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Derivation of Human Embryonic Stem Cells by Immunosurgery

The ability of human embryonic stem cells to self-renew and differentiate into all cell types of 
the body suggests that they hold great promise for both ...

Harvard

WNT &#x4FE1;&#x53F7;&#x5728;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x5927;&#x4F5C;&#x7528;&#x9635;&#x5217; dermomyotome &#x7684; somitic &#x7684;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x4E0B;&#x6E38;&#x9776;&#x57FA;&#x56E0;&#x53CA;&#x5176;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x77E5;&#x8BC6;&#x662F;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x3002;&#x5BFB;&#x627E;&#x65B0;&#x57FA;&#x56E0;&#x53C2;&#x4E0E;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x65E9;&#x671F;&#x9635;&#x5217;&#x7684;&#x4F53;&#x8282;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7531;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7814;&#x7A76; presomitic &#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x548C;&#x9F20;&#x6807;&#x7684; 5 &#x6700;&#x6700;&#x8FD1;&#x6210;&#x7ACB;&#x7684; somites &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x82AF;&#x7247;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x5929; 9.5&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A; 207 &#x57FA;&#x56E0;&#x4E0A;&#x8C03;&#x53CA;&#x5728;&#x4F53;&#x8282;&#x5F62;&#x6210; 120 &#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x7C7B;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x662F;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x6C60;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76;&#x4F53;&#x8282;&#x53D1;&#x5C55;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B9D;&#x8D35;&#x7684;&#x8D44;&#x6E90;&#x3002;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E09;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E2D;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x4F53;&#x8282; dermomyotome &#x8868;&#x793A;&#x3002;&#x7B26;&#x5408;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x76EE;&#x6807; WNT &#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x4F46;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; WNTs &#x663E;&#x793A;&#x5DEE;&#x522B;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8BC1;&#x660E;&#x8BE5; 1 &#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7279;&#x6D1B;&#x4F0A;&#x57CE;&#xFF0C;&#x662F;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684; WNT &#x4FE1;&#x53F7;&#x89C4;&#x8303;&#xFF0C;&#x800C;&#x5176;&#x4ED6; 2 &#x57FA;&#x56E0;&#x79CD;&#x548C; Arl4&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x662F;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x95F4;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x82AF;&#x7247;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5168;&#x7403;&#x4FE1;&#x606F;&#x5BF9;&#x4F53;&#x8282;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x5B83;&#x8FD8;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x65B0;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x611F;&#x5E94;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8BE5;&#x76F4;&#x63A5;&#x4F53;&#x8282;&#x7F16;&#x7EC4;&#x3002;

&#x52A8;&#x7269;&#x57FA;&#x56E0;&#x82AF;&#x7247;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x4E0D;&#x540C; WNT &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x5728; somitic &#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x65B0;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

WNT signaling plays a major role in patterning the dermomyotome of the somitic mesoderm. However, knowledge of downstream target genes and their regulation is limited. To identify new genes involved in the development and early patterning of the somite, we performed a comparison of gene expression by microarray between the presomitic mesoderm and the 5 most recently formed somites of the mouse at embryonic day 9.5. We identified 207 genes upregulated and 120 genes downregulated in somite formation. Expression analysis and functional categorization of these genes demonstrate this to be a diverse pool that provides a valuable resource for studying somite development. Thus far, we have found three genes expressed in the dermomyotome of the early somite. Consistent with their expression patterns, these genes are transcriptional targets of WNT signals, but display differential activation by different WNTs. We further demonstrate that 1 of these genes, Troy, is a direct target of canonical WNT signaling, while the other 2 genes, Selp and Arl4, are not. Thus, our microarray study using microdissected tissues not only provides global information on gene expression during somite development, it also provides novel targets to study the inductive signaling pathways that direct somite patterning.

Microarray analysis of somitogenesis reveals novel targets of different WNT signaling pathways in the somitic mesoderm.

La signalisation WNT joue un r&ocirc;le majeur dans la structuration de la dermomyotome du m&eacute;soderme somitique. Cependant, la connaissance des g&egrave;nes cibles en aval et de leur r&eacute;gulation est limit&eacute;e. Afin d&#39;identifier de nouveaux g&egrave;nes impliqu&eacute;s dans le d&eacute;veloppement et la structuration au d&eacute;but de la somite, nous r&eacute;alis&eacute; une comparaison de l&#39;expression g&eacute;nique par microarray entre le m&eacute;soderme ont et les 5 somites plus r&eacute;cemment form&eacute;s de la souris &agrave; jour embryonnaire 9.5. Nous avons identifi&eacute; 207 g&egrave;nes surexprim&eacute;s et 120 g&egrave;nes sous-exprim&eacute;s dans formation somite. Analyse de l&#39;expression et la cat&eacute;gorisation fonctionnelle de ces g&egrave;nes montrent il s&#39;agit d&#39;un bassin diversifi&eacute; qui fournit une aide pr&eacute;cieuse pour l&#39;&eacute;tude de d&eacute;veloppement somite. Jusqu&#39;ici, nous avons identifi&eacute; trois g&egrave;nes exprim&eacute;s dans le dermomyotome du d&eacute;but somite. Conform&eacute;ment &agrave; leurs profils d&#39;expression, ces g&egrave;nes sont des cibles transcriptionnelles des signaux WNT, mais affichent activation diff&eacute;rentielle par WNTs diff&eacute;rents. Nous d&eacute;montrons que 1 de ces g&egrave;nes, Troy, est une cible directe de canonique SIGNALISATION WNT, tandis que les 2 autres g&egrave;nes, Selp et Arl4, ne le sont pas. Ainsi, notre &eacute;tude sur puces &agrave; l&#39;aide de tissus microdiss&eacute;qu&eacute;s non seulement fournit des informations globales sur l&#39;expression des g&egrave;nes au cours du d&eacute;veloppement du somite, il fournit &eacute;galement des nouvelles cibles pour &eacute;tudier les voies de signalisation inductives cette structuration somite direct.

Analyse de microarray d&#39;engendrent r&eacute;v&egrave;le de nouvelles cibles de WNT diff&eacute;rente voies dans le m&eacute;soderme somitique de signalisation.

Microarray-Analyse von Somitogenese enth&#xFC;llt neue Targets verschiedener WNT Signalwege in der somitic Mesoderm.

Segnalazione WNT gioca un ruolo importante nella creazione di una serie dermomyotome del mesoderma somitic. Tuttavia, conoscenza dei geni bersaglio a valle e il loro regolamento &egrave; limitato. Per identificare nuovi geni coinvolti nello sviluppo e nella precoce patterning del somite, abbiamo eseguito un confronto dell&#39;espressione di gene di microarray tra il mesoderm presomitic e 5 somiti pi&ugrave; recentemente formate del mouse al giorno embrionale 9.5. Abbiamo identificato 207 geni sovraregolati e downregolata 120 geni nella formazione somite. Analisi di espressione e categorizzazione funzionale di questi geni dimostrare questo per essere un pool diversificato che fornisce una risorsa preziosa per lo studio di sviluppo somite. Finora, abbiamo trovato tre geni espressi in dermomyotome dell&#39;inizio del somite. Coerenti con i loro modelli di espressione, questi geni sono obiettivi di transcriptional di WNT segnali, ma visualizzare attivazione differenziale di WNTs diversi. Abbiamo ulteriormente dimostrare che 1 di questi geni, Troy, &egrave; un obiettivo diretto della canonica segnalazione WNT, mentre gli altri 2 geni, Selp e Arl4, non sono. Cos&igrave;, il nostro studio di microarray utilizzando tessuti microdissected non solo fornisce informazioni globali sulla espressione genica durante lo sviluppo del somite, fornisce anche nuovi bersagli per studiare i percorsi di segnalazione induttivi che patterning somite diretto.

Analisi di Microarray di somitogenesis rivelano nuovi bersagli di WNT diverse vie nel mesoderma somitic di segnalazione.

Wnt &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x76AE;&#x7B4B;&#x677F;&#x3059;&#x308B;&#x4F53;&#x7BC0;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x4E0B;&#x6D41;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x306F;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3084;&#x3001;&#x4F53;&#x7BC0;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x6211;&#x3005; &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03; presomitic &#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x4F53; 5 &#x6700;&#x3082;&#x6700;&#x8FD1;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7BC0;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x80DA;&#x4E00;&#x65E5; 9.5 &#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; 207 &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x4EA2;&#x9032;&#x3068; 120 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; downregulated &#x306E;&#x4F53;&#x7BC0;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3002;&#x767A;&#x73FE;&#x89E3;&#x6790;&#x3068;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5206;&#x985E;&#x4F53;&#x7BC0;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x30EA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x3068;&#x3053;&#x308D;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x7B4B;&#x7BC0;&#x306E;&#x76AE;&#x7B4B;&#x677F;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; 3 &#x3064;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x72EC;&#x81EA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x69D8;&#x5F0F;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19; WNT &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5DEE;&#x52D5;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x8A8D;&#x8A3C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x308B; WNTs &#x8868;&#x793A;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x305D;&#x306E; 1 &#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A4;&#x3001;&#x3067;&#x3059;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E; 2 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;Selp &#x3068; Arl4 &#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x6B63;&#x898F;&#x3001;wnt &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;microdissected &#x7D44;&#x7E54;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x4F53;&#x7BC0;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x305D;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x4F53;&#x7BC0;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6A19;&#x7684;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4F53;&#x7BC0;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x89E3;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308B; WNT &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3059;&#x308B;&#x4F53;&#x7BC0;&#x4E2D;&#x306E;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6A19;&#x7684;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

WNT &#xC2E0;&#xD638; somitic mesoderm dermomyotome &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC758; &#xC9C0;&#xC2DD;&#xC740; &#xD55C;&#xC815; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xACFC; somite, &#xCD08;&#xAE30; &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC218;&#xD589;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; 5 &#xAC00;&#xC7A5; &#xCD5C;&#xADFC; &#xD615;&#xC131; &#xB41C; somites&#xC640; presomitic mesoderm microarray &#xBC30;&#xC544; &#xD558;&#xB8E8; 9.5&#xC5D0;&#xC11C;. 207 &#xC720;&#xC804;&#xC790; upregulated &#xBC0F; 120 &#xC720;&#xC804;&#xC790; downregulated somite &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xD30C;&#xC545;. &#xC2DD; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xBD84;&#xB958;&#xAC00; somite &#xAC1C;&#xBC1C; &#xACF5;&#xBD80;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xADC0;&#xC911; &#xD55C; &#xC790;&#xC6D0;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD480;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xCD08;&#xAE30; somite dermomyotome &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134; &#xC77C;&#xCE58;,&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; WNT &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; transcriptional &#xB300;&#xC0C1; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB2E4;&#xB978; Wnts&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB3D9; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xCD94;&#xAC00; 1 &#xC2DC;&#xC5F0;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD2B8;&#xB85C;&#xC774;, &#xC815;&#xC2DD; WNT &#xC2E0;&#xD638;, &#xBC18;&#xBA74;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB978; 2 &#xC720;&#xC804;&#xC790;, Selp &#xBC0F; Arl4, &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC0C1; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; microarray &#xC5F0;&#xAD6C; microdissected &#xC870;&#xC9C1; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; somite &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB610;&#xD55C; &#xADF8; &#xC9C1;&#xC811; somite &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xC720;&#xB3C4; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC18C;&#xC124; &#xB300;&#xC0C1;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;.

Microarray &#xBD84;&#xC11D; somitogenesis&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; WNT &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C; somitic mesoderm&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18C;&#xC124; &#xB300;&#xC0C1;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

Se&ntilde;alizaci&oacute;n de WNT desempe&ntilde;a un papel importante en el dibujo de la dermomyotome del mesodermo somitic. Sin embargo, el conocimiento de genes diana y su regulaci&oacute;n es limitado. Para identificar nuevos genes implicados en el desarrollo y los patrones tempranos de las somitas, realizamos una comparaci&oacute;n de la expresi&oacute;n g&eacute;nica por microarray entre el mesodermo de la presomitic y las 5 somitas recientemente formados del rat&oacute;n en el d&iacute;a embrionario 9.5. Se identificaron 207 alza de genes y 120 genes o en formaci&oacute;n de somitas. An&aacute;lisis de la expresi&oacute;n y categorizaci&oacute;n funcional de estos genes demostraron esto para ser una piscina diversa que proporciona un valioso recurso para el estudio de desarrollo de somitas. Hasta el momento, hemos encontrado tres genes expresados en la dermomyotome de las somitas temprano. De acuerdo con sus patrones de expresi&oacute;n, estos genes son dianas transcripcionales de se&ntilde;ales WNT, pero muestran activaci&oacute;n diferencial por diferentes WNTs. Adem&aacute;s, demostramos que 1 de estos genes, Troy, es un objetivo directo de se&ntilde;alizaci&oacute;n de WNT can&oacute;nica, mientras que los otros 2 genes, Selp y Arl4, no. Por lo tanto, nuestro estudio de microarray utilizando tejidos microdissected no s&oacute;lo proporciona informaci&oacute;n global sobre la expresi&oacute;n g&eacute;nica durante el desarrollo de somitas, tambi&eacute;n proporciona nuevas dianas para estudiar las v&iacute;as de se&ntilde;alizaci&oacute;n inductivas patrones de somitas directa.

An&aacute;lisis de microarrays de somitogenesis revelan nuevas dianas de WNT diferente rutas en el mesodermo somitic de se&ntilde;alizaci&oacute;n.

&#x9009;&#x62E9;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x7684; Wnt &#x5206;&#x6CCC;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x808C;&#x7684;&#x884C;&#x5217;&#x5F0F;&#x57FA;&#x56E0; Pax3&#x3001; MyoD &#x548C; Myf5 &#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x751F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5C1A;&#x672A;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; A &#xFF08;PKA&#xFF09; &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7; CREB &#x8FD9;&#x79CD;&#x611F;&#x5E94;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F53;&#x5916;&#x5916;&#x690D;&#x4F53;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3001; &#x7A81;&#x53D8;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F20;&#x9012;&#x5230;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x6269;&#x589E;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x901A;&#x8FC7; PKA &#x548C;&#x5176;&#x76EE;&#x6807;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; CREB &#x7684;&#x817A;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6240;&#x9700;&#x7684; Wnt &#x5B9A;&#x5411;&#x808C;&#x6E90;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;Wnt &#x86CB;&#x767D;&#x8FD8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x523A;&#x6FC0; CREB &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B; Wnt &#x4FE1;&#x53F7;&#x9014;&#x5F84;&#x6D89;&#x53CA; PKA &#x548C; CREB &#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5F15;&#x8D77;&#x4E86; PKA/CREB &#x4FE1;&#x53F7;&#x4E5F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5176;&#x4ED6; Wnt &#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x3001; &#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x91CD;&#x5EFA;&#x548C;&#x764C;&#x75C7;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;

&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7; CREB &#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x63A7;&#x5236;&#x6210;&#x808C; Wnt &#x86CB;&#x767D;&#x6240;&#x81F4;&#x3002;

Select members of the Wnt family of secreted glycoproteins have been implicated in inducing the myogenic determinant genes Pax3, MyoD and Myf5 during mammalian embryogenesis, but the mechanism of induction has not been defined. We describe an unexpected role for protein kinase A (PKA) signalling via CREB in this induction. Using a combination of in vitro explant assays, mutant analysis and gene delivery into mouse embryos cultured ex vivo, we demonstrate that adenylyl cyclase signalling via PKA and its target transcription factor CREB are required for Wnt-directed myogenic gene expression. Wnt proteins can also stimulate CREB-mediated transcription, providing evidence for a Wnt signalling pathway involving PKA and CREB. Our findings raise the possibility that PKA/CREB signalling may also contribute to other Wnt-regulated processes in embryonic patterning, stem cell renewal and cancer.

Protein kinase A signalling via CREB controls myogenesis induced by Wnt proteins.

Certains membres de la famille Wnt de glycoprot&eacute;ines s&eacute;cr&eacute;t&eacute;es ont &eacute;t&eacute; impliqu&eacute;s dans l&#39;induction de g&egrave;nes d&eacute;terminants myog&egrave;nes Pax3, MyoD et Myf5 durant l&#39;embryogen&egrave;se chez les mammif&egrave;res, mais le m&eacute;canisme d&#39;induction n&#39;a pas &eacute;t&eacute; d&eacute;fini. Les auteurs d&eacute;crivent un r&ocirc;le inattendu pour la prot&eacute;ine kinase A (PKA) signalisation via CREB dans cette induction. Une combinaison de tests in vitro d&#39;explants, analyse de mutant et administration d&#39;un g&egrave;ne dans des embryons de souris cultiv&eacute;es ex vivo, nous d&eacute;montrons que l&#39;ad&eacute;nylyl cyclase signalisation via PKA et son facteur de transcription CREB de cible sont requis pour l&#39;expression des g&egrave;nes myog&egrave;ne Wnt dirig&eacute;e. Prot&eacute;ines Wnt peuvent aussi stimuler la transcription CREB-m&eacute;diation, fournissant des preuves pour un Wnt signalisation voie impliquant la PKA et CREB. Nos r&eacute;sultats soul&egrave;vent la possibilit&eacute; que les PKA/CREB signalisation peut aussi contribuer &agrave; d&#39;autres processus r&eacute;glement&eacute;s Wnt dans la structuration embryonnaire, la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration des cellules souches et cancer.

Prot&eacute;ine kinase, une signalisation via CREB contr&ocirc;le myogen&egrave;se induite par les prot&eacute;ines Wnt.

Proteinkinase A Signalisierung &#xFC;ber CREB steuert Myogenese durch Wnt-Proteine &#x200B;&#x200B;induziert.

Selezionare membri della famiglia Wnt di glicoproteine secrete sono stati implicati nell&#39;indurre i geni determinanti miogena Pax3 e MyoD, Myf5 durante l&#39;embriogenesi dei mammiferi, ma non &egrave; stato definito il meccanismo di induzione. Descriviamo un ruolo inatteso per la proteina chinasi A (PKA) segnalazione via CREB in questa induzione. Utilizzando una combinazione di espianto in vitro assays, analisi di mutanti e gene consegna negli embrioni di topo in coltura ex vivo, dimostreremo che adenil ciclasi segnalazione via PKA ed il relativo fattore di trascrizione bersaglio CREB sono necessari per l&#39;espressione di gene miogena Wnt-diretto. Le proteine WNT possono anche stimolare la trascrizione CREB-mediata, fornendo le prove per un Wnt segnalazione percorso coinvolgendo PKA e CREB. I nostri risultati aumentare la possibilit&agrave; che PKA/CREB segnalazione pu&ograve; anche contribuire a altri processi regolamentati Wnt patterning embrionale, il rinnovamento delle cellule staminali e cancro.

Chinasi di proteina una segnalazione via CREB controlla myogenesis indotta da proteine Wnt.

&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E; Wnt &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x4E2D;&#x306E;&#x7B4B;&#x539F;&#x6027;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; Pax3&#x3001;MyoD&#x3001;Myf5 &#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304C;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; A(PKA) &#x3053;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; creb &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x306E;&#x4E88;&#x60F3;&#x5916;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3001;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x524D;&#x306E;&#x30F4;&#x30A3;&#x30F4;&#x30A9;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x3078;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; PKA &#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50; CREB &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x304C; Wnt &#x76E3;&#x7763;&#x7B4B;&#x539F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x3002;Wnt &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x307E;&#x305F; CREB &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E; PKA &#x3068; CREB &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F; wnt &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F; PKA/CREB &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306F;&#x4ED6;&#x80DA;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3068;&#x764C;&#x306E; Wnt &#x898F;&#x5236;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x3082;&#x8CA2;&#x732E;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x4E0A;&#x3052;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Creb &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; Wnt &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7B4B;&#x767A;&#x751F;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Wnt &#xBE44; glycoproteins&#xC758; &#xBA64;&#xBC84; &#xC120;&#xD0DD; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; embryogenesis &#xC911; Pax3, MyoD &#xBC0F; Myf5 myogenic &#xACB0;&#xC815; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC720;&#xB3C4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC815;&#xC758; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; A (PKA) &#xC2E0;&#xD638; CREB &#xD1B5;&#xD574;&#xC774; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xC740; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCB4; &#xC678; explant &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;, &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xB2EC; ex vivo &#xAD50;&#xC591; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544;&#xB85C; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC; adenylyl cyclase PKA&#xC640; &#xADF8; &#xB300;&#xC0C1;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; CREB &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; Wnt &#xAC10;&#xB3C5; myogenic &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Wnt &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; CREB &#xC911;&#xC7AC; &#xC804;&#xC0AC;, Wnt &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C; PKA&#xC640; CREB&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xC790;&#xADF9;&#xB3C4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131; &#xB610;&#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; Wnt &#xADDC;&#xC81C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xD328;&#xD134;&#xD654;, &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xBC0F; &#xC554;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; PKA/CREB &#xC2E0;&#xD638;.

CREB &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; myogenesis Wnt &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xBC1C; &#xB41C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Selectos miembros de la familia Wnt de glicoprote&iacute;nas secretadas se han implicado en la inducci&oacute;n de los genes determinantes mi&oacute;genos Pax3, MyoD y Myf5 durante la embriog&eacute;nesis mam&iacute;feros, pero no se ha definido el mecanismo de inducci&oacute;n. Describimos un inesperado papel de prote&iacute;na quinasa A (PKA) se&ntilde;alizaci&oacute;n v&iacute;a CREB en esta inducci&oacute;n. Usando una combinaci&oacute;n de ensayos in vitro del explante, an&aacute;lisis mutante y entrega de genes en embriones de rat&oacute;n cultivadas ex vivo, demostramos que adenylyl cyclase se&ntilde;alizaci&oacute;n v&iacute;a PKA y su factor de transcripci&oacute;n de destino CREB se requieren para expresi&oacute;n g&eacute;nica mi&oacute;gena Wnt-dirigido. Prote&iacute;nas Wnt tambi&eacute;n pueden estimular la transcripci&oacute;n mediada por CREB, proporcionando evidencia de un PKA y CREB de la v&iacute;a de se&ntilde;alizaci&oacute;n de Wnt. Nuestros resultados mencionan la posibilidad de que la se&ntilde;alizaci&oacute;n de PKA/CREB puede contribuir tambi&eacute;n a otros procesos regulados por Wnt en patr&oacute;n embrionario, renovaci&oacute;n de c&eacute;lulas madre y c&aacute;ncer.

Prote&iacute;na quinasa una se&ntilde;alizaci&oacute;n v&iacute;a CREB controla miog&eacute;nesis inducida por prote&iacute;nas Wnt.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A;&#x76F4;&#x63A5;&#x57FA;&#x4E8E;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x67D3;&#x4E0E;&#x6574;&#x4E2A;&#x80DA;&#x80CE;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x8054;&#x5408;&#x5E94;&#x7528;&#x9F20;&#x6807;&#x4F53;&#x8282;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x65B0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8BC1;&#x660E;&#x7684;&#x539F;&#x5219;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; somites &#x8868;&#x793A;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7A97;&#x4F53;&#x7684; Smoothened&#xFF0C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x58F0;&#x6CE2;&#x523A;&#x732C; (SHH) &#x5DE5;&#x7A0B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5FAE;&#x91CF;&#x6CE8;&#x5C04;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x968F;&#x7740;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x53EF;&#x4EE5;&#x611F;&#x67D3;&#x8BB8;&#x591A;&#x80DA;&#x80CE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x9F20;&#x6807;&#xFF0C;&#x6B64;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x6709;&#x6548;&#x66FF;&#x4EE3;&#x5E38;&#x89C4;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6280;&#x672F;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x65F6;&#x7A7A;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x9488;&#x5BF9;&#x5728;&#x9F20;&#x6807;&#x4F53;&#x8282;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF1A; &#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x67D3;&#x548C;&#x5168;&#x80DA;&#x80CE;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;

We report here a novel approach to direct gene expression in the mouse somite based on the combined application of adenovirus-mediated gene delivery and whole embryo ex vivo culture. As proof of principle, we show functional analysis of somites microinjected with an engineered virus expressing an activated form of Smoothened, the signaling receptor for Sonic Hedgehog (SHH). As adenovirus can infect many embryonic tissues in the mouse, this method may provide an effective alternative to conventional transgenesis for targeted spatial and temporal gene expression.

Targeting gene expression in the mouse somite: adenovirus-mediated gene delivery and whole embryo culture.

Nous rapportons ici une nouvelle approche pour diriger l&#39;expression des g&egrave;nes dans le somite souris bas&eacute;e sur l&#39;application combin&eacute;e de la livraison de g&egrave;ne ad&eacute;novirale et tout embryon ex vivo la culture. Comme preuve de principe, nous montrons une analyse fonctionnelle des somites micro avec un virus machin&eacute; exprimant une forme allotropique de Smoothened, le r&eacute;cepteur de signalisation pour Sonic Hedgehog (SHH). Comme l&#39;ad&eacute;novirus peut infecter de nombreux tissus embryonnaires chez la souris, cette m&eacute;thode peut fournir une alternative efficace &agrave; la transg&eacute;n&egrave;se classique pour l&#39;expression des g&egrave;nes cibl&eacute;s de spatiale et temporelle.

Ciblage de l&#39;expression des g&egrave;nes dans le somite souris : livraison ad&eacute;novirale g&egrave;ne et la culture de l&#39;embryon entier.

Targeting-Genexpression in der Maus Somiten: Adenovirus-vermittelte Gentransfer und ganzen Embryo Kultur.

Riportiamo qui un nuovo approccio alla diretta espressione genica nel somite mouse basato sull&#39;applicazione combinata di intero embrione ex vivo cultura e consegna dell&#39;adenovirus-mediata del gene. Come prova di principio, vi mostriamo in analisi funzionale dei somiti microinjected con un virus ingegnerizzati che esprimono una forma attivata di lisciato, il segnalazione del recettore per Sonic Hedgehog (SHH). Come adenovirus pu&ograve; infettare molti tessuti embrionali del mouse, questo metodo pu&ograve; fornire un&#39;efficace alternativa alla transgenesi convenzionale per l&#39;espressione del gene bersaglio spaziale e temporale.

Espressione genica nel somite del mouse di targeting: consegna dell&#39;adenovirus-mediata del gene e coltura degli embrioni intero.

&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x8907;&#x5408;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A3;&#x30EB;&#x30B9;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30C7;&#x30EA;&#x30D0;&#x30EA;&#x30FC;&#x3068; ex vivo &#x6587;&#x5316;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x80DA;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x4F53;&#x7BC0;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x76F4;&#x63A5;&#x306B;&#x65AC;&#x65B0;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x539F;&#x5247;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4F53;&#x7BC0;&#x6ED1;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30BD;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30FB; &#x30B6; &#x30FB; &#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0; (SHH) &#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x7D44;&#x307F;&#x63DB;&#x3048;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; microinjected &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x840C;&#x82BD;&#x671F;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x5BFE;&#x8C61;&#x306E;&#x6642;&#x7A7A;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x4EE3;&#x66FF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x4F53;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;: &#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A3;&#x30EB;&#x30B9;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30C7;&#x30EA;&#x30D0;&#x30EA;&#x30FC;&#x3068;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x80DA;&#x57F9;&#x990A;&#x3002;

&#xC5EC;&#xAE30; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; somite &#xC911;&#xC7AC; &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xB2EC; &#xBC0F; ex vivo &#xBB38;&#xD654; &#xC804;&#xCCB4; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC9C1;&#xC811; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC54C;&#xB824;&#xB4DC;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6D0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC99D;&#xAC70;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Smoothened, &#xC18C;&#xB2C9; &#xB354; &#xD5E4;&#xC9C0;&#xD638;&#xADF8; (SHH) &#xC2E0;&#xD638; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; &#xD615;&#xD0DC; &#xD45C;&#xD604; &#xC870;&#xC791; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; microinjected somites&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xB9CE;&#xC740; &#xBC30;&#xC544; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB85C;&#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xB300;&#xC0C1;&#xB41C; &#xACF5;&#xAC04; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; transgenesis&#xC5D0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC548;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; somite&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305;: &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC911;&#xC7AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xB2EC; &#xBC0F; &#xC804;&#xCCB4; &#xBC30;&#xC544; &#xBB38;&#xD654;.

Se presenta aqu&iacute; un nuevo enfoque para dirigir la expresi&oacute;n g&eacute;nica en las somitas rat&oacute;n basado en la aplicaci&oacute;n combinada de genes mediada por adenovirus y todo embri&oacute;n ex vivo de la cultura. Como prueba del principio, mostramos el an&aacute;lisis funcional de somitas microinyectados con un virus dise&ntilde;ado expresando una forma activada de alisado, el se&ntilde;alizaci&oacute;n del receptor para Sonic Hedgehog (SHH). Como adenovirus puede infectar muchos tejidos embrionarios en el rat&oacute;n, este m&eacute;todo puede proporcionar una alternativa eficaz a la transg&eacute;nesis convencionales para la expresi&oacute;n de genes espec&iacute;ficos de espacial y temporal.

Dirigidos a la expresi&oacute;n g&eacute;nica en las somitas rat&oacute;n: genes mediada por adenovirus y cultivo de embriones enteros.

&#x5C3D;&#x7BA1;&#x6CBB;&#x7597;&#x80F0;&#x3001; &#x809D;&#x3001; &#x80BA;&#x3001; &#x80A0;&#x7B49;&#x7684;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x884D;&#x751F;&#x5DE5;&#x5177;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6709;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5206;&#x5B50;&#x6807;&#x8BB0;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x786E;&#x5B9A;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5173;&#x4E8E;&#x5B9A;&#x4E49;&#x8F6C;&#x5F55;&#x90AE;&#x7968;&#x53CA;&#x5185;&#x810F;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BF9; E8.25 &#x6700;&#x7EC8;&#x548C;&#x5185;&#x810F;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x6267;&#x884C;&#x57FA;&#x56E0;&#x82AF;&#x7247;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5F00;&#x53D1;&#x65E9;&#x671F;&#x7684;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7B7E;&#x540D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x9610;&#x660E;&#x4E86;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x76F8;&#x4F3C;&#x4E4B;&#x5904;&#x548C;&#x660E;&#x786E;&#x548C;&#x5185;&#x810F;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x660E;&#x786E;&#x548C;&#x5185;&#x810F;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x6D41;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EEA;&#x9694;&#x79BB;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A;&#x7684;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x5F62;&#x6210;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5E94;&#x4FBF;&#x5229;&#x7684;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x5F62;&#x6210;&#x4ECE;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#x51C6;&#x5206;&#x79BB;&#x4E0E;&#x5168;&#x7403;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x6700;&#x7EC8;&#x548C;&#x5185;&#x810F;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x3002;

In spite of the therapeutic importance of endoderm derivatives such as the pancreas, liver, lung, and intestine, there are few molecular markers specific for early endoderm. In order to identify endoderm-specific genes as well as to define transcriptional differences between definitive and visceral endoderm, we performed microarray analysis on E8.25 definitive and visceral endoderm. We have developed an early endoderm gene expression signature, and clarified the transcriptional similarities and differences between definitive and visceral endoderm. Additionally, we have developed methods for flow cytometric isolation of definitive and visceral endoderm. These results shed light on the mechanism of endoderm formation and should facilitate investigation of endoderm formation from embryonic stem cells.

Prospective isolation and global gene expression analysis of definitive and visceral endoderm.

En d&#xE9;pit de l&#x26;#39;importance th&#xE9;rapeutique des d&#xE9;riv&#xE9;s endodermiques tels que le pancr&#xE9;as, le foie, les poumons et l&#x26;#39;intestin, il ya peu de marqueurs mol&#xE9;culaires sp&#xE9;cifiques pour l&#x26;#39;endoderme d&#xE9;but. Afin d&#x26;#39;identifier des g&#xE8;nes sp&#xE9;cifiques endoderme ainsi que de d&#xE9;finir les diff&#xE9;rences entre la transcription endoderme d&#xE9;finitif et visc&#xE9;rale, nous avons effectu&#xE9; l&#x26;#39;analyse des micror&#xE9;seaux sur E8.25 endoderme d&#xE9;finitif et visc&#xE9;rale. Nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; une signature endoderme d&#xE9;but l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes, et de clarifier les similitudes et les diff&#xE9;rences entre la transcription endoderme d&#xE9;finitif et visc&#xE9;rale. En outre, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; des m&#xE9;thodes pour l&#x26;#39;isolement de cytom&#xE9;trie en flux de l&#x26;#39;endoderme d&#xE9;finitif et visc&#xE9;rale. Ces r&#xE9;sultats mettent en lumi&#xE8;re le m&#xE9;canisme de formation endoderme et devrait faciliter l&#x26;#39;enqu&#xEA;te de la formation endoderme &#xE0; partir de cellules souches embryonnaires.

Isolement prospective et globale Analyse de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique de l&#x26;#39;endoderme d&#xE9;finitif et visc&#xE9;rale

Trotz der therapeutischen Bedeutung der Endodermis Derivate wie die Bauchspeicheldr&uuml;se, Leber, Lunge und Darm gibt es einige molekulare Marker speziell f&uuml;r fr&uuml;he Endodermis. Ermittlung Endodermis-spezifische Gene als auch hinsichtlich transkriptionelle Unterschiede zwischen definitive und viszeralen Endodermis definieren, f&uuml;hrten wir Microarray-Analyse auf E8.25 definitive und viszeralen Endodermis. Wir haben eine fr&uuml;he Endodermis Gen-Ausdruck-Signatur entwickelt und pr&auml;zisiert die transkriptionelle &Auml;hnlichkeiten und Unterschiede zwischen definitive und viszeralen Endodermis. Dar&uuml;ber hinaus haben wir Methoden flie&szlig;en Cytometric Isolierung des definitiven und viszerale Entoderm entwickelt. Diese Ergebnisse Aufschluss &uuml;ber den Mechanismus der Endodermis Bildung und Untersuchung der Endodermis Formation aus embryonalen Stammzellen erleichtern sollte.

Prospektive Isolation und globale Genexpressionsanalyse der definitive und viszeralen Endodermis.

Nonostante l&#39;importanza terapeutica dei derivati endoderma come il pancreas, fegato, polmone e intestino, ci sono alcuni marcatori molecolari specifici per primo endoderma. Al fine di identificare geni specifici endoderma pure quanto a definire transcriptional differenze tra endoderma viscerale e definitiva, abbiamo eseguito analisi microarray su E8.25 endoderma definitivo e viscerale. Abbiamo sviluppato una firma di espressione di gene di endoderma precoce e chiarita la transcriptional somiglianze e differenze tra endoderma definitivo e viscerale. Inoltre, abbiamo sviluppato metodi per flusso cytometric isolamento dell&#39;endoderma definitivo e viscerale. Questi risultati fanno luce sul meccanismo di formazione endoderma e dovrebbero facilitare l&#39;indagine di formazione endoderma da cellule staminali embrionali.

Isolamento futuri e analisi di espressione genica globale dell&#39;endoderma definitivo e viscerale.

&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x81B5;&#x81D3;&#x3001;&#x809D;&#x81D3;&#x3001;&#x80BA;&#x3001;&#x8178;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x3001;&#x5185;&#x81D3;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;E8.25&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x5185;&#x81D3;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CD;&#x30C1;&#x30E3;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3001;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x3001;&#x5185;&#x81D3;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x70B9;&#x3068;&#x76F8;&#x9055;&#x70B9;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x5185;&#x81D3;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x5149;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x3079;&#x304D;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x5358;&#x96E2;&#x3068;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x3068;&#x5185;&#x81D3;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x89E3;&#x6790;

&#xCDCC;, &#xAC04;, &#xD3D0;, &#xC18C;&#xC7A5; &#xB4F1; endoderm &#xC720;&#xB3C4;&#xCCB4;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC801; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xCD08;&#xAE30; endoderm &#xD2B9;&#xC815; &#xBA87; &#xBD84;&#xC790; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xD655;&#xC2E4; &#xD55C; &#xB0B4;&#xC7A5; endoderm transcriptional &#xCC28;&#xC774;&#xC810;&#xC744; &#xC815;&#xC758;&#xB85C; endoderm &#xD2B9;&#xC815; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC2DD;&#xBCC4;, &#xC6B0;&#xB9AC; E8.25 &#xCD5C;&#xC885; &#xBC0F; &#xB0B4;&#xC7A5; endoderm microarray &#xBD84;&#xC11D; &#xC218;&#xD589;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC77C;&#xCC0D; endoderm &#xC9C4; &#xC2DD; &#xC11C;&#xBA85; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; transcriptional &#xC720;&#xC0AC;&#xC810;&#xACFC; &#xCC28;&#xC774;&#xC810; &#xD655;&#xC2E4; &#xD55C; &#xB0B4;&#xC7A5; endoderm &#xBA85;&#xD655;&#xD788;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD655;&#xC2E4; &#xD55C; &#xB0B4;&#xC7A5; endoderm&#xC758; &#xD750;&#xB984; cytometric &#xACA9;&#xB9AC; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; endoderm &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xBE5B;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0B0; &#xD558; &#xACE0; endoderm &#xD615;&#xC131; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xC608;&#xBE44; &#xACE0;&#xB9BD;&#xACFC; &#xCD5C;&#xC885;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xB0B4;&#xC7A5; endoderm&#xC758; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2DD; &#xBD84;&#xC11D;.

A pesar de la importancia terap&#xE9;utica de los derivados del endodermo, como el p&#xE1;ncreas, el h&#xED;gado, el pulm&#xF3;n y el intestino, hay pocos marcadores moleculares espec&#xED;ficos para endodermo temprano. Con el fin de identificar los genes espec&#xED;ficos endodermo, as&#xED; como para definir las diferencias entre la transcripci&#xF3;n endodermo definitivo y visceral, se realiz&#xF3; un an&#xE1;lisis de microarrays de E8.25 endodermo definitivo y visceral. Hemos desarrollado un gen temprano endodermo firma la expresi&#xF3;n, y aclar&#xF3; las similitudes y diferencias entre la transcripci&#xF3;n endodermo definitivo y visceral. Adem&#xE1;s, hemos desarrollado m&#xE9;todos para el aislamiento de citometr&#xED;a de flujo del endodermo definitivo y visceral. Estos resultados arrojan luz sobre el mecanismo de formaci&#xF3;n del endodermo y debe facilitar la investigaci&#xF3;n de la formaci&#xF3;n del endodermo a partir de c&#xE9;lulas madre embrionarias.

Aislamiento de Prospectiva y An&#xE1;lisis Global de la Expresi&#xF3;n G&#xE9;nica del endodermo definitivo y visceral

&#x9F20;&#x6807;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x91CD;&#x7F16;&#x7A0B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53D6;&#x5F97;&#x7684;&#x5F02;&#x4F4D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6548;&#x7387;&#x4F4E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x548C;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x53BB;&#x4E59;&#x9170;&#x9176; (HDAC) &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x63D0;&#x9AD8;&#x7F16;&#x7A0B;&#x6548;&#x7387;&#x3002;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E19;&#x620A;&#x9178;&#x94A0; (VPA) HDAC &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x63D0;&#x9AD8;&#x7F16;&#x7A0B;&#x6548;&#x7387;&#x7684;&#x8D85;&#x8FC7; 100 &#x500D;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528; Oct4 GFP &#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x540D;&#x8BB0;&#x8005;&#x3002;VPA &#x8FD8;&#x4F7F;&#x9AD8;&#x6548;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x65E0;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0; C-myc &#x7684;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x3002;

&#x8BF1;&#x5BFC;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5B9A;&#x4E49;&#x56E0;&#x7D20;&#x5927;&#x5927;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4E86;&#x901A;&#x8FC7;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3002;

Reprogramming of mouse and human somatic cells can be achieved by ectopic expression of transcription factors, but with low efficiencies. We report that DNA methyltransferase and histone deacetylase (HDAC) inhibitors improve reprogramming efficiency. In particular, valproic acid (VPA), an HDAC inhibitor, improves reprogramming efficiency by more than 100-fold, using Oct4-GFP as a reporter. VPA also enables efficient induction of pluripotent stem cells without introduction of the oncogene c-Myc.

Induction of pluripotent stem cells by defined factors is greatly improved by small-molecule compounds.

Reprogrammation de la souris et des cellules somatiques humaines peuvent &#xEA;tre atteints par l&#x26;#39;expression ectopique de facteurs de transcription, mais avec des rendements faibles. Nous signalons que les DNA m&#xE9;thyltransf&#xE9;rase et des histones d&#xE9;sac&#xE9;tylases (HDAC) am&#xE9;liorer l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de la reprogrammation. En particulier, l&#x26;#39;acide valpro&#xEF;que (VPA), un inhibiteur d&#x26;#39;HDAC, am&#xE9;liore l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de reprogrammation de plus de 100 fois, en utilisant Oct4-GFP en tant que journaliste. VPA permet &#xE9;galement d&#x26;#39;induction efficace de cellules souches pluripotentes sans introduction de l&#x26;#39;oncog&#xE8;ne c-Myc.

L&#x26;#39;induction de cellules souches pluripotentes par des facteurs d&#xE9;finis est grandement am&#xE9;lior&#xE9;e par petites mol&#xE9;cules

Eine Anpassung der Maus und menschliche K&ouml;rperzellen kann durch ektopische Expression von Transkriptionsfaktoren, aber mit geringer Effizienz erreicht werden. Wir berichten, dass die DNA-Methyltransferase und Histon-Deacetylase (HDAC)-Inhibitoren Neuprogrammierung Effizienz verbessern. Insbesondere verbessert Valproins&auml;ure (VPA), einen HDAC-Inhibitor, Neuprogrammierung Wirkungsgrad von mehr als 100-fold mit Oct4-GFP als Reporter. VPA erm&ouml;glicht auch effiziente Induktion der Pluripotent Stammzellen ohne Einf&uuml;hrung von der Onkogen c-Myc.

Induktion der Pluripotent Stammzellen durch definierte Faktoren wird durch kleine-Molek&uuml;l-Verbindungen erheblich verbessert.

Riprogrammazione di topo e cellule somatiche umane pu&ograve; essere ottenuto dall&#39;espressione ectopica di fattori di trascrizione, ma con bassa efficienza. Segnaliamo che gli inibitori DNA metiltransferasi e istone deacetylase (HDAC) migliorano l&#39;efficienza di riprogrammazione. In particolare, l&#39;acido valproico (VPA), un inibitore HDAC, migliora l&#39;efficienza della riprogrammazione pi&ugrave; di 100 volte, usando Oct4-GFP come reporter. VPA consente anche efficiente induzione di cellule staminali pluripotenti senza introduzione dell&#39;oncogene c-Myc.

Induzione di cellule staminali pluripotenti da fattori definiti &egrave; notevolmente migliorata da piccolo-molecola composti.

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x200B;&#x200B;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x4F4E;&#x52B9;&#x7387;&#x3067;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;DNA&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x8131;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#xFF08;HDAC&#xFF09;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x52B9;&#x7387;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x30D0;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x9178;&#xFF08;VPA&#xFF09;&#x3001;HDAC&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;Oct4-GFP&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;100&#x500D;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x3082;&#x52B9;&#x7387;&#x6027;&#x3092;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x5411;&#x4E0A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; VPA&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x764C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;c-Myc&#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6539;&#x5584;&#x3055;&#x308C;&#x308B;

&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC7AC;&#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xC18C;&#xC131; &#xC2DD; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB0AE;&#xC740; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2EC;&#xC131; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; DNA&#xC640; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; methyltransferase deacetylase (HDAC) &#xC800; &#xD574;&#xC81C; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;&#xC744; &#xAC1C;&#xC120; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788;, valproic &#xC0B0; (VPA), HDAC &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xD6A8;&#xC728;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0A8;&#xB2E4; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xC0C1; &#xC57D; Oct4 GFP&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAE30;&#xC790;&#xB85C;. VPA oncogene c Myc&#xC758; &#xB3C4;&#xC785; &#xC5C6;&#xC774; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xB3C4; &#xD574;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC815;&#xC758; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La reprogramaci&#xF3;n de rat&#xF3;n y c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas humanas se puede lograr mediante la expresi&#xF3;n ect&#xF3;pica de factores de transcripci&#xF3;n, pero con bajas eficiencias. Nos informan de que ADN metiltransferasa y la histona deacetilasa (HDAC) mejorar la eficiencia de la reprogramaci&#xF3;n. En particular, el &#xE1;cido valproico (VPA), un inhibidor de HDAC, mejora la eficiencia de reprogramaci&#xF3;n por m&#xE1;s de 100 veces, utilizando Oct4-GFP como reportero. VPA tambi&#xE9;n permite la inducci&#xF3;n eficiente de las c&#xE9;lulas madre pluripotentes sin introducci&#xF3;n del oncog&#xE9;n c-Myc.

La inducci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas madre pluripotentes de factores definidos por la mejora en gran medida compuestos de peque&#xF1;as mol&#xE9;culas

&#x65F6;&#x673A;&#x9009;&#x62E9;&#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x5206;&#x79BB;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x884D;&#x751F;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5141;&#x8BB8;&#x540C;&#x7EA7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7684;&#x4E00;&#x4EE3;&#x3002;

Optimal timing of inner cell mass isolation increases the efficiency of human embryonic stem cell derivation and allows generation of sibling cell lines.

Le moment optimal de l&#x26;#39;isolement cellulaire de masse int&#xE9;rieure augmente l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de la D&#xE9;rivation humain sur les cellules souches embryonnaires et permet la g&#xE9;n&#xE9;ration de lign&#xE9;es cellulaires fr&#xE8;res et s&#x153;urs

Optimalen Zeitpunkt der inneren Zelle Masse Isolation erh&ouml;ht die Effizienz der Ableitung der menschlichen embryonalen Stammzellen und erm&ouml;glicht die Generierung von Geschwister-Zelllinien.

Timing ottimale di isolamento massa interna delle cellule aumenta l&#39;efficienza di derivazione di cellule staminali embrionali umane e permette la generazione di linee cellulari di pari livello.

&#x5185;&#x90E8;&#x7D30;&#x80DE;&#x584A;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5C0E;&#x51FA;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x304C;&#x5411;&#x4E0A;&#x3057;&#x3001;&#x5144;&#x5F1F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB0B4;&#xBD80; &#xC138;&#xD3EC; &#xC9D1;&#xB2E8; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC758; &#xCD5C;&#xC801; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D; &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xD615;&#xC81C; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xC138;&#xB300; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Momento &#xF3;ptimo de la masa celular interna de aislamiento aumenta la eficiencia de los Derechos Humanos de derivaci&#xF3;n con c&#xE9;lulas madre embrionarias, y permite la generaci&#xF3;n de l&#xED;neas celulares de hermanos

&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x6B65;&#x9AA4;&#x6CBB;&#x7597;&#x548C;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7814;&#x7A76;&#x5E94;&#x7528;&#x662F;&#x5B83;&#x4EEC;&#x5206;&#x5316;&#x6210;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x80DA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x884D;&#x751F;&#x54C1;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x80BA;&#x764C;&#x3001; &#x809D;&#x764C;&#x53CA;&#x80F0;&#x817A;&#xFF0C;&#x662F;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x5B66;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x4F46;&#x53EA;&#x6709;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7684;&#x6210;&#x529F;&#x4F1A;&#x6664;&#x4E86;&#x52AA;&#x529B;&#x4EA7;&#x751F;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x5C4F;&#x5E55;&#x7684; 4000 &#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E17;&#x900F;&#x6027;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x88AB;&#x6807;&#x8BC6;&#x76F4;&#x63A5;&#x80DA;&#x6CBF;&#x88AD;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x8FD1; 80%&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6210;&#x660E;&#x786E;&#x7684;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x8FD9;&#x66F4;&#x9AD8;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#x5B9E;&#x73B0;&#x7531;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7D20; A &#x6216; Nodal&#xFF0C;&#x5E38;&#x7528;&#x7684;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x86CB;&#x767D;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5242;&#x3002;&#x5316;&#x5B66;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x8868;&#x793A;&#x591A;&#x4E2A;&#x80DA;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53C2;&#x52A0;&#x6B63;&#x5E38;&#x53D1;&#x5C55;&#x65F6;&#x6CE8;&#x5165;&#x53D1;&#x5C55;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x5F62;&#x6210;&#x80F0;&#x817A;&#x524D;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x9F20;&#x6807;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x8868;&#x793A;&#x5B9E;&#x73B0;&#x91CD;&#x73B0;&#x548C;&#x9AD8;&#x6548;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x6240;&#x9700;&#x7684; ESC &#x884D;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x4E00;&#x6B65;&#x3002;

&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x76F4;&#x63A5;&#x80DA;&#x9F20;&#x6807;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x3002;

An essential step for therapeutic and research applications of stem cells is the ability to differentiate them into specific cell types. Endodermal cell derivatives, including lung, liver, and pancreas, are of interest for regenerative medicine, but efforts to produce these cells have been met with only modest success. In a screen of 4000 compounds, two cell-permeable small molecules were indentified that direct differentiation of ESCs into the endodermal lineage. These compounds induce nearly 80% of ESCs to form definitive endoderm, a higher efficiency than that achieved by Activin A or Nodal, commonly used protein inducers of endoderm. The chemically induced endoderm expresses multiple endodermal markers, can participate in normal development when injected into developing embryos, and can form pancreatic progenitors. The application of small molecules to differentiate mouse and human ESCs into endoderm represents a step toward achieving a reproducible and efficient production of desired ESC derivatives.

Small molecules efficiently direct endodermal differentiation of mouse and human embryonic stem cells.

Une &#xE9;tape essentielle pour des applications th&#xE9;rapeutiques et de recherche de cellules souches est la capacit&#xE9; &#xE0; les diff&#xE9;rencier en diff&#xE9;rents types cellulaires sp&#xE9;cifiques. D&#xE9;riv&#xE9;s de cellules endodermiques, notamment du poumon, du foie et du pancr&#xE9;as, sont d&#x26;#39;int&#xE9;r&#xEA;t pour la m&#xE9;decine r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rative, mais les efforts pour produire ces cellules ont &#xE9;t&#xE9; rencontr&#xE9; qu&#x26;#39;un succ&#xE8;s modeste. Dans un &#xE9;cran de 4000 compos&#xE9;s, deux cellules perm&#xE9;ables de petites mol&#xE9;cules ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;es que la diff&#xE9;renciation directe des CES dans la lign&#xE9;e endodermique. Ces compos&#xE9;s induisent pr&#xE8;s de 80% des CES pour former l&#x26;#39;endoderme d&#xE9;finitif, un rendement plus &#xE9;lev&#xE9; que celui obtenu par l&#x26;#39;activine A ou Nodal, inducteurs de prot&#xE9;ines couramment utilis&#xE9;es de l&#x26;#39;endoderme. L&#x26;#39;endoderme chimiquement induite exprime de multiples marqueurs endodermiques, peuvent participer dans le d&#xE9;veloppement normal lorsqu&#x26;#39;il est inject&#xE9; dans le d&#xE9;veloppement des embryons, et peuvent former des prog&#xE9;niteurs pancr&#xE9;atiques. L&#x26;#39;application de petites mol&#xE9;cules pour diff&#xE9;rencier la souris et les CES de l&#x26;#39;homme dans l&#x26;#39;endoderme repr&#xE9;sente une &#xE9;tape vers la r&#xE9;alisation d&#x26;#39;une production reproductible et efficace des produits d&#xE9;riv&#xE9;s ESC souhait&#xE9;es.

Petites mol&#xE9;cules efficacement diff&#xE9;renciation directe endodermique de la souris et cellules souches embryonnaires humaines

Ein wesentlicher Schritt f&uuml;r therapeutische und Forschungsanwendungen Stammzellen ist die F&auml;higkeit, sie in bestimmte Zelltypen unterscheiden. Endodermalen Zellen, einschlie&szlig;lich Lunge, Leber und Bauchspeicheldr&uuml;se, Derivate sind von Interesse f&uuml;r die regenerative Medizin, aber Bem&uuml;hungen, diese Zellen produzieren nur bescheidenen Erfolg erreicht wurden. In einem Bildschirm 4000 Verbindungen wurden zwei Zelle-durchl&auml;ssigen kleine Molek&uuml;le, die Differenzierung des WSR in der endodermalen Linie direkt Nahrungsbedarf. Diese Verbindungen f&uuml;hren fast 80 % der WSR definitive Endodermis, eine h&ouml;here Effizienz als die von Activin A oder Nodal erreicht, h&auml;ufig verwendete Protein Induktoren der Endodermis zu bilden. Die chemisch induzierte Endodermis dr&uuml;ckt mehrere endodermalen Marker, kann normale Entwicklung wenn injiziert in die Entwicklung von Embryonen beteiligt und Pankreas Vorl&auml;uferzellen bilden kann. Die Anwendung von niedermolekularen, Maus und menschlichen WSR in Endodermis zu unterscheiden ist ein Schritt in Richtung zum Erzielen einer reproduzierbaren und effizienten Produktion von gew&uuml;nschten ESC-Derivate.

Kleine Molek&uuml;le direkt effizient endodermalen Differenzierung der Maus und humaner embryonaler Stammzellen.

Un passo essenziale per terapeutico e applicazioni di ricerca delle cellule staminali &egrave; la capacit&agrave; di distinguerli in tipi cellulari specifici. Cella endodermico derivati, compresi polmoni, fegato e pancreas, sono di interesse per la medicina rigenerativa, ma gli sforzi per produrre queste cellule hanno incontrati solo modesto successo. In una schermata di 4000 composti, due piccole molecole cellula permeabile sono stati identificati che indirizzano la differenziazione del CES in lignaggio endodermico. Questi composti inducono quasi l&#39;80% della CES per formare l&#39;endoderma definitivo, una maggiore efficienza rispetto a quello raggiunto da Activin A o Nodal, comunemente utilizzati induttori della proteina dell&#39;endoderma. L&#39;endoderma indotta chimicamente esprime pi&ugrave; marcatori endodermico, pu&ograve; partecipare al normale sviluppo quando iniettato in sviluppo di embrioni e pu&ograve; formare progenitori pancreatici. L&#39;applicazione di piccole molecole per differenziare il mouse e CES umane in endoderma rappresenta un passo verso il raggiungimento di una produzione efficiente e riproducibile di desiderato derivati ESC.

Piccole molecole dirigere efficientemente endodermico differenziazione di topo e cellule staminali embrionali umane.

&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7814;&#x7A76;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x80BA;&#x3001;&#x809D;&#x81D3;&#x3001;&#x81B5;&#x81D3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x7642;&#x306B;&#x95A2;&#x5FC3;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x52AA;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3055;&#x3084;&#x304B;&#x306A;&#x6210;&#x529F;&#x3067;&#x6E80;&#x305F;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; 4000&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x753B;&#x9762;&#x3067;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306B;ESC&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x71FB;&#x88FD;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x4F53;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D3;&#x30F3;A&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x3001;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x9AD8;&#x3044;&#x52B9;&#x7387;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;ESC&#x306E;&#x7D04;80&#xFF05;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x80DA;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x30D2;&#x30C8;ESC&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;ESC&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x306E;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x3068;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x4E00;&#x6B69;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x30C0;&#x30A4;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x5206;&#x5316;

&#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC640; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC740; &#xD2B9;&#xC815; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;. Endodermal &#xC140; &#xD30C;&#xC0DD; &#xC0C1;&#xD488;, &#xD3D0;, &#xAC04;, &#xCDCC; &#xC7A5;, &#xB4F1; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC758;&#xD559;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xC2EC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC804;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xB178;&#xB825;&#xB9CC; &#xACB8;&#xC190; &#xD55C; &#xC131;&#xACF5;&#xB9CC; &#xB098; &#xC84C;&#xB2E4;. 4000 &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xD654;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xD22C;&#xACFC;&#xC131; &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xC9C1;&#xC811; endodermal &#xD608;&#xD1B5;&#xC73C;&#xB85C; Escs&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C; ESCs &#xD655;&#xC2E4; &#xD55C; endoderm, &#xADF8; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xD6A8;&#xC728;&#xC744; Activin A &#xB610;&#xB294; Nodal &#xB2EC;&#xC131;, &#xD1B5;&#xC6A9; &#xB41C;&#xB2E4; endoderm&#xC758; inducers &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xAC70;&#xC758; 80%&#xB97C; &#xC720;&#xBC1C;. &#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; endoderm &#xC5EC;&#xB7EC; endodermal &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xACE0; &#xBC30;&#xC544;, &#xAC1C;&#xBC1C;&#xB85C; &#xC8FC;&#xC785; &#xD588;&#xC744; &#xB54C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xCDCC; &#xC7A5; progenitors&#xC744; &#xD615;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC0F; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; ESCs endoderm&#xC73C;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; ESC &#xD30C;&#xC0DD; &#xC0C1;&#xD488;&#xC758; &#xC7AC;&#xD604;&#xC774; &#xACE0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xB2EC;&#xC131;&#xC744; &#xD5A5;&#xD574; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790;&#xB294; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC640; &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; endodermal &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xB97C; &#xC9C1;&#xC811;.

Un paso esencial para aplicaciones terap&#xE9;uticas y de investigaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre es la capacidad para diferenciarlas en tipos celulares espec&#xED;ficos. Endod&#xE9;rmico derivados de c&#xE9;lulas, incluyendo los pulmones, el h&#xED;gado y el p&#xE1;ncreas, son de inter&#xE9;s para la medicina regenerativa, pero los esfuerzos para producir estas c&#xE9;lulas se han encontrado con un &#xE9;xito bastante modesto. En una pantalla de 4000 compuestos, dos penetran en las c&#xE9;lulas mol&#xE9;culas peque&#xF1;as se identific&#xF3; que la diferenciaci&#xF3;n directa de los CES en el linaje endod&#xE9;rmico. Estos compuestos inducen casi el 80% de los CES para formar endodermo definitivo, una mayor eficiencia que el alcanzado por la activina A o nodal, de uso com&#xFA;n inductores de prote&#xED;nas de endodermo. El endodermo qu&#xED;micamente inducida expresa de m&#xFA;ltiples marcadores del endodermo, pueden participar en el desarrollo normal cuando se inyectan en embriones en desarrollo, y pueden formar c&#xE9;lulas progenitoras pancre&#xE1;ticas. La aplicaci&#xF3;n de mol&#xE9;culas peque&#xF1;as para diferenciar el rat&#xF3;n y el CES humanos en endodermo representa un paso hacia el logro de una producci&#xF3;n reproducible y eficiente de los deseados derivados de la ESC.

Las mol&#xE9;culas peque&#xF1;as de manera eficiente la diferenciaci&#xF3;n directa endod&#xE9;rmico de rat&#xF3;n y c&#xE9;lulas madre embrionarias humanas

(ES) &#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5728;&#x4EBA;&#x4EEC;&#x719F;&#x77E5;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7F51;&#x7EDC;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x6F5C;&#x80FD;&#x548C;&#x538B;&#x6291;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x5728;&#x6BD4;&#x8F83;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x7F51;&#x7EDC;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x56CA;&#x80DA;&#x5185;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x79EF;&#x5374;&#x4E0D;&#x751A;&#x4E86;&#x89E3;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E; Sox17 &#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;&#x5728; Sox17 &#x4E2D;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0D;&#x80FD;&#x5206;&#x5316;&#x6210;&#x80DA;&#x5916;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x548C;&#x4FDD;&#x6301;&#x591A;&#x6F5C;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; Oct4&#x3001; Sox2 &#x548C; Nanog&#xFF0C;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5F3A;&#x8FEB;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; Sox17 &#x5411;&#x4E0B;&#x8C03;&#x8282; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x76F4;&#x63A5;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x57FA;&#x56E0;&#x80DA;&#x5916;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x7EC6;&#x80DE;&#x547D;&#x8FD0;&#x8D70;&#x5411;&#x5206;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD; Sox17 ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0A;&#x90FD;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x901A;&#x8FC7; Sox17 &#x548C; Nanog &#x4E4B;&#x95F4;&#x4E3A;&#x5171;&#x540C;&#x7684; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#x7684;&#x7ADE;&#x4E89;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x5236;&#x5B9A;&#x7684; Sox17 &#x51FD;&#x6570;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6DF1;&#x5165;&#x4E86;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7F51;&#x7EDC;&#x4FC3;&#x8FDB; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x88AB;&#x4E2D;&#x65AD;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3002;

Sox17 &#x4FC3;&#x8FDB;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x80DA;&#x5916;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x76F4;&#x63A5;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E0E;&#x95F4;&#x63A5;&#x5BF9;&#x6297;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x3002;

In embryonic stem (ES) cells, a well-characterized transcriptional network promotes pluripotency and represses gene expression required for differentiation. In comparison, the transcriptional networks that promote differentiation of ES cells and the blastocyst inner cell mass are poorly understood. Here, we show that Sox17 is a transcriptional regulator of differentiation in these pluripotent cells. ES cells deficient in Sox17 fail to differentiate into extraembryonic cell types and maintain expression of pluripotency-associated transcription factors, including Oct4, Nanog, and Sox2. In contrast, forced expression of Sox17 down-regulates ES cell-associated gene expression and directly activates genes functioning in differentiation toward an extraembryonic endoderm cell fate. We show these effects of Sox17 on ES cell gene expression are mediated at least in part through a competition between Sox17 and Nanog for common DNA-binding sites. By elaborating the function of Sox17, our results provide insight into how the transcriptional network promoting ES cell self-renewal is interrupted, allowing cellular differentiation.

Sox17 promotes differentiation in mouse embryonic stem cells by directly regulating extraembryonic gene expression and indirectly antagonizing self-renewal.

En souches embryonnaires (ES) des cellules, un r&#xE9;seau bien caract&#xE9;ris&#xE9; de la transcription favorise la pluripotence et r&#xE9;prime l&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne n&#xE9;cessaire &#xE0; la diff&#xE9;renciation. En comparaison, les r&#xE9;seaux transcriptionnels qui favorisent la diff&#xE9;renciation des cellules souches embryonnaires et la masse cellulaire interne du blastocyste sont mal comprises. Ici, nous montrons que Sox17 est un r&#xE9;gulateur transcriptionnel de la diff&#xE9;renciation de ces cellules pluripotentes. Cellules souches embryonnaires d&#xE9;ficientes en Sox17 ne parviennent pas &#xE0; se diff&#xE9;rencier en diff&#xE9;rents types cellulaires extra-embryonnaires et de maintenir l&#x26;#39;expression de facteurs de transcription pluripotence-associ&#xE9;s, y compris Oct4, Nanog, et Sox2. En revanche, l&#x26;#39;expression forc&#xE9;e de Sox17 r&#xE9;gule &#xE0; la baisse l&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne ES associ&#xE9; aux cellules et active directement des g&#xE8;nes fonctionnels dans la diff&#xE9;renciation vers un destin cellulaire endoderme extra-embryonnaire. Nous montrons ces effets de Sox17 sur l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique des cellules ES sont m&#xE9;di&#xE9;s au moins en partie par une concurrence entre les Sox17 et Nanog pour communes liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN des sites. Par l&#x26;#39;&#xE9;laboration de la fonction de Sox17, nos r&#xE9;sultats fournissent un aper&#xE7;u sur la fa&#xE7;on dont le r&#xE9;seau de la transcription de promouvoir des cellules ES auto-renouvellement est interrompue, ce qui permet la diff&#xE9;renciation cellulaire.

Sox17 favorise la diff&#xE9;renciation dans les cellules souches embryonnaires de souris par Directement r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique extraembryonnaire et indirectement antagoniser auto-renouvellement

In embryonale Stammzellen (ES) ein gut charakterisierten transkriptionelle Netzwerk f&ouml;rdert Pluripotenz und unterdr&uuml;ckt Genexpression f&uuml;r Differenzierung erforderlich. Im Vergleich dazu die transkriptionelle Netze, die F&ouml;rderung der Differenzierung von ES-Zellen und die Blastozyste innere Zelle Masse sind schlecht verstanden. Hier zeigen wir, dass Sox17 ein transcriptional Regulator der Differenzierung in diesen pluripotenten Zellen. ES-Zellen einen Mangel an Sox17 nicht in extraembryonic Zelltypen differenzieren und Ausdruck der Pluripotenz-assoziierte Transkriptionsfaktoren, einschlie&szlig;lich Oct4, Nanog und Sox2 pflegen. Im Gegensatz dazu erzwungene Ausdruck der Sox17 nach unten-reguliert ES Zelle-assoziierten Genexpression und direkt aktiviert Gene funktionieren bei Differenzierung gegen&uuml;ber einem extraembryonic Endodermis Zelle Schicksal. Wir zeigen, dass diese Auswirkungen des Sox17 auf ES Zelle Genexpression zumindest teilweise durch einen Wettbewerb zwischen Sox17 und Nanog f&uuml;r gemeinsame DNA-Bindungsstellen vermittelt werden. Durch die Funktion der Sox17 Ausarbeitung, bieten unsere Ergebnisse Einblick, wie die transkriptionelle F&ouml;rderung ES Zelle Selbsterneuerung Netzwerk unterbrochen wird, damit zellul&auml;re Differenzierung.

Sox17 f&ouml;rdert die Differenzierung in M&auml;useder embryonalen Stammzellen durch direkt regulieren extraembryonic Genexpression und indirekt davon Selbsterneuerung.

In cellule staminali embrionali (ES), una rete ben caratterizzata transcriptional promuove la pluripotenza e reprime l&#39;espressione di gene necessario per la differenziazione. In confronto, le reti di transcriptional che promuovono la differenziazione delle cellule di ES e la cella interiore blastocisti massa sono capiti male. Qui, vi mostriamo che Sox17 &egrave; un regolatore di transcriptional di differenziazione di queste cellule pluripotenti. Le cellule ES carenti di Sox17 non riescono a differenziarsi in tipi cellulari extraembryonic e mantenere l&#39;espressione di fattori di trascrizione associati pluripotenza, Sox2, Nanog e Oct4. Al contrario, espressione forzata di Sox17 gi&ugrave;-regola l&#39;espressione genica cell-associated ES e direttamente attiva geni funzionamento nella differenziazione verso un destino di cella extraembryonic endoderma. Vi mostriamo che questi effetti di Sox17 sull&#39;espressione del gene delle cellule ES sono almeno in parte mediati attraverso una competizione tra Sox17 e Nanog per comuni siti di legame del DNA. Attraverso l&#39;elaborazione della funzione di Sox17, i nostri risultati forniscono spaccato come il transcriptional rete promozione ES cella self-renewal &egrave; interrotto, permettendo la differenziazione cellulare.

Sox17 promuove la differenziazione in cellule staminali embrionali di topo direttamente che regolano l&#39;espressione di gene extraembryonic e indirettamente inimicarsi self-renewal.

&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#xFF08;ES&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x304F;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x8EE2;&#x5199;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3067;&#x306F;&#x3001;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x80DA;&#x76E4;&#x80DE;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x7D30;&#x80DE;&#x584A;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x304C;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;SOX17&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; SOX17&#x6B20;&#x640D;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x80DA;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x3001;Oct4&#x306E;&#x3001;Nanog&#x306E;&#x3001;&#x3068;Sox2&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x95A2;&#x9023;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;SOX17&#x306E;&#x5F37;&#x5236;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x80DA;&#x4F53;&#x5916;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x5206;&#x5316;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3078;&#x306E;SOX17&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;SOX17&#x3068;Nanog&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x7AF6;&#x4E89;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; SOX17&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8D77;&#x8349;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3001;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x304C;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

SOX17&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x80DA;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3001;&#x81EA;&#x5DF1;&#x66F4;&#x65B0;&#x9593;&#x63A5;&#x7684;&#x306B;&#x62EE;&#x6297;

&#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; (ES&#xC758;) &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; well-characterized transcriptional &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; pluripotency &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xB204;&#xB974;&#xB294;. &#xC774;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; blastocyst &#xB0B4;&#xBD80; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; transcriptional &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xB300;&#xB7C9; &#xC11C; &#xD22C;&#xB974; &#xAC8C; &#xC774;&#xD574;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; sox17&#xC740; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xC758; transcriptional &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Sox17&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; ES &#xC138;&#xD3EC; extraembryonic &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; pluripotency &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;, Oct4, Sox2, Nanog, &#xB4F1;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xB418;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, sox17&#xC758; &#xAC15;&#xC81C; &#xC2DD; &#xB2E4;&#xC6B4; ES &#xC138;&#xD3EC; &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C1;&#xC811; extraembryonic endoderm &#xC140; &#xC6B4;&#xBA85; &#xD5A5;&#xD574; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC5D0; sox17&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; Sox17 &#xBC0F; Nanog &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xACBD;&#xC7C1;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Sox17&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xACB0;&#xACFC; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C;&#xB294; transcriptional &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xCD94;&#xC9C4; ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825; &#xC911;&#xB2E8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xAC10; &#xBCC4; &#xBC95;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Sox17 &#xC9C1;&#xC811; extraembryonic &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xACE0; &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0;&#xC744; &#xC9C1;&#xC811; antagonizing &#xC5EC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

En madre embrionarias (ES) las c&#xE9;lulas, una red bien caracterizado transcripcional promueve la pluripotencia y reprime la expresi&#xF3;n de genes necesaria para la diferenciaci&#xF3;n. En comparaci&#xF3;n, las redes de transcripci&#xF3;n que promueven la diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre embrionarias de blastocisto y de la masa celular interna son poco conocidos. Aqu&#xED;, mostramos que Sox17 es un regulador transcripcional de la diferenciaci&#xF3;n de estas c&#xE9;lulas pluripotentes. C&#xE9;lulas madre embrionarias deficientes en Sox17 no se diferencian en tipos de c&#xE9;lulas extraembrionarias y mantener la expresi&#xF3;n de factores de transcripci&#xF3;n asociados a la pluripotencia, incluyendo Oct4, Nanog, y Sox2. Por el contrario, la expresi&#xF3;n forzada de Sox17 regula a la baja ES asociada a las c&#xE9;lulas la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica y activa directamente los genes que funcionan en la diferenciaci&#xF3;n hacia un destino de c&#xE9;lulas del endodermo extraembrionario. Nos muestran estos efectos de Sox17 en la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica de c&#xE9;lulas ES son mediadas, al menos en parte, a trav&#xE9;s de una competencia entre Sox17 y Nanog para el com&#xFA;n de uni&#xF3;n al ADN sitios. Al elaborar la funci&#xF3;n de Sox17, nuestros resultados proporcionan una idea de c&#xF3;mo la red de promoci&#xF3;n de la transcripci&#xF3;n de c&#xE9;lulas ES de auto-renovaci&#xF3;n se interrumpe, lo que permite la diferenciaci&#xF3;n celular.

Sox17 promueve la diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre embrionarias de rat&#xF3;n directamente regulan la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica y de forma indirecta extraembrionario antagonizaci&#xF3;n de auto-renovaci&#xF3;n

&#x5C0F;&#x9F20;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x53EF;&#x4EE5;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80DA;&#x80CE;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x7528;&#x751F;&#x4EA7;&#x75C5;&#x4EBA;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x540E;&#x52E4;&#x3001; &#x6CD5;&#x5F8B;&#x548C;&#x793E;&#x4F1A;&#x56E0;&#x7D20;&#x6709;&#x9650;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5375;&#x5B50;&#x7684;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x83B7;&#x5F97;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375; &#xFF08;&#x5408;&#x5B50;&#xFF09; &#x91CD;&#x65B0;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5F53;&#x5408;&#x5B50;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x88AB;&#x66FF;&#x6362;&#x7684;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x53D1;&#x5C55;&#x5288;&#x88C2;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#xFF0C;&#x901A;&#x5E38;&#x8FDB;&#x5C55;&#x4F46;&#x7136;&#x540E;&#x902E;&#x6355;&#x6851;&#x6939;&#x9636;&#x6BB5;&#x4E4B;&#x524D;&#x3002;&#x8FD9;&#x6B21;&#x902E;&#x6355;&#x884C;&#x52A8;&#x662F;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x79FB;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5931;&#x8D25;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x4E0E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#xFF0C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x8F6C;&#x79FB;&#x540E;&#x7684;&#x5C0F;&#x65F6;&#x5185;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5230;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7684;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6210;&#x529F;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5148;&#x524D;&#x8D4F;&#x8BC6;&#x7684;&#x969C;&#x788D;&#x548C;&#x4ECA;&#x540E;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4FA7;&#x91CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x8981;&#x6C42;&#x3002;

&#x5C0F;&#x65F6;&#x540E;&#x6838;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5230;&#x9F20;&#x6807;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x5185;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x3002;

Fertilized mouse zygotes can reprogram somatic cells to a pluripotent state. Human zygotes might therefore be useful for producing patient-derived pluripotent stem cells. However, logistical, legal and social considerations have limited the availability of human eggs for research. Here we show that a significant number of normal fertilized eggs (zygotes) can be obtained for reprogramming studies. Using these zygotes, we found that when the zygotic genome was replaced with that of a somatic cell, development progressed normally throughout the cleavage stages, but then arrested before the morula stage. This arrest was associated with a failure to activate transcription in the transferred somatic genome. In contrast to human zygotes, mouse zygotes reprogrammed the somatic cell genome to a pluripotent state within hours after transfer. Our results suggest that there may be a previously unappreciated barrier to successful human nuclear transfer, and that future studies could focus on the requirements for genome activation.

Reprogramming within hours following nuclear transfer into mouse but not human zygotes.

Zygotes fertilis&#xE9;s de souris peut reprogrammer des cellules somatiques &#xE0; un &#xE9;tat pluripotent. Zygotes de l&#x26;#39;homme pourrait donc &#xEA;tre utile pour produire des patients issus de cellules souches pluripotentes. Cependant, des consid&#xE9;rations logistiques, juridiques et sociales ont limit&#xE9; la disponibilit&#xE9; des ovocytes humains pour la recherche. Ici, nous montrons qu&#x26;#39;un nombre important de normales &#x153;ufs f&#xE9;cond&#xE9;s (zygotes) peuvent &#xEA;tre obtenus pour la reprogrammation des &#xE9;tudes. L&#x26;#39;utilisation de ces zygotes, nous avons constat&#xE9; que lorsque le g&#xE9;nome zygotique a &#xE9;t&#xE9; remplac&#xE9; par celui d&#x26;#39;une cellule somatique, le d&#xE9;veloppement s&#x26;#39;est d&#xE9;roul&#xE9; normalement &#xE0; toutes les &#xE9;tapes de clivage, mais arr&#xEA;t&#xE9; avant le stade morula. Cette arrestation a &#xE9;t&#xE9; associ&#xE9;e &#xE0; une incapacit&#xE9; &#xE0; activer la transcription dans le g&#xE9;nome somatique transf&#xE9;r&#xE9;. Contrairement &#xE0; zygotes humains, la souris zygotes reprogramm&#xE9; le g&#xE9;nome de la cellule somatique dans un &#xE9;tat pluripotent en quelques heures apr&#xE8;s le transfert. Nos r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent qu&#x26;#39;il peut y avoir une barri&#xE8;re d&#xE9;j&#xE0; appr&#xE9;ci&#xE9; &#xE0; la r&#xE9;ussite du transfert nucl&#xE9;aire humaine, et que des &#xE9;tudes futures pourraient se concentrer sur les exigences pour l&#x26;#39;activation du g&#xE9;nome.

Reprogrammation heures qui suivent le transfert nucl&#xE9;aire dans la souris, mais pas zygotes humains

Befruchteten Maus Zygoten k&ouml;nnen somatischen Zellen in einen pluripotenten Zustand umzuprogrammieren. Menschliche Zygoten k&ouml;nnen daher f&uuml;r die Herstellung von Patienten abgeleiteten pluripotenten Stammzellen n&uuml;tzlich sein. Logistische, juristische und soziale &Uuml;berlegungen haben jedoch die Verf&uuml;gbarkeit von menschlichen Eizellen f&uuml;r die Forschung begrenzt. Hier zeigen wir, dass eine betr&auml;chtliche Anzahl von normal befruchteten Eier (Zygoten) abgerufen werden kann, f&uuml;r die Neuprogrammierung Studien. Verwenden diese Zygoten, fanden wir, dass als zygotic Genom mit einer somatischen Zelle ersetzt wurde, Entwicklung normalerweise w&auml;hrend der Spaltung-Stadien fortgeschritten, aber dann vor dem Morulastadium verhaftet. Diese Verhaftung war verbunden mit einem Ausfall, Transkription im &uuml;bertragenen somatische Genom zu aktivieren. Im Gegensatz zu menschlichen Zygoten umprogrammiert Maus Zygoten somatische Genom in einen pluripotenten Zustand innerhalb von Stunden nach &Uuml;bertragung. Unsere Ergebnisse legen nahe, dass es m&ouml;glicherweise ein zuvor unbeachtet Hindernis f&uuml;r erfolgreiche menschliche Kerntransfer und zuk&uuml;nftige Studien k&ouml;nnte die Anforderungen f&uuml;r Genom-Aktivierung setzen.

Neuprogrammierung innerhalb von Stunden nach Kerntransfer in Maus aber nicht menschlichen Zygoten.

Zigoti fecondati mouse possono riprogrammare le cellule somatiche di uno stato pluripotenti. Zigoti umani potrebbero quindi essere utile per la produzione di cellule staminali pluripotenti derivate dal paziente. Tuttavia, considerazioni logistiche, legali e sociali hanno limitato la disponibilit&agrave; di ovuli umani per la ricerca. Qui ci mostrano che un numero significativo di normali uova fecondate (zigoti) pu&ograve; essere ottenuto per riprogrammazione studi. Utilizzando questi zigoti, abbiamo trovato che quando il genoma zygotic &egrave; stato sostituito con quello di una cellula somatica, sviluppo progredito normalmente in tutte le fasi della scissione, ma poi arrestato prima della fase di morula. Questo arresto &egrave; stato associato con un fallimento per attivare la trascrizione del genoma somatico trasferito. Contrariamente a zigoti umani, zigoti mouse riprogrammato il genoma delle cellule somatiche in uno stato di pluripotent entro ore dopo il trasferimento. I nostri risultati suggeriscono che ci pu&ograve; essere una barriera in precedenza incompreso per trasferimento nucleare di successo umano, e che gli studi futuri potrebbero concentrarsi sui requisiti per l&#39;attivazione del genoma.

Riprogrammazione entro ore trasferimento nucleare in mouse ma non umani zigoti.

&#x53D7;&#x7CBE;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x60A3;&#x8005;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x88FD;&#x9020;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F79;&#x306B;&#x7ACB;&#x3064;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x7269;&#x6D41;&#x3001;&#x6CD5;&#x7684;&#x3001;&#x793E;&#x4F1A;&#x7684;&#x306A;&#x8003;&#x616E;&#x4E8B;&#x9805;&#x306F;&#x3001;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x5375;&#x5B50;&#x306E;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3057;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#xFF08;&#x63A5;&#x5408;&#x5B50;&#xFF09;&#x3001;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x63A5;&#x5408;&#x5B50;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x304C;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x304C;&#x958B;&#x88C2;&#x6BB5;&#x968E;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x9032;&#x884C;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x6851;&#x5B9F;&#x80DA;&#x671F;&#x524D;&#x306B;&#x902E;&#x6355;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x902E;&#x6355;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x9001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5185;&#x3067;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x5931;&#x6557;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x9001;&#x5F8C;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3092;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x529F;&#x3057;&#x305F;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x6838;&#x79FB;&#x690D;&#x306E;&#x524D;&#x306B;&#x6B63;&#x3057;&#x304F;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x969C;&#x58C1;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x4ECA;&#x5F8C;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x8981;&#x4EF6;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3002;

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5375;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x6838;&#x79FB;&#x690D;&#x5F8C;&#x6570;&#x6642;&#x9593;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;

&#xC218;&#xC815; &#xB41C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; zygotes &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; pluripotent &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB97C; &#xC7AC; &#xC124; &#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; zygotes &#xD658;&#xC790; &#xC720;&#xB798; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC720;&#xC6A9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xBCD1; &#xCC38;, &#xBC95;&#xB960; &#xBC0F; &#xC0AC;&#xD68C;&#xC801; &#xACE0;&#xB824; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xACC4;&#xB780;&#xC758; &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC218;&#xC815; &#xB41C; &#xC54C; (zygotes)&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xC218;&#xB97C; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; zygotes&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCC3E;&#xC558;&#xC9C0;&#xB9CC; zygotic &#xAC8C;&#xB188;&#xC744; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAD50;&#xCCB4;&#xB294; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xC5F4; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC9C4;&#xD589; morula &#xB2E8;&#xACC4; &#xC804;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xC74C; &#xCCB4;&#xD3EC;. &#xC774; &#xCCB4;&#xD3EC; &#xC804;&#xC1A1; &#xB41C; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC2E4;&#xD328;&#xC640; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; zygotes &#xB2EC;&#xB9AC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; zygotes &#xC804;&#xC1A1; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC774;&#xB0B4; pluripotent &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB85C; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xAC8C;&#xB188;&#xC744; &#xC7AC;&#xC124;&#xC815;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC81C;&#xC548; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD575; &#xC774;&#xC2DD;, &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC9C4;&#xAC00; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC774; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBBF8;&#xB798; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xAC8C;&#xB188; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC5D0; &#xC9D1;&#xC911;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC778;&#xAC04; zygotes &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xD575; &#xC774;&#xC804; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;.

Cigotos fertilizados de rat&#xF3;n se pueden reprogramar c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas a un estado pluripotente. Cigotos humanos tanto, podr&#xED;a ser &#xFA;til para producir paciente derivados de c&#xE9;lulas madre pluripotentes. Sin embargo, las consideraciones log&#xED;sticas, legales y sociales han limitado la disponibilidad de &#xF3;vulos humanos para investigaci&#xF3;n. Aqu&#xED; nos muestran que un n&#xFA;mero significativo de los huevos fecundados normales (cigotos) se pueden obtener para la reprogramaci&#xF3;n de los estudios. El uso de estos cigotos, hemos encontrado que cuando el genoma cig&#xF3;ticos se reemplaz&#xF3; con el de una c&#xE9;lula som&#xE1;tica, el desarrollo progres&#xF3; normalmente a lo largo de las etapas de escisi&#xF3;n, pero entonces detenido antes de la fase de m&#xF3;rula. Esta detenci&#xF3;n se asoci&#xF3; con un fracaso para activar la transcripci&#xF3;n en el genoma transferido som&#xE1;tica. En contraste con los cigotos humanos, rat&#xF3;n cigotos reprogramar el genoma de la c&#xE9;lula som&#xE1;tica a un estado pluripotente en cuesti&#xF3;n de horas despu&#xE9;s de la transferencia. Nuestros resultados sugieren que puede ser una barrera para el &#xE9;xito de poco apreciado anteriormente la transferencia nuclear humana, y que los futuros estudios podr&#xED;an centrarse en los requisitos para la activaci&#xF3;n del genoma.

Reprogramaci&#xF3;n de las pocas horas despu&#xE9;s de la transferencia nuclear en rat&#xF3;n, pero no los cigotos humanos

&#x7528;&#x9014;&#x5E76;&#x4E0D;&#x86CB;&#x8005;&#x62DB;&#x52DF;&#x4E2D;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x7684;&#x8865;&#x507F;&#x3002;

Impracticality of egg donor recruitment in the absence of compensation.

Impossibilit&#xE9; de recrutement de donneurs de Egg en l&#x26;#39;absence d&#x26;#39;indemnisation

Unm&ouml;glichkeit der Ei Spender Einstellung keine Entsch&auml;digung.

Impraticabilit&agrave; di reclutamento di donatore uova in assenza di compensazione.

&#x88DC;&#x511F;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x5834;&#x5408;&#x306E;&#x5375;&#x5B50;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8005;&#x52DF;&#x96C6;&#x306E;&#x975E;&#x73FE;&#x5B9F;&#x7684;

Alice E. Chen

Department of Molecular and Cell Biology

Harvard

Derivation of Human Embryonic Stem Cells by Immunosurgery

Alice E. Chen

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Molecular and Cell Biology

Harvard

Derivation of Human Embryonic Stem Cells by Immunosurgery

Department of Molecular and Cell Biology