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Induction of Alloantigen-specific Anergy in Human Peripheral Blood Mononuclear Cells by Alloantigen Stimulation with Co-stimulatory Signal Blockade

Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (AHSCT) offers the best chance of cure for many patients with congenital and acquired hematologic ...

Dana Farber Cancer Institute

The successful application of gene therapy for the treatment of genetic diseases such as Fabry is reliant on the development of vectors that are safe and that facilitate sustained expression of therapeutic levels of the transgene product. Here, we report that intravenous administration of a recombinant AAV2 vector encoding human alpha-galactosidase A under the transcriptional control of a liver-restricted enhancer/promoter (AAV2/DC190-alphagal) generated significantly higher levels of expression in BALB/c and Fabry mice than could be realized using the ubiquitous CMV promoter (AAV2/CMVHI-alphagal). Moreover, AAV2/DC190-alphagal-mediated hepatic expression of alpha-galactosidase A was sustained for 12 months in BALB/c mice and was associated with a significantly reduced immune response to the expressed enzyme. Subsequent challenge of the AAV2/DC190-alphagal-treated animals with recombinant human alpha-galactosidase A at 6 months failed to elicit the production of anti-alpha-galactosidase A antibodies, suggesting the induction of immune tolerance in these animals. The levels of expression attained with AAV2/DC190-alphagal in the Fabry mice were sufficient to reduce the abnormal accumulation of globotriaosylceramide in the liver, spleen, and heart to basal levels and in the kidney by approximately 40% at 8 weeks. Together, these results demonstrate that AAV2-mediated gene transfer that limits the expression of alpha-galactosidase A to the liver may be a viable strategy for treating Fabry disease.

AAV2 vector harboring a liver-restricted promoter facilitates sustained expression of therapeutic levels of alpha-galactosidase A and the induction of immune tolerance in Fabry mice.

La exitosa aplicaci&oacute;n de la terapia g&eacute;nica para el tratamiento de enfermedades gen&eacute;ticas como Fabry es dependiente en el desarrollo de vectores que son seguros y que faciliten la expresi&oacute;n sostenida de los niveles terap&eacute;uticos del producto transg&eacute;nico. Aqu&iacute;, se reporta la administraci&oacute;n intravenosa de un vector de AAV2 recombinante humana alfa-galactosidasa A bajo el control transcripcional de un h&iacute;gado restringidos enhancer/promotor (AAV2/DC190-alphagal) generado significativamente mayores niveles de expresi&oacute;n en ratones BALB/c y Fabry que podr&iacute;a realizarse mediante el omnipresente promotor del CMV (AAV2/CMVHI-alphagal) de la codificaci&oacute;n. Por otra parte, AAV2/DC190-alphagal-mediada la expresi&oacute;n hep&aacute;tica de la alfa-galactosidasa A fue sostenida durante 12 meses en ratones BALB/c y se asoci&oacute; con una reducci&oacute;n significativa respuesta inmunol&oacute;gica a la enzima expresada. Desaf&iacute;o posterior de los animales AAV2/DC190-alphagal-tratados con recombinante humana alfa-galactosidasa A en 6 meses no ha podido provocar la producci&oacute;n de anti-anti-alfa-galactosidasa A anticuerpos, sugiriendo la inducci&oacute;n de tolerancia inmunol&oacute;gica en estos animales. Los niveles de expresi&oacute;n lograda con AAV2/DC190-alphagal en los ratones de Fabry eran suficientes para reducir la acumulaci&oacute;n anormal de globotriaosilceramida en el coraz&oacute;n a niveles b&aacute;sicos y en el ri&ntilde;&oacute;n, h&iacute;gado y bazo por aproximadamente 40% en 8 semanas. Juntos, estos resultados demuestran que la transferencia de genes mediada por AAV2 que limita la expresi&oacute;n de alfa-galactosidasa A en el h&iacute;gado puede ser una estrategia viable para el tratamiento de la enfermedad de Fabry.

Vector AAV2 que un promotor de h&iacute;gado-restringido facilita la expresi&oacute;n sostenida de los niveles terap&eacute;uticos de la alfa-galactosidasa A y la inducci&oacute;n de tolerancia inmunol&oacute;gica en ratones de Fabry.

&#x6CD5;&#x5E03;&#x91CC;&#x7B49;&#x9057;&#x4F20;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x6210;&#x529F;&#x5E94;&#x7528;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x8F7D;&#x4F53;&#xFF0C;&#x662F;&#x5B89;&#x5168;&#x7684;&#x8FD9;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x6301;&#x7EED;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x54C1;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7F16;&#x7801;&#x8F6C;&#x5F55;&#x542F;&#x52A8;&#x809D;&#x9650;&#x5236;&#x5F3A;&#x5316;&#x5242;/&#x5B50; &#xFF08;AAV2/DC190-alphagal&#xFF09; &#x751F;&#x6210;&#x663E;&#x8457;&#x66F4;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6CD5;&#x5E03;&#x91CC;&#x548C; BALB/c &#x5C0F;&#x9F20;&#x6BD4;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F7F;&#x7528;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728; CMV &#x542F;&#x52A8;&#x5B50; &#xFF08;AAV2/CMVHI-alphagal) &#x8BA4;&#x8BC6;&#x5230;&#x63A7;&#x5236;&#x4E0B;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B; &alpha;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176; A AAV2 &#x8F7D;&#x4F53;&#xFF0C;&#x9759;&#x8109;&#x7ED9;&#x7684;&#x836F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;AAV2/DC190-alphagal &#x4ECB;&#x5BFC;&#x809D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE; &alpha;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176; A BALB/c &#x5C0F;&#x9F20;&#x7684; 12 &#x4E2A;&#x6708;&#x5F97;&#x5230;&#x7EF4;&#x6301;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5BF9;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x9176;&#x663E;&#x8457;&#x964D;&#x4F4E;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x6709;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x63A5;&#x4E0B;&#x6765;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#xFF0C;AAV2/DC190-alphagal &#x6CBB;&#x7597;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4EBA; &alpha;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176; A &#x5728; 6 &#x4E2A;&#x6708;&#x672A;&#x80FD;&#x83B7;&#x5F97;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684; alpha &#x4E73;&#x7CD6;&#x9176;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x52A8;&#x7269;&#x514D;&#x75AB;&#x8010;&#x53D7;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x3002;&#x5728;&#x6CD5;&#x5E03;&#x91CC;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E0E; AAV2/DC190-alphagal &#x5B9E;&#x73B0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x8DB3;&#x4EE5; globotriaosylceramide &#x4E2D;&#x809D;&#x3001; &#x813E;&#x3001; &#x5FC3;&#x81F3;&#x57FA;&#x5E95;&#x6C34;&#x5E73;&#x548C;&#x80BE;&#x810F;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#x79EF;&#x805A;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EA6; 40%&#x5728; 8 &#x4E2A;&#x661F;&#x671F;&#x3002;&#x5171;&#x540C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; AAV2 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x79FB;&#xFF0C;&#x9650;&#x5236;&#x5728; &alpha;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176; A &#x81F3;&#x809D;&#x810F;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x6CBB;&#x7597;&#x6CD5;&#x5E03;&#x91CC;&#x75C5;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x6218;&#x7565;&#x3002;

AAV2 &#x8F7D;&#x4F53;&#x809D;&#x9650;&#x5236;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x65B9;&#x4FBF;&#x6CBB;&#x7597;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; &alpha;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176; A &#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x514D;&#x75AB;&#x8010;&#x53D7;&#x73D0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6301;&#x7EED;&#x7684;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

L&#39;application r&eacute;ussie de la th&eacute;rapie g&eacute;nique pour le traitement des maladies g&eacute;n&eacute;tiques comme Fabry est tributaire de l&#39;&eacute;laboration de vecteurs qui sont s&ucirc;rs et qui facilitent l&#39;expression soutenue des concentrations th&eacute;rapeutiques du produit transg&eacute;nique. Nous rapportons ici que l&#39;administration intraveineuse d&#39;un vecteur d&#39;AAV2 recombinante humaine alpha-galactosidase A, sous le contr&ocirc;le transcriptionnel d&#39;un taux significativement plus &eacute;lev&eacute;s de restriction foie enhancer/promoteur (AAV2/DC190-AGAL) g&eacute;n&eacute;r&eacute; d&#39;expression chez la souris BALB/c et Fabry que pouvait &ecirc;tre r&eacute;alis&eacute; &agrave; l&#39;aide du promoteur omnipr&eacute;sent du CMV (AAV2/CMVHI-AGAL) de codage. En outre, expression h&eacute;patique par AAV2/DC190-AGAL d&#39;alpha-galactosidase A a &eacute;t&eacute; maintenue pendant 12 mois chez des souris BALB/c et a &eacute;t&eacute; associ&eacute;e &agrave; une r&eacute;ponse immunitaire r&eacute;duite de fa&ccedil;on significative &agrave; l&#39;enzyme exprim&eacute;e. Contestation ult&eacute;rieure des animaux trait&eacute;s AAV2/DC190-AGAL avec recombinante humain alpha-galactosidase A &agrave; 6 mois n&#39;a pas pu susciter la production d&#39;anti-pr&eacute;-alpha-galactosidase un anticorps, ce qui sugg&egrave;re l&#39;induction d&#39;une tol&eacute;rance immunitaire chez ces animaux. Les niveaux d&#39;expression atteint avec AAV2/DC190-AGAL chez les souris de Fabry ne suffisaient pas &agrave; r&eacute;duire l&#39;accumulation anormale de globotriaosylc&eacute;ramide dans le foie, la rate et c&oelig;ur aux niveaux de base et dans le rein par environ 40 % apr&egrave;s 8 semaines. Ensemble, ces r&eacute;sultats d&eacute;montrent que le transfert de g&egrave;ne AAV2 qui limite l&#39;expression de l&#39;alpha-galactosidase A vers le foie peut &ecirc;tre une strat&eacute;gie viable pour le traitement de la maladie de Fabry.

AAV2 vecteur porteur d&#39;un promoteur de foie restreint facilite l&#39;expression soutenue des concentrations th&eacute;rapeutiques de l&#39;alpha-galactosidase A et l&#39;induction d&#39;une tol&eacute;rance immunitaire chez des souris de Fabry.

AAV2 Vektor, eine Leber-restricted Promoter erleichtert nachhaltig Ausdruck der therapeutischen Spiegel von alpha-Galactosidase A und die Induktion einer Immuntoleranz in Fabry-M&#xE4;usen.

L&#39;applicazione di successo della terapia genica per il trattamento di malattie genetiche come Fabry &egrave; legata allo sviluppo di vettori che sono sicuri e che facilitano la sostenuta espressione dei livelli terapeutici del transgene prodotto. Qui, segnaliamo che la somministrazione endovenosa di vettore ricombinante AAV2 codifica umano alfa-galattosidasi A, sotto il controllo trascrizionale di un fegato-restricted enhancer/promotore (AAV2/DC190-alphagal) generato significativamente pi&ugrave; elevati livelli di espressione nei topi BALB/c e Fabry, che potrebbe essere realizzato utilizzando l&#39;onnipresente promotore CMV (AAV2/CMVHI-alphagal). Inoltre, espressione epatica AAV2/DC190-alphagal-mediato dell&#39;alfa-galattosidasi A &egrave; stata sostenuta per 12 mesi in topi BALB/c ed &egrave; stata associata con una risposta immunitaria significativamente ridotta all&#39;enzima espresso. Sfida successiva degli animali AAV2/DC190-alphagal-trattati con ricombinante umano alfa-galattosidasi A 6 mesi non &egrave; riuscito a suscitare la produzione di anti-alfa-galattosidasi A anticorpi, suggerendo l&#39;induzione di tolleranza immunologica in questi animali. I livelli di espressione raggiunta con AAV2/DC190-alphagal in topi Fabry erano sufficienti per ridurre l&#39;accumulo anomalo di globotriaosilceramide nel fegato, milza e cuore a livelli basali e nel rene di circa il 40% a 8 settimane. Insieme, questi risultati dimostrano che il trasferimento di AAV2-mediata del gene che limita l&#39;espressione di alfa-galattosidasi A del fegato pu&ograve; essere una valida strategia per il trattamento di malattia di Fabry.

AAV2 vector harboring un promotore di fegato-limitato facilita sostenuta espressione dei livelli terapeutici dell&#39;alfa-galattosidasi A e l&#39;induzione di tolleranza immunologica in topi Fabry.

&#x30D5;&#x30A1;&#x30D6;&#x30EA;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x75C5;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x6210;&#x529F;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5B89;&#x5168;&#x6027;&#x3068;&#x305D;&#x306E; transgene &#x88FD;&#x54C1;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; &alpha;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; A &#x5F0F;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9; CMV &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#xFF08;AAV2/CMVHI-alphagal) &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x5B9F;&#x73FE;&#x3067;&#x304D;&#x308B; balb/c &#x3068;&#x30D5;&#x30A1;&#x30D6;&#x30EA; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x809D;&#x81D3;&#x5236;&#x9650;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;/&#x751F;&#x6210;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#xFF08;AAV2/DC190-alphagal&#xFF09; &#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x4E0B;&#x3067;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; AAV2 &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x9759;&#x8108;&#x5185;&#x6295;&#x4E0E;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;AAV2/DC190-alphagal &#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x809D;&#x5F0F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1; &#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; A &#x306E; balb/c &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067; 12 &#x30F6;&#x6708;&#x6301;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x767A;&#x73FE;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306E;&#x6311;&#x6226; AAV2/DC190-alphagal-&#x6271;&#x308F;&#x52D5;&#x7269;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30D2;&#x30C8; &alpha;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; A 6 &#x30F6;&#x6708;&#x3067;&#x306E;&#x5931;&#x6557;&#x306E; &alpha;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x3068;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5BDB;&#x5BB9;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x6297;&#x4F53;&#x3002;AAV2/DC190-alphagal &#x3068;&#x30D5;&#x30A1;&#x30D6;&#x30EA; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x9054;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F; globotriaosylceramide &#x809D;&#x81D3;, &#x813E;&#x81D3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x57FA;&#x5E95;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5FC3;&#x306F;&#x3001;&#x814E;&#x81D3;&#x3067;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092; 8 &#x9031;&#x9593;&#x3067;&#x7D04; 40% &#x524A;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x304B;&#x3089;&#x809D;&#x81D3;&#x306E; &alpha;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; A &#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x5236;&#x9650; AAV2 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x4F1D;&#x64AD;&#x30D5;&#x30A1;&#x30D6;&#x30EA;&#x30FC;&#x75C5;&#x3092;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

AAV2 &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x809D;&#x81D3;&#x5236;&#x9650;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x304B;&#x304F;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1; &#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; A &#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3068;&#x30D5;&#x30A1;&#x30D6;&#x30EA; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x5BDB;&#x5BB9;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Fabry &#xC720;&#xC804; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC758; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xC801;&#xC6A9;&#xC740; &#xBCA1;&#xD130;&#xB294; &#xC548;&#xC804; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC218;&#xC900;&#xC758; transgene &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xC2DD; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC778;&#xAC04; &#xC54C;&#xD30C;-galactosidase A BALB/c&#xC640; Fabry &#xC950; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4; CMV &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; (AAV2/CMVHI-alphagal)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E4;&#xD604; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC2DD;&#xC758; &#xAC04; &#xC81C;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC15;/&#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; (AAV2/DC190-alphagal) &#xC0DD;&#xC131; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; transcriptional &#xD1B5;&#xC81C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; AAV2 &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xC815; &#xB9E5; &#xD589;&#xC815;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC54C;&#xD30C;-galactosidase a &#xAC04;&#xC7A5; &#xC2DD; AAV2/DC190 alphagal &#xC911;&#xC7AC; BALB/c &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; 12 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xB3D9;&#xC548; &#xC9C0;&#xC18D; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xACE0; &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC778;&#xAC04; &#xC54C;&#xD30C;-galactosidase A 6 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC548;&#xD2F0; alpha-galactosidase&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC640; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC744; AAV2/DC190-alphagal-&#xCC98;&#xB9AC;&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D; &#xACFC;&#xC81C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294;&#xC774; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAD00;&#xC6A9; &#xC720;&#xB3C4; &#xD56D; &#xCCB4;. Fabry &#xC950;&#xC5D0; AAV2/DC190-alphagal&#xB85C; &#xD68D;&#xB4DD; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD;&#xC758; &#xB808;&#xBCA8; 8 &#xC8FC;&#xC5D0; &#xC57D; 40%&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC04;, &#xBE44;&#xC7A5;, &#xC2E0;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC800; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xB9C8;&#xC74C;&#xC5D0; globotriaosylceramide&#xC758; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xCD95;&#xC801;&#xC744; &#xC904;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC54C;&#xD30C;-galactosidase A &#xAC04;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558; AAV2 &#xC911;&#xC7AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC774;&#xB3D9; Fabry &#xC9C8;&#xD658; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD589; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC785;&#xC99D;.

&#xAC04; &#xC81C;&#xD55C; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC740;&#xB2C9; AAV2 &#xBCA1;&#xD130; &#xC54C;&#xD30C;-galactosidase A&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC218;&#xC900;&#xACFC; Fabry &#xC950;&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAD00;&#xC6A9; &#xC720;&#xB3C4;&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xC2DD; &#xC6A9;&#xC774;.

&#x9178; sphingomyelinase &#x7F3A;&#x662F;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x6C34;&#x89E3;&#x9176;&#x672A;&#x80FD;&#x964D;&#x4F4E;&#x9798;&#x78F7;&#x8102;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x8D2E;&#x79EF;&#x75C7;&#x3002;&#x7531;&#x6B64;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x57FA;&#x4F53;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x4E2D;&#x5BFC;&#x81F4;&#x809D;&#x813E;&#x80BF;&#x5927;&#x548C;&#x4E25;&#x91CD;&#x7684;&#x80BA;&#x90E8;&#x708E;&#x75C7;&#x3002;&#x653F;&#x5E9C;&#x5F53;&#x5C40;&#x7684;&#x6709;&#x6548;&#x7F16;&#x7801;&#x5230;&#x9178; sphingomyelinase (ASMKO) &#x57FA;&#x56E0;&#x5254;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x9178; sphingomyelinase AAV1 &#x8F7D;&#x4F53;&#x51CF;&#x5C11;&#x7D2F;&#x79EF;&#x7684;&#x57FA;&#x4F53;&#x4E2D;&#x6240;&#x6709;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x5185;&#x810F;&#x5668;&#x5B98;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x66F4;&#x52A0;&#x5168;&#x9762;&#x3001; &#x8FC5;&#x901F;&#x7684;&#x95F4;&#x9699;&#xFF0C;&#x9798;&#x78F7;&#x8102;&#x7684;&#x6307;&#x51FA;&#x5F53;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x4E8E; AAV8 &#x7684;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x5411;&#x91CF;&#x4F7F;&#x7528;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F; AAV1&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;AAV8 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x9176;&#x7684;&#x66F4;&#x9AD8;&#x7684;&#x6301;&#x7EED;&#x6C34;&#x5E73;&#x809D;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E5F;&#x7EA0;&#x6B63;&#x5F02;&#x5E38;&#x6784;&#x6210;&#x53D8;&#x5316;&#x76D1;&#x6D4B;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5DEE;&#x5F02;&#x548C; ASMKO &#x5C0F;&#x9F20;&#x652F;&#x6C14;&#x7BA1;&#x80BA;&#x6CE1;&#x704C;&#x6D17;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7684;&#x6309;&#x63ED;&#x4FDD;&#x9669;&#x8BA1;&#x5212;-1alpha &#x8D8B;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E5F;&#x626D;&#x8F6C;&#x5173;&#x8054; ASMKO &#x5C0F;&#x9F20;&#x80BA;&#x6CE1;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x7578;&#x53D8;&#x548C;&#x6062;&#x590D;&#x5176;&#x541E;&#x566C;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x4E0E;&#x7A9D;&#x85CF;&#x5C06;&#x589E;&#x5F3A;&#x5B50;/&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x809D;&#x9650;&#x5236;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5361;&#x5E26;&#x4E00;&#x8D77;&#x88AB;&#x4F7F;&#x7528;&#x65F6;&#x88AB;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x6CA1;&#x6709;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x9176;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301; AAV8 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x809D;&#x810F;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x529E;&#x6CD5;&#x6CBB;&#x7597;&#x5185;&#x810F;&#x8868;&#x73B0;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x6301;&#x7EED;&#x53D1;&#x5C55;&#x5728;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x9178; sphingomyelinase &#x865A;&#x3002;

AAV8 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x9178; sphingomyelinase &#x809D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7EA0;&#x6B63;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x5C3C;&#x66FC;-&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x5185;&#x810F;&#x5668;&#x5B98;&#x3002;

Acid sphingomyelinase deficiency is a lysosomal storage disorder in which the defective lysosomal hydrolase fails to degrade sphingomyelin. The resulting accumulation of substrate in the lysosomes of histiocytic cells leads to hepatosplenomegaly and severe pulmonary inflammation. Administration of a recombinant AAV1 vector encoding human acid sphingomyelinase to acid sphingomyelinase knockout (ASMKO) mice effectively reduced the accumulated substrate in all of the affected visceral organs. However, more complete and rapid clearance of sphingomyelin was observed when an AAV8-based serotype vector was used in lieu of AAV1. Importantly, AAV8-mediated hepatic expression of higher and sustained levels of the enzyme also corrected the abnormal cellularity, cell differentials, and levels of the chemokine MIP-1alpha in the bronchoalveolar lavage fluids of the ASMKO mice. Treatment also reversed the morphological aberrations associated with the alveolar macrophages of ASMKO mice and restored their phagocytic activity. No antibodies to the expressed enzyme were detected when the viral vectors were used in conjunction with a transcription cassette harboring a liver-restricted enhancer/promoter. Together, these data support the continued development of AAV8-mediated hepatic gene transfer as an approach to treat the visceral manifestations observed in individuals with acid sphingomyelinase deficiency.

AAV8-mediated hepatic expression of acid sphingomyelinase corrects the metabolic defect in the visceral organs of a mouse model of Niemann-Pick disease.

D&eacute;ficit en sphingomy&eacute;linase acide est une maladie lysosomale dans lequel l&#39;hydrolase lysosomal d&eacute;fectueux ne parvient pas &agrave; d&eacute;grader la sphingomy&eacute;line. L&#39;accumulation r&eacute;sultante du substrat dans les lysosomes des cellules histiocytaires m&egrave;ne &agrave; une h&eacute;patospl&eacute;nom&eacute;galie et une inflammation pulmonaire s&eacute;v&egrave;re. Administration d&#39;un vecteur recombinant de AAV1 encodage humaine sphingomy&eacute;linase acide de la sphingomy&eacute;linase acide (ASMKO) souris efficacement r&eacute;duit substrat accumul&eacute; dans tous les organes visc&eacute;raux touch&eacute;s. Toutefois, une clairance plus rapide et compl&egrave;te de la sphingomy&eacute;line observa quand un vecteur AAV8-bas&eacute; de s&eacute;rotype a &eacute;t&eacute; utilis&eacute; au lieu de AAV1. Ce qui est important, induite par le AAV8 l&#39;expression h&eacute;patique de niveaux sup&eacute;rieurs et soutenues de l&#39;enzyme a aussi corrig&eacute; la cellularit&eacute; anormale, &eacute;carts de cellule et niveaux de la chimiokine MIP-1alpha dans les liquides de lavage bronchoalv&eacute;olaire des souris ASMKO. Traitement aussi invers&eacute; les aberrations morphologiques associ&eacute;es les macrophages alv&eacute;olaires des souris ASMKO et restaure leur activit&eacute; phagocytaire. Aucun anticorps &agrave; l&#39;enzyme exprim&eacute;e ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;s lorsque les vecteurs viraux ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;es conjointement avec une cassette de transcription nourrissait un restriction foie enhancer/promoteur. Ensemble, ces donn&eacute;es au d&eacute;veloppement continu de transfert de g&egrave;nes h&eacute;patiques AAV8 comme approche pour traiter les manifestations visc&eacute;rales observ&eacute;es chez les individus pr&eacute;sentant un d&eacute;ficit en sphingomy&eacute;linase acide.

AAV8 v&eacute;hicul&eacute;e par l&#39;expression h&eacute;patique de la sphingomy&eacute;linase acide corrige l&#39;anomalie m&eacute;tabolique dans les visc&egrave;res d&#39;un mod&egrave;le murin de la maladie de Niemann-Pick.

AAV8-vermittelte hepatische Expression der sauren Sphingomyelinase korrigiert die Stoffwechselst&#xF6;rung im inneren Organe von einem Mausmodell des Morbus Niemann-Pick.

Deficit di sfingomielinasi acida &egrave; una malattia da accumulo lisosomiale in cui l&#39;idrolasi lisosomiale difettosi non riesce a degradare la sfingomielina. Il conseguente accumulo del substrato nei lisosomi delle cellule Istiocitario conduce a epato-splenomegalia e grave infiammazione polmonare. Amministrazione del vettore ricombinante AAV1 codifica sfingomielinasi acida umana di topi knockout (ASMKO) sfingomielinasi acida efficacemente ridotto substrato accumulato in tutti gli organi viscerali affetti. Tuttavia, pi&ugrave; completa e rapida clearance della sfingomielina &egrave; stata osservata quando un vettore di sierotipo basata su AAV8 &egrave; stato utilizzato al posto di AAV1. Importante, AAV8-mediata espressione epatica dei livelli pi&ugrave; elevati e sostenuti dell&#39;enzima corretto anche la cellularit&agrave; anormale, i differenziali delle cellule e livelli di chemochine MIP-1alpha nei fluidi di lavaggio broncoalveolare dei topi ASMKO. Trattamento anche invertito le aberrazioni morfologiche associate con i macrofagi alveolari di topi ASMKO e ripristinata la loro attivit&agrave; fagocitaria. L&#39;enzima espresso anticorpi non rilevati quando i vettori virali sono stati utilizzati in combinazione con una cassetta di trascrizione harboring un fegato-restricted enhancer/promotore. Insieme, questi dati supporto il costante sviluppo di trasferimento AAV8-mediata del gene epatico come un approccio per trattare le manifestazioni viscerali osservato in individui con deficit di sfingomielinasi acida.

AAV8-mediata espressione epatica della sfingomielinasi acida corregge il difetto metabolico negli organi viscerali di un modello murino di malattia di Niemann-Pick.

&#x9178;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6B20;&#x4E4F;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BD;&#x30BE;&#x30FC;&#x30E0;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x304C;&#x5931;&#x6557;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x8CAF;&#x8535;&#x969C;&#x5BB3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7D44;&#x7E54;&#x7403;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30A6;&#x30DE;&#x30C8;&#x30A4;&#x30C9;&#x3068;&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;&#x80BA;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x306B; &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x9178;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x9178;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8; (ASMKO) &#x3092;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; AAV1 &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x7BA1;&#x7406;&#x304C;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x5185;&#x81D3;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x57FA;&#x677F;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3088;&#x308A;&#x5B8C;&#x5168;&#x304B;&#x3064;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9; &#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E; AAV8 &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; AAV1 &#x306E;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306F;&#x3001;AAV8 &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x809D;&#x767A;&#x73FE;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x304B;&#x3064;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x307E;&#x305F;&#x7570;&#x5E38;&#x7D30;&#x80DE;&#x6027;, &#x30BB;&#x30EB;&#x5DEE;&#x3068;&#x30B1;&#x30E2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3; MIP 1 &alpha; ASMKO &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x6C17;&#x7BA1;&#x652F;&#x80BA;&#x80DE;&#x6D17;&#x6D44;&#x6DB2;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x4FEE;&#x6B63;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x9006;&#x306B; ASMKO &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x80BA;&#x80DE;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x5F62;&#x614B;&#x7570;&#x5E38;&#x3068;&#x5F7C;&#x3089;&#x8CAA;&#x98DF;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x809D;&#x5236;&#x9650;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;/&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x304B;&#x304F;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x8EE2;&#x5199;&#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306F;&#x3001;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9175;&#x7D20;&#x6297;&#x4F53;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8; AAV8 &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x809D;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x958B;&#x767A;&#x5185;&#x81D3;&#x306E;&#x75C7;&#x72B6;&#x3092;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x9178;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6B20;&#x4E4F;&#x75C7;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x500B;&#x4EBA;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3002;

AAV8 &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x809D;&#x5F0F;&#x9178;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30CD;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30CB;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3; &#x30FB; &#x30D4;&#x30C3;&#x30AF;&#x75C5;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x5185;&#x81D3;&#x81D3;&#x5668;&#x3067;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x6B20;&#x640D;&#x3092;&#x4FEE;&#x6B63;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC0B0; sphingomyelinase &#xACB0;&#xD54D;&#xC740; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; lysosomal &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; sphingomyelin &#xC800;&#xD558; &#xC2E4;&#xD328; lysosomal &#xC2A4;&#xD1A0;&#xB9AC;&#xC9C0; &#xC7A5;&#xC560;. Histiocytic &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880;&#xC5D0; &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xCD95;&#xC801; hepatosplenomegaly&#xACFC; &#xC2EC;&#xD55C; &#xD3D0; &#xC5FC;&#xC99D;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC0B0; sphingomyelinase &#xC0B0; sphingomyelinase &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; (ASMKO) &#xC950;&#xB97C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; AAV1 &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xB294; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCD95;&#xC801; &#xB41C; &#xAE30;&#xD310; &#xAC10;&#xC18C;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, sphingomyelin&#xC758; &#xB354; &#xC644;&#xC804; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xD1B5;&#xAD00; AAV1 &#xB300;&#xC2E0; AAV8 &#xAE30;&#xBC18; serotype &#xBCA1;&#xD130;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xD558; &#xACE0; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xAC04;&#xC7A5; &#xC2DD; AAV8 &#xC911;&#xC7AC; &#xB610;&#xD55C; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; cellularity, &#xC140; &#xCC28;&#xC774; &#xBC0F; chemokine MIP 1alpha ASMKO &#xC0DD;&#xC950;&#xC758; bronchoalveolar &#xC138;&#xCC99; &#xCCB4;&#xC561;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xB808;&#xBCA8;&#xC744; &#xC218;&#xC815; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCE58;&#xB8CC; &#xB610;&#xD55C; ASMKO &#xC950;&#xC758; &#xD3D0; &#xD3EC; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xCC29;&#xC624;&#xB97C; &#xBC18;&#xB300; &#xD558; &#xACE0; phagocytic &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xBCA1;&#xD130; &#xD588;&#xB2E4; &#xAC04; &#xC81C;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC15;/&#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC740;&#xB2C9; &#xB179;&#xC74C; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0;&#xB294; &#xC544;&#xBB34; &#xD56D; &#xCCB4; &#xAC80;&#xCD9C; &#xB410;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xB294; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; AAV8 &#xC911;&#xC7AC; &#xAC04;&#xC7A5; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC774;&#xB3D9;&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC0B0; sphingomyelinase &#xACB0;&#xD54D;&#xACFC; &#xAC1C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30;.

&#xC0B0; sphingomyelinase&#xC758; &#xAC04;&#xC7A5; &#xC2DD; AAV8 &#xC911;&#xC7AC; &#xB124; &#xC120;&#xD0DD; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC758; &#xB300;&#xC0AC; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xD574;&#xACB0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Deficiencia de esfingomielinasa &aacute;cida es un desorden de almacenamiento lisosomal, en el cual la hidrolasa lisosomal defectuosa no degradar la esfingomielina. La acumulaci&oacute;n resultante de sustrato en los lisosomas de c&eacute;lulas histiocytic conduce a hepatosplenomegalia y la inflamaci&oacute;n pulmonar severa. La administraci&oacute;n de un vector de AAV1 recombinante codificaci&oacute;n humana esfingomielinasa &aacute;cida a ratones knockout (ASMKO) de esfingomielinasa &aacute;cida efectivamente redujo el sustrato acumulado en todos los &oacute;rganos viscerales afectados. Sin embargo, m&aacute;s completa y r&aacute;pida separaci&oacute;n de esfingomielina se observ&oacute; cuando un vector de serotipo basadas en AAV8 fue utilizado en lugar de AAV1. Importante, AAV8-mediada la expresi&oacute;n hep&aacute;tica de niveles sostenidos de la enzima tambi&eacute;n corrige la celularidad anormal, diferenciales de la c&eacute;lula y los niveles de la Quimiocina MIP-1alfa en los l&iacute;quidos de lavado broncoalveolar de los ratones ASMKO. Tratamiento tambi&eacute;n revoc&oacute; las aberraciones morfol&oacute;gicas asociadas con los macr&oacute;fagos alveolares de ratones ASMKO y restaur&oacute; su actividad fagoc&iacute;tica. No hay anticuerpos contra la enzima expresa fueron detectado cuando los vectores virales fueron utilizados en conjunci&oacute;n con un cassette de la transcripci&oacute;n que una restricci&oacute;n de h&iacute;gado enhancer/promotor. Juntos, estos datos apoyan el desarrollo continuo de la transferencia g&eacute;nica hep&aacute;tica mediada por AAV8 como un enfoque para tratar las manifestaciones viscerales observan en individuos con deficiencia de esfingomielinasa &aacute;cida.

AAV8-mediada la expresi&oacute;n hep&aacute;tica de esfingomielinasa &aacute;cida corrige el defecto metab&oacute;lico en los &oacute;rganos viscerales de un modelo de rat&oacute;n de la enfermedad de Niemann-Pick.

&#x5177;&#x6709;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x6D3B;&#x6027;&#x65B0;&#x578B;&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2; (&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF09; &#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x5411;&#x91CF;&#x7684;&#x5230;&#x6765;&#x5DF2;&#x9F13;&#x52B1;&#x6B64;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x5E73;&#x53F0;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x5404;&#x79CD;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x4F18;&#x70B9;&#x7684;&#x91CD;&#x65B0;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A;&#x7F16;&#x7801;&#x8F93;&#x5165;&#x6CD5;&#x5E03;&#x91CC;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B; &alpha;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176; A &#x91CD;&#x7EC4;&#x57FA;&#x4E8E; AAV8 &#x7684;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7BA1;&#x7406;&#x4FBF;&#x5229;&#x66F4;&#x8FC5;&#x901F;&#x548C;&#x660E;&#x663E;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x6BD4; AAV2 &#x8F7D;&#x4F53;&#x9176;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x8FD9;&#x8F6C;&#x5316;&#x4E3A;&#x63D0;&#x9AD8;&#x6392;&#x96F7;&#x7684; globotriaosylceramide&#xFF0C;glycosphingolipid&#xFF0C;&#x5728;&#x6CD5;&#x5E03;&#x91CC;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x66F4;&#x6B63;&#x6240;&#x793A;&#x7684;&#x5468;&#x56F4;&#x795E;&#x7ECF;&#x75C5;&#x53D8;&#x4E0E;&#x6B64;&#x75C5;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x4E2D;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;&Alpha;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176;&#x8FD8;&#x5141;&#x8BB8;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x514D;&#x75AB;&#x8010;&#x53D7;&#x66F4;&#x8FC5;&#x901F;&#x611F;&#x5E94;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x66F4;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4E86;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; &alpha;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176; A &#x809D;&#x9650;&#x5236;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4; AAV8 &#x8F7D;&#x4F53;&#x65E9; 30 &#x5929;&#x540E;&#x5904;&#x7406;&#x8D4B;&#x4E88;&#x5230;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x9176;&#x514D;&#x75AB;&#x8010;&#x53D7;&#x3002;&#x52A8;&#x7269;&#x8868;&#x8FBE;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x6C34;&#x89E3;&#x9176;&#xFF0C;&#x5982;&#x90A3;&#x4E9B;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E0E;&#x57FA;&#x4E8E; AAV2 &#x7684;&#x5411;&#x91CF;&#x6216;&#x4F4E;&#x5242;&#x91CF;&#x7684;&#x57FA;&#x4E8E; AAV8 &#x7684;&#x5411;&#x91CF;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x80FD;&#x591F;&#x5236;&#x5B9A;&#x514D;&#x75AB;&#x8010;&#x53D7;&#xFF0C;&#x4F46;&#x53EA;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x66F4;&#x52A0;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x6BB5;&#x4E4B;&#x540E;&#x3002;Immunotolerized &#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x813E;&#x810F; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7EE7;&#x8F6C;&#x79FB;&#x538B;&#x5236;&#x5929;&#x771F;&#x6536;&#x4EF6;&#x4EBA;&#x52A8;&#x7269;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x6697;&#x793A;&#x53EF;&#x80FD;&#x4FC3;&#x6210;&#x8FD9;&#x79CD;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x6CD5;&#x5E03;&#x91CC;&#x5C0F;&#x9F20;&#x540E; AAV8 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684; &alpha;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176; A.&#x809D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x751F;&#x5316;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x8D64;&#x5B57;&#x7684;&#x6821;&#x6B63;

The advent of novel adeno-associated virus (AAV) serotype vectors with higher transduction activity has encouraged a re-evaluation of the merits of this delivery platform for a variety of diseases. We report here that administration of a recombinant AAV8-based serotype vector encoding human alpha-galactosidase A into Fabry mice facilitated more rapid and significantly higher levels of production of the enzyme than an AAV2 vector. This translated into improved clearance of globotriaosylceramide, the glycosphingolipid that accumulates in the lysosomes of affected Fabry cells, and to correction of the peripheral neuropathy shown associated with this disease. The higher levels of alpha-galactosidase A expression also allowed for a more rapid induction of immunotolerance to the enzyme. Recombinant AAV8 vectors that facilitated hepatic-restricted expression of high levels of alpha-galactosidase A conferred immunotolerance to the expressed enzyme as early as 30 days post-treatment. Animals expressing lower levels of the hydrolase, such as those treated with an AAV2-based vector or with lower doses of the AAV8-based vector, were also able to develop immunotolerance, but only after a more extended time period. Adoptive transfer of T cells isolated from the spleens of immunotolerized mice suppressed the formation of antibodies in naÃ¯ve recipient animals, suggesting the possible role of regulatory T cells in effecting this state.

Correction of the biochemical and functional deficits in fabry mice following AAV8-mediated hepatic expression of alpha-galactosidase A.

L&#39;av&egrave;nement des vecteurs de s&eacute;rotype nouveau adeno-associated virus (AAV) avec une plus grande activit&eacute; de transduction a encourag&eacute; une r&eacute;&eacute;valuation de la valeur de cette plate-forme de livraison pour une vari&eacute;t&eacute; de maladies. Nous rapportons ici que l&#39;administration d&#39;un recombinant AAV8 s&eacute;rotype vectoriel encodage humaine alpha-galactosidase A Fabry chez la souris a facilit&eacute; des niveaux significativement plus &eacute;lev&eacute;es et plus rapides de la production de l&#39;enzyme &agrave; un vecteur d&#39;AAV2. Cela se traduisait par le meilleur d&eacute;gagement du globotriaosylc&eacute;ramide, les glycosphingolipides qui s&#39;accumule dans les lysosomes des cellules affect&eacute;es de Fabry et &agrave; la correction de la neuropathie p&eacute;riph&eacute;rique indiqu&eacute;e associ&eacute; &agrave; cette maladie. Une expression a &eacute;galement permise une induction plus rapide de l&#39;immunotol&eacute;rance &agrave; l&#39;enzyme alpha-galactosidase sup&eacute;rieurs. Vecteurs recombinants de AAV8 qui facilite l&#39;expression h&eacute;patique restreints des niveaux &eacute;lev&eacute;s de l&#39;alpha-galactosidase A conf&eacute;r&eacute; immunotol&eacute;rance &agrave; l&#39;enzyme exprim&eacute;e d&egrave;s apr&egrave;s le traitement de 30 jours. Animaux exprimant des niveaux inf&eacute;rieurs de l&#39;hydrolase, tels que ceux trait&eacute;s avec un AAV2 vectoriel ou des doses plus faibles de la vectoriel AAV8, purent &eacute;galement d&eacute;velopper immunotol&eacute;rance, mais seulement apr&egrave;s qu&#39;un plus a prolong&eacute; la p&eacute;riode de temps. Transfert adoptif de lymphocytes T isol&eacute;es de la rate des souris immunotolerized a supprim&eacute; la formation d&#39;anticorps chez les animaux receveurs na&iuml;ve, sugg&eacute;rant le r&ocirc;le possible des lymphocytes T r&eacute;gulateurs de cet &Eacute;tat.

Correction des d&eacute;ficits biochimiques et fonctionnelles chez des souris fabry AAV8 v&eacute;hicul&eacute;e par l&#39;expression h&eacute;patique de l&#39;alpha-galactosidase A.

Die Einf&uuml;hrung des neuartigen Adeno-assoziierte Virus (AAV) Serotyp Vektoren mit h&ouml;heren Transduktion Aktivit&auml;t hat eine Neubewertung von den Vorz&uuml;gen dieser Lieferung-Plattform f&uuml;r eine Vielzahl von Krankheiten gef&ouml;rdert. Wir berichten hier, dass die Verwaltung eines rekombinanten AAV8 basierende Serotyp Vektors codieren Menschen Alpha-Galaktosidase A in Fabry-M&auml;usen schneller und deutlich h&ouml;here Niveaus der Produktion des Enzyms als ein Vektor AAV2 erleichtert. Dies &uuml;bersetzt verbesserte Abfertigung der Globotriaosylceramide, der Glycosphingolipide, die in den Lysosomen der betroffenen Fabry-Zellen und Korrektur der peripheren Neuropathie gezeigt, mit dieser Krankheit ansammelt. Die h&ouml;heren Ebenen der Alpha-Galaktosidase erlaubt ein Ausdruck auch f&uuml;r eine raschere Induktion von Immunotolerance an das Enzym. Rekombinante AAV8 Vektoren, die Leber-eingeschr&auml;nkte Ausdruck hoher Gehalte von Alpha-Galaktosidase A erleichtert verliehenen Immunotolerance auf das ausdr&uuml;ckliche Enzym bereits 30 Tage nach der Behandlung. Tiere, die untere Ebenen der Hydrolase, z. B. mit einem AAV2 basierenden Vektor behandelt oder mit niedrigeren Dosen des Vektors AAV8 basierende, zum Ausdruck zu bringen konnten auch entwickeln Immunotolerance, aber nur, nachdem ein mehr Zeitraum verl&auml;ngert. Adoptiven Transfer von T-Zellen aus der Milz von Immunotolerized M&auml;usen isoliert unterdr&uuml;ckt die Bildung von Antik&ouml;rpern in naive Empf&auml;nger Tiere, was auf die m&ouml;gliche Rolle von regulatorischen T-Zellen in diesem Zustand bewirken.

Korrektur der biochemische und funktionelle Defizite an Fabry-M&auml;usen, die nach AAV8-vermittelte hepatische Ausdruck von Alpha-Galaktosidase A.

L&#39;avvento dei vettori sierotipo romanzo virus adeno-associati (AAV) con maggiore attivit&agrave; di trasduzione ha incoraggiato una rivalutazione dei meriti di questa piattaforma di consegna per una variet&agrave; di malattie. Segnaliamo qui che amministrazione di un vettore del sierotipo di basata su AAV8 ricombinante, codifica umano alfa-galattosidasi A in topi Fabry agevolato pi&ugrave; rapidi e significativamente pi&ugrave; alti livelli di produzione dell&#39;enzima rispetto a un vettore AAV2. Questo tradotto in liquidazione migliorata di globotriaosilceramide, glicosfingolipidi che si accumulano nei lisosomi delle cellule colpite di Fabry e alla correzione della neuropatia periferica dimostrato associato a questa malattia. I livelli pi&ugrave; elevati di alfa-galattosidasi un&#39;espressione ha permesso anche per una pi&ugrave; rapida induzione dell&#39;Immunotolleranza all&#39;enzima. Ricombinante AAV8 vettori che hanno facilitato epatica limitata espressione di alti livelli dell&#39;alfa-galattosidasi A conferito Immunotolleranza all&#39;enzima espresso gi&agrave; nel post-trattamento di 30 giorni. Gli animali che esprimono livelli inferiori di idrolasi, come quelli trattati con un vettore basato su AAV2 o con dosi pi&ugrave; basse del vettore basato su AAV8, sono stati anche in grado di sviluppare Immunotolleranza, ma solo dopo un pi&ugrave; prolungato periodo di tempo. Trasferimento adottivo di cellule T isolate dalle milze di topi immunotolerized soppresso la formazione di anticorpi in animali destinatario na&iuml;ve, che suggerisce il possibile ruolo delle cellule T regolatorie ad effettuare questo stato.

Correzione dei deficit biochimico e funzionale nei topi fabry seguendo AAV8-mediata espressione epatica della alfa-galattosidasi A.

&#x5C0F;&#x8AAC;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x968F;&#x4F34;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (AAV) &#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x9AD8;&#x3044;&#x4F1D;&#x9054;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x51FA;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x75C5;&#x6C17;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30E1;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x518D;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3092;&#x5968;&#x52B1;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; &alpha;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; A &#x30D5;&#x30A1;&#x30D6;&#x30EA; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; AAV8 &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x7BA1;&#x7406;&#x3088;&#x308A;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E; AAV2 &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3088;&#x308A;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F; globotriaosylceramide &#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x30D5;&#x30A1;&#x30D6;&#x30EA; &#x30BB;&#x30EB;&#x3068;&#x793A;&#x3059;&#x672B;&#x68A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x969C;&#x5BB3;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x88DC;&#x6B63;&#x306E;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x84C4;&#x7A4D;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x7CD6;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3002;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E; &alpha;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x819C;&#x9175;&#x7D20;&#x3078;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3082;&#x8A31;&#x5BB9;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5F0F;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1; &#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; A &#x306E;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x809D;&#x767A;&#x73FE;&#x4FC3;&#x9032;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; AAV8 &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x819C;&#x306E;&#x65E9;&#x3051;&#x308C;&#x3070; 30 &#x65E5;&#x5F8C;&#x51E6;&#x7406;&#x6388;&#x4E0E;&#x3002;AAV2 &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; AAV8 &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x4F4E;&#x7528;&#x91CF;&#x6295;&#x4E0E;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x52D5;&#x7269;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3060;&#x3051;&#x3088;&#x308A;&#x62E1;&#x5F35;&#x671F;&#x9593;&#x5F8C;&#x306E;&#x819C;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x3002;Immunotolerized &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x813E;&#x81D3;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x305F; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x990A;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x3067;&#x3053;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5236;&#x5FA1;&#x6027; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;&#x53D7;&#x4FE1;&#x8005;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x6B21;&#x306E; AAV8 &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x809D;&#x5F0F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1; &#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; A &#x306E;&#x30D5;&#x30A1;&#x30D6;&#x30EA; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;, &#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x8D64;&#x5B57;&#x306E;&#x88DC;&#x6B63;

&#xB192;&#xC740; &#xBCC0;&#xD658; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC18C;&#xC124; adeno &#xC81C;&#xD734;&#xD574; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (AAV) serotype &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xCD9C;&#xD604;&#xC740; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC774; &#xC804;&#xB2EC; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC758; &#xC7A5;&#xC810; &#xB2E4;&#xC2DC;&#xB97C; &#xACA9;&#xB824; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC5EC;&#xAE30; Fabry &#xC950;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04; &#xC54C;&#xD30C;-galactosidase A &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; AAV8 &#xAE30;&#xBC18; serotype &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xAD00;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; AAV2 &#xBCA1;&#xD130; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; globotriaosylceramide, &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xB294; Fabry &#xC140;&#xC758; &#xBC0F; &#xC815;&#xC815; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBCD1;&#xC774;&#xC774; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880; &#xCD95;&#xC801; glycosphingolipid&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC815;&#xB9AC;&#xB85C; &#xBC88;&#xC5ED;. &#xC54C;&#xD30C;-galactosidase &#xB610;&#xD55C; &#xD6A8;&#xC18C; immunotolerance&#xC758; &#xB354; &#xBE60;&#xB978; &#xC720;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD;&#xC758; &#xC0C1;&#xBD80;. &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; AAV8 &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xC54C;&#xD30C;-galactosidase A&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD0A4; &#xBAA8; &#xC81C;&#xD55C; &#xC2DD; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xD45C;&#xD604; &#xD6A8;&#xC18C; immunotolerance&#xB97C; &#xBE60;&#xB974;&#xBA74; 30 &#xC77C; &#xD6C4; &#xC218; &#xC5EC;. &#xB3D9;&#xBB3C; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; AAV2 &#xAE30;&#xBC18; &#xBCA1;&#xD130; &#xB610;&#xB294; AAV8 &#xAE30;&#xBC18; &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC800;&#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB354; &#xAE30;&#xAC04;&#xC744; &#xC5F0;&#xC7A5; &#xD55C; &#xD6C4;&#xC5D0; immunotolerance&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xB3C4; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Immunotolerized &#xC950; spleens&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC785;&#xC591; &#xC804;&#xC1A1; &#xD55C;&#xB2E4; &#xAD6C; &#xC694;&#xC774; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADDC;&#xC81C; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; &#xBC1B;&#xB294; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xD615;&#xC131; &#xC5B5;&#xC81C;.

&#xC54C;&#xD30C;-galactosidase a &#xAC04;&#xC7A5; &#xC2DD; AAV8 &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; fabry &#xC950;&#xC758; &#xC0DD; &#xD654; &#xD559;&#xC801; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC801;&#xC790;&#xC758; &#xC815;&#xC815;

La llegada de vectores de serotipo nuevo virus adeno-asociado (AAV) con mayor actividad de transducci&oacute;n ha impulsado una reevaluaci&oacute;n de los m&eacute;ritos de esta plataforma de entrega de una variedad de enfermedades. Divulgamos aqu&iacute; que la administraci&oacute;n de un vector de serotipo de basadas en AAV8 recombinante codificaci&oacute;n humana alfa-galactosidasa A en ratones de Fabry facilit&oacute; m&aacute;s r&aacute;pidos y significativamente m&aacute;s altos niveles de producci&oacute;n de la enzima de un vector AAV2. Esto se tradujo en mejor separaci&oacute;n de globotriaosilceramida, el glycosphingolipid que se acumula en los lisosomas de c&eacute;lulas afectadas de Fabry y a la correcci&oacute;n de la neuropat&iacute;a perif&eacute;rica que se muestra asociados con esta enfermedad. Los niveles m&aacute;s altos de una expresi&oacute;n tambi&eacute;n permitida una inducci&oacute;n m&aacute;s r&aacute;pida de immunotolerance a la enzima alfa-galactosidasa. Vectores de AAV8 recombinantes que facilitaron la expresi&oacute;n hep&aacute;tica restringidos de altos niveles de alfa-galactosidasa A hab&iacute;an conferido immunotolerance a la enzima expresada tan pronto como los 30 d&iacute;as siguientes al tratamiento. Animales expresando niveles m&aacute;s bajos de la hidrolasa, como los tratados con un vector basado en AAV2 o con dosis m&aacute;s bajas del vector basadas en AAV8, tambi&eacute;n fueron capaces de desarrollar immunotolerance, pero s&oacute;lo despu&eacute;s de una m&aacute;s extendido per&iacute;odo de tiempo. La transferencia adoptiva de las c&eacute;lulas aisladas de los bazos de ratones immunotolerized suprime la formaci&oacute;n de anticuerpos en animales receptores de ingenuo, sugiriendo el posible papel de las c&eacute;lulas T reguladoras en efectuar este estado.

Correcci&oacute;n de los d&eacute;ficits funcionales y bioqu&iacute;micos en ratones de fabry siguiendo la expresi&oacute;n hep&aacute;tica mediada por AAV8 de la alfa-galactosidasa A.

Administration syst&eacute;mique de la sphingomy&eacute;linase acide recombinante (rhASM) &agrave; des souris d&eacute;ficientes ASM (ASMKO) traduit par hydrolyse du stockage anormal de sphingomy&eacute;line dans les lysosomes de la foie, la rate et le poumon. Cependant, l&#39;efficacit&eacute; avec laquelle le substrat est effac&eacute; du poumon, particuli&egrave;rement les macrophages alv&eacute;olaires, semble &ecirc;tre plus faible que les autres tissus visc&eacute;raux. Pour d&eacute;terminer si livraison des rhASM dans les espaces a&eacute;riens du poumon pourrait am&eacute;liorer la clairance de la sphingomy&eacute;line pulmonaire, enzyme a &eacute;t&eacute; administr&eacute; &agrave; des souris ASMKO par instillation intranasale. Traitement a entra&icirc;n&eacute; une r&eacute;duction significative et dose-d&eacute;pendante des niveaux de sphingomy&eacute;line dans le poumon. Concomitant avec cette r&eacute;duction des concentrations de substrat a &eacute;t&eacute; une diminution du montant de la cytokine pro-inflammatoire, MIP-1alpha, dans les liquides de lavage broncho-alv&eacute;olaire et une am&eacute;lioration de la pathologie pulmonaire. La r&eacute;duction maximale des niveaux de sphingomy&eacute;line poumon a observ&eacute; apr&egrave;s le traitement de 7 jours. Cependant, manifesterait du substrat a &eacute;t&eacute; not&eacute; &agrave; partir de jour 14 sugg&eacute;rant que r&eacute;p&eacute;t&eacute;e de traitements sera n&eacute;cessaires d&#39;effectuer une r&eacute;duction soutenue des niveaux de sphingomy&eacute;line. En plus de r&eacute;duire l&#39;anomalie du stockage dans le poumon, intranasale de rhASM a aussi entra&icirc;n&eacute; le d&eacute;gagement du substrat du foie et la rate. Par cons&eacute;quent, l&#39;administration pulmonaire de rhASM peut repr&eacute;senter un autre itin&eacute;raire de livraison pour traiter la pathologie visc&eacute;rale associ&eacute;e &agrave; une carence en ASM.

Administration pulmonaire de la sphingomy&eacute;linase acide recombinante am&eacute;liore la clairance de la sphingomy&eacute;line lysosomale des poumons d&#39;un mod&egrave;le murin de la maladie de Niemann-Pick.

La administraci&oacute;n sist&eacute;mica de esfingomielinasa &aacute;cida recombinante (rhASM) en ratones deficientes de ASM (ASMKO) da lugar a la hidr&oacute;lisis del almacenaje anormal de esfingomielina en los lisosomas del h&iacute;gado, bazo y pulm&oacute;n. Sin embargo, la eficacia con que el sustrato se borra del pulm&oacute;n, particularmente los macr&oacute;fagos alveolares, parece ser inferior a la de los otros tejidos viscerales. Para determinar si la entrega de rhASM en los espacios de aire del pulm&oacute;n podr&iacute;a acrecentar la separaci&oacute;n de esfingomielina pulmonar, enzima fue administrado a ratones ASMKO por instilaci&oacute;n intranasal. Tratamiento dio lugar a una reducci&oacute;n significativa y dosis-dependiente en niveles de esfingomielina en el pulm&oacute;n. Concomitante con esta reducci&oacute;n de los niveles de sustrato fue una disminuci&oacute;n en las cantidades de la citocina proinflamatoria, MIP-1alfa, en los l&iacute;quidos de lavado broncoalveolar y una mejora en la patolog&iacute;a pulmonar. M&aacute;xima reducci&oacute;n de los niveles de esfingomielina pulmonar se observ&oacute; en 7 d&iacute;as siguientes al tratamiento. Sin embargo, reacumulaci&oacute;n del sustrato se observ&oacute; a partir de d&iacute;a 14 sugiriendo que repetidos tratamientos ser&aacute; necesarios efectuar una reducci&oacute;n sostenida en los niveles de la esfingomielina. Adem&aacute;s de reducir la anormalidad de almacenamiento en el pulm&oacute;n, intranasal entrega de rhASM tambi&eacute;n result&oacute; en la remoci&oacute;n del sustrato del h&iacute;gado y del bazo. Por lo tanto, la administraci&oacute;n pulmonar de rhASM puede representar una ruta alternativa de entrega para abordar la patolog&iacute;a visceral asociada a deficiencia ASM.

Entrega pulmonar de esfingomielinasa &aacute;cida recombinante mejora la depuraci&oacute;n de esfingomielina lisosomal de los pulmones de un modelo murino de la enfermedad de Niemann-Pick.

&#x91CD;&#x7EC4;&#x9178; sphingomyelinase (rhASM) &#x5230; ASM &#x7F3A;&#x9677;&#x9F20; &#xFF08;ASMKO&#xFF09; &#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6027;&#x7BA1;&#x7406;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#x5B58;&#x50A8;&#x9798;&#x78F7;&#x8102;&#x5728;&#x809D;&#x3001; &#x813E;&#x3001; &#x80BA;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7684;&#x6C34;&#x89E3;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#x7684;&#x57FA;&#x6750;&#x6E05;&#x9664;&#x4ECE;&#x80BA;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x80BA;&#x6CE1;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x4ECE;&#x5176;&#x4ED6;&#x5185;&#x810F;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x8F83;&#x4F4E;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x7684; rhASM &#x5230;&#x80BA;&#x7684;&#x7A7A;&#x6C14;&#x7A7A;&#x95F4;&#x53EF;&#x52A0;&#x5F3A;&#x6E05;&#x80BA;&#x9798;&#x78F7;&#x8102;&#xFF0C;&#x9176;&#x88AB;&#x7ECF;&#x7BA1;&#x5230; ASMKO &#x5C0F;&#x9F20;&#x9F3B;&#x6EF4;&#x3002;&#x6CBB;&#x7597;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x80BA;&#x9798;&#x78F7;&#x8102;&#x6C34;&#x5E73;&#x663E;&#x8457;&#x548C;&#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x51CF;&#x5C11;&#x57FA;&#x677F;&#x6C34;&#x5E73;&#x4F34;&#x662F;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x6309;&#x63ED;&#x4FDD;&#x9669;&#x8BA1;&#x5212;-1alpha&#xFF0C;&#x652F;&#x6C14;&#x7BA1;&#x80BA;&#x6CE1;&#x704C;&#x6D17;&#x6DB2;&#x548C;&#x6539;&#x5584;&#x80BA;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x6B3E;&#x989D;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x5728; 7 &#x5929;&#x540E;&#x5904;&#x7406;&#x7EA2;&#x6F6E;&#x7684;&#x80BA;&#x9798;&#x78F7;&#x8102;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x6781;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x57FA;&#x677F;&#x7684;&#x4EFB;&#x4E18;&#x6307;&#x51FA;&#x8D77;&#x4EF7;&#x5929; 14 &#x6697;&#x793A;&#xFF0C;&#x91CD;&#x590D;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5C06;&#x5728;&#x5FC5;&#x8981;&#x65F6;&#x9798;&#x78F7;&#x8102;&#x6C34;&#x5E73;&#x6301;&#x7EED;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x51CF;&#x5C11;&#x5B58;&#x50A8;&#x5F02;&#x5E38;&#x7684;&#x80BA;&#xFF0C;&#x9F3B;&#x5185;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x7684; rhASM &#x8FD8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4ECE;&#x809D;&#x548C;&#x813E;&#x57FA;&#x677F;&#x7684;&#x95F4;&#x9699;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x80BA;&#x7BA1;&#x7406;&#x7684; rhASM &#x53EF;&#x80FD;&#x8868;&#x793A;&#x4EA4;&#x8D27;&#x7684;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x89E3;&#x51B3;&#x4F34; ASM &#x7F3A;&#x5931;&#x7684;&#x5185;&#x810F;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x53E6;&#x4E00;&#x6761;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;

&#x80BA;&#x90E8;&#x7ED9;&#x836F;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x9178; sphingomyelinase &#x63D0;&#x9AD8;&#x4E86;&#x901A;&#x5173;&#x7684;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x9798;&#x78F7;&#x8102;&#x4ECE;&#x80BA;&#x90E8;&#x7684;&#x5C3C;&#x66FC;-&#x75BE;&#x75C5;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

Systemic administration of recombinant acid sphingomyelinase (rhASM) into ASM deficient mice (ASMKO) results in hydrolysis of the abnormal storage of sphingomyelin in lysosomes of the liver, spleen and lung. However, the efficiency with which the substrate is cleared from the lung, particularly the alveolar macrophages, appears to be lower than from the other visceral tissues. To determine if delivery of rhASM into the air spaces of the lung could enhance clearance of pulmonary sphingomyelin, enzyme was administered to ASMKO mice by intranasal instillation. Treatment resulted in a significant and dose-dependent reduction in sphingomyelin levels in the lung. Concomitant with this reduction in substrate levels was a decrease in the amounts of the pro-inflammatory cytokine, MIP-1alpha, in the bronchoalveolar lavage fluids and an improvement in lung pathology. Maximal reduction of lung sphingomyelin levels was observed at 7 days post-treatment. However, reaccumulation of the substrate was noted starting at day 14 suggesting that repeated treatments will be necessary to effect a sustained reduction in sphingomyelin levels. In addition to reducing the storage abnormality in the lung, intranasal delivery of rhASM also resulted in clearance of the substrate from the liver and spleen. Hence, pulmonary administration of rhASM may represent an alternative route of delivery to address the visceral pathology associated with ASM deficiency.

Pulmonary delivery of recombinant acid sphingomyelinase improves clearance of lysosomal sphingomyelin from the lungs of a murine model of Niemann-Pick disease.

Systemischer Verabreichung rekombinanten saure Sphingomyelinase (RhASM) in ASM mangelhaft M&auml;use (ASMKO) f&uuml;hrt Hydrolyse von der anormalen Lagerung von Sphingomyelin in Lysosomen von Leber, Milz und Lunge. Jedoch scheint die Effizienz, mit der das Substrat aus der Lunge, insbesondere der alveol&auml;ren Makrophagen, deaktiviert ist, niedriger als von anderen viszeralen Gewebe. Um festzustellen, ob die Anlieferung der RhASM in die Luft-R&auml;ume der Lunge Rechnungsabschluss pulmonale Sphingomyelin steigern k&ouml;nnte, wurde Enzym durch intranasale Instillation ASMKO M&auml;usen verabreicht. Behandlung f&uuml;hrte zu einer signifikanten und dosisabh&auml;ngige Reduktion in Sphingomyelin Niveaus in der Lunge. Damit einhergehende mit dieser Reduktion Substrat war eine Verringerung der Mengen an die Pro-inflammatorische Zytokin, MIP-1alpha, in die Bronchoalveol&auml;re Lavage-Fl&uuml;ssigkeit und eine Verbesserung der Lunge Pathologie. Maximale Reduzierung der Lunge Sphingomyelin Ebenen wurde auf 7 Tage nach der Behandlung beobachtet. Reaccumulation des Substrats war jedoch ab Tag 14 darauf hindeutet, dass wiederholte Behandlungen notwendig um nachhaltig reduziert Sphingomyelin Ebenen wirksam werden. Neben der Verringerung der Speicher-Anomalie in der Lunge, f&uuml;hrte intranasale Lieferung von RhASM Abfertigung des Substrates von Leber und Milz. Pulmonale Verwaltung des RhASM kann daher eine alternative Route der Lieferung an die viszerale Pathologie zugeordnet ASM-Mangel beheben vertreten.

Pulmonale Lieferung von rekombinanten saure Sphingomyelinase verbessert die Abfertigung der lysosomalen Sphingomyelin aus den Lungen von einem murinen Modell der Niemann-Pick-Krankheit.

Somministrazione sistemica di sfingomielinasi acida ricombinante (rhASM) in topi carenti di ASM (ASMKO) si traduce in idrolisi dell&#39;archiviazione anomala della sfingomielina nei lisosomi del fegato, della milza e del polmone. Tuttavia, l&#39;efficienza con cui il substrato viene eliminato dai polmoni, soprattutto i macrofagi alveolari, sembra essere inferiore da altri tessuti viscerali. Per determinare se consegna del rhASM negli spazi d&#39;aria del polmone potrebbe migliorare la clearance della sfingomielina polmonare, l&#39;enzima &egrave; stato somministrato a topi ASMKO mediante instillazione intranasale. Trattamento ha determinato una riduzione significativa e dose-dipendente dei livelli di sfingomielina nel polmone. Concomitante con questa riduzione nei livelli di substrato &egrave; stata una diminuzione della quantit&agrave; di citochine pro-infiammatorie, MIP-1alpha, i fluidi di lavaggio broncoalveolare e un miglioramento nella patologia polmonare. Massima riduzione dei livelli di sfingomielina del polmone &egrave; stata osservata al post-trattamento di 7 giorni. Tuttavia, reaccumulation del substrato &egrave; stato osservato a partire da giorno 14 suggerendo che ripetuti trattamenti sar&agrave; necessari effettuare una costante riduzione dei livelli di sfingomielina. Oltre a ridurre l&#39;anomalia di archiviazione nel polmone, consegna intranasale di rhASM ha portato anche nella liquidazione del substrato da fegato e milza. Quindi, somministrazione polmonare di rhASM pu&ograve; rappresentare una via alternativa di consegna per affrontare la patologia viscerale associata a deficit di ASM.

Polmonare consegna della sfingomielinasi acida ricombinante migliora la clearance della sfingomielina lisosomiale dai polmoni di un modello murino di malattia di Niemann-Pick.

&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x9178;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (rhASM) &#x306E;&#x5168;&#x8EAB;&#x6295;&#x4E0E; ASM &#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; (ASMKO) &#x306B;&#x306F;&#x809D;&#x81D3;, &#x813E;&#x81D3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x80BA;&#x306E;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BE;&#x30FC;&#x30E0; &#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x53CD;&#x5FDC;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3067;&#x80BA;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x80BA;&#x80DE;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x677F;&#x3092;&#x30AA;&#x30D5;&#x52B9;&#x7387;&#x304B;&#x3089;&#x4ED6;&#x306E;&#x5185;&#x81D3;&#x7D44;&#x7E54;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x4F4E;&#x3044;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x914D;&#x4FE1; rhASM &#x306E;&#x80BA;&#x306E;&#x7A7A;&#x6C17;&#x306E;&#x30B9;&#x30DA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x80BA;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x9F3B;&#x8154;&#x5185;&#x6CE8;&#x5165;&#x306B;&#x3088;&#x308B; ASMKO &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x6295;&#x4E0E;&#x3057;&#x305F;.&#x6CBB;&#x7642;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30F3; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x80BA;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x304B;&#x3064;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58;&#x524A;&#x6E1B;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x57FA;&#x677F;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3092;&#x5408;&#x4F75;&#x3057;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x708E;&#x75C7;&#x7684;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;MIP 1 &alpha; &#x306E;&#x6C17;&#x7BA1;&#x652F;&#x80BA;&#x80DE;&#x6D17;&#x6D44;&#x6DB2;&#x3068;&#x80BA;&#x306E;&#x75C5;&#x7406;&#x306E;&#x5411;&#x4E0A;&#x3068;&#x91CF;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x80BA;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30F3; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x6700;&#x5927;&#x6E1B;&#x5C11; 7 &#x65E5;&#x5F8C;&#x51E6;&#x7406;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x518D;&#x8CAF;&#x7559;&#x306F;&#x4E00;&#x65E5; 14 &#x793A;&#x5506;&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x524A;&#x6E1B;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30F3; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x3067;&#x59CB;&#x307E;&#x308B;&#x6CE8;&#x610F;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B8;&#x7570;&#x5E38;&#x80BA;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;rhASM &#x306E;&#x9F3B;&#x8154;&#x5185;&#x914D;&#x4FE1;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x809D;&#x81D3;&#x3068;&#x813E;&#x81D3;&#x304B;&#x3089;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3067;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;rhASM &#x306E;&#x7D4C;&#x80BA;&#x6295;&#x4E0E; ASM &#x306E;&#x6B20;&#x4E4F;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x5185;&#x81D3;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x914D;&#x4FE1;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

&#x80BA;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x9178;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#x30E9;&#x30A4;&#x30BD;&#x30BE;&#x30FC;&#x30E0; &#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30F3; &#x30CB;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3; &#x30FB; &#x30D4;&#x30C3;&#x30AF;&#x75C5;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x80BA;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

ASM &#xACB0;&#xD54D; &#xC950; (ASMKO)&#xB85C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC0B0; sphingomyelinase (rhASM)&#xC758; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC758; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC2A4;&#xD1A0;&#xB9AC;&#xC9C0; &#xAC04;, &#xBE44;&#xC7A5;, &#xD3D0;&#xC758; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880;&#xC5D0; sphingomyelin&#xC758; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xD6A8;&#xC728;&#xC131; &#xC788;&#xB294; &#xAE30;&#xD310; &#xD2B9;&#xD788; &#xD3D0; &#xD3EC; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;, &#xD3D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC6CC;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB2E4;&#xB978; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB0AE;&#xC740; &#xAC83; &#xC778; &#xB4EF;&#xD558;&#xB2E4;. &#xD3D0;&#xC758; &#xACF5;&#xAE30; &#xACF5;&#xAC04;&#xC5D0; Rhasm&#xC758; &#xBC30;&#xB2EC; &#xD3D0; sphingomyelin&#xC758; &#xD074;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xB7F0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xACBD;&#xC6B0; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294; ASMKO &#xC950; intranasal &#xC8FC;&#xC785;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD00;&#xB9AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCE58;&#xB8CC;&#xB294; &#xD3D0;&#xC758; sphingomyelin &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC758;&#xC874; &#xAC10;&#xC18C; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xAE30;&#xD310; &#xC218;&#xC900;&#xC774;&#xC774; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xC5EC; &#xC218; &#xBC18;&#xD558;&#xB294; bronchoalveolar &#xC138;&#xCC99; &#xCCB4;&#xC561; &#xBC0F; &#xD3D0; &#xBCD1; &#xAC1C;&#xC120; &#xD504;&#xB85C;-&#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; cytokine MIP 1alpha &#xC591;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD3D0; sphingomyelin &#xB808;&#xBCA8;&#xC758; &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C; 7 &#xC77C; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xAE30;&#xD310;&#xC758; reaccumulation&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xB8E8; 14 &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBCF5; &#xCE58;&#xB8CC; sphingomyelin &#xB808;&#xBCA8;&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD544;&#xC694;&#xAC00; &#xC788;&#xC744; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC2DC;&#xC791; &#xC9C0;&#xC801; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C; &#xD3D0;&#xC5D0; &#xC800;&#xC7A5; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xAC10;&#xC18C; &#xC774;&#xC678;&#xC5D0; &#xAC04;, &#xBE44;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xD310;&#xC758; Rhasm&#xC758; intranasal &#xBC30;&#xB2EC; &#xACB0;&#xACFC;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, Rhasm&#xC758; &#xD3D0; &#xAD00;&#xB9AC; &#xBC30;&#xB2EC; ASM &#xACB0;&#xD54D;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xBCD1; &#xB9AC;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB300;&#xCCB4; &#xACBD;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0BC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD615; &#xC0B0; sphingomyelinase&#xC758; &#xD3D0; &#xC804;&#xB2EC; lysosomal sphingomyelin &#xB124; &#xBC1B;&#xC544; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; murine &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xD3D0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD074;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xB7F0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Cyclophosphamide in combination with immunotherapeutic approaches preferentially impinges on T(reg) activity and allows for robust generation of T cell effectors. Reduced dosages of cyclophosphamide are necessary to restrict its cytotoxic effects to the negative regulatory cell populations while sparing effector lymphocytes. We investigated cyclophosphamide dosing in combination with ZYC300, a PLG-encapsulated plasmid DNA vaccine which encodes the cytochrome P450 family member, CYP1B1, a known human tumor-associated antigen. In mice, three consecutive, low doses of cyclophosphamide comprised a superior regimen in enhancing the magnitude, diversity of epitopes, and avidity to individual epitopes of specific T cell responses when compared to regimens that used either a single low or a single high dose. Consecutive low doses of cyclophosphamide predominantly targeted T(regs) while sparing overall T lymphocyte counts. Thus, we report the synergistic activity of pharmacologic T(reg) depletion with cyclophosphamide on quantitatively and qualitatively increasing T cell responses to a known human tumor-associated antigen.

Consecutive low doses of cyclophosphamide preferentially target Tregs and potentiate T cell responses induced by DNA PLG microparticle immunization.

&#x73AF;&#x78F7;&#x9170;&#x80FA;&#x4E0E;&#x514D;&#x75AB;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F18;&#x5148; T(reg) &#x6D3B;&#x52A8;&#x53D7;&#x5230;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5141;&#x8BB8;&#x9C81;&#x68D2;&#x4E00;&#x4EE3;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;&#x73AF;&#x78F7;&#x9170;&#x80FA;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x5242;&#x91CF;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x76D8;&#x6548;&#x5E94;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x540C;&#x65F6;&#x5411;&#x8D1F;&#x8C03;&#x63A7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EBA;&#x53E3;&#x9650;&#x5236;&#x5B83;&#x7684;&#x6BD2;&#x6027;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BF9;&#x73AF;&#x78F7;&#x9170;&#x80FA;&#x52A0;&#x836F;&#x7ED3;&#x5408; ZYC300&#xFF0C;&#x4E00; PLG &#x5C01;&#x88C5;&#x7684;&#x8D28;&#x7C92; DNA &#x75AB;&#x82D7;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5C06;&#x7F16;&#x7801;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20; p450 &#x6C27;&#x5316;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80BF;&#x7624;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F; CYP1B1&#xFF0C;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x4E09;&#x4E2A;&#x8FDE;&#x7EED;&#x7684;&#x3001; &#x4F4E;&#x5242;&#x91CF;&#x73AF;&#x78F7;&#x9170;&#x80FA;&#x7EC4;&#x6210;&#x4F18;&#x8D8A;&#x517B;&#x751F;&#x63D0;&#x9AD8;&#x89C4;&#x6A21;&#x3001; &#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5411;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x65F6;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x5355;&#x4E00;&#x4F4E;&#x6216;&#x5355;&#x4E00;&#x9AD8;&#x5242;&#x91CF;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6848;&#x4E2A;&#x522B;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x3002;&#x8FDE;&#x7EED;&#x4F4E;&#x5242;&#x91CF;&#x73AF;&#x78F7;&#x9170;&#x80FA;&#x4E3A;&#x4E3B;&#x76D8;&#x6574;&#x4F53; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BA1;&#x6570;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#x9488;&#x5BF9; T(regs)&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x534F;&#x540C;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E0E;&#x73AF;&#x78F7;&#x9170;&#x80FA;&#x7684;&#x836F;&#x7406; T(reg) &#x8017;&#x5C3D;&#x7684;&#x8D28;&#x548C;&#x91CF;&#x65B9;&#x9762;&#x589E;&#x52A0;&#x5BF9;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80BF;&#x7624;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

&#x8FDE;&#x7EED;&#x4F4E;&#x5242;&#x91CF;&#x73AF;&#x78F7;&#x9170;&#x80FA;&#x4F18;&#x5148;&#x76EE;&#x6807; Tregs &#x548C;&#x4FC3;&#x8FDB; DNA PLG &#x5FAE;&#x7C92;&#x514D;&#x75AB;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

Cyclophosphamide en association avec des approches immunoth&eacute;rapeutiques pr&eacute;f&eacute;rentiellement empi&egrave;te sur l&#39;activit&eacute; T(reg) et permet de g&eacute;n&eacute;ration robuste des lymphocytes T effecteurs. R&eacute;duction des doses de cyclophosphamide sont n&eacute;cessaires pour limiter ses effets cytotoxiques pour les populations de lymphocytes r&eacute;gulateurs n&eacute;gatifs tout en &eacute;pargnant les lymphocytes effecteurs. Nous avons &eacute;tudi&eacute; la cyclophosphamide dosage en association avec ZYC300, un vaccin &agrave; ADN plasmide PLG encapsul&eacute; qui encode le cytochrome P450 membre de la famille, CYP1B1, un antig&egrave;ne d&#39;associ&eacute;es aux tumeurs humain connu. Chez les souris, trois cons&eacute;cutives, &agrave; faibles doses de cyclophosphamide comprenant un r&eacute;gime sup&eacute;rieur dans l&#39;am&eacute;lioration de l&#39;ampleur, la diversit&eacute; des &eacute;pitopes et avidit&eacute; aux diff&eacute;rents &eacute;pitopes des lymphocytes T sp&eacute;cifiques par rapport aux sch&eacute;mas qui a utilis&eacute; un seul creux ou une seule dose &eacute;lev&eacute;e. Cons&eacute;cutifs faibles doses de cyclophosphamide cibl&eacute; principalement T(regs) tout en &eacute;pargnant l&#39;ensemble des lymphocytes T. Ainsi, nous pr&eacute;sentons l&#39;activit&eacute; synergique de l&#39;appauvrissement T(reg) pharmacologique avec cyclophosphamide quantitativement et qualitativement augmentation des lymphocytes T &agrave; un antig&egrave;ne d&#39;associ&eacute;es aux tumeurs humain connu.

Cons&eacute;cutifs faibles doses de cyclophosphamide pr&eacute;f&eacute;rentiellement ciblent Tregs et potentialisent les lymphocytes T induites par la vaccination au moyen de microparticules ADN PLG.

Cyclophosphamid in Kombination mit immuntherapeutischen Ans&auml;tze bevorzugt auf T(reg) T&auml;tigkeit auswirkt und robuste Generation von T-Zell-Effektoren erm&ouml;glicht. Geringere Dosierungen von Cyclophosphamid sind notwendig, um seine zytotoxische Wirkung auf die negative regulatorische Zelle Bev&ouml;lkerungen zu beschr&auml;nken, w&auml;hrend Effektor Lymphozyten zu schonen. Wir untersuchten Cyclophosphamid Dosierung in Kombination mit ZYC300, ein PLG-gekapselte Plasmid-DNA-Impfstoff das codiert die Cytochrom P450-Familienmitglied, CYP1B1, einem bekannten menschlichen Tumor-assoziierte Antigen. Bei M&auml;usen umfasste drei aufeinanderfolgende, niedrige Dosen von Cyclophosphamid eine &uuml;berlegene Therapie bei der Verbesserung der Helligkeit, Vielfalt der Epitope und Gier zu einzelnen Epitope von spezifischen T-Zell-Antworten Vergleich zu Therapien, die entweder eine einzelne niedrige oder hohe Einzeldosis verwendet. Aufeinanderfolgende niedrige Dosen von Cyclophosphamid gezielt &uuml;berwiegend T(regs) w&auml;hrend insgesamt T-Lymphozyten Grafen zu schonen. So berichten wir die synergistische T&auml;tigkeit der pharmakologische T(reg) Ersch&ouml;pfung mit Cyclophosphamid quantitativ und qualitativ erh&ouml;ht T Zelle Antworten zu einem bekannten menschlichen Tumor-assoziierte Antigen.

Aufeinanderfolgende niedrige Dosen von Cyclophosphamid bevorzugt Ziel Tregs und T-Zell Reaktionen induziert durch DNA-PLG Mikropartikel Immunisierung beigemischt.

Ciclofosfamide in combinazione con gli approcci immunotherapeutic preferenzialmente incida sulle attivit&agrave; T(reg) e permette di robusta generazione di cellule T effettori. Ridotti dosaggi di ciclofosfamide sono necessarie per limitare i suoi effetti citotossici per le popolazioni di cellule normativo negativo mentre risparmiatori linfociti effector. Abbiamo studiato la ciclofosfamide dosaggio in combinazione con ZYC300, un vaccino del DNA del plasmide PLG-incapsulati che codifica per il citocromo P450 membro della famiglia, CYP1B1, un noto antigene umano associato al tumore. Nei topi, tre consecutivi, basse dosi di ciclofosfamide comprendono un regime superiore nel migliorare la grandezza, la diversit&agrave; degli epitopi e avidit&agrave; di singoli epitopi delle risposte delle cellule T specifiche rispetto ai regimi che ha utilizzato un basso singolo o una singola dose elevata. Consecutivi basse dosi di ciclofosfamide mirati principalmente T(regs) mentre risparmiatori conta totale dei linfociti T. Cos&igrave;, segnaliamo l&#39;attivit&agrave; sinergica di deplezione T(reg) farmacologica con ciclofosfamide su quantitativamente e qualitativamente aumentando T cell responses to un noto antigene umano associato al tumore.

Consecutivi basse dosi di ciclofosfamide preferenzialmente target Tregs e potenziare le risposte delle cellule T indotte dall&#39;immunizzazione microparticelle DNA PLG.

&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A9;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x512A;&#x5148;&#x7684; T(reg) &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306B;&#x5165;&#x5C04;&#x3057;&#x3066; T &#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x751F;&#x6210;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F4E;&#x7528;&#x91CF;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A9;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30C9;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x3092;&#x6E29;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x8CA0;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30C9; P450 &#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3001;CYP1B1&#x3001;&#x65E2;&#x77E5;&#x3072;&#x3068;&#x816B;&#x760D;&#x95A2;&#x9023;&#x6297;&#x539F;&#x306E; ZYC300&#x3001;&#x30C1;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30E0; &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9; PLG &#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB; &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9; DNA &#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x4F75;&#x7528;&#x6295;&#x4E0E;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;3 &#x3064;&#x306E;&#x9023;&#x7D9A;&#x3001;&#x4F4E;&#x7528;&#x91CF;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A9;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30C9;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x3001;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7; &#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB;&#x4F4E;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x9AD8;&#x7528;&#x91CF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30EC;&#x30B8;&#x30E1;&#x30F3;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x7684; T &#x7D30;&#x80DE;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x30EC;&#x30B8;&#x30E1;&#x30F3;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3002;&#x9023;&#x7D9A;&#x4F4E;&#x7528;&#x91CF;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A9;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30C9;&#x306E;&#x4E3B;&#x306B;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A; T &#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x3092;&#x6E29;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089; T(regs) &#x3092;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x65E2;&#x77E5;&#x3072;&#x3068;&#x816B;&#x760D;&#x95A2;&#x9023;&#x6297;&#x539F;&#x3092; T &#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5897;&#x3084;&#x3059;&#x306B;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684; T(reg) &#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x3068;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A9;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30C9;&#x306E;&#x76F8;&#x4E57;&#x7684;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9023;&#x7D9A;&#x4F4E;&#x7528;&#x91CF;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A9;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30C9;&#x306E;&#x512A;&#x5148;&#x7684; Treg &#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;DNA PLG &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AF;&#x30EB;&#x4E88;&#x9632;&#x63A5;&#x7A2E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B; T &#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Immunotherapeutic &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xBC95; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; cyclophosphamide &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; T(reg) &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; impinges &#xD558; &#xACE0; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC138;&#xB300;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Cyclophosphamide&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; effector &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0B4;&#xB824;&#xC8FC;&#xB294; cytotoxic &#xD6A8;&#xACFC; &#xB124;&#xAC70;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xADDC;&#xC81C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C;&#xD560; &#xD544;&#xC694;&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC870;&#xC0AC; cyclophosphamide P450 &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;, CYP1B1&#xB294; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC885;&#xC591; &#xAD00;&#xB828; &#xD56D; &#xC6D0; ZYC300&#xB294; &#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xB294; PLG &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; &#xB41C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; DNA &#xBC31;&#xC2E0;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBA39;&#xC774; &#xC9C0;. &#xC950;, cyclophosphamide&#xC758; 3 &#xB144; &#xC5F0;&#xC18D;, &#xB0AE;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC9C4;&#xB3C4; epitopes, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB85C;&#xC6B0; &#xB610;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB192;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; regimens&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD2B9;&#xC815; T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xAC1C;&#xBCC4; epitopes &#xC695;&#xB9DD;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; &#xAC15;&#xD654;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; &#xCC98;&#xBC29;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131;. &#xC8FC;&#xB85C; cyclophosphamide&#xC758; &#xC5F0;&#xC18D; &#xB0AE;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC740; &#xC804;&#xCCB4; T &#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; &#xC218;&#xB97C; &#xC0B4;&#xB824;&#xC8FC;&#xB294; t(regs)&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC885;&#xC591; &#xAD00;&#xB828; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC5D0; T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xC591;&#xC801; &#xBC0F; &#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; cyclophosphamide&#xC640; pharmacologic T(reg) &#xACE0;&#xAC08;&#xC758; &#xC2DC;&#xB108;&#xC9C0; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBCF4;&#xACE0;.

&#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; cyclophosphamide&#xC758; &#xC5F0;&#xC18D; &#xB0AE;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; Tregs &#xB300;&#xC0C1;&#xACFC; DNA PLG microparticle &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5; &#xC57D;&#xD6A8;.

Ciclofosfamida en combinaci&oacute;n con enfoques inmunoterap&eacute;uticos preferentemente afecta a la actividad de T(reg) y permite s&oacute;lida generaci&oacute;n de c&eacute;lulas T efectores. Dosis reducidas de ciclofosfamida son necesarias para limitar sus efectos citot&oacute;xicos a las poblaciones celulares regulador negativo mientras que ahorra los linfocitos efectores. Investigamos ciclofosfamida dosis en combinaci&oacute;n con ZYC300, una vacuna de ADN pl&aacute;smido PLG-encapsulado que codifica el citocromo P450 familiar, CYP1B1, un ant&iacute;geno de tumor asociado humano conocido. En ratones, tres consecutivas, bajas dosis de ciclofosfamida compuesto por un r&eacute;gimen superior en la mejora de la magnitud, diversidad de ep&iacute;topes y avidez epitopes individuales de las respuestas de c&eacute;lulas T espec&iacute;ficas, en comparaci&oacute;n con los reg&iacute;menes que utilizan una sola baja o una sola dosis alta. Consecutivas dosis bajas de ciclofosfamida dirigido principalmente a T(regs) mientras que ahorra la cuenta total de linfocitos T. As&iacute;, divulgamos la actividad sin&eacute;rgica de agotamiento de T(reg) farmacol&oacute;gico con ciclofosfamida en cuantitativa y cualitativamente aumentar las respuestas de c&eacute;lulas T a un ant&iacute;geno de tumor asociado humano conocido.

Consecutivas dosis bajas de ciclofosfamida preferencial blanco Tregs y potencian las respuestas de c&eacute;lulas T inducidas por vacunaci&oacute;n de micropart&iacute;culas de ADN PLG.

&#x5DF2;&#x88AB;&#x5C01;&#x88C5;&#x5728;&#x4FDD;&#x5229;-&#x7F9F;&#x57FA;&#x4E19;&#x916F; (PLG&#xFF09; &#x5FAE;&#x7C92;&#x4E2D;&#x7684; DNA &#x8D28;&#x7C92;&#x514D;&#x75AB;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x5BF9;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x51FA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8D28;&#x7C92; DNA&#xFF0C;&#x8BF1;&#x53D1;&#x7F16;&#x7801;&#x7684; antigen(s) &#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x5E94;&#x7B54;&#x3002;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x7535;&#x8109;&#x51B2; (EPT) unformulated &#x7684; DNA &#x6CE8;&#x5C04;&#x540E;&#x7ACB;&#x5373;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x589E;&#x52A0;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528; EPT &#x4E4B;&#x524D;&#x6216;&#x4E4B;&#x540E; PLG &#x5C01;&#x88C5;&#x7684;&#x8D28;&#x7C92; DNA &#x514D;&#x75AB;&#x63A5;&#x79CD;&#x6D4B;&#x8BD5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426;&#x63D0;&#x9AD8;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#xFF0C;&#x5C31;&#x4F1A;&#x4EA7;&#x751F;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x5408;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E24;&#x8005;&#x52A0;&#x5F3A;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x548C;&#x66F4;&#x53EF;&#x9760;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F; ept &#x6280;&#x672F;&#x88AB;&#x5E94;&#x7528;&#x5728;&#x514D;&#x75AB;&#x63A5;&#x79CD;&#x524D;&#x3002;&#x6570;&#x636E;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E;&#x62DB;&#x52DF;&#x5230;&#x6CE8;&#x5C04;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x660E;&#x663E;&#x52A0;&#x5F3A;&#x4E86; EPT&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x5171;&#x7BA1;&#x7684;&#x5FAE;&#x7C92;&#x548C; EPT &#x8FD8;&#x5B9E;&#x884C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x574F;&#x6B7B;&#x808C;&#x8089;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x3001; &#x9020;&#x6210;&#x6301;&#x4E45;&#x6027; Th 1 &#x8C03;&#x5236;&#x56E0;&#x5B50;&#x751F;&#x4EA7;&#x548C;&#x4E24;&#x79CD;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x4F50;&#x5242;&#x3001; &#x5C3F;&#x9178;&#x4E0E; HMGB1 &#x91CA;&#x653E;&#x5BFC;&#x81F4;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x589E;&#x52A0;&#x514D;&#x75AB;&#x539F;&#x6027;&#x89C2;&#x5BDF;&#x4E0E; EPT PLG &#x5C01;&#x88C5;&#x7684;&#x8D28;&#x7C92; DNA &#x5FAE;&#x7C92;&#x7ED3;&#x5408;&#x5728;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x5448;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x66F4;&#x6709;&#x529B;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x6BD4;&#x89C2;&#x5BDF;&#x4E0E;&#x514D;&#x75AB;&#x63A5;&#x79CD;&#x5355;&#x62DB;&#x8058;&#x589E;&#x591A;&#x6240;&#x81F4;&#x3002;

&#x4F53;&#x5185;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x589E;&#x5F3A;&#x805A;&#x4E19;-&#x7F9F;&#x57FA; (PLG) &#x8D28;&#x7C92; DNA &#x514D;&#x75AB;&#x7684;&#x6548;&#x80FD;&#x3002;

Immunization with plasmid DNA that has been encapsulated in poly lactide-co-glycolide (PLG) microparticles targets the plasmid DNA to antigen presenting cells and elicits immune responses to the encoded antigen(s). Application of a series of electrical pulses (EPT) immediately following unformulated DNA injection enhances expression of the encoded antigen and increases immune responses. The combination of using EPT before or after PLG-encapsulated plasmid DNA immunization was tested to determine if enhanced immune responses would be generated. The results show that the combination lead to both enhanced expression of antigen and more robust T cell responses, even if EPT was applied prior to immunization. The data also demonstrate that recruitment of phagocytes to the injection site was markedly enhanced by EPT, and this resulted in an increase of the antigen expression levels in these cells. Co-administration of microparticles and EPT also effected localized necrosis of muscle fibers, caused persistent Th-1-modulated cytokine production, and lead to the release of two endogenous adjuvants, uric acid and HMGB1. In all, we describe that increased immunogenicity observed with the combination of PLG-encapsulated plasmid DNA microparticle with EPT was caused by an increase in the recruitment of antigen presenting cells which mediated a more robust T cell response than observed with immunization alone.

In vivo electroporation enhances the potency of poly-lactide co-glycolide (PLG) plasmid DNA immunization.

La vaccination par ADN qui a &eacute;t&eacute; encapsul&eacute;e dans poly lactide-co-glycolide (PLG) microparticules plasmidique cible l&#39;ADN de plasmide de cellules pr&eacute;sentatrices d&#39;antig&egrave;ne et suscite des r&eacute;actions immunitaires &agrave; des antig&egrave;nes cod&eacute;s. Application d&#39;une s&eacute;rie d&#39;impulsions &eacute;lectriques (EPT) imm&eacute;diatement apr&egrave;s injection d&#39;ADN informul&eacute;e augmente l&#39;expression de l&#39;antig&egrave;ne cod&eacute; et augmente la r&eacute;ponse immunitaire. La combinaison des EPT avant ou apr&egrave;s que vaccination ADN plasmide encapsul&eacute; PLG a &eacute;t&eacute; test&eacute;e pour d&eacute;terminer si des r&eacute;ponses immunitaires am&eacute;lior&eacute;es sera g&eacute;n&eacute;r&eacute;es. Les r&eacute;sultats montrent que la combinaison entra&icirc;ne tous deux am&eacute;lior&eacute;s expression de l&#39;antig&egrave;ne et les r&eacute;ponses des cellules T plus robustes, m&ecirc;me si l&#39;EPT a &eacute;t&eacute; appliqu&eacute;e avant la vaccination. Les donn&eacute;es montrent &eacute;galement que le recrutement des phagocytes vers le site d&#39;injection a &eacute;t&eacute; fortement amplifi&eacute;e par l&#39;EPT, et il en est r&eacute;sult&eacute; une augmentation des niveaux d&#39;expression de l&#39;antig&egrave;ne dans ces cellules. L&#39;administration concomitante de microparticules et EPT &eacute;galement effectu&eacute; localis&eacute; n&eacute;crose des fibres musculaires, la production de cytokines de Th-1-modul&eacute; persistants caus&eacute;s et conduire &agrave; la lib&eacute;ration de deux adjuvants endog&egrave;nes, l&#39;acide urique et HMGB1. Dans l&#39;ensemble, les auteurs d&eacute;crivent qu&#39;immunog&eacute;nicit&eacute; accrue observ&eacute;e avec la combinaison de microparticules ADN plasmide PLG encapsul&eacute; avec l&#39;EPT a &eacute;t&eacute; caus&eacute;e par une augmentation dans le recrutement des cellules qui v&eacute;hicul&eacute;e par une r&eacute;ponse des lymphocytes T plus robuste que celle observ&eacute;e avec la vaccination seul pr&eacute;sentatrices.

&Eacute;lectroporation in vivo am&eacute;liore l&#39;efficacit&eacute; de la vaccination d&#39;ADN poly lactide co-glycolide (PLG) plasmide.

Immunisierung mit Plasmid-DNA, die in Poly Lactid-co-Glycolide (PLG) Mikropartikel gekapselt worden hat zielt auf die Plasmid-DNA, Antigen-pr&auml;sentierende Zellen und entlockt Immunantworten die kodierte Antigene. Anwendung einer Reihe von elektrischen Impulsen (EPT) unmittelbar nach unformulated DNA-Injektion Ausdruck des codierten Antigens verbessert und erh&ouml;ht die Immunantworten. Die Kombination mit EPT, bevor oder nachdem PLG-gekapselte Plasmid-DNA-Immunisierung getestet wurde, um festzustellen, ob erweiterte Immunantworten generiert w&uuml;rden. Die Ergebnisse zeigen verbessert, dass die Kombination dazu f&uuml;hren, dass sowohl Ausdruck des Antigens und robuster T Zelle Antworten, auch wenn EPT vor Immunisierung angewendet wurde. Die Daten zeigen auch, dass die Rekrutierung von Fresszellen an der Injektionsstelle wurde von EPT deutlich verbessert, und dies f&uuml;hrte zu einer Erh&ouml;hung der Antigen-Ausdruck-Niveaus in diese Zellen. Die gleichzeitige Gabe von Mikropartikel und EPT auch bewirkt lokalisiert Nekrose der Muskelfasern, verursacht best&auml;ndige Th-1-moduliert Cytokine Produktion und dazu f&uuml;hren, dass die Ver&ouml;ffentlichung von zwei endogenen Adjuvantien, Harns&auml;ure und HMGB1. Alles in allem beschreiben wir erh&ouml;hten Immunogenit&auml;t beobachtet mit der Kombination von PLG-gekapselte Plasmid DNA Mikropartikel mit EPT verursacht durch eine Zunahme der Rekrutierung von Antigen pr&auml;sentiert von Zellen, die eine h&auml;rtere T-Zell-Antwort als beobachtet mit Immunisierung allein vermittelt.

In-vivo Electroporation erh&ouml;ht die St&auml;rke der Poly-Lactid co-Glycolide (PLG) Plasmid-DNA-Immunisierung.

Immunizzazione con plasmide DNA che &egrave; stato incapsulato in poly lactide-co-glicolide (PLG) microparticelle rivolge il DNA del plasmide a presentare cellule antigene e induce risposte immunitarie per il antigen(s) codificato. Applicazione di una serie di impulsi elettrici (EPT) immediatamente dopo iniezione di DNA quanto aumenta l&#39;espressione dell&#39;antigene codificato e aumenta la risposta immunitaria. La combinazione dell&#39;utilizzo dell&#39;EPT prima o dopo l&#39;immunizzazione del DNA del plasmide incapsulato PLG &egrave; stato testato per determinare se una maggiore risposta immunitaria sarebbe generato. I risultati mostrano che la combinazione portano a sia rafforzata espressione dell&#39;antigene e le risposte delle cellule T pi&ugrave; robuste, anche se EPT &egrave; stato applicato prima dell&#39;immunizzazione. I dati dimostrano anche che il reclutamento dei fagociti al sito di iniezione &egrave; stato notevolmente migliorato dall&#39;EPT, e questo ha provocato un aumento dei livelli di espressione dell&#39;antigene in queste cellule. La co-somministrazione di microparticelle ed EPT anche effettuata localizzata con necrosi delle fibre muscolari, produzione di causato persistenti citochine Th-1-modulato e piombo per il rilascio di due adiuvanti endogeni, acido urico e HMGB1. In tutto, descriviamo che maggiore immunogenicit&agrave; osservati con la combinazione di microparticelle del DNA del plasmide PLG-incapsulati con EPT &egrave; stato causato da un aumento del reclutamento di cellule che mediata una risposta delle cellule T pi&ugrave; robusta rispetto a osservato con immunizzazione da solo presentanti l&#39;antigene.

Elettroporazione in vivo migliora la potenza di immunizzazione di poli-lactide co-glicolide (PLG) plasmide DNA.

&#x4E88;&#x9632;&#x63A5;&#x7A2E;&#x30DD;&#x30EA;&#x4E73;&#x9178; co &#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178; (PLG) &#x5FAE;&#x7C92;&#x5B50;&#x3067;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; DNA &#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C9; DNA, &#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x793A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6297;&#x539F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Unformulated DNA &#x6CE8;&#x5165;&#x76F4;&#x5F8C;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x4E00;&#x9023;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9; (EPT) &#x306F;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5897;&#x5927;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x524D;&#x306B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F; PLG &#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB; &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9; DNA &#x514D;&#x75AB;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x5F8C; EPT &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3002;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3092;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3001;EPT &#x514D;&#x75AB;&#x524D;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3067;&#x3082;&#x7D50;&#x679C;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x4E21;&#x65B9;&#x5F0F;&#x6297;&#x539F;&#x3068;&#x3088;&#x308A;&#x5805;&#x7262;&#x306A; T &#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x3002;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x98DF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6CE8;&#x5C04;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x306F; EPT &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x767A;&#x73FE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3067;&#x8D77;&#x56E0;&#x3092;&#x30C7;&#x30E2;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5FAE;&#x7C92;&#x5B50;&#x3068;&#x3082;&#x5F71;&#x97FF; EPT &#x306E;&#x4F75;&#x7528;&#x58CA;&#x6B7B;&#x7B4B;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x3001;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6C38;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A; Th 1 &#x5909;&#x8ABF;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x7523;&#x751F;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 2 &#x3064;&#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30A2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C8;&#x3001;&#x5C3F;&#x9178;&#x3068; HMGB1 &#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; PLG &#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB; &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9; DNA &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AF;&#x30EB; EPT &#x3068;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3067;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5897;&#x52A0;&#x514D;&#x75AB;&#x539F;&#x6027;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x793A;&#x4E88;&#x9632;&#x63A5;&#x7A2E;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3088;&#x308A;&#x5805;&#x7262;&#x306A; T &#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

In vivo &#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30DD;&#x30EA;&#x4E73;&#x9178; co &#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178; (PLG) &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9; DNA &#x514D;&#x75AB;&#x529B;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; DNA &#xD3F4; &#xB9AC; lactide-co-glycolide (PLG) &#xB4A4;&#xC5D0; &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB294; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC81C;&#xC2DC; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; DNA&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; antigen(s) &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; elicits. Unformulated DNA &#xC8FC;&#xC785; &#xC9C1;&#xD6C4; &#xC804;&#xAE30; &#xD384;&#xC2A4; (EPT)&#xC758; &#xC77C;&#xB828;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; antigen&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00;. &#xC804;&#xC774;&#xB098; &#xD6C4; PLG &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; &#xB41C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; DNA &#xBA74;&#xC5ED; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB294; EPT&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC870;&#xD569; &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xADF8; &#xB458;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xC2DD; &#xD56D; &#xC6D0; &#xBC0F; &#xB354; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5; EPT &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;. &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB85C; phagocytes&#xC758; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xC740; &#xC131;&#xBCC4;, &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xD558; &#xACE0;&#xC774;&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC2DD; &#xC218;&#xC900; &#xC99D;&#xAC00; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;. Co-administration &#xB4A4; &#xBC0F; &#xC131;&#xBCC4; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xB610;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xADFC;&#xC721; &#xC12C;&#xC720;, &#xC6D0;&#xC778;&#xB41C; &#xC601;&#xAD6C; Th 1 &#xBCC0;&#xC870; cytokine &#xC0DD;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8; &#xB450; &#xC0DD; adjuvants, &#xC694; &#xC0B0; &#xBC0F; HMGB1 &#xCD9C;&#xC2DC; &#xAD34; &#xC0AC;. &#xBAA8;&#xB450; &#xC788;&#xC74C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; PLG &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; &#xB41C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; DNA microparticle EPT&#xC640; &#xC870;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xC99D;&#xAC00; immunogenicity &#xD63C;&#xC790; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885;&#xACFC; &#xAD00;&#xCC30; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xD56D; &#xC6D0; &#xCC44;&#xC6A9; &#xC99D;&#xAC00; &#xAE30;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4; &#xC124;&#xBA85;.

Vivo&#xC5D0;&#xC11C; electroporation &#xD3F4; &#xB9AC; lactide &#xACF5;&#xB3D9;-glycolide (PLG) &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; DNA &#xBA74;&#xC5ED;&#xC758; &#xD798;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Inmunizaci&oacute;n con ADN que ha sido guardado en poli lactide-co-glic&oacute;lido (PLG) micropart&iacute;culas pl&aacute;smido dirige el ADN pl&aacute;smido a c&eacute;lulas de presentaci&oacute;n de ant&iacute;geno y provoca la respuesta inmunitaria a los ant&iacute;genos codificados. Aplicaci&oacute;n de una serie de pulsos el&eacute;ctricos (EPT) inmediatamente despu&eacute;s de inyecci&oacute;n de ADN justific&aacute;ndose aumenta la expresi&oacute;n del ant&iacute;geno codificado y aumenta la respuesta inmune. La combinaci&oacute;n del uso de EPT antes o despu&eacute;s de vacunas de ADN pl&aacute;smido PLG-encapsulado fue probado para determinar si se generar&iacute;an mayor respuesta inmune. Los resultados muestran que permitan la combinaci&oacute;n tanto mayor expresi&oacute;n del ant&iacute;geno y las respuestas de c&eacute;lulas T m&aacute;s robustas, aunque EPT se aplic&oacute; antes de la inmunizaci&oacute;n. Los datos tambi&eacute;n demuestran que contrataci&oacute;n de fagocitos en el sitio de inyecci&oacute;n mejor&oacute; notablemente por EPT, y esto dio lugar a un aumento de los niveles de expresi&oacute;n del ant&iacute;geno en estas c&eacute;lulas. La administraci&oacute;n concomitante de micropart&iacute;culas y EPT tambi&eacute;n efectuada localizada necrosis de fibras musculares, producci&oacute;n de citoquinas de Th-1-modulada persistente causado y conducen a la liberaci&oacute;n de dos adyuvantes end&oacute;genos, &aacute;cido &uacute;rico y HMGB1. En total, describimos que mayor inmunogenicidad observada con la combinaci&oacute;n de micropart&iacute;culas de ADN pl&aacute;smido PLG-encapsulado con EPT fue causada por un incremento en el reclutamiento de c&eacute;lulas que mediada por una respuesta m&aacute;s robusta de la c&eacute;lula T que observa con inmunizaci&oacute;n solo presentadoras de ant&iacute;geno.

Electroporaci&oacute;n en vivo mejora la potencia de las vacunas de ADN poli-lactide-co-glic&oacute;lido (PLG) pl&aacute;smido.

&#x5B89;&#x5168;&#x3001; &#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x51CF;&#x8F7B;&#x6BD2;&#x6027;&#x540E;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x8F90;&#x5C04;&#x7167;&#x5C04;&#x5DF2;&#x8BC1;&#x660E;&#x5177;&#x6709;&#x6311;&#x6218;&#x6027;&#x7684;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;&#x9ED8;&#x8BA4;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x4E3A;&#x6570;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x5019;&#x9009;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5DF2;&#x51FA;&#x73B0;&#x548C;&#x7F8E;&#x56FD;&#x98DF;&#x54C1;&#x548C;&#x836F;&#x7269;&#x7BA1;&#x7406;&#x5C40;&#x5C1A;&#x672A;&#x6279;&#x51C6;&#x4EFB;&#x4F55;&#x4F24;&#x4EA1;&#x8F90;&#x5C04;&#x707E;&#x96BE;&#x7684;&#x4EE3;&#x7406;&#x3002;&#x9020;&#x8840;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x60A3;&#x8005;&#x63A5;&#x53D7;&#x8F90;&#x5C04;&#x6CBB;&#x7597;&#x4EA7;&#x751F;&#x6BD2;&#x6027;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x8F90;&#x5C04;&#x707E;&#x96BE;&#x66B4;&#x9732;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5F85;&#x9047;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x6B64;&#x95EE;&#x9898;&#x7684;&#x65B0;&#x529E;&#x6CD5;&#x540E;&#x65E9;&#x671F;&#x7814;&#x7A76;&#x75C5;&#x4EBA;&#x3002;&#x75C5;&#x4EBA;&#x8FC5;&#x901F;&#x5236;&#x5B9A;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x8840;&#x75C7;&#xFF0C;&#x5E76;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x6740;&#x83CC;/&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x52A0;&#x86CB;&#x767D; (BPI) &#x70C8;&#x6027;&#x7684;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6291;&#x5236;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5728;&#x534F;&#x4F1A;&#x4E0E;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5047;&#x8BBE;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6291;&#x5236;&#x6D3B;&#x6027;&#x6CBB;&#x7597;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D6;&#x4EE3; BPI &#x8D64;&#x5B57;&#x548C;&#x51CF;&#x8F7B;&#x8F90;&#x5C04;&#x6BD2;&#x6027;&#x548C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8BBE;&#x60F3;&#x3002;&#x5355; 7 Gy &#x8F90;&#x5C04;&#x5242;&#x91CF;&#xFF0C;&#x6740;&#x5BB3; 30 &#x5929;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684; 95%&#xFF0C;&#x5176;&#x540E; 24 &#x5C0F;&#x65F6;&#x4E4B;&#x540E;&#xFF0C;&#x6BCF;&#x5929;&#x4E24;&#x6B21;&#xFF0C;&#x76AE;&#x4E0B;&#x6CE8;&#x5C04;&#x91CD;&#x7EC4; BPI &#x7247;&#x6BB5; rBPI21 &#x6216;&#x8F66;&#x8F86;&#x4EC5;&#x4E3A; 14 &#x6216; 30 &#x5929;&#xFF0C;&#x6216;&#x53E3;&#x670D;&#x6C1F;&#x55B9;&#x8BFA;&#x916E;&#x7C7B;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x5E7F;&#x8C31;&#x6297;&#x83CC;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x5305;&#x62EC;&#x5BF9;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x8F74;&#x627F;&#x9769;&#x5170;&#x6C0F;&#x9634;&#x6027;&#x83CC;&#x3002;&#x4E0E;&#x6C1F;&#x55B9;&#x8BFA;&#x916E;&#x7C7B;&#x836F;&#x7269;&#x5355;&#x6216;&#x8F66;&#x8F86;&#x52A0;&#x6C1F;&#x55B9;&#x8BFA;&#x916E;&#x7C7B;&#x836F;&#x7269;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x8054;&#x5408;&#x7684; rBPI21 &#x52A0;&#x6C1F;&#x55B9;&#x8BFA;&#x916E;&#x7C7B;&#x836F;&#x7269;&#x6CBB;&#x7597;&#x6539;&#x5584;&#x751F;&#x5B58;&#xFF0C;&#x52A0;&#x901F;&#x9020;&#x8840;&#x6062;&#x590D;&#x548C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5E72;&#x3001; &#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6269;&#x5F20;&#x3002;RBPI21 &#x52A0;&#x6C1F;&#x55B9;&#x8BFA;&#x916E;&#x7C7B;&#x836F;&#x7269;&#x53D1;&#x8D77;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x8F90;&#x5C04;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x826F;&#x597D;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x5371;&#x91CD;&#x75C5;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#xFF0C;&#x5728;&#x5B89;&#x5168;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x76F8;&#x7ED3;&#x5408;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6F5C;&#x529B;&#x540E;&#x7684; 24 &#x5C0F;&#x65F6;&#x89C2;&#x5BDF;&#x7684;&#x7597;&#x6548;&#x8FD9;&#x8F90;&#x5C04;&#x7F13;&#x89E3;&#x7B56;&#x7565;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x652F;&#x6301;&#x5176;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7684;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x3002;

&#x6740;&#x83CC;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x52A0;&#x86CB;&#x767D; (rBPI21) &#x548C;&#x6C1F;&#x55B9;&#x8BFA;&#x916E;&#x7C7B;&#x836F;&#x7269;&#x51CF;&#x8F7B;&#x8F90;&#x5C04;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E0D;&#x5168;&#x548C;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;

Identification of safe, effective treatments to mitigate toxicity after extensive radiation exposure has proven challenging. Only a limited number of candidate approaches have emerged, and the U.S. Food and Drug Administration has yet to approve any agent for a mass-casualty radiation disaster. Because patients undergoing hematopoietic stem cell transplantation undergo radiation treatment that produces toxicities similar to radiation-disaster exposure, we studied patients early after such treatment to identify new approaches to this problem. Patients rapidly developed endotoxemia and reduced plasma bactericidal/permeability-increasing protein (BPI), a potent endotoxin-neutralizing protein, in association with neutropenia. We hypothesized that a treatment supplying similar endotoxin-neutralizing activity might replace the BPI deficit and mitigate radiation toxicity and tested this idea in mice. A single 7-Gy radiation dose, which killed 95% of the mice by 30 days, was followed 24 hours later by twice-daily, subcutaneous injections of the recombinant BPI fragment rBPI21 or vehicle alone for 14 or 30 days, with or without an oral fluoroquinolone antibiotic with broad-spectrum antibacterial activity, including that against endotoxin-bearing Gram-negative bacteria. Compared to either fluoroquinolone alone or vehicle plus fluoroquinolone, the combined rBPI21 plus fluoroquinolone treatment improved survival, accelerated hematopoietic recovery, and promoted expansion of stem and progenitor cells. The observed efficacy of rBPI21 plus fluoroquinolone initiated 24 hours after lethal irradiation, combined with their established favorable bioactivity and safety profiles in critically ill humans, suggests the potential clinical use of this radiation mitigation strategy and supports its further evaluation.

Bactericidal/permeability-increasing protein (rBPI21) and fluoroquinolone mitigate radiation-induced bone marrow aplasia and death.

Identification des traitements s&#xFB;rs et efficaces pour att&#xE9;nuer la toxicit&#xE9; apr&#xE8;s une exposition de rayonnement de grande envergure a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; difficile. Seul un nombre limit&#xE9; d&#x26;#39;approches candidats ont fait leur apparition, et la US Food and Drug Administration n&#x26;#39;a pas encore approuv&#xE9; un agent d&#x26;#39;une catastrophe rayonnement grand nombre de victimes. Parce que les patients subissant une transplantation de cellules souches h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques subissent des traitements de radioth&#xE9;rapie qui produit des effets toxiques similaires &#xE0; un rayonnement &#xE0; une catastrophe d&#x26;#39;exposition, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; les patients au d&#xE9;but, apr&#xE8;s un tel traitement pour identifier de nouvelles approches &#xE0; ce probl&#xE8;me. Les patients se d&#xE9;veloppa rapidement et r&#xE9;duit endotox&#xE9;mie plasmatique bact&#xE9;ricide / augmentant la perm&#xE9;abilit&#xE9; (BPI), un puissant neutralisant la prot&#xE9;ine d&#x26;#39;endotoxine, en association avec une neutrop&#xE9;nie. Nous avons suppos&#xE9; que la fourniture d&#x26;#39;un traitement similaire aux endotoxines neutralisant l&#x26;#39;activit&#xE9; pourrait remplacer le d&#xE9;ficit BPI et d&#x26;#39;att&#xE9;nuer la toxicit&#xE9; radiologique et test&#xE9; cette id&#xE9;e chez la souris. Une dose de rayonnement unique 7-Gy, qui a tu&#xE9; 95% des souris de 30 jours, a &#xE9;t&#xE9; suivie 24 heures plus tard par deux fois par jour des injections, sous-cutan&#xE9;e du fragment recombinant BPI rBPI21 ou un v&#xE9;hicule &#xE0; lui seul 14 ou 30 jours, avec ou sans antibiotique fluoroquinolone orale &#xE0; large spectre d&#x26;#39;activit&#xE9; antibact&#xE9;rienne, y compris celle contre l&#x26;#39;endotoxine de palier bact&#xE9;ries Gram-n&#xE9;gatives. Par rapport &#xE0; la fluoroquinolone soit seul ou v&#xE9;hicule plus fluoroquinolone, la rBPI21 combin&#xE9; ainsi que la survie des fluoroquinolones l&#x26;#39;am&#xE9;lioration du traitement, l&#x26;#39;acc&#xE9;l&#xE9;ration de la r&#xE9;cup&#xE9;ration h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tique, et l&#x26;#39;expansion de la promotion cellules souches et prog&#xE9;nitrices. L&#x26;#39;efficacit&#xE9; observ&#xE9;e de rBPI21, plus fluoroquinolone lanc&#xE9; 24 heures apr&#xE8;s l&#x26;#39;irradiation l&#xE9;tale, combin&#xE9; avec leur bioactivit&#xE9; favorable mis en place et des profils de s&#xE9;curit&#xE9; chez les humains gravement malades, sugg&#xE8;re l&#x26;#39;utilisation clinique potentielle de cette strat&#xE9;gie d&#x26;#39;att&#xE9;nuation de rayonnement et appuie son &#xE9;valuation ult&#xE9;rieure.

Prot&#xE9;ines bact&#xE9;ricide / augmentant la perm&#xE9;abilit&#xE9; (rBPI21) et fluoroquinolones Att&#xE9;nuer radio-induite aplasie m&#xE9;dullaire et de la mort

Kennung der sichere und wirksame Behandlungen um Toxizit&auml;t zu verringern, nachdem umfangreiche Strahlenbelastung schwierig erwiesen hat. Nur eine begrenzte Anzahl von Kandidaten Ans&auml;tze entstanden, und der U.S. Food and Drug Administration hat noch jeden Arbeitsstoff, f&uuml;r eine Masse-Unfall Strahlung-Katastrophe zu genehmigen. Da Patienten h&auml;matopoetischen Stammzelltransplantation Strahlentherapie unterzogen, die Toxizit&auml;ten Strahlung-Katastrophe Exposition &auml;hnlich produziert werden, studierte wir Patienten fr&uuml;h nach solcher Behandlung neue Ans&auml;tze, um dieses Problem zu identifizieren. Patienten rasch entwickelt Endotoxin&auml;mie und bakterizide/Durchl&auml;ssigkeit-Ausbau Plasmaprotein (BPI), ein potenter Endotoxin-Neutralisierung Protein, in Verbindung mit Neutropenie reduziert. Wir die Hypothese, dass eine Behandlung liefern &auml;hnliche Endotoxin-neutralisierenden T&auml;tigkeit k&ouml;nnte das BPI-Defizit ersetzen und Strahlung Toxizit&auml;t zu verringern und diese Idee in M&auml;usen getestet. Eine einzelne 7-Gy-Strahlendosis, die 95 % der M&auml;use von 30 Tagen get&ouml;tet, folgte 24 Stunden sp&auml;ter von zweimal t&auml;glich, subkutanen Injektionen des rekombinanten BPI Fragment rBPI21 oder Fahrzeug allein f&uuml;r 14 oder 30 Tage, mit oder ohne Antibiotikum orale Fluorchinolone mit Breitspektrum antibakterielle Aktivit&auml;t, einschlie&szlig;lich gegen Endotoxin gramnegativer Bakterien. Im Vergleich zu entweder Fluorchinolone allein oder Fahrzeug plus Fluorchinolone, der kombinierten rBPI21 plus Fluorchinolone Behandlung verbessert &Uuml;berleben, beschleunigte h&auml;matopoetischen Wiederherstellung und Ausbau der Stamm- und Vorl&auml;uferzellen Zellen gef&ouml;rdert. Die beobachtete Wirksamkeit von rBPI21 plus Fluorchinolone initiiert von 24 Stunden nach t&ouml;dliche Bestrahlung, mit ihren etablierten g&uuml;nstige Bioaktivit&auml;t und Sicherheitsprofile beim kritisch kranken Menschen, kombiniert das Potenzial, die klinische schl&auml;gt verwenden dieser Strahlung-Klimaschutz-Strategie und unterst&uuml;tzt die weitere Auswertung.

Bactericidal/Durchl&auml;ssigkeit-Ausbau Protein (rBPI21) und Fluorchinolone Knochenmark strahleninduzierten Aplasie und Tod zu mildern.

Identificazione di trattamenti sicuri ed efficaci per attenuare la tossicit&agrave; dopo l&#39;esposizione alle radiazioni di vasto ha dimostrato impegnativo. Solo un numero limitato di candidati approcci &egrave; emerse, e l&#39;US Food and Drug Administration ha ancora approvare qualsiasi agente per un disastro di radiazione incidente di massa. Poich&eacute; i pazienti sottoposti a trapianto di cellule staminali ematopoietiche sottoposti a trattamento con radiazioni che produce tossicit&agrave; simile all&#39;esposizione di radiazioni-disastro, abbiamo studiato i pazienti all&#39;inizio dopo tale trattamento per identificare nuovi approcci a questo problema. I pazienti rapidamente sviluppato endotoxemia e ridotto battericida/permeabilit&agrave;-aumento proteine plasmatiche (BPI), una potente proteina endotossina-neutralizzante, in associazione con neutropenia. Abbiamo ipotizzato che un trattamento fornendo attivit&agrave; neutralizzante endotossina simile potrebbe sostituire il deficit BPI e attenuare la tossicit&agrave; di radiazione e testato questa idea nei topi. Una singolo 7-Gy dose di radiazione, che uccise il 95% dei topi di 30 giorni, &egrave; stata seguita 24 ore pi&ugrave; tardi da due volte al giorno, sottocutanei iniezioni del ricombinante BPI frammento rBPI21 o veicolo da solo per 14 o 30 giorni, con o senza un antibiotico fluorochinolonico orale con attivit&agrave; antibatterica ad ampio spettro, compresa quella contro i batteri Gram-negativi endotossina-cuscinetto. Rispetto al fluorochinolone da solo o veicolo oltre a fluorochinolone, il combinato rBPI21 plus trattamento antimicrobico migliorato la sopravvivenza, accelerato recupero ematopoietico e promosso l&#39;espansione di cellule staminali e progenitrici. L&#39;efficacia osservata di rBPI21 plus fluorochinolone iniziata 24 ore dopo l&#39;irradiazione letale, combinato con loro stabilito bioattivit&agrave; favorevole e profili di sicurezza nell&#39;uomo criticamente malato, suggerisce il potenziale clinico utilizzare questa strategia di mitigazione di radiazione e supporta la sua ulteriore valutazione.

Bactericidal/permeabilit&agrave;-incremento della proteina (rBPI21) e fluorochinolone mitigare morte e aplasia midollare indotta da radiazioni.

&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x88AB;&#x3070;&#x304F;&#x5F8C;&#x306E;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x7DE9;&#x548C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x5B89;&#x5168;&#x3067;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x306F;&#x96E3;&#x3057;&#x3044;&#x304C;&#x8A3C;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x5019;&#x88DC;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x6570;&#x306F;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x7C73;&#x56FD;&#x98DF;&#x54C1;&#x533B;&#x85AC;&#x54C1;&#x5C40;&#xFF08;FDA&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x91CF;&#x306E;&#x6B7B;&#x50B7;&#x8005;&#x306E;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x707D;&#x5BB3;&#x306E;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x627F;&#x8A8D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x9020;&#x8840;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x60A3;&#x8005;&#x306F;&#x3001;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x707D;&#x5BB3;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x6CBB;&#x7642;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x3078;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C;&#x65E9;&#x671F;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x60A3;&#x8005;&#x306F;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x8840;&#x75C7;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x6BBA;&#x83CC;/&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x5927;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;BPI&#xFF09;&#x3001;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x4E2D;&#x548C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x4E2D;&#x548C;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x4F9B;&#x7D66;&#x3057;&#x3066;&#x6CBB;&#x7642;&#x304C;BPI&#x306E;&#x8D64;&#x5B57;&#x3092;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3057;&#x3001;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x7ACB;&#x3066;&#x305F;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A2;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 30&#x65E5;&#x9593;&#x3067;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;95&#xFF05;&#x304C;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB;7 Gy&#x306E;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x6709;&#x7121;&#x306B;&#x95A2;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;14&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F;30&#x65E5;&#x9593;&#x306E;&#x4E00;&#x4EBA;&#x3067;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;BPI&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;rBPI21&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8ECA;&#x4E21;1&#x65E5;2&#x56DE;&#x3001;&#x76AE;&#x4E0B;&#x6CE8;&#x5C04;&#x306B;&#x3088;&#x308A;24&#x6642;&#x9593;&#x5F8C;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5E83;&#x57DF;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x6297;&#x83CC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x7D4C;&#x53E3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30ED;&#x30AD;&#x30CE;&#x30ED;&#x30F3;&#x7CFB;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x30D9;&#x30A2;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x9670;&#x6027;&#x83CC;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x3002;&#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30ED;&#x30AD;&#x30CE;&#x30ED;&#x30F3;&#x5358;&#x72EC;&#x3067;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8ECA;&#x4E21;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30ED;&#x30AD;&#x30CE;&#x30ED;&#x30F3;&#x3001;&#x8907;&#x5408;rBPI21&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30ED;&#x30AD;&#x30CE;&#x30ED;&#x30F3;&#x6CBB;&#x7642;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x3001;&#x52A0;&#x901F;&#x9020;&#x8840;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3057;&#x3001;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6607;&#x9032;&#x306E;&#x62E1;&#x5927;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; rBPI21&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30ED;&#x30AD;&#x30CE;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x5371;&#x7BE4;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x826F;&#x597D;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x5B89;&#x5168;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3001;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x306A;&#x7167;&#x5C04;24&#x6642;&#x9593;&#x5F8C;&#x306B;&#x958B;&#x59CB;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x653E;&#x5C04;&#x7DE9;&#x548C;&#x6226;&#x7565;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x81E8;&#x5E8A;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x5927;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;rBPI21&#xFF09;&#x3068;&#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30ED;&#x30AD;&#x30CE;&#x30ED;&#x30F3;/&#x6BBA;&#x83CC;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x8A98;&#x767A;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x82BD;&#x7403;&#x3068;&#x6B7B;&#x3092;&#x8EFD;&#x6E1B;

&#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xB178;&#xCD9C; &#xD6C4; &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xC644;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC548;&#xC804; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC740; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4; &#xC785;&#xC99D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD6C4;&#xBCF4; &#xC811;&#xADFC;&#xC758; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xC218;&#xB9CC; &#xB4F1;&#xC7A5;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBBF8;&#xAD6D; &#xC2DD;&#xD488; &#xBC0F; &#xC758;&#xC57D;&#xD488; &#xC548;&#xC804; &#xCCAD;&#xC740; &#xC544;&#xC9C1; &#xB300;&#xB7C9; &#xC0AC;&#xC0C1;&#xC790; &#xBC29;&#xC0AC;&#xB2A5; &#xC7AC;&#xD574;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC2B9;&#xC778; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC870; &#xD608; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xC2DD; &#xD658;&#xC790; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xC7AC;&#xD574; &#xB178;&#xCD9C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558; &#xACE0; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xBC1B;&#xC544;&#xC57C; &#xD558;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xBB38;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAC19;&#xC740; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6C4; &#xCD08;&#xAE30; &#xD658;&#xC790;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD658;&#xC790;&#xB294; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; endotoxemia&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xC0B4; &#xADE0;/&#xCE68;&#xD22C;&#xC131; &#xC99D;&#xAC00; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (BPI), &#xD638; &#xC911;&#xAD6C; &#xAC10;&#xC18C; &#xC99D; &#xD611;&#xD68C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xB294; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC120;&#xCC98;&#xB9AC; &#xC911;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xAC10;&#xC18C;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC120;&#xCC98;&#xB9AC; &#xC911;&#xD654; &#xC791;&#xC5C5;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xCE58;&#xB8CC; BPI &#xC801;&#xC790;&#xB97C; &#xB300;&#xCCB4; &#xD558; &#xACE0; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xB3C5;&#xC131; &#xC644;&#xD654; &#xC218; hypothesized &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC774; &#xC544;&#xC774;&#xB514;&#xC5B4;&#xB97C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558; &#xACE0;. 30 &#xC77C; &#xC950;&#xC758; 95%&#xB97C; &#xC8FD; &#xC600;&#xB2E4;, &#xB2E8;&#xC77C; 7 Gy &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; BPI &#xC870;&#xAC01; rBPI21 &#xB610;&#xB294; &#xCC28;&#xB7C9; 14&#xB9CC; &#xB450; &#xBC88; &#xB9E4;&#xC77C;, &#xD53C;&#xD558; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xD6C4; 24 &#xC2DC;&#xAC04; &#xB4A4;&#xC5D0; 30 &#xC77C;, &#xB610;&#xB294; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xD56D;&#xADE0; &#xD65C;&#xB3D9; &#xAD6C;&#xAC15; fluoroquinolone &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C; &#xC5C6;&#xC774; &#xB0B4; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xADF8;&#xB78C; &#xC74C;&#xC131; &#xC138;&#xADE0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB610;&#xB294;. Fluoroquinolone &#xD63C;&#xC790; &#xB610;&#xB294; &#xCC28;&#xB7C9; &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; fluoroquinolone&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xACB0;&#xD569;&#xB41C; rBPI21 &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; fluoroquinolone &#xCE58;&#xB8CC; &#xC0DD;&#xC874; &#xD5A5;&#xC0C1;, &#xAC00;&#xC18D; hematopoietic &#xBCF5;&#xAD6C; &#xBC0F; &#xC904;&#xAE30;&#xC640; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xCD94;&#xC9C4;. RBPI21 &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; fluoroquinolone &#xC2DC;&#xC791; 24 &#xC2DC;&#xAC04; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xC870;&#xC0AC;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC124;&#xB9BD;&#xB41C; &#xC720;&#xB9AC;&#xD55C; bioactivity&#xACFC; &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC544;&#xD508; &#xC778;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC548;&#xC804; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xD568;&#xAED8; &#xC81C;&#xC548; &#xC784;&#xC0C1; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC758; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC774; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xC644;&#xD654; &#xC804;&#xB7B5;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xCD94;&#xAC00; &#xD3C9;&#xAC00; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Bactericidal/&#xCE68;&#xD22C;&#xC131; &#xC99D;&#xAC00; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (rBPI21)&#xC640; fluoroquinolone &#xC644;&#xD654; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; &#xACE8; &#xC218; aplasia &#xBC0F; &#xC8FD;&#xC74C;.

La identificaci&#xF3;n de tratamientos seguros y eficaces para mitigar la toxicidad despu&#xE9;s de la exposici&#xF3;n a la radiaci&#xF3;n extensa ha demostrado ser un desaf&#xED;o. S&#xF3;lo un n&#xFA;mero limitado de los enfoques candidatos han surgido, y los EE.UU. Food and Drug Administration no ha aprobado todav&#xED;a ning&#xFA;n agente de la radiaci&#xF3;n de un desastre masivo de v&#xED;ctimas. Dado que los pacientes sometidos a trasplante de c&#xE9;lulas madre hematopoy&#xE9;ticas someterse a un tratamiento de radiaci&#xF3;n que produce una toxicidad similar a la exposici&#xF3;n a la radiaci&#xF3;n del desastre, se estudiaron los pacientes despu&#xE9;s del tratamiento temprano como para identificar nuevos enfoques a este problema. Los pacientes desarroll&#xF3; r&#xE1;pidamente endotoxemia y reducido de plasma bactericida / permeabilidad-aumentando prote&#xED;na (MDP), un potente endotoxina neutralizante prote&#xED;na, en asociaci&#xF3;n con neutropenia. La hip&#xF3;tesis de que el suministro de un tratamiento semejante actividad neutralizadora de endotoxina podr&#xED;a reemplazar el d&#xE9;ficit de BPI y mitigar la toxicidad por radiaci&#xF3;n y probado esta idea en ratones. Un &#xFA;nico 7-Gy dosis de radiaci&#xF3;n, que mat&#xF3; a 95% de los ratones por 30 d&#xED;as, fue seguido 24 horas m&#xE1;s tarde por dos inyecciones diarias, subcut&#xE1;nea del fragmento recombinante BPI rBPI21 o veh&#xED;culo solo durante 14 o 30 d&#xED;as, con o sin un fluoroquinolona oral con actividad de amplio espectro antibacteriano, incluyendo contra bacterias Gram-negativas que la endotoxina de bacterias. En comparaci&#xF3;n con cualquier fluoroquinolona sola o veh&#xED;culo m&#xE1;s fluoroquinolona, &#x200B;&#x200B;la combinaci&#xF3;n de rBPI21 adem&#xE1;s la supervivencia de las fluoroquinolonas mejorar el tratamiento, la recuperaci&#xF3;n hematopoy&#xE9;tica acelerado, y la expansi&#xF3;n promovida de c&#xE9;lulas madre y progenitoras. La eficacia observada de rBPI21 m&#xE1;s fluoroquinolona inici&#xF3; 24 horas despu&#xE9;s de la irradiaci&#xF3;n letal, combinado con su bioactividad estableci&#xF3; favorable y perfil de seguridad en los seres humanos en estado cr&#xED;tico, sugiere el uso potencial cl&#xED;nico de esta estrategia de reducci&#xF3;n de la radiaci&#xF3;n y apoya su posterior evaluaci&#xF3;n.

La prote&#xED;na bactericida / permeabilidad cada vez mayor-(rBPI21) y fluoroquinolonas mitigar la radiaci&#xF3;n inducida por aplasia de la m&#xE9;dula &#xF3;sea y de la Muerte

Christine M. Barbon

Medical Oncology

Dana Farber Cancer Institute

Induction of Alloantigen-specific Anergy in Human Peripheral Blood Mononuclear Cells by Alloantigen Stimulation with Co-stimulatory Signal Blockade

Christine M. Barbon

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Dana Farber Cancer Institute

Induction of Alloantigen-specific Anergy in Human Peripheral Blood Mononuclear Cells by Alloantigen Stimulation with Co-stimulatory Signal Blockade

Medical Oncology