Constructing a Low-budget Laser Axotomy System to Study Axon Regeneration in <em>C. elegans</em>

Laser axotomy followed by time-lapse microscopy is a sensitive assay for axon regeneration phenotypes in C. elegans1.  The main difficulty of this assay ...

University of Utah

&#x7537;&#x6027;&#x4E0D;&#x80B2;&#x75C7;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x957F;&#x671F;&#x533B;&#x7597;&#x5F15;&#x8D77;&#x91CD;&#x5927;&#x5173;&#x6CE8;&#x7684;&#x8C1C;&#x3002;&#x7CBE;&#x5B50;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x662F;&#x7537;&#x6027;&#x7684;&#x751F;&#x80B2;&#x80FD;&#x529B;&#x548C;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x53D7;&#x7CBE;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6307;&#x6807;&#xFF1A; &#x975E;&#x6574;&#x500D;&#x4F53;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x548C; DNA decondensation &#x6216;&#x635F;&#x5BB3;&#x76F8;&#x5173;&#x751F;&#x6B96;&#x529F;&#x80FD;&#x8870;&#x7AED;&#x3002;&#x8BC6;&#x522B;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x5305;&#x88C5;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x4E0D;&#x5B55;&#x4E0D;&#x80B2;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5B66;&#x548C;&#x4E2D;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x751F;&#x80B2;&#x7387;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x751F;&#x7CBE;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x91C7;&#x7528;&#x591A;&#x4E2A;&#x6B65;&#x9AA4;&#xFF1A; &#x4ECE;&#x53EF;&#x6BD4;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7EAF;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x5373;&#x90A3;&#x4E9B;&#x7ECF;&#x5386;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6216;&#x5375;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F; &#xFF1B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x591A;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x8BC6;&#x522B;&#x6280;&#x672F; &#xFF08;MudPIT&#xFF09; &#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28; &#xFF1B; &#x4E0E; co-purify &#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x57FA;&#x4E8E;&#x4E30;&#x5EA6; &#xFF1B; &#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x4F18;&#x5148;&#x6B21;&#x5E8F;&#x548C;&#x51CF;&#x6CD5;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6765;&#x6D88;&#x9664;&#x4E00;&#x822C;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x548C;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x51CF;&#x5C11;&#x751F;&#x7CBE;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#xFF0C;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x6700;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x76EE;&#x5F55;&#x3001; 132 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x4E0E; co-purified &#x7684; 1,099 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x51CF;&#x5C11;&#x901A;&#x8FC7; RNA &#x5E72;&#x6270;&#x6280;&#x672F;&#x52A0;&#x4E0A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x7814;&#x7A76;&#x57FA;&#x56E0;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x63ED;&#x793A;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7CBE;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#x7279;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; DNA &#x538B;&#x5B9E;&#x3001; &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x9694;&#x79BB;&#x548C;&#x751F;&#x80B2;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x5728;&#x5176;&#x4ED6;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x4E5F;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x610F;&#x5916;&#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7B56;&#x7565;&#x8981;&#x67E5;&#x627E;&#x5230;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x4ECE;&#x7EBF;&#x866B;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x80A5;&#x529B;&#x56E0;&#x7D20;&#x8FBE;&#x5230;&#x5B83;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#xFF1A; &#x5BF9;&#x5E94;&#x4E8E;&#x7EBF;&#x866B;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;37%(7/19) &#x5BFC;&#x81F4;&#x96C4;&#x6027;&#x4E0D;&#x80B2;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5217;&#x8868;&#x63D0;&#x4F9B;&#x91CD;&#x8981;&#x673A;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FBF;&#x67E5;&#x660E;&#x539F;&#x56E0;&#x7684;&#x7537;&#x6027;&#x4E0D;&#x80B2;&#x548C;&#x7537;&#x6027;&#x907F;&#x5B55;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

&#x7CBE;&#x5B50;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x6807;&#x8BC6;&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x7684;&#x80A5;&#x529B;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

Male infertility is a long-standing enigma of significant medical concern. The integrity of sperm chromatin is a clinical indicator of male fertility and in vitro fertilization potential: chromosome aneuploidy and DNA decondensation or damage are correlated with reproductive failure. Identifying conserved proteins important for sperm chromatin structure and packaging can reveal universal causes of infertility. Here we combine proteomics, cytology and functional analysis in Caenorhabditis elegans to identify spermatogenic chromatin-associated proteins that are important for fertility. Our strategy employed multiple steps: purification of chromatin from comparable meiotic cell types, namely those undergoing spermatogenesis or oogenesis; proteomic analysis by multidimensional protein identification technology (MudPIT) of factors that co-purify with chromatin; prioritization of sperm proteins based on abundance; and subtraction of common proteins to eliminate general chromatin and meiotic factors. Our approach reduced 1,099 proteins co-purified with spermatogenic chromatin, currently the most extensive catalogue, to 132 proteins for functional analysis. Reduction of gene function through RNA interference coupled with protein localization studies revealed conserved spermatogenesis-specific proteins vital for DNA compaction, chromosome segregation, and fertility. Unexpected roles in spermatogenesis were also detected for factors involved in other processes. Our strategy to find fertility factors conserved from C. elegans to mammals achieved its goal: of mouse gene knockouts corresponding to nematode proteins, 37% (7/19) cause male sterility. Our list therefore provides significant opportunity to identify causes of male infertility and targets for male contraceptives.

Sperm chromatin proteomics identifies evolutionarily conserved fertility factors.

Infertilit&eacute; masculine est une &eacute;nigme depuis longue de graves pr&eacute;occupations m&eacute;dicales. L&#39;int&eacute;grit&eacute; de la chromatine de sperme est un indicateur clinique de fertilit&eacute; masculine et les potentielle de f&eacute;condation in vitro : aneuplo&iuml;die chromosomique et de d&eacute;condensation de l&#39;ADN ou de dommage sont corr&eacute;l&eacute;es avec l&#39;&eacute;chec de la reproduction. Identification des prot&eacute;ines conserv&eacute;es importants pour la structure de la chromatine de sperme et l&#39;emballage peuvent r&eacute;v&eacute;ler universels causes de l&#39;infertilit&eacute;. Ici, nous combinons prot&eacute;omique, cytologie et analyse fonctionnelle chez Caenorhabditis elegans afin d&#39;identifier les prot&eacute;ines associ&eacute;es &agrave; la chromatine spermatog&eacute;niques qui sont importants pour la fertilit&eacute;. Notre strat&eacute;gie employ&eacute;e plusieurs &eacute;tapes : types de purification de la chromatine de cellule m&eacute;iotique comparable, &agrave; savoir celles soumises &agrave; la spermatogen&egrave;se et l&#39;ovogen&egrave;se ; analyse prot&eacute;omique de technologie d&#39;identification de prot&eacute;ine multidimensionnelle (MudPIT) des facteurs qui co-purifier avec la chromatine ; priorisation des prot&eacute;ines de sperme bas&eacute;es sur l&#39;abondance ; et la soustraction des prot&eacute;ines communes visant &agrave; &eacute;liminer la chromatine g&eacute;n&eacute;rale et facteurs m&eacute;iotiques. Notre approche r&eacute;duit 1 099 prot&eacute;ines membranaires &agrave; la chromatine spermatogen&egrave;se, actuellement le plus vaste catalogue, &agrave; 132 prot&eacute;ines analyse fonctionnelle. R&eacute;duction de la fonction des g&egrave;nes par le biais de l&#39;interf&eacute;rence ARN coupl&eacute; avec les &eacute;tudes de localisation de prot&eacute;ine a r&eacute;v&eacute;l&eacute; des prot&eacute;ines sp&eacute;cifiques &agrave; la spermatogen&egrave;se conserv&eacute;es vitales pour ADN compactage, s&eacute;gr&eacute;gation des chromosomes et la fertilit&eacute;. R&ocirc;les inattendus dans la spermatogen&egrave;se ont aussi &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;s pour les facteurs impliqu&eacute;s dans d&#39;autres proc&eacute;d&eacute;s. Notre strat&eacute;gie visant &agrave; rechercher les facteurs de fertilit&eacute; conserv&eacute;s de c. elegans aux mammif&egrave;res atteint son objectif : des d&eacute;bouchures de g&egrave;ne de souris correspondant aux prot&eacute;ines n&eacute;matodes, 37 % (7/19) cause de st&eacute;rilit&eacute; m&acirc;le. Notre liste fournit donc une occasion importante pour identifier les causes de l&#39;infertilit&eacute; masculine et de cibles pour les contraceptifs masculins.

Sperm chromatine prot&eacute;omique identifie les facteurs de fertilit&eacute; &eacute;volutivement conserv&eacute;s.

M&auml;nnliche Infertilit&auml;t ist eine seit langem R&auml;tsel der bedeutenden medizinischen Anliegen. Die Integrit&auml;t der Sperm Chromatin ist ein klinischer Indikator f&uuml;r m&auml;nnliche Fruchtbarkeit und potenzielle Befruchtung: Chromosom Aneuploidie und DNA-Decondensation oder Sch&auml;den mit reproduktiven Ausfall korreliert sind. Ermittlung von konservierte Proteinen wichtig f&uuml;r Sperm Chromatin Struktur und Verpackung k&ouml;nnen universale Ursachen der Unfruchtbarkeit aufzeigen. Hier verbinden wir Proteomics, Zytologie und Funktionalanalysis in Caenorhabditis Elegans spermatogenic Chromatin-assoziierte Proteine zu identifizieren, die f&uuml;r die Fruchtbarkeit wichtig sind. Unsere Strategie besch&auml;ftigt mehrere Schritte: Reinigung von Chromatin aus vergleichbaren meiotischen Zelle eingibt, n&auml;mlich jene, die Spermatogenese und Oogenese; Proteomic Analyse von mehrdimensionalen Protein Identifikationstechnologie (MudPIT) von Faktoren, die mit Chromatin co-purify; Priorisierung von Spermien Proteine auf der Grundlage von F&uuml;lle; und Subtraktion der gemeinsamen Proteine allgemeine Chromatin und meiotischen Faktoren zu beseitigen. Unser Ansatz reduziert 1.099 Proteine co-purified mit spermatogenic Chromatin, derzeit umfangreichste Katalog 132 Proteine f&uuml;r Funktionalanalysis. Reduzierung der Genfunktion durch RNA-Interferenz, gepaart mit Protein-Lokalisierung-Studien ergab konservierten Spermatogenese-spezifische Proteine lebenswichtig f&uuml;r DNA Verdichtung, Chromosom Rassentrennung und Fruchtbarkeit. Unerwartete Rollen in Spermatogenese wurden auch f&uuml;r Faktoren, die in anderen Prozessen erkannt. Unsere Strategie, Fruchtbarkeit Faktoren konserviert von C. Elegans bis zu den S&auml;ugetieren zu finden sein Ziel erreicht: der Maus gen Aussparungen, Fadenw&uuml;rmer Proteine, 37 % (7/19) Ursache m&auml;nnlicher Sterilit&auml;t entspricht. Unsere Liste enth&auml;lt daher bedeutende Gelegenheit die Ursachen der m&auml;nnlichen Unfruchtbarkeit und Ziele f&uuml;r die m&auml;nnlichen Kontrazeptiva zu.

Sperm Chromatin Proteomics identifiziert evolution&auml;r konservierte Fruchtbarkeit Faktoren.

Infertilit&agrave; maschile &egrave; un annoso enigma di notevole preoccupazione medica. L&#39;integrit&agrave; della cromatina degli spermatozoi &egrave; un indicatore clinico di fertilit&agrave; maschile e di potenziale di fecondazione in vitro: aneuploidia cromosomica e decondensazione DNA o danni sono correlate con fallimento riproduttivo. Identificando le proteine conservate importanti per la struttura della cromatina degli spermatozoi e imballaggio pu&ograve; rivelare universale cause di infertilit&agrave;. Qui combiniamo proteomics, citologia e analisi funzionale in Caenorhabditis elegans per identificare le proteine della cromatina associata spermatogenic che sono importanti per la fertilit&agrave;. La nostra strategia impiegata pi&ugrave; passaggi: tipi di purificazione della cromatina da paragonabile meiotic delle cellule, vale a dire quelli in fase di spermatogenesi o ovogenesi; Analisi proteomic di tecnologia di identificazione della proteina multidimensionale (MudPIT) di fattori che co-purify con cromatina; Prioritizzazione delle proteine dello sperma basato sull&#39;abbondanza; e sottrazione di proteine comuni per eliminare fattori meiotica e generale della cromatina. Il nostro approccio ridotto 1.099 proteine co-purified con cromatina spermatogenic, attualmente il pi&ugrave; ampio catalogo, 132 delle proteine per l&#39;analisi funzionale. Riduzione della funzione del gene attraverso interferenza RNA accoppiato con studi di localizzazione della proteina ha rivelato conservate spermatogenesi specifiche proteine vitali per la compattazione del DNA, segregazione del cromosoma e fertilit&agrave;. Ruoli inattesi della spermatogenesi sono stati rilevati anche per fattori coinvolti in altri processi. La nostra strategia per trovare fattori di fertilit&agrave; conservate dal c. elegans a mammiferi raggiunto il suo obiettivo: di Knockout gene mouse corrispondenti ai nematodi proteine, 37% (7/19) causa sterilit&agrave; maschile. Il nostro elenco fornisce quindi significative opportunit&agrave; per identificare le cause di infertilit&agrave; maschile e obiettivi di contraccettivi maschili.

Lo sperma della cromatina proteomica identifica evolutionarily conserved fattori di fertilit&agrave;.

&#x7537;&#x6027;&#x4E0D;&#x598A;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x533B;&#x5B66;&#x7684;&#x95A2;&#x5FC3;&#x306E;&#x9577;&#x5E74;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x308B;&#x8B0E;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7537;&#x6027;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x80FD;&#x529B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x4F53;&#x5916;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x6307;&#x6A19;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;: &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7570;&#x6570;&#x6027;&#x3068; DNA decondensation &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x640D;&#x50B7;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x6B96;&#x969C;&#x5BB3;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x306A;&#x4E0D;&#x598A;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x306F;&#x3001;&#x7CBE;&#x5B50;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3068;&#x5305;&#x88C5;&#x306B;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;, &#x7D30;&#x80DE;&#x8A3A;&#x3068;&#x4E0D;&#x598A;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x7DDA;&#x866B;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;: &#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x5339;&#x6575;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7CBE;&#x88FD;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3001;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3084;&#x5375;&#x5F62;&#x6210;; &#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x6B21;&#x5143;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x540C;&#x5B9A;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CE;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC; (MudPIT) co-purify &#x3068;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x89E3;&#x6790;;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x512A;&#x5148;&#x9806;&#x4F4D;&#x4ED8;&#x3051;;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6E1B;&#x7B97;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3068;&#x9020;&#x7CBE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x6700;&#x3082;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x30AB;&#x30BF;&#x30ED;&#x30B0;&#x3001;132 &#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#xFF0C; 1,099 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5C40;&#x5728;&#x8AD6;&#x3068; RNA &#x5E72;&#x6E09;&#x306E;&#x4F4E;&#x6E1B;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; DNA &#x7DE0;&#x56FA;&#x3081;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5206;&#x914D;&#x3068;&#x4E0D;&#x598A;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x904E;&#x7A0B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E88;&#x671F;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x8981;&#x56E0;&#x3082;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;C. elegans &#x304B;&#x3089;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x307E;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x306E;&#x4E0D;&#x598A;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x306B;&#x5F53;&#x793E;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x3092;&#x9054;&#x6210;: &#x7DDA;&#x866B;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;37% (7/19) &#x539F;&#x56E0;&#x96C4;&#x6027;&#x4E0D;&#x7A14;&#x6027;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x306E;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x7537;&#x6027;&#x4E0D;&#x598A;&#x30FB;&#x7537;&#x6027;&#x907F;&#x598A;&#x85AC;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6A5F;&#x4F1A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7CBE;&#x5B50;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E0D;&#x598A;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB0A8;&#xC131; &#xBD88; &#xC784;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC758;&#xB8CC; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC0AC;&#xC758; &#xC624;&#xB79C; &#xC218;&#xC218;&#xAED8;&#xB07C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC815;&#xC790; chromatin&#xC758; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131;&#xC740; &#xB0A8;&#xC131; &#xBD88; &#xC784; &#xBC0F; &#xCCB4; &#xC678; &#xC218;&#xC815; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC784;&#xC0C1; &#xC9C0;&#xD45C;: &#xC774;&#xC218;&#xC131; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBC0F; DNA decondensation &#xB610;&#xB294; &#xC190;&#xC0C1; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC2E4;&#xD328;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00;. &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC815;&#xC790; chromatin &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xBD88;&#xBAA8;&#xC758; &#xBCF4;&#xD3B8;&#xC801;&#xC778; &#xC6D0;&#xC778;&#xC740; &#xBC1D;&#xD790; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; proteomics, &#xC138;&#xD3EC;&#xD559; &#xBC0F; &#xBD88; &#xC784;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; spermatogenic chromatin &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD;&#xBCC4; Caenorhabditis elegans &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xACB0;&#xD569;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC804;&#xB7B5; &#xACE0;&#xC6A9; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB2E8;&#xACC4;: &#xC815;&#xD654; &#xBE44;&#xAD50; meiotic &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; chromatin&#xC758; &#xC720;&#xD615;, &#xC989; &#xADF8; spermatogenesis &#xB610;&#xB294; oogenesis; chromatin;&#xC640; co-purify &#xC694;&#xC18C;&#xC758; &#xB2E4;&#xCC28;&#xC6D0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xAE30;&#xC220; (MudPIT)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; proteomic &#xBD84;&#xC11D; &#xC815;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C;;&#xC758; &#xC6B0;&#xC120; &#xC21C;&#xC704; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC77C;&#xBC18; chromatin &#xBC0F; meiotic &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBE7C;&#xAE30;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC740; spermatogenic chromatin, &#xD604;&#xC7AC; &#xAC00;&#xC7A5; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xCE74;&#xD0C8;&#xB85C;&#xADF8;, 132 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD574;&#xC640; co-purified 1099 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC10;&#xC18C;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC640; &#xACB0;&#xD569; &#xD558;&#xB294; RNA &#xAC04;&#xC12D;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; spermatogenesis &#xD2B9;&#xC815; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; DNA &#xC555;&#xCD95;, &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBD84;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xBD88; &#xC784;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. Spermatogenesis &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xC740; &#xC5ED;&#xD560; &#xB610;&#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC804;&#xB7B5; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; C. elegans&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xBD88; &#xC784; &#xC694;&#xC778; &#xCC3E;&#xAE30;: &#xC120; &#xCDA9; &#xB958; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, 37% (7/19) &#xC6D0;&#xC778; &#xB0A8;&#xC131; &#xBD88; &#xC784;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3;&#xC758;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBA85;&#xBD80;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB0A8;&#xC131; &#xBD88; &#xC784; &#xBC0F; &#xB0A8;&#xC131; &#xD53C;&#xC784;&#xC57D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;&#xC744; &#xD30C;&#xC545; &#xD558; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAE30;&#xD68C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xC815;&#xC790; chromatin proteomics &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xBD88; &#xC784; &#xC694;&#xC778;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Infertilidad masculina es un enigma de larga data de significativa preocupaci&oacute;n m&eacute;dica. La integridad de la cromatina esperm&aacute;tica es un indicador cl&iacute;nico de fertilidad masculina y el potencial de fertilizaci&oacute;n in vitro: aneuploide del cromosoma y decondensation de ADN o da&ntilde;o se correlacionan con falla reproductiva. Identificar prote&iacute;nas conservadas importantes para la estructura de la cromatina de esperma y embalaje pueden revelar universales causas de infertilidad. Aqu&iacute; combinamos prote&oacute;mica, citolog&iacute;a y an&aacute;lisis funcional en Caenorhabditis elegans para identificar prote&iacute;nas asociadas a cromatina espermatog&eacute;nica que son importantes para la fertilidad. Nuestra estrategia emple&oacute; varios pasos: tipos de purificaci&oacute;n de la cromatina de la c&eacute;lula mei&oacute;tica comparable, es decir, aquellos que experimentan la espermatog&eacute;nesis u Ovog&eacute;nesis; An&aacute;lisis prote&oacute;mico de la tecnolog&iacute;a de la identificaci&oacute;n de la prote&iacute;na multidimensional (MudPIT) de factores que co-purify con cromatina; priorizaci&oacute;n de las prote&iacute;nas de la esperma basado en abundancia; y resta de prote&iacute;nas comunes para eliminar factores mei&oacute;ticas y cromatina general. Nuestro enfoque reducido 1.099 prote&iacute;nas co-purified con cromatina espermatog&eacute;nica, actualmente el m&aacute;s extenso cat&aacute;logo, a 132 prote&iacute;nas para el an&aacute;lisis funcional. Reducci&oacute;n de funciones de los genes a trav&eacute;s de la interferencia del ARN juntada con estudios de localizaci&oacute;n de la prote&iacute;na revel&oacute; conservadas espermatog&eacute;nesis espec&iacute;fica prote&iacute;nas vitales para la compactaci&oacute;n del ADN, segregaci&oacute;n cromos&oacute;mica y la fertilidad. Tambi&eacute;n se detectaron papeles inesperados en la espermatog&eacute;nesis de factores implicados en otros procesos. Nuestra estrategia para encontrar factores de fertilidad conservados de C. elegans mam&iacute;feros logr&oacute; su objetivo: de nocauts de genes de rat&oacute;n correspondiente a prote&iacute;nas NEMATODAS, 37% (7/19) causa esterilidad masculina. Por lo tanto, la lista proporciona una oportunidad significativa para identificar causas de infertilidad masculina y objetivos para anticonceptivos masculinos.

Esperma cromatina prote&oacute;mica identifica factores de fertilidad evolutivamente conservados.

&#x808C;&#x8089;&#x6536;&#x7F29;&#x901A;&#x5E38;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x7684;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x8D28;&#x5B50;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5145;&#x5F53;&#x4ECE;&#x80A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x53D1;&#x5C04;&#x673A;&#xFF0C;&#x523A;&#x6FC0;&#x808C;&#x8089;&#x6536;&#x7F29;&#x3002;C.&#x7EBF;&#x866B;&#x6392;&#x4FBF;&#x7535;&#x673A;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x671F;&#x95F4;&#x540E;&#x8EAB;&#x4F53;&#x808C;&#x8089;&#x5408;&#x540C;&#x751A;&#x81F3;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6295;&#x5165;&#x6216;&#x6C34;&#x75B1;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x80A0;&#x9053;&#x4E0E;&#x808C;&#x8089;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x9178;&#x5316;&#x524D;&#x808C;&#x8089;&#x6536;&#x7F29;&#x548C;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x7B3C;&#x8D28;&#x5B50;&#x662F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x4F7F;&#x808C;&#x8089;&#x6536;&#x7F29;&#x3002;PBO 4 &#x662F;&#x5047;&#x5B9A;&#x5B58;&#x5728; Na + / H + &#x79BB;&#x5B50;&#x4EA4;&#x6362;&#x5668;&#x5728;&#x80A0;&#x5185;&#x7684;&#x57FA;&#x5E95;&#x5916;&#x4FA7;&#x819C;&#x4E0A;&#x8868;&#x793A;&#x5E76;&#x5217;&#x5230;&#x540E;&#x8EAB;&#x4F53;&#x808C;&#x8089;&#x3002;Pbo 4 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x6CA1;&#x6709;&#x9178;&#x5316;&#x548C;&#x808C;&#x8089;&#x4E0D;&#x80FD;&#x6536;&#x7F29;&#x3002;Pbo 5 &#x548C; pbo 6 &#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x808C;&#x8089;&#x6765;&#x56DE;&#x5E94;&#x9178;&#x5316;&quot;cys-&#x5FAA;&#x73AF;&quot;&#x8D28;&#x5B50;&#x95E8;&#x63A7;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x4E9A;&#x57FA;&#x3002;&#x5728;&#x5F02;&#x6E90;&#x8868;&#x8FBE;&#x68C0;&#x6D4B; PBO &#x53D7;&#x4F53;&#x5728; pH 6.8 &#x7684;&#x534A;-&#x6700;&#x5927;&#x9650;&#x5EA6;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x786E;&#x5B9A;&#x91CA;&#x653E;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x8D28;&#x5B50;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x63A5;&#x6536;&#x786E;&#x7ACB;&#x4E86;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7684;&#x6C9F;&#x901A;&#x673A;&#x5236;&#x6781;&#x4E0D;&#x5BFB;&#x5E38;&#x3002;

&#x8D28;&#x5B50;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x53D8;&#x9001;&#x5668;&#x7EBF;&#x866B;&#x4E2D;&#x808C;&#x8089;&#x6536;&#x7F29;&#x3002;

Muscle contraction is normally mediated by the release of neurotransmitters from motor neurons. Here we demonstrate that protons can act as a direct transmitter from intestinal cells to stimulate muscle contraction. During the C. elegans defecation motor program the posterior body muscles contract even in the absence of neuronal inputs or vesicular neurotransmission. In this study, we demonstrate that the space between the intestine and the muscle is acidified just prior to muscle contraction and that the release of caged protons is sufficient to induce muscle contraction. PBO-4 is a putative Na+/H+ ion exchanger expressed on the basolateral membrane of the intestine, juxtaposed to the posterior body muscles. In pbo-4 mutants the extracellular space is not acidified and the muscles fail to contract. The pbo-5 and pbo-6 genes encode subunits of a "cys-loop" proton-gated cation channel required for muscles to respond to acidification. In heterologous expression assays the PBO receptor is half-maximally activated at a pH of 6.8. The identification of the mechanisms for release and reception of proton signals establishes a highly unusual mechanism for intercellular communication.

Protons act as a transmitter for muscle contraction in C. elegans.

Normalement, la contraction musculaire est m&eacute;di&eacute;e par la lib&eacute;ration de neurotransmetteurs des neurones moteurs. Nous d&eacute;montrons que les protons peuvent agir comme un &eacute;metteur direct de cellules intestinales pour stimuler la contraction musculaire. Pendant le programme moteur de d&eacute;f&eacute;cation de c. elegans, les muscles du corps post&eacute;rieur contractent m&ecirc;me en l&#39;absence d&#39;intrants neuronales ou de neurotransmission v&eacute;siculaire. Dans cette &eacute;tude, nous d&eacute;montrons que l&#39;espace entre l&#39;intestin et le muscle est acidifi&eacute; juste avant la contraction du muscle et que la lib&eacute;ration de protons &quot;cage&quot; est suffisante pour induire la contraction musculaire. PBO-4 est un putatif Na + / H + &eacute;changeur ionique exprim&eacute; sur la membrane baso-lat&eacute;rale de l&#39;intestin, juxtapos&eacute;s aux muscles post&eacute;rieurs de corps. Chez les mutants pbo-4 l&#39;espace extracellulaire n&#39;est pas acidifi&eacute;e et les muscles ne parviennent pas &agrave; se contracter. Pbo-5 et pbo-6 g&egrave;nes codent des sous-unit&eacute;s d&#39;un canal cationique de proton-d&eacute;pendant &laquo; cys-loop &raquo; requis pour les muscles de r&eacute;agir &agrave; l&#39;acidification. Dans les essais d&#39;expression h&eacute;t&eacute;rologue le r&eacute;cepteur PBO intervient moiti&eacute;-au maximum &agrave; un pH de 6,8. L&#39;identification des m&eacute;canismes de diffusion et r&eacute;ception des signaux des protons &eacute;tablit un m&eacute;canisme tr&egrave;s inhabituel pour la communication intercellulaire.

Protons agissent comme un &eacute;metteur pour la contraction musculaire chez c. elegans.

Muskelkontraktion ist normalerweise durch die Freisetzung von Neurotransmittern aus Motoneuronen vermittelt. Hier zeigen wir, dass Protonen als direkter &Uuml;bermittler von Darmzellen Muskelkontraktion stimulieren fungieren k&ouml;nnen. Vertrag die hinteren Muskeln auch in Abwesenheit der neuronalen ein- oder vesikul&auml;ren Neurotransmission, w&auml;hrend das C. Elegans Stuhlgang-motor-Programm. In dieser Studie demonstriert, dass der Raum zwischen dem Darm und der Muskel kurz vor Muskelkontraktion anges&auml;uert wird und die Freigabe der K&auml;fig Protonen ausreicht, um die Muskelkontraktion zu induzieren. PBO-4 ist ein mutma&szlig;liches Na + / H + Ionen-Austauscher ausgedr&uuml;ckt auf der Basolateraler-Membran des Darms, nebeneinander zu den hinteren K&ouml;rper Muskeln. Im Pbo-4 Mutanten der extrazellul&auml;re Raum nicht anges&auml;uert wird und die Muskeln nicht schrumpfen. Die Pbo-5 und Pbo-6 Gene codieren Untereinheiten eines &quot;Cys-Loop&quot; Proton-Gating-kation-Kanals f&uuml;r die Muskeln zur Versauerung reagieren. Heterologe Expression Proben wird der PBO-Rezeptor bei einem pH-Wert von 6,8 H&auml;lfte maximal aktiviert. Die Identifizierung der Mechanismen f&uuml;r die Freigabe und Aufnahme von Protonen-Signale stellt einen h&ouml;chst ungew&ouml;hnlichen Mechanismus f&uuml;r die interzellul&auml;re Kommunikation.

Protonen wirken als ein Sender f&uuml;r Muskelkontraktion in C. Elegans.

Contrazione muscolare &egrave; normalmente mediata dal rilascio di neurotrasmettitori dai motoneuroni. Qui dimostriamo che i protoni possono agire come un trasmettitore diretto da cellule intestinali per stimolare la contrazione muscolare. Durante il programma motor di c. elegans defecazione dei muscoli posteriori del corpo contraggono anche in assenza di input neuronale o vescicolari dei neurotrasmettitori. In questo studio, ci dimostrano che lo spazio tra l&#39;intestino e il muscolo &egrave; acidificato appena prima della contrazione muscolare e che il rilascio di protoni in gabbia &egrave; sufficiente per indurre la contrazione muscolare. PBO-4 &egrave; un putativo Na + H + scambiatore di ioni espresso sulla membrana basolaterale dell&#39;intestino, giustapposti ai muscoli posteriori del corpo. Pbo-4 mutanti spazio extracellulare non &egrave; acidificato e i muscoli non riescono a contrarsi. I pbo-5 e pbo-6 geni codificano per le subunit&agrave; di un canale cationico &quot;cys-loop&quot; protone-gated necessaria per i muscoli rispondere all&#39;acidificazione. Nelle analisi di espressione eterologa il recettore PBO &egrave; attivato al massimo met&agrave; a pH 6,8. L&#39;identificazione dei meccanismi di rilascio e ricezione dei segnali del protone stabilisce un meccanismo altamente inusuale per la comunicazione intercellulare.

Protoni agiscono come un trasmettitore per la contrazione muscolare in c. elegans.

&#x901A;&#x5E38;, &#x7B4B;&#x53CE;&#x7E2E;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x653E;&#x51FA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x967D;&#x5B50;&#x304C;&#x7B4B;&#x8089;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30BF;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;C. elegans &#x306E;&#x6392;&#x4FBF;&#x904B;&#x52D5;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x5F8C;&#x65B9;&#x306E;&#x4F53;&#x306E;&#x7B4B;&#x8089;&#x795E;&#x7D4C;&#x5165;&#x529B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5C0F;&#x80DE;&#x6027;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x3082;&#x5951;&#x7D04;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x7B4B;&#x53CE;&#x7E2E;&#x524D;&#x306B;&#x3061;&#x3087;&#x3046;&#x3069;&#x8178;&#x3068;&#x7B4B;&#x8089;&#x9593;&#x306E;&#x30B9;&#x30DA;&#x30FC;&#x30B9;&#x304C;&#x9178;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x967D;&#x5B50;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x304C;&#x7B4B;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x3002;PBO 4 &#x3067;&#x3059;&#x63A8;&#x5B9A; Na +/&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x8178;&#x7BA1;&#x306E;&#x57FA;&#x5E95;&#x819C;&#x4E0A;&#x306B;&#x767A;&#x73FE; H + &#x4EA4;&#x63DB;&#x4E26;&#x7F6E;&#x5F8C;&#x65B9;&#x306E;&#x4F53;&#x306E;&#x7B4B;&#x8089;&#x3092;&#x3002;Pbo 4 &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;&#x30B9;&#x30DA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306A;&#x3044;&#x9178;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x7B4B;&#x8089;&#x306E;&#x5951;&#x7D04;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Pbo 5 &#x304A;&#x3088;&#x3073; pbo 6 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7B4B;&#x8089;&#x306E;&#x9178;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x300C;cys &#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3; &#x30B2;&#x30FC;&#x30C8;&#x300D;&#x967D;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7570;&#x7A2E;&#x767A;&#x73FE;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067; PBO &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x534A;&#x5206;&#x6700;&#x5927;&#x9650; 6.8 &#x306E; pH &#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x73CD;&#x3057;&#x3044;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x967D;&#x5B50;&#x306F;&#x7DDA;&#x866B;&#x306E;&#x7B4B;&#x8089;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30BF;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xADFC;&#xC721; &#xC218;&#xCD95; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBAA8;&#xD130; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC758; &#xBC29;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC11C; &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xC218; &#xCD95;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558; &#xC7A5; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C1;&#xC811; &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30;&#xB85C; &#xC791;&#xB3D9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. C. elegans &#xAE68;&#xB057; &#xD558; &#xAC8C; &#xD568; &#xBAA8;&#xD130; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xC911; &#xD6C4;&#xBD80; &#xBAB8; &#xADFC;&#xC721; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC785;&#xB825; &#xB610;&#xB294; &#xAE30;&#xACF5;&#xC744; neurotransmission&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xACC4;&#xC57D;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC18C;&#xC7A5;&#xACFC; &#xADFC;&#xC721; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAC04;&#xACA9; &#xADFC;&#xC721; &#xC218;&#xCD95; &#xD558;&#xAE30; &#xC9C1;&#xC804; &#xC0B0;&#xC131;&#xD654;&#xC640; &#xAC07;&#xD78C;&#xB41C; &#xC591;&#xC131;&#xC790;&#xC758; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xADFC;&#xC721; &#xC218;&#xCD95; &#xC720;&#xBC1C; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. PBO-4&#xB294; putative Na + H + &#xC774;&#xC628; &#xAD50;&#xD658;&#xAE30;&#xC758; &#xC18C;&#xC7A5;, basolateral &#xB9C9;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xD6C4;&#xBD80; &#xBAB8; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0; juxtaposed. Pbo 4 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xACF5;&#xAC04; &#xC0B0;&#xC131;&#xD654; &#xB418;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xADFC;&#xC721;&#xC744; &#xACC4;&#xC57D; &#xC2E4;&#xD328;. Pbo 5, pbo 6 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xC0B0;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; &#xD558;&#xB294; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &quot;cys &#xB8E8;&#xD504;&quot; &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xBB38;&#xC774; &#xC591;&#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xB2E8;&#xC704;. &#xBD84;&#xB9AC; &#xC2DD; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; PBO &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBC18; maximally 6.8&#xC758; Ph&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC2E0;&#xBD84;&#xC99D;&#xACFC; &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xC218;&#xC2E0; &#xC138;&#xD3EC; &#xD1B5;&#xC2E0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC774;&#xB840;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC124;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC591;&#xC131;&#xC790; C. elegans&#xC5D0; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xC218;&#xCD95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30; &#xC5ED;&#xD560;.

Contracci&oacute;n muscular normalmente est&aacute; mediada por la liberaci&oacute;n de neurotransmisores de las neuronas motoras. Aqu&iacute; demostramos que los protones pueden actuar como un transmisor directo de las c&eacute;lulas intestinales para estimular la contracci&oacute;n muscular. Durante el programa de motor de defecaci&oacute;n de C. elegans, los m&uacute;sculos del cuerpo posterior contrataci&oacute;n incluso en la ausencia de entradas neuronales o neurotransmisi&oacute;n vesicular. En este estudio demostramos que el espacio entre el intestino y el m&uacute;sculo se acidifica justo antes de la contracci&oacute;n muscular y que la liberaci&oacute;n de protones enjaulados es suficiente para inducir la contracci&oacute;n muscular. PBO-4 es una supuesta Na + / H + intercambiador de iones expresado en la membrana basolateral del intestino, yuxtapuesto a los m&uacute;sculos posteriores del cuerpo. En mutantes de pbo-4 no se acidifica el espacio extracelular y no contraer los m&uacute;sculos. Los pbo-5 y 6 de pbo genes codifican subunidades de un canal de cationes &quot;cys-loop&quot; prot&oacute;n-bloqueado para m&uacute;sculos responder a la acidificaci&oacute;n. En ensayos de expresi&oacute;n heter&oacute;loga el receptor PBO mitad-m&aacute;ximo se activa a un pH de 6,8. La identificaci&oacute;n de los mecanismos de lanzamiento y recepci&oacute;n de se&ntilde;ales de protones establecen un mecanismo altamente inusual para la comunicaci&oacute;n intercelular.

Los protones act&uacute;an como un transmisor para la contracci&oacute;n muscular en C. elegans.

&#x529F;&#x80FD;&#x5168;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x8FD8;&#x4E0D;&#x592A;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x86CB;&#x767D; DPY 28 &#x63A7;&#x5236;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8FDB;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x4EA4;&#x53C9;&#x6570; x &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5242;&#x91CF;&#x8865;&#x507F;&#x548C;&#x80DA;&#x82BD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5206;&#x5E03;&#x3002;DPY 28 &#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; condensin&#xFF0C;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x538B;&#x5B9E;&#x548C;&#x9694;&#x79BB;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x3002;&#x7D22;&#x739B;&#x5728; DPY 28 &#x5C06;&#x4E0E;&#x590D;&#x6742;&#x9547;&#x538B;&#x8A8A;&#x672C;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x96CC;&#x96C4;&#x540C;&#x4F53; X &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x7684;&#x5242;&#x91CF;&#x8865;&#x507F;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x5728;&#x751F;&#x6B96; DPY 28 &#x9650;&#x5236;&#x9053;&#x5C94;&#x3002;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x751F;&#x7269;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4EA4;&#x53C9;&#x964D;&#x4F4E;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4EA4;&#x53C9;&#x9644;&#x8FD1;&#x795E;&#x79D8;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A;&#x4EA4;&#x53C9;&#x5E72;&#x6270;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;&#x7EBF;&#x866B;&#x4E2D;, &#x5E72;&#x6270;&#x662F;&#x5B8C;&#x6574;&#xFF1A; &#x6BCF;&#x4E2A;&#x540C;&#x6E90;&#x5BF9;&#x53EA;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4EA4;&#x53C9;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;dpy 28 &#x7A81;&#x53D8;&#x589E;&#x52A0;&#x9053;&#x5C94;&#x3001; &#x4EA4;&#x53C9;&#x5E72;&#x6270;&#x3001; &#x7834;&#x574F;&#x548C;&#x6539;&#x53D8;&#x4EA4;&#x53C9;&#x5206;&#x5E03;&#x3002;&#x65E9;&#x671F;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4F53; &#xFF08;RAD 51 &#x7076;) &#x540C;&#x65F6;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x6697;&#x793A; DPY 28 &#x884C;&#x4E3A;&#x6765;&#x9650;&#x5236;&#x53CC;&#x94FE;&#x65AD;&#x88C2; &#xFF08;DSBs&#xFF09;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x52A0;&#x5F3A;&#x8FD9;&#x4E00;&#x89C2;&#x70B9;&#xFF0C;dpy 28 &#x7A81;&#x53D8;&#x90E8;&#x5206;&#x6062;&#x590D; DSBs &#x5728;&#x7F3A;&#x4E4F; HIM-17&#xFF0C;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x4E89;&#x7AEF;&#x89E3;&#x51B3;&#x673A;&#x6784;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x94FE;&#x63A5;&#x5230; condensin &#x7684;&#x5242;&#x91CF;&#x8865;&#x507F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E86; condensin &#x7EC4;&#x4EF6;&#x5728;&#x89C4;&#x7BA1;&#x4EA4;&#x53C9;&#x6570;&#x91CF;&#x548C;&#x5206;&#x5E03;&#x7684;&#x65B0;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x5229;&#x7528;&#x6D89;&#x53CA;&#x6539;&#x53D8;&#x9AD8;&#x9636;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5B9E;&#x73B0;&#x5168;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x4EA4;&#x53C9;&#x6570;&#x91CF;&#x548C;&#x5206;&#x5E03;&#x53D7;&#x5242;&#x91CF;&#x8865;&#x507F;&#x86CB;&#x767D;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; condensin &#x7684;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x3002;

Biological processes that function chromosome-wide are not well understood. Here, we show that the Caenorhabditis elegans protein DPY-28 controls two such processes, X-chromosome dosage compensation in somatic cells and meiotic crossover number and distribution in germ cells. DPY-28 resembles a subunit of condensin, a conserved complex required for chromosome compaction and segregation. In the soma, DPY-28 associates with the dosage compensation complex on hermaphrodite X chromosomes to repress transcript levels. In the germline, DPY-28 restricts crossovers. In many organisms, one crossover decreases the likelihood of another crossover nearby, an enigmatic process called crossover interference. In C. elegans, interference is complete: Only one crossover occurs per homolog pair. dpy-28 mutations increase crossovers, disrupt crossover interference, and alter crossover distribution. Early recombination intermediates (RAD-51 foci) increase concomitantly, suggesting that DPY-28 acts to limit double-strand breaks (DSBs). Reinforcing this view, dpy-28 mutations partially restore DSBs in mutants lacking HIM-17, a chromatin-associated protein required for DSB formation. Our work further links dosage compensation to condensin and establishes a new role for condensin components in regulating crossover number and distribution. We propose that both processes utilize a related mechanism involving changes in higher-order chromosome structure to achieve chromosome-wide effects.

Meiotic crossover number and distribution are regulated by a dosage compensation protein that resembles a condensin subunit.

Les processus biologiques qui fonctionnent &agrave; l&#39;&eacute;chelle du chromosome ne sont pas bien comprises. Ici, nous montrons que la prot&eacute;ine elegans de Caenorhabditis DPY-28 contr&ocirc;le deux de ces processus, compensation de dosage de chromosome x dans les cellules somatiques et nombre de filtre m&eacute;iotique et distribution dans les cellules germinales. DPY-28 ressemble &agrave; une sous-unit&eacute; du condensin, un complexe conserv&eacute; n&eacute;cessaire &agrave; la s&eacute;gr&eacute;gation et la compaction des chromosomes. Dans le soma, DPY-28 associe &agrave; la compensation de dosage complexe sur les chromosomes hermaphrodite X pour r&eacute;primer des niveaux de transcription. Dans la lign&eacute;e germinale, DPY-28 restreint de v&eacute;hicules multisegments. Dans de nombreux organismes, un filtre diminue la probabilit&eacute; d&#39;un autre croisement &agrave; proximit&eacute;, un processus &eacute;nigmatique appel&eacute; interf&eacute;rence de crossover. Chez c. elegans, l&#39;interf&eacute;rence est compl&egrave;te : seul croisement se produit par paire homologue. dpy-28 mutations augmentent v&eacute;hicules multisegments, perturbent les interf&eacute;rences de crossover et modifient r&eacute;partition crossover. Premiers interm&eacute;diaires de recombinaison (RAD-51 foyers) augmentent en m&ecirc;me temps, sugg&eacute;rant que DPY-28 agit pour limiter des cassures double-brin (CDB). Renforcer ce point de vue, dpy-28 mutations restaurer partiellement DSBs chez les mutants d&eacute;pourvus de HIM-17, une prot&eacute;ine associ&eacute;e &agrave; la chromatine n&eacute;cessaire &agrave; la formation de l&#39;ORD. Notre travail plus lie indemnisation de dosage &agrave; condensin et &eacute;tablit un nouveau r&ocirc;le pour condensin des composants dans la r&eacute;gulation de distribution et nombre de filtre. Nous proposons que les deux processus utilisent un m&eacute;canisme impliquant des changements dans la structure des chromosomes d&#39;ordre sup&eacute;rieur pour obtenir des effets &agrave; l&#39;&eacute;chelle du chromosome.

Distribution et nombre de filtre m&eacute;iotique sont r&eacute;gies par une prot&eacute;ine de compensation de dose qui ressemble &agrave; une sous-unit&eacute; condensin.

Biologischen Prozesse, die Chromosom-weite-Funktion sind nicht gut verstanden. Hier zeigen wir, dass das Caenorhabditis Elegans Protein DPY-28 zwei solche Prozesse, Wissenschaftlerhaus Dosierung Entsch&auml;digung in K&ouml;rperzellen und meiotischen Frequenzweiche Anzahl und Verteilung in Keimzellen steuert. DPY-28 &auml;hnelt eine Untereinheit des condensin, eines konservierten Komplexes f&uuml;r Chromosom Verdichtung und Segregation erforderlich. In der Soma ordnet DPY-28 die Dosierung Entsch&auml;digung komplexe auf Hermaphrodite X Chromosomen Abschrift Ebenen zu unterdr&uuml;cken. In die Keimbahn schr&auml;nkt DPY-28 Frequenzweichen. In vielen Organismen verringert eine Frequenzweiche die Wahrscheinlichkeit von einem anderen Crossover in der N&auml;he, eine r&auml;tselhafte Prozess mit dem Namen Frequenzweiche Einmischung. In C. Elegans Einmischung ist abgeschlossen: nur eine Frequenzweiche tritt pro homologes Paar. Dpy-28 Mutationen erh&ouml;hen Frequenzweichen, Frequenzweiche Interferenzen zu st&ouml;ren und die Frequenzweiche Verteilung &auml;ndern. Fr&uuml;he Rekombination Zwischenprodukte (RAD-51-Foki) erh&ouml;hen begleitend, darauf hindeutet, dass DPY-28 fungiert, um Doppel-Strang Pausen (DSBs) zu begrenzen. Diese Ansicht zu verst&auml;rken, Wiederherstellung Dpy-28 Mutationen teilweise DSBs in Mutanten fehlt HIM-17, ein Chromatin-assoziierte Protein zur DSB Bildung erforderlich sind. Unsere Arbeit weiter verkn&uuml;pft Dosierung Verg&uuml;tung zu condensin und gr&uuml;ndet eine neue Rolle f&uuml;r condensin Komponenten bei der Regulierung der Frequenzweiche Anzahl und Verteilung. Wir schlagen vor, dass beide Prozesse eine verwandte Verfahren ein, Ver&auml;nderungen der Chromosomenstruktur, h&ouml;herer Ordnung Chromosom-weite Effekte nutzen.

Meiotischen Frequenzweiche Anzahl und Verteilung einer Dosierung Entsch&auml;digung Protein geregelt, die eine condensin Untereinheit &auml;hnelt.

I processi biologici che funzionano tutto il cromosoma non sono ben compresi. Qui, ci mostra che la proteina elegans di Caenorhabditis DPY-28 controlla due tali processi, compensazione di dosaggio del cromosoma x nelle cellule somatiche e crossover meiotic numero e distribuzione nelle cellule germinali. DPY-28 assomiglia ad una subunit&agrave; di condensin, un complesso conservato necessario per la segregazione e la compattazione del cromosoma. In soma, DPY-28 associa la compensazione di dosaggio complessa sui cromosomi ermafrodita X per reprimere i livelli di trascrizione. Nella linea germinale, DPY-28 limita i crossover. In molti organismi, un crossover diminuisce la probabilit&agrave; di un altro crossover nelle vicinanze, un enigmatico processo chiamato interferenza crossover. In c. elegans, interferenza &egrave; completa: si verifica solo un crossover al paio omologo. dpy-28 mutazioni aumentano crossover, perturbare interferenza crossover e alterano la distribuzione di crossover. Primi intermedi di ricombinazione (RAD-51 fuochi) aumentano simultaneamente, suggerendo che DPY-28 agisce per limitare double-strand break (DSBs). Rafforzare questa visione, dpy-28 mutazioni parzialmente ripristino DSBs mutanti manca HIM-17, una proteina associata della cromatina necessaria per la formazione del DSB. Il nostro lavoro ulteriori collegamenti compensazione di dosaggio di condensin e stabilisce un nuovo ruolo per componenti nella regolazione della distribuzione e il numero di crossover di condensin. Proponiamo che entrambi i processi utilizzano un meccanismo correlato che comportano modifiche della struttura cromosomica di ordine superiore per ottenere effetti tutto il cromosoma.

Distribuzione e numero di crossover meiotic sono regolati da una proteina di compensazione di dosaggio che assomiglia ad una subunit&agrave; condensin.

&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5168;&#x4F53;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x904E;&#x7A0B;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7DDA;&#x866B;&#x7DDA;&#x866B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x4F7F;&#x3046; 28 2 &#x3064;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;x &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x91CF;&#x88DC;&#x511F;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x6570;&#x3068;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F7F;&#x3046; 28 &#x30B3;&#x30F3;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x7DE0;&#x56FA;&#x3081;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x96E2;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x76F8;&#x99AC;&#x3067;&#x4F7F;&#x3046; 28 &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3; &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E21;&#x6027; X &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x8907;&#x96D1;&#x91CF;&#x88DC;&#x511F;&#x3092;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x4F7F;&#x3046; 28 &#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x3001;1 &#x3064;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x8FD1;&#x96A3;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x5E72;&#x6E09;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x3001;&#x89E3;&#x304D;&#x96E3;&#x3044;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DDA;&#x866B;&#x3067;&#x306E;&#x5E72;&#x6E09;&#x306F;&#x5B8C;&#x4E86;&#x3067;&#x3059;&#xFF1A; 1 &#x3064;&#x3060;&#x3051;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x7269;&#x306E;&#x30DA;&#x30A2;&#x3054;&#x3068;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F7F;&#x3046; 28 &#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x5897;&#x3084;&#x3059;&#x4EA4;&#x53C9;&#x306E;&#x5E72;&#x6E09;&#x3092;&#x59A8;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53; (RAD 51 &#x5DE3;&#xFF09; &#x4ED8;&#x968F;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4F7F;&#x3046; 28 &#x4E8C;&#x672C;&#x9396;&#x5207;&#x65AD; &#xFF08;Dsb&#xFF09; &#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x4F7F;&#x3046; 28 &#x5909;&#x7570;&#x90E8;&#x5206;&#x7684; Dsb HIM-17&#x3001;DSB &#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x95A2;&#x9023;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3067;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x91CF;&#x88DC;&#x511F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3057;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x6570;&#x3068;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x304C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x9AD8;&#x6B21;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.

&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x6570;&#x3068;&#x5206;&#x5E03; condensin &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6295;&#x4E0E;&#x91CF;&#x88DC;&#x511F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; Caenorhabditis elegans &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; DPY 28 &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; meiotic &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84; &#xC22B;&#xC790;&#xC5D0; x &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xBCF4;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xD3EC; &#xAC19;&#xC740; &#xB450; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. DPY 28 condensin, &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC555;&#xCD95; &#xBC0F; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C;&#xC758; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xB97C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xB9C8;, DPY 28 &#xC0AC;&#xBCF8; &#xB808;&#xBCA8;&#xC744; &#xC5B5; &#xB204;&#xB974;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC790;&#xC6C5; &#xB3D9;&#xCCB4; X &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xBCF4;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC88;&#xC9F8;, DPY 28 &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84;&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9CE;&#xC740; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xD55C; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84; &#xAC04;&#xC12D; &#xC774;&#xB77C;&#xB294; &#xC218;&#xC218;&#xAED8;&#xB07C;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xADFC;&#xCC98; &#xB2E4;&#xB978; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. C. elegans &#xAC04;&#xC12D;&#xC774; &#xC644;&#xB8CC;: &#xCCB4; &#xC30D; &#xB2F9; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD55C; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84;. dpy 28 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84; &#xAC04;&#xC12D;, &#xBC29;&#xD574; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84; &#xBC30;&#xD3EC; &#xBCC0;&#xACBD;. &#xCD08;&#xAE30; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC911;&#xAC04;&#xCCB4; (RAD-51 foci) &#xC99D;&#xAC00; concomitantly, DPY 28 &#xB354;&#xBE14;-&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB79C;&#xB4DC; &#xB098;&#xB204;&#xAE30; (DSBs)&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCF4;&#xAE30;&#xB97C; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xB294; dpy 28 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; Dsbs&#xB97C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xADF8;-17, DSB &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; chromatin &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBD80;&#xC871;&#xC5D0; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC791;&#xC5C5; &#xCD94;&#xAC00; condensin &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xBCF4;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558; &#xACE0; condensin &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84; &#xBC88;&#xD638;&#xC640; &#xC720;&#xD1B5; &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB450; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB450; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC804;&#xCCB4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB192;&#xC740; &#xC21C;&#xC11C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xD65C;&#xC6A9; &#xC81C;&#xC548;.

Meiotic &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84; &#xC218; &#xBC0F; &#xBC30;&#xD3EC; condensin &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xBCF4;&#xC0C1; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Procesos biol&oacute;gicos que funcionan todo el cromosoma no son bien entendidos. Aqu&iacute;, demostramos que la prote&iacute;na elegans de Caenorhabditis DPY-28 controla estos dos procesos, compensaci&oacute;n de dosis de cromosoma x en las c&eacute;lulas som&aacute;ticas y cruce mei&oacute;tica n&uacute;mero y distribuci&oacute;n en las c&eacute;lulas germinales. DPY-28 se asemeja a una subunidad del Condensina, un complejo conservado para la segregaci&oacute;n y compactaci&oacute;n del cromosoma. En el soma, DPY-28 se asocia con la compensaci&oacute;n de dosis compleja en los cromosomas X de hermafrodita para reprimir a los niveles de transcripci&oacute;n. En la l&iacute;nea germinal, DPY-28 restringe crossover. En muchos organismos, un cruce disminuye la probabilidad de otro cruce cerca, un proceso enigm&aacute;tico llamado interferencia de cruce. En C. elegans, la interferencia es completa: s&oacute;lo un cruce se produce por par hom&oacute;logo. mutaciones dpy-28 aumentan crossover, interrumpen la interferencia de cruce y alteran la distribuci&oacute;n de cruce. Principios intermedios de recombinaci&oacute;n (focos de RAD-51) aumentan concomitante, sugiriendo que DPY-28 act&uacute;a para limitar las roturas de doble cadena (consejos escolares distritales). Reforzar este punto de vista, las mutaciones de dpy-28 restauraci&oacute;n parcialmente consejos escolares distritales en mutantes que carecen de &eacute;l-17, una prote&iacute;na asociada a la cromatina necesaria para la formaci&oacute;n del OSD. Nuestro trabajo m&aacute;s enlaces compensaci&oacute;n de dosis a Condensina y establece un nuevo papel para Condensina componentes en la regulaci&oacute;n de la distribuci&oacute;n y el n&uacute;mero de cruce. Proponemos que ambos procesos utilizan un mecanismo relacionado que implica cambios en la estructura del cromosoma de orden superior para conseguir efectos de todo el cromosoma.

Distribuci&oacute;n y n&uacute;mero de cruce mei&oacute;tica son reguladas por una prote&iacute;na de compensaci&oacute;n de dosis que se asemeja a una subunidad condensin.

&#x53D7;&#x635F;&#x4F24;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x518D;&#x751F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8FD8;&#x539F;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x518D;&#x751F;&#x4E0D;&#x826F;&#x6216;&#x6839;&#x672C;&#x6CA1;&#x6709;&#x3002;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x91CD;&#x65B0;&#x751F;&#x6210;&#x5931;&#x8D25;&#x662F;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x7531;&#x4E8E;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x5728;&#x518D;&#x751F;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8DEF;&#x5F84;&#x53EF;&#x80FD;&#x9488;&#x5BF9;&#x5F00;&#x53D1;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6062;&#x590D;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x529F;&#x80FD;&#x540E;&#x635F;&#x4F24;&#x6216;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x7597;&#x6CD5;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x4E09;&#x5E73;&#x67F4;&#x6CB9;&#x7F50; 1 &#xFF08;&#x56FE;&#xFF09; &#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x901A;&#x8DEF;&#x662F;&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x8FD9;&#x6761;&#x6B65;&#x9053;&#x635F;&#x5931;&#x6D88;&#x9664;&#x4E86;&#x518D;&#x751F;&#xFF0C;&#x800C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5B83;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4E86;&#x518D;&#x751F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x8FD8;&#x8C03;&#x8282;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x8FC1;&#x79FB;&#x540E;&#x9762;&#x7684;&#x6B65;&#x9AA4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x8F74;&#x7A81;&#x635F;&#x4F24;&#x540E;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6B64;&#x5730;&#x56FE;&#x6FC0;&#x9176;&#x7EA7;&#x8054;&#x7684;&#x9700;&#x8981;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4ECE;&#x518D;&#x751F;&#x969C;&#x788D;&#x6027;&#x72B6;&#x6001;&#x5207;&#x6362;&#x5230;&#x80FD;&#x591F;&#x5B9E;&#x73B0;&#x589E;&#x957F;&#x7684;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;

&#x8F74;&#x7A81;&#x518D;&#x751F;&#x9700;&#x8981;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x5730;&#x56FE;&#x6FC0;&#x9176;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;

Regeneration of injured neurons can restore function, but most neurons regenerate poorly or not at all. The failure to regenerate in some cases is due to a lack of activation of cell-intrinsic regeneration pathways. These pathways might be targeted for the development of therapies that can restore neuron function after injury or disease. Here, we show that the DLK-1 mitogen-activated protein (MAP) kinase pathway is essential for regeneration in Caenorhabditis elegans motor neurons. Loss of this pathway eliminates regeneration, whereas activating it improves regeneration. Further, these proteins also regulate the later step of growth cone migration. We conclude that after axon injury, activation of this MAP kinase cascade is required to switch the mature neuron from an aplastic state to a state capable of growth.

Axon regeneration requires a conserved MAP kinase pathway.

R&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des neurones l&#xE9;s&#xE9;s peut restaurer la fonction, mais la plupart des neurones r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rer mal ou pas du tout. L&#x26;#39;&#xE9;chec &#xE0; se r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rer, dans certains cas est due &#xE0; une absence d&#x26;#39;activation des voies de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des cellules-intrins&#xE8;ques. Ces voies pourraient &#xEA;tre cibl&#xE9;s pour le d&#xE9;veloppement de th&#xE9;rapies capables de restaurer la fonction des neurones apr&#xE8;s une l&#xE9;sion ou une maladie. Ici, nous montrons que la DLK-1 mitogen-activated protein kinase voie (MAP) est essentielle &#xE0; la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des neurones moteurs Caenorhabditis elegans. La perte de cette voie de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration &#xE9;limine, alors qu&#x26;#39;il l&#x26;#39;activation am&#xE9;liore la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration. En outre, ces prot&#xE9;ines r&#xE9;gulent &#xE9;galement l&#x26;#39;&#xE9;tape ult&#xE9;rieure de la migration du c&#xF4;ne de croissance. Nous concluons que, apr&#xE8;s des blessures axone, l&#x26;#39;activation de cette cascade des MAP kinases est n&#xE9;cessaire pour faire basculer le neurone mature &#xE0; partir d&#x26;#39;un &#xE9;tat &#xE0; un &#xE9;tat aplasique capable d&#x26;#39;une croissance.

La r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des axones N&#xE9;cessite un sentier MAP Kinase conserv&#xE9;e

Regeneration der Gesch&auml;digten Nervenzellen kann Funktion wiederherstellen, aber die meisten Neuronen zu regenerieren, schlecht oder gar nicht. In einigen F&auml;llen zu regenerieren, ist aufgrund fehlender Aktivierung der Zelle systeminterne Regenerierung Bahnen. Diese Pfade k&ouml;nnen f&uuml;r die Entwicklung von Therapien abzielen, die Neuron-Funktion nach Verletzung oder Krankheit wiederherstellen k&ouml;nnen. Hier zeigen wir, dass die DLK-1 Mitogen-aktivierte Protein (MAP) Kinase Pathway zur Regeneration in Caenorhabditis Elegans Motoneuronen unerl&auml;sslich ist. Verlust von diesem Weg beseitigt Regenerierung, w&auml;hrend Aktivierung verbessert die Regeneration. Dar&uuml;ber hinaus Regeln diese Proteine auch den sp&auml;teren Schritt Wachstum Kegel Migration. Wir schlie&szlig;en, dass nach Axon Verletzung, Aktivierung dieser MAP-Kinase-Kaskade erforderliche Reife Neurons aus einem aplastische Zustand in einen Zustand des Wachstums in der Lage zu wechseln.

Axon Regenerierung erfordert eine konservierte MAP-Kinase-Signalweg.

Rigenerazione di neuroni infortunati pu&ograve; ripristinare la funzione, ma la maggior parte dei neuroni rigenerano scarsamente o per niente. Il fallimento di rigenerare in alcuni casi &egrave; dovuto una mancanza di attivazione di percorsi di rigenerazione cellula-intrinseco. Questi percorsi potrebbero essere mirati per lo sviluppo di terapie che pu&ograve; ripristinare la funzione del neurone dopo infortunio o malattia. Qui, ci mostrano che il pathway della chinasi di proteina mitogene-attivata (mappa) DLK-1 &egrave; essenziale per la rigenerazione in Caenorhabditis elegans motoneuroni. Perdita di questo pathway elimina la rigenerazione, mentre attivando e migliora la rigenerazione. Ulteriormente, queste proteine regolano anche il passo successivo della migrazione di cono di crescita. Possiamo concludere che, dopo l&#39;infortunio di assone, attivazione della cascata di chinasi mappa &egrave; necessario passare il neurone maturo da uno stato aplastica a uno stato capace di una crescita.

Rigenerazione assone richiede un percorso di chinasi mappa conservato.

&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x307E;&#x3063;&#x305F;&#x304F;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x518D;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x518D;&#x751F;&#x6210;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x3001;&#x3051;&#x304C;&#x3084;&#x75C5;&#x6C17;&#x5F8C;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;DLK-1&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;MAP&#xFF09;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x3001;&#x7DDA;&#x866B;Caenorhabditis elegans&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306B;&#x3068;&#x3063;&#x3066;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x640D;&#x50B7;&#x5F8C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;MAP&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x518D;&#x751F;&#x4E0D;&#x826F;&#x72B6;&#x614B;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x3048;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x8EF8;&#x7D22;&#x518D;&#x751F;&#x306F;&#x3001;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;MAP&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

&#xBD80;&#xC0C1;&#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xB610;&#xB294; &#xC804;&#xD600; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC131;. &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC131; &#xC2E4;&#xD328; &#xC140; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xBD80;&#xC871; &#xB54C;&#xBB38;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACBD;&#xB85C; &#xBD80;&#xC0C1; &#xB610;&#xB294; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xD6C4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xCE58;&#xB8CC;&#xBC95;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xC774; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; DLK 1 &#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (&#xC9C0;&#xB3C4;) &#xB2C8; &#xD1B5;&#xB85C; Caenorhabditis elegans &#xBAA8;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xC81C;&#xAC70; &#xC911;&#xC0DD;, &#xC911;&#xC0DD;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xADF8;&#xAC83;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xC774;&#xD6C4; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC870;&#xC808;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC190;&#xC0C1; &#xD6C4;&#xC774; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB85C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC131;&#xC219;&#xD55C; &#xB274;&#xB7F0; aplastic &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;&#xB294; &#xACB0;&#xB860;.

&#xCD95; &#xC0AD; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xB2C8; &#xD1B5;&#xB85C;&#xAC00; &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La regeneraci&#xF3;n de neuronas da&#xF1;adas puede restaurar la funci&#xF3;n, pero la mayor&#xED;a de las neuronas regeneran poco o nada en absoluto. El fracaso para regenerar en algunos casos es debido a una falta de activaci&#xF3;n de las v&#xED;as de regeneraci&#xF3;n de c&#xE9;lulas intr&#xED;nsecas. Estas v&#xED;as podr&#xED;an ser el objetivo para el desarrollo de terapias que pueden restaurar la funci&#xF3;n de las neuronas despu&#xE9;s de una lesi&#xF3;n o enfermedad. Aqu&#xED;, mostramos que el DLK-1 activadas por mit&#xF3;genos (MAP) quinasa es esencial para la regeneraci&#xF3;n de las neuronas motoras Caenorhabditis elegans. La p&#xE9;rdida de esta v&#xED;a elimina la regeneraci&#xF3;n, mientras que la activaci&#xF3;n se mejora la regeneraci&#xF3;n. Adem&#xE1;s, estas prote&#xED;nas tambi&#xE9;n regular el paso posterior de la migraci&#xF3;n crecimiento cono. Se concluye que despu&#xE9;s de la lesi&#xF3;n axonal, la activaci&#xF3;n de esta cascada MAP quinasa se requiere para cambiar la neurona madura a partir de un estado apl&#xE1;sica a un estado capaz de crecer.

Axon regeneraci&#xF3;n requiere una MAP quinasa conservadas

We developed a method, MosDEL, to generate targeted knockouts of genes in Caenorhabditis elegans by injection. We generated a double-strand break by mobilizing a Mos1 transposon adjacent to the region to be deleted; the double-stranded break is repaired using injected DNA as a template. Repair can delete up to 25 kb of DNA and simultaneously insert a positive selection marker.

Targeted gene deletions in C. elegans using transposon excision.

Nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; une m&#xE9;thode, MosDEL, pour g&#xE9;n&#xE9;rer des knock-out cibl&#xE9;es de g&#xE8;nes chez Caenorhabditis elegans par injection. Nous avons g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; une rupture double brin par la mobilisation d&#x26;#39;un transposon Mos1 adjacente &#xE0; la r&#xE9;gion doit &#xEA;tre supprim&#xE9;; la pause double brin d&#x26;#39;ADN est r&#xE9;par&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;aide inject&#xE9;e comme un mod&#xE8;le. R&#xE9;paration pouvez supprimer jusqu&#x26;#39;&#xE0; 25 kb d&#x26;#39;ADN et, simultan&#xE9;ment, d&#x26;#39;ins&#xE9;rer un marqueur de s&#xE9;lection positive.

D&#xE9;l&#xE9;tions de g&#xE8;nes cibl&#xE9;s dans l&#x26;#39;aide de C. Elegans Excision Transposon

Wir entwickelten eine Methode, MosDEL, gezielte Aussparungen von Genen in Caenorhabditis Elegans durch Injektion zu generieren. Wir generiert eine Doppel-Strang-Pause durch die Mobilisierung einer Mos1 Transposon neben der Region gel&ouml;scht werden; die Doppelstrang-Pause ist mit injizierten DNA als Vorlage repariert. Reparatur kann bis zu 25 kb DNA l&ouml;schen und gleichzeitig eine positive Auswahl Markierungsfaden.

Gezielte gen Streichungen in C. Elegans mit Transposon Exzision.

Abbiamo sviluppato un metodo, MosDEL, per generare knockouts mirata dei geni in Caenorhabditis elegans di iniezione. Abbiamo generato un double-strand break mobilitando una trasposone Mos1 adiacente alla regione per essere eliminata; la rottura di double-stranded &egrave; riparata utilizzando DNA iniettato come un modello. Riparazione pu&ograve; eliminare fino a 25 kb di DNA e contemporaneamente inserire un marcatore di selezione positiva.

Mirati delezioni del gene in c. elegans mediante escissione trasposone.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;MosDEL&#xFF0C;&#x6CE8;&#x5C04;&#x5728;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B;&#x4E2D;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x5730;&#x6316;&#x7A7A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x52A8;&#x6BD7;&#x90BB;&#x5730;&#x533A;&#x88AB;&#x5220;&#x9664; &#xFF1B; &#x6216; Mos1 &#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x4EA7;&#x751F;&#x53CC;&#x94FE;&#x65AD;&#x88C2;&#x53CC;&#x94FE;&#x65AD;&#x88C2;&#x4FEE;&#x590D;&#x4F7F;&#x7528;&#x6CE8;&#x5165;&#x7684; DNA &#x4F5C;&#x4E3A;&#x6A21;&#x677F;&#x3002;&#x4FEE;&#x590D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5220;&#x9664;&#x8FBE; 25 kb &#x7684; DNA&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x63D2;&#x5165;&#x9633;&#x6027;&#x9009;&#x62E9;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;

&#x9488;&#x5BF9;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x5207;&#x9664; C.&#x7EBF;&#x866B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F3A;&#x5931;&#x3002;

&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x6CE8;&#x5C04;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7DDA;&#x866B;Caenorhabditis elegans&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3001;MosDEL&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;MOS1&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x3092;&#x52D5;&#x54E1;&#x3057;&#x3066;&#x4E8C;&#x672C;&#x9396;&#x5207;&#x65AD;&#x304C;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E8C;&#x672C;&#x9396;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30AF;&#x304C;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;DNA&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x306F;&#x3001;DNA&#x306E;25 kb&#x307E;&#x3067;&#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x6B63;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x633F;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x5207;&#x9664;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x7DDA;&#x866B;C. elegans&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6B20;&#x5931;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; Mosdel&#xB97C; &#xC8FC;&#xC785; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; Caenorhabditis elegans&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xC6B0;&#xB9AC; Mos1 transposon &#xC0AD;&#xC81C;&#xD560;; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC778;&#xC811; &#xD55C;&#xC744; &#xB3D9;&#xC6D0; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xC911; &#xAC00;&#xB2E5; &#xB098;&#xB204;&#xAE30; &#xC0DD;&#xC131; &#xB354;&#xBE14;-&#xC88C;&#xCD08; &#xD734;&#xC2DD;&#xC744; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0BD;&#xC785; &#xB41C; DNA&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC218;&#xB9AC; &#xC218; DNA&#xC758; &#xCD5C;&#xB300; 25 kb&#xB97C; &#xC0AD;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC120;&#xD0DD; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xC0BD;&#xC785; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

C. elegans transposon &#xC808;&#xB2E8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC0AD;&#xC81C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hemos desarrollado un m&#xE9;todo, MosDEL, para generar nocauts espec&#xED;ficas de los genes en Caenorhabditis elegans por inyecci&#xF3;n. Hemos generado una ruptura de doble cadena mediante la movilizaci&#xF3;n de un transpos&#xF3;n MOS1 adyacente a la regi&#xF3;n que se suprime la rotura de doble cadena se repara utilizando el ADN inyectado como una plantilla. Reparaci&#xF3;n puede eliminar hasta 25 kb de ADN y al mismo tiempo insertar un marcador de selecci&#xF3;n positiva.

Dirigida supresiones de genes en C. elegans mediante escisi&#xF3;n Transpos&#xF3;n

&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x9014;&#x5F84;&#x57FA;&#x672C;&#x4E3A;&#x8F74;&#x7A81;&#x518D;&#x751F;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#x6216;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x662F;&#x7279;&#x522B;&#x9002;&#x5408;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x5E72;&#x9884;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5FC5;&#x987B;&#x534F;&#x8C03;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5E76;&#x884C;&#x7684; PMK-3(p38) &#x548C; KGB-1(JNK) MAPK &#x9014;&#x5F84;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8F74;&#x7A81;&#x518D;&#x751F;&#x3002;&#x8F74;&#x7A81;&#x518D;&#x751F;&#x5931;&#x8D25;&#x5982;&#x679C;&#x4EFB;&#x4E00;&#x9014;&#x5F84;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E0D;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;E3 &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176; RPM-1(Phr1) &#x901A;&#x8FC7;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x5730;&#x9000;&#x5316;&#x7684; MAPKKKs &#x4E09;&#x5E73;&#x67F4;&#x6CB9;&#x7F50; 1 &#x548C;&#x767D;&#x4E91;-1 &#x548C;&#x78F7;&#x9178;&#x9176; VHP-1(MKP7)&#xFF0C;&#x4E0D;&#x5229;&#x8BE5;&#x6CD5; PMK-3(p38) &#x548C; KGB-1(JNK) &#x7684; MAPK&#xFF0C;&#x529B;&#x534F;&#x540C;&#x662F;&#x8C03;&#x8282;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E24;&#x4E2A; MAPKs &#x7684;&#x83CC;&#x3002;

&#x8F74;&#x7A81;&#x518D;&#x751F;&#x9700;&#x8981;&#x5750;&#x6807;&#x6FC0;&#x6D3B; p38 &#x548C; JNK MAPK &#x901A;&#x8DEF;&#x3002;

Signaling pathways essential for axon regeneration, but not for neuron development or function, are particularly well suited targets for therapeutic intervention. We find that the parallel PMK-3(p38) and KGB-1(JNK) MAPK pathways must be coordinately activated to promote axon regeneration. Axon regeneration fails if the activity of either pathway is absent. These two MAPKs are coregulated by the E3 ubiquitin ligase RPM-1(Phr1) via targeted degradation of the MAPKKKs DLK-1 and MLK-1 and by the MAPK phosphatase VHP-1(MKP7), which negatively regulates both PMK-3(p38) and KGB-1(JNK).

Axon regeneration requires coordinate activation of p38 and JNK MAPK pathways.

Voies de signalisation essentiels pour la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des axones, mais pas pour le d&#xE9;veloppement des neurones ou de la fonction, sont particuli&#xE8;rement bien adapt&#xE9;s pour des cibles d&#x26;#39;intervention th&#xE9;rapeutique. Nous constatons que le parall&#xE8;le PCM-3 (p38) et du KGB-1 (JNK) MAPK doit &#xEA;tre activ&#xE9; de fa&#xE7;on coordonn&#xE9;e pour promouvoir la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des axones. La r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des axones &#xE9;choue si l&#x26;#39;activit&#xE9; de l&#x26;#39;une des voies est absent. Ces deux MAPK sont cor&#xE9;gul&#xE9;s par le ubiquitine ligase E3 RPM-1 (Phr1) via la d&#xE9;gradation cibl&#xE9;e de la MAPKKKs DLK-1 et MLK-1 et par la phosphatase MAPK VHP-1 (MKP7), qui r&#xE9;gule n&#xE9;gativement &#xE0; la fois la PCM-3 (p38 ) et du KGB-1 (JNK).

La r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des axones n&#xE9;cessite l&#x26;#39;activation de coordonn&#xE9;es de p38 MAPK et JNK

Signalling Wege essenziell f&uuml;r Axon Regeneration, aber nicht f&uuml;r Neuron Entwicklung oder Funktion, sind besonders gut geeignet f&uuml;r therapeutische Intervention. Wir finden, dass die parallelen PMK-3(p38) und KGB-1(JNK) MAPK-Bahnen coordinately aktiviert werden m&uuml;ssen, um Axon Regenerierung zu f&ouml;rdern. Axon Regenerierung schl&auml;gt fehl, wenn die Aktivit&auml;t der beiden Stoffwechselweg nicht vorhanden ist. Diese zwei MAPKs sind coregulated, von der E3 Ubiquitin Ligase RPM-1(Phr1) &uuml;ber gezielte Abbau des MAPKKKs DLK-1 und MLK-1 und die MAPK-Phosphatase VHP-1(MKP7), die negativ sowohl die PMK-3(p38) als auch die KGB-1(JNK) regelt.

Axon Regenerierung erfordert koordinieren Aktivierung der p38 und JNK MAPK Wege.

Segnalazione percorsi essenziali per la rigenerazione di assoni, ma non per lo sviluppo del neurone o funzione, sono bersagli particolarmente adatti per l&#39;intervento terapeutico. Troviamo che le vie PMK-3(p38) e KGB-1(JNK) MAPK parallele devono essere attivate coordinately per promuovere la rigenerazione di assoni. Rigenerazione assone ha esito negativo se l&#39;attivit&agrave; di ogni percorso &egrave; assente. Questi due MAPKs sono coregulated dalla E3 ubiquitina ligasi RPM-1(Phr1) via mirata degradazione del MAPKKKs DLK-1 e MLK-1 e la fosfatasi MAPK VHP-1(MKP7), che regola negativamente sia PMK-3(p38) e KGB-1(JNK).

Rigenerazione assone richiede attivazione coordinata di percorsi MAPK JNK e p38.

&#x8EF8;&#x7D22;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3084;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x6CBB;&#x7642;&#x7684;&#x4ECB;&#x5165;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x6A19;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x4E26;&#x5217;PMK-3&#xFF08;P38&#xFF09;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x3001;KGB-1&#xFF08;JNK&#xFF09;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;MAPK&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x5354;&#x8ABF;&#x8EF8;&#x7D22;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x518D;&#x751F;&#x304C;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;MAPK&#x306F;&#x306F;MAPKKKs DLK-1&#x3001;MLK-1&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3068;&#x8CA0;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;PMK-3&#xFF08;p38&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;MAPK&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;VHP-1&#xFF08;MKP7&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x308B;E3&#x30E6;&#x200B;&#x200B;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;RPM-1&#xFF08;Phr1&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;coregulated&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#xFF09;&#x3068;KGB-1&#xFF08;JNK&#xFF09;&#x3002;

&#x8EF8;&#x7D22;&#x518D;&#x751F;&#x306F;P38&#x3068;JNK MAPK&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x5EA7;&#x6A19;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

&#xACBD;&#xB85C; &#xC5D0;&#xC13C;&#xC15C; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB610;&#xB294; &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E0;&#xD638;, &#xCE58;&#xB8CC; &#xC801; &#xAC1C;&#xC785;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD2B9;&#xD788; &#xC801;&#xD569;&#xB41C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC3E;&#xC744; &#xBCD1;&#xB82C; PMK-3(p38) &#xBC0F; KGB-1(JNK) MAPK &#xACBD;&#xB85C; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xB294; coordinately &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB418;&#xC5B4;&#xC57C; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xCD95; &#xC0AD; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC5B4;&#xB290; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; &#xACB0; &#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC2E4;&#xD328; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB450; MAPKs MAPKKKs DLK-1 &#xACE0; &#xAC15;&#xB3C4; &#xC0B4;&#xC778; &#xC0AC;&#xAC74;-1&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; E3 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00; rpm-1(phr1)&#xC640; MAPK &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; VHP-1(MKP7), PMK-3(p38) &#xBC0F; KGB-1(JNK)&#xB97C; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD1B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; coregulated &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCD95; &#xC0AD; &#xC7AC;&#xC0DD; p38 MAPK JNK &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC88C;&#xD45C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC694;&#xAD6C; &#xD55C;&#xB2E4;.

V&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n esenciales para la regeneraci&#xF3;n del ax&#xF3;n, pero no para el desarrollo neuronal o funci&#xF3;n, son particularmente bien adecuados para los objetivos de la intervenci&#xF3;n terap&#xE9;utica. Nos parece que el paralelo PMK-3 (p38) y la KGB 1-(JNK) las v&#xED;as de MAPK se activa de forma coordinada para promover la regeneraci&#xF3;n de los axones. Axon se producen errores si la actividad de cualquiera de v&#xED;a est&#xE1; ausente. Estos dos MAPKs se coregulated por la ligasa de ubiquitina E3 RPM-1 (Phr1) a trav&#xE9;s de la degradaci&#xF3;n selectiva de la MAPKKKs DLK-1 y 1-Martin Luther King y de la fosfatasa MAPK VHP-1 (MKP7), que regula negativamente tanto PMK-3 (p38 ) y la KGB-1 (JNK).

Paola Nix

Department of Biology

University of Utah

Constructing a Low-budget Laser Axotomy System to Study Axon Regeneration in C. elegans

Paola Nix

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University of Utah

Constructing a Low-budget Laser Axotomy System to Study Axon Regeneration in C. elegans

Department of Biology