Two-photon axotomy and time-lapse confocal imaging in live zebrafish embryos

Zebrafish have long been utilized to study the cellular and molecular mechanisms of development by time-lapse imaging of the living transparent embryo.  ...

University of California, Los Angeles

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&#x53D1;&#x80B2;&#x8C03;&#x8282;&#x76AE;&#x80A4;&#x53D7;&#x4F24;&#x5916;&#x56F4;&#x611F;&#x5B98;&#x8F74;&#x7A81;&#x7801;&#x5934;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x518D;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x969C;&#x788D;&#x3002;

The structural plasticity of neurites in the central nervous system (CNS) diminishes dramatically after initial development, but the peripheral nervous system (PNS) retains substantial plasticity into adulthood. Nevertheless, functional reinnervation by injured peripheral sensory neurons is often incomplete [1-6]. To investigate the developmental control of skin reinnervation, we imaged the regeneration of trigeminal sensory axon terminals in live zebrafish larvae following laser axotomy. When axons were injured during early stages of outgrowth, regenerating and uninjured axons grew into denervated skin and competed with one another for territory. At later stages, after the establishment of peripheral arbor territories, the ability of uninjured neighbors to sprout diminished severely, and although injured axons reinitiated growth, they were repelled by denervated skin. Regenerating axons were repelled specifically by their former territories, suggesting that local inhibitory factors persist in these regions. Antagonizing the function of several members of the Nogo receptor (NgR)/RhoA pathway improved the capacity of injured axons to grow into denervated skin. Thus, as in the CNS, impediments to reinnervation in the PNS arise after initial establishment of axon arbor structure.

Developmentally regulated impediments to skin reinnervation by injured peripheral sensory axon terminals.

La plasticit&#xE9; structurale des neurites dans le syst&#xE8;me nerveux central (SNC) diminue de fa&#xE7;on spectaculaire apr&#xE8;s le d&#xE9;veloppement initial, mais le syst&#xE8;me nerveux p&#xE9;riph&#xE9;rique (SNP) conserve la plasticit&#xE9; importante dans la vie adulte. N&#xE9;anmoins, la r&#xE9;innervation fonctionnelle par bless&#xE9;es neurones sensoriels p&#xE9;riph&#xE9;riques est souvent incompl&#xE8;te [1-6]. Pour enqu&#xEA;ter sur le contr&#xF4;le du d&#xE9;veloppement de r&#xE9;innervation la peau, nous imager la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des terminaisons axonales sensorielles trig&#xE9;minales dans les larves du poisson z&#xE8;bre en direct &#xE0; la suite axotomie laser. Lorsque les axones ont &#xE9;t&#xE9; bless&#xE9;s durant les premiers stades de l&#x26;#39;excroissance, la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des axones et indemnes grandi dans la peau d&#xE9;nerv&#xE9; et en concurrence avec l&#x26;#39;autre pour le territoire. Aux stades ult&#xE9;rieurs, apr&#xE8;s la cr&#xE9;ation de territoires p&#xE9;riph&#xE9;riques tonnelle, la capacit&#xE9; des voisins indemnes de germes diminu&#xE9; fortement, et m&#xEA;me si la croissance des axones l&#xE9;s&#xE9;s relanc&#xE9;, ils ont &#xE9;t&#xE9; repouss&#xE9;s par la peau d&#xE9;nerv&#xE9;. Axones ont &#xE9;t&#xE9; repouss&#xE9;s sp&#xE9;cifiquement par leurs anciens territoires, ce qui sugg&#xE8;re que des facteurs locaux inhibiteurs persistent dans ces r&#xE9;gions. Antagoniser la fonction de plusieurs membres du r&#xE9;cepteur Nogo (NgR) / voie RhoA am&#xE9;lior&#xE9; la capacit&#xE9; des axones l&#xE9;s&#xE9;s &#xE0; se d&#xE9;velopper dans la peau d&#xE9;nerv&#xE9;. Ainsi, comme dans le SNC, les obstacles &#xE0; la r&#xE9;innervation dans les SNP se produire apr&#xE8;s l&#x26;#39;&#xE9;tablissement initial de l&#x26;#39;axone tonnelle structure.

Obstacles r&#xE9;gul&#xE9;e par le d&#xE9;veloppement &#xE0; une r&#xE9;innervation la peau par p&#xE9;riph&#xE9;riques bless&#xE9;s terminaisons axonales sensorielles

Die strukturelle Plastizit&auml;t der Neurites in das Zentralnervensystem (ZNS) sinkt dramatisch nach der anf&auml;nglichen Entwicklung, sondern das periphere Nervensystem (PNS) beh&auml;lt erhebliche Plastizit&auml;t ins Erwachsenenalter. Dennoch ist die funktionale Reinnervation von verletzten peripheren sensorischen Neuronen oft unvollst&auml;ndig [1-6]. Um die Entwicklungsbiologie Kontrolle der Haut Reinnervation untersuchen, abgebildet wir die Regeneration von trigeminal sensorische Axon Terminals in live Zebrafisch-Larven, die nach Laser Axotomie. Wenn Axone verletzt wurden, w&auml;hrend der Fr&uuml;he Stadien der Auswuchs, regenerierende und unverletzt Axone wuchs in denervated Haut und wetteiferten miteinander um Territorium. In sp&auml;teren Phasen nach der Gr&uuml;ndung des peripheren Arbor Territorien die unverletzt Nachbarn sprie&szlig;en reparaturbed&uuml;rftig stark, und obwohl Axone reinitiated Wachstum verletzt, sie von denervated Haut abgesto&szlig;en. Regenerierende Axone speziell von abgesto&szlig;en ihre ehemaligen Gebiete, was darauf hindeutet, dass lokale hemmende Faktoren in diesen Regionen bestehen. Davon die Funktion mehrerer Mitglieder des Nogo-Rezeptors (NgR) / RhoA Bahn verbessert die F&auml;higkeit der Gesch&auml;digte Axone wachsen in denervated Haut. So entstehen wie in der CNS, Hindernisse zu Reinnervation in die PNS nach Neugr&uuml;ndung der Axon-Arbor-Struktur.

Entwicklungspolitisch geregelten Hindernisse Reinnervation verletzten periphere sensorische Axon Terminals der Haut.

La plasticit&agrave; strutturale dei neuriti nel sistema nervoso centrale (SNC) diminuisce drasticamente dopo la fase di sviluppo iniziale, ma il sistema nervoso periferico (PNS) mantiene la sostanziale plasticit&agrave; nell&#39;et&agrave; adulta. Tuttavia, reinnervazione funzionale di neuroni sensitivi periferici feriti &egrave; spesso incompleta [1-6]. Per indagare il controllo dello sviluppo di reinnervazione pelle, abbiamo ripreso la rigenerazione dei terminali di assoni sensoriali del trigemino in larve di zebrafish live seguendo laser axotomy. Quando assoni sono stati feriti durante le prime fasi di escrescenza, rigenerante e illeso assoni crebbero in pelle denervata e gareggiarono con uno altro per il territorio. Nelle fasi successive, dopo l&#39;istituzione dei territori periferici arbor, la capacit&agrave; dei vicini illesi a germogliare diminuito severamente, e sebbene ferito rilanciate crescita assoni, essi furono respinti da pelle denervata. Assoni rigeneranti furono respinti in particolare dai loro ex territori, suggerendo che fattori inibitori locali persistono in queste regioni. Inimicarsi la funzione dei diversi membri del recettore Nogo (NgR) / RhoA percorso migliorato la capacit&agrave; di assoni feriti a crescere in pelle denervata. Cos&igrave;, come il CNS, impedimenti a reinnervazione nel PNS sorgono dopo il primo insediamento della struttura arbor assone.

Inerente allo sviluppo regolato impedimenti alla pelle reinnervazione dai terminali infortunato assone sensoriale periferico.

&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#xFF08;CNS&#xFF09;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x5F8C;&#x306B;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x672B;&#x68A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#xFF08;PNS&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x4EBA;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x672B;&#x68A2;&#x611F;&#x899A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x795E;&#x7D4C;&#x518D;&#x652F;&#x914D;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;[1-6]&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x76AE;&#x819A;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x5236;&#x5FA1;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x8EF8;&#x7D22;&#x5207;&#x65AD;&#x5F8C;&#x306B;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x5E7C;&#x751F;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E09;&#x53C9;&#x795E;&#x7D4C;&#x611F;&#x899A;&#x8EF8;&#x7D22;&#x7D42;&#x672B;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8EF8;&#x7D22;&#x304C;&#x4F38;&#x9577;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x3057;&#x3001;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306F;&#x3001;&#x9664;&#x795E;&#x7D4C;&#x76AE;&#x819A;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x3001;&#x5730;&#x57DF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E92;&#x3044;&#x306B;&#x7AF6;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5F8C;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x3001;&#x5468;&#x8FBA;&#x30A2;&#x30FC;&#x30D0;&#x9818;&#x571F;&#x306E;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x5F8C;&#x3001;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x96A3;&#x4EBA;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x767A;&#x82BD;&#x3057;&#x3001;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x304C;&#x518D;&#x958B;&#x59CB;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x304C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x9664;&#x795E;&#x7D4C;&#x76AE;&#x819A;&#x306B;&#x53CD;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x518D;&#x751F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306F;&#x3001;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x8981;&#x56E0;&#x304C;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x306B;&#x56FA;&#x57F7;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x5143;&#x306E;&#x9818;&#x571F;&#x3067;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x53CD;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x62EE;&#x6297;Nogo&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#xFF08;NGR&#xFF09;/ RhoA&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x3001;&#x8131;&#x795E;&#x7D4C;&#x76AE;&#x819A;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x3059;&#x308B;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;PNS&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x518D;&#x751F;&#x306B;&#x969C;&#x5BB3;&#x304C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30A2;&#x30FC;&#x30D0;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x78BA;&#x7ACB;&#x5F8C;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8CA0;&#x50B7;&#x672B;&#x68A2;&#x611F;&#x899A;&#x8EF8;&#x7D22;&#x672B;&#x7AEF;&#x304B;&#x3089;&#x76AE;&#x819A;&#x795E;&#x7D4C;&#x518D;&#x751F;&#x3078;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x963B;&#x5BB3;&#x8981;&#x56E0;

&#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; (CNS)&#xC5D0;&#xC11C; neurites&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xC778;&#xAC00; &#xC18C;&#xC131; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD6C4; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB9D0; &#xCD08; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; (PNS) &#xC131;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC18C;&#xC131;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0;. &#xADF8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0;, &#xBD80; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xB9D0; &#xCD08; &#xAC10;&#xAC01; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAE30;&#xB2A5; reinnervation&#xB294; &#xC885;&#xC885; &#xBD88;&#xC644;&#xC804; &#xD55C; [1-6]. &#xD53C;&#xBD80; reinnervation&#xC758; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; zebrafish &#xC560;&#xBC8C;&#xB808; &#xB808;&#xC774;&#xC800; axotomy &#xB2E4;&#xC74C;&#xC5D0; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; trigeminal &#xAC10;&#xAC01; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC758; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xBA87; &#xAD70;&#xB370;. &#xCD95; &#xC0AD; &#xC911; &#xBD80;&#xC0C1;&#xC744; &#xB2F9;&#xD588;&#xB2E4; &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C;, &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xBC0F; &#xC950;&#xB294; axons&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4; denervated &#xD53C;&#xBD80;&#xC5D0; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xC11C;&#xB85C; &#xC601;&#xD1A0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACBD;&#xC7C1;. &#xC8FC;&#xBCC0; &#xC2DD; &#xBAA9; &#xC601;&#xD1A0;&#xC758; &#xC124;&#xB9BD; &#xD6C4; &#xB098;&#xC911; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C8;&#xC2F9;&#xC744; &#xC190;&#xC0C1; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC774;&#xC6C3;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xC2EC;&#xAC01; &#xD558; &#xAC8C;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xCD95; &#xC0AD; reinitiated &#xC131;&#xC7A5; &#xBD80;&#xC0C1;, &#xBE44;&#xB85D; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; denervated &#xD53C;&#xBD80;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACA9;&#xD1F4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC7AC;&#xC0DD; &#xCD95; &#xC0AD; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC61B; &#xC601;&#xD1A0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC694;&#xC778;&#xC774; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xACA9;&#xD1F4; &#xD588;&#xB2E4;. Nogo &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (NgR)&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; &#xD568;&#xC218; antagonizing / RhoA &#xD1B5;&#xB85C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; denervated &#xD53C;&#xBD80;&#xC5D0; &#xC131;&#xC7A5; &#xBD80;&#xC0C1;&#xB41C; axons&#xC758; &#xC6A9;&#xB7C9;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, CNS, &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C; &#xC7A5;&#xC560; PNS&#xC5D0; reinnervation &#xCD95; &#xC0AD; &#xC2DD; &#xBAA9; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xC124;&#xB9BD; &#xD6C4; &#xBC1C;&#xC0DD;.

&#xBC1C;&#xB2EC; &#xC7A5;&#xC560; reinnervation &#xBD80;&#xC0C1;&#xB41C; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xAC10;&#xAC01; &#xCD95; &#xC0AD; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD53C;&#xBD80;&#xB97C; &#xADDC;&#xC81C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La plasticidad estructural de neuritas en el sistema nervioso central (SNC) disminuye dr&#xE1;sticamente despu&#xE9;s del desarrollo inicial, pero el sistema nervioso perif&#xE9;rico (SNP) conserva la plasticidad considerable en la edad adulta. Sin embargo, la reinervaci&#xF3;n funcional por las neuronas sensoriales perif&#xE9;ricas lesionados es a menudo incompleta [1-6]. Para investigar el control del desarrollo de la reinervaci&#xF3;n la piel, que tom&#xF3; im&#xE1;genes de la regeneraci&#xF3;n de los terminales de los axones sensoriales del trig&#xE9;mino en larvas de pez cebra en vivo despu&#xE9;s de axotom&#xED;a l&#xE1;ser. Cuando los axones resultaron heridas durante las primeras etapas de la consecuencia, la regeneraci&#xF3;n de los axones lesionados y se convirti&#xF3; en la piel denervado y compet&#xED;an entre s&#xED; por el territorio. En etapas posteriores, despu&#xE9;s de que el establecimiento de los territorios perif&#xE9;ricos cenador, la capacidad de los vecinos de lesionados a brotar disminuido severamente, y aunque el crecimiento de los axones lesionados reinici&#xF3;, que fueron repelidos por la piel denervado. Regeneraci&#xF3;n de los axones fueron repelidos espec&#xED;ficamente por sus antiguos territorios, lo que sugiere que los factores inhibitorios locales persisten en estas regiones. Antagonizar la funci&#xF3;n de varios miembros del receptor Nogo (NGR) / v&#xED;a RhoA mejorar la capacidad de los axones da&#xF1;ados para crecer en la piel denervado. As&#xED;, como en el SNC, los obst&#xE1;culos a la reinervaci&#xF3;n en el SNP surgen despu&#xE9;s del establecimiento inicial del ax&#xF3;n estructura de &#xE1;rbol.

Los impedimentos de desarrollo regulados en la piel de reinervaci&#xF3;n lesionados terminales perif&#xE9;ricas sensoriales Axon

&#x53D7;&#x4F24;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#xFF0C;&#x5206;&#x79BB;&#x5176;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5206;&#x89E3;&#x7684;&#x6C83;&#x52D2;&#x53D8;&#x6027; &#xFF08;WD&#xFF09; &#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x7247;&#x6BB5;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1; WD &#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x672C;&#x5730;&#x8F74;&#x7A81;&#x53D8;&#x6027;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5171;&#x540C;&#x673A;&#x5236;&#x7CBE;&#x5236;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x4F46;&#x53D1;&#x5C55;&#x4FEE;&#x526A;&#x51E0;&#x4E2A;&#x4EE5;&#x524D;&#x68C0;&#x67E5;&#x7684;&#x5B9E;&#x4F8B;&#x4E0D;&#x53D7; WD &#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x4E8E;&#x6FC0;&#x5149;&#x5207;&#x65AD;&#x548C;&#x5EF6;&#x65F6;&#x5171;&#x7126;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x548C;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5916;&#x56F4;&#x611F;&#x5B98;&#x8F74;&#x7A81; WD &#x548C;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x6D3B;&#x5E7C;&#x866B;&#x53D1;&#x80B2;&#x4FEE;&#x526A;&#x3002;&#x4E54;&#x6728;&#x6811;&#x79CD;&#x5355;&#x4E00;&#x53D7;&#x4F24;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x7247;&#x6BB5;&#x7ECF;&#x5386;&#x4E86;&#x4E09;&#x4E2A;&#x5B9A;&#x578B;&#x7684;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684; WD&#xFF1A; &#x6EDE;&#x540E;&#x671F;&#x3001; &#x5206;&#x88C2;&#x671F;&#x548C;&#x6E05;&#x5173;&#x3002;&#x53D1;&#x80B2;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x6EDE;&#x540E;&#x671F;&#xFF0C;&#x6210;&#x4E3A;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x80DA;&#x80CE;&#x8001;&#x5E74;&#x4EBA;&#x8F83;&#x77ED;&#x800C;&#x95F4;&#x9699;&#x671F;&#x7684;&#x957F;&#x5EA6;&#x4E0E;&#x8F74;&#x7A81;&#x788E;&#x7247;&#x6570;&#x91CF;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7279;&#x5B9A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6CDB;&#x7D20;&#x5316;&#x548C;&#x6C83;&#x52D2;&#x53D8;&#x6027;&#x6162;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528; &#xFF08;would(S)) &#x52A0;&#x957F;&#x7684;&#x6EDE;&#x540E;&#x671F;&#x663E;&#x8457;&#xFF0C;&#x4F46;&#x65E2;&#x4E0D;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x788E;&#x7247;&#x3002;&#x6301;&#x7EED;&#x5C06; (S)-&#x8868;&#x793A;&#x8F74;&#x7A81;&#x7247;&#x6BB5;&#x76F4;&#x63A5;&#x51FB;&#x9000;&#x518D;&#x751F;&#x8F74;&#x7A81;&#x5206;&#x652F;&#x5176;&#x7236;&#x4E54;&#x6728;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; self-repulsion &#x7684;&#x59B9;&#x59B9;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x4E54;&#x6728;&#x6811;&#x79CD;&#x7684;&#x5206;&#x652F;&#x673A;&#x6784;&#x3002;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7684;&#x5C06; (S) &#x4E5F;&#x7834;&#x574F;&#x81EA;&#x7136;&#x53D1;&#x751F;&#x5F53;&#x5730;&#x8F74;&#x7A81;&#x4FEE;&#x526A;&#x548C;&#x81EA;&#x53D1;&#x5730;&#x6B7B;&#x4E8E;&#x4E09;&#x53C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x53D8;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF1A; &#x867D;&#x7136;&#x4EF6;&#x4F1A; (S)-&#x8868;&#x793A;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x88AB;&#x4FEE;&#x526A;&#xFF0C;&#x548C;&#x4E00;&#x4E9B;&#x4EBA;&#x4F1A; (S)-&#x8868;&#x793A;&#x4ECD;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E24;&#x79CD;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x5206;&#x79BB;&#x5931;&#x8D25;&#xFF0C;&#x9000;&#x5316;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x7247;&#x6BB5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5916;&#x56F4;&#x7684;&#x611F;&#x5B98;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x81EA;&#x53D1;&#x6027;&#x6574;&#x5F62;&#x4FEE;&#x526A;&#x7684;&#x7247;&#x6BB5;&#x5FC5;&#x987B;&#x5220;&#x9664;&#x7531; WD &#x6837;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x8868;&#x76AE;&#x3002;

&#x6C83;&#x52D2;&#x53D8;&#x6027;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E09;&#x53C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x76AE;&#x80A4;&#x4E2D;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x518D;&#x751F;&#x548C;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x4FEE;&#x526A;&#x3002;

Fragments of injured axons that detach from their cell body break down by the molecularly regulated process of Wallerian degeneration (WD). Although WD resembles local axon degeneration, a common mechanism for refining neuronal structure, several previously examined instances of developmental pruning were unaffected by WD pathways. We used laser axotomy and time-lapse confocal imaging to characterize and compare peripheral sensory axon WD and developmental pruning in live zebrafish larvae. Detached fragments of single injured axon arbors underwent three stereotyped phases of WD: a lag phase, a fragmentation phase and clearance. The lag phase was developmentally regulated, becoming shorter as embryos aged, while the length of the clearance phase increased with the amount of axon debris. Both cell-specific inhibition of ubiquitylation and overexpression of the Wallerian degeneration slow protein (Wld(S)) lengthened the lag phase dramatically, but neither affected fragmentation. Persistent Wld(S)-expressing axon fragments directly repelled regenerating axon branches of their parent arbor, similar to self-repulsion among sister branches of intact arbors. Expression of Wld(S) also disrupted naturally occurring local axon pruning and axon degeneration in spontaneously dying trigeminal neurons: although pieces of Wld(S)-expressing axons were pruned, and some Wld(S)-expressing cells still died during development, in both cases detached axon fragments failed to degenerate. We propose that spontaneously pruned fragments of peripheral sensory axons must be removed by a WD-like mechanism to permit efficient innervation of the epidermis.

Wallerian degeneration of zebrafish trigeminal axons in the skin is required for regeneration and developmental pruning.

Fragments d&#x26;#39;axones l&#xE9;s&#xE9;s qui se d&#xE9;tachent de leur corps cellulaire se d&#xE9;composent par le processus mol&#xE9;culaire r&#xE9;glement&#xE9; de la d&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence wall&#xE9;rienne (DEO). M&#xEA;me si DEO ressemble d&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence axonale locale, un m&#xE9;canisme commun pour le raffinage structure neuronale, plusieurs cas examin&#xE9;s pr&#xE9;c&#xE9;demment d&#x26;#39;&#xE9;lagage de d&#xE9;veloppement n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; affect&#xE9;s par des voies de DEO. Nous avons utilis&#xE9; au laser axotomie et time-lapse d&#x26;#39;imagerie confocale pour caract&#xE9;riser et comparer p&#xE9;riph&#xE9;rique axone sensoriel taille de DEO et de d&#xE9;veloppement des larves de poisson z&#xE8;bre en direct. Fragments d&#xE9;tach&#xE9;s de simples arbres axones bless&#xE9;s a subi trois phases st&#xE9;r&#xE9;otyp&#xE9;es de DEO: une phase de latence, une phase de fragmentation et de la clairance. La phase de latence &#xE9;tait r&#xE9;gul&#xE9;e par le d&#xE9;veloppement, devenant plus courte que les embryons &#xE2;g&#xE9;s, tandis que la longueur de la phase de clairance augmente avec la quantit&#xE9; de d&#xE9;bris axone. Les deux inhibition sp&#xE9;cifique des cellules de l&#x26;#39;ubiquitination et la surexpression de la prot&#xE9;ine lente d&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence wall&#xE9;rienne (Org (S)) a allong&#xE9; la phase de latence de fa&#xE7;on spectaculaire, mais ni la fragmentation touch&#xE9;e. Persistante Org (S)-exprimant des fragments axone directement repouss&#xE9; r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des axones branches de leur arbre parent, semblables &#xE0; l&#x26;#39;auto-r&#xE9;pulsion entre les branches s&#x153;urs de tonnelles intactes. Expression des Org (S) a &#xE9;galement perturb&#xE9; naturellement la taille axone locale et de la d&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence axonale dans les neurones meurent spontan&#xE9;ment trijumeau: bien que des morceaux de Org (s) exprimant des axones ont &#xE9;t&#xE9; &#xE9;lagu&#xE9;s, et quelques-uns Org (S)-cellules exprimant encore d&#xE9;c&#xE9;d&#xE9; au cours du d&#xE9;veloppement, en fragments d&#xE9;tach&#xE9;s axone les deux cas n&#x26;#39;a pas d&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;. Nous proposons que les fragments taill&#xE9;s de fa&#xE7;on spontan&#xE9;e des axones sensoriels p&#xE9;riph&#xE9;riques doivent &#xEA;tre &#xE9;limin&#xE9;s par un m&#xE9;canisme de WD-comme pour permettre &#xE0; l&#x26;#39;innervation efficace de l&#x26;#39;&#xE9;piderme.

D&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence wall&#xE9;rienne du poisson z&#xE8;bre axones trig&#xE9;minales dans la peau est n&#xE9;cessaire &#xE0; la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration et d&#x26;#39;&#xE9;lagage de d&#xE9;veloppement

Fragmente der Gesch&auml;digte Axone, die ihre Zellk&ouml;rper brechen vom molekular geregelten Prozess der Wallersche Degeneration (WD) trennen. Obwohl WD lokalen Axon Degeneration, ein gemeinsamer Mechanismus zur Raffination neuronale Struktur &auml;hnelt wurden mehrere zuvor untersuchten F&auml;lle der Entwicklungsbiologie Beschneidung von WD Wege unber&uuml;hrt. Wir verwendeten Laser Axotomie und Time-Lapse confocal imaging zu charakterisieren und zu vergleichen, periphere sensorische Axon WD und Entwicklungsst&ouml;rungen Ausholzen in live Zebrafisch-Larven. Freistehendes Fragmente der einzelnen verletzten Axon Dorne unterzog sich drei Stereotype Phasen des WD: eine Verz&ouml;gerung-Phase, eine Fragmentierung Phase und Freiraum. Die Lag-Phase war entwicklungspolitisch geregelt, k&uuml;rzer als Embryonen im Alter, w&auml;hrend die L&auml;nge der Freiraum-Phase mit der Menge der Axon Tr&uuml;mmer erh&ouml;ht. Beide zellspezifische Hemmung der Ubiquitylation und eine &Uuml;berexpression des langsamen Proteins Wallersche Degeneration (Wld(S)) verl&auml;ngert die Lag-Phase dramatisch, aber weder Fragmentierung betroffen. Persistent w&uuml;rde (S)-Ausdruck Axon-Fragmente direkt abgesto&szlig;en regenerierende Axon Zweige der ihr &uuml;bergeordneten Arbor, &auml;hnlich dem Self-repulsion unter Schwester zweigt der intakten Dorne. Ausdruck der Wld (S) auch gest&ouml;rt, nat&uuml;rlich vorkommenden lokalen Axon Rebschnitt und Axon Degeneration spontan Sterbehilfe trigeminal Neuronen: Obwohl St&uuml;cke der Wld S-Ausdr&uuml;cken Axone beschnitten wurden und einige Zellen Wld S-Ausdr&uuml;cken noch w&auml;hrend der Entwicklung in beiden F&auml;llen getrennt starb Axon Fragmente nicht ausarten. Schlagen wir spontan Aufger&Atilde; Fragmente der periphere sensorische Axone von einer WD-&auml;hnlichen Mechanismus erm&ouml;glichen effiziente Innervation der Epidermis entfernt werden m&uuml;ssen.

Wallersche Degeneration der Zebrafisch trigeminal Axone in der Haut ist f&uuml;r Regeneration und Entwicklungsst&ouml;rungen Beschneidung erforderlich.

Frammenti di assoni feriti che staccano dal loro corpo cellulare rompere molecolarmente regolamentato processo di degenerazione walleriana (WD). Sebbene WD assomiglia a degenerazione locale assone, un meccanismo comune per raffinazione struttura neuronale, diversi casi precedentemente esaminati di potatura dello sviluppo sono state influenzate da percorsi di WD. Abbiamo utilizzato axotomy laser e imaging confocale time-lapse di caratterizzare e confrontare assone sensoriale periferico WD e potatura dello sviluppo nelle larve di zebrafish dal vivo. Distaccata frammenti di pergole singolo assone ferito ha subito tre fasi stereotipato di WD: una fase di ritardo, una fase di frammentazione e clearance. La fase di ritardo inerente allo sviluppo &egrave; stata regolamentata, diventando pi&ugrave; brevi come embrioni invecchiato, mentre la lunghezza della fase di liquidazione &egrave; aumentato con la quantit&agrave; di detriti assone. Entrambi inibizione delle cellule specifiche di ubiquitylation e iperespressione della proteina lenta degenerazione walleriana (Wld(S)) allungato notevolmente la fase di lag, ma n&eacute; colpiti frammentazione. Persistente che esprimono Wld S axon frammenti direttamente respinti rigenerante assone rami di arbor loro padre, simile a self-repulsion tra sorella rami di pergole intatti. Espressione di Wld (S) perturbato anche naturali locali assone potatura e degenerazione assone spontaneamente morendo trigeminale neuroni: sebbene pezzi di assoni che esprimono Wld S sono stati potati, e alcune cellule che esprimono Wld S ancora morirono durante lo sviluppo, in entrambi i casi staccati frammenti assone non &egrave; riuscito a degenerare. Proponiamo che spontaneamente potate frammenti degli assoni sensoriali periferici devono essere rimosso da un WD-come meccanismo per consentire efficiente innervazione dell&#39;epidermide.

Degenerazione walleriana di zebrafish trigeminale assoni nella pelle &egrave; necessaria per la rigenerazione e la potatura dello sviluppo.

&#x30A6;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30FC;&#x5909;&#x6027;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#xFF08;WD&#xFF09;&#x306F;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x5207;&#x308A;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x65AD;&#x7247;&#x3002; WD&#x306F;&#x3001;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x8EF8;&#x7D22;&#x5909;&#x6027;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x767A;&#x9054;&#x30D7;&#x30EB;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;WD&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x5E7C;&#x866B;&#x3067;&#x306F;&#x672B;&#x68A2;&#x611F;&#x899A;&#x795E;&#x7D4C;&#x8EF8;&#x7D22;WD&#x3068;&#x767A;&#x9054;&#x526A;&#x5B9A;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x8EF8;&#x7D22;&#x5207;&#x65AD;&#x3068;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30E9;&#x30D7;&#x30B9;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30E9;&#x30B0;&#x76F8;&#x3001;&#x65AD;&#x7247;&#x5316;&#x306E;&#x4F4D;&#x76F8;&#x3068;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#xFF1A;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x65AD;&#x7247;&#x306F;&#x3001;WD&#x306E;&#x4E09;&#x7D0B;&#x5207;&#x308A;&#x578B;&#x306E;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30E9;&#x30B0;&#x76F8;&#x304C;&#x767A;&#x9054;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x76F8;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x7834;&#x7247;&#x306E;&#x91CF;&#x3068;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x9AD8;&#x9F62;&#x8005;&#x306E;&#x80DA;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x77ED;&#x304F;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A6;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30FC;&#x5909;&#x6027;&#x304C;&#x9045;&#x3044;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;WLD&#xFF08;S&#xFF09;&#xFF09;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x671F;&#x3092;&#x9577;&#x304F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x65AD;&#x7247;&#x5316;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x3068;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3002;&#x6C38;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;WLD&#xFF08;S&#xFF09;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x65AD;&#x7247;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x59C9;&#x59B9;&#x679D;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x3001;&#x81EA;&#x5DF1;&#x5ACC;&#x60AA;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x89AA;&#x30A2;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x679D;&#x3092;&#x3001;&#x53CD;&#x767A;&#x3002; WLD&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#xFF08;S&#xFF09;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306F;&#x30D7;&#x30EB;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;WLD&#xFF08;S&#xFF09;&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x3067;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3057;&#x305F;&#xFF1A;WLD&#xFF08;S&#xFF09;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x81EA;&#x7136;&#x306B;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306B;&#x4E09;&#x53C9;&#x795E;&#x7D4C;&#x3092;&#x7015;&#x6B7B;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30D7;&#x30EB;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8EF8;&#x7D22;&#x5909;&#x6027;&#x3092;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3066;&#x4E2D;&#x65AD;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7E2E;&#x9000;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x305F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x65AD;&#x7247;&#x3092;&#x5207;&#x308A;&#x96E2;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x672B;&#x68A2;&#x611F;&#x899A;&#x795E;&#x7D4C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306B;&#x526A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x8868;&#x76AE;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x652F;&#x914D;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;WD&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9664;&#x53BB;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x3051;&#x308C;&#x3070;&#x306A;&#x3089;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x76AE;&#x819A;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x4E09;&#x53C9;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x30A6;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30FC;&#x5909;&#x6027;&#x306F;&#x518D;&#x751F;&#x3068;&#x767A;&#x9054;&#x526A;&#x5B9A;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

Wallerian &#xBCC0;&#xC131; (WD) &#xBD84;&#xC790;&#xB85C; &#xADDC;&#xC81C; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC140; &#xBC14;&#xB514; &#xBE0C;&#xB808;&#xC774;&#xD06C; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xBD80;&#xC0C1;&#xB41C; axons&#xC758; &#xD30C;&#xD3B8;. WD&#xACFC; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB85C;&#xCEEC; &#xCD95; &#xC0AD; &#xBCC0;&#xC131;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xAD6C;&#xC870; &#xC870;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD55C; &#xC778;&#xC2A4;&#xD134;&#xC2A4;&#xC758; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC815;&#xB9AC; WD &#xACBD;&#xB85C; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xAC10;&#xAC01; &#xCD95; &#xC0AD; WD&#xC640; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; zebrafish &#xC560;&#xBC8C;&#xB808; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC815;&#xB9AC; &#xBE44;&#xAD50; &#xB808;&#xC774;&#xC800; axotomy &#xBC0F; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; confocal &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD80;&#xC0C1;&#xB41C; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC544; &#xBC84;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC870;&#xAC01; &#xBC1B;&#xC558;&#xB2E4; WD&#xC758; &#xC138; &#xC9C4;&#xBD80;&#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4;: &#xB798;&#xADF8; &#xB2E8;&#xACC4;, &#xC870;&#xAC01;&#xD654; &#xB2E8;&#xACC4; &#xBC0F; &#xC815;&#xB9AC;. &#xB798;&#xADF8; &#xB2E8;&#xACC4;, &#xC815;&#xB9AC; &#xB2E8;&#xACC4; &#xAE38;&#xC774; &#xCD95; &#xC0AD; &#xD30C;&#xD3B8;&#xC758; &#xC591;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC30;&#xC544; &#xC138;&#xB85C; &#xC9E7;&#xC740; &#xB418; &#xACE0; &#xADDC;&#xC81C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB450; &#xC140; &#xAD00;&#xB828; &#xC5B5;&#xC81C; ubiquitylation &#xBC0F; Wallerian &#xBCC0;&#xC131; &#xB290;&#xB9B0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; overexpression (would(S)) &#xAE38;&#xC5B4; &#xB798;&#xADF8; &#xB2E8;&#xACC4; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB098;&#xB3C4; &#xC870;&#xAC01;&#xD654;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744;. &#xC601;&#xAD6C; &#xAC83; (S)-&#xC790;&#xB9E4; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; self-repulsion&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBD80;&#xBAA8; &#xC544; &#xBC84;&#xC758; &#xACA9;&#xD1F4; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xCD95; &#xC0AD; &#xAC00;&#xC9C0; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xC544; &#xBC84;&#xC758; &#xBD84;&#xAE30; &#xC9C1;&#xC811; &#xCD95; &#xC0AD; &#xD30C;&#xD3B8;&#xC744; &#xD45C;&#xD604;. &#xC2DD;&#xC758; &#xAC83; (&#xB4E4;) &#xB610;&#xD55C; &#xC911;&#xB2E8; &#xC790;&#xC5F0;&#xC2A4;&#xB7FD; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC758; &#xCD95; &#xC0AD; &#xAC00;&#xC9C0; &#xCE58;&#xAE30;&#xC640; &#xC800;&#xC808;&#xB85C; trigeminal &#xC8FD;&#xC5B4;&#xC11C; &#xCD95; &#xC0AD; &#xBCC0;&#xC131; &#xB274;&#xB7F0;: &#xBE44;&#xB85D;&#xC758; &#xAC83; (S)-&#xD45C;&#xD604; axons &#xD588;&#xB2E4; &#xC815;&#xB9AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC77C;&#xBD80; (S)-&#xCD95; &#xC0AD; &#xD30C;&#xD3B8; &#xD0C0;&#xB77D; &#xD55C; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB450; &#xACBD;&#xC6B0; &#xBAA8;&#xB450; &#xC140; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC911;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xC744; &#xD45C;&#xD604;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xAC10;&#xAC01; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC758; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801; &#xC815;&#xB9AC; &#xC870;&#xAC01; &#xD45C; &#xD53C;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; innervation &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; WD &#xAC19;&#xC740; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xAC70; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD53C;&#xBD80;&#xC5D0; zebrafish trigeminal axons&#xC758; wallerian &#xD1F4;&#xBCF4;&#xB294; &#xC911;&#xC0DD;&#xACFC; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC815;&#xB9AC; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Fragmentos de los axones lesionados que se desprenden de su cuerpo celular se descomponen por el proceso de regulaci&#xF3;n molecular de la degeneraci&#xF3;n walleriana (WD). A pesar de WD se asemeja a la degeneraci&#xF3;n del ax&#xF3;n local, un mecanismo com&#xFA;n para perfeccionar la estructura neuronal, varios casos examinados anteriormente en el desarrollo de la poda se vieron afectados por las v&#xED;as de WD. Se utiliz&#xF3; l&#xE1;ser de axotom&#xED;a y lapso de tiempo de imagen confocal para caracterizar y comparar ax&#xF3;n sensorial perif&#xE9;rica poda de WD y de desarrollo de las larvas de pez cebra en vivo. Fragmentos desprendidos de un solo ax&#xF3;n cenadores heridos fue sometido a tres fases estereotipadas de WD: una fase de latencia, una fase de la fragmentaci&#xF3;n y la separaci&#xF3;n. La fase de retardo era regulado por el desarrollo, cada vez m&#xE1;s cortos como embriones a&#xF1;os, mientras que la longitud de la fase de eliminaci&#xF3;n aumenta con la cantidad de desechos ax&#xF3;n. Tanto la inhibici&#xF3;n de c&#xE9;lulas espec&#xED;ficas de la ubiquitinaci&#xF3;n y la sobreexpresi&#xF3;n de la prote&#xED;na degeneraci&#xF3;n walleriana lenta (Wld (S)) alargado la fase de retardo de manera espectacular, pero ni fragmentaci&#xF3;n afectada. Persistente Wld (S)-expresando fragmentos ax&#xF3;n directamente rechazado la regeneraci&#xF3;n de los axones de las ramas de su eje principal, de forma similar a la auto-repulsi&#xF3;n entre las ramas hermanas de cenadores intactas. Expresi&#xF3;n de Wld (S) tambi&#xE9;n se interrumpe naturalmente la poda ax&#xF3;n local y la degeneraci&#xF3;n axonal en las neuronas que mueren de forma espont&#xE1;nea del trig&#xE9;mino: aunque las piezas de Wld (S) que expresan los axones fueron podados, y algunos Wld (S)-que expresan las c&#xE9;lulas segu&#xED;an muriendo durante el desarrollo, en ambos casos separados fragmentos ax&#xF3;n no se degenere. Proponemos que los fragmentos de forma espont&#xE1;nea poda de los axones sensoriales perif&#xE9;ricas deben ser removidos mediante un mecanismo de WD-como para permitir la inervaci&#xF3;n eficiente de la epidermis.

Seanna M. Martin

Department of Molecular Cell and Developmental Biology

University of California, Los Angeles

Two-photon axotomy and time-lapse confocal imaging in live zebrafish embryos

Seanna M. Martin

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University of California, Los Angeles

Two-photon axotomy and time-lapse confocal imaging in live zebrafish embryos

Department of Molecular Cell and Developmental Biology