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C. elegans Positive Butanone Learning, Short-term, and Long-term Associative Memory Assays

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Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

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Genome-wide Purification of Extrachromosomal Circular DNA from Eukaryotic Cells

Extrachromosomal circular DNAs (eccDNAs) are common genetic elements in Saccharomyces cerevisiae and are reported in other eukaryotes as well. EccDNAs ...

Princeton University

&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; (HSV-1&#xFF09; 1 &#x662F;&#x81EA;&#x7136;&#x754C;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4FB5;&#x5165;&#x5468;&#x56F4;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5E76;&#x4E14;&#x575A;&#x6301;&#x6709;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7EC8;&#x8EAB;&#x7684;&#x6F5C;&#x4F0F;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5176;&#x65E0;&#x6240;&#x4E0D;&#x5728;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#xFF0C;&#x88AB;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x7684;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#xFF08;17 &#x682A;&#xFF09; &#x53EA;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x81EA;&#x7136;&#x9694;&#x79BB;&#x5F00;&#x6765;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x7167;&#x6392;&#x80F6;&#x7247;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2; DNA &#x6D4B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x83B7;&#x5F97;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x5E94;&#x53D8; (F) &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x4F4E;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB; (H129)&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; interstrain &#x53D8;&#x5F02;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x5728;&#x4E24;&#x8005;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x7684;&#x6574;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7F16;&#x7801;&#x548C;&#x975E;&#x7F16;&#x7801;&#x533A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8BB8;&#x591A;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5DEE;&#x5F02;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x7684;&#x65B0;&#x83CC;&#x682A; F &#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x5148;&#x524D;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x5E94;&#x53D8; 17&#xFF0C;&#x5206;&#x5E03;&#x8868;&#x660E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x53D8;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x9891;&#x8C31;&#x3002;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x79BB;&#x3001; &#x5E94;&#x53D8; H129&#x3001; &#x663E;&#x793A;&#x8868;&#x56E0;&#x679C;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E3A;&#x5B8C;&#x5168;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x987A;&#x884C;&#x8513;&#x5EF6;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x5B9A;&#x4E49; H129 &#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x5DEE;&#x5F02;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4E00;&#x4E9B;&#x6F5C;&#x5728;&#x56E0;&#x679C;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x795E;&#x7ECF;&#x86CB;&#x767D; ICP34.5 &#xFF08;RL1&#xFF09;&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5C06;&#x9700;&#x8981;&#x8BC1;&#x660E;&#x7684;&#x66F4;&#x6539;&#x662F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x590D;&#x8FF0;&#x7684;&#x5E94;&#x53D8; H129 &#x8513;&#x5EF6;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x4E5F;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x6211;&#x4EEC;&#x5E94;&#x53D8; F UL13 &#x6FC0;&#x9176;&#x7A81;&#x53D8;&#x7A81;&#x53D8;&#x9694;&#x79BB;&#xFF0C;&#x6F14;&#x793A;&#x5982;&#x4F55;&#x6DF1;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63ED;&#x793A;&#x51FA;&#x8DB3;&#x989D;&#x7684;&#x5728;&#x4EFB;&#x4F55;&#x7ED9;&#x5B9A;&#x7684;&#x5E94;&#x53D8;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x90A3;&#x4E9B;&#x4F20;&#x4EE3;&#x80CC;&#x666F;&#x7A81;&#x53D8;&#x6216;&#x6591;&#x5757;&#x51C0;&#x5316;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x4E2D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x589E;&#x52A0;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BF9;&#x5927; DNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x5E8F;&#x5217;&#x53D8;&#x5F02;&#x7684;&#x77E5;&#x8BC6;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8868;&#x660E;&#x6DF1;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x4EA7;&#x91CF;&#x6D1E;&#x5BDF; DNA &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x8FDB;&#x5316;&#x548C;&#x4E0D;&#x540C;&#x75C5;&#x539F;&#x5206;&#x79BB;&#x682A;&#x53D8;&#x5F02;&#x3002;

&#x5E8F;&#x5217;&#x53D8;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x548C;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x5206;&#x79BB;&#x682A;&#x7684;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x53D1;&#x73B0;&#x65B0;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;

Herpes simplex virus 1 (HSV-1) is a well-adapted human pathogen that can invade the peripheral nervous system and persist there as a lifelong latent infection. Despite their ubiquity, only one natural isolate of HSV-1 (strain 17) has been sequenced. Using Illumina high-throughput sequencing of viral DNA, we obtained the genome sequences of both a laboratory strain (F) and a low-passage clinical isolate (H129). These data demonstrated the extent of interstrain variation across the entire genome of HSV-1 in both coding and noncoding regions. We found many amino acid differences distributed across the proteome of the new strain F sequence and the previously known strain 17, demonstrating the spectrum of variability among wild-type HSV-1 proteins. The clinical isolate, strain H129, displays a unique anterograde spread phenotype for which the causal mutations were completely unknown. We have defined the sequence differences in H129 and propose a number of potentially causal genes, including the neurovirulence protein ICP34.5 (RL1). Further studies will be required to demonstrate which change(s) is sufficient to recapitulate the spread defect of strain H129. Unexpectedly, these data also revealed a frameshift mutation in the UL13 kinase in our strain F isolate, demonstrating how deep genome sequencing can reveal the full complement of background mutations in any given strain, particularly those passaged or plaque purified in a laboratory setting. These data increase our knowledge of sequence variation in large DNA viruses and demonstrate the potential of deep sequencing to yield insight into DNA genome evolution and the variation among different pathogen isolates.

Sequence variability in clinical and laboratory isolates of herpes simplex virus 1 reveals new mutations.

Herpes simplex virus 1 (HSV-1) est un agent pathog&#xE8;ne bien adapt&#xE9; humaine qui peut envahir le syst&#xE8;me nerveux p&#xE9;riph&#xE9;rique et y persister comme une infection latente &#xE0; vie. En d&#xE9;pit de leur omnipr&#xE9;sence, un seul isolat naturel du virus HSV-1 (souche 17) a &#xE9;t&#xE9; s&#xE9;quenc&#xE9;. Utilisation Illumina &#xE0; haut d&#xE9;bit de s&#xE9;quen&#xE7;age de l&#x26;#39;ADN viral, on obtient les s&#xE9;quences de g&#xE9;nome de fois une souche de laboratoire (F) et une clinique faible passage isoler (H129). Ces donn&#xE9;es ont d&#xE9;montr&#xE9; l&#x26;#39;ampleur des variations interstrain travers l&#x26;#39;ensemble du g&#xE9;nome de HSV-1 dans les r&#xE9;gions de codage et de non codante deux. Nous avons trouv&#xE9; de nombreuses diff&#xE9;rences d&#x26;#39;acides amin&#xE9;s r&#xE9;partis &#xE0; travers le prot&#xE9;ome de la s&#xE9;quence F nouvelle souche et la souche d&#xE9;j&#xE0; connu 17, d&#xE9;montrant le spectre de la variabilit&#xE9; parmi les sauvages de type HSV-1 prot&#xE9;ines. Le isolat clinique, la souche H129, affiche un ph&#xE9;notype unique de propagation ant&#xE9;rograde pour lesquelles les mutations causales &#xE9;taient compl&#xE8;tement inconnus. Nous avons d&#xE9;fini les diff&#xE9;rences de s&#xE9;quence dans H129 et de proposer un certain nombre de g&#xE8;nes potentiellement causales, y compris la prot&#xE9;ine ICP34.5 neurovirulence (RL1). D&#x26;#39;autres &#xE9;tudes seront n&#xE9;cessaires pour d&#xE9;montrer que le changement (s) est suffisante pour r&#xE9;capituler le d&#xE9;faut propagation de la souche H129. De fa&#xE7;on inattendue, ces donn&#xE9;es ont &#xE9;galement r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; une mutation du cadre de lecture dans la kinase UL13 dans notre souche F isoler, d&#xE9;montrant comment le s&#xE9;quen&#xE7;age du g&#xE9;nome de profondeur peut r&#xE9;v&#xE9;ler la gamme compl&#xE8;te des mutations de fond dans n&#x26;#39;importe quelle souche donn&#xE9;e, en particulier ceux passages ou de la plaque purifi&#xE9;e dans un environnement de laboratoire. Ces donn&#xE9;es accro&#xEE;tre notre connaissance de la variation de la s&#xE9;quence en grands virus &#xE0; ADN et de d&#xE9;montrer le potentiel de s&#xE9;quen&#xE7;age en profondeur pour donner un aper&#xE7;u de l&#x26;#39;&#xE9;volution du g&#xE9;nome de l&#x26;#39;ADN et la variation entre les diff&#xE9;rents isolats pathog&#xE8;nes.

La variabilit&#xE9; des s&#xE9;quences dans les isolats cliniques et de laboratoire du virus herp&#xE8;s simplex 1 r&#xE9;v&#xE8;le nouvelles mutations

Herpes-Simplex-Virus 1 (HSV-1) ist ein gut angepasster menschlichen Krankheitserreger, die das periphere Nervensystem einzudringen und beibehalten kann dort als eine lebenslange latente Infektion. Trotz ihrer Allgegenw&auml;rtigkeit hat nur eine nat&uuml;rliche Isolat von HSV-1 (17-Stamm) sequenziert. Mit Illumina Hochdurchsatz-viraler DNA Sequenzierung, wir erhalten die Genomsequenzen von einem Labor-Stamm (F) und eine niedrig-Passage klinischen isolieren (H129). Diese Daten zeigte das Ausma&szlig; der interstrain Variation &uuml;ber das gesamte Genom von HSV-1 in beiden Kodierung und nichtkodierende Regionen. Wir fanden viele Aminos&auml;ure Unterschiede &uuml;ber das Proteom der neuen Belastung F-Sequenz und die bisher bekannten Belastung 17, verteilt, zeigen das Spektrum der Variabilit&auml;t unter Wildtyp-HSV-1-Proteine. Die klinischen isolieren, Stamm H129, zeigt einen einzigartige Anterograde Ausbreitung Ph&auml;notyp, f&uuml;r die die urs&auml;chlichen Mutationen v&ouml;llig unbekannt waren. Wir haben die Sequenz Unterschiede in H129 definiert und eine Reihe von potentiell urs&auml;chlichen Gene, darunter das Neurovirulence-Protein ICP34.5 (RL1) schlagen. Weitere Studien m&uuml;ssen zeigen, welche &Auml;nderung(en) ausreicht, um die Verbreitung Mangels Belastung H129 rekapitulieren. Unerwartet, zeigte diese Daten auch eine Frameshift-Mutation in der UL13-Kinase in unserem Stamm F isolieren, demonstrieren, wie tief die Sequenzierung des Genoms erkennen l&auml;sst, umfassenden Hintergrund Mutationen in jede m&ouml;gliche gegebene Belastung, besonders jene passaged oder Plakette im Labor gereinigt. Diese Daten erh&ouml;hen unsere Kenntnisse der Sequenz Unterschiede in gro&szlig;e DNA-Viren und zeigen das Potenzial der Ultratiefe Sequenzierung, Einblick in die DNA-Genom-Evolution und die Variation zwischen den verschiedenen Erreger Isolate zu erbringen.

Sequenz Variabilit&auml;t klinischer und Labor-Isolaten von Herpes-Simplex-Virus 1 enth&uuml;llt neue Mutationen.

Herpes simplex virus 1 (HSV-1) &egrave; un patogeno umano daltonico che pu&ograve; invadere il sistema nervoso periferico e persistono l&igrave; come un&#39;infezione latente permanente. Nonostante la loro ubiquit&agrave;, solo un isolato naturale di HSV-1 (strain 17) &egrave; stato sequenziato. Utilizzando Illumina high-throughput di sequenziamento del DNA virale, abbiamo ottenuto le sequenze di genoma di entrambe un ceppo di laboratorio (F) e un basso-passaggio clinico isolare (H129). Questi dati hanno dimostrato l&#39;entit&agrave; della variazione interstrain attraverso l&#39;intero genoma di HSV-1 sia in regioni codificanti e non codificante. Abbiamo trovato molte differenze di aminoacidi distribuite tra il proteoma della nuova sequenza di ceppo F e il ceppo precedentemente conosciuto 17, dimostrando lo spettro di variabilit&agrave; tra le proteine di HSV-1 wild-type. La clinica isolare, ceppo H129, viene visualizzato un fenotipo di diffusione anterograda unico per cui le mutazioni causali erano completamente sconosciute. Ci hanno definito le differenze di sequenza in H129 e proporre un certo numero di geni potenzialmente causali, tra cui la proteina neurovirulence ICP34.5 (RL1). Saranno necessari ulteriori studi per dimostrare quali modifiche &egrave; sufficiente a riassumere il difetto di diffusione del ceppo H129. Inaspettatamente, questi dati hanno rivelato anche una mutazione frameshift la chinasi UL13 nel nostro ceppo F isolare, dimostrando quanto in profondit&agrave; il sequenziamento del genoma pu&ograve; rivelare il complemento completo di mutazioni di sfondo in qualsiasi determinato ceppo, particolarmente quelle secondarie o placca purificato in un ambiente di laboratorio. Questi dati, aumentano la nostra conoscenza della variazione di sequenza in grandi virus a DNA e dimostrano il potenziale di deep sequencing di cedere la comprensione della evoluzione del genoma del DNA e la variazione tra i diversi agenti patogeni isolati.

Variabilit&agrave; clinica di sequenza e isolati del laboratorio del virus herpes simplex 1 rivela nuove mutazioni.

&#x30D8;&#x30EB;&#x30DA;&#x30B9;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;1&#x578B;&#x3001;&#x5358;&#x7D14;&#x578B;&#xFF08;HSV-1&#xFF09;&#x672B;&#x68A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306B;&#x4FB5;&#x5165;&#x3057;&#x3001;&#x751F;&#x6DAF;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x308B;&#x6F5C;&#x4F0F;&#x611F;&#x67D3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x3053;&#x306B;&#x4FDD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3088;&#x304F;&#x9069;&#x5FDC;&#x3057;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x666E;&#x904D;&#x6027;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;HSV-1&#xFF08;&#x682A;17&#xFF09;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x3060;&#x3051;&#x306E;&#x81EA;&#x7136;&#x304C;&#x914D;&#x5217;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;DNA&#x306E;&#x30A4;&#x30EB;&#x30DF;&#x30CA;&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5BA4;&#x682A;&#xFF08;F&#xFF09;&#x3068;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5206;&#x96E2;&#x682A;&#x306E;&#x4F4E;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF08;H129&#xFF09;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x5F97;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x7B26;&#x53F7;&#x5316;&#x3068;&#x975E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;HSV-1&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5168;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7D71;&#x9593;&#x306E;&#x3070;&#x3089;&#x3064;&#x304D;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;HSV-1&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x5909;&#x52D5;&#x306E;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x682A;F&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x4EE5;&#x524D;&#x304B;&#x3089;&#x77E5;&#x200B;&#x200B;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x682A;&#x3092;17&#x306B;&#x5206;&#x6563;&#x3057;&#x3066;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x306F;H129&#x3092;&#x75DB;&#x3081;&#x3001;&#x5207;&#x308A;&#x5206;&#x3051;&#x3001;&#x539F;&#x56E0;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x9806;&#x884C;&#x6027;&#x306E;&#x5E83;&#x304C;&#x308A;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;H129&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x6BD2;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;ICP34.5&#xFF08;RL1&#xFF09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x304C;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5909;&#x5316;&#xFF08;S&#xFF09;&#x682A;H129&#x306E;&#x666E;&#x53CA;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x518D;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x4E88;&#x671F;&#x305B;&#x305A;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x6DF1;&#x3044;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5BA4;&#x306E;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3067;&#x7CBE;&#x88FD;&#x7279;&#x306B;&#x7D99;&#x4EE3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306F;&#x3001;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x682A;&#x3067;&#x80CC;&#x666F;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x88DC;&#x5B8C;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x682A;F&#x5206;&#x96E2;&#x306E;UL13&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3067;&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x578B;&#x306E;DNA&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3067;&#x914D;&#x5217;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x83CC;&#x682A;&#x9593;&#x306E;DNA&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x9032;&#x5316;&#x3068;&#x5909;&#x5316;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6DF1;&#x3044;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5358;&#x7D14;&#x30D8;&#x30EB;&#x30DA;&#x30B9;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;1&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5206;&#x96E2;&#x682A;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x5909;&#x52D5;&#x306F;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;

&#xD5E4; &#xB974; &#xD398; &#xC2A4;&#xC758; &#xB2E8;&#xC21C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; 1 (HSV-1)&#xB294; &#xB9D0; &#xCD08; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xB97C; &#xCE68;&#xBC94; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC798; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xD3C9;&#xC0DD; &#xC7A0;&#xC7AC; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC73C;&#xB85C;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD3B8; &#xC7AC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC790;&#xC5F0; &#xBD84;&#xB9AC; HSV-1 (&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; 17)&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Illumina &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; (F)&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC5BB;&#xC740; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; dna &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xBC0F; &#xB0AE;&#xC740; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC784;&#xC0C1; &#xBD84;&#xB9AC; (H129). &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBAA8;&#xB450;&#xC5D0; HSV-1&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; interstrain &#xBCC0;&#xD615; &#xC815;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; &#xCF54;&#xB529; &#xBC0F; noncoding &#xC601;&#xC5ED;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; HSV-1 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC758; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; F &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBC0F; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; 17, &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC634; &#xBD84;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xB9CE;&#xC740; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xCC28;&#xC774; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC784;&#xC0C1; &#xBD84;&#xB9AC;, H129 &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;, &#xACE0;&#xC720; &#xCC38;&#xAC00;&#xC790; &#xD655;&#xC0B0; &#xD615; &#xC778;&#xACFC; &#xBCC0;&#xC774; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C0;&#xC9C0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. H129 &#xC21C;&#xC11C; &#xCC28;&#xC774; &#xC815;&#xC758; &#xD558; &#xACE0; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; neurovirulence &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; ICP34.5 (RL1)&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xACFC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;. H129 &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;&#xC758; &#xD655;&#xC0B0; &#xACB0;&#xD568; &#xC815;&#xB9AC; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C;&#xB294; &#xC801;&#xC808;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xAC00; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xAC8C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD53C;&#xB85C; F UL13 &#xB2C8; frameshift &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBD84;&#xB9AC;, &#xC5BC;&#xB9C8;&#xB098; &#xAE4A;&#xC740; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC8FC;&#xC5B4;&#xC9C4;&#xB41C; &#xBCC0;&#xD615;, &#xD2B9;&#xD788; &#xADF8; passaged&#xC5D0; &#xBC30;&#xACBD; &#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC644;&#xC744; &#xBC1D;&#xD790; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xB610;&#xB294; &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C; &#xC815;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xC124;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xD070; DNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xC21C;&#xC11C; &#xBCC0;&#xD654;&#xC758; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC9C0;&#xC2DD;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; DNA &#xAC8C;&#xB188; &#xC9C4;&#xD654; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC911; &#xBCC0;&#xD615;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC5BB;&#xC744; &#xAE4A;&#xC740; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xC785;&#xC99D;.

&#xC784;&#xC0C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC744; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD558; &#xACE0; &#xD5E4; &#xB974; &#xD398; &#xC2A4;&#xC758; &#xB2E8;&#xC21C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; 1&#xC758; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xACA9;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;.

Virus del herpes simple 1 (VHS-1) es un pat&#xF3;geno bien adaptado humana que pueden invadir el sistema nervioso perif&#xE9;rico y persistir all&#xED; como una infecci&#xF3;n latente permanente. A pesar de su ubicuidad, s&#xF3;lo uno natural aislar de HSV-1 (cepa 17) ha sido secuenciado. Uso de Illumina secuenciaci&#xF3;n de alto rendimiento de ADN viral, hemos obtenido las secuencias del genoma de una cepa de laboratorio tanto (F) y una cl&#xED;nica de bajo pasaje aislado (H129). Estos datos demostraron el grado de variaci&#xF3;n interstrain a trav&#xE9;s de la totalidad del genoma del VHS-1 en ambas regiones codificantes y no codificantes. Hemos encontrado muchas diferencias en los amino&#xE1;cidos distribuidos en todo el proteoma de la secuencia de la cepa F nueva y la cepa conocida anteriormente 17, lo que demuestra el espectro de variabilidad entre los de tipo salvaje HSV-1 prote&#xED;nas. El aislado cl&#xED;nico, la cepa H129, muestra un fenotipo &#xFA;nico propagaci&#xF3;n anter&#xF3;grada para el cual las mutaciones causales eran completamente desconocidas. Hemos definido las diferencias en las secuencias en H129 y proponer una serie de genes potencialmente causales, incluyendo la prote&#xED;na neurovirulencia ICP34.5 (RL1). M&#xE1;s estudios ser&#xE1;n necesarios para demostrar que el cambio (s) es suficiente para recapitular el defecto de propagaci&#xF3;n de la cepa H129. Inesperadamente, estos datos tambi&#xE9;n revelaron una mutaci&#xF3;n en el marco de lectura quinasa UL13 en nuestro aislar la cepa F, demostrando c&#xF3;mo la secuenciaci&#xF3;n del genoma profunda puede revelar el complemento completo de las mutaciones de fondo en cualquier cepa dada, en particular los passaged o placa purificada en el laboratorio. Estos datos aumentan nuestro conocimiento de la variaci&#xF3;n de la secuencia de los virus grandes de ADN y demostrar el potencial de secuenciaci&#xF3;n profunda de arrojar luz sobre la evoluci&#xF3;n del genoma de ADN y la variaci&#xF3;n entre los diferentes agentes pat&#xF3;genos.

Variabilidad de la secuencia en aislados cl&#xED;nicos y de laboratorio del virus herpes simplex 1, revela nuevas mutaciones

&#x632F;&#x8361;&#x4E2D;&#x5F88;&#x5927;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E0E;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5173;&#x8054;&quot;&#x4EE3;&#x8C22;&#x5468;&#x671F;&#xFF0C;&quot;&#x901A;&#x5E38;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x4EC5;&#x5728; prestarved&#x3001; &#x8FDE;&#x7EED;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x9C7C;&#x7684; mRNA &#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6765;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x632F;&#x8361;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x7ED8;&#x5236;&#x5728;&#x6052;&#x5316;&#x5668;&#x5448;&#x6307;&#x6570;&#x7EA7;&#x589E;&#x957F;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x6B65;&#x6587;&#x5316;&#x4ECE;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE;&#x3002;&#x4ECE;&#x540C;&#x6B65;&#x6587;&#x5316;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6570;&#x636E;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x4E0D;&#x540C;&#x6B65;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x6210;&#x5BF9;&#x4ECE;&#x91CD;&#x5408;&#x5916;&#x89C2;&#x3002;&#x9C7C;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x589E;&#x957F;&#x7F13;&#x6162;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x9650;&#x5236;&#x6216;&#x78F7;&#x9650;&#x5236;&#x5355;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x6B65;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x663E;&#x793A;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x632F;&#x8361;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x9175;&#x6BCD;&#x4EE3;&#x8C22;&#x5468;&#x671F;&#x662F;&#x9175;&#x6BCD;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x5C5E;&#x6027;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x540C;&#x6B65;&#x6216;&#x5916;&#x90E8;&#x9650;&#x5236;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x78B3;&#x6E90;&#x3002;

&#x4EE3;&#x8C22;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x6216;&#x78F7;&#x9178;&#x4E0A;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x6B65;&#x7A33;&#x6001;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4ECE;&#x5355;&#x4E00;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5FAA;&#x73AF;&#x3002;

Oscillations in patterns of expression of a large fraction of yeast genes are associated with the "metabolic cycle," usually seen only in prestarved, continuous cultures of yeast. We used FISH of mRNA in individual cells to test the hypothesis that these oscillations happen in single cells drawn from unsynchronized cultures growing exponentially in chemostats. Gene-expression data from synchronized cultures were used to predict coincident appearance of mRNAs from pairs of genes in the unsynchronized cells. Quantitative analysis of the FISH results shows that individual unsynchronized cells growing slowly because of glucose limitation or phosphate limitation show the predicted oscillations. We conclude that the yeast metabolic cycle is an intrinsic property of yeast metabolism and does not depend on either synchronization or external limitation of growth by the carbon source.

Metabolic cycling in single yeast cells from unsynchronized steady-state populations limited on glucose or phosphate.

Oscillations dans les modes d&#39;expression d&#39;une grande partie des g&egrave;nes de la levure sont associ&eacute;es avec le &laquo; cycle m&eacute;tabolique, &raquo; g&eacute;n&eacute;ralement vu seulement dans les cultures prestarved, continues de levure. Nous avons utilis&eacute; des poissons de l&#39;ARNm dans des cellules individuelles pour v&eacute;rifier l&#39;hypoth&egrave;se que ces oscillations se produisent dans les cellules provenant de cultures non synchronis&eacute;s en croissance exponentielle en ch&eacute;mostats. Donn&eacute;es d&#39;expression g&eacute;nique de cultures synchronis&eacute;es furent utilis&eacute;es pour pr&eacute;dire l&#39;apparition co&iuml;ncide d&#39;ARNm de paires de g&egrave;nes dans les cellules non synchronis&eacute;s. Analyse quantitative des r&eacute;sultats poisson montre que les cellules individuelles non synchronis&eacute;s de plus en plus lentement &agrave; cause de la limitation de la glyc&eacute;mie ou limitation de phosphate montrent les oscillations pr&eacute;dites. Nous concluons que le cycle m&eacute;tabolique de la levure est une propri&eacute;t&eacute; intrins&egrave;que du m&eacute;tabolisme de la levure et ne d&eacute;pend pas de la synchronisation ou limitation externe de la croissance par la source de carbone.

M&eacute;tabolique cyclisme dans les cellules de levure unique provenant de populations de stationnaire non synchronis&eacute;es limit&eacute;es sur le glucose ou le phosphate.

Schwingungen im Muster des Ausdrucks der ein gro&szlig;er Teil der Hefe-Gene sind &quot;metabolische Zyklus,&quot; in der Regel nur in prestarved, kontinuierliche Kulturen der Hefe gesehen zugeordnet. Wir verwendet Fisch von mRNA in einzelne Zellen, um die Hypothese zu testen, dass diese Schwingungen in Einzelzellen, gezeichnet von nicht synchronisierten Kulturen exponentiell in Chemostats passieren. Genexpression Daten aus synchronisierten Kulturen wurden verwendet, um zusammenfallenden Darstellung von mRNAs von Paaren der Gene in den Zellen nicht synchronisierten vorherzusagen. Quantitative Analyse der Fisch Ergebnisse zeigt, dass nicht synchronisierte Einzelzellen w&auml;chst langsam wegen Glukose Beschr&auml;nkung oder Phosphat-Beschr&auml;nkung die vorhergesagten Schwingungen zeigen. Wir schlie&szlig;en, dass der Hefe metabolische Zyklus eine intrinsische Eigenschaft des Hefe-Stoffwechsels ist und Synchronisierung oder externe Beschr&auml;nkung des Wachstums durch die Kohlenstoffquelle nicht abh&auml;ngig.

Metabolische Radfahren in einzelne Hefezellen nicht synchronisierten station&auml;ren Bev&ouml;lkerungen begrenzt auf Glukose oder Phosphat.

Oscillazioni nel pattern di espressione di una grande frazione dei geni di lievito sono associate con il &quot;ciclo metabolico,&quot; di solito visto solo nelle culture prestarved, continue di lievito. Abbiamo usato il pesce di mRNA nelle singole celle per testare l&#39;ipotesi che queste oscillazioni accadono in singole cellule provenienti da culture non sincronizzate cresce esponenzialmente in chemostati. Dati di espressione genica da colture sincronizzate sono stati utilizzati per predire coincida aspetto dei mRNAs da coppie di geni nelle cellule non sincronizzate. Analisi quantitativa dei risultati pesce dimostra che le singole celle non sincronizzate cresce lentamente a causa della limitazione di glucosio o la limitazione di fosfato Visualizza le oscillazioni predetta. Concludiamo che il ciclo metabolico di lievito &egrave; una propriet&agrave; intrinseca del metabolismo del lievito e non dipende dalla sincronizzazione o limitazione esterna della crescita con la fonte di carbonio.

Metabolica in bicicletta in cellule di lievito singolo non sincronizzate steady-state popolazioni limitate su glucosio o fosfato.

&#x9175;&#x6BCD;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x632F;&#x52D5;&#x300C;&#x306E;&#x307F; prestarved&#x3001;&#x9023;&#x7D9A;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x306F;&#x901A;&#x5E38;&#x898B;&quot;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x300D;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x632F;&#x52D5;&#x306F; chemostats &#x3067;&#x6307;&#x6570;&#x95A2;&#x6570;&#x7684;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x304C;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x304B;&#x3089;&#x63CF;&#x304B;&#x308C;&#x305F;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8D77;&#x3053;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E; mRNA &#x306E;&#x9B5A;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x540C;&#x671F;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6587;&#x5316;&#x304B;&#x3089;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7D44;&#x304B;&#x3089;&#x306E; Mrna &#x306E;&#x4E00;&#x81F4;&#x306E;&#x5916;&#x89B3;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9B5A;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5236;&#x9650;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3086;&#x3063;&#x304F;&#x308A;&#x3068;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x3066;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x30BB;&#x30EB;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306E;&#x632F;&#x52D5;&#x3067;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x9175;&#x6BCD;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307F;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3057;&#x3001;&#x540C;&#x671F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5916;&#x90E8;&#x5236;&#x9650;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x70AD;&#x7D20;&#x6E90;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3092;&#x7DE0;&#x7D50;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4EE3;&#x8B1D;&#x5358;&#x4E00;&#x9175;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x9650;&#x5B9A;&#x672A;&#x540C;&#x671F;&#x306E;&#x5B9A;&#x5E38;&#x96C6;&#x56E3;&#x304B;&#x3089;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD6A8; &#xBAA8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD070; &#xBD84;&#xC218;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xD328;&#xD134;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C4;&#xB3D9; &quot;&#xB300;&#xC0AC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;,&quot; &#xBCF4;&#xD1B5; &#xD6A8; prestarved, &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xBCFC; &#xC218;&#xC640; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC9C4;&#xB3D9; chemostats &#xAE30; &#xD558; &#xAE09;&#xC218;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xB3D9;&#xAE30;&#xD654; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB824;&#xC9C4; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC140;&#xC5D0; Mrna&#xC758; &#xC0DD;&#xC120;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xAE30;&#xD654; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC30D;&#xC5D0;&#xC11C; Mrnas&#xC758; &#xC77C;&#xCE58; &#xBAA8;&#xC591;&#xC744; &#xC608;&#xCE21; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xAE30;&#xD654; &#xB41C; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xC815;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xB3D9;&#xAE30;&#xD654; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC81C;&#xD55C; &#xB610;&#xB294; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xC81C;&#xD55C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xCC9C;&#xCC9C;&#xD788; &#xC131;&#xC7A5; &#xC608;&#xCE21;&#xB41C; &#xC9C4;&#xB3D9; &#xD45C;&#xC2DC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACB0;&#xB860; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC740; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xB300;&#xC0AC;&#xC758; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xC18D;&#xC131; &#xB3D9;&#xAE30;&#xD654; &#xB610;&#xB294; &#xC678;&#xBD80; &#xD0C4;&#xC18C; &#xC18C;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC131;&#xC7A5; &#xD55C;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB300;&#xC0AC; &#xD55C; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB610;&#xB294; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xC81C;&#xD55C; &#xB3D9;&#xAE30;&#xD654; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC548;&#xC815; &#xB41C; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xB9C1;.

Las variaciones en los patrones de expresi&oacute;n de una gran parte de los genes de la levadura se asocian con el &quot;ciclo metab&oacute;lico,&quot; generalmente se observa s&oacute;lo en las culturas prestarved, continuas de levadura. Utilizamos peces de ARNm en c&eacute;lulas individuales para probar la hip&oacute;tesis de que estas oscilaciones ocurren en las c&eacute;lulas extra&iacute;das de culturas sincronizadas creciendo exponencialmente en chemostats. Datos de expresi&oacute;n g&eacute;nica de culturas sincronizadas fueron usados para predecir la aparici&oacute;n coincidente de mRNAs de pares de genes en las c&eacute;lulas no sincronizadas. An&aacute;lisis cuantitativo de los resultados de pescado demuestra que las c&eacute;lulas individuales sincronizadas creciendo lentamente debido a la limitaci&oacute;n de la glucosa o limitaci&oacute;n de fosfato Mostrar las oscilaciones previstas. Concluimos que el ciclo metab&oacute;lico de la levadura es una propiedad intr&iacute;nseca del metabolismo de la levadura y no depende de sincronizaci&oacute;n o limitaci&oacute;n externa de crecimiento por la fuente de carbono.

Metab&oacute;licos en las c&eacute;lulas de levadura sola en bicicleta de poblaciones de estado estacionario no sincronizadas limitadas en glucosa o fosfato.

&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; (HSV) pUL34 &#x8F66;&#x884C; nucleocapsids &#x4ECE;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x7684;&#x51FA;&#x53E3;&#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x7A81;&#x53D8; pUL34 (Y68A) &#x4E3B;&#x8981;&#x4EA7;&#x751F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x548C;&#x53D7;&#x635F;&#x6838;&#x51FA;&#x53E3;&#x4F46;&#x8FD8;&#x6DF1;&#x523B;&#x5730;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;-&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x548C;&#x8D29;&#x8FD0;&#x7684; gE&#x3002;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9897;&#x7C92;&#x91CA;&#x653E;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x4ECB;&#x8D28;&#x4E0D;&#x53D7; Y68A &#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E13;&#x95E8;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;-&#x7EC6;&#x80DE;&#x8513;&#x5EF6;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x503C;&#x6307;&#x793A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5B64;&#x7ACB; extragenic &#x6291;&#x5236;&#x5242; Y68A &#x6591;&#x5757;&#x5F62;&#x6210;&#x7F3A;&#x9677;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x548C;&#x6620;&#x5C04;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x7167;&#x6392;&#x80F6;&#x7247;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x548C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7B5B;&#x9009;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5236;&#x6B62;&#x4E0E;&#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4; US9 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8513;&#x5EF6;&#x7684;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;&#x5355;&#x72EC;&#x7684; US9 &#x7A81;&#x53D8;&#x5E76;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x5236;&#x6B62;&#x8513;&#x5EF6;&#x7684; Y68A &#x578B;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x4E3A;&#x591A;&#x4E2A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x56E0;&#x7D20;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; 1 pUL34 &#x4E2D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x8513;&#x5EF6;&#x9664;&#x4E86;&#x5728;&#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x5177;&#x6709;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Herpes simplex virus (HSV) pUL34 plays a critical role in virus replication by mediating egress of nucleocapsids from the infected cell nucleus. We have identified a mutation in pUL34 (Y68A) that produces a major defect in virus replication and impaired nuclear egress but also profoundly inhibits cell-to-cell spread and trafficking of gE. Virion release to the extracellular medium is not affected by the Y68A mutation, indicating that the mutation specifically inhibits cell-to-cell spread. We isolated extragenic suppressors of the Y68A plaque formation defect and mapped them by a combination of high-throughput Illumina sequencing and PCR-based screening. We found that suppression is highly correlated with a nonsense mutation in the US9 gene, which plays a critical role in cell-to-cell spread of HSV-1 in neurons. The US9 mutation alone is not sufficient to suppress the Y68A spread phenotype, indicating a likely role for multiple viral factors.

Herpes simplex virus 1 pUL34 plays a critical role in cell-to-cell spread of virus in addition to its role in virus replication.

Herpes simplex virus (HSV) pUL34 joue un r&#xF4;le essentiel dans la r&#xE9;plication du virus par la m&#xE9;diation de sortie des nucl&#xE9;ocapsides du noyau de la cellule infect&#xE9;e. Nous avons identifi&#xE9; une mutation dans pUL34 (Y68A) qui produit un d&#xE9;faut majeur dans la r&#xE9;plication du virus et une alt&#xE9;ration de l&#x26;#39;&#xE9;vacuation nucl&#xE9;aire, mais aussi inhibe profond&#xE9;ment la cellule &#xE0; cellule propagation et le trafic de gE. Lib&#xE9;ration virion dans le milieu extracellulaire n&#x26;#39;est pas affect&#xE9;e par la mutation Y68A, indiquant que la mutation inhibe sp&#xE9;cifiquement la cellule &#xE0; cellule propagation. On isole suppresseurs extrag&#xE9;niques du d&#xE9;faut Y68A formation de la plaque et les mapp&#xE9; par une combinaison de haut d&#xE9;bit Illumina s&#xE9;quen&#xE7;age et reposant sur la PCR pr&#xE9;alable. Nous avons constat&#xE9; que la suppression est fortement corr&#xE9;l&#xE9;e avec une mutation non-sens dans le g&#xE8;ne US9, qui joue un r&#xF4;le essentiel dans la cellule &#xE0; cellule propagation du virus HSV-1 dans les neurones. La mutation US9 seule n&#x26;#39;est pas suffisante pour supprimer le ph&#xE9;notype propagation Y68A, indiquant un r&#xF4;le probable de plusieurs facteurs viraux.

Herpes Simplex Virus 1 PUL34 joue un r&#xF4;le essentiel dans la cellule &#xE0; cellule propagation du virus dans plus de son r&#xF4;le dans la r&#xE9;plication du virus

Herpes Simplex Virus (HSV) pUL34 spielt eine wichtige Rolle bei der Virus-Replikation durch Vermittlung der Ausstieg von Nucleocapsids vom infizierten Zellenkern. Wir haben ermittelt, dass eine Mutation in pUL34 (Y68A), produziert eine gro&szlig;e in der Virus-Replikation M&auml;ngel und nuklearen Ausstieg beeintr&auml;chtigt aber auch zutiefst hemmt Ausbreitung von Zelle zu Zelle und den Handel mit gE. Virion Freigabe auf das extrazellul&auml;re Medium wird nicht durch die Y68A-Mutation, die darauf hinweist, dass die Mutation speziell hemmt die Ausbreitung von Zelle zu Zelle beeinflusst. Wir extragenic D&auml;mpfer der Y68A Plakette Bildung Mangels isoliert und sie durch eine Kombination von hohem Durchsatz Illumina Sequenzierung und PCR-basierten Screening zugeordnet. Wir fanden, dass Unterdr&uuml;ckung hochgradig mit Unsinn Mutation im Gen US9 korreliert sind, das eine entscheidende Rolle in der Zell-Zell-Verbreitung von HSV-1 in Neuronen spielt. Die US9-Mutation allein reicht nicht, die Y68A verbreiten-Ph&auml;notyp, angibt, eine wahrscheinlich Rolle f&uuml;r mehrere virale Faktoren zu unterdr&uuml;cken.

Herpes-Simplex-Virus 1 pUL34 spielt eine wichtige Rolle in der Zell-Zell-Ausbreitung des Virus zus&auml;tzlich zu ihrer Rolle in der Virus-Replikation.

Herpes simplex virus (HSV) pUL34 svolge un ruolo critico nella replicazione del virus di mediazione egress di nucleocapsidi dal nucleo della cellula infetta. Abbiamo identificato una mutazione nel pUL34 (Y68A) che produce un maggior difetto nella replicazione del virus e alterata egress nucleare ma anche profondamente inibisce la diffusione cellula-cellula e il traffico di gE. Rilascio del virione al medium extracellulare non subisce la mutazione Y68A, che indica che la mutazione inibisce specificamente alla cella diffusione. Abbiamo isolato extragenic soppressori del difetto di formazione di placca Y68A e li mappato da una combinazione di sequenziamento Illumina high-throughput e screening basati sulla PCR. Abbiamo trovato che la soppressione &egrave; altamente correlata con una mutazione nonsenso nel gene US9, che svolge un ruolo critico nella cella a diffusione di HSV-1 in neuroni. La mutazione US9 da sola non &egrave; sufficiente per sopprimere il fenotipo Y68A diffusa, che indica un probabile ruolo per molteplici fattori virali.

Herpes simplex virus 1 pUL34 svolge un ruolo critico nella cella di diffusione del virus oltre al suo ruolo nella replicazione del virus.

&#x5358;&#x7D14;&#x30D8;&#x30EB;&#x30DA;&#x30B9;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;HSV&#xFF09;pUL34&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x306E;&#x51FA;&#x53E3;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x969C;&#x5BB3;&#x306E;&#x6838;&#x51FA;&#x529B;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x6DF1;&#x304F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x62E1;&#x6563;&#x304A;&#x3088;&#x3073;gE&#x306E;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;pUL34&#xFF08;Y68A&#xFF09;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x5A92;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x62E1;&#x6563;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;Y68A&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;Y68A&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x5F62;&#x6210;&#x6B20;&#x640D;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5916;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x3001;&#x9AD8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x30A4;&#x30EB;&#x30DF;&#x30CA;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;PCR&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x6291;&#x5236;&#x304C;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;HSV-1&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x62E1;&#x6563;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;US9&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x30CA;&#x30F3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x5909;&#x7570;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5358;&#x72EC;&#x3067;US9&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;Y68A&#x306E;&#x5E83;&#x304C;&#x308A;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x5358;&#x7D14;&#x30D8;&#x30EB;&#x30DA;&#x30B9;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;1 PUL34&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8907;&#x88FD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x62E1;&#x6563;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5358;&#x7D14;

&#xB2E8;&#xC21C; &#xD3EC;&#xC9C4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (HSV) pUL34 nucleocapsids &#xAC10;&#xC5FC;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD575;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD0C8;&#xCD9C;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; Pul34&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD655;&#xC778; (Y68A) &#xC8FC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558; &#xACE0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558; &#xACE0; &#xD575; &#xC1A1;&#xC2E0; &#xC7A5;&#xC560; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xC2EC;&#xD788; &#xC140;&#xC744; &#xD655;&#xC0B0; &#xD558; &#xACE0; Ge&#xC758; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB294;. &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB9E4;&#xCCB4; virion &#xCD9C;&#xC2DC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD2B9;&#xD788; &#xC140; &#xD655;&#xC0B0; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; Y68A &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Y68A &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C; &#xD615;&#xC131; &#xACB0;&#xD568;&#xC758; extragenic &#xC9C4;&#xC555;&#xC744; &#xC808;&#xC5F0; &#xD558; &#xACE0; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; Illumina&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xBC0F; PCR &#xAE30;&#xBC18; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB9E4;&#xD551;&#xB41C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5B5;&#xC81C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; HSV-1 &#xC140; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4; US9 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB10C;&#xC13C;&#xC2A4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xD63C;&#xC790; US9 &#xBCC0;&#xC774; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; Y68A &#xD655;&#xC0B0; &#xD615; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xB824;&#xBA74; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD5E4; &#xB974; &#xD398; &#xC2A4;&#xC758; &#xB2E8;&#xC21C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; 1 pUL34 &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xC140; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;.

Virus del herpes simple (VHS) pUL34 desempe&#xF1;a un papel fundamental en la replicaci&#xF3;n del virus por la mediaci&#xF3;n de la salida de nucleoc&#xE1;pside del n&#xFA;cleo de la c&#xE9;lula infectada. Hemos identificado una mutaci&#xF3;n en pUL34 (Y68A) que produce un defecto importante en la replicaci&#xF3;n del virus y la salida nuclear alterada, pero tambi&#xE9;n profundamente inhibe la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de difusi&#xF3;n y el tr&#xE1;fico de GE. Viri&#xF3;n liberaci&#xF3;n al medio extracelular no se ve afectada por la mutaci&#xF3;n Y68A, lo que indica que la mutaci&#xF3;n inhibe espec&#xED;ficamente la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula propagaci&#xF3;n. Se aislaron supresores extrag&#xE9;nicas del defecto formaci&#xF3;n Y68A placa y mapeado ellos por una combinaci&#xF3;n de alto rendimiento Illumina secuenciaci&#xF3;n y detecci&#xF3;n basado en la PCR. Hemos encontrado que la supresi&#xF3;n est&#xE1; altamente correlacionada con una mutaci&#xF3;n sin sentido en el gen de US9, que desempe&#xF1;a un papel fundamental en la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de difusi&#xF3;n de HSV-1 en las neuronas. La mutaci&#xF3;n US9 por s&#xED; sola no es suficiente para suprimir el fenotipo propagaci&#xF3;n Y68A, indicando un papel probable para m&#xFA;ltiples factores virales.

Herpes Simplex Virus 1 PUL34 desempe&#xF1;a un papel fundamental en la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de diseminaci&#xF3;n del virus, adem&#xE1;s de su papel en la replicaci&#xF3;n del virus

Alphaherpesviruses &#x662F;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5305;&#x62EC;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; (HSV-1&#xFF09; 1 &#x548C;&#x7B2C; 2 &#x6B3E;&#x548C;&#x6C34;&#x75D8;&#x5E26;&#x72B6;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; &#xECFD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E0A;&#x76AE;&#x75C5;&#x53D8;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x611F;&#x67D3;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4F1A;&#x9020;&#x6210;&#x7EC8;&#x8EAB;&#x7684;&#x6EDE;&#x540E;&#x65F6;&#x95F4;&#x3001; &#x91CD;&#x65B0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4F20;&#x64AD;&#x3002;&#x6709;&#x5173;&#x517D;&#x533B;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3001; &#x732A;&#x4F2A;&#x72C2;&#x72AC;&#x75C5; &#xFF08;&#x4E0A;&#x4E00;&#x9875;&#xFF09;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x75BE;&#x75C5;&#x5BFC;&#x81F4;&#x91CD;&#x5927;&#x7ECF;&#x6D4E;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x7272;&#x755C;&#x3002;&#x75AB;&#x82D7;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684; VZV &#x548C;&#x4F2A;&#x72C2;&#x72AC;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x75AB;&#x82D7;&#x7684;&#x6709;&#x76CA;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7684;&#x4F2A;&#x72C2;&#x72AC;&#x75C5;&#x6BD2;&#x75AB;&#x82D7;&#x682A;&#x5DF4;&#x5C14;&#x5854;&#x548C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6BD2;&#x4F2A;&#x72C2;&#x72AC;&#x75C5;&#x6BD2;&#x682A;&#xFF0C;&#x5361;&#x666E;&#x5170;&#x548C;&#x8D1D;&#x514B;&#x5C14;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#x5B9A;&#x7684;&#x9AD8;&#x901A;&#x91CF;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x548C;&#x96C6;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x8870;&#x51CF;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; alphaherpesvirus &#x75AB;&#x82D7;&#x682A;&#x672C;&#x65B0;&#x7684;&#x89C1;&#x89E3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5F88;&#x591A;&#x4EE5;&#x524D;&#x672A;&#x77E5;&#x7F16;&#x7801;&#x5DEE;&#x522B;&#x4E0A;&#x4E00;&#x9875;&#x5DF4;&#x5C14;&#x5854;&#x548C;&#x5F3A;&#x6BD2;&#x682A;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x66F4;&#x6539;&#x4E4B;&#x95F4; gH &#x548C; gB &#x548C;&#x56DB;&#x5341;&#x591A;&#x5176;&#x4ED6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x4F2A;&#x72C2;&#x72AC;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x5E8F;&#x5217; inter-strain &#x53D8;&#x5316;&#x662F;&#x66F4;&#x63A5;&#x8FD1;&#x4E8E;&#x4EE5;&#x524D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x6BD4;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684; VZV &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x51E0;&#x4E4E; 20%&#x7684;&#x4F2A;&#x72C2;&#x72AC;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5305;&#x542B;&#x4E32;&#x8054;&#x7684;&#x77ED;&#x5E8F;&#x5217;&#x91CD;&#x590D;&#x5E8F;&#x5217; &#xFF08;SSRs&#xFF09;&#xFF0C;&#x5176;&#x957F;&#x5EA6;&#x53D8;&#x5316;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x4E0E; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x7AD9;&#x70B9;&#x6548;&#x7387;&#x3001; &#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x6838;&#x9178;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x4E00;&#x7C7B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5BB6;&#x65CF;&#xFF0C;&#x6574;&#x4E2A;&#x67E5;&#x627E; SSRs &#x548C;&#x63D0;&#x4F9B; SSRs &#x4E2D;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5185;, &#x548C;&#x83CC;&#x682A;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x5168;&#x7403;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x5230; SSR &#x957F;&#x5EA6;&#x5DEE;&#x5F02;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x5206;&#x79BB;&#x682A;&#x4F2A;&#x72C2;&#x72AC;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x548C;&#x5355;&#x7EAF;&#x75B1;&#x75B9;&#x75C5;&#x6BD2;-1&#xFF0C;&#x53EF;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x53D8;&#x5F02;&#x682A;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x65B0;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x5C11;&#x91CF;&#x7684;&#x591A;&#x6001;&#x57FA;&#x5730;&#x5185;&#x6BCF;&#x4E00;&#x6591;&#x5757;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684;&#x4F2A;&#x72C2;&#x72AC;&#x75C5;&#x6BD2;&#x682A;&#xFF0C;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x662F;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x591A;&#x6001;&#x6027;&#x5F71;&#x54CD;&#x901A;&#x884C;&#x548C;&#x83CC;&#x6591;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x5C06;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5230;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&#x751A;&#x81F3;&#x6591;&#x5757;&#x51C0;&#x5316;&#x80A1;&#x5E02;&#x7A33;&#x5B9A; DNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x5C55;&#x89C8;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x975E;&#x5747;&#x8D28;&#x6027;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53EF;&#x80FD;&#x79CD;&#x5B50;&#x672A;&#x6765;&#x5E94;&#x53D8;&#x6F14;&#x5316;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

Inter-strain &#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x7684;&#x6076;&#x6BD2;&#x7684;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x548C; alphaherpesviruses &#x75AB;&#x82D7;&#x682A;&#x3002;

Alphaherpesviruses are widespread in the human population, and include herpes simplex virus 1 (HSV-1) and 2, and varicella zoster virus (VZV). These viral pathogens cause epithelial lesions, and then infect the nervous system to cause lifelong latency, reactivation, and spread. A related veterinary herpesvirus, pseudorabies (PRV), causes similar disease in livestock that result in significant economic losses. Vaccines developed for VZV and PRV serve as useful models for the development of an HSV-1 vaccine. We present full genome sequence comparisons of the PRV vaccine strain Bartha, and two virulent PRV isolates, Kaplan and Becker. These genome sequences were determined by high-throughput sequencing and assembly, and present new insights into the attenuation of a mammalian alphaherpesvirus vaccine strain. We find many previously unknown coding differences between PRV Bartha and the virulent strains, including changes to the fusion proteins gH and gB, and over forty other viral proteins. Inter-strain variation in PRV protein sequences is much closer to levels previously observed for HSV-1 than for the highly stable VZV proteome. Almost 20% of the PRV genome contains tandem short sequence repeats (SSRs), a class of nucleic acids motifs whose length-variation has been associated with changes in DNA binding site efficiency, transcriptional regulation, and protein interactions. We find SSRs throughout the herpesvirus family, and provide the first global characterization of SSRs in viruses, both within and between strains. We find SSR length variation between different isolates of PRV and HSV-1, which may provide a new mechanism for phenotypic variation between strains. Finally, we detected a small number of polymorphic bases within each plaque-purified PRV strain, and we characterize the effect of passage and plaque-purification on these polymorphisms. These data add to growing evidence that even plaque-purified stocks of stable DNA viruses exhibit limited sequence heterogeneity, which likely seeds future strain evolution.

A wide extent of inter-strain diversity in virulent and vaccine strains of alphaherpesviruses.

Alphaherp&#xE8;svirus sont tr&#xE8;s r&#xE9;pandues dans la population humaine, et incluent le virus de l&#x26;#39;herp&#xE8;s simplex 1 (HSV-1) et 2, et le virus varicelle zona (VZV). Ces agents pathog&#xE8;nes viraux causer des l&#xE9;sions &#xE9;pith&#xE9;liales, puis infecter le syst&#xE8;me nerveux de provoquer la latence tout au long, la r&#xE9;activation, et la propagation. Un virus de l&#x26;#39;herp&#xE8;s li&#xE9;es v&#xE9;t&#xE9;rinaire, pseudorage (PRV), provoque une maladie similaire &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;levage qui se traduisent par des pertes &#xE9;conomiques importantes. Les vaccins d&#xE9;velopp&#xE9;s pour le VZV et PRV servir de mod&#xE8;les utiles pour l&#x26;#39;&#xE9;laboration d&#x26;#39;un vaccin contre le HSV-1. Nous pr&#xE9;sentons &#xE0; part enti&#xE8;re des comparaisons de s&#xE9;quences du g&#xE9;nome de la souche vaccinale PRV Bartha, et deux isolats virulents PRV, Kaplan et Becker. Ces s&#xE9;quences g&#xE9;nomiques ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9;es par s&#xE9;quen&#xE7;age &#xE0; haut d&#xE9;bit et d&#x26;#39;assemblage, et de pr&#xE9;senter de nouvelles connaissances sur l&#x26;#39;att&#xE9;nuation d&#x26;#39;une souche vaccinale alphaherp&#xE8;svirus mammif&#xE8;res. Nous trouvons de nombreux jusque-l&#xE0; inconnues des diff&#xE9;rences de codage entre PRV Bartha et les souches virulentes, y compris les modifications apport&#xE9;es &#xE0; la gH prot&#xE9;ines de fusion et GB, et plus de quarante autres prot&#xE9;ines virales. Inter-souche variation de s&#xE9;quences de prot&#xE9;ines PRV est beaucoup plus proche des niveaux observ&#xE9;s auparavant pour le HSV-1 que pour le tr&#xE8;s stable prot&#xE9;ome VZV. Pr&#xE8;s de 20% du g&#xE9;nome de PRV contient des r&#xE9;p&#xE9;titions en tandem de courtes s&#xE9;quences (SSRS), une classe de motifs d&#x26;#39;acides nucl&#xE9;iques dont la longueur de variation a &#xE9;t&#xE9; associ&#xE9;e &#xE0; des changements dans l&#x26;#39;efficacit&#xE9; du site de liaison d&#x26;#39;ADN, la r&#xE9;gulation transcriptionnelle et les interactions entre prot&#xE9;ines. Nous trouvons tout au long de SSR la famille des herp&#xE8;svirus, et de fournir la premi&#xE8;re caract&#xE9;risation globale de SSR dans les virus, tant &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur et entre les souches. Nous trouvons variation de longueur SSR entre les diff&#xE9;rents isolats de PRV et le HSV-1, qui peuvent fournir un nouveau m&#xE9;canisme de variation ph&#xE9;notypique entre souches. Enfin, on a d&#xE9;tect&#xE9; un petit nombre de bases polymorphes &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur de chaque souche purifi&#xE9;e de plaque PRV, et on caract&#xE9;rise l&#x26;#39;effet de passage et la plaque-purification sur ces polymorphismes. Ces donn&#xE9;es s&#x26;#39;ajoutent aux preuves de plus en plus que m&#xEA;me la plaque-purifi&#xE9; des stocks de virus &#xE0; ADN stables pr&#xE9;sentent h&#xE9;t&#xE9;rog&#xE9;n&#xE9;it&#xE9; de s&#xE9;quence limit&#xE9;e, dont l&#x26;#39;&#xE9;volution probable des graines souche avenir.

Dans une large mesure de l&#x26;#39;Inter-souche diversit&#xE9; dans les souches virulentes et les vaccins des alphaherp&#xE8;svirus

Alphaherpesviruses sind in der menschlichen Bev&ouml;lkerung weit verbreitet und sind Herpes-Simplex-Virus 1 (HSV-1) und 2 und Varicella-Zoster-Virus (VZV). Diese virale Erreger epithelialen L&auml;sionen und dann infizieren das Nervensystem um lebenslange Latenz, Reaktivierung und Verbreitung zu verursachen. Eine verwandte tier&auml;rztliche Herpesvirus, Pseudorabies (PRV), verursacht &auml;hnliche Krankheit im Vieh, die zu erheblichen wirtschaftlichen Verlusten f&uuml;hren. Impfstoffe f&uuml;r VZV und PRV als n&uuml;tzliche Modelle f&uuml;r die Entwicklung einer HSV-1-Impfung dienen entwickelt. Wir pr&auml;sentieren vollst&auml;ndige Genom Sequenz Vergleiche der PRV Vakzinstammes Bartha und zwei virulenten PRV-Isolaten, Kaplan und Becker. Diese Genomsequenzen wurden von Hochdurchsatz-Sequenzierung und Assembly und vorliegende neue Einblicke in die D&auml;mpfung von S&auml;ugetier-Alphaherpesvirus Impfstoff Belastung bestimmt. Wir finden viele bisher unbekannte Kodierung Unterschiede zwischen PRV-Bartha und die virulenten St&auml;mmen, einschlie&szlig;lich &Auml;nderungen an die Fusionsproteine gH und gB und &uuml;ber 40 andere virale Proteine. Inter-Strain Schwankungen der PRV Proteinsequenzen ist viel n&auml;her an Ebenen, die zuvor f&uuml;r HSV-1 als das hochstabile VZV Proteome beobachtet. Fast 20 % des Genoms PRV enth&auml;lt Tandem kurze Sequenz Wiederholungen (SSRs), einer Klasse von Nukleins&auml;uren-Motiven, deren L&auml;nge-Variation Ver&auml;nderungen in DNA Bindung Website Effizienz, Transkriptionsregulation und Proteininteraktionen zugeordnet wurde. Wir SSRs w&auml;hrend der Herpesvirus-Familie zu finden, und die erste globale Charakterisierung der SSRs Viren, sowohl innerhalb als auch zwischen den St&auml;mmen. Wir finden die SSR L&auml;nge Variation zwischen verschiedenen Isolaten des PRV und HSV-1, die einen neuen Mechanismus f&uuml;r die ph&auml;notypische Variation zwischen St&auml;mmen vorsehen. Schlie&szlig;lich erkannten wir eine kleine Anzahl von polymorphen Basen innerhalb jeder Tafel-gereinigt PRV-Stamm, und wir charakterisieren die Wirkung der Passage und Plakette-Reinigung auf diese Polymorphismen. Diese Daten hinzuf&uuml;gen zu beweisen, dass sogar Plakette gereinigt Best&auml;nde stabil DNA-Viren begrenzte Folge Heterogenit&auml;t, zeigen die wahrscheinlich zuk&uuml;nftige Belastung Entwicklung Samen wachsen.

Einem breiten Umfang der inter-strain Vielfalt in virulenten Impfstoff Strapazen des Alphaherpesviruses.

Alphaherpesviruses sono diffusi nella popolazione umana e comprendono l&#39;herpes simplex virus 1 (HSV-1) e 2 e il virus varicella-zoster (VZV). Questi agenti patogeni virali provocano lesioni epiteliali e quindi infettano il sistema nervoso per causare la diffusione, la riattivazione e la latenza permanente. Un herpesvirus veterinarie correlate, Pseudorabbia (PRV), causa malattia simile nel bestiame che si traducono in notevoli perdite economiche. Vaccini sviluppati per VZV e PRV servono come modelli utili per lo sviluppo di un vaccino contro HSV-1. Vi presentiamo il genoma completo i confronti di sequenza del ceppo vaccino PRV Bartha e due isolati virulenti PRV, Kaplan e Becker. Queste sequenze di genoma sono state determinate da high-throughput sequencing e assemblaggio presenti nuove intuizioni l&#39;attenuazione di un ceppo del vaccino alphaherpesvirus dei mammiferi. Troviamo molte differenze codificante sconosciute tra PRV Bartha e ceppi virulenti, incluse le modifiche alle proteine di fusione gH e gB e pi&ugrave; di quaranta altre proteine virali. Inter-Strain variazione in PRV sequenze della proteina &egrave; molto pi&ugrave; vicino ai livelli precedentemente osservati per HSV-1 che per il proteoma VZV altamente stabile. Quasi il 20% del genoma PRV contiene tandem breve sequenza ripete (SSRs), una classe di acidi nucleici motivi cui variazione di lunghezza &egrave; stata associata con i cambiamenti in DNA binding sito efficienza, regolazione trascrizionale e le interazioni della proteina. Troviamo SSRs per tutta la famiglia herpesvirus e fornire la prima caratterizzazione globale di SSRs in virus, sia all&#39;interno sia tra ceppi. Troviamo la variazione di lunghezza SSR tra diversi isolati di PRV e HSV-1, che pu&ograve; fornire un nuovo meccanismo per variazione fenotipica tra ceppi. Infine, abbiamo rilevato un piccolo numero di polimorfici basi all&#39;interno di ogni ceppo PRV placca purificata e ci caratterizzano l&#39;effetto del passaggio e targa-purificazione su questi polimorfismi. Questi dati aggiungere alla crescente evidenza che anche purificato placca stock di virus a DNA stabile esibiscono eterogeneit&agrave; sequenza limitata, quale probabile evoluzione futura ceppo i semi.

Una misura ampia diversit&agrave; inter-strain in virulento e ceppi di vaccino di alphaherpesviruses.

Alphaherpesviruses&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x306B;&#x5E83;&#x7BC4;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x5358;&#x7D14;&#x30D8;&#x30EB;&#x30DA;&#x30B9;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;1&#xFF08;HSV-1&#xFF09;&#x304A;&#x3088;&#x3073;2&#x3001;&#x6C34;&#x75D8;&#x5E2F;&#x72B6;&#x75B1;&#x75B9;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;VZV&#xFF09;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x76AE;&#x6027;&#x75C5;&#x5909;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x751F;&#x6DAF;&#x5F85;&#x3061;&#x6642;&#x9593;&#x3001;&#x518D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;&#x53CA;&#x3073;&#x307E;&#x3093;&#x5EF6;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x7363;&#x533B;&#x30D8;&#x30EB;&#x30DA;&#x30B9;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3001;&#x4EEE;&#x6027;&#x72C2;&#x72AC;&#x75C5;&#xFF08;PRV&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7D4C;&#x6E08;&#x7684;&#x640D;&#x5931;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x5BB6;&#x755C;&#x3067;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3002; VZV&#x3068;PRV&#x7528;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;HSV-1&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;PRV&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x682A;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B5;&#x3001;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x5F37;&#x6BD2;PRV&#x5206;&#x96E2;&#x3001;&#x30AB;&#x30D7;&#x30E9;&#x30F3;&#x3068;&#x30D9;&#x30C3;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x5168;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;alphaherpesvirus&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x682A;&#x306E;&#x6E1B;&#x8870;&#x3078;&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x529B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;GH&#x3068;GB&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;40&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4ED6;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3078;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x542B;&#x3080;PRV&#x30D0;&#x30FC;&#x30B5;&#x3068;&#x5F37;&#x6BD2;&#x682A;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x3001;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x3002; PRV&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;VZV&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x3088;&#x308A;&#x3082;HSV-1&#x306B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x8FD1;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002; PRV&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x307B;&#x307C;20&#xFF05;&#x306F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x77ED;&#x3044;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#xFF08;SSRS&#xFF09;&#x3001;&#x9577;&#x200B;&#x200B;&#x3055;&#x5909;&#x5316;&#x306E;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x52B9;&#x7387;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6838;&#x9178;&#x306E;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30D8;&#x30EB;&#x30DA;&#x30B9;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x5168;&#x4F53;&#x3067;SSR&#x306E;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x3001;&#x5185;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7CFB;&#x7D71;&#x9593;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;SSR&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x306A;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x7CFB;&#x7D71;&#x9593;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;PRV&#x304A;&#x3088;&#x3073;HSV-1&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x83CC;&#x682A;&#x9593;&#x3067;SSR&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x7CBE;&#x88FD;PRV&#x682A;&#x5185;&#x3067;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E2;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x62E0;&#x70B9;&#x306E;&#x5C11;&#x6570;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x591A;&#x578B;&#x306E;&#x901A;&#x8DEF;&#x3068;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x7CBE;&#x88FD;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3042;&#x3063;&#x3066;&#x3082;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;DNA&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x682A;&#x3092;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x4E0D;&#x5747;&#x4E00;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x7A2E;&#x5B50;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x682A;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Alphaherpesviruses&#x306E;&#x6BD2;&#x6027;&#x3068;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x682A;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;

Alphaherpesviruses&#xC740; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; 1 (HSV-1)&#xACFC; 2, &#xD5E4; &#xB974; &#xD398; &#xC2A4;&#xC758; &#xB2E8;&#xC21C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBC0F; &#xC218; &#xB450; &#xB300;&#xC0C1; &#xD3EC;&#xC9C4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (VZV). &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD53C; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558; &#xACE0; &#xD3C9;&#xC0DD; &#xB300;&#xAE30; &#xC2DC;&#xAC04;, &#xC7AC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;, &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC; &#xD558; &#xC2E0; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xAC10;&#xC5FC;. &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xC218;&#xC758;&#xD559; herpesvirus, pseudorabies (PRV) &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xACBD;&#xC81C;&#xC801; &#xC190;&#xC2E4;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xAC00;&#xCD95;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;. &#xBC31;&#xC2E0; VZV &#xBC0F; PRV &#xC5ED;&#xD560; HSV-1 &#xBC31;&#xC2E0;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC804;&#xCCB4; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBE44;&#xAD50; PRV &#xBC31;&#xC2E0; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; Bartha, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC545;&#xC131; PRV &#xACA9;&#xB9AC;, &#xCE74; &#xD50C; &#xB780;&#xACFC; &#xBCA0; &#xCEE4;&#xC758; &#xD604;&#xC7AC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xBC0F; &#xC870;&#xB9BD;&#xACFC; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; alphaherpesvirus &#xBC31;&#xC2E0; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;&#xC758; &#xAC10;&#xC1C4;&#xC5D0; &#xD604;&#xC7AC; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. PRV Bartha &#xC735;&#xD574; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC545;&#xC131; &#xBCC0;&#xC885; &#xC0AC;&#xC774; &#xB9CE;&#xC740; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C0;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xCF54;&#xB529; &#xCC28;&#xC774;&#xC810;&#xC744; &#xCC3E;&#xC744; &#xC218; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; Gh&#xC640; g b, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC774;&#xC0C1; 40 &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. PRV &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; inter-strain &#xD3B8;&#xCC28; &#xC218;&#xC900; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; VZV &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC634;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xB2E4; HSV-1&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30;&#xC5D0; &#xD6E8;&#xC52C; &#xAC00;&#xAE5D;&#xB2E4;. PRV &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xAC70;&#xC758; 20% &#xD0E0;&#xB364; &#xC9E7;&#xC740; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBC18;&#xBCF5; (SSRs)&#xC758; &#xAE38;&#xC774; &#xBCC0;&#xD654; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;, transcriptional &#xADDC;&#xC81C;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xC5B4; &#xD575; &#xC0B0; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xD504;&#xC758; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; SSRs herpesvirus &#xC81C;&#xD488;&#xAD70;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xCC3E;&#xC544; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;, &#xB0B4;&#xBD80;&#xC640; &#xC885;&#xC790; &#xC0AC;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; Ssrs&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC3E;&#xC744; SSR &#xAE38;&#xC774; &#xBCC0;&#xD615; PRV&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC640; HSV-1, &#xC885;&#xC790; &#xC0AC;&#xC774; phenotypic &#xBCC0;&#xD615;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xAC01; &#xD328; &#xC815;&#xD654; PRV &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xD615; &#xAE30;&#xC9C0;&#xC758; &#xC801;&#xC740; &#xC218; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; polymorphisms&#xC5D0; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C;-&#xC815;&#xD654;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xCD94;&#xAC00; &#xC99D;&#xAC70; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; DNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xC8FC;&#xC2DD;&#xB3C4; &#xC0C1; &#xD328; &#xC815;&#xD654; &#xC804;&#xC2DC; &#xC81C;&#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xAC00; &#xC9C8; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; &#xC9C4;&#xD654; &#xC528;&#xC557; &#xC131;&#xC7A5;.

&#xC545;&#xC131; inter-strain &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC758; &#xB113;&#xC740; &#xBC94;&#xC704;&#xC640; alphaherpesviruses&#xC758; &#xBC31;&#xC2E0; &#xBCC0;&#xC885;.

Herpesvirus alfa est&#xE1;n muy extendidos en la poblaci&#xF3;n humana, e incluyen el virus del herpes simplex 1 (HSV-1) y 2, y la varicela zoster (VZV). Estos pat&#xF3;genos virales causan lesiones epiteliales, y luego infectar el sistema nervioso que causa la latencia de toda la vida, la reactivaci&#xF3;n y expansi&#xF3;n. Un virus del herpes relacionado con veterinaria, pseudorrabia (PRV), causa una enfermedad similar en el ganado que se traducen en importantes p&#xE9;rdidas econ&#xF3;micas. Las vacunas desarrolladas para VVZ y PRV servir como modelos &#xFA;tiles para el desarrollo de una vacuna de HSV-1. Se presenta completo de comparaci&#xF3;n de secuencias del genoma de la cepa Bartha vacuna VLP, y dos cepas virulentas de PRV, Kaplan y Becker. Estas secuencias del genoma se determinaron mediante secuenciaci&#xF3;n de alto rendimiento y de reuni&#xF3;n, y presentar nuevas ideas sobre la atenuaci&#xF3;n de una cepa de la vacuna alphaherpesvirus mam&#xED;feros. Encontramos muchas diferencias de codificaci&#xF3;n previamente desconocidas entre PRV Bartha y las cepas virulentas, incluyendo cambios en el GH prote&#xED;nas de fusi&#xF3;n y GB, y m&#xE1;s de cuarenta otras prote&#xED;nas virales. Inter-deformaci&#xF3;n variaci&#xF3;n en las secuencias de prote&#xED;nas PRV es mucho m&#xE1;s cercano a los niveles observados anteriormente para el HSV-1 que para la gran estabilidad proteoma VZV. Casi el 20% del genoma PRV contiene repeticiones en t&#xE1;ndem cortas secuencias (SSR), una clase de motivos &#xE1;cidos nucleicos cuya longitud-la variaci&#xF3;n ha sido asociado con cambios en la eficiencia del sitio de uni&#xF3;n al ADN, la regulaci&#xF3;n de la transcripci&#xF3;n, y las interacciones de prote&#xED;nas. Encontramos SSR en toda la familia de los herpesvirus, y proporcionar la primera caracterizaci&#xF3;n global de la SSR en los virus, tanto dentro como entre las cepas. Encontramos variaci&#xF3;n RSS de longitud entre los diferentes aislamientos de PRV y el VHS-1, que pueden proporcionar un nuevo mecanismo para la variaci&#xF3;n fenot&#xED;pica entre las cepas. Finalmente, se detect&#xF3; un peque&#xF1;o n&#xFA;mero de bases polim&#xF3;rficas dentro de cada cepa de placa purificado PRV, y caracterizar el efecto de paso y la placa de purificaci&#xF3;n-en estos polimorfismos. Estos datos se a&#xF1;aden a la creciente evidencia de que incluso la placa-purificado de las poblaciones de virus de ADN estables presentan heterogeneidad de la secuencia limitada, lo que es probable evoluci&#xF3;n futura semillas cepa.

Una amplia extensi&#xF3;n del Inter-deformaci&#xF3;n diversidad en las cepas virulentas y la vacuna de herpesvirus alfa

Heterochromatin represents a significant portion of eukaryotic genomes and has essential structural and regulatory functions. Its molecular organization is largely unknown due to difficulties in sequencing through and assembling repetitive sequences enriched in the heterochromatin. Here we developed a novel strategy using chromosomal rearrangements and embryonic phenotypes to position unmapped Drosophila melanogaster heterochromatic sequence to specific chromosomal regions. By excluding sequences that can be mapped to the assembled euchromatic arms, we identified sequences that are specific to heterochromatin and used them to design heterochromatin specific probes ("H-probes") for microarray. By comparative genomic hybridization (CGH) analyses of embryos deficient for each chromosome or chromosome arm, we were able to map most of our H-probes to specific chromosome arms. We also positioned sequences mapped to the second and X chromosomes to finer intervals by analyzing smaller deletions with breakpoints in heterochromatin. Using this approach, we were able to map >40% (13.9 Mb) of the previously unmapped heterochromatin sequences assembled by the whole-genome sequencing effort on arm U and arm Uextra to specific locations. We also identified and mapped 110 kb of novel heterochromatic sequences. Subsequent analyses revealed that sequences located within different heterochromatic regions have distinct properties, such as sequence composition, degree of repetitiveness, and level of underreplication in polytenized tissues. Surprisingly, although heterochromatin is generally considered to be transcriptionally silent, we detected region-specific temporal patterns of transcription in heterochromatin during oogenesis and early embryonic development. Our study provides a useful approach to elucidate the molecular organization and function of heterochromatin and reveals region-specific variation of heterochromatin.

Mapping the pericentric heterochromatin by comparative genomic hybridization analysis and chromosome deletions in Drosophila melanogaster.

H&eacute;t&eacute;rochromatine repr&eacute;sente une part importante du g&eacute;nome des eucaryotes et a des fonctions structurelles et r&eacute;glementaires essentielles. Son organisation mol&eacute;culaire ignore en grande partie en raison de difficult&eacute;s dans le s&eacute;quen&ccedil;age &agrave; travers et l&#39;assemblage de s&eacute;quences r&eacute;p&eacute;titives, enrichis dans l&#39;h&eacute;t&eacute;rochromatine. Ici, nous avons d&eacute;velopp&eacute; une nouvelle strat&eacute;gie &agrave; l&#39;aide de r&eacute;arrangements chromosomiques et des ph&eacute;notypes embryonnaires pour positionner non mapp&eacute; s&eacute;quence h&eacute;t&eacute;rochromatique de Drosophila melanogaster de certaines r&eacute;gions chromosomiques sp&eacute;cifiques. En excluant les s&eacute;quences pouvant &ecirc;tre mapp&eacute;s aux bras euchromatiques assembl&eacute;s, nous avons identifi&eacute; les s&eacute;quences sp&eacute;cifiques de l&#39;h&eacute;t&eacute;rochromatine et utilisaient pour la conception h&eacute;t&eacute;rochromatine sondes sp&eacute;cifiques (&laquo; H-sondes&quot;) pour les micror&eacute;seaux. Par analyses d&#39;hybridation g&eacute;nomique comparative (CGH) des embryons d&eacute;ficients pour chaque chromosome ou un bras chromosomique, nous avons pu mapper la plupart de nos H-sondes &agrave; des bras chromosomiques sp&eacute;cifiques. Nous positionnons aussi s&eacute;quences mapp&eacute;s &agrave; la seconde et X chromosomes &agrave; des intervalles plus fines en analysant des destructions plus petites avec des points d&#39;arr&ecirc;t dans l&#39;h&eacute;t&eacute;rochromatine. En utilisant cette approche, nous avons pu carte &gt; 40 % (13,9 Mo) des s&eacute;quences pr&eacute;c&eacute;demment non mapp&eacute;s h&eacute;t&eacute;rochromatine assembl&eacute;s par les efforts de s&eacute;quen&ccedil;age de g&eacute;nome entier sur vous armer et bras Uextra vers des emplacements sp&eacute;cifiques. Aussi, nous avons identifi&eacute; et cartographi&eacute; 110KO de nouvelles s&eacute;quences h&eacute;t&eacute;rochromatiques. Les analyses subs&eacute;quentes ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les s&eacute;quences situ&eacute;es dans diff&eacute;rentes r&eacute;gions h&eacute;t&eacute;rochromatiques ont des propri&eacute;t&eacute;s distinctes, telles que la composition de la s&eacute;quence, le degr&eacute; de r&eacute;p&eacute;titivit&eacute; et le niveau de sous-duplication dans les tissus polytenized. &Eacute;tonnamment, bien que h&eacute;t&eacute;rochromatine est g&eacute;n&eacute;ralement consid&eacute;r&eacute; comme transcriptionally silencieux, nous avons d&eacute;tect&eacute; les patrons temporels sp&eacute;cifiques &agrave; une r&eacute;gion de la transcription dans l&#39;h&eacute;t&eacute;rochromatine durant l&#39;ovogen&egrave;se et d&eacute;veloppement embryonnaire pr&eacute;coce. Notre &eacute;tude fournit une approche utile pour expliquer l&#39;organisation mol&eacute;culaire et la fonction de l&#39;h&eacute;t&eacute;rochromatine et r&eacute;v&egrave;le des variations propres &agrave; chaque r&eacute;gion d&#39;h&eacute;t&eacute;rochromatine.

La cartographie de l&#39;h&eacute;t&eacute;rochromatine p&eacute;ricentrique par les destructions de l&#39;hybridation g&eacute;nomique comparative analysis and chromosome chez Drosophila melanogaster.

Eterocromatina rappresenta una porzione significativa di genomi eucariotici e ha funzioni strutturali e normative essenziali. Sua organizzazione molecolare &egrave; in gran parte sconosciuto a causa della difficolt&agrave; nel sequenziamento attraverso e assemblaggio di sequenze ripetitive arricchiti nell&#39;eterocromatina. Qui abbiamo sviluppato una strategia romanzo utilizzando riarrangiamenti cromosomici e fenotipi embrionali in posizione non mappato eterocromatiche sequenza di Drosophila melanogaster a specifiche regioni cromosomiche. Escludendo le sequenze che possono essere associati a braccia eucromatina assemblate, abbiamo individuato sequenze che sono specifici di eterocromatina e li ha usati per progettazione eterocromatina sonde specifiche (&quot;H-sonde&quot;) per microarray. Analisi di ibridazione genomic comparativa (CGH) degli embrioni carenti per ogni cromosoma o braccio del cromosoma, siamo stati in grado di mappare la maggior parte delle nostre H-sonde a braccia cromosomiche specifiche. Abbiamo posizionato anche sequenze mappati al secondo e X cromosomi a intervalli pi&ugrave; preciso analizzando piccole delezioni con punti di interruzione in eterocromatina. Utilizzando questo approccio, siamo stati in grado di mappare &amp;gt; 40% (13,9 Mb) delle sequenze precedentemente mappati eterocromatina assemblate da sforzo il sequenziamento del genoma intero sul braccio si e braccio Uextra in posizioni specifiche. Abbiamo anche individuato e mappato 110 kb del romanzo sequenze eterocromatiche. Analisi successive hanno evidenziato che si trova all&#39;interno di diverse regioni Eterocromatiche sequenze hanno propriet&agrave; distinte, come sequenza composizione, grado di ripetitivit&agrave; e il livello di underreplication nei tessuti polytenized. Sorprendentemente, anche se eterocromatina &egrave; generalmente considerato transcriptionally silenziosa, abbiamo rilevato specifici pattern temporale della trascrizione in eterocromatina durante l&#39;ovogenesi e sviluppo embrionale precoce. Il nostro studio fornisce un approccio utile per chiarire l&#39;organizzazione molecolare e funzione di eterocromatina e rivela la regione specifica variazione dell&#39;eterocromatina.

Mappatura dell&#39;eterocromatina pericentrica da delezioni di analisi e cromosoma ibridazione genomic comparativa in Drosophila melanogaster.

The macronuclear genome of the ciliate Oxytricha trifallax displays an extreme and unique eukaryotic genome architecture with extensive genomic variation. During sexual genome development, the expressed, somatic macronuclear genome is whittled down to the genic portion of a small fraction (âˆ¼5%) of its precursor "silent" germline micronuclear genome by a process of "unscrambling" and fragmentation. The tiny macronuclear "nanochromosomes" typically encode single, protein-coding genes (a small portion, 10%, encode 2-8 genes), have minimal noncoding regions, and are differentially amplified to an average of âˆ¼2,000 copies. We report the high-quality genome assembly of âˆ¼16,000 complete nanochromosomes (âˆ¼50 Mb haploid genome size) that vary from 469 bp to 66 kb long (mean âˆ¼3.2 kb) and encode âˆ¼18,500 genes. Alternative DNA fragmentation processes âˆ¼10% of the nanochromosomes into multiple isoforms that usually encode complete genes. Nucleotide diversity in the macronucleus is very high (SNP heterozygosity is âˆ¼4.0%), suggesting that Oxytricha trifallax may have one of the largest known effective population sizes of eukaryotes. Comparison to other ciliates with nonscrambled genomes and long macronuclear chromosomes (on the order of 100 kb) suggests several candidate proteins that could be involved in genome rearrangement, including domesticated MULE and IS1595-like DDE transposases. The assembly of the highly fragmented Oxytricha macronuclear genome is the first completed genome with such an unusual architecture. This genome sequence provides tantalizing glimpses into novel molecular biology and evolution. For example, Oxytricha maintains tens of millions of telomeres per cell and has also evolved an intriguing expansion of telomere end-binding proteins. In conjunction with the micronuclear genome in progress, the O. trifallax macronuclear genome will provide an invaluable resource for investigating programmed genome rearrangements, complementing studies of rearrangements arising during evolution and disease.

The Oxytricha trifallax macronuclear genome: a complex eukaryotic genome with 16,000 tiny chromosomes.

Le g&eacute;nome macronucl&eacute;aire du cili&eacute;s trifallax Oxytricha affiche une architecture de g&eacute;nomes eucaryotes extr&ecirc;me et unique avec une importante variation g&eacute;nomique. Au cours du d&eacute;veloppement sexuel de g&eacute;nome, le g&eacute;nome macronucl&eacute;aire expresse, somatique est amenuis&eacute; jusqu&#39;&agrave; la partie g&eacute;nique d&#39;une petite fraction (&sim;5 %) de son g&eacute;nome micronucl&eacute;aire &laquo; silencieux &raquo; dans les cellules germinales de pr&eacute;curseur par un processus de &laquo; d&eacute;chiffrer &raquo; et de la fragmentation. Les minuscules macronucl&eacute;aire &laquo; nanochromosomes &raquo; typiquement Encoder de g&egrave;nes unique, codant pour des prot&eacute;ines (une petite partie, 10 %, encoder 2-8 g&egrave;nes), pr&eacute;sentent des r&eacute;gions non codantes minimales et sont amplifi&eacute;s diff&eacute;remment &agrave; une moyenne de &sim;2, 000 exemplaires. Nous rapportons l&#39;Assembl&eacute;e de la qualit&eacute; du g&eacute;nome de &sim;16, 000 nanochromosomes complets (taille du g&eacute;nome haplo&iuml;de Mo &sim;50) qui varient entre 469 bp &agrave; long 66 Ko (&sim;3.2 moyenne kb) et encoder &sim;18, 500 g&egrave;nes. Alternative ADN fragmentation des processus &sim;10 % de la nanochromosomes en plusieurs isoformes qui codent g&eacute;n&eacute;ralement des g&egrave;nes complets. Diversit&eacute; des nucl&eacute;otides dans le macronucleus est tr&egrave;s &eacute;lev&eacute;e (h&eacute;t&eacute;rozygotie SNP est &sim;4.0 %), ce qui laisse supposer que trifallax Oxytricha peut avoir l&#39;un des plus grandes tailles de population efficace connue des eucaryotes. Comparaison aux autres cili&eacute;s avec g&eacute;nomes brouill&eacute;s et longtemps macronucl&eacute;aire chromosomes (de l&#39;ordre 100KO) sugg&egrave;re plusieurs prot&eacute;ines de candidat qui pourraient jouer un r&ocirc;le dans le r&eacute;arrangement du g&eacute;nome, y compris domestiques transposases MULE et IS1595 comme DDE. L&#39;ensemble du g&eacute;nome macronucl&eacute;aire Oxytricha fragment&eacute; est le premier g&eacute;nome d&ucirc;ment rempli avec une telle architecture inhabituelle. Cette s&eacute;quence du g&eacute;nome fournit un aper&ccedil;u all&eacute;chant dans la nouvelle biologie mol&eacute;culaire et l&#39;&eacute;volution. Par exemple, Oxytricha maintient des dizaines de millions des t&eacute;lom&egrave;res par cellule et a &eacute;volu&eacute; aussi une expansion intrigante de prot&eacute;ines liant l&#39;extr&eacute;mit&eacute; t&eacute;lom&eacute;rique. En conjonction avec le g&eacute;nome micronucl&eacute;aire en cours, le g&eacute;nome macronucl&eacute;aire trifallax o. fournira une pr&eacute;cieuse ressource pour l&#39;&eacute;tude programm&eacute;e r&eacute;arrangements g&eacute;nomiques, compl&eacute;ment aux &eacute;tudes des r&eacute;arrangements survenus lors d&#39;&eacute;volution et de la maladie.

Le g&eacute;nome de macronucl&eacute;aire trifallax Oxytricha : un complex g&eacute;nome eucaryote avec 16 000 chromosomes minuscules.

Il genoma di macronuclear dei ciliati Oxytricha trifallax Visualizza un&#39;architettura estrema e unico genoma eucariotico con ampia variazione genomica. Durante lo sviluppo sessuale del genoma, il genoma di macronuclear espresso, somatico &egrave; ridotti alla porzione genica di una piccola frazione (&sim;5%) del suo genoma micronuclear della linea germinale &quot;silenzioso&quot; precursore da un processo di &quot;decodifica&quot; e frammentazione. Il piccolo macronuclear &quot;nanochromosomes&quot; tipicamente codificare singoli, proteina-codificazione geni (una piccola porzione, 10%, codificano geni 2-8), hanno regioni non codificante minimal e differenzialmente sono amplificati ad una media di &sim;2, 000 copie. Riportiamo l&#39;assemblaggio del genoma di alta qualit&agrave; di &sim;16, 000 nanochromosomes completo (dimensione &sim;50 Mb genoma aploide) che variano da 469 bp a lungo 66 kb (&sim;3.2 significa kb) e codificare &sim;18, 500 geni. Alternativa DNA frammentazione processi &sim;10% di nanochromosomes in molteplici isoforme che solitamente codificano geni completi. Diversit&agrave; nucleotidica nella macronucleus &egrave; molto alta (eterozigosi SNP sono &sim;4.0%), suggerendo che Oxytricha trifallax pu&ograve; avere una delle pi&ugrave; grandi dimensioni conosciuta popolazione efficace degli eucarioti. Confronto con altri ciliati con genomi nonscrambled e tempo macronuclear cromosomi (dell&#39;ordine di 100 kb) suggerisce diverse proteine di candidati che potrebbero essere coinvolti nel riarrangiamento di genoma, compresi addomesticati mulo e DDE IS1595-come transposases. L&#39;assemblaggio del genoma macronuclear Oxytricha altamente frammentato &egrave; il primo genoma completato con tale un&#39;architettura insolita. Questa sequenza del genoma offre scorci allettante novel molecular biology and evolution. Ad esempio, Oxytricha mantiene decine di milioni di telomeri per ogni cella e si &egrave; evoluta anche un&#39;espansione intrigante di fine-binding proteins telomeri. In concomitanza con il genoma di micronuclear in corso, il genoma di macronuclear o. trifallax fornir&agrave; un&#39;inestimabile risorsa per indagare programmato riarrangiamenti del genoma, completando gli studi di riarrangiamenti derivanti durante l&#39;evoluzione e la malattia.

Oxytricha trifallax macronuclear genoma: un complesso genoma eucariotico con 16.000 piccoli cromosomi.

DNA mismatch repair is a highly conserved DNA repair pathway. In humans, germline mutations in hMSH2 or hMLH1, key components of mismatch repair, have been associated with Lynch syndrome, a leading cause of inherited cancer mortality. Current estimates of the mutation rate and the mutational spectra in mismatch repair defective cells are primarily limited to a small number of individual reporter loci. Here we use the yeast Saccharomyces cerevisiae to generate a genome-wide view of the rates, spectra, and distribution of mutation in the absence of mismatch repair. We performed mutation accumulation assays and next generation sequencing on 19 strains, including 16 msh2 missense variants implicated in Lynch cancer syndrome. The mutation rate for DNA mismatch repair null strains was approximately 1 mutation per genome per generation, 225-fold greater than the wild-type rate. The mutations were distributed randomly throughout the genome, independent of replication timing. The mutation spectra included insertions/deletions at homopolymeric runs (87.7%) and at larger microsatellites (5.9%), as well as transitions (4.5%) and transversions (1.9%). Additionally, repeat regions with proximal repeats are more likely to be mutated. A bias toward deletions at homopolymers and insertions at (AT)n microsatellites suggests a different mechanism for mismatch generation at these sites. Interestingly, 5% of the single base pair substitutions might represent double-slippage events that occurred at the junction of immediately adjacent repeats, resulting in a shift in the repeat boundary. These data suggest a closer scrutiny of tumor suppressors with homopolymeric runs with proximal repeats as the potential drivers of oncogenesis in mismatch repair defective cells.

Mutation rates, spectra, and genome-wide distribution of spontaneous mutations in mismatch repair deficient yeast.

We used paired-end Illumina deep sequencing and de novo assembly to determine the genome sequence of herpes simplex virus 1 (HSV-1) strain MacIntyre (aka McIntyre). The MacIntyre strain originated from the brain of a patient with lethal HSV encephalitis and has a unique limitation in its neuronal spread, moving solely in the retrograde direction.

Genome Sequence of the Anterograde-Spread-Defective Herpes Simplex Virus 1 Strain MacIntyre.

Herpes simplex virus (HSV) is a widespread pathogen that causes epithelial lesions with recurrent disease that manifests over a lifetime. The lifelong aspect of infection results from latent viral infection of neurons, a reservoir from which the virus reactivates periodically. Recent work has demonstrated the breadth of genetic variation in globally distributed HSV strains. However, the amount of variation or capacity for mutation within one strain has not been well studied. Here we developed and applied a streamlined new approach for assembly and comparison of large DNA viral genomes such as HSV-1. This viral genome assembly (VirGA) workflow incorporates a combination of de novo assembly, alignment, and annotation strategies to automate the generation of draft genomes for large viruses. We applied this approach to quantify the amount of variation between clonal derivatives of a common parental virus stock. In addition, we examined the genetic basis for syncytial plaque phenotypes displayed by a subset of these strains. In each of the syncytial strains, we found an identical DNA change, affecting one residue in the gB (UL27) fusion protein. Since these identical mutations could have appeared after extensive in vitro passaging, we applied the VirGA sequencing and comparison approach to two clinical HSV-1 strains isolated from the same patient. One of these strains was syncytial upon first culturing; its sequence revealed the same gB mutation. These data provide insight into the extent and origin of genome-wide intrastrain HSV-1 variation and present useful methods for expansion to in vivo patient infection studies.

Rapid genome assembly and comparison decode intrastrain variation in human alphaherpesviruses.

Examples of extrachromosomal circular DNAs (eccDNAs) are found in many organisms, but their impact on genetic variation at the genome scale has not been investigated. We mapped 1,756 eccDNAs in the Saccharomyces cerevisiae genome using Circle-Seq, a highly sensitive eccDNA purification method. Yeast eccDNAs ranged from an arbitrary lower limit of 1 kb up to 38 kb and covered 23% of the genome, representing thousands of genes. EccDNA arose both from genomic regions with repetitive sequences ≥ 15 bases long and from regions with short or no repetitive sequences. Some eccDNAs were identified in several yeast populations. These eccDNAs contained ribosomal genes, transposon remnants, and tandemly repeated genes (HXT6/7, ENA1/2/5, and CUP1-1/-2) that were generally enriched on eccDNAs. EccDNAs seemed to be replicated and 80% contained consensus sequences for autonomous replication origins that could explain their maintenance. Our data suggest that eccDNAs are common in S. cerevisiae, where they might contribute substantially to genetic variation and evolution.

Extrachromosomal circular DNA is common in yeast.

Extrachromosomal circular DNA (eccDNA) derived from chromosomal Ty retrotransposons in yeast can be generated in multiple ways. Ty eccDNA can arise from the circularization of extrachromosomal linear DNA during the transpositional life cycle of retrotransposons, or from circularization of genomic Ty DNA. Circularization may happen through nonhomologous end-joining (NHEJ) of long terminal repeats (LTRs) flanking Ty elements, by Ty autointegration, or by LTR-LTR recombination. By performing an in-depth investigation of sequence reads stemming from Ty eccDNAs obtained from populations of Saccharomyces cerevisiae S288c, we find that eccDNAs predominantly correspond to full-length Ty1 elements. Analyses of sequence junctions reveal no signs of NHEJ or autointegration events. We detect recombination junctions that are consistent with yeast Ty eccDNAs being generated through recombination events within the genome. This opens the possibility that retrotransposable elements could move around in the genome without an RNA intermediate directly through DNA circularization.

Article Total : 3	Year
Publication title	2011
Publication title	2013
Publication title	2016

Article	Year
Sequence variability in clinical and laboratory isolates of herpes simplex virus 1 reveals new mutations. Journal of virology\| PubMed ID: 20219902	2010
Metabolic cycling in single yeast cells from unsynchronized steady-state populations limited on glucose or phosphate. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 20335538	2010
Herpes simplex virus 1 pUL34 plays a critical role in cell-to-cell spread of virus in addition to its role in virus replication. Journal of virology\| PubMed ID: 21561917	2011
A wide extent of inter-strain diversity in virulent and vaccine strains of alphaherpesviruses. PLoS pathogens\| PubMed ID: 22022263	2011
Mapping the pericentric heterochromatin by comparative genomic hybridization analysis and chromosome deletions in Drosophila melanogaster. Genome research\| PubMed ID: 22745230	2012
The Oxytricha trifallax macronuclear genome: a complex eukaryotic genome with 16,000 tiny chromosomes. PLoS biology\| PubMed ID: 23382650	2013
Mutation rates, spectra, and genome-wide distribution of spontaneous mutations in mismatch repair deficient yeast. G3 (Bethesda, Md.)\| PubMed ID: 23821616	2013
Genome Sequence of the Anterograde-Spread-Defective Herpes Simplex Virus 1 Strain MacIntyre. Genome announcements\| PubMed ID: 25395637	2014
Rapid genome assembly and comparison decode intrastrain variation in human alphaherpesviruses. mBio\| PubMed ID: 25827418	2015
Extrachromosomal circular DNA is common in yeast. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 26038577	2015
Formation of Extrachromosomal Circular DNA from Long Terminal Repeats of Retrotransposons in Saccharomyces cerevisiae. G3 (Bethesda, Md.)\| PubMed ID: 26681518	2015

Lance Parsons

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