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Delivery of Therapeutic Agents Through Intracerebroventricular (ICV) and Intravenous (IV) Injection in Mice

Despite the protective role that blood brain barrier plays in shielding the brain, it limits the access to the central nervous system (CNS) which most ...

Columbia University 

&#x810A;&#x9AD3;&#x6027;&#x808C;&#x840E;&#x7F29;&#x75C7; (SMA) &#x662F;&#x5A74;&#x513F;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x9057;&#x4F20;&#x539F;&#x56E0;&#x662F;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x9690;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x808C;&#x8089;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;SMA &#x662F;&#x6240;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;-1 (SMN1)&#x3002;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x5168;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x526F;&#x672C;&#x57FA;&#x56E0;&#x662F;&#x76EE;&#x524D;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A; SMN2&#x3002;SMN2 &#x4FDD;&#x7559;&#x6240;&#x6709; SMA &#x60A3;&#x8005;&#x548C;&#x7F16;&#x7801;&#x76F8;&#x6BD4; SMN1 &#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#x5916;, &#x663E;&#x5B50; SMN2 7 &#x5355;&#x6C89;&#x9ED8;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x5DEE;&#x5F02;&#x7ED3;&#x679C;&#x62FC;&#x63A5;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53; &#xFF08;&#x79F0;&#x4E3A; SMNDelta7&#xFF09; &#x5C06;&#x65E0;&#x6CD5;&#x6B63;&#x5E38;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x4E2D;&#x3002;SMN2 &#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x8868;&#x793A;&#x552F;&#x4E00;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x76EE;&#x6807; SMN2 &#x4EE5;&#x6765;&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801;&#x4E00;&#x79CD;&#x5168;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x8C03;&#x5236; SMN2 &#x62FC;&#x63A5;&#x7684;&#x77ED;&#x53CC;&#x5B98;&#x80FD;&#x56E2; RNAs &#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x53CC;&#x5B98;&#x80FD;&#x56E2; RNAs &#x5BFC;&#x51FA;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x540D;&#x79F0;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57DF;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#xFF1A; &#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x76EE;&#x6807; RNA &#x548C;&#x65E0;&#x7EA6;&#x675F;&#x7684; RNA &#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x7528;&#x4F5C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7EB2;&#x8981; &#x300B; &#x526A;&#x63A5;&#x56E0;&#x5B50;&#x53CD;&#x4E49; RNA &#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8D28;&#x7C92;&#x548C;&#x91CD;&#x7EC4;&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x5F97;&#x4EE5;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x53CC;&#x5B98;&#x80FD;&#x56E2; RNAs &#x523A;&#x6FC0; SMN2 &#x5916;&#x663E;&#x5B50; 7 &#x5305;&#x5BB9;&#x548C;&#x5168;&#x957F; SMN &#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#x6765;&#x8C03;&#x8282;&#x62FC;&#x63A5;&#x4ECE;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x80CC;&#x666F;&#x548C;&#x76F4;&#x63A5;&#x5C55;&#x793A;&#x5BF9;&#x5F62;&#x72B6;&#x8BB0;&#x5FC6;&#x5408;&#x91D1;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x901A;&#x8FC7;&#x63D0;&#x4F9B;&#x53CC;&#x529F;&#x80FD; Rna &#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x901A;&#x8FC7;&#x523A;&#x6FC0;&#x5168;&#x957F; SMN2 &#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Spinal muscular atrophy (SMA) is an autosomal recessive neuromuscular disorder that is the leading genetic cause of infant mortality. SMA is caused by the loss of survival motor neuron-1 (SMN1). In humans, a nearly identical copy gene is present, called SMN2. SMN2 is retained in all SMA patients and encodes an identical protein compared to SMN1. However, a single silent nucleotide difference in SMN2 exon 7 results in the production of a spliced isoform (called SMNDelta7) that encodes a nonfunctional protein. The presence of SMN2 represents a unique therapeutic target since SMN2 has the capacity to encode a fully functional protein. Here we describe an in vivo delivery system for short bifunctional RNAs that modulate SMN2 splicing. Bifunctional RNAs derive their name from the presence of two domains: an antisense RNA sequence specific to a target RNA and an untethered RNA segment that serves as a binding platform for splicing factors. Plasmid-based and recombinant adeno-associated virus vectors were developed that expressed bifunctional RNAs that stimulated SMN2 exon 7 inclusion and full-length SMN protein in patient fibroblasts. These experiments provide a mechanism to modulate splicing from a variety of genetic contexts and demonstrate directly a novel therapeutic approach for SMA.

Stimulating full-length SMN2 expression by delivering bifunctional RNAs via a viral vector.

L&#x26;#39;amyotrophie spinale (SMA) est une transmission autosomique r&#xE9;cessive neuromusculaire qui est la principale cause g&#xE9;n&#xE9;tique de la mortalit&#xE9; infantile. SMA est caus&#xE9;e par la perte de la survie des neurones moteurs-1 (SMN1). Chez l&#x26;#39;homme, un g&#xE8;ne &#xE0; copie presque identique est pr&#xE9;sent, dit SMN2. SMN2 est conserv&#xE9;e chez tous les patients SMA et code pour une prot&#xE9;ine identique par rapport &#xE0; SMN1. Cependant, une seule diff&#xE9;rence dans le silence nucl&#xE9;otidique SMN2 exon 7 dans la production des r&#xE9;sultats d&#x26;#39;une isoforme &#xE9;piss&#xE9;e (appel&#xE9; SMNDelta7) qui code pour une prot&#xE9;ine non fonctionnelle. La pr&#xE9;sence de SMN2 repr&#xE9;sente une cible th&#xE9;rapeutique unique depuis SMN2 a la capacit&#xE9; de coder pour une prot&#xE9;ine enti&#xE8;rement fonctionnelle. Ici, nous d&#xE9;crivons une dans le syst&#xE8;me de d&#xE9;livrance in vivo &#xE0; court ARN bifonctionnels qui modulent l&#x26;#39;&#xE9;pissage SMN2. ARN bifonctionnels tirent leur nom de la pr&#xE9;sence de deux domaines: une s&#xE9;quence d&#x26;#39;ARN antisens sp&#xE9;cifiques &#xE0; un ARN cible et un segment untethered ARN qui sert de plate-forme de liaison pour les facteurs d&#x26;#39;&#xE9;pissage. &#xC0; base de plasmides et de vecteurs recombinants de virus ad&#xE9;no-associ&#xE9;s ont &#xE9;t&#xE9; mis au point qui a exprim&#xE9; ARN bifonctionnels qui ont stimul&#xE9; SMN2 l&#x26;#39;exon 7 et l&#x26;#39;inclusion prot&#xE9;ine SMN pleine longueur dans les fibroblastes de patients. Ces exp&#xE9;riences fournissent un m&#xE9;canisme pour moduler l&#x26;#39;&#xE9;pissage d&#x26;#39;une vari&#xE9;t&#xE9; de contextes g&#xE9;n&#xE9;tiques et de d&#xE9;montrer directement une nouvelle approche th&#xE9;rapeutique pour les SMA.

Stimuler pleine longueur SMN2 expression en offrant ARN bifonctionnels via un vecteur viral

Spinale Muskelatrophie (SMA) wird autosomal-rezessiv vererbt neuromuskul&auml;re, das ist die h&auml;ufigste genetische Ursache der Kindersterblichkeit. SMA wird durch den Verlust des &Uuml;berlebens Motoneuron-1 (SMN1) verursacht. Beim Menschen ist eine fast identische Kopie-gen vorhanden, genannt SMN2. SMN2 bleibt bei allen Patienten mit SMA und eine identische Protein im Vergleich zu SMN1 codiert. Ein Stille Einzel-Nukleotid-Unterschied in SMN2 Exon 7 f&uuml;hrt jedoch die Produktion von einem gesplei&szlig;ten Isoform (genannt SMNDelta7), die einem nicht funktionsf&auml;higen Protein kodiert. Das Vorhandensein von SMN2 stellt ein einzigartiges therapeutisches Ziel seit SMN2 die F&auml;higkeit hat, ein voll funktionsf&auml;higes Protein kodieren. Hier beschreiben wir eine in-vivo-Delivery-System f&uuml;r kurze bifunktionelle RNAs, die SMN2 Splei&szlig;en modulieren. Bifunktionelle RNAs leiten ihren Namen aus dem Vorhandensein von zwei Dom&auml;nen: eine antisense RNA-Sequenz, die spezifisch f&uuml;r ein Ziel-RNA und eine ungefesselte RNA-Segment, das als Plattform f&uuml;r das Splei&szlig;en Faktoren Bindung dient. Plasmid-basierte und rekombinante Adeno-assoziierte Virus Vektoren wurden entwickelt, die bifunktionelle RNAs ausgedr&uuml;ckt, die SMN2 Exon 7 Aufnahme und in SMN-Protein in Patienten Fibroblasten stimuliert. Diese Experimente bieten einen Mechanismus, modulieren, Splei&szlig;en aus einer Vielzahl von genetischen zusammenh&auml;ngen und direkt einen neuen therapeutischen Ansatz f&uuml;r SMA zu demonstrieren.

Anregend in SMN2-Ausdruck durch die Bereitstellung von bifunktionelle RNAs &uuml;ber ein viraler Vektor.

Atrofia muscolare spinale (SMA) &egrave; una malattia autosomica recessiva neuromuscolare che &egrave; la principale causa genetica di mortalit&agrave; infantile. SMA &egrave; causata dalla perdita di survival motor neuron-1 (SMN1). Negli esseri umani, un gene copia quasi identica &egrave; presente, denominato SMN2. SMN2 &egrave; mantenuto in tutti i pazienti SMA e codifica per una proteina identica rispetto al SMN1. Tuttavia, una differenza di singolo nucleotide silenzioso in SMN2 esone 7 risultati nella produzione di un isoform impiombato (chiamato SMNDelta7) che codifica per una proteina non funzionante. La presenza di SMN2 rappresenta un obiettivo terapeutico unico dal SMN2 ha la capacit&agrave; di codificare una proteina completamente funzionale. Qui descriviamo un sistema di consegna in vivo per breve RNAs bifunzionale che modulano SMN2 splicing. RNAs bifunzionale derivano il loro nome dalla presenza di due domini: una sequenza di RNA antisenso specifica per un target RNA e un segmento di RNA untethered che serve come una piattaforma di legame per fattori di splicing. Vettori ricombinanti e basati su plasmide virus adeno-associati sono stati sviluppati che espresse RNAs bifunzionale che ha stimolato l&#39;inclusione di esone 7 SMN2 e full-length della proteina SMN in fibroblasti di pazienti. Questi esperimenti forniscono un meccanismo per modulare lo splicing da una variet&agrave; di contesti genetici e dimostrare direttamente un nuovo approccio terapeutico per la SMA.

Stimolante espressione SMN2 full-length consegnando bifunzionale RNAs tramite un vettore virale.

&#x810A;&#x9AC4;&#x6027;&#x7B4B;&#x840E;&#x7E2E;&#x75C7;&#xFF08;SMA&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x4E73;&#x5150;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x52A3;&#x6027;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7B4B;&#x75BE;&#x60A3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; SMA&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x5B58;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;-1&#xFF08;SMN1&#xFF09;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x307B;&#x307C;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;SMN2&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; SMN2&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;SMA&#x60A3;&#x8005;&#x3067;&#x4FDD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x3001;SMN1&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x975E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF08;SMNDelta7&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#xFF09;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306B;SMN2&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30F3;7&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3002; SMN2&#x304C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6709;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;SMN2&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F;&#x3001;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;SMN2&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x77ED;&#x3044;&#x4E8C;&#x5B98;&#x80FD;&#x6027;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;RNA&#x306E;in vivo&#x30C7;&#x30EA;&#x30D0;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;RNA&#x914D;&#x5217;&#x3001;&#x6A19;&#x7684;RNA&#x3068;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x547D;&#x7DB1;&#x306E;RNA&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x56FA;&#x6709;&#xFF1A;&#x4E8C;&#x5B98;&#x80FD;&#x6027;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;RNA&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x304B;&#x3089;&#x81EA;&#x5206;&#x306E;&#x540D;&#x524D;&#x3092;&#x6D3E;&#x751F;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x968F;&#x4F34;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;SMN2&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30F3;7&#x3092;&#x542B;&#x3081;&#x308B;&#x3068;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;SMN&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x305F;&#x4E8C;&#x5B98;&#x80FD;&#x6027;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;RNA&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;SMA&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4E8C;&#x5B98;&#x80FD;&#x6027;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;RNA&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3001;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x306E;SMN2&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;

&#xCC99;&#xC218; &#xADFC;&#xC721; &#xC704;&#xCD95; &#xC99D; (SMA)&#xC740; &#xC0C1; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC5F4;&#xC131; &#xC2E0;&#xACBD; &#xADFC;&#xC721; &#xD559; &#xC7A5;&#xC560;&#xB294; &#xC720;&#xC544; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC720;&#xC804; &#xC6D0;&#xC778;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. SMA&#xB294; &#xC11C;&#xBC14;&#xC774;&#xBC8C; &#xBAA8;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD; 1 (SMN1)&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294;, &#xAC70;&#xC758; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xBCF5;&#xC0AC;&#xBCF8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xC874;&#xC7AC;, SMN2 &#xB77C;&#xB294;. SMN2 &#xBAA8;&#xB4E0; SMA &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBC0F; smn1&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, SMN2 exon 7 &#xB2E8;&#xC77C; &#xCE68;&#xBB35; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xCC28;&#xC774; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC811;&#xD569;&#xB41C; isoform (SMNDelta7 &#xB77C;&#xACE0; &#xD568;)&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC;. Smn2&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; SMN2 &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC774; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD558; &#xAC8C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB300;&#xC0C1;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9E7;&#xC740; bifunctional RNAs SMN2 &#xC811;&#xD569; &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xB2EC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Bifunctional RNAs &#xB450; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC774;&#xB984;&#xC744; &#xD30C;&#xC0DD;: &#xC13C;&#xC2A4; RNA &#xC21C;&#xC11C; &#xB300;&#xC0C1; RNA &#xBC0F; &#xC694;&#xC778; &#xC811;&#xD569;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xC81C;&#xD55C; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; RNA &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xB97C;. &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; adeno &#xC81C;&#xD734;&#xD574; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCA1;&#xD130; &#xD45C;&#xD604; bifunctional RNAs SMN2 exon 7 &#xD3EC;&#xD568; &#xBC0F; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; SMN &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC81C;&#xACF5; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xC0C1;&#xD669;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC811;&#xD569; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C1;&#xC811; SMA&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC801; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;.

&#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xBCA1;&#xD130;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; bifunctional RNAs &#xC81C;&#xACF5; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; SMN2 &#xC2DD; &#xC790;&#xADF9;.

La atrofia muscular espinal (AME) es un trastorno autos&#xF3;mico recesivo neuromuscular que es la principal causa gen&#xE9;tica de la mortalidad infantil. SMA es causado por la p&#xE9;rdida de la supervivencia de las neuronas motoras-1 (SMN1). En los seres humanos, un gen copia casi id&#xE9;ntica est&#xE1; presente, llamado SMN2. SMN2 se conserva en todas las pacientes con SMA y codifica una prote&#xED;na id&#xE9;ntica en comparaci&#xF3;n con SMN1. Sin embargo, una sola diferencia de nucle&#xF3;tidos en silencio SMN2 ex&#xF3;n 7 resultados en la producci&#xF3;n de una isoforma empalmados (llamado SMNDelta7) que codifica una prote&#xED;na funcional. La presencia de SMN2 representa una diana terap&#xE9;utica &#xFA;nica desde SMN2 tiene la capacidad para codificar una prote&#xED;na totalmente funcional. A continuaci&#xF3;n se describe un sistema in vivo de entrega de cortos ARN bifuncionales que modulan SMN2 empalme. ARNs bifuncionales derivan su nombre de la presencia de dos dominios: una secuencia de ARN antisentido espec&#xED;ficos para una diana de ARN y una untethered segmento de ARN que sirve como una plataforma de uni&#xF3;n para los factores de empalme. Basados &#x200B;&#x200B;en pl&#xE1;smidos y recombinantes adeno-asociados vectores de virus se han desarrollado lo expresado ARN bifuncionales que estimularon SMN2 el ex&#xF3;n 7 de inclusi&#xF3;n y de larga duraci&#xF3;n prote&#xED;na SMN en los fibroblastos de pacientes. Estos experimentos proporcionan un mecanismo para modular el empalme de una variedad de contextos gen&#xE9;ticos y demostrar directamente un nuevo enfoque terap&#xE9;utico para SMA.

Estimular cuerpo entero SMN2 Expresi&#xF3;n mediante la entrega de ARN bifuncionales trav&#xE9;s de un vector viral

&#x810A;&#x9AD3;&#x6027;&#x808C;&#x840E;&#x7F29;&#x75C7; (SMA) &#x662F;&#x7531;&#x751F;&#x5B58;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;-1 (SMN1) &#x635F;&#x5931;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x3002;&#x79F0;&#x4E3A; SMN2 &#x57FA;&#x56E0;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x5168;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x526F;&#x672C;&#x662F;&#x76EE;&#x524D;&#x6240;&#x6709; SMA &#x60A3;&#x8005; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C; SMN2 &#x4EA7;&#x751F;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x7531;&#x4E8E;&#x526A;&#x63A5;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x4E00;&#x79CD;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x79F0;&#x4E3A;&#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5;&#x3002;&#x4ECE;&#x6982;&#x5FF5;&#x4E0A;&#x8BB2;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7B56;&#x7565;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x62FC;&#x63A5;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5355;&#x72EC;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x4E4B;&#x95F4;&#x53D1;&#x751F;&#x7684; pre-messenger RNA (pre-mRNA)&#xFF1A; (i) &#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x76EE;&#x6807; RNA &#x53CA; (ii) &#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x6B63;&#x786E;&#x7684; RNA &#x7684;&#x6CBB;&#x7597; RNA &#x5E8F;&#x5217;&#x901A;&#x8FC7;&#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;SMN &#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5; RNAs &#x6700;&#x521D;&#x68C0;&#x67E5;&#x548C;&#x8868;&#x793A;&#x4ECE;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8D28;&#x7C92;&#x4E3B;&#x5E72;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x8981;&#x91CD;&#x5B9A;&#x5411;&#x62FC;&#x63A5;&#x4ECE; SMN2 mini-gene &#x548C;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x7684;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x3002;&#x968F;&#x540E;&#xFF0C;&#x91CD;&#x7EC4;&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x5F97;&#x4EE5;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x548C;&#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5; RNAs &#x9001;&#x4EA4; SMA &#x60A3;&#x8005;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x4E25;&#x91CD;&#x7684; SMA &#x60A3;&#x8005;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#xFF0C;SMN2 &#x62FC;&#x63A5;&#x5728;&#x901A;&#x8FC7;&#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5;&#x4EA7;&#x751F;&#x589E;&#x52A0;&#x5168;&#x957F; SMN mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x548C;&#x603B; SMN &#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x5E73;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x88AB;&#x91CD;&#x5B9A;&#x5411;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x5C0F;&#x6838;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x86CB;&#x767D; (snRNP) &#x5927;&#x4F1A;&#xFF0C;SMN &#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x529F;&#x80FD;&#x88AB;&#x8FD8;&#x539F;&#x5230; SMN &#x7F3A; SMA &#x7684;&#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5;&#x5411;&#x91CF;&#x4E0E;&#x6CBB;&#x7597;&#x540E;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x526A;&#x63A5;&#x7684; SMN2 &#x5916;&#x663E;&#x5B50; 7 &#x66F4;&#x6362;&#x7531;&#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5;&#x6E29;&#x987A;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

SMN &#x6062;&#x590D;&#x529F;&#x80FD;&#xFF1A; &#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5; RNA &#x4F20;&#x9012;&#x91CD;&#x5B9A;&#x5411; SMN2 pre mRNA &#x526A;&#x63A5;&#x3002;

Spinal muscular atrophy (SMA) is caused by loss of survival motor neuron-1 (SMN1). A nearly identical copy gene called SMN2 is present in all SMA patients; however SMN2 produces low levels of functional protein due to alternative splicing. Recently a therapeutic approach has been developed referred to as trans-splicing. Conceptually, this strategy relies upon pre-messenger RNA (pre-mRNA) splicing occurring between two separate molecules: (i) the endogenous target RNA and (ii) the therapeutic RNA that provides the correct RNA sequence via a trans-splicing event. SMN trans-splicing RNAs were initially examined and expressed from a plasmid-backbone and shown to re-direct splicing from a SMN2 mini-gene as well as from endogenous transcripts. Subsequently, recombinant adeno-associated viral vectors were developed that expressed and delivered trans-splicing RNAs to SMA patient fibroblasts. In the severe SMA patient fibroblasts, SMN2 splicing was redirected via trans-splicing to produce increased levels of full-length SMN mRNA and total SMN protein levels. Finally, small nuclear ribonucleoprotein (snRNP) assembly, a critical function of SMN, was restored to SMN-deficient SMA fibroblasts following treatment with the trans-splicing vector. Together these results demonstrate that the alternatively spliced SMN2 exon 7 is a tractable target for replacement by trans-splicing.

Restoration of SMN function: delivery of a trans-splicing RNA re-directs SMN2 pre-mRNA splicing.

L&#x26;#39;amyotrophie spinale (SMA) est caus&#xE9;e par la perte de la survie des neurones moteurs-1 (SMN1). Une copie du g&#xE8;ne presque identique appel&#xE9; SMN2 est pr&#xE9;sent chez tous les patients SMA, mais SMN2 produit de faibles niveaux de prot&#xE9;ine fonctionnelle en raison de l&#x26;#39;&#xE9;pissage alternatif. R&#xE9;cemment, une approche th&#xE9;rapeutique a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;velopp&#xE9;e d&#xE9;nomm&#xE9; trans-&#xE9;pissage. Conceptuellement, cette strat&#xE9;gie repose sur pr&#xE9;-ARN messager (ARNm pr&#xE9;-) &#xE9;pissage survenant entre deux mol&#xE9;cules distinctes: (i) l&#x26;#39;ARN cible endog&#xE8;ne, et (ii) les ARN th&#xE9;rapeutique qui fournit la s&#xE9;quence correcte ARN par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire d&#x26;#39;un &#xE9;v&#xE9;nement trans-&#xE9;pissage. SMN trans-&#xE9;pissage des ARN ont initialement &#xE9;t&#xE9; examin&#xE9;s et ont exprim&#xE9; &#xE0; partir d&#x26;#39;un squelette plasmidique et montr&#xE9; &#xE0; r&#xE9;orienter l&#x26;#39;&#xE9;pissage d&#x26;#39;un g&#xE8;ne SMN2 mini-ainsi que des transcriptions endog&#xE8;nes. Par la suite, vecteurs recombinants viraux ad&#xE9;no-associ&#xE9;s ont &#xE9;t&#xE9; mis au point et livr&#xE9; exprim&#xE9; trans-&#xE9;pissage des ARN &#xE0; des fibroblastes de patients SMA. Dans les fibroblastes de patients SMA graves, SMN2 &#xE9;pissage a &#xE9;t&#xE9; redirig&#xE9; via trans-&#xE9;pissage de produire des niveaux accrus d&#x26;#39;ARNm SMN pleine longueur et le total des niveaux de prot&#xE9;ine SMN. Enfin, petite ribonucl&#xE9;oprot&#xE9;ine nucl&#xE9;aire (snRNP) ensemble, une fonction essentielle du SMN, a &#xE9;t&#xE9; restaur&#xE9; pour les fibroblastes d&#xE9;ficients en SMA SMN apr&#xE8;s le traitement avec le vecteur trans-&#xE9;pissage. Ensemble, ces r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que l&#x26;#39;&#xE9;pissage alternatif SMN2 l&#x26;#39;exon 7 est une cible docile pour le remplacement par le trans-&#xE9;pissage.

Restauration de la fonction SMN: livraison d&#x26;#39;un &#xE9;pissage d&#x26;#39;ARN-Trans Re-dirige SMN2 pr&#xE9;-ARNm &#xE9;pissure

Spinale Muskelatrophie (SMA) verursacht durch Verlust von Survival Motor Neuron-1 (SMN1). Eine fast identische Kopie gen SMN2 genannt ist aller SMA-Patienten; jedoch produziert SMN2 geringe funktionelle Protein durch alternatives Splei&szlig;en. Vor kurzem wurde ein therapeutischer Ansatz als Trans-Splei&szlig;en bezeichnet entwickelt. Im Prinzip dieser Strategie st&uuml;tzt sich auf Eukaryoten RNA (Pre-mRNA) Splei&szlig;en, die zwischen zwei einzelnen Molek&uuml;len auftreten: (i) die endogene Ziel-RNA und (Ii) die therapeutische RNA, die bietet die richtige RNA-Sequenz &uuml;ber ein Trans-splicing-Ereignis. SMN Trans-Splei&szlig;en RNAs zun&auml;chst gepr&uuml;ften und ausgedr&uuml;ckt aus einem Plasmid-Backbone und zu leiten, Splei&szlig;en aus einem SMN2-Mini-gene sowie endogene Transkripte gezeigt. Anschlie&szlig;end wurden die rekombinante Adeno-assoziierter virale Vektoren ausgedr&uuml;ckt und Trans-Splei&szlig;en RNAs an SMA Patienten Fibroblasten geliefert entwickelt. In den schweren SMA-Patienten Fibroblasten war SMN2 Splei&szlig;en &uuml;ber Trans-Splei&szlig;en umfassendere in SMN-mRNA und total SMN-Protein-Ebene produzieren umgeleitet. Schlie&szlig;lich wurde kleine nukleare Ribonucleoprotein (SnRNP) Montage, eine kritische Funktion des SMN, SMN-defizienten SMA Fibroblasten nach Behandlung mit der Trans-Splei&szlig;en Vektor wiederhergestellt. Zusammen zeigen diese Ergebnisse, dass die alternativ gesplei&szlig;ten SMN2-Exon 7 steuerbar Ziel f&uuml;r Ersatz durch Trans-Splei&szlig;en.

Restaurierung des SMN Funktion: Lieferung einer Trans-Splei&szlig;en RNA &uuml;berf&auml;llt SMN2 Pre-mRNA Splei&szlig;en.

Atrofia muscolare spinale (SMA) &egrave; causata dalla perdita di survival motor neuron-1 (SMN1). Un copia quasi identica gene chiamato SMN2 &egrave; presente in tutti i pazienti SMA; Tuttavia SMN2 produce bassi livelli di proteina funzionale a causa di splicing alternativo. Recentemente &egrave; stato sviluppato un approccio terapeutico denominato trans-splicing. Concettualmente, questa strategia si basa su RNA pre-messenger (pre-mRNA) lo splicing che si verificano tra due molecole separate: (i) il RNA bersaglio endogeno e (ii) il RNA terapeutico che fornisce il corretto RNA sequenza tramite un evento trans-splicing. SMN trans-splicing RNAs inizialmente esaminati ed espressa da una plasmide-dorsale e mostrato a ri-orientare la giunzione da un mini-gene di SMN2 nonch&eacute; da trascrizioni endogene. Successivamente, vettori virali ricombinanti adeno-associati sono stati sviluppati che espresso e recapitati RNAs trans-splicing di fibroblasti di pazienti SMA. Al gravi fibroblasti di pazienti SMA, SMN2 splicing &egrave; stato reindirizzato mediante trans-splicing per produrre aumento dei livelli di mRNA di SMN full-length e livelli di proteina SMN totali. Infine, Assemblea piccola ribonucleoproteina nucleare (snRNP), una funzione critica di SMN, &egrave; stata restaurata a fibroblasti SMA SMN-carenti dopo il trattamento con il vettore trans-splicing. Insieme, questi risultati dimostrano che l&#39;impiombato alternativamente SMN2 esone 7 &egrave; una destinazione trattabili per sostituzione mediante trans-splicing.

Funzione di ripristino della SMN: consegna di un RNA trans-splicing rigirando SMN2 splicing pre-mRNA.

&#x810A;&#x9AC4;&#x6027;&#x7B4B;&#x840E;&#x7E2E;&#x75C7;&#xFF08;SMA&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x5B58;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;-1&#xFF08;SMN1&#xFF09;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; SMN2&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x307B;&#x307C;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;SMA&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;SMN2&#x306F;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6982;&#x5FF5;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x306F;2&#x3064;&#x306E;&#x5225;&#x3005;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30EC;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;RNA&#xFF08;mRNA&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#xFF09;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#xFF1A;&#xFF08;i&#xFF09;&#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x6A19;&#x7684;RNA&#x3068;&#x3001;&#xFF08;ii&#xFF09;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x6B63;&#x3057;&#x3044;RNA&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;RNA&#x3002; SMN&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;RNA&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DC;&#x30FC;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x304B;&#x3089;SMN2&#x30DF;&#x30CB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304B;&#x3089;&#x518D;&#x76F4;&#x63A5;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x968F;&#x4F34;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x3001;SMA&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;RNA&#x3092;&#x7D0D;&#x5165;&#x3057;&#x3066;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;SMA&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;SMN2&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;SMN mRNA&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5408;&#x8A08;SMN&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x4E0A;&#x6607;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6838;&#x5185;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x30EA;&#x30DC;&#x6838;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;snRNP&#xFF09;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3001;SMN&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C;&#x306E;SMN&#x6B20;&#x640D;SMA&#x7E4A;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5FA9;&#x5143;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;SMN2&#x30A8;&#x30AF;&#x30BD;&#x30F3;7&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7F6E;&#x63DB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6271;&#x3044;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

SMN&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#xFF1A;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;RNA&#x306E;&#x518D;&#x6307;&#x793A;SMN2 pre-mRNA&#x306E;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x914D;&#x9054;

&#xADFC;&#xC721; &#xC9C8; &#xCC99;&#xC218; &#xC704;&#xCD95; &#xC99D; (SMA) &#xC11C;&#xBC14;&#xC774;&#xBC8C; &#xBAA8;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD; 1 (SMN1)&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. SMN2 &#xB77C;&#xB294; &#xAC70;&#xC758; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xBCF5;&#xC0AC;&#xBCF8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xBAA8;&#xB4E0; SMA &#xD658;&#xC790;&#xC758;;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; SMN2 &#xB300;&#xCCB4; &#xC811;&#xD569; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC804;&#xB7B5; pre-messenger RNA (mRNA &#xC804;) &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xBCC4;&#xB3C4; &#xBD84;&#xC790; &#xC0AC;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC811;&#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xAC1C;&#xB150;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;: &#xC0DD; &#xB300;&#xC0C1; RNA (i) &#xBC0F; (ii) &#xC62C;&#xBC14;&#xB978; RNA&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC801; RNA &#xACC4;&#xC5F4; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574;. SMN &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4;-&#xC811;&#xD569; RNAs &#xCC98;&#xC74C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xC911;&#xCD94;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xC811;&#xD569; SMN2 mini-gene &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB0B4; &#xC131;&#xC801; &#xC99D;&#xBA85;&#xC11C;&#xB97C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8; &#xD6C4;, &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; adeno &#xC81C;&#xD734;&#xD574; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xBCA1;&#xD130; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569; RNAs SMA &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC804;&#xB2EC; &#xD558;&#xB294; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC2EC;&#xD55C; SMA &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xAC8C;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; SMN Mrna&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC;&#xD0A8;&#xB41C; &#xC218;&#xC900; &#xBC0F; &#xCD1D; SMN &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB808;&#xBCA8; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xC811;&#xD569;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC774;&#xB3D9; &#xD588;&#xB2E4; SMN2 &#xC811;&#xD569;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC791;&#xC740; &#xD575; ribonucleoprotein (snRNP) &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; SMN&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569; &#xBCA1;&#xD130;&#xC640; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB2E4;&#xC74C;&#xACFC; SMN &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; SMA &#xAC8C;&#xC7AC; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC785;&#xC99D; &#xB610;&#xB294; &#xC811;&#xD569;&#xB41C; SMN2 exon 7 &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD50;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC138;&#xACF5; &#xB300;&#xC0C1;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

SMN &#xBCF5;&#xC6D0; &#xAE30;&#xB2A5;: &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569; RNA&#xC758; &#xBC30;&#xB2EC; &#xB2E4;&#xC2DC; SMN2 &#xC608;&#xC57D; mRNA &#xC811;&#xD569;.

La atrofia muscular espinal (SMA) es causada por la p&#xE9;rdida de la supervivencia de la neurona motora-1 (SMN1). Un gen copia casi id&#xE9;ntica llamada SMN2 est&#xE1; presente en todos los pacientes con AME, sin embargo SMN2 produce bajos niveles de prote&#xED;na funcional, debido a splicing alternativo. Recientemente, un enfoque terap&#xE9;utico ha sido desarrollado referido como trans-empalme. Conceptualmente, esta estrategia se basa en pre-ARN mensajero (pre-ARNm) de empalme que ocurren entre dos mol&#xE9;culas separadas: (i) el end&#xF3;geno ARN diana y (ii) el ARN terap&#xE9;uticos que proporciona la correcta secuencia de ARN a trav&#xE9;s de un evento trans-empalme. SMN trans-empalme RNAs fueron examinados inicialmente y expresada a partir de un esqueleto del pl&#xE1;smido y se muestra de nuevo empalme directo de un mini-gen SMN2 as&#xED; como de las transcripciones end&#xF3;genos. Posteriormente, vectores virales recombinantes adeno-asociados se han desarrollado lo expresado y entregado transeuropeas de empalme de ARN a fibroblastos de pacientes con AME. En los fibroblastos de pacientes graves SMA, SMN2 empalme fue redirigido a trav&#xE9;s de trans-empalme para producir mayores niveles de ARNm SMN de longitud completa y total de los niveles de prote&#xED;na SMN. Por &#xFA;ltimo, peque&#xF1;a ribonucleoprote&#xED;na nuclear (snRNP) el montaje, una funci&#xF3;n cr&#xED;tica del SMN, fue restaurado en los fibroblastos SMA SMN deficientes despu&#xE9;s del tratamiento con el vector de trans-empalme. En conjunto, estos resultados demuestran que el corte y empalme alternativo SMN2 ex&#xF3;n 7 es un objetivo manejable para el reemplazo por trans-empalme.

Restauraci&#xF3;n de la funci&#xF3;n SMN: Entrega de un empalme de ARN-Trans Re-dirige SMN2 pre-mRNA de empalme

&#xADFC;&#xC721; &#xC9C8; &#xCC99;&#xC218; &#xC704;&#xCD95; &#xC99D; (SMA) &#xC2EC;&#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xADFC;&#xC721; &#xD559; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xB9C8;&#xBE44;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xCC99;&#xCD94; &#xC54C;&#xD30C; &#xBAA8;&#xD130; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. SMA&#xB294; &#xC11C;&#xBC14;&#xC774;&#xBC8C; &#xBAA8;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD; (SMN) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB808;&#xBCA8;&#xC758; &#xACB0;&#xD54D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC99D;&#xAC70; &#xCD95; &#xC0AD; &#xBCC0;&#xC131; SMA pathogenesis&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xAE30; &#xD558;&#xB294; SMN &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD95; &#xC0AD; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB290;&#xB9B0; Wallerian &#xBCC0;&#xC131; (would(s)) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xCD95; &#xC0AD; &#xBCC0;&#xC131; &#xC57D; 2 ~ 3 &#xC8FC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC124;&#xC815;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378; SMA&#xC758;&#xC758; phenotype (s) &#xAC83;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; &#xAC83; (s) &#xBCC0;&#xACBD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; SMA phenotype Wallerian &#xBCC0;&#xC131;&#xC744; &#xC9C1;&#xC811; SMA &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xBC1C;&#xACAC;.

&#xB290;&#xB9B0; Wallerian &#xBCC0;&#xC131; (would(s)) &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCC99;&#xC218; &#xADFC;&#xC721; &#xC704;&#xCD95; &#xC99D;&#xC758; &#xC950; &#xBAA8;&#xD615;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La atrofia muscular espinal (AME) es una enfermedad severa neuromuscular caracterizado por la p&#xE9;rdida de la columna vertebral de motor alfa-las neuronas, lo que resulta en la par&#xE1;lisis de los m&#xFA;sculos esquel&#xE9;ticos. SMA es causada por la deficiencia de la supervivencia de la neurona motora (SMN) los niveles de prote&#xED;na. La evidencia reciente ha puesto de relieve un papel ax&#xF3;n-espec&#xED;fico para la prote&#xED;na SMN, aumentando la posibilidad de que la degeneraci&#xF3;n axonal puede ser un evento temprano en la patog&#xE9;nesis del SMA. La degeneraci&#xF3;n walleriana lenta (VDE (s)) gen es una mutaci&#xF3;n espont&#xE1;nea dominante en ratones que la degeneraci&#xF3;n del ax&#xF3;n retrasos en aproximadamente 2-3 semanas. Nos propusimos estudiar el efecto de Wld (s) sobre el fenotipo de un modelo de rat&#xF3;n de la SMA. Se encontr&#xF3; que Wld (s) no altera el fenotipo SMA, lo que indica que la degeneraci&#xF3;n walleriana no contribuye directamente a la patog&#xE9;nesis del desarrollo de SMA.

La lenta degeneraci&#xF3;n walleriana (VDE (s)) Gene no aten&#xFA;a la enfermedad en un modelo de rat&#xF3;n de la atrofia muscular espinal

&#x810A;&#x9AD3;&#x6027;&#x808C;&#x840E;&#x7F29;&#x75C7; (SMA) &#x662F;&#x7279;&#x5F81;&#x7684; &alpha; &#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x9AA8;&#x80F3;&#x808C;&#x762B;&#x75EA;&#x635F;&#x5931;&#x4E25;&#x91CD;&#x795E;&#x7ECF;&#x808C;&#x8089;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;SMA &#x662F;&#x7531;&#x751F;&#x5B58;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143; &#xFF08;SMN&#xFF09; &#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x7A81;&#x51FA;&#x4E86;&#x8F74;&#x7A81;&#x7279;&#x5B9A;&#x89D2;&#x8272; SMN &#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x63D0;&#x9AD8;&#x8F74;&#x7A81;&#x53D8;&#x6027;&#x53EF;&#x4E3A; SMA &#x53D1;&#x75C5;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;&#x7F13;&#x6162;&#x7684;&#x6C83;&#x52D2;&#x53D8;&#x6027; (would(s)) &#x57FA;&#x56E0;&#x662F;&#x81EA;&#x53D1;&#x663E;&#x6027;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x7EA6; 2-3 &#x5468;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x53D8;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x6765;&#x68C0;&#x67E5;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#x4F1A; (s) &#x5BF9; SMA &#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5C06; (s) &#x5E76;&#x4E0D;&#x6539;&#x53D8; SMA &#x578B;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x6C83;&#x52D2;&#x53D8;&#x6027;&#x4E0D;&#x76F4;&#x63A5;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x53D1;&#x75C5;&#x7684; SMA &#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

&#x7F13;&#x6162;&#x7684;&#x6C83;&#x52D2;&#x53D8;&#x6027; (would(s)) &#x57FA;&#x56E0;&#x4E0D;&#x80FD;&#x51CF;&#x5F31;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x810A;&#x9AD3;&#x6027;&#x808C;&#x840E;&#x7F29;&#x75C7;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;

Spinal muscular atrophy (SMA) is a severe neuromuscular disease characterized by loss of spinal alpha-motor neurons, resulting in the paralysis of skeletal muscle. SMA is caused by deficiency of survival motor neuron (SMN) protein levels. Recent evidence has highlighted an axon-specific role for SMN protein, raising the possibility that axon degeneration may be an early event in SMA pathogenesis. The Wallerian degeneration slow (Wld(s)) gene is a spontaneous dominant mutation in mice that delays axon degeneration by approximately 2-3 weeks. We set out to examine the effect of Wld(s) on the phenotype of a mouse model of SMA. We found that Wld(s) does not alter the SMA phenotype, indicating that Wallerian degeneration does not directly contribute to the pathogenesis of SMA development.

The Wallerian degeneration slow (Wld(s)) gene does not attenuate disease in a mouse model of spinal muscular atrophy.

L&#x26;#39;amyotrophie spinale (SMA) est une maladie grave neuromusculaire caract&#xE9;ris&#xE9;e par la perte de la colonne vert&#xE9;brale alpha-neurones moteurs, entra&#xEE;nant la paralysie du muscle squelettique. SMA est caus&#xE9;e par une carence de la survie des neurones moteurs (SMN) la teneur en prot&#xE9;ines. Des donn&#xE9;es r&#xE9;centes ont mis en &#xE9;vidence un r&#xF4;le axone-sp&#xE9;cifique pour la prot&#xE9;ine SMN, qui soul&#xE8;ve la possibilit&#xE9; que la d&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence axonale peut &#xEA;tre un &#xE9;v&#xE9;nement pr&#xE9;coce dans la pathogen&#xE8;se de SMA. La d&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence wall&#xE9;rienne lente (Org (s)) g&#xE8;ne est une mutation spontan&#xE9;e dominante chez la souris que la d&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence axonale des retards d&#x26;#39;environ 2-3 semaines. Nous avons cherch&#xE9; &#xE0; examiner l&#x26;#39;effet de Org (s) sur le ph&#xE9;notype d&#x26;#39;un mod&#xE8;le murin de la SMA. Nous avons constat&#xE9; que Org (s) ne modifie pas le ph&#xE9;notype SMA, ce qui indique que la d&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence wall&#xE9;rienne ne contribue pas directement &#xE0; la pathogen&#xE8;se de d&#xE9;veloppement SMA.

La lente d&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence wall&#xE9;rienne (Org (s)) Gene n&#x26;#39;att&#xE9;nue pas la maladie dans un mod&#xE8;le murin de l&#x26;#39;amyotrophie spinale

Spinale Muskelatrophie (SMA) ist eine schwere Neuromuskul&auml;re Krankheit, gekennzeichnet durch Verlust von spinale Alpha-Motoneuronen, wodurch die L&auml;hmung der Skelettmuskulatur. SMA wird durch Mangel an &uuml;berleben Motoneuron (SMN) Protein Ebenen verursacht. Neuere Belege hat hervorgehoben, dass eine Axon-spezifische Rolle f&uuml;r SMN-Protein, erh&ouml;hen die M&ouml;glichkeit, dass Axon Entartung kann ein fr&uuml;hes Ereignis im SMA-Pathogenese. Die Wallersche Degeneration langsam (would(s))-Gen ist eine spontane dominante Mutation bei M&auml;usen, die Axon Entartung von ca. 2-3 Wochen verz&ouml;gert. Wir setzen aus, um die Wirkung zu pr&uuml;fen w&uuml;rde (s) auf der Ph&auml;notyp eines Maus-Modells von SMA. Wir fanden, dass w&uuml;rde (s) keine &Auml;nderung der SMA-Ph&auml;notyp, darauf hinweist, dass Wallersche Degeneration nicht direkt auf die Pathogenese der SMA-Entwicklung beitr&auml;gt.

Die Wallersche Degeneration langsam (would(s))-Gen wird Krankheit in einem Mausmodell der spinalen Muskelatrophie nicht d&auml;mpfen.

Atrofia muscolare spinale (SMA) &egrave; una grave malattia neuromuscolare caratterizzata da perdita di alfa-motoneuroni spinali, con conseguente paralisi del muscolo scheletrico. SMA &egrave; causata dal deficit di livelli di proteina survival motor neuron (SMN). Recenti prove ha evidenziato un ruolo di assone-specifici per la proteina SMN, alzando la possibilit&agrave; che la degenerazione assone pu&ograve; essere un evento precoce nella patogenesi di SMA. La degenerazione walleriana lenta (gene Wld(s)) &egrave; una mutazione dominante spontanea nei topi che ritarda la degenerazione assone di circa 2-3 settimane. Ci siamo proposti di esaminare l&#39;effetto di Wld(s) sul fenotipo di un modello murino di SMA. Abbiamo trovato che Wld(s) non alterare il fenotipo SMA, indicando che la degenerazione walleriana non contribuiscono direttamente alla patogenesi della SMA sviluppo.

La degenerazione walleriana lenta (Wld(s)) gene non attenuano la malattia in un modello murino di atrofia muscolare spinale.

&#x810A;&#x9AC4;&#x6027;&#x7B4B;&#x840E;&#x7E2E;&#x75C7;&#xFF08;SMA&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x306E;&#x9EBB;&#x75FA;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x810A;&#x9AC4;&#x3B1;-&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x7B4B;&#x75BE;&#x60A3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; SMA&#x306F;&#x3001;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x751F;&#x5B58;&#xFF08;SMN&#xFF09;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x6B20;&#x4E4F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x5909;&#x6027;&#x306F;&#x3001;SMA&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306E;&#x65E9;&#x671F;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x3001;SMN&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A6;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30FC;&#x5909;&#x6027;&#x304C;&#x9045;&#x3044;&#xFF08;WLD&#xFF08;s&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x7D04;2-3&#x9031;&#x9593;&#x3067;&#x305D;&#x306E;&#x9045;&#x5EF6;&#x306F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x5909;&#x6027;&#x3092;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x512A;&#x6027;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;SMA&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306B;WLD&#xFF08;s&#xFF09;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30FC;&#x5909;&#x6027;&#x304C;&#x76F4;&#x63A5;SMA&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;WLD&#xFF08;s&#xFF09;&#x306F;SMA&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x30A6;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30FC;&#x5909;&#x6027;&#x30B9;&#x30ED;&#x30FC;&#xFF08;WLD&#xFF08;s&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x9AC4;&#x6027;&#x7B4B;&#x840E;&#x7E2E;&#x75C7;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x75C5;&#x6C17;&#x3092;&#x6E1B;&#x8870;&#x3057;&#x306A;&#x3044;

RNA &#x65B9;&#x5F0F;&#x6B63;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x51B7;&#x6C14;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x524D; mRNA &#x526A;&#x63A5;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x6709;&#x529B;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4F53;&#x5185;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#x975E;&#x5E38;&#x91CD;&#x8981;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x4EEC;&#x8D70;&#x5411;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;&#x810A;&#x9AD3;&#x6027;&#x808C;&#x840E;&#x7F29;&#x75C7; (SMA) &#x662F;&#x7531; SMN1 &#x635F;&#x5931;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x3002;&#x53EB;&#x505A; SMN2 &#x51E0;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x5168;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x526F;&#x672C;&#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x751F;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x7531;&#x4E8E;&#x526A;&#x63A5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x66FE;&#x62A5;&#x9053;&#x51CC;&#x5389; SMN2 &#x62FC;&#x63A5;&#x7684;&#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5; RNA (tsRNA)&#x3002;&#x73B0;&#x5728;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x51CF;&#x5C11;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x7EDE;&#x63A5;&#x5904;&#x7AD9;&#x70B9;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7ADE;&#x4E89;&#x589E;&#x5F3A;&#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#x3002;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x5355;&#x77E2;&#x91CF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8868;&#x793A; SMN tsRNA &#x548C;&#x62FC;&#x63A5;&#x7AD9;&#x70B9;&#x963B;&#x585E;&#x4E49; (&#x9EBB;&#x751F;-tsRNA&#xFF09;&#x3002;&#x9EBB;&#x751F;&#x592A;&#x90CE; tsRNA &#x77E2;&#x91CF;&#x5927;&#x5927; SMN &#x6C34;&#x5E73;&#x521D;&#x7EA7;&#x7684; SMA &#x75C5;&#x4EBA;&#x7EA4;&#x7EF4;&#xFF0C;SMA &#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5185;&#xFF0C;&#x5E76;&#x589E;&#x52A0; SMN &#x4F9D;&#x8D56;&#x4F53;&#x5916; snRNP &#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x9EBB;&#x751F;&#x592A;&#x90CE; tsRNA &#x6218;&#x7565;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x7684;&#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x663E;&#x8457;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;

&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86; SMN2 &#x8A8A;&#x672C;&#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5;&#x7684;&#x5355;&#x77E2;&#x91CF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

RNA modalities are developing as a powerful means to re-direct pathogenic pre-mRNA splicing events. Improving the efficiency of these molecules in vivo is critical as they move towards clinical applications. Spinal muscular atrophy (SMA) is caused by loss of SMN1. A nearly identical copy gene called SMN2 produces low levels of functional protein due to alternative splicing. We previously reported a trans-splicing RNA (tsRNA) that re-directed SMN2 splicing. Now we show that reducing the competition between endogenous splices sites enhanced the efficiency of trans-splicing. A single vector system was developed that expressed the SMN tsRNA and a splice-site blocking antisense (ASO-tsRNA). The ASO-tsRNA vector significantly elevated SMN levels in primary SMA patient fibroblasts, within the central nervous system of SMA mice and increased SMN-dependent in vitro snRNP assembly. These results demonstrate that the ASO-tsRNA strategy provides insight into the trans-splicing mechanism and a means of significantly enhancing trans-splicing activity in vivo.

Development of a single vector system that enhances trans-splicing of SMN2 transcripts.

Modalidades de ARN se est&#xE1;n desarrollando como un medio poderoso para re-dirigir los eventos de splicing de pre-mRNA de pat&#xF3;genos. Mejorar la eficiencia de estas mol&#xE9;culas in vivo es fundamental, ya que se mueven hacia las aplicaciones cl&#xED;nicas. La atrofia muscular espinal (SMA) es causada por la p&#xE9;rdida de SMN1. Un gen copia casi id&#xE9;ntica llamada SMN2 produce bajos niveles de prote&#xED;na funcional, debido a splicing alternativo. Hemos informado anteriormente de un empalme de trans-ARN (tsRNA) que re-dirigido SMN2 empalme. Ahora nos muestran que la reducci&#xF3;n de la competencia entre los sitios de empalmes end&#xF3;genos aument&#xF3; la eficiencia de trans-empalme. Un sistema &#xFA;nico vector que se ha desarrollado expres&#xF3; la tsRNA SMN y un sitio de empalme bloqueo antisentido (ASO-tsRNA). El vector de ASO-tsRNA significativamente elevados los niveles de SMN en la ense&#xF1;anza primaria fibroblastos de pacientes con AME, en el sistema nervioso central de ratones SMA y el aumento de SMN dependiente de la in vitro snRNP asamblea. Estos resultados demuestran que la estrategia de ASO-tsRNA proporciona la penetraci&#xF3;n en el mecanismo de trans-empalme y un medio de mejorar significativamente trans-empalme actividad in vivo.

Desarrollo de un sistema &#xFA;nico vector que mejora la trans-empalme de SMN2 Transcripciones

Modalit&#xE9;s d&#x26;#39;ARN sont en d&#xE9;veloppement comme un moyen puissant pour r&#xE9;orienter les &#xE9;v&#xE9;nements pathog&#xE8;nes d&#x26;#39;&#xE9;pissage de pr&#xE9;-ARNm. Am&#xE9;liorer l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de ces mol&#xE9;cules in vivo est essentiel &#xE0; mesure qu&#x26;#39;ils progressent vers les applications cliniques. L&#x26;#39;amyotrophie spinale (SMA) est caus&#xE9;e par la perte de SMN1. Une copie du g&#xE8;ne presque identique appel&#xE9; SMN2 produit de faibles niveaux de prot&#xE9;ine fonctionnelle en raison de l&#x26;#39;&#xE9;pissage alternatif. Nous avons rapport&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment un &#xE9;pissage trans-ARN (tsRNA) qui re-dirig&#xE9; SMN2 &#xE9;pissage. Nous allons maintenant montrer que la r&#xE9;duction de la concurrence entre les sites d&#x26;#39;&#xE9;pissures endog&#xE8;nes am&#xE9;lior&#xE9; l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de trans-&#xE9;pissage. Un syst&#xE8;me de vecteur unique a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;labor&#xE9; qui a exprim&#xE9; le tsRNA SMN et une &#xE9;pissure place blocage antisens (ASO-tsRNA). Le vecteur ASO-tsRNA niveaux significativement plus &#xE9;lev&#xE9;s dans les SMN des fibroblastes primaires de patients SMA, au sein du syst&#xE8;me nerveux central de souris SMA et a augment&#xE9; SMN-d&#xE9;pendants in vitro snRNP assemblage. Ces r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que la strat&#xE9;gie ASO-tsRNA donne un aper&#xE7;u du m&#xE9;canisme de trans-&#xE9;pissage et un moyen de renforcer de mani&#xE8;re significative l&#x26;#39;activit&#xE9; trans-&#xE9;pissage in vivo.

D&#xE9;veloppement d&#x26;#39;un syst&#xE8;me unique qui am&#xE9;liore Vecteur Trans-&#xE9;pissage de SMN2 Transcriptions

RNA-Modalit&auml;ten entwickeln als ein leistungsstarkes Mittel zur pathogenen Pre-mRNA-Splei&szlig;en-Veranstaltungen zu leiten. Verbesserung der Effizienz dieser Molek&uuml;le in-vivo ist entscheidend, wie sie Schritt f&uuml;r klinische Anwendungen Schritt. Spinale Muskelatrophie (SMA) wird durch den Verlust des SMN1 verursacht. Eine fast identische Kopie gen SMN2 genannt produziert geringe funktionelle Protein durch alternatives Splei&szlig;en. Zuvor berichteten wir ein Trans-Splei&szlig;en RNA (TsRNA), das Splei&szlig;en SMN2 umgeleitet. Jetzt wir, dass die Verringerung zeigen erweitert der Wettbewerb zwischen endogenen Spleisse Standorten die Effizienz der Trans-Splei&szlig;en. Einem einzigen Vektor-System wurde entwickelt, die das SMN-TsRNA und &quot;Antisense ein Splei&szlig;-Website blockieren&quot; (ASO-TsRNA) ausgedr&uuml;ckt. Der ASO-TsRNA-Vektor deutlich erh&ouml;hte SMN Niveaus in prim&auml;re SMA Patienten Fibroblasten, innerhalb des zentralen Nervensystems von SMA-M&auml;usen und erh&ouml;ht SMN-abh&auml;ngigen in Vitro-SnRNP-Assembly. Diese Ergebnisse zeigen, dass die ASO-TsRNA-Strategie bietet Einblick in die Trans-splicing-Mechanismus und ein Mittel Trans-Splei&szlig;en Aktivit&auml;t in-vivo deutlich zu verbessern.

Entwicklung eines einzigen Vektor-Systems, das Trans-Splei&szlig;en der SMN2-Transkripte erh&ouml;ht.

Modalit&agrave; di RNA sono in via di sviluppo come un potente mezzo per re-indirizzare gli eventi di splicing pre-mRNA patogeni. Migliorare l&#39;efficienza di queste molecole in vivo &egrave; fondamentale come si muovono verso le applicazioni cliniche. Atrofia muscolare spinale (SMA) &egrave; causata dalla perdita di SMN1. Un gene copia quasi identica denominato SMN2 produce bassi livelli di proteina funzionale a causa di splicing alternativo. Abbiamo segnalato in precedenza un RNA trans-splicing (tsRNA) che re-indirizzato SMN2 splicing. Ora mostriamo che riducendo la concorrenza tra i siti di impiombature endogeno migliorato l&#39;efficienza del trans-splicing. Un sistema unico vettore &egrave; stato sviluppato che ha espresso il tsRNA SMN e un antisenso blocco splice-sito (ASO-tsRNA). Il vettore di ASO-tsRNA significativamente elevati livelli di SMN in primari fibroblasti di pazienti SMA, all&#39;interno del sistema nervoso centrale dei topi SMA e aumentato SMN-dipendente in vitro snRNP assieme. Questi risultati dimostrano che la strategia di ASO-tsRNA fornisce la comprensione del meccanismo trans-splicing e un mezzo per migliorare significativamente la trans-splicing attivit&agrave; in vivo.

Sviluppo di un sistema singolo vettore che migliora la trans-splicing delle trascrizioni SMN2.

RNA&#x306E;&#x30E2;&#x30C0;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x76F4;&#x63A5;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;pre-mRNA&#x306E;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3078;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x624B;&#x6BB5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5FDC;&#x7528;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x810A;&#x9AC4;&#x6027;&#x7B4B;&#x840E;&#x7E2E;&#x75C7;&#xFF08;SMA&#xFF09;&#x306F;SMN1&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; SMN2&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x307B;&#x307C;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;RNA&#xFF08;tsRNA&#xFF09;&#x304C;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;SMN2&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4ECA;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x90E8;&#x4F4D;&#x9593;&#x306E;&#x7AF6;&#x4E89;&#x3092;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x7CFB;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#xFF08;ASO-tsRNA&#xFF09;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;SMN tsRNA&#x3068;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3092;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; ASO-tsRNA&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;SMA&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x5185;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;SMA&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;SMN&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x3001;in vitro snRNP&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306B;SMN&#x4F9D;&#x5B58;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;ASO-tsRNA&#x6226;&#x7565;&#x306F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x624B;&#x6BB5;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

SMN2&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x958B;&#x767A;

RNA modalities &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xC0AC;&#xC804; mRNA &#xC811;&#xD569; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC218;&#xB2E8;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;&#xC744; &#xAC1C;&#xC120; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC740; &#xC784;&#xC0C1; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xB54C; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADFC;&#xC721; &#xC9C8; &#xCC99;&#xC218; &#xC704;&#xCD95; &#xC99D; (SMA) smn1&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. SMN2 &#xB77C;&#xB294; &#xAC70;&#xC758; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xBCF5;&#xC0AC;&#xBCF8; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB300;&#xCCB4; &#xC811;&#xD569; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC800;&#xAE09;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569; RNA (tsRNA) SMN2 &#xC811;&#xD569; &#xC774;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xBCF4;&#xACE0;. &#xC774;&#xC81C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; &#xAC10;&#xC18C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC0DD; &#xC2A4;&#xD50C;&#xB77C;&#xC774;&#xC2A4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xAC04;&#xC758; &#xACBD;&#xC7C1; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131; &#xD5A5;&#xC0C1;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xBCA1;&#xD130; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; SMN tsRNA &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD50C;&#xB77C;&#xC774;&#xC2A4;-&#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xCC28;&#xB2E8; antisense (&#xC544;&#xC18C;-tsRNA) &#xD558;&#xB294; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xC18C;-tsRNA &#xBCA1;&#xD130; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB192;&#xC740; &#xAE30;&#xBCF8; SMA &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xAC8C;&#xC7AC;, SMA &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; SMN &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00; snRNP &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; SMN &#xC885;&#xC18D; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC544;&#xC18C; tsRNA &#xC804;&#xB7B5; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xD06C;&#xAC8C; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC785;&#xC99D;.

SMN2 &#xC131;&#xC801;&#xD45C;&#xC758; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xBCA1;&#xD130; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;.

&#x810A;&#x9AD3;&#x6027;&#x808C;&#x840E;&#x7F29;&#x75C7;&#x662F;&#x9057;&#x4F20;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x5A74;&#x5E7C;&#x513F;&#x6B7B;&#x4EA1;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x5927;&#x7EA6; 1/6000 &#x6D3B;&#x4EA7;&#x5A74;&#x513F;&#x3002;SMA &#x6240;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;-1 (SMN1&#xFF09;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x6240;&#x6709;&#x75C5;&#x4EBA;&#x90FD;&#x4FDD;&#x7559;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E00;&#x4E2A;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x5168;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A; SMN2&#x3002;&#x867D;&#x7136; SMN2 &#x548C; SMN1 &#x7531;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x7EC4;&#x6210;&#xFF0C;&#x5927;&#x591A;&#x6570; SMN2 &#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x88AB;&#x526A;&#x63A5;&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801;&#x4E00;&#x79CD;&#x622A;&#x65AD;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x65E0;&#x6CD5;&#x6B63;&#x5E38;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x3002;&#x76F8;&#x5F53;&#x5927;&#x7684;&#x52AA;&#x529B;&#x4E3B;&#x8981;&#x96C6;&#x4E2D;&#x5728;&#x8C03;&#x5236; SMN2 &#x66FF;&#x4EE3;&#x62FC;&#x63A5;&#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4F1A;&#x4EA7;&#x751F;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x9053;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684; SMN2 &#x5171;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5;&#x4F18;&#x5316;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x5F00;&#x53D1;&#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5; RNA &#x548C;&#x53CD;&#x4E49; RNA&#xFF0C;&#x963B;&#x6B62; SMN2 pre mrna &#x4E0B;&#x6E38;&#x62FC;&#x63A5;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5C55;&#x793A;&#x4F18;&#x5316;&#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5;&#x5411;&#x91CF;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x4EA4;&#x8D27;&#x589E;&#x52A0; SMN &#x4F9D;&#x8D56;&#x9879;&#x91CD;&#x8981;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;snRNP &#x5927;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x5728;&#x75BE;&#x75C5;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5728; SMA &#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x5411;&#x91CF;&#x7684;&#x5355;&#x6B21;&#x6CE8;&#x5C04;&#x5165; SMA &#x65B0;&#x751F;&#x513F;&#x7684;&#x8111;&#x5185;&#x5BA4;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4E5F;&#x964D;&#x4F4E; SMA &#x578B;&#x91CD;&#x75C7; SMA &#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x5EF6;&#x957F;&#x5927;&#x7EA6; 70%&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x6027;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B; SMN2 &#x53CD;&#x5F0F;&#x526A;&#x63A5;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684; SMA &#x578B;&#x7F13;&#x548C;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x4F53;&#x5185;&#x793A;&#x5A01;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E3A;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x524D; mRNA &#x4E00;&#x7EA7;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x75BE;&#x75C5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E00;&#x6218;&#x7565;&#x529B;&#x91CF;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

&#x810A;&#x9AD3;&#x6027;&#x808C;&#x840E;&#x7F29;&#x75C7;&#x4E25;&#x91CD;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x8DE8;&#x62FC;&#x63A5;&#x7684;&#x6539;&#x8FDB;&#x3002;

Spinal muscular atrophy is a leading genetic cause of infantile death and occurs in approximately 1/6000 live births. SMA is caused by the loss of Survival Motor Neuron-1 (SMN1), however, all patients retain at least one copy of a nearly identical gene called SMN2. While SMN2 and SMN1 are comprised of identical coding sequences, the majority of SMN2 transcripts are alternatively spliced, encoding a truncated protein that is unstable and nonfunctional. Considerable effort has focused upon modulating the SMN2 alternative splicing event since this would produce more wild-type protein. Recently we reported the development of an optimized trans-splicing system that involved the coexpression of a SMN2 trans-splicing RNA and an antisense RNA that blocks a downstream splice site in SMN2 pre-mRNA. Here, we demonstrate that in vivo delivery of the optimized trans-splicing vector increases an important SMN-dependent activity, snRNP assembly, in disease-relevant tissue in the SMA mouse model. A single injection of the vector into the intracerebral-ventricular space in SMA neonates also lessens the severity of the SMA phenotype in a severe SMA mouse model, extending survival approximately 70%. Collectively, these results provide the first in vivo demonstration that SMN2 trans-splicing leads to a lessening of the severity of the SMA phenotype and provide evidence for the power of this strategy for reprogramming genetic diseases at the pre-mRNA level.

Trans-splicing-mediated improvement in a severe mouse model of spinal muscular atrophy.

L&#x26;#39;amyotrophie spinale est une cause majeure de mortalit&#xE9; infantile g&#xE9;n&#xE9;tique de et se produit dans environ 1/6000 naissances vivantes. SMA est caus&#xE9;e par la perte de la survie du motoneurone-1 (SMN1), cependant, tous les patients de conserver au moins une copie d&#x26;#39;un g&#xE8;ne appel&#xE9; SMN2 presque identique. Alors que SMN2 et SMN1 sont constitu&#xE9;s de s&#xE9;quences codantes identiques, la majorit&#xE9; des SMN2 transcriptions sont alternativement &#xE9;piss&#xE9;s, codant pour une prot&#xE9;ine tronqu&#xE9;e qui est instable et non fonctionnel. Des efforts consid&#xE9;rables ont port&#xE9; sur l&#x26;#39;&#xE9;v&#xE9;nement de modulation &#xE9;pissage alternatif SMN2 depuis ce serait de produire plus de prot&#xE9;ines de type sauvage. R&#xE9;cemment, nous avons signal&#xE9; le d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;une optimisation du syst&#xE8;me de trans-&#xE9;pissage qui a impliqu&#xE9; la coexpression d&#x26;#39;un SMN2 trans-&#xE9;pissage de l&#x26;#39;ARN et un ARN antisens qui bloquent un site d&#x26;#39;&#xE9;pissage en aval dans SMN2 pr&#xE9;-ARNm. Ici, nous d&#xE9;montrons que l&#x26;#39;administration in vivo de l&#x26;#39;optimisation de trans-&#xE9;pissage vecteur augmente un important SMN-d&#xE9;pendante l&#x26;#39;activit&#xE9;, snRNP assemblage, &#xE0; la maladie concern&#xE9;e tissus dans le mod&#xE8;le de souris SMA. Une seule injection du vecteur dans l&#x26;#39;espace intra-c&#xE9;r&#xE9;brale-ventriculaire chez les nouveaux n&#xE9;s SMA permet &#xE9;galement de r&#xE9;duire la s&#xE9;v&#xE9;rit&#xE9; du ph&#xE9;notype SMA dans un mod&#xE8;le murin SMA s&#xE9;v&#xE8;re, prolongation de la survie d&#x26;#39;environ 70%. Collectivement, ces r&#xE9;sultats fournissent la premi&#xE8;re d&#xE9;monstration in vivo que dans SMN2 trans-&#xE9;pissage conduit &#xE0; une diminution de la s&#xE9;v&#xE9;rit&#xE9; du ph&#xE9;notype SMA et fournir des preuves de la puissance de cette strat&#xE9;gie pour la reprogrammation des maladies g&#xE9;n&#xE9;tiques au niveau pr&#xE9;-ARNm.

Trans-&#xE9;pissage &#xE0; m&#xE9;diation am&#xE9;lioration dans un mod&#xE8;le murin de la s&#xE9;v&#xE8;re amyotrophie spinale

Spinale Muskelatrophie ist eine genetische Todesursache infantile und tritt bei etwa 1/6000 Lebendgeburten. SMA wird verursacht durch den Verlust von Survival Motor Neuron-1 (SMN1), alle Patienten behalten jedoch mindestens eine Kopie eine nahezu identische gen SMN2 genannt. W&auml;hrend SMN2 und SMN1 aus identischen kodierende Sequenzen bestehen, sind die meisten SMN2-Transkripte Alternativ gesplei&szlig;t, Codierung eine abgeschnittene Protein, das instabil und nicht funktionsf&auml;hig ist. Erhebliche Anstrengungen konzentriert sich auf Modulation das alternative Splei&szlig;en SMN2-Ereignis, da dies mehr Wildtyp-Protein produzieren w&uuml;rde. Vor kurzem berichteten wir die Entwicklung eines optimierten Trans-splicing-Systems, die die Coexpression von einem SMN2 beteiligt Trans-Splei&szlig;en der RNA und ein antisense-RNA, die einen nachgeschalteten Splei&szlig;-Standort in SMN2 Pre-mRNA blockiert. Hier zeigen wir, dass in-vivo Lieferung des optimierten Trans-Splei&szlig;en Vektors eine wichtige SMN-abh&auml;ngige Aktivit&auml;t, SnRNP Versammlung in Krankheit-relevanten Gewebe in der SMA-Mausmodell erh&ouml;ht. Eine einzige Injektion des Vektors in den intrazerebralen-ventrikul&auml;re Raum bei SMA Neugeborenen verringert auch den Schweregrad der SMA-Ph&auml;notyp in einem schweren SMA-Mausmodell erweitern &uuml;berleben etwa 70 %. Zusammen diese Ergebnisse liefern die erste in-vivo-Demonstration, die Trans-Splei&szlig;en SMN2 f&uuml;hrt zu einer Verminderung des Schweregrads des Ph&auml;notyps SMA und vorsehen, dass Beweise f&uuml;r die Kraft dieser Strategie Neuprogrammierung Erbkrankheiten auf der Pre-mRNA-Ebene.

Trans-splicing-vermittelter Verbesserung in einem schweren Mausmodell der spinalen Muskelatrophie.

Atrofia muscolare spinale &egrave; una causa genetica di morte infantile e si verifica in circa 1/6000 nati vivi. SMA &egrave; causata dalla perdita di Survival Motor Neuron-1 (SMN1), tuttavia, tutti i pazienti conservano almeno una copia di un gene quasi identico chiamato SMN2. Mentre SMN2 e SMN1 sono costituite da sequenze codificanti identici, la maggior parte delle trascrizioni SMN2 &egrave; splicing, codifica una proteina tronca che &egrave; instabile e non funzionali. Uno sforzo considerevole ha concentrato su modulando l&#39;evento splicing alternativo SMN2 poich&eacute; questo produrrebbe pi&ugrave; proteina wild-type. Recentemente abbiamo segnalato lo sviluppo di un sistema ottimizzato di trans-splicing che ha coinvolto il coexpression di un SMN2 trans-splicing RNA e un RNA antisenso che blocca un sito di splicing a valle in SMN2 pre-mRNA. Qui, ci dimostrano che consegna in vivo del vettore trans-splicing ottimizzato aumenta un&#39;importante attivit&agrave; di SMN-dipendente, snRNP assieme, in tessuto rilevante per la malattia nel modello murino di SMA. Una singola iniezione del vettore nello spazio intracerebrale-ventricolare in SMA neonati diminuisce anche la gravit&agrave; del fenotipo SMA in un modello murino di SMA grave, estendendo la sopravvivenza circa il 70%. Collettivamente, questi risultati forniscono la prima dimostrazione in vivo che SMN2 trans-splicing conduce ad una diminuzione della gravit&agrave; del fenotipo SMA e forniscono la prova per la potenza di questa strategia per riprogrammazione malattie genetiche a livello pre-mRNA.

Trans-splicing-mediato miglioramento in un modello murino grave di atrofia muscolare spinale.

&#x810A;&#x9AC4;&#x6027;&#x7B4B;&#x840E;&#x7E2E;&#x75C7;&#x306F;&#x3001;&#x4E73;&#x5150;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x7D04;6000&#x5206;&#x306E;1&#x306E;&#x51FA;&#x751F;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; SMA&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x5B58;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;-1&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#xFF08;SMN1&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x304C;SMN2&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x307B;&#x307C;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;1&#x3064;&#x306E;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; SMN2&#x3068;SMN1&#x304C;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x914D;&#x5217;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;SMN2&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x52AA;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x8ABF;SMN2&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;SMN2&#x306E;pre-mRNA&#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306B;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;SMN2&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;RNA&#x3068;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;RNA&#x306E;&#x5171;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x306B;SMA&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x75BE;&#x60A3;&#x95A2;&#x9023;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x3001;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;SMN&#x4F9D;&#x5B58;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3001;snRNP&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; SMA&#x306E;&#x65B0;&#x751F;&#x5150;&#x306E;&#x8133;&#x5FC3;&#x5BA4;&#x7A7A;&#x9593;&#x3078;&#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5358;&#x56DE;&#x6CE8;&#x5C04;&#x3067;&#x3082;&#x751F;&#x5B58;&#x306E;&#x7D04;70&#xFF05;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x3001;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;SMA&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;SMA&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x91CD;&#x75C7;&#x5EA6;&#x3092;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;SMN2&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;SMA&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x91CD;&#x75C7;&#x5EA6;&#x306E;&#x7DE9;&#x548C;&#x3092;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3068;&#x306E;pre-mRNA&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x3092;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x306E;&#x529B;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30C7;&#x30E2;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x810A;&#x9AC4;&#x6027;&#x7B4B;&#x840E;&#x7E2E;&#x75C7;&#x306E;&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x5A92;&#x4ECB;&#x6539;&#x5584;

&#xCC99;&#xCD94; &#xADFC;&#xC721; &#xC704;&#xCD95; &#xC720;&#xC544; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xC6D0;&#xC778;&#xC774; &#xB418;&#xBA70; &#xC57D; 1/6000 &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xCD9C;&#xC0DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; SMA&#xB294; &#xC11C;&#xBC14;&#xC774;&#xBC8C; &#xBAA8;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD;-1 (SMN1)&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD;,, &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD658;&#xC790; SMN2 &#xB77C;&#xB294; &#xAC70;&#xC758; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD558;&#xB098; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xBCF5;&#xC0AC;&#xBCF8;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. SMN2 &#xBC0F; SMN1 &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xCF54;&#xB529; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; SMN2 &#xC131;&#xC801; &#xC99D;&#xBA85;&#xC11C;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC740; &#xB610;&#xB294; &#xBC30;&#xC120;, &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xC798;&#xB9B0;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;. &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xB178;&#xB825; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xD560; &#xAC83;&#xC774; SMN2 &#xB300;&#xCCB4; &#xC811;&#xD569; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xBCC0;&#xC870; &#xC2DC; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xB9DE;&#xCD94;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; smn2&#xC758; coexpression &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB41C; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBCF4;&#xB3C4; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569; RNA &#xBC0F; SMN2 &#xC0AC;&#xC804; Mrna&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC2A4;&#xD50C;&#xB77C;&#xC774;&#xC2A4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xB294; &#xC13C;&#xC2A4; RNA. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB41C; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569; &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBC30;&#xB2EC; &#xC911;&#xC694; SMN &#xC885;&#xC18D; &#xD65C;&#xB3D9;, SMA &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xAD00;&#xB828; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; snRNP &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. SMA &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; intracerebral &#xC2EC; &#xC2E4; &#xACF5;&#xAC04;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xB610;&#xD55C; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; SMA &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378; &#xD655;&#xC7A5; &#xC0DD;&#xC874; &#xC57D; 70%&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; SMA &#xD615;&#xC758; &#xC2EC;&#xAC01;&#xB3C4; &#xC904;&#xC778;&#xB2E4;. &#xC9D1;&#xD569;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569; SMN2 &#xB9AC;&#xB4DC; SMA &#xD615;&#xC758; &#xC2EC;&#xAC01;&#xB3C4; &#xC904;&#xC774;&#xB294; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xB370;&#xBAA8; &#xD558; &#xACE0; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;&#xC744; &#xC774;&#xC804; mRNA &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC9C8;&#xD658;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;&#xC774; &#xC804;&#xB7B5;&#xC758; &#xD798;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;.

&#xD6A1;&#xB2E8; &#xC811;&#xD569; &#xC911;&#xC7AC; &#xCC99;&#xC218; &#xADFC;&#xC721; &#xC704;&#xCD95; &#xC99D;&#xC758; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xC120;.

La atrofia muscular espinal es la principal causa gen&#xE9;tica de la muerte infantil y ocurre en aproximadamente 1/6000 nacidos vivos. SMA es causado por la p&#xE9;rdida de supervivencia de las neuronas motoras-1 (SMN1), sin embargo, todos los pacientes retener al menos una copia de un gen casi id&#xE9;ntico llamado SMN2. Mientras SMN2 y SMN1 se componen de id&#xE9;nticas secuencias de codificaci&#xF3;n, la mayor&#xED;a de SMN2 transcripciones son empalmados alternativamente, que codifica una prote&#xED;na truncada que es inestable y no funcionales. Un esfuerzo considerable se ha centrado en la modulaci&#xF3;n de la evento SMN2 empalme alternativo ya que esto producir&#xE1; m&#xE1;s prote&#xED;na de tipo salvaje. Recientemente se inform&#xF3; de la elaboraci&#xF3;n de un optimizado sistema de trans-empalme que involucr&#xF3; a la co-expresi&#xF3;n de un SMN2 transeuropeas de empalme de ARN y un ARN antisentido que bloquea un sitio de empalme aguas abajo en el SMN2 pre-mRNA. Aqu&#xED;, nos demuestran que en la entrega in vivo de la trans-empalme optimizado aumenta un importante vector de SMN dependiente de la actividad, snRNP asamblea, en la enfermedad de los tejidos relevante en el modelo de rat&#xF3;n de SMA. Una sola inyecci&#xF3;n del vector en el espacio intracerebral-ventricular en neonatos SMA tambi&#xE9;n reduce la severidad del fenotipo SMA en un modelo de rat&#xF3;n SMA severa, prolongar la supervivencia de aproximadamente 70%. En conjunto, estos resultados proporcionan la primera demostraci&#xF3;n in vivo que SMN2 trans-empalme lleva a una disminuci&#xF3;n de la severidad del fenotipo SMA y aportar pruebas de la fuerza de esta estrategia para la reprogramaci&#xF3;n de las enfermedades gen&#xE9;ticas en el nivel de pre-mRNA.

Trans-empalme mediada mejora en un modelo de rat&#xF3;n grave de la Atrofia Muscular Espinal

Ribonucleoprotein (RNP) &#xB2E8;&#xC9C0; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C;. Spliceosome&#xAC00; &#xC774;&#xB2E4; introns &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; catalytically&#xC758; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801;, &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801;, &#xC808;&#xBB18; &#xD55C; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xC911;&#xAC04; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBC0F; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC9C4; &#xC2DD; &#xC81C;&#xAC70; &#xD544;&#xC218; RNP. U Snrnps&#xB97C; spliceosome&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE4C;&#xB529; &#xBE14;&#xB85D;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD544;&#xC218; &#xC785;&#xC790;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC870;&#xB9BD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xAC89;&#xBCF4;&#xAE30; &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xC740; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xC654;&#xB2E4;: neurodegeneration. &#xC11C;&#xBC14;&#xC774;&#xBC8C; &#xBAA8;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD; (SMN) &#xCC99;&#xC218; &#xADFC;&#xC721; &#xC704;&#xCD95; &#xC99D; (SMA) &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD1F4;&#xD589; &#xC131; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC; SMN1 homozygous &#xC190;&#xC2E4; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; Snrnps&#xC758; &#xC131;&#xC219;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC218;&#xD589;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB9AC;&#xBDF0;&#xC5D0;&#xC11C; snRNP &#xC18D;&#xC758; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; SMN &#xAE30;&#xB2A5; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC0F; SMN &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xACB0;&#xD568; snRNP &#xC18D;&#xC5D0; SMA&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xBAA8;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBCD1; &#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACC4;&#xC815; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC;.

SMN &#xCC99;&#xCD94; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xC704;&#xCD95;&#xACFC; snRNP &#xC18D;&#xC5D0;.

Ribonucleoprotein (RNP) komplexe Funktion in fast jede Facette der Zellaktivit&auml;t. Das Spliceosom ist eine wesentliche RNP, die genau identifiziert Introns und katalytisch entfernt die dazwischenliegenden Sequenzen, eine exquisite Kontrolle der r&auml;umliche, zeitliche, und Entwicklungsst&ouml;rungen gen Ausdr&uuml;cke. U-SnRNPs sind die Bausteine f&uuml;r das Spliceosom. Eine erhebliche Menge an Einblick in die molekulare Assembly dieser grundlegenden Partikel ist vor kurzem von einem scheinbar unerwarteten Forschungsfeld gekommen: Neurodegeneration. Survival Motorneuron (SMN) f&uuml;hrt eine wesentliche Rolle bei der Reifung der SnRNPs, w&auml;hrend der homozygoten Verlust des SMN1 Ergebnisse bei der Entwicklung der spinalen Muskelatrophie (SMA), eine verheerende Neurodegenerative Krankheit. In diesem Bericht die Funktion des SMN wird untersucht im Rahmen der SnRNP Biogenese und Beweise wird untersucht, was darauf hindeutet, dass die Motoneuron-Pathologie in SMA beobachtet die SMN-Funktionsst&ouml;rungen in SnRNP Biogenese entfallen k&ouml;nnen.

SMN in spinale muskul&ouml;se Atrophie und SnRNP Biogenese.

Funzione di complessi ribonucleoproteina (RNP) in quasi ogni aspetto dell&#39;attivit&agrave; cellulare. Lo spliceosoma &egrave; un RNP essenziale che identifica con precisione gli introni e cataliticamente rimuove le sequenze intermedie, fornendo il controllo squisito di spaziale e temporale e le espressioni del gene dello sviluppo. U-biogen&egrave;se sono i blocchetti di costruzione per lo spliceosoma. Una quantit&agrave; significativa di visione l&#39;assemblaggio molecolare di queste particelle essenziali &egrave; venuto recentemente da una zona apparentemente inaspettata della ricerca: neurodegenerazione. Survival motor neuron (SMN) svolge un ruolo essenziale nella maturazione del biogen&egrave;se, mentre la perdita omozigote di SMN1 risultati nello sviluppo di atrofia muscolare spinale (SMA), una devastante malattia neurodegenerativa. In questa recensione, la funzione di SMN &egrave; esaminata nel contesto della biogenesi snRNP e prova che suggerisce che i difetti funzionali SMN nella biogenesi snRNP possono spiegare la patologia del motoneurone osservata in SMA &egrave; esaminato.

SMN in spinal muscular biogenesi atrofia e snRNP.

&#x30EA;&#x30DC;&#x6838;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;RNP&#xFF09;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x307B;&#x307C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x9762;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x3001;&#x767A;&#x9054;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x7D76;&#x5999;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;&#x89E6;&#x5A92;&#x4ECB;&#x5728;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x9808;&#x306E;RNP&#x3067;&#x3059;&#x3002; U-snRNPs&#x306F;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D3;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#xFF1A;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x96C6;&#x5408;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x529B;&#x306E;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x4E00;&#x898B;&#x4E88;&#x60F3;&#x5916;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x304B;&#x3089;&#x6765;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x751F;&#x5B58;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#xFF08;SMN&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x9AC4;&#x6027;&#x7B4B;&#x840E;&#x7E2E;&#x75C7;&#xFF08;SMA&#xFF09;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;SMN1&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x30DB;&#x30E2;&#x63A5;&#x5408;&#x6027;&#x55AA;&#x5931;&#x3001;&#x58CA;&#x6EC5;&#x7684;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;snRNPs&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3067;&#x306F;&#x3001;SMN&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;snRNP&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x5185;&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x3001;snRNP&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;SMN&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6B20;&#x9665;&#x304C;SMA&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x75C5;&#x5909;&#x3092;&#x5360;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x810A;&#x9AC4;&#x6027;&#x7B4B;&#x840E;&#x7E2E;&#x75C7;&#x3068;SnRNP&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;SMN

Ribonucl&#xE9;oprot&#xE9;ine (RNP) complexes fonctionnent dans presque toutes les facettes de l&#x26;#39;activit&#xE9; cellulaire. Le spliceosome est un RNP essentielle qui identifie avec pr&#xE9;cision les introns et supprime les s&#xE9;quences interm&#xE9;diaires catalytique, fournissant un contr&#xF4;le exquis de l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes spatiales, temporelles, et de d&#xE9;veloppement. U-snRNP sont les blocs de construction pour le spliceosome. Une quantit&#xE9; importante de perspicacit&#xE9; dans l&#x26;#39;assemblage mol&#xE9;culaire de ces particules essentielles a r&#xE9;cemment arriv&#xE9; d&#x26;#39;un domaine apparemment inattendue de la recherche: la neurod&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence. Survie des neurones moteurs (SMN) joue un r&#xF4;le essentiel dans la maturation des snRNP, tandis que la perte homozygote de SMN1 r&#xE9;sultats dans le d&#xE9;veloppement de l&#x26;#39;atrophie musculaire spinale (SMA), une maladie neurod&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rative d&#xE9;vastatrice. Dans cette revue, la fonction de SMN est examin&#xE9;e dans le contexte de la biogen&#xE8;se des snRNP et les preuves sont examin&#xE9;es ce qui sugg&#xE8;re que les d&#xE9;fauts fonctionnels SMN dans la biogen&#xE8;se des snRNP peut expliquer la pathologie du neurone moteur observ&#xE9;e dans SMA.

SMN dans l&#x26;#39;amyotrophie spinale et la biogen&#xE8;se snRNP

&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x86CB;&#x767D; (&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#xFF09; &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5C42;&#x9762;&#x3002;&#x526A;&#x63A5;&#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x51C6;&#x786E;&#x6807;&#x8BC6;&#x5185;&#x542B;&#x5B50;&#x548C;&#x50AC;&#x5316;&#x4E2D;&#x79FB;&#x9664;&#x4E2D;&#x95F4;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7CBE;&#x81F4;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x3001; &#x65F6;&#x95F4;&#xFF0C;&#x63A7;&#x5236;&#x548C;&#x53D1;&#x80B2;&#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;U snRNPs &#x662F;&#x526A;&#x63A5;&#x7684;&#x6784;&#x5EFA;&#x5757;&#x3002;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x6DF1;&#x5165;&#x4E86;&#x89E3;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x7C92;&#x5B50;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x5927;&#x4F1A;&#x6700;&#x8FD1;&#x6765;&#x81EA;&#x4E00;&#x4E2A;&#x770B;&#x4F3C;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x9886;&#x57DF;&#xFF1A; &#x795E;&#x7ECF;&#x53D8;&#x6027;&#x3002;&#x751F;&#x5B58;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143; &#xFF08;SMN&#xFF09; &#x6267;&#x884C;&#x7684; snRNPs&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x7EAF;&#x5408;&#x635F;&#x5931; SMN1 &#x7ED3;&#x679C;&#x4E2D;&#x7684;&#x810A;&#x9AD3;&#x6027;&#x808C;&#x840E;&#x7F29;&#x75C7; (SMA)&#xFF0C;&#x7834;&#x574F;&#x6027;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x9000;&#x884C;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x6B21;&#x5BA1;&#x67E5;&#xFF0C;SMN &#x7684;&#x51FD;&#x6570; snRNP &#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x5BA1;&#x67E5;&#x548C;&#x8BC1;&#x636E;&#x68C0;&#x67E5;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; snRNP &#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x751F; SMN &#x529F;&#x80FD;&#x7F3A;&#x9677;&#x53EF;&#x80FD;&#x5360; SMA &#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x75C5;&#x7406;&#x3002;

&#x810A;&#x9AD3;&#x6027;&#x808C;&#x840E;&#x7F29;&#x548C; snRNP &#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x751F;&#x5728; SMN&#x3002;

Ribonucleoprotein (RNP) complexes function in nearly every facet of cellular activity. The spliceosome is an essential RNP that accurately identifies introns and catalytically removes the intervening sequences, providing exquisite control of spatial, temporal, and developmental gene expressions. U-snRNPs are the building blocks for the spliceosome. A significant amount of insight into the molecular assembly of these essential particles has recently come from a seemingly unexpected area of research: neurodegeneration. Survival motor neuron (SMN) performs an essential role in the maturation of snRNPs, while the homozygous loss of SMN1 results in the development of spinal muscular atrophy (SMA), a devastating neurodegenerative disease. In this review, the function of SMN is examined within the context of snRNP biogenesis and evidence is examined which suggests that the SMN functional defects in snRNP biogenesis may account for the motor neuron pathology observed in SMA.

SMN in spinal muscular atrophy and snRNP biogenesis.

Ribonucleoprote&#xED;na (RNP) complejos de funcionar en casi todas las facetas de la actividad celular. El spliceosome es un RNP esencial que identifica con precisi&#xF3;n los intrones y catal&#xED;ticamente elimina las secuencias que intervienen, proporcionando un control exquisito de las expresiones de genes espaciales, temporales, y de desarrollo. U snRNPs son los bloques de construcci&#xF3;n para el spliceosome. Una parte importante de la penetraci&#xF3;n en el ensamblaje molecular de estas part&#xED;culas esenciales recientemente ha salido de un &#xE1;rea aparentemente inesperado de la investigaci&#xF3;n: la neurodegeneraci&#xF3;n. La supervivencia de la neurona motora (SMN) realiza un papel esencial en la maduraci&#xF3;n de snRNPs, mientras que la p&#xE9;rdida homocig&#xF3;tica de SMN1 resultados en el desarrollo de la atrofia muscular espinal (AME), una enfermedad neurodegenerativa devastadora. En esta revisi&#xF3;n, la funci&#xF3;n del SMN se examina en el contexto de la biog&#xE9;nesis snRNP y las pruebas se examina lo que sugiere que los defectos funcionales del SMN en la biog&#xE9;nesis snRNP puede dar cuenta de la patolog&#xED;a de las neuronas motoras observadas en la SMA.

Tristan H. Coady

Department of Biological Sciences

Columbia University

Delivery of Therapeutic Agents Through Intracerebroventricular (ICV) and Intravenous (IV) Injection in Mice