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Silicon Microchips for Manipulating Cell-cell Interaction

The role of the cellular microenvironment is recognized as crucial in determining cell fate and function in virtually all mammalian tissues from ...

MIT - Massachusetts Institute of Technology

Micropatterned &#x7EC6;&#x80DE;&#x6784;&#x9020;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x7684;&#x9635;&#x5217;&#x6587;&#x5316;&#x57FA;&#x5E95;&#x4E0A;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x8868;&#x9762;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x56F0;&#x96BE;&#x53D7;&#x5230;&#x9650;&#x5236;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x591A;&#x4E2A;&#x5BF9;&#x9F50;&#x7684;&#x63A9;&#x7801;&#x7684;&#x5149;&#x523B;&#x6280;&#x672F;&#x662F;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x7528;&#x4E8E;&#x5E7F;&#x4E49;&#x591A;&#x5143;&#x9635;&#x5217;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5F80;&#x5F80;&#x8FC7;&#x4E8E;&#x4E25;&#x82DB;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x8C03;&#x6574;&#x4EE5;&#x7EF4;&#x62A4;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x5171;&#x4EF7;&#x952E;&#x8026;&#x5408; poly(ethylene glycol) &#x805A;&#x4E59;&#x4E8C;&#x9187; (PEG) &#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x5438;&#x9644;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x86CB;&#x767D;&#x4E24;&#x4E2A;&#x63A9;&#x7801;&#x5149;&#x523B;&#x5DE5;&#x827A; (&#x5982;&#x80F6;&#x539F;&#x6211;)&#xFF0C;&#x53CA;&#x5438;&#x9644;&#x8840;&#x6E05;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5173;&#x7CFB;&#xFF09;&#x3002;&#x4ECE;&#x800C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x5C0F;&#x5B66;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; 3T3 &#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x660E;&#x63A7;&#x5236;&#x63A5;&#x89E6;&#x548C;&#x8D85;&#x8FC7;&#x4E00;&#x4E2A;&#x661F;&#x671F;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x95F4;&#x8DDD; &#xFF08;20-200 microm&#xFF09;&#x3002;&#x6B64;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E5F;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x901A;&#x8BAF;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#x5FAE;&#x578B;&#x63A7;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x63A5;&#x89E6;&#x548C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E09;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x8868;&#x9762;&#x56FE;&#x6848;&#x5316;&#x7684;&#x95F4;&#x8DDD;&#x3002;

The complexity of micropatterned cell constructs has been limited by difficulties in patterning more than two surface components on a culture substrate. Photolithography using multiple aligned masks is well established for generalized multicomponent patterning, but is often too harsh for biomolecules. We report a two-mask photolithographic process that is tuned to preserve bioactivity in patterns composed of covalently coupled poly(ethylene glycol) (PEG), adsorbed extracellular matrix protein (e.g., collagen I), and adsorbed serum proteins (e.g., vitronectin). Thereby, we pattern two cell types-primary hepatocytes and 3T3 fibroblasts-demonstrating control over contact and spacing (20-200 microm) between the two cell types for over one week. This method is applicable to the study of intercellular communication in cell biology and tissue engineering.

Microscale control of cell contact and spacing via three-component surface patterning.

La complexit&#xE9; des constructions cellulaires micro&#xE9;lectrodes a &#xE9;t&#xE9; limit&#xE9;e par les difficult&#xE9;s dans les composants de structuration de surface de plus de deux sur un substrat de culture. Photolithographie &#xE0; l&#x26;#39;aide de multiples masques align&#xE9;s est bien &#xE9;tablie pour g&#xE9;n&#xE9;ralis&#xE9;e multicomposant motifs, mais il est souvent trop s&#xE9;v&#xE8;re pour des biomol&#xE9;cules. On rapporte un processus en deux masque photolithographique qui est accord&#xE9; pour pr&#xE9;server la bioactivit&#xE9; de motifs constitu&#xE9;s de coupl&#xE9; de mani&#xE8;re covalente poly (&#xE9;thyl&#xE8;ne glycol) (PEG), adsorb&#xE9; prot&#xE9;ine de matrice extracellulaire (par exemple, du collag&#xE8;ne I), et adsorb&#xE9;s prot&#xE9;ines s&#xE9;riques (par exemple, la vitronectine). Ainsi, nous mod&#xE8;le deux types de cellules-h&#xE9;patocytes primaires et 3T3-fibroblastes d&#xE9;montrer le contr&#xF4;le de contacts et de l&#x26;#39;espacement (20-200 microm&#xE8;tre) entre les deux types de cellules pour plus d&#x26;#39;une semaine. Cette m&#xE9;thode est applicable &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;tude de la communication intercellulaire en biologie cellulaire et ing&#xE9;nierie tissulaire.

Contr&#xF4;le Microscale de contact cellulaire et de l&#x26;#39;espacement Via Trois-composante modelage du rev&#xEA;tement

Die Komplexit&auml;t der Micropatterned Zelle Konstrukte wurde durch Schwierigkeiten bei der Musterung von mehr als zwei Oberfl&auml;chen-Komponenten auf einem Kultur-Substrat begrenzt. Fotolithografie mit mehreren ausgerichtete Masken f&uuml;r generalisierte Multikomponenten Musterung gut etabliert ist, aber ist oft zu hart f&uuml;r Biomolek&uuml;le. Wir berichten einen zwei-Maske fotolithografische Prozess, der optimiert ist, um die Bioaktivit&auml;t in Mustern aus kovalent Poly(ethylene glycol) (PEG), adsorbiert extrazellul&auml;ren Matrixprotein zu erhalten (z. B. Kollagen ich), und Serum-Proteine (z. B. spezifischer) adsorbiert. Damit Muster wir zwei Zelle Arten-prim&auml;re Hepatozyten und 3T3 Fibroblasten-Nachweis Kontrolle Kontakt und Abstand (20-200 Microm) zwischen den beiden Zelltypen f&uuml;r &uuml;ber eine Woche. Diese Methode gilt f&uuml;r das Studium der interzellul&auml;re Kommunikation in Zellbiologie und Tissue Engineering.

Microscale Kontrolle der Zelle Kontakt und Abstand &uuml;ber drei-Komponenten-Oberfl&auml;che-Musterung.

La complessit&agrave; dei costrutti di cella micropatterned ha stata limitata dalle difficolt&agrave; nella creazione di una serie pi&ugrave; di due componenti di superficie su un substrato di coltura. Fotolitografia utilizzando maschere pi&ugrave; allineate &egrave; ben definita per incartonatura multicomponente generalizzata, ma spesso &egrave; troppo dura per biomolecole. Riportiamo un processo di fotolitografia due-maschera &egrave; sintonizzato per preservare la bioattivit&agrave; nei modelli composti da legame covalente accoppiati poly(ethylene glycol) (PEG), adsorbito extracellulare della proteina (ad es., collagene I) e adsorbita proteine del siero (ad es., vitronectina). Quindi, abbiamo pattern due epatociti primari tipi cellulari e 3T3 fibroblasti dimostrando controllo contatto e spaziatura (20-200 microm) tra i due tipi di cellule per oltre una settimana. Questo metodo &egrave; applicabile allo studio della comunicazione intercellulare in biologia cellulare e ingegneria dei tessuti.

Controllo su microscala di contatto delle cellule e la spaziatura tramite tre componenti superficiali patterning.

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x306F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x57FA;&#x677F;&#x4E0A;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x56F0;&#x96E3;&#x3064;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x9650;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6574;&#x5217;&#x30DE;&#x30B9;&#x30AF;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30D5;&#x30A9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30BD;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x591A;&#x6210;&#x5206;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x304C;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F59;&#x308A;&#x306B;&#x53B3;&#x3057;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5171;&#x6709;&#x7D50;&#x5408;&#x30DD;&#x30EA;&#xFF08;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF09;&#xFF08;PEG&#xFF09;&#x3001;&#x5438;&#x7740;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;I&#xFF09;&#x3001;&#x5438;&#x7740;&#x8840;&#x6E05;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x30D3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30CD;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#xFF09;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;2&#x30DE;&#x30B9;&#x30AF;&#x30D5;&#x30A9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30BD;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;2&#x3064;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x3001;&#x521D;&#x4EE3;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x4E00;&#x9031;&#x9593;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x9694;&#xFF08;20&#x304B;&#x3089;200&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;3T3&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x30C7;&#x30E2;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3068;&#x7D44;&#x7E54;&#x5DE5;&#x5B66;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x3082;&#x9069;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

3&#x6210;&#x5206;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9023;&#x7D61;&#x5148;&#x3068;&#x9593;&#x9694;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x5236;&#x5FA1;

Micropatterned &#xC140; &#xAD6C;&#xBB38;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131; &#xBB38;&#xD654; &#xAE30;&#xD310;&#xC5D0; &#xB450; &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6C0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC18C; &#xADF8;&#xB798;&#xD53C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC815;&#xB82C;&#xB41C; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD06C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC77C;&#xBC18;&#xD654; &#xB41C; &#xAE61;&#xD1B5;&#xC774; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC124;&#xB9BD; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC885;&#xC885; biomolecules&#xB97C; &#xB108;&#xBB34; &#xAC00;&#xD639;&#xD55C;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; adsorbed &#x70AD; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; poly(ethylene glycol) (&#xB098;&#xBB34; &#xBABB;)&#xC758; &#xD328;&#xD134;&#xC5D0;&#xC11C; bioactivity &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC870;&#xC815; &#xB418;&#xC5B4; 2 &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD06C; photolithographic &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; (&#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xB098;), &#xBC0F; adsorbed &#xD608; &#xCCAD; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (&#xC608;: vitronectin). &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD328;&#xD134; &#xB450; &#xC140; &#xC720;&#xD615; &#xAE30;&#xBCF8; hepatocytes &#xBC0F; 3T3 &#xC811;&#xCD09;&#xACFC; 1 &#xC8FC;&#xC77C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAC04;&#xACA9; (20-200 microm) &#xC81C;&#xC5B4; &#xAC8C;&#xC7AC; &#xC2DC;&#xC5F0;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xACF5;&#xD559;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xCEE4;&#xBBA4;&#xB2C8;&#xCF00;&#xC774;&#xC158;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Microscale &#xC81C;&#xC5B4; &#xC140; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98; 3 &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xD45C;&#xBA74; &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xAC04;&#xACA9;

La complejidad de construcciones de c&#xE9;lulas micropatterned ha sido limitado por las dificultades en los componentes de modelado de superficie m&#xE1;s de dos sobre un sustrato de cultivo. La fotolitograf&#xED;a utilizando m&#xE1;scaras m&#xFA;ltiples alineados est&#xE1; bien establecido para generalizar los patrones de varios componentes, pero a menudo es demasiado duro para las biomol&#xE9;culas. Se presenta un proceso fotolitogr&#xE1;fico de dos m&#xE1;scara que est&#xE1; sintonizado para preservar bioactividad en los patrones de compuestos de covalentemente unido poli (etileno glicol) (PEG), la prote&#xED;na adsorbida matriz extracelular (por ejemplo, el col&#xE1;geno I), y adsorbidos prote&#xED;nas s&#xE9;ricas (por ejemplo, vitronectina). Con esto hemos patr&#xF3;n de dos tipos de c&#xE9;lulas primarias, hepatocitos y fibroblastos 3T3-demostrando control sobre el contacto y la separaci&#xF3;n (20-200 micras) entre los dos tipos de c&#xE9;lulas durante m&#xE1;s de una semana. Este m&#xE9;todo es aplicable al estudio de la comunicaci&#xF3;n intercelular en la biolog&#xED;a celular y la ingenier&#xED;a de tejidos.

Control de microescala de contacto celda y Espacio a trav&#xE9;s de tres componentes, con patr&#xF3;n de superficie

&#x751F;&#x7269;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0E;&#x53D1;&#x5C55;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x53D6;&#x51B3;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x4E24;&#x6B21;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E0E;&#x7A7A;&#x95F4; &#xFF1B; &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5177;&#x6709;&#x6311;&#x6218;&#x6027;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x5E26;&#x6709;&#x79FB;&#x52A8;&#x90E8;&#x4EF6;&#x7684;&#x5FAE;&#x673A;&#x68B0;&#x7845;&#x886C;&#x5E95;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8FC7;&#x8D34;&#x58C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x64CD;&#x7EB5;&#x5FAE;&#x7C73;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECE;&#x800C;&#x5B9E;&#x73B0;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x7EC4;&#x6210;&#x548C;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x673A;&#x68B0;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6848;&#x4F8B;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6F14;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x5DE5;&#x5177;&#x5728;&#x89E3;&#x6784;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x652F;&#x6301;&#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5171;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x901A;&#x8BAF;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x5B9E;&#x7528;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4; &#xFF08;&#x7EA6;&#x5C0F;&#x65F6;&#xFF09; &#x8DDF;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6301;&#x7EED;&#x7684;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x6709;&#x6548;&#x8303;&#x56F4;&#x7684;&#x809D;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x7684;&#x7EF4;&#x62A4;&#x9700;&#x8981;&#x76F4;&#x63A5;&#x63A5;&#x89E6; &lt; 400 microm&#x3002;&#x6B64;&#x5E73;&#x53F0;&#x4F7F;&#x591A;&#x79CD;&#x7528;&#x9014;&#xFF0C;&#x8DE8;&#x8D8A;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x751F;&#x3001; &#x52A8;&#x6001;&#x5E73;&#x8861;&#x548C;&#x81F4;&#x75C5;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#x5FAE;&#x673A;&#x68B0;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The development and function of living tissues depends largely on interactions between cells that can vary in both time and space; however, temporal control of cell-cell interaction is experimentally challenging. By using a micromachined silicon substrate with moving parts, we demonstrate the dynamic regulation of cell-cell interactions via direct manipulation of adherent cells with micrometer-scale precision. We thereby achieve mechanical control of both tissue composition and spatial organization. As a case study, we demonstrate the utility of this tool in deconstructing the dynamics of intercellular communication between hepatocytes and supportive stromal cells in coculture. Our findings indicate that the maintenance of the hepatocellular phenotype by stroma requires direct contact for a limited time ( approximately hours) followed by a sustained soluble signal that has an effective range of <400 microm. This platform enables investigation of dynamic cell-cell interaction in a multitude of applications, spanning embryogenesis, homeostasis, and pathogenic processes.

Micromechanical control of cell-cell interactions.

Le d&#xE9;veloppement et la fonction des tissus vivants d&#xE9;pend en grande partie sur les interactions entre les cellules qui peuvent varier dans le temps et l&#x26;#39;espace; cependant, le contr&#xF4;le temporel de l&#x26;#39;interaction cellule-cellule est exp&#xE9;rimentalement difficile. En utilisant un substrat de silicium micro-usin&#xE9; avec des pi&#xE8;ces mobiles, nous d&#xE9;montrons la r&#xE9;gulation dynamique de interactions cellule-cellule par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire d&#x26;#39;une manipulation directe des cellules adh&#xE9;rentes avec &#xE9;chelle microm&#xE9;trique de pr&#xE9;cision. Nous atteindre ainsi le contr&#xF4;le m&#xE9;canique de la composition des tissus &#xE0; la fois et l&#x26;#39;organisation spatiale. Comme une &#xE9;tude de cas, nous d&#xE9;montrons l&#x26;#39;utilit&#xE9; de cet outil dans la d&#xE9;construction de la dynamique de la communication intercellulaire entre les h&#xE9;patocytes et les cellules stromales de soutien en co-culture. Nos r&#xE9;sultats indiquent que le maintien du ph&#xE9;notype h&#xE9;patocellulaire par stroma n&#xE9;cessite un contact direct pour un temps limit&#xE9; (environ heures) suivi par un signal soutenu soluble qui a une port&#xE9;e effective de &#x26;lt;400 microm. Cette plate-forme permet l&#x26;#39;&#xE9;tude de la dynamique d&#x26;#39;interaction cellule-cellule dans une multitude d&#x26;#39;applications, l&#x26;#39;embryogen&#xE8;se couvrant, l&#x26;#39;hom&#xE9;ostasie, et les processus pathog&#xE8;nes.

Contr&#xF4;le de la microm&#xE9;canique Interactions cellule-cellule

Die Entwicklung und Funktion des lebendes Gewebe h&auml;ngt weitgehend von Interaktionen zwischen Zellen, die sowohl Zeit schwanken k&ouml;nnen und Raum; zeitliche Steuerung der Zell-Zell-Interaktion ist jedoch experimentell schwierig. Mit einem Mikromaschinen-Silizium-Substrat mit beweglichen Teilen, zeigen wir die dynamische Regelung der Zell-Zell-Interaktionen &uuml;ber direkte Manipulation adh&auml;renter Zellen mit Mikrometer-Ma&szlig;stab Pr&auml;zision. Wir erreichen damit mechanische Kontrolle der Gewebe Zusammensetzung und der r&auml;umlichen Organisation. Als Fallstudie zeigen wir die N&uuml;tzlichkeit dieses Tool in der Dekonstruktion der Dynamik der interzellul&auml;ren Kommunikation zwischen Hepatozyten und unterst&uuml;tzenden Stromazellen Zellen in Coculture. Unsere Ergebnisse zeigen, dass die Wartung des hepatozellul&auml;ren Ph&auml;notyps von Stroma direkten Kontakt f&uuml;r eine begrenzte Zeit erfordert (ca. Stunden) gefolgt von ein nachhaltiges l&ouml;sliche Signal, das eine effektive Reichweite von hat &lt; 400 Microm. Diese Plattform erm&ouml;glicht die Untersuchung des dynamischen Zell-Zell-Interaktion in eine Vielzahl von Anwendungen, &uuml;bergreifende Embryogenese, Hom&ouml;ostase und pathogene Prozesse.

Mikromechanische Kontrolle der Zell-Zell-Interaktionen.

Lo sviluppo e la funzione dei tessuti viventi dipende in larga misura le interazioni tra le cellule che possono variare nel tempo sia e spazio; Tuttavia, controllo temporale dell&#39;interazione cellula-cellula &egrave; sperimentalmente impegnativo. Utilizzando un substrato di silicio micro con parti in movimento, dimostriamo la regolazione dinamica delle interazioni cellula-cellula tramite manipolazione diretta delle celle aderenti con precisione micrometrica-scala. Raggiungiamo quindi il controllo meccanico di composizione del tessuto e di organizzazione spaziale. Come un caso di studio, ci dimostrano l&#39;utilit&agrave; di questo strumento nel decostruire le dinamiche della comunicazione intercellulare tra epatociti e cellule stromali solidale in coculture. I nostri risultati indicano che il mantenimento del fenotipo epatocellulare da stroma richiede contatto diretto per un periodo di tempo limitato (circa ore) seguita da un segnale continuo solubile che ha una gamma efficace di &lt; microm 400. Questa piattaforma permette di indagine dell&#39;interazione cellula-cellula dinamica in una moltitudine di applicazioni, che abbracciano l&#39;embriogenesi, l&#39;omeostasi e processi patogeni.

Micromeccanica controllo delle interazioni cellula-cellula.

&#x751F;&#x4F53;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x6642;&#x9593;&#x3068;&#x7A7A;&#x9593;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x5909;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x5236;&#x5FA1;&#x3092;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x306B;&#x56F0;&#x96E3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x53EF;&#x52D5;&#x90E8;&#x306E;&#x5FAE;&#x7D30;&#x52A0;&#x5DE5;&#x30B7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x57FA;&#x677F;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3067;&#x63A5;&#x7740;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x8ABF;&#x6574;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x7D44;&#x6210;&#x3068;&#x7A7A;&#x9593;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306A;&#x5236;&#x5FA1;&#x3092;&#x5B9F;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30C7;&#x30A3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x652F;&#x6301;&#x9593;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x5206;&#x89E3;&#x3067;&#x3053;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x6240;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x9593;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x26;lt;400&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x6642;&#x9593;&#xFF08;&#x7D04;&#x6642;&#x9593;&#xFF09;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x63A5;&#x89E6;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x3001;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x307E;&#x305F;&#x304C;&#x308B;&#x3001;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5236;&#x5FA1;

&#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xD65C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xACF5;&#xAC04;; &#xB450; &#xC2DC;&#xAC04; &#xB2E4;&#xB97C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC140; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC758;&#xC874; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3C4;&#xC804; &#xC774;&#xB2E4;. Micromachined &#xC2E4;&#xB9AC;&#xCF58; &#xAE30;&#xD310; &#xBD80;&#xD488; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC140; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xBBF8;&#xD130; &#xADDC;&#xBAA8; &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; &#xBD80;&#xCC29; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xC870;&#xC791;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD6C;&#xC131; &#xBC0F; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xC870;&#xC9C1; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB2EC;&#xC131;. &#xC0AC;&#xB840; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB85C; deconstructing hepatocytes&#xC640; coculture&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC6D0; stromal &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xCEE4;&#xBBA4;&#xB2C8;&#xCF00;&#xC774;&#xC158;&#xC758; &#xC5ED;&#xD559;&#xC5D0;&#xC774; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC758; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC04;&#xC138;&#xD3EC; &#xD615; &#xAE30;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xBC94;&#xC704;&#xB97C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xC131; &#xC2E0;&#xD638; (&#xC57D; &#xC2DC;&#xAC04;) &#xC774;&#xC5B4;&#xC11C; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C1;&#xC811; &#xC811;&#xCD09;&#xC744; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &lt; 400 microm. &#xC774; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;, embryogenesis, &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131;, &#xACE0; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCE5C; &#xB2E4; &#xC218;&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xC140; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Micromechanical &#xC140; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El desarrollo y la funci&#xF3;n de los tejidos vivos depende en gran medida de las interacciones entre las c&#xE9;lulas que pueden variar en el tiempo y el espacio, sin embargo, el control temporal de la interacci&#xF3;n c&#xE9;lula-c&#xE9;lula es un reto experimental. Mediante el uso de un sustrato de silicio micromecanizado con partes m&#xF3;viles, que demuestran la regulaci&#xF3;n din&#xE1;mica de las interacciones c&#xE9;lula-c&#xE9;lula a trav&#xE9;s de la manipulaci&#xF3;n directa de las c&#xE9;lulas adherentes con precisi&#xF3;n microm&#xE9;trica a gran escala. Tenemos por lo tanto lograr el control mec&#xE1;nico de la composici&#xF3;n del tejido y la organizaci&#xF3;n espacial tanto. Como caso de estudio, se demuestra la utilidad de esta herramienta en la deconstrucci&#xF3;n de las din&#xE1;micas de la comunicaci&#xF3;n intercelular entre los hepatocitos y las c&#xE9;lulas del estroma de apoyo en co-cultivo. Nuestros resultados indican que el mantenimiento del fenotipo hepatocelular por estroma requiere el contacto directo durante un tiempo limitado (aproximadamente horas) seguida por una se&#xF1;al sostenida soluble que tiene un rango efectivo de &#x26;lt;400 micras. Esta plataforma permite la investigaci&#xF3;n de la din&#xE1;mica de la interacci&#xF3;n c&#xE9;lula-c&#xE9;lula en una multitud de aplicaciones, que abarcan la embriog&#xE9;nesis, la homeostasis, y los procesos pat&#xF3;genos.

Control micromec&#xE1;nico de interacciones c&#xE9;lula-c&#xE9;lula

&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28; (ECM) &#x5206;&#x5B50;&#x8868;&#x660E;&#x53EF;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5404;&#x7C7B;&#x4EBA;&#x7FA4;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8F74;&#x7A81;&#x6307;&#x5BFC;&#x63D0;&#x793A;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x5C42;&#x7C98;&#x8FDE;&#x86CB;&#x767D; (LN) &#x548C;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D; (FN) &#x8F7D;&#x6709;&#x6761;&#x7EB9;&#x5FAE;&#x56FE;&#x6848;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65B0;&#x751F;&#x513F; (P5) &#x5185;&#x8033;&#x87BA;&#x65CB;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282; (SG) neurites &#x6307;&#x5BFC;&#x7EBF;&#x7D22;&#x3002;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; ECM &#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x662F;&#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x3002;LN &#x4E0E;&#x591A;&#x805A;-L-&#x8D56;&#x6C28;&#x9178; (PLL) &#x6D4B;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5728; neurites &#x88AB;&#x66F4;&#x7ECF;&#x5E38;&#x89C2;&#x5BDF; PLL &#x4F4E;&#x6D82;&#x6599;&#x6D53;&#x5EA6; &#xFF08;5 &#x548C; 10 microg/mL&#xFF09;&#xFF0C;&#x800C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5219;&#x66F4;&#x591A;&#x7ECF;&#x5E38; LN (80 microg/mL) &#x6D53;&#x5EA6;&#x504F;&#x9AD8;&#x65F6;&#x3002;&#x5728; PLL &#x6D4B;&#x5B9A;&#x4E0E; FN&#xFF0C;neurites &#x90FD;&#x66F4;&#x7ECF;&#x5E38;&#x4E0A;&#x6BD4; PLL FN &#x6761;&#x7EB9;&#x9AD8;&#x6D82;&#x6599;&#x6D53;&#x5EA6; (40 &#x548C; 80 microg/mL)&#x3002;LN &#x4E0E; FN &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x7ADE;&#x4E89;&#xFF0C;neurites &#x88AB;&#x89C2;&#x5BDF; LN &#x663E;&#x8457;&#x6BD4;&#x4E0A;&#x591A;&#x5728; 10 &#x81F3; 40 microg/mL FN&#x3002;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x6D53;&#x5EA6;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x907F;&#x514D;&#x5728;&#x4F4E; LN &#x548C; FN &#x6D53;&#x5EA6;&#x9AD8;&#x7684; SG neurites LN &#x4E3A;&#x504F;&#x597D;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8FD8;&#x652F;&#x6301;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x5185;&#x8033;&#x4F53;&#x5185;&#x8F74;&#x7A81;&#x6307;&#x5BFC;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;LN&#xFF0C;SG &#x548C; osseus &#x7684;&#x87BA;&#x65CB;&#x53F6;&#x7247;&#x53EF;&#x80FD;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x671D;&#x7740; Corti SG &#x679D;&#x6676;&#x751F;&#x957F;&#x3002;&#x5185; Corti&#xFF0C;&#x8F83;&#x4F4E;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684; LN &#x53EF;&#x80FD;&#x6162;&#x7A81;&#x8D77;&#x751F;&#x957F;&#xFF0C;&#x4E0E; FN &#x63D0;&#x4F9B;&#x505C;&#x6B62;&#x6216;&#x907F;&#x514D;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x884C;&#x7684;&#x4E0B;&#x65B9;&#x3002;&#x8FD9;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5141;&#x8BB8;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x589E;&#x52A0;&#x65F6;&#x95F4;&#x6765;&#x6837;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x6216;&#x76F4;&#x63A5;&#x5411;&#x4E0A;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x3002;

&#x5C42;&#x7C98;&#x8FDE;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x5236;&#x4F53;&#x5916;&#x5907;&#x7528;&#x9009;&#x62E9;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x5185;&#x8033;&#x87BA;&#x65CB;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7A81;&#x8D77;&#x3002;

Extracellular matrix (ECM) molecules have been shown to function as cues for neurite guidance in various populations of neurons. Here we show that laminin (LN) and fibronectin (FN) presented in stripe micro-patterns can provide guidance cues to neonatal (P5) inner ear spiral ganglion (SG) neurites. The response to both ECM molecules was dose-dependent. In a LN versus poly-L-lysine (PLL) assay, neurites were more often observed on PLL at low coating concentrations (5 and 10 microg/mL), while they were more often on LN at a high concentration (80 microg/mL). In a FN versus PLL assay, neurites were more often on PLL than on FN stripes at high coating concentrations (40 and 80 microg/mL). In a direct competition between LN and FN, neurites were observed on LN significantly more often than on FN at both 10 and 40 microg/mL. The data suggest a preference by SG neurites for LN at high concentrations, as well as avoidance of both LN at low and FN at high concentrations. The results also support a potential model for neurite guidance in the developing inner ear in vivo. LN, in the SG and osseus spiral lamina may promote SG dendrite growth toward the organ of Corti. Within the organ of Corti, lower concentrations of LN may slow neurite growth, with FN beneath each row of hair cells providing a stop or avoidance signal. This could allow growth cone filopodia increased time to sample their cellular targets, or direct the fibers upward toward the hair cells.

Laminin and fibronectin modulate inner ear spiral ganglion neurite outgrowth in an in vitro alternate choice assay.

De la matrice extracellulaire (ECM) de mol&#xE9;cules ont &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; pour fonctionner comme des signaux pour l&#x26;#39;orientation des neurites dans diverses populations de neurones. Ici, nous montrons que la laminine (LN) et de la fibronectine (FN) a pr&#xE9;sent&#xE9; en bande des micro-mod&#xE8;les peuvent fournir des signaux de guidage pour n&#xE9;onatale (P5) ganglion oreille spirale int&#xE9;rieure (SG) neurites. La r&#xE9;ponse &#xE0; ces deux mol&#xE9;cules de la MEC &#xE9;tait dose-d&#xE9;pendante. Dans un rapport LN poly-L-lysine (PLL) de dosage, neurites ont &#xE9;t&#xE9; plus souvent observ&#xE9;s sur PLL &#xE0; des concentrations faibles de rev&#xEA;tement (5 et 10 microg / ml), alors qu&#x26;#39;ils &#xE9;taient plus souvent sur LN &#xE0; une concentration &#xE9;lev&#xE9;e (80 microg / ml ). Dans un essai FN contre PLL, neurites &#xE9;taient plus souvent sur PLL que sur des bandes des Premi&#xE8;res Nations &#xE0; des concentrations &#xE9;lev&#xE9;es de rev&#xEA;tement (40 et 80 microg / ml). Dans une comp&#xE9;tition directe entre LN et FN, neurites ont &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;s sur LN significativement plus souvent que sur les FN &#xE0; la fois 10 et 40 microg / ml. Les donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent une pr&#xE9;f&#xE9;rence par neurites SG pour LN &#xE0; des concentrations &#xE9;lev&#xE9;es, ainsi que l&#x26;#39;&#xE9;vitement des deux LN &#xE0; basse et FN &#xE0; des concentrations &#xE9;lev&#xE9;es. Les r&#xE9;sultats confirment aussi un mod&#xE8;le potentiel pour l&#x26;#39;orientation des neurites dans l&#x26;#39;oreille int&#xE9;rieure d&#xE9;veloppement in vivo. LN, dans la lame spirale SG et SG osseus peut favoriser la croissance des dendrites vers l&#x26;#39;organe de Corti. Dans l&#x26;#39;organe de Corti, des concentrations plus faibles de LN peut ralentir la croissance des neurites, avec FN-dessous de chaque rang&#xE9;e de cellules cili&#xE9;es qui fournissent un arr&#xEA;t ou un signal d&#x26;#39;&#xE9;vitement. Cela pourrait permettre &#xE0; c&#xF4;ne de croissance filopodes augment&#xE9; le temps de go&#xFB;ter leurs cibles cellulaires, ou de diriger les fibres vers le haut vers les cellules cili&#xE9;es.

Laminine et la fibronectine Moduler Inner Ear Spiral neurites Ganglion Excroissance dans un test in vitro avec choix alternatif

Molek&uuml;le der extrazellul&auml;ren Matrix (ECM) wurden gezeigt, die Funktion als Hinweise f&uuml;r die Ausrichtung der Neurit in den verschiedenen Bev&ouml;lkerungen der Neuronen. Hier zeigen wir, dass Laminin (LN) und Fibronektin (FN) dargestellt in Mikro-Streifenmuster Anleitung Hinweise auf neonatale (P5) Innenohr Spirale Ganglion (SG) Neurites bieten k&ouml;nnen. Die Antwort auf beide ECM-Molek&uuml;le war dosisabh&auml;ngig. In einer LN gegen Poly-L-Lysin (PLL) Assay, Neurites &ouml;fter beobachtet auf PLL bei niedrigen Beschichtung Konzentrationen (5 und 10 &micro;g/mL), w&auml;hrend sie mehr oft bei LN in hoher Konzentration (80 &micro;g/mL waren). In einer FN gegen&uuml;ber PLL-Assay waren Neurites &ouml;fter PLL als FN-Streifen bei hohen Beschichtung Konzentrationen (40 und 80 &micro;g/mL). In eine direkte Konkurrenz zwischen LN und FN Neurites wurden beobachtet auf LN deutlich h&auml;ufiger als bei FN bei sowohl 10 und 40 &micro;g/mL. Die Daten zeigen eine Pr&auml;ferenz von SG Neurites f&uuml;r LN bei hohen Konzentrationen sowie Vermeidung von LN am tief und FN in hohen Konzentrationen. Die Ergebnisse unterst&uuml;tzen auch ein Modell f&uuml;r die Ausrichtung der Neurit im in-vivo entwickelnden Innenohr. LN, k&ouml;nnte in die SG und Osseus Spiral-Lamina SG Dendrit Wachstum in Richtung des Organs von Corti f&ouml;rdern. Innerhalb des Organs von Corti k&ouml;nnen niedrigere Konzentrationen an LN Neurit Wachstum, mit FN unter jeder Zeile der Haarzellen, die Bereitstellung eines Signals Stop oder Vermeidung verlangsamen. Dies k&ouml;nnte Wachstum Kegel Filopodium erh&ouml;hte Zeit ihre zellulare Ziele zu probieren, oder direkt die Fasern nach oben in Richtung der Haarzellen.

Laminin und Fibronectin modulieren Innenohr Spirale Ganglion Neurit Auswuchs in einer in-vitro-Alternative Wahl-Probe.

Molecole della matrice extracellulare (ECM) hanno dimostrati di funzionare come spunti per l&#39;orientamento dei neuriti in diverse popolazioni di neuroni. Qui vi mostriamo che (LN), laminina e fibronectina (FN) presentato in striscia micro-modelli in grado di fornire spunti di orientamento a spirale neonatale dell&#39;orecchio interno (P5) (SG) del ganglio neuriti. La risposta a due molecole di ECM &egrave; stata dose-dipendente. In un LN versus dosaggio poly-L-lisina (PLL), neuriti sono stati osservati pi&ugrave; spesso su PLL a concentrazioni basse rivestimento (5 e 10 microg/mL), mentre erano pi&ugrave; spesso in LN a una concentrazione elevata (80 microg/mL). Un FN versus dosaggio PLL, neuriti erano pi&ugrave; spesso su PLL rispetto su strisce di FN a concentrazioni di rivestimento ad alta (40 e 80 microg/mL). In una concorrenza diretta tra LN e FN, neuriti sono stati osservati su LN significativamente pi&ugrave; spesso su FN a 10 e 40 microg/mL. I dati suggeriscono una preferenza di neuriti SG per LN ad alte concentrazioni, come pure evitare di LN al basso e di FN a concentrazioni elevate. I risultati supportano anche un modello potenziale per l&#39;orientamento dei neuriti nell&#39;orecchio interno in via di sviluppo in vivo. LN, la lamina spirale SG e osseus possono promuovere la crescita dendrite SG verso l&#39;organo del Corti. All&#39;interno dell&#39;organo di Corti, concentrazioni pi&ugrave; basse di LN possono rallentare la crescita dei neuriti, con FN sotto ogni riga delle cellule ciliate che fornisce un segnale di stop o evasioni. Questo potrebbe consentire la crescita di cono filopodia aumentato tempo di assaggiare i loro bersagli cellulari, o direttamente le fibre verso l&#39;alto verso le cellule ciliate.

Laminina e fibronectina modulare dell&#39;orecchio interno a spirale ganglio dei neuriti escrescenza in un test in vitro scelta alternativa.

&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;ECM&#xFF09;&#x5206;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x96C6;&#x56E3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x6307;&#x5C0E;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30F3;&#xFF08;LN&#xFF09;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30CD;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#xFF08;FN&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x751F;&#x5150;&#xFF08;P5&#xFF09;&#x5185;&#x8033;&#x306E;&#x87BA;&#x65CB;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#xFF08;SG&#xFF09;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x3078;&#x306E;&#x6307;&#x5C0E;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D7;&#x3067;&#x63D0;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002; ECM&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x9AD8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#xFF08;80&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;/ mL&#x3067;&#x3088;&#x308A;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;LN&#x4E0A;&#x306B;&#x3044;&#x308B;&#x9593;&#x306B;&#x30DD;&#x30EA;-L-&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#xFF08;PLL&#xFF09;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x5BFE;LN&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306F;&#x3088;&#x308A;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x3001;&#x4F4E;&#x3044;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x6FC3;&#x5EA6;&#xFF08;5&#x304A;&#x3088;&#x3073;10&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;/ ml&#xFF09;&#x3067;PLL&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#xFF09; FN&#x5BFE;PLL&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x6FC3;&#x5EA6;&#xFF08;40&#x304A;&#x3088;&#x3073;80&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;/ ml&#xFF09;&#x3067;FN&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D7;&#x3088;&#x308A;&#x3082;PLL&#x3067;&#x3088;&#x308A;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; LN&#x3068;FN&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x7AF6;&#x4E89;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306F;10&#x301C;40&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;/ mL&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x591A;&#x304F;FN&#x3088;&#x308A;&#x3082;LN&#x306B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;LN&#x306E;SG&#x7A81;&#x8D77;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x55DC;&#x597D;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x4F4E;&#x6E29;&#x3067;&#x4E21;&#x65B9;LN&#x306E;&#x56DE;&#x907F;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x3001;&#x9AD8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;Fn&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x5185;&#x8033;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; LN&#x306F;&#x3001;SG&#x3068;osseus&#x3089;&#x305B;&#x3093;&#x677F;&#x306B;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x5668;&#x5B98;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;SG&#x30C7;&#x30F3;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x306F;&#x3001;LN&#x306E;&#x4F4E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6709;&#x6BDB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x884C;&#x306E;&#x4E0B;&#x306B;FN&#x304C;&#x30B9;&#x30C8;&#x30C3;&#x30D7;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x56DE;&#x907F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x9045;&#x3089;&#x305B;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A19;&#x7684;&#x3092;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x6642;&#x9593;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x6709;&#x6BDB;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x4E0A;&#x65B9;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x3092;&#x6307;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30F3;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30CD;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x4EE3;&#x66FF;&#x9078;&#x629E;&#x80A2;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x5185;&#x8033;&#x306E;&#x3089;&#x305B;&#x3093;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x4F38;&#x9577;&#x3092;&#x5909;&#x8ABF;

&#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8; (ECM) &#xBD84;&#xC790; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; neurite &#xC9C0;&#xCE68;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD45C;&#xD604;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; laminin (LN) &#xBC0F; fibronectin (FN) &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB77C;&#xC774;&#xD504; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xD328;&#xD134;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC544; (P5) &#xB0B4;&#xAC00; &#xB098;&#xC120; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808; (SG) neurites&#xC5D0; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; ECM &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xBC18;&#xC751;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3F4; &#xB9AC;-L-&#xB9AC; &#xC2E0; (PLL) &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xB300; LN&#xC5D0; neurites &#xB354; &#xC790;&#xC8FC; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4; PLL&#xC5D0; &#xB0AE;&#xC740; &#xCF54;&#xD305; &#xB18D;&#xB3C4; (5, 10 microg/mL), &#xADF8;&#xB4E4;&#xC774; &#xB192;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; (80 microg/mL)&#xC5D0;&#xC11C; &#xB354; &#xC790;&#xC8FC;&#xC5D0; LN. PLL &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xB300; FN&#xC5D0;&#xC11C; neurites &#xB354; &#xC790;&#xC8FC; &#xB192;&#xC740; &#xCF54;&#xD305; &#xB18D;&#xB3C4; (40 &#xBC0F; 80 microg/mL)&#xC5D0;&#xC11C; FN &#xC904;&#xBB34;&#xB2AC;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xB2E4; PLL&#xC5D0; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. LN&#xC640; FN &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xACBD;&#xC7C1;&#xC5D0;&#xC11C; neurites &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4; LN&#xC5D0; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xB354; &#xC790;&#xC8FC; &#xBCF4;&#xB2E4; 10&#xACFC; 40 microg/Ml&#xC5D0;&#xC11C; FN. &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC81C;&#xC548; &#xAE30;&#xBCF8; SG neurites&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; LN&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB192;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740; LN &#xBC0F; &#xB192;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; FN&#xC758; &#xC18C;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC5C6;&#xC560;&#xAE30;. &#xACB0;&#xACFC; &#xB610;&#xD55C; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB0B4;&#xAC00; &#xC788;&#xB294; neurite &#xC9C0;&#xCE68;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. LN, SG&#xC640; osseus &#xB098;&#xC120; lamina&#xC5D0;&#xC11C; &#xC624;&#xB974;&#xAC04;&#xC758; &#xCF54;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD5A5;&#xD574; SG dendrite &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC624;&#xB974;&#xAC04;&#xC758; &#xCF54;&#xD2B8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; LN&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC815;&#xC9C0; &#xB610;&#xB294; &#xD68C;&#xD53C; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xAC01; &#xD589; &#xC544;&#xB798;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; FN&#xC640; neurite &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC800;&#xD558; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xCD94; filopodia &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC;&#xAC04; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xC801;&#xC744; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xBA38;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD5A5;&#xD574; &#xC704;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC12C;&#xC720;&#xB97C; &#xC9C1;&#xC811; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Laminin &#xBC0F; fibronectin &#xBCC0;&#xC870; &#xB0B4;&#xAC00; &#xB098;&#xC120; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808;&#xC758; neurite &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xB300;&#xCCB4; &#xC120;&#xD0DD; &#xCCB4; &#xC678; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C;.

La matriz extracelular (ECM) mol&#xE9;culas han sido demostrado que funcionan como se&#xF1;ales para la orientaci&#xF3;n de neuritas en diversas poblaciones de neuronas. Aqu&#xED; nos muestran que la laminina (LN) y fibronectina (FN) se presenta en bandas de micro-patrones pueden proporcionar se&#xF1;ales de orientaci&#xF3;n para reci&#xE9;n nacidos (P5) del ganglio espiral del o&#xED;do interno (SG) neuritas. La respuesta a ambas mol&#xE9;culas ECM era dependiente de la dosis. En una LN contra poli-L-lisina (PLL) de ensayo, neuritas se observa m&#xE1;s a menudo en PLL a concentraciones bajas de recubrimiento (5 y 10 ug / ml), mientras que eran m&#xE1;s a menudo en LN en una alta concentraci&#xF3;n (80 microgramos / ml ). En un ensayo frente a FN PLL, neuritas eran m&#xE1;s a menudo en PLL que en rayas FN a concentraciones altas de recubrimiento (40 y 80 ug / ml). En una competencia directa entre LN y FN, neuritas se observaron en LN significativamente m&#xE1;s a menudo que en la FN, tanto en 10 y 40 microg / ml. Los datos sugieren una preferencia por neuritas SG para LN en altas concentraciones, as&#xED; como la evitaci&#xF3;n de ambos LN en baja y FN a altas concentraciones. Los resultados tambi&#xE9;n apoyan un modelo potencial para orientaci&#xF3;n de neuritas en el o&#xED;do interno en desarrollo in vivo. LN, en la l&#xE1;mina espiral SG y SG &#xF3;seo puede promover crecimiento de las dendritas hacia el &#xF3;rgano de Corti. En el &#xF3;rgano de Corti, concentraciones m&#xE1;s bajas de LN puede retardar el crecimiento de neuritas, con FN debajo de cada hilera de c&#xE9;lulas ciliadas que proporcionan una se&#xF1;al de stop o de evitaci&#xF3;n. Esto podr&#xED;a permitir el crecimiento del cono filopodios mayor tiempo para probar sus dianas celulares, o dirigir las fibras hacia arriba, hacia las c&#xE9;lulas ciliadas.

Laminina y fibronectina modular espiral del o&#xED;do interno Ganglio crecimiento neur&#xED;tico en un ensayo in vitro opci&#xF3;n alternativa

&#x809D;&#x7AA6;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (LSECs) &#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x90FD;&#x6709;&#x6240;&#x4E0D;&#x540C;&#x886C;&#x780C;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x8840;&#x7BA1;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (ECs)&#x3002;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6; ECs LSECs &#x62E5;&#x6709;&#x5371;&#xFF0C;&#x7EA7;&#x522B;&#x8F83;&#x4F4E;&#x53EF;&#x63A2;&#x6D4B;&#x7684;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50; 1 &#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x5927;&#x9F20;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4E0E;&#x4F17;&#x4E0D;&#x540C;&#x5FEB;&#x9012; SE-1 &#x6297;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x6807;&#x8BB0;&#x8BC6;&#x522B;&#x3002;&#x5728;&#x809D;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x770B;&#x5230;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x7279;&#x5F81;&#x968F;&#x65F6;&#x95F4;&#x5728;&#x4F53;&#x5916; &#xFF1B; &#x57F9;&#x517B;&#x540E;&#x90FD;&#x5C06;&#x4E22;&#x5931;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x5BFB;&#x6C42;&#x6709;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5730;&#x7814;&#x7A76; LSEC &#x578B;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x523A;&#x6FC0; &mdash; &mdash; &#x5373;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x548C;&#x76F8;&#x90BB;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5728;&#x63A2;&#x7D22;&#x57FA;&#x7840;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x80F6;&#x539F;&#x6211;&#x548C;&#x80F6;&#x539F;&#x86CB;&#x767D; III &#x4EE5;&#x53CA;&#x80F6;&#x539F;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x6211; / &#x80F6;&#x539F; IV/&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x5177;&#x6709; LSEC &#x751F;&#x5B58;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5728;&#x5438;&#x6536;&#x4F7F;&#x7528;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x4EE5;&#x5EF6;&#x957F;&#x65E2; SE-1 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C; LSEC &#x7B49;&#x7B2C; VIII &#x56E0;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x53CA; AcLOL &#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x529F;&#x80FD;&#x7A33;&#x5B9A;&#x809D;&#x764C;&#x6A21;&#x578B; &#xFF08;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;-&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;) &#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x77ED;&#x7A0B;&#x65C1;&#x5206;&#x6CCC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x6C57;&#x817A; LSECs&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x8BC6;&#x522B;&#x6297;&#x539F;&#x7684; SE-1 &#x4F5C;&#x4E3A; CD32b.&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF1A; &#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x51E0;&#x79CD;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x8C03;&#x8282;&#x5242;&#x809D;&#x7AA6;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5EF6;&#x957F;&#x8FBE; 2 &#x5468;&#x5728;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x80FD;&#x591F;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x809D;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x548C;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x53CA;&#x5176;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

&#x7AA6;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x4F53;&#x5916;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;

Liver sinusoidal endothelial cells (LSECs) differ, both structurally and functionally, from endothelial cells (ECs) lining blood vessels of other tissues. For example, in contrast to other ECs, LSECs possess fenestrations, have low detectable levels of platelet endothelial cell adhesion molecule 1 expression, and in rat tissue, they distinctively express a cell surface marker recognized by the SE-1 antibody. These unique phenotypic characteristics seen in hepatic tissue are lost over time upon culture in vitro; therefore, this study sought to systematically examine the effects of microenvironmental stimuli--namely, extracellular matrix and neighboring cells, on the LSEC phenotype in vitro. In probing the role of the underlying extracellular matrix, we identified collagen I and collagen III as well as mixtures of collagen I/collagen IV/fibronectin as having a positive effect on LSEC survival. Furthermore, using a stable hepatocellular model (hepatocyte-fibroblast) we were able to prolong the expression of both SE-1 and phenotypic functions of LSEC such as factor VIII activity and AcLOL uptake in cocultured LSECs through the production of short-range paracrine signals. In the course of these experiments, we identified the antigen recognized by SE-1 as CD32b. Conclusion: Collectively, this study has identified several microenvironmental regulators of liver sinusoidal endothelial cells that prolong their phenotypic functions for up to 2 weeks in culture, enabling the development of better in vitro models of liver physiology and disease.

Microenvironmental regulation of the sinusoidal endothelial cell phenotype in vitro.

Cellules endoth&#xE9;liales sinuso&#xEF;dales h&#xE9;patiques (LSECs) diff&#xE8;rent, &#xE0; la fois structurellement et fonctionnellement, &#xE0; partir de cellules endoth&#xE9;liales (CE) des vaisseaux sanguins qui tapissent les autres tissus. Par exemple, contrairement &#xE0; d&#x26;#39;autres CE, LSECs poss&#xE8;dent fenestrations, ont de faibles niveaux d&#xE9;tectables de plaquettes d&#x26;#39;adh&#xE9;sion cellulaire endoth&#xE9;liale mol&#xE9;cule une expression, et dans les tissus chez le rat, ils distinctement exprimer un marqueur de surface cellulaire reconnu par le SE-1 anticorps. Ces caract&#xE9;ristiques uniques ph&#xE9;notypiques observ&#xE9;es dans le tissu h&#xE9;patique sont perdues au fil du temps sur la culture in vitro, par cons&#xE9;quent, cette &#xE9;tude a cherch&#xE9; &#xE0; examiner syst&#xE9;matiquement les effets des stimuli du microenvironnement, &#xE0; savoir, la matrice extracellulaire et les cellules voisines, sur le ph&#xE9;notype LSEC in vitro. En sondant le r&#xF4;le de la matrice extracellulaire sous-jacente, nous avons identifi&#xE9; de collag&#xE8;ne I et III du collag&#xE8;ne ainsi que des m&#xE9;langes de collag&#xE8;ne I / collag&#xE8;ne IV / fibronectine comme ayant un effet positif sur la survie LSEC. En outre, en utilisant un mod&#xE8;le h&#xE9;patocellulaire stable (h&#xE9;patocytes fibroblastes), nous avons pu prolonger l&#x26;#39;expression de fonctions deux SE-1 et ph&#xE9;notypique de LSEC tels que l&#x26;#39;activit&#xE9; du facteur VIII et l&#x26;#39;absorption dans AcLOL LSECs cocultiv&#xE9;s par la production de signaux de courte port&#xE9;e paracrines. Au cours de ces exp&#xE9;riences, nous avons identifi&#xE9; l&#x26;#39;antig&#xE8;ne reconnu par SE-1 comme CD32b. Conclusion: Collectivement, cette &#xE9;tude a identifi&#xE9; plusieurs r&#xE9;gulateurs du microenvironnement de cellules endoth&#xE9;liales sinuso&#xEF;dales h&#xE9;patiques qui prolongent leurs fonctions ph&#xE9;notypiques pour un maximum de 2 semaines de culture, permettant le d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;une meilleure mod&#xE8;les in vitro de la physiologie du foie et de la maladie.

R&#xE8;glement microenvironnement du ph&#xE9;notype des cellules endoth&#xE9;liales sinuso&#xEF;dales in vitro

Leber sinusf&ouml;rmige Endothelzellen (LSECs) unterscheiden, sowohl strukturell als auch funktional, Endothelzellen (ECs) Auskleidung der Blutgef&auml;&szlig;e des anderen Geweben. Beispielsweise im Gegensatz zu anderen ECs LSECs besitzen Fenestrations, nachweisbare niedrigen Thrombozyten endothelial Zelle Adh&auml;sion Molek&uuml;l 1 Ausdruck und Ratte Gewebe, sie unverwechselbar ausdr&uuml;cklich eine Zelle Oberfl&auml;che Markierung von der SE-1-Antik&ouml;rper erkannt haben. Diese einzigartigen ph&auml;notypischen Eigenschaften gesehen im hepatischen Gewebe sind im Laufe der Zeit auf in-vitro-Kultur verloren; Diese Studie versucht daher systematisch untersuchen die Auswirkungen der microenvironmental Reize--n&auml;mlich die extrazellul&auml;re Matrix und die benachbarten Zellen, auf die in-vitro-LSEC-Ph&auml;notyp. In sondieren die Rolle der zugrunde liegenden extrazellul&auml;ren Matrix, wir identifiziert Kollagen I und III Kollagen sowie Mischungen von Kollagen ich / Kollagen IV/Fibronectin als einen positiven Effekt auf das &Uuml;berleben der LSEC. Dar&uuml;ber hinaus cocultured mit einem stabilen hepatozellul&auml;re Modell (Hepatozyten-Fibroblasten) konnten wir den Ausdruck sowohl SE-1 und ph&auml;notypische Funktionen des LSEC wie Faktor VIII-Aktivit&auml;t und AcLOL verl&auml;ngern Aufnahme in LSECs durch die Produktion von Kurzstrecken Parakrine Signale. Im Zuge dieser Experimente, die wir identifiziert des Antigens erkannt von SE-1 als CD32b. Fazit: gemeinsam, diese Studie hat ermittelt, mehrere microenvironmental Regler der Leber sinusf&ouml;rmige Endothelzellen, die ihre ph&auml;notypischen Funktionen f&uuml;r bis zu 2 Wochen in Kultur, erm&ouml;glicht die Entwicklung besser in-vitro-Modelle der Leber Physiologie und Krankheit zu verl&auml;ngern.

Microenvironmental Verordnung des sinusf&ouml;rmigen Endothelzellen in-vitro-Ph&auml;notyps.

Le cellule endoteliali sinusoidali epatiche (LSECs) differiscono, sia strutturalmente e funzionalmente, da cellule endoteliali (ECs) che rivestono i vasi sanguigni di altri tessuti. Per esempio, a differenza di altri ECs, LSECs possiedono finestrature, hanno bassi livelli rilevabili di piastrine cellule endoteliali adesione molecola 1 espressione e nei tessuti di ratto, hanno espresso distintamente un marcatore di superficie cellulare riconosciuto dall&#39;anticorpo SE-1. Queste uniche caratteristiche fenotipiche vista nel tessuto epatico sono perse nel tempo sulla coltura in vitro; Pertanto, questo studio ha cercato di esaminare sistematicamente gli effetti degli stimoli microenvironmental - vale a dire, la matrice extracellulare e celle vicine, sul fenotipo LSEC in vitro. Nel sondaggio il ruolo della matrice extracellulare sottostante, abbiamo identificato il collagene I e collagene III cos&igrave; come miscele di collagene I / collagene IV/fibronectina come avendo un effetto positivo sulla sopravvivenza LSEC. Inoltre, utilizzando un modello stabile epatocellulare (degli epatociti-fibroblasto) siamo stati in grado di prolungare l&#39;espressione sia SE-1 e le funzioni fenotipiche di LSEC come attivit&agrave; di fattore VIII e AcLOL assorbimento in cocultured LSECs attraverso la produzione di segnali a corto raggio paracrina. Nel corso di questi esperimenti, abbiamo identificato l&#39;antigene riconosciuto da SE-1 come CD32b. conclusione: collettivamente, questo studio ha individuato diversi regolatori microenvironmental del fegato cellule endoteliali sinusoidali che prolungano la loro funzioni fenotipiche per fino a 2 settimane di cultura, consentendo lo sviluppo di meglio modelli in vitro di fegato fisiologia e malattie.

Microenvironmental regolamento del fenotipo delle cellule endoteliali sinusoidali in vitro.

&#x809D;&#x985E;&#x6D1E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;LSECs&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#xFF08;ECS&#xFF09;&#x30E9;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3068;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;EC&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;LSECs&#x306F;&#x3001;&#x30D4;&#x30F3;&#x30DB;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x6709;&#x3057;&#x3001;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50;1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x4F4E;&#x3044;&#x691C;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x72EC;&#x7279;&#x306E;SE-1&#x6297;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x809D;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x306B;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x7D4C;&#x904E;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7684;&#x306B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3088;&#x3046;&#x3068;&#x3057;&#x305F; - &#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;LSEC&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306B;&#x3002;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;LSEC&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;I&#x3001;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;III&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;I / IV&#x578B;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;/&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30CD;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x77ED;&#x8DDD;&#x96E2;&#x30D1;&#x30E9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;SE-1&#x3068;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;LSECs&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7B2C;VIII&#x56E0;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;AcLOL&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x306A;&#x3069;LSEC&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5EF6;&#x9577;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#xFF08;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;CD32b&#x3068;SE-1&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6297;&#x539F;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#xFF1A;&#x5168;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x809D;&#x81D3;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3084;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;in vitro&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x3088;&#x308A;&#x826F;&#x3044;&#x958B;&#x767A;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x3001;2&#x9031;&#x9593;&#x307E;&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x4E2D;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5EF6;&#x3070;&#x3059;&#x809D;&#x985E;&#x6D1E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

in vitro&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x985E;&#x6D1E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x898F;&#x5236;

&#xAC04; &#xC815;&#xD604;&#xD30C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (LSECs) &#xB2E4;, &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xB2E4;&#xB978; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xD608;&#xAD00; &#xC548; &#xAC10; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (ECs)&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, &#xB2EC;&#xB9AC; &#xB2E4;&#xB978; ECs LSECs fenestrations&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0;, &#xC218;&#xC900;&#xC774; &#xB0AE;&#xC740; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790; 1 &#xC2DD;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC950; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xAC1C;&#xC131; &#xD45C;&#xD604; SE-1 &#xD56D; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xC778;&#xC2DD;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; phenotypic &#xD2B9;&#xC131; &#xAC04;&#xC7A5; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF8; &#xBB38;&#xD654; &#xCCB4; &#xC678;;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xC9C0;&#xB0A8;&#xC5D0; &#xC190;&#xC2E4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; LSEC &#xD615; &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; microenvironmental &#xC790;&#xADF9;-&#xC989;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8;&#xACFC; &#xC778;&#xC811; &#xC140;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC80;&#xD1A0; &#xD558;&#xACE0;&#xC790; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xBCF8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xC870;&#xC0AC;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; I&#xACFC; III &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xC73C;&#xB85C; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xC758; &#xD63C;&#xD569;&#xBB3C; &#xB098; / &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; IV/fibronectin LSEC &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xACE0;&#xB85C;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00;&#xC5D0; &#xB2E8;&#xAC70;&#xB9AC; paracrine &#xC2E0;&#xD638; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; LSECs cocultured &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBAA8;&#xB450; SE-1&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; VIII &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; AcLOL &#xAC19;&#xC740; LSEC&#xC758; phenotypic &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5F0;&#xC7A5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xAC04;&#xC138;&#xD3EC; &#xBAA8;&#xB378; (hepatocyte fibroblast)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; CD32b. &#xACB0;&#xB860;&#xC73C;&#xB85C; SE-1&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC2DD; &#xD558;&#xB294; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD655;&#xC778;: &#xD1B5;&#xCE6D; &#xD558; &#xC5EC;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; phenotypic &#xAE30;&#xB2A5; &#xAC04; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xCCB4; &#xC678; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xB300; 2 &#xC8FC; &#xC5F0;&#xC7A5; &#xAC04; &#xC815;&#xD604;&#xD30C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; microenvironmental &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC815;&#xD604;&#xD30C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xD604; &#xD615; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; microenvironmental.

H&#xED;gado c&#xE9;lulas endoteliales sinusoidales (LSECs) difieren, tanto estructural como funcionalmente, de las c&#xE9;lulas endoteliales (ECS) los vasos sangu&#xED;neos de otros tejidos de revestimiento. Por ejemplo, en contraste con otros CE, LSECs poseen fenestraciones, tienen bajos niveles detectables de plaquetas adhesi&#xF3;n de c&#xE9;lulas endoteliales mol&#xE9;cula 1 de expresi&#xF3;n, y en el tejido de rata, que caracter&#xED;sticamente expresar un marcador de superficie celular reconocido por el anticuerpo SE-1. Estas caracter&#xED;sticas &#xFA;nicas fenot&#xED;picos observados en el tejido hep&#xE1;tico se pierden con el tiempo en cultivo in vitro, por lo tanto, este estudio trata de estudiar sistem&#xE1;ticamente los efectos de los est&#xED;mulos microambientales, a saber, la matriz extracelular y las c&#xE9;lulas vecinas, en el fenotipo LSEC in vitro. En sondear el papel de la matriz extracelular subyacente, hemos identificado col&#xE1;geno I y III col&#xE1;geno, as&#xED; como mezclas de col&#xE1;geno I / col&#xE1;geno IV / fibronectina como teniendo un efecto positivo sobre la supervivencia LSEC. Por otra parte, utilizando un modelo estable hepatocelular (hepatocitos fibroblastos) que fueron capaces de prolongar la expresi&#xF3;n de las funciones de ambos SE-1 y fenot&#xED;pica de LSEC tales como la actividad del factor VIII y la absorci&#xF3;n de AcLOL en LSECs cocultured a trav&#xE9;s de la producci&#xF3;n de corto alcance de tipo paracrino. En el curso de estos experimentos, hemos identificado el ant&#xED;geno reconocido por SE-1 como CD32b. Conclusi&#xF3;n: En conjunto, este estudio ha identificado varios reguladores microambientales del h&#xED;gado de c&#xE9;lulas endoteliales sinusoidales que prolongan sus funciones fenot&#xED;picas para un m&#xE1;ximo de 2 semanas en cultivo, lo que permite el desarrollo de mejores modelos in vitro de la fisiolog&#xED;a del h&#xED;gado y la enfermedad.

Elliot E Hui

Laboratory for Multiscale Regenerative Technologies

MIT - Massachusetts Institute of Technology

Silicon Microchips for Manipulating Cell-cell Interaction

Elliot E Hui

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MIT - Massachusetts Institute of Technology

Silicon Microchips for Manipulating Cell-cell Interaction

Laboratory for Multiscale Regenerative Technologies