente monoal&#xE9;lica en sus hu&#xE9;spedes mam&#xED;feros, pero no est&#xE1; claro c&#xF3;mo este mecanismo de virulencia importante es cumplir. Efecto de la posici&#xF3;n del tel&#xF3;mero, un fen&#xF3;meno epigen&#xE9;tico, se ha propuesto para desempe&#xF1;ar un papel fundamental en la regulaci&#xF3;n de VSG, sin embargo, ninguna prote&#xED;na telom&#xE9;rica ha sido identificada cuyo deterioro llev&#xF3; a desrepresi&#xF3;n VSG. Ahora tbRAP1 identificar como un componente intr&#xED;nseco del complejo T. brucei tel&#xF3;meros y un regulador importante para silenciar a los sitios de VSG expresi&#xF3;n (ESS). Derribo de tbRAP1 llev&#xF3; a desrepresi&#xF3;n de todas las VSG en la ESS en silencio, pero no VSG ubicado en otro lugar, y dio lugar a fuertes desrepresi&#xF3;n de los genes situados dentro de los 10 kb de los tel&#xF3;meros que los genes situados aguas arriba. Este patr&#xF3;n sugiere que el silenciamiento se gradu&#xF3; integridad de los tel&#xF3;meros juegan un papel clave en tbRAP1 dependiente de silenciamiento y la regulaci&#xF3;n de VSG.

RAP1 es esencial para silenciar genes variantes telom&#xE9;ricas glicoprote&#xED;na de superficie de Trypanosoma brucei

&#x9632;&#x6B62;&#x529F;&#x80FD;&#x5931;&#x8C03;&#x6027;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7AEF;&#x7C92;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#xFF0C;&#x662F;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x5728;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#xFF0C;&#x65E5;&#x6CE2;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x9176;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x8D1F;&#x8D23;&#x7AEF;&#x7C92; GT-&#x94A2;&#x7EDE;&#x7EBF;&#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x9634;&#x6027;&#xFF0C;&#x4F4E;&#x9891;&#x91CD;&#x7EC4;&#x673A;&#x5236;&#x53EF;&#x4EE5;&#x907F;&#x514D;&#x6740;&#x4F24;&#x529B;&#x62D4;&#x8282;&#x4F24;&#x52BF;&#x4E25;&#x91CD;&#x77ED;&#x7AEF;&#x7C92;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x4FA7;&#x91CD;&#x4E8E;&#x840C;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD; Mre11 &#x5728;&#x7AEF;&#x7C92;&#x91CD;&#x7EC4;&#x548C;&#x7A33;&#x6001;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x65B0;&#x7684;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684; MRE11&#xFF0C;mre11 A470T &#x4E2D;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x9633;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;, &#x8D4B;&#x4E88;&#x7AEF;&#x7C92;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684;&#x8DCC;&#x5E45;&#x4E3A; semidominant &#x548C;&#x4E2D;&#x7AEF;&#x7C92;&#x6108;&#x5408;&#x7684;&#x9690;&#x6027;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x7A81;&#x53D8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x5927;&#x5C0F;&#x52A8;&#x6001;&#x5E73;&#x8861;&#x3002;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x9634;&#x6027; mre11 A470T &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x663E;&#x793A;&#x590D;&#x5236;&#x8870;&#x8001;&#x901A;&#x8FC7;&#x79F0;&#x4E3A;&#x7C7B;&#x578B;&#x4FDD;&#x9669;&#x4E1A;&#x7684;&#x9AD8;&#x6548;&#x7C7B;&#x578B;-&#x76F8;&#x5173;&#x91CD;&#x7EC4;&#x901A;&#x8DEF;&#x8BF1;&#x5BFC; Rad51 &#x4F9D;&#x8D56;&#x65C1;&#x8DEF;IA &#x578B;&#x9014;&#x5F84;&#x5305;&#x62EC;&#x6269;&#x589E;&#x6742;&#x4EA4; Y&#39; &#x5143;&#x7D20;&#xFF0C;&#x52A0;&#x4E4B;&#x8292;&#x548C;&#x66F4;&#x5F02;&#x6784;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x77ED;&#x7AEF;&#x7C92;&#x5927;&#x5C0F;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x5927;&#x7247;&#x6211;&#x7684;&#x5E78;&#x5B58;&#x8005;&#x3002;&#x6570;&#x636E;&#x4F7F;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4E2D;&#x65AD;&#x81F4;&#x590D;&#x5236;&#x5728;&#x7AEF;&#x7C92;&#x6269;&#x5F20;&#x4E2D;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;&#x4E0D;&#x540C;&#x8868;&#x578B;&#x8BF1;&#x53D1; mre11 A470T &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x9633;&#x6027;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x548C;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x9634;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E5F;&#x4F7F;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A8;&#x6D4B;&#x7AEF;&#x7C92;&#x7AEF;&#x7ED3;&#x6784;&#x53EF;&#x80FD;&#x4FEE;&#x6539;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5728; mre11 A470T &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5177;&#x4F53;&#x9014;&#x5F84;&#x5230;&#x6307;&#x6325;&#x7AEF;&#x7C92;&#x3002;

&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7AEF;&#x7C92;&#x91CD;&#x7EC4;&#x548C;&#x8870;&#x8001;&#x6709;&#x6548;&#x65C1;&#x8DEF; mre11 &#x7A81;&#x53D8;&#x3002;

Preventing the formation of dysfunctional telomeres is essential for genomic stability. In most organisms, the ribo-nucleoprotein reverse transcriptase telomerase is responsible for telomere GT-strand elongation. However, in telomerase-negative cells, low-frequency recombination mechanisms can avert lethality by elongating critically short telomeres. This study focuses on the involvement of the budding yeast Mre11 in telomere recombination and homeostasis. We have identified a novel allele of MRE11, mre11-A470T, that, in telomerase-positive cells, confers a semidominant decrease in telomere size and a recessive defect in telomere healing. In addition, mutant cells lack normal telomere size homeostasis. Telomerase-negative mre11-A470T cells display a Rad51-dependent bypass of replicative senescence via induction of a highly efficient type I-related recombination pathway termed type IA. The type IA pathway involves an amplification of subtelomeric Y' elements, coupled with elongated and more heterogeneous telomere tracts relative to the short telomere size of type I survivors. The data have led us to propose the involvement of break-induced replication in telomere expansion. The differing phenotypes elicited by the mre11-A470T mutants in telomerase-positive and telomerase-negative cells have also led us to speculate that the telomere end structure may be modified differentially in mre11-A470T cells, directing the telomere into specific pathways.

An mre11 mutation that promotes telomere recombination and an efficient bypass of senescence.

Pr&#xE9;vention de la formation des t&#xE9;lom&#xE8;res dysfonctionnels est essentielle pour la stabilit&#xE9; du g&#xE9;nome. Dans la plupart des organismes, la t&#xE9;lom&#xE9;rase ribo-nucl&#xE9;oprot&#xE9;ine de la transcriptase inverse est responsable de t&#xE9;lom&#xE8;res GT brin d&#x26;#39;allongement. Cependant, dans la t&#xE9;lom&#xE9;rase-n&#xE9;gatives cellules, des m&#xE9;canismes de recombinaison &#xE0; basse fr&#xE9;quence peut &#xE9;viter la l&#xE9;talit&#xE9; en allongeant les t&#xE9;lom&#xE8;res courts critique. Cette &#xE9;tude met l&#x26;#39;accent sur l&#x26;#39;implication de la levure bourgeonnante Mre11 la recombinaison des t&#xE9;lom&#xE8;res et l&#x26;#39;hom&#xE9;ostasie. Nous avons identifi&#xE9; un nouvel all&#xE8;le de MRE11, Mre11-A470T, que, dans la t&#xE9;lom&#xE9;rase des cellules positives, conf&#xE8;re une diminution de la taille des t&#xE9;lom&#xE8;res semi-dominant et un d&#xE9;faut r&#xE9;cessif dans la gu&#xE9;rison des t&#xE9;lom&#xE8;res. En outre, les cellules mutantes n&#x26;#39;ont pas la taille des t&#xE9;lom&#xE8;res hom&#xE9;ostasie. La t&#xE9;lom&#xE9;rase-n&#xE9;gatives Mre11-A470T cellules affichent un by-pass Rad51-d&#xE9;pendante de la s&#xE9;nescence r&#xE9;plicative via l&#x26;#39;induction d&#x26;#39;un type tr&#xE8;s efficace voie de recombinaison I-connexes de type IA appel&#xE9;. La voie de type IA implique une amplification des &#xE9;l&#xE9;ments subt&#xE9;lom&#xE9;rique Y &#x26;#39;, coupl&#xE9;e &#xE0; de vastes t&#xE9;lom&#xE8;res allong&#xE9;es et plus h&#xE9;t&#xE9;rog&#xE8;ne par rapport &#xE0; la taille des t&#xE9;lom&#xE8;res courts de type I survivants. Les donn&#xE9;es nous ont conduit &#xE0; proposer la participation de la rupture induite par la r&#xE9;plication des t&#xE9;lom&#xE8;res dans l&#x26;#39;expansion. Les ph&#xE9;notypes diff&#xE9;rents suscit&#xE9;s par les mutants Mre11-A470T dans les cellules t&#xE9;lom&#xE9;rase-positives et t&#xE9;lom&#xE9;rase-n&#xE9;gatives nous ont &#xE9;galement conduit &#xE0; sp&#xE9;culer que la structure des t&#xE9;lom&#xE8;res fin peut &#xEA;tre modifi&#xE9;e de fa&#xE7;on diff&#xE9;rentielle dans Mre11-A470T cellules, la direction du t&#xE9;lom&#xE8;re dans des voies sp&#xE9;cifiques.

Une mutation qui favorise la recombinaison Mre11 des t&#xE9;lom&#xE8;res et une d&#xE9;rivation efficace de la s&#xE9;nescence

Verhindert die Bildung von dysfunktionalen Telomere ist wesentlich f&uuml;r die genomische Stabilit&auml;t. In den meisten Organismen verantwortet die Ribo-Nukleoprotein R&uuml;cktranscriptase Telomerase Telomer GT-Strang Dehnung. Jedoch k&ouml;nnen in Telomerase-Negative Zellen, Niederfrequenz-Rekombination Mechanismen Letalit&auml;t abwenden von dehnen kritisch kurze Telomere. Diese Studie konzentriert sich auf die Einbeziehung der Knospen Hefe Mre11 in Telomer-Rekombination und Hom&ouml;ostase. Wir haben eine neuartige Allel des MRE11, mre11-A470T, identifiziert, die in Telomerase-positiven Zellen, dem semidominant R&uuml;ckgang der Telomer-Gr&ouml;&szlig;e und rezessive Defekt des Telomer Heilung verleiht. Dar&uuml;ber hinaus fehlen mutierte Zellen normal Telomer-Gr&ouml;&szlig;e-Hom&ouml;ostase. Telomerase-Negative mre11-A470T Zellen zeigen einen Bypass Rad51 abh&auml;ngigen der Zellalterung &uuml;ber Induktion von hocheffizienten Typ ich-bezogenen Rekombination Weg genannt Typ IA Die Typ IA-Pathway beinhaltet eine Verst&auml;rkung der subt&eacute;lom&eacute;riques Y&#39; Elemente, gekoppelt mit l&auml;nglichen und heterogeneren Telomer Abhandlungen Dokumentengr&ouml;&szlig;e kurze Telomer Typ i. &Uuml;berlebenden. Die Daten f&uuml;hrten uns die Beteiligung der Pause-induzierte Replikation Telomer-Ausbau vorzuschlagen. Die unterschiedlichen Ph&auml;notypen hervorgerufen durch die mre11-A470T-Mutanten in Telomerase-Positive und Telomerase-Negative Zellen haben auch f&uuml;hrte uns zu spekulieren, dass die Telomer-Ende-Struktur differentiell in mre11-A470T Zellen, ge&auml;ndert werden kann, leiten die Telomer in bestimmten Bahnen.

Ein mre11-Mutation, die Telomer-Rekombination und eine effiziente Umgehungsstra&szlig;e von Seneszenz f&ouml;rdert.

Prevenire la formazione dei telomeri disfunzionali &egrave; essenziale per la stabilit&agrave; genomica. Nella maggior parte degli organismi, la telomerasi trascrittasi inversa ribo-nucleoproteina &egrave; responsabile dell&#39;allungamento dei telomeri GT-strand. Tuttavia, nelle cellule telomerasi-negativo, meccanismi di ricombinazione bassa frequenza possono scongiurare letalit&agrave; di allungamento dei telomeri criticamente breve. Questo studio si concentra sul coinvolgimento del lievito germogliante Mre11 nella ricombinazione telomeri e omeostasi. Abbiamo identificato un allele romanzo di MRE11, mre11-A470T, che, in cellule telomerasi-positive, conferisce una diminuzione semidominant dimensione telomeri e un difetto recessivo nella guarigione di telomeri. Inoltre, le cellule mutanti privi di omeostasi dimensione normale telomeri. Cellule telomerasi-negativo mre11-A470T visualizzare un bypass Rad51-dipendente della senescenza replicativa tramite induzione di un tipo altamente efficiente ricombinazione I relativi percorso definito di tipo IA Il percorso di tipo IA comporta un&#39;amplificazione di subtelomerica Y&#39; elementi, accoppiato con tratti di telomeri allungata e pi&ugrave; eterogenea rispetto alla dimensione di telomeri breve del tipo I sopravvissuti. I dati ci hanno portato a proporre il coinvolgimento di replica break-indotta in espansione di telomeri. I fenotipi differenti hanno suscitato da mutanti mre11-A470T in positivo la telomerasi e cellule telomerasi-negativo anche ci hanno portato a ipotizzare che la struttura fine telomeri possa essere modificata differenzialmente nelle cellule mre11-A470T, dirigendo i telomeri in percorsi specifici.

Una mutazione mre11 che promuove la ricombinazione telomeri e un&#39;efficiente bypass della senescenza.

&#x9EC4;&#x82A9;&#x82F7;&#x4E0E;&#x805A;&#x7EF4;&#x916E; (PVP) &#x5171;&#x63BA;&#x6742;&#x56FA;&#x4F53;&#x5206;&#x6563;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x6EB6;&#x5242;&#x6CD5;&#x51C6;&#x5907;&#x6539;&#x5584;&#x9EC4;&#x82A9;&#x82F7;&#x6EB6;&#x51FA;&#x5EA6;&#x3002;&#x5171;&#x63BA;&#x6742;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x5229;&#x7528;&#x5DEE;&#x793A;&#x626B;&#x63CF;&#x91CF;&#x70ED; (DSC)&#x3001; x &#x5C04;&#x7EBF;&#x7C89;&#x672B;&#x884D;&#x5C04; (XRD)&#x3001; &#x7EA2;&#x5916;&#x5149;&#x8C31; (IR) &#x548C;&#x6EB6;&#x51FA;&#x5EA6;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;AFM&middot;IPC 208B &#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C; &#xFF08;AFM&#xFF09; &#x88AB;&#x5229;&#x7528;&#x5206;&#x5B50;&#x5F62;&#x6001;&#x7684;&#x9EC4;&#x82A9;&#x5185;&#x5176;&#x627F;&#x8FD0;&#x4EBA;&#x548C;&#x9EC4;&#x82A9;&#x548C;&#x5176;&#x627F;&#x8FD0;&#x4EBA;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;DSC &#x548C; XRD &#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x975E;&#x6676;&#x6216;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x9636;&#x6BB5;&#x5728; PVP &#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x9EC4;&#x82A9;&#x5C45;&#x4F4F;&#x3001; &#x6EB6;&#x51FA;&#x5EA6;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x6EB6;&#x51FA;&#x5EA6;&#x7684;&#x6C89;&#x6DC0;&#x662F; 21.4 &#x500D;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x836F;&#x7269;&#x6210;&#x5206; (API)&#x3002;&#x7EA2;&#x5916;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5206;&#x5B50;&#x95F4;&#x6C22;&#x952E;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;AFM&middot;IPC 208B &#x95EE;&#x5377;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x9EC4;&#x82A9;&#x5206;&#x6563;&#x5728; PVP &#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x5206;&#x5B50;&#x5927;&#x5C0F;&#x4E3A; 2 nm &#x548C;&#x5305;&#x88C5;&#x6216;&#x5305;&#x56F4;&#x7EA6; 0.4 nm &#x7684; PVP &#x4E94;&#x5143;&#x73AF;&#x6392;&#x5217;&#x6CBF;&#x78B3;&#x94FE;&#x6309;&#x987A;&#x5E8F;&#x3002;4-&#x7F9F;&#x57FA;&#x7684;&#x9EC4;&#x82A9;&#x82F7;&#x8461;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9178;&#x548C; PVP &#x9664;&#x4E86;&#x5185;&#x9EC4;&#x82A9;&#x82F7;&#x5206;&#x5B50;&#x5185;&#x6C22;&#x952E;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x4F7F;&#x7FB0;&#x57FA; O &#x4E4B;&#x95F4;&#x6210;&#x7ACB;&#x4E86;&#x5206;&#x5B50;&#x95F4;&#x7684;&#x6C22;&#x952E;&#x3002;

&#x5236;&#x5907;&#x4E0E;&#x8868;&#x5F81;&#x9EC4;&#x82A9;&#x82F7;&#x805A;-vinylpyrrolidone &#x6C89;&#x6DC0;&#x3002;

Baicalin-polyvinylpyrrolidone (PVP) coprecipitate was prepared by the solvent method of solid dispersion technology to improve the dissolution rate of baicalin. The coprecipitate was characterized using differential scanning calorimetry (DSC), X-ray powder diffraction (XRD), infrared spectrometry (IR) and dissolution testing. Furthermore, AFMÂ·IPC-208B high-resolution atomic force microscopy (AFM) was utilized to characterize the molecular morphology of baicalin within its carrier and the interaction between baicalin and its carrier. The results of DSC and XRD indicated that baicalin resided in PVP polymers in an amorphous or molecular phase, dissolution test results demonstrated that the dissolution rate of the coprecipitate was 21.4 times that of the active pharmaceutical ingredient (API). The results of IR indicated the possibility of the formation of intermolecular hydrogen bonds. The AFMÂ·IPC-208B findings revealed that baicalin was dispersed in PVP polymers with a molecular size of 2 nm and either wrapped or surrounded by approximately 0.4 nm of a five-membered ring of PVP arranged along the carbon chain sequentially. An intermolecular hydrogen bond was formed between the 4-OH of the glucuronide of baicalin and the O of the carbonyl group from PVP in addition to the formation of intramolecular hydrogen bonds within baicalin.

Preparation and characterization of baicalin-poly -vinylpyrrolidone coprecipitate.

Baicaline-polyvinylpyrrolidone (PVP) copr&#xE9;cipit&#xE9; a &#xE9;t&#xE9; pr&#xE9;par&#xE9; par la m&#xE9;thode solvant de la technologie de dispersion solide pour am&#xE9;liorer la vitesse de dissolution de baicaline. Le copr&#xE9;cipit&#xE9; a &#xE9;t&#xE9; caract&#xE9;ris&#xE9; en utilisant la calorim&#xE9;trie diff&#xE9;rentielle &#xE0; balayage (DSC), diffraction des rayons X sur poudre (DRX), la spectrom&#xE9;trie infrarouge (IR) et les essais de dissolution. Par ailleurs, l&#x26;#39;AFM &#xB7; IPC-208B microscopie &#xE0; haute r&#xE9;solution &#xE0; force atomique (AFM) a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;e pour caract&#xE9;riser la morphologie mol&#xE9;culaire de baicaline au sein de son transporteur et l&#x26;#39;interaction entre baicaline et son support. Les r&#xE9;sultats de DSC et de diffraction des rayons X a indiqu&#xE9; que baicaline r&#xE9;sid&#xE9; dans les polym&#xE8;res PVP dans une phase amorphe ou mol&#xE9;culaire, les r&#xE9;sultats des tests de dissolution ont d&#xE9;montr&#xE9; que la vitesse de dissolution du copr&#xE9;cipit&#xE9; &#xE9;tait de 21,4 fois celle de l&#x26;#39;ingr&#xE9;dient pharmaceutique actif (IPA). Les r&#xE9;sultats de la RI a indiqu&#xE9; la possibilit&#xE9; de la formation de liaisons hydrog&#xE8;ne intermol&#xE9;culaires. Les AFM &#xB7; CIB-208B recueillis, le baicaline a &#xE9;t&#xE9; dispers&#xE9; dans polym&#xE8;res PVP avec une taille mol&#xE9;culaire de 2 nm et soit envelopp&#xE9; ou entour&#xE9; par environ 0,4 nm d&#x26;#39;un cycle &#xE0; cinq cha&#xEE;nons de PVP agenc&#xE9; le long de la cha&#xEE;ne carbon&#xE9;e s&#xE9;quentiellement. Une liaison hydrog&#xE8;ne intermol&#xE9;culaire est form&#xE9;e entre le 4-OH du glucuronide de baicaline et le joint du groupe carbonyle de la PVP en outre la formation de liaisons hydrog&#xE8;ne intramol&#xE9;culaires dans les baicaline.

Pr&#xE9;paration et caract&#xE9;risation d&#x26;#39;baicaline-poly-vinylpyrrolidone copr&#xE9;cipit&#xE9;

Baicalin-Polyvinylpyrrolidon (PVP) Coprecipitate bereitete die solvent-Methode des solid Dispersion-Technologie die Aufl&ouml;sung Baicalin zu verbessern. Die Coprecipitate war gepr&auml;gt mit differential scanning Calorimetry (DSC), Pulver R&ouml;ntgendiffraktometrie (XRD), Infrarot-Spektrometrie (IR) und Aufl&ouml;sung zu testen. Dar&uuml;ber hinaus AFM&middot;IPC-208B hochaufl&ouml;sende Rasterkraftmikroskopie (AFM) wurde genutzt, um molekulare Morphologie der Baicalin innerhalb seiner Tr&auml;ger und die Interaktion zwischen Baicalin und seinen Tr&auml;ger zu charakterisieren. Der DSC und XRD ergab, dass Baicalin residierte in PVP-Polymere in einer amorphen oder molekulare Phase, Aufl&ouml;sung Testergebnisse gezeigt, dass die Aufl&ouml;sung der Coprecipitate 21.4 mal der pharmazeutische Wirkstoff (API) lag. Die Ergebnisse der IR zeigten die M&ouml;glichkeit der Bildung von intermolekularen Wasserstoffbr&uuml;ckenbindungen. Die AFM&middot;IPC-208B Erkenntnisse offenbart, dass Baicalin wurde verstreut in PVP-Polymere mit einer molekularen Gr&ouml;&szlig;e von 2 nm und gewickelt, oder umgeben von etwa 0,4 nm eine f&uuml;nf RINGATOME des PVP entlang der Kohlenstoff angeordnet-Kette nacheinander. Eine intermolekulare Wasserstoff-Bindung wurde zwischen der 4-OH von Glucuronid von Baicalin und dem O der Carbonyl-Gruppe aus PVP neben der Bildung von intramolekulare Wasserstoffbr&uuml;ckenbindungen innerhalb Baicalin gebildet.

Herstellung und Charakterisierung von Baicalin-Poly - Vinylpyrrolidon Coprecipitate.

Coprecipitato Baicalin-polivinilpirrolidone (PVP) &egrave; stato preparato con il metodo solvente di tecnologia di dispersione solidi per migliorare la velocit&agrave; di dissoluzione di baicalin. Il coprecipitato &egrave; stato caratterizzato mediante calorimetria a scansione differenziale (DSC), diffrazione della polvere di raggi x (XRD), spettrometria a infrarossi (IR) e test di dissoluzione. Inoltre, AFM&middot;IPC-208B ad alta risoluzione atomic force microscopy (AFM) &egrave; stato utilizzato per caratterizzare la morfologia molecolare di baicalin all&#39;interno del relativo elemento portante e l&#39;interazione tra baicalin e il relativo elemento portante. I risultati della DSC e XRD indicano che baicalin risiedeva in polimeri PVP in una fase amorfa o molecolare, risultati dei test di dissoluzione ha dimostrato che il tasso di dissoluzione del coprecipitato era 21,4 volte quello del principio attivo farmaceutico (API). I risultati di IR hanno indicato la possibilit&agrave; di formazione di legami idrogeno intermolecolari. Il AFM&middot;IPC-208B risultati hanno rivelato che baicalin fu dispersa in polimeri PVP con una dimensione molecolare di 2 nm e avvolto o circondato da circa 0,4 nm di un cinque-membered anello di PVP disposti lungo il carbonio della catena in sequenza. Si form&ograve; un legame a idrogeno intermolecolare tra 4-OH di glucuronide di baicalin e l&#39;O del gruppo carbonilico da PVP oltre la formazione di legami idrogeno intramolecolari entro baicalin.

Preparazione e caratterizzazione di coprecipitato - vinilpirrolidone baicalin-poly.

&#x30D0;&#x30A4;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30D3;&#x30CB;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30C9;&#x30F3;&#xFF08;PVP&#xFF09;&#x5171;&#x6C88;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6EB6;&#x89E3;&#x901F;&#x5EA6;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x56FA;&#x4F53;&#x5206;&#x6563;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x6EB6;&#x5A92;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x8ABF;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5171;&#x6C88;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x793A;&#x5DEE;&#x8D70;&#x67FB;&#x71B1;&#x91CF;&#x6E2C;&#x5B9A;&#xFF08;DSC&#xFF09;&#x3001;&#x7C89;&#x672B;X&#x7DDA;&#x56DE;&#x6298;&#xFF08;XRD&#xFF09;&#x3001;&#x8D64;&#x5916;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#xFF08;IR&#xFF09;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6EB6;&#x51FA;&#x8A66;&#x9A13;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;AFM&#xB7;IPC-208B&#x9AD8;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#xFF08;AFM&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x3068;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; DSC&#x3068;XRD&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x5171;&#x6C88;&#x7269;&#x306E;&#x6EB6;&#x89E3;&#x901F;&#x5EA6;&#x306F;21.4&#x500D;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x975E;&#x6676;&#x8CEA;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5206;&#x5B50;&#x76F8;&#x3001;&#x6EB6;&#x51FA;&#x8A66;&#x9A13;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;PVP&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x306B;&#x4F4F;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x533B;&#x85AC;&#x54C1;&#x6709;&#x52B9;&#x6210;&#x5206;&#xFF08;API&#xFF09;&#x306E;&#x3053;&#x3068;&#x3002; IR&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; AFM&#xB7;IPC-208B&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x304C;2 nm&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3068;PVP&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x306B;&#x5206;&#x6563;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x9806;&#x6B21;&#x70AD;&#x7D20;&#x9396;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x914D;&#x7F6E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;PVP&#x306E;&#x4E94;&#x54E1;&#x74B0;&#x306E;&#x7D04;0.4 nm&#x306E;&#x3067;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x56F2;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x5185;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x5185;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;PVP&#x304B;&#x3089;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30CB;&#x30EB;&#x57FA;&#x306E;O&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30AF;&#x30ED;&#x30CB;&#x30C9;&#x306E;4-OH&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;

&#x30D0;&#x30A4;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;-&#x30DD;&#x30EA;&#x30D3;&#x30CB;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30C9;&#x30F3;&#x5171;&#x6C88;&#x7269;&#x306E;&#x8ABF;&#x88FD;&#x3068;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;

Baicalin-polyvinylpyrrolidone (PVP) coprecipitate baicalin &#xD574;&#xC0B0; &#xC18D;&#xB3C4; &#xAC1C;&#xC120; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC6A9; &#xB9E4; &#xACE0;&#xCCB4; &#xBD84;&#xC0B0; &#xAE30;&#xC220; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC900;&#xBE44; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Coprecipitate &#xCC28;&#xB3D9; &#xC2A4;&#xCE90;&#xB2DD; &#xC5F4; &#xB7C9; &#xCE21;&#xC815; (DSC), x-&#xC120; &#xBD84;&#xB9D0; &#xD68C;&#xC808; (XRD), &#xC801;&#xC678;&#xC120; &#xBD84; &#xAD11; &#xBC95; (IR) &#xBC0F; &#xD574;&#xC0B0; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, AFM&middot;IPC 208B &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; (AFM) baicalin&#xC740; &#xCE90;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xC640; baicalin&#xC740; &#xCE90;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. DSC&#xC640; XRD&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xB098;&#xD0C0;&#xB09C; baicalin &#xBE44;&#xC815; &#xC9C8; &#xB610;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; PVP &#xACE0;&#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xAC70;&#xC8FC;, &#xD574;&#xC0B0; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xACB0;&#xACFC; coprecipitate&#xC758; &#xD574;&#xC0B0; &#xC728;&#xC740; 21.4 &#xBC30; &#xD65C;&#xC131; &#xC81C;&#xC57D; &#xC131;&#xBD84; (API)&#xC758; &#xC2DC;&#xC5F0;. IR&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; intermolecular &#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xC9C0;&#xC801; &#xD588;&#xB2E4;. AFM&middot;IPC 208B &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC1D;&#xD600; &#xADF8; baicalin &#xBD84;&#xC790; &#xD06C;&#xAE30; 2&#xC758; PVP &#xACE0;&#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xBD84;&#xC0B0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; nm &#xBC0F; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xB610;&#xB294; &#xC57D;&#xC73C;&#xB85C; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2F8;&#xC778; 0.4 nm&#xC758; PVP 5 membered &#xBC18;&#xC9C0;&#xC758; &#xD0C4;&#xC18C;&#xB97C; &#xB530;&#xB77C; &#xC815;&#xB82C; &#xB41C; &#xC21C;&#xC11C; &#xB300;&#xB85C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Intermolecular &#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569; baicalin glucuronide 4 &#xC624; &#xC0AC;&#xC774; baicalin &#xB0B4; intramolecular &#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569;&#xC758; &#xD615;&#xC131; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; PVP&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE74; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; O &#xD615;&#xC131; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xC900;&#xBE44; &#xBC0F; baicalin &#xD3F4; &#xB9AC; vinylpyrrolidone&#xC758; coprecipitate.

Baicalina-polivinilpirrolidona (PVP) coprecipitado se prepar&#xF3; por el m&#xE9;todo de disolvente de la tecnolog&#xED;a de dispersi&#xF3;n s&#xF3;lida para mejorar la velocidad de disoluci&#xF3;n de baicalina. El coprecipitado se caracteriz&#xF3; mediante calorimetr&#xED;a diferencial de barrido (DSC), difracci&#xF3;n de rayos X en polvo (DRX), espectrometr&#xED;a infrarroja (IR) y las pruebas de disoluci&#xF3;n. Por otra parte, AFM &#xB7; IPC-208B de microscop&#xED;a de alta resoluci&#xF3;n de fuerza at&#xF3;mica (AFM) se utiliz&#xF3; para caracterizar la morfolog&#xED;a molecular de baicalina dentro de su compa&#xF1;&#xED;a y la interacci&#xF3;n entre baicalina y su portador. Los resultados de DSC y DRX indic&#xF3; que baicalina resid&#xED;a en pol&#xED;meros de PVP en una fase amorfa o molecular, resultados de la disoluci&#xF3;n de prueba demostr&#xF3; que la velocidad de disoluci&#xF3;n del coprecipitado fue 21,4 veces mayor que la del ingrediente farmac&#xE9;utico activo (API). Los resultados de IR indic&#xF3; la posibilidad de la formaci&#xF3;n de enlaces de hidr&#xF3;geno intermoleculares. La AFM &#xB7; IPC-208B resultados revelaron que baicalina se dispers&#xF3; en pol&#xED;meros de PVP con un tama&#xF1;o molecular de 2 nm y, o bien envuelto o rodeado por aproximadamente 0,4 nm de un anillo de cinco miembros de PVP dispuestos a lo largo de la cadena de carbono de forma secuencial. Un enlace de hidr&#xF3;geno intermolecular se forma entre la 4-OH del glucur&#xF3;nido de baicalina y el O del grupo carbonilo de PVP en adici&#xF3;n a la formaci&#xF3;n de enlaces de hidr&#xF3;geno intramoleculares dentro baicalina.

Preparaci&#xF3;n y caracterizaci&#xF3;n de Baicalina-poli-vinilpirrolidona coprecipitado

&#x548C;&#x79CD;&#x9525;&#x4F53;&#x8868;&#x793A;&#x4E25;&#x683C; monoallelic &#x65F6;&#x5C1A;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53D8;&#x4F53;&#x8868;&#x9762;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D; (&#x53EF;&#x89C6;&#x5E94;&#x529B;&#x7B49;&#x7EA7;) &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E00;&#x91CD;&#x8981;&#x81F4;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x89C4;&#x7BA1;&#x51E0;&#x5341;&#x5E74;&#x6765;&#x4E00;&#x76F4;&#x662F;&#x7814;&#x7A76;&#x91CD;&#x70B9;&#x3002;&#x7AEF;&#x7C92;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6548;&#x5E94; (TPE)&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x7684;&#x73B0;&#x8C61;&#xFF0C;&#x63D0;&#x51FA;&#x8981;&#x5728;&#x53EF;&#x89C6;&#x5E94;&#x529B;&#x7B49;&#x7EA7;&#x89C4;&#x4F8B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x5374;&#x6CA1;&#x6709;&#x7AEF;&#x7C92;&#x86CB;&#x767D;&#x786E;&#x5B9A;&#x5176;&#x4E2D;&#x65AD;&#x5BFC;&#x81F4;&#x53EF;&#x89C6;&#x5E94;&#x529B;&#x7B49;&#x7EA7; derepression&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E86; tbRAP1 T.&#x9525;&#x4F53;&#x7C92;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x548C;&#x4E3B;&#x8981;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x7684;&#x6C89;&#x9ED8;&#x53EF;&#x89C6;&#x5E94;&#x529B;&#x7B49;&#x7EA7;&#x8868;&#x8FBE;&#x7AD9;&#x70B9; (ESs)&#x3002;TbRAP1 &#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x94FE;&#x63A5; ES-VSGs derepression &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; VSGs &#x4F4D;&#x4E8E;&#x5176;&#x4ED6;&#x4F4D;&#x7F6E;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7AEF;&#x7C92;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x57FA;&#x56E0;&#x6BD4;&#x7AEF;&#x7C92;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5F3A; derepression&#x3002;&#x6B64;&#x5706;&#x9525;&#x7684;&#x6C89;&#x9ED8;&#x6A21;&#x5F0F;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8FA9;&#x79F0;&#x7AEF;&#x7C92;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; tbRAP1 &#x7684;&#x6C89;&#x9ED8;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x7AEF;&#x7C92;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x53EF;&#x89C6;&#x5E94;&#x529B;&#x7B49;&#x7EA7;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C03;&#x63A7;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#x5C06;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x662F;&#x5426;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x91CD;&#x6784;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x53E4;&#x5178; TPE &#x5728; tbRAP1 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6C89;&#x9ED8;&#x3002;

&#x65B0;&#x53D1;&#x73B0;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x53E4;&#x4EE3;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7AEF;&#x7C92;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Trypanosoma brucei expresses Variant Surface Glycoprotein (VSG) genes in a strictly monoallelic fashion in its mammalian hosts, and the regulation of this important virulence mechanism has been the research focus for decades. Telomere position effect (TPE), an epigenetic phenomenon, has been proposed to play a critical role in VSG regulation, yet no telomeric protein was identified whose disruption led to VSG derepression. We recently identified tbRAP1 as an intrinsic component of the T. brucei telomere complex and a major regulator for silencing VSG expression sites (ESs). Knockdown of tbRAP1 led to derepression of all ES-linked VSGs but not VSGs located elsewhere, and resulted in stronger derepression of telomere-proximal genes than telomere-distal genes. This tapered silencing pattern further argues that telomere integrity plays a key role in tbRAP1-dependent silencing and for the first time provides direct evidence indicating that telomeres are important for VSG expression regulation. Whether chromatin remodeling is important for tbRAP1-mediated silencing as in classical TPE will also be discussed.

A newly discovered role of telomeres in an ancient organism.

Trypanosoma brucei exprime glycoprot&#xE9;ine variable de surface (VSG) d&#x26;#39;une fa&#xE7;on strictement monoall&#xE9;lique dans ses h&#xF4;tes mammif&#xE8;res, et la r&#xE9;gulation de ce m&#xE9;canisme de virulence important a &#xE9;t&#xE9; l&#x26;#39;objet de recherche depuis des d&#xE9;cennies. Effet de position des t&#xE9;lom&#xE8;res (TPE), un ph&#xE9;nom&#xE8;ne &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique, a &#xE9;t&#xE9; propos&#xE9; de jouer un r&#xF4;le crucial dans la VSG la r&#xE9;glementation, mais aucune prot&#xE9;ine t&#xE9;lom&#xE9;rique a &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9; dont la perturbation conduit &#xE0; d&#xE9;r&#xE9;pression VSG. Nous avons r&#xE9;cemment identifi&#xE9; tbRAP1 comme une composante intrins&#xE8;que du complexe T. brucei t&#xE9;lom&#xE8;res et un r&#xE9;gulateur majeur pour faire taire les sites d&#x26;#39;expression de VSG (ESS). Knockdown de tbRAP1 conduit &#xE0; d&#xE9;r&#xE9;pression de tous les VSG ES li&#xE9;s mais pas VSG situ&#xE9; ailleurs, et a abouti &#xE0; plus forte d&#xE9;r&#xE9;pression de t&#xE9;lom&#xE8;re-proximales g&#xE8;nes que des t&#xE9;lom&#xE8;res-distales des g&#xE8;nes. Ce mod&#xE8;le silencieux conique soutient en outre que l&#x26;#39;int&#xE9;grit&#xE9; des t&#xE9;lom&#xE8;res joue un r&#xF4;le cl&#xE9; dans tbRAP1-d&#xE9;pendante au silence et pour la premi&#xE8;re fois fournit une preuve directe indiquant que les t&#xE9;lom&#xE8;res jouent un r&#xF4;le important pour VSG r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;expression. Que remodelage de la chromatine est important pour tbRAP1 m&#xE9;di&#xE9;e silence comme dans le classique TPE seront &#xE9;galement discut&#xE9;es.

Un r&#xF4;le nouvellement d&#xE9;couvert des t&#xE9;lom&#xE8;res dans un organisme antique

Trypanosoma Brucei dr&uuml;ckt Variant Oberfl&auml;che Glykoprotein (VSG) Gene in streng monoallelisches Weise bei seinen S&auml;ugetier- und die Verordnung dieses wichtige Virulenz-Mechanismus ist seit Jahrzehnten der Forschungsschwerpunkt. Telomer-Position, die Wirkung (TPE), eine epigenetische Ph&auml;nomen vorgeschlagen wurde eine kritische Rolle in VSG-Verordnung, noch kein Telomerisches Protein war identifiziert, deren St&ouml;rung zu VSG Derepression gef&uuml;hrt. Wir identifiziert tbRAP1 als intrinsische Bestandteil der T. Brucei Telomer-komplex und ein wichtiger Regulator zum Schweigen zu VSG Ausdruck Websites (ESs) k&uuml;rzlich. Niederschlag des tbRAP1 f&uuml;hrte zu der ES-chromosomale VSGs derepression aber nicht VSGs liegt anderswo, und f&uuml;hrte zu st&auml;rkeren Derepression Telomer-proximale Gene als Telomer-distale Gene. Diese konische silencing Muster weiter argumentiert, dass die Telomer-Integrit&auml;t spielt eine Schl&uuml;sselrolle im tbRAP1-abh&auml;ngige zum Schweigen und zum ersten Mal bietet direkte Beweise, dass Telomere f&uuml;r VSG Ausdruck Verordnung wichtig sind. Ob Chromatin Umbau f&uuml;r tbRAP1-vermittelte wie in klassischen TPE Unterdr&uuml;ckender wichtig wird auch diskutiert werden.

Eine neu entdeckte Rolle der Telomere in einem alten Organismus.

Trypanosoma brucei esprime geni variante superficie glicoproteina (VSG) in un modo rigorosamente monoallelic nei suoi ospiti mammiferi, e il regolamento di questo meccanismo di virulenza importante &egrave; stato al centro di ricerca per decenni. Posizione di telomeri effetto (TPE), un fenomeno epigenetico, &egrave; stato proposto di svolgere un ruolo critico nella regolazione VSG, ancora nessuna proteina telomerica era identificata cui perturbazione ha portato a derepression VSG. Recentemente abbiamo identificato tbRAP1 come componente intrinseca del complesso T. brucei telomeri e un regolatore importante per silenziare siti di espressione VSG (ESs). Atterramento di tbRAP1 ha portato a derepression del tutto legata all&#39;ES VSGs ma non VSGs si trova altrove e portato a derepression pi&ugrave; forte dei geni telomero-prossimale di geni telomero-distale. Questo modello di silenziamento rastremato ulteriormente sostiene che l&#39;integrit&agrave; telomeri gioca un ruolo chiave nel silenziamento tbRAP1-dipendente e per la prima volta fornisce la prova diretta che indica che i telomeri sono importanti per la regolazione di espressione VSG. Se il rimodellamento della cromatina &egrave; importante per tbRAP1-mediated silencing come in TPE classica sar&agrave; anche discusso.

Un ruolo appena scoperto dei telomeri in un antico organismo.

&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x53B3;&#x5BC6;&#x306B;monoallelic&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x5909;&#x7570;&#x8868;&#x9762;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;VSG&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306F;&#x3001;&#x6570;&#x5341;&#x5E74;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x7126;&#x70B9;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x52B9;&#x679C;&#xFF08;TPE&#xFF09;&#x3001;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x73FE;&#x8C61;&#x306F;&#x3001;&#x898F;&#x5236;&#x3092;VSG&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6DF7;&#x4E71;VSG&#x6291;&#x5236;&#x89E3;&#x9664;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;T.&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;VSG&#x767A;&#x73FE;&#x90E8;&#x4F4D;&#xFF08;ESS&#xFF09;&#x3092;&#x9ED9;&#x3089;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;tbRAP1&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; tbRAP1&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;ES-&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;VSGs&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x89E3;&#x9664;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x5225;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3088;&#x308A;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x8FD1;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x6291;&#x5236;&#x89E3;&#x9664;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;VSGs&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30C6;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x304C;tbRAP1&#x4F9D;&#x5B58;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x304C;&#x767A;&#x73FE;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3092;VSG&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3068;&#x4E3B;&#x5F35;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;TPE&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;tbRAP1&#x5A92;&#x4ECB;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x3082;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x53E4;&#x4EE3;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F79;&#x5272;

Trypanosoma brucei &#xBCC0;&#xD615; &#xD45C;&#xBA74; &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (VSG) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5C4;&#xACA9; &#xD558; &#xAC8C; monoallelic &#xD328;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xACE0; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC774; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB3C5;&#xC131; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC218;&#xC2ED; &#xB144; &#xB3D9;&#xC548; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Telomere &#xC704;&#xCE58; &#xD6A8;&#xACFC; (TPE) epigenetic &#xD604;&#xC0C1; &#xC5C6;&#xC74C; telomeric &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC544;&#xC9C1; VSG &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4; &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; &#xC911;&#xB2E8; VSG derepression&#xC744; &#xD655;&#xC778;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCD5C;&#xADFC; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; T. brucei telomere&#xC758; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB85C; tbRAP1 &#xBC0F; VSG &#xC2DD; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; (ESs) &#xC785;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC8FC;&#xC694; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xD655;&#xC778;. &#xCD5C;&#xC800; Tbrap1&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; ES &#xB9C1;&#xD06C; &#xB41C; Vsgs&#xC758; derepression&#xC744; &#xC8FC;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; VSGs &#xB2E4;&#xB978; &#xC7A5;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC;, telomere &#xC6D0;&#xC2EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCF4;&#xB2E4; proximal telomere &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAC15;&#xD55C; derepression &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC774; &#xD14C;&#xC774;&#xD37C; silencing &#xD328;&#xD134; &#xCD94;&#xAC00; telomere &#xBB34;&#xACB0;&#xC131; tbRAP1 &#xC885;&#xC18D; &#xCE68;&#xBB35;&#xC5D0; &#xD575;&#xC2EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; &#xCC98;&#xC74C; &#xC2DC;&#xAC04; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; telomeres &#xC911;&#xC694; VSG &#xC2DD; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xC8FC;&#xC7A5; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xAC1C;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; chromatin &#xC778;&#xC9C0; &#xD074;&#xB798;&#xC2DD; TPE&#xC5D0;&#xC11C; &#xC785;&#xC744; tbRAP1 &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC124;&#xBA85;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACE0; &#xB300; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0; telomeres&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C; &#xBC1C;&#xACAC;&#xB41C; &#xB41C; &#xC5ED;&#xD560;.

Trypanosoma brucei expresa variantes glicoprote&#xED;na de superficie (VSG) los genes de una forma estrictamente monoal&#xE9;lica en sus hu&#xE9;spedes mam&#xED;feros, y la regulaci&#xF3;n de este mecanismo de virulencia importante ha sido el foco de la investigaci&#xF3;n durante d&#xE9;cadas. Efecto de la posici&#xF3;n del tel&#xF3;mero (TPE), un fen&#xF3;meno epigen&#xE9;tico, se ha propuesto para desempe&#xF1;ar un papel fundamental en la regulaci&#xF3;n de VSG, sin embargo, ninguna prote&#xED;na telom&#xE9;rica fue identificada cuyo deterioro llev&#xF3; a desrepresi&#xF3;n VSG. Recientemente hemos identificado tbRAP1 como un componente intr&#xED;nseco de la T. brucei tel&#xF3;meros complejo y un regulador importante para silenciar a los sitios de VSG expresi&#xF3;n (ESS). Derribo de tbRAP1 llev&#xF3; a desrepresi&#xF3;n de todos VSG ES-vinculados, pero no VSG ubicado en otro lugar, y dio lugar a fuertes desrepresi&#xF3;n de los tel&#xF3;meros-proximal genes que los tel&#xF3;meros-distales genes. Este patr&#xF3;n de silenciamiento c&#xF3;nico sostiene adem&#xE1;s que la integridad de los tel&#xF3;meros juegan un papel clave en tbRAP1 dependiente de silenciamiento y por primera vez, proporciona una evidencia directa que indique que los tel&#xF3;meros son importantes para la regulaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n VSG. Si remodelaci&#xF3;n de la cromatina es importante para tbRAP1 mediada por silenciamiento, como en el cl&#xE1;sico TPE tambi&#xE9;n ser&#xE1;n discutidos.

Bibo Li

Biological,
Geo. & Env. Sciences,
Biological, Geo. & Env. Sciences

Cleveland State University

Examination of the Telomere G-overhang Structure in Trypanosoma brucei

Bibo Li

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Cleveland State University

Examination of the Telomere G-overhang Structure in Trypanosoma brucei

Biological,
Geo. & Env. Sciences,
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