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<em>In ovo</em> Electroporation of miRNA-based Plasmids in the Developing Neural Tube and Assessment of Phenotypes by DiI Injection in Open-book Preparations

Commissural dI1 neurons have been extensively studied to elucidate the mechanisms underlying axon guidance during development1,2. These neurons are ...

University of Zurich

&#x80DA;&#x80CE;&#x524D;&#x8111;&#xFF0C;&#x5148;&#x9A71;&#x8F74;&#x7A81;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4EB2;&#x548C;&#x7EB5;&#x5411;&#x5927;&#x7247;&#x7B80;&#x5355;&#x5730;&#x5F62;&#x3002;&#x5728;&#x521D;&#x6B65;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x811A;&#x624B;&#x67B6;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x7EBF;&#x7D22;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x843D;&#x4E0D;&#x660E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86; Neogenin&#xFF0C;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; chemoattractive &#x914D; Netrin-1&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA; chemorepulsive &#x914D;&#x4F53;&#x6392;&#x65A5;&#x6307;&#x5BFC;&#x5206;&#x5B50; (RGMa) &#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; (Ig) &#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x6307;&#x5BFC;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x5F3A;&#x70C8;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; Neogenin &#x548C;&#x5176;&#x5047;&#x5B9A;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x524D;&#x8111;&#x3002;Neogenin &#x529F;&#x80FD;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x79CD;&#x53D7;&#x4F53;&#x662F;&#x8F74;&#x7A81;&#x6307;&#x5BFC;&#x65E9;&#x671F;&#x5F62;&#x6210;&#x4EB2;&#x5927;&#x8111;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7A81;&#x53D8;&#x8868;&#x578B;&#x4E5F;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x662F; RGMa &#x6216; Netrin-1&#x3002;&#x540C;&#x65F6;&#x90E8;&#x5206;&#x6572;&#x843D;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x66B4;&#x9732;&#x5242;&#x91CF;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E0E;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x884C;&#x4E8B;&#x90FD;&#x540C;&#x4E00;&#x9014;&#x5F84;&#x4E2D;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684; Neogenin &#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8F74;&#x7A81;&#x6307;&#x5BFC;&#x5206;&#x5B50;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8BC1;&#x636E;&#x548C;&#x652F;&#x6301;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x5373; Neogenin &#x8868;&#x793A;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x56DE;&#x5E94;&#x7684;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x548C;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x538C;&#x6076;&#x7684;&#x7EBF;&#x7D22;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F53;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6D4F;&#x89C8;&#x5176;&#x8179;&#x4FA7;&#x7684;&#x8F68;&#x8FF9;&#x3002;

Neogenin &#x4E0E; RGMa &#x548C; netrin-1 &#x6765;&#x6307;&#x5BFC;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x80DA;&#x80CE;&#x524D;&#x8111;&#x5185;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;

In the embryonic forebrain, pioneer axons establish a simple topography of dorsoventral and longitudinal tracts. The cues used by these axons during the initial formation of the axon scaffold remain largely unknown. We have investigated the axon guidance role of Neogenin, a member of the immunoglobulin (Ig) superfamily that binds to the chemoattractive ligand Netrin-1, as well as to the chemorepulsive ligand repulsive guidance molecule (RGMa). Here, we show strong expression of Neogenin and both of its putative ligands in the developing Xenopus forebrain. Neogenin loss-of-function mutants revealed that this receptor was essential for axon guidance in an early forming dorsoventral brain pathway. Similar mutant phenotypes were also observed following loss of either RGMa or Netrin-1. Simultaneous partial knock downs of these molecules revealed dosage-sensitive interactions and confirmed that these receptors and ligands were acting in the same pathway. The results provide the first evidence that Neogenin acts as an axon guidance molecule in vivo and support a model whereby Neogenin-expressing axons respond to a combination of attractive and repulsive cues as they navigate their ventral trajectory.

Neogenin interacts with RGMa and netrin-1 to guide axons within the embryonic vertebrate forebrain.

Dans le cerveau embryonnaire, pionniers des axones &eacute;tablissent une topographie simple des voies dorsoventral et longitudinale. Les rep&egrave;res utilis&eacute;s par ces axones au cours de la formation initiale de l&#39;&eacute;chafaudage axon demeurent largement inconnus. Nous avons &eacute;tudi&eacute; le r&ocirc;le de guidance axon de Neogenin, membre de la superfamille des immunoglobulines (Ig) qui lie le ligand chemoattractive la n&eacute;trine-1, ainsi que sur la mol&eacute;cule d&#39;orientation r&eacute;pulsive ligand chemorepulsive (RGMa). Ici, nous montrons forte expression de Neogenin et deux de ses ligands putatifs dans le cerveau en d&eacute;veloppement de Xenopus. Mutants de perte de fonction de Neogenin a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que ce r&eacute;cepteur est indispensable pour guidage axonal dans une voie de cerveau dorsoventral formant au d&eacute;but. Les ph&eacute;notypes mutants similaires ont &eacute;galement &eacute;taient des pertes observ&eacute;es suivant de RGMa ou de la n&eacute;trine-1. Downs knock partielle simultan&eacute;e de ces mol&eacute;cules a r&eacute;v&eacute;l&eacute; des interactions de dosage sensible et a confirm&eacute; que ces r&eacute;cepteurs et ligands ont agi dans la m&ecirc;me voie. Les r&eacute;sultats fournissent la premi&egrave;re preuve que Neogenin agit comme une mol&eacute;cule d&#39;axon guidance in vivo et prend en charge un mod&egrave;le par lequel axones exprimant Neogenin r&eacute;pondent &agrave; une combinaison de signaux attractives et r&eacute;pulsives comme ils naviguer dans leur trajectoire ventrale.

Neogenin interagit avec RGMa et la n&eacute;trine-1 pour guider les axones dans le cerveau des vert&eacute;br&eacute;s embryonnaire.

In der embryonalen Stirnhirn etablieren Pionier Axone eine einfache Topographie von dorsoventral und L&auml;ngsschnittdaten Abhandlungen. Die Signale, die durch diese Axone w&auml;hrend der Grundausbildung der Axon-Ger&uuml;st verwendet, bleiben weitgehend unbekannt. Wir haben die Axon-Anleitung-Rolle des Neogenin, ein Mitglied der Immunglobuline (Ig)-Superfamilie untersucht, die an den Chemoattractive-Liganden Netrin-1 sowie das Chemorepulsive Ligand absto&szlig;ende Anleitung Molek&uuml;l (RGMa) bindet. Hier zeigen wir starken Ausdruck der Neogenin und beide seine vermeintliche Liganden in Entwicklungsl&auml;ndern Xenopus Stirnhirns. Neogenin Loss of Function Mutanten ergab, dass dieser Rezeptor f&uuml;r Axon Anleitung in einem fr&uuml;hen bilden dorsoventral Gehirn Weg. &Auml;hnliche Mutante Ph&auml;notypen waren auch beobachteten folgenden Verlust von RGMa oder Netrin-1. Gleichzeitige teilweise Knock tiefen dieser Molek&uuml;le offenbart Dosierung-Sensitive Interaktionen und best&auml;tigt, dass diese Rezeptoren und Liganden in dem gleichen Weg handeln w&uuml;rde. Die Ergebnisse der ersten nachweisen, die Neogenin als ein Axon Guidance Molek&uuml;l in-vivo fungiert und ein Modell, wobei Axone Neogenin-Ausdruck auf eine Kombination von attraktiven und absto&szlig;ende Signale zu reagieren, w&auml;hrend sie ihrer ventralen Flugbahn navigieren, zu unterst&uuml;tzen.

Neogenin interagiert mit RGMa und Netrin-1 Axone in das embryonale vertebrate Stirnhirn zu f&uuml;hren.

Nel proencefalo embrionale, pioniere assoni stabiliscono una semplice topografia dei tratti dorsoventral e longitudinale. I segnali utilizzati da questi assoni durante la formazione iniziale del patibolo assone rimangono in gran parte sconosciuti. Abbiamo studiato il ruolo di guida assone di Neogenin, un membro della superfamiglia delle immunoglobuline (Ig) che lega il ligando chemoattractive netrina-1, cos&igrave; come la molecola di orientamento ripugnante ligando chemorepulsive (RGMa). Qui, vi mostriamo forte espressione di Neogenin ed entrambi i suoi ligandi putativi nel proencefalo Xenopus in via di sviluppo. Mutanti di perdita di funzione Neogenin ha rivelato che questo recettore &egrave; stato essenziale per l&#39;orientamento assone in un percorso di cervello dorsoventral formante precoce. Fenotipi mutanti simili sono stati anche osservato seguente perdita di RGMa o di netrina-1. Simultanea parziale knock down di queste molecole ha rivelato interazioni di dosaggio sensibile e ha confermato che questi recettori e ligandi agivano nel percorso stesso. I risultati forniscono la prima prova che Neogenin agisce come una molecola di orientamento assone in vivo e supportano un modello per cui assoni che esprimono Neogenin rispondono a una combinazione di attrattive e repulsive spunti come navigano loro traiettoria ventrale.

Neogenin interagisce con RGMa e netrina-1 guida assoni all&#39;interno il proencefalo vertebrato embrionale.

&#x840C;&#x82BD;&#x671F;&#x524D;&#x8133;&#x90E8;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AA;&#x30CB;&#x30A2;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30A4;&#x30A8;&#x30B3;&#x30A6;&#x30E2;&#x30EA;&#x3084;&#x7E26;&#x7BA1;&#x306E;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x5730;&#x5F62;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8EF8;&#x7D22;&#x8DB3;&#x5834;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30AD;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Neogenin&#x3001;chemorepulsive &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x53CD;&#x767A;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x5206;&#x5B50; &#xFF08;RGMa&#xFF09; &#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x5316;&#x5B66;&#x8D70;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9; &#x30CD;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; 1&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; (Ig) &#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x79C1;&#x9054;&#x306F; Neogenin &#x306E;&#x5F37;&#x3044;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x767A;&#x5C55;&#x9014;&#x4E0A;&#x306E;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x524D;&#x8133;&#x3067;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Neogenin &#x6A5F;&#x80FD;&#x55AA;&#x5931;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x304C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x521D;&#x671F;&#x5F62;&#x6210;&#x30A4;&#x30A8;&#x30B3;&#x30A6;&#x30E2;&#x30EA;&#x306E;&#x8133;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x306E;&#x305F;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4F3C;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3082;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6B21;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306E; RGMa &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30CD;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3; 1 &#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x6642;&#x90E8;&#x5206;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF; &#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x7528;&#x91CF;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306F;&#x540C;&#x3058;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x884C;&#x52D5;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F; Neogenin &#x306F;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x5206;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x884C;&#x70BA;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x8179;&#x5074;&#x306E;&#x8ECC;&#x9053;&#x5185;&#x3092;&#x79FB;&#x52D5; whereby Neogenin &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x8EF8;&#x7D22;&#x5F15;&#x529B;&#x3068;&#x65A5;&#x529B;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Neogenin RGMa &#x30FB; &#x30CD;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;-1 &#x8EF8;&#x7D22;&#x5185;&#x80DA;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x524D;&#x8133;&#x3092;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBC30;&#xC544; &#xAC1C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xCC99;&#xC790; axons dorsoventral&#xC774; &#xACE0; &#xC138;&#xB85C; &#xCC45;&#xC790;&#xC758; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xC9C0;&#xD615;&#xC744; &#xC124;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD95; &#xC0AD; &#xBE44; &#xACC4;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xC11C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C0;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; Neogenin, chemoattractive &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; Netrin 1 &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; chemorepulsive ligand &#xBD88;&#xCF8C; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xBD84;&#xC790; (RGMa)&#xB294; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE00;&#xB85C;&#xBD88;&#xB9B0; (Ig) superfamily&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC758; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC9C0;&#xCE68; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xAC1C;&#xBC1C; Xenopus &#xAC1C;&#xC5D0; Neogenin&#xC758; &#xAC15;&#xD55C; &#xC2DD;&#xACFC; &#xB450; &#xC0C1; ligands&#xC758;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Neogenin &#xAE30;&#xB2A5; &#xC190;&#xC2E4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC774; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xCD08;&#xAE30; &#xD615;&#xC131; dorsoventral &#xB450;&#xB1CC; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xC704;&#xD55C; &#xD544;&#xC218; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xACE0;&#xAE30; &#xB610;&#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC190;&#xC2E4; RGMa &#xB610;&#xB294; Netrin-1 &#xD588;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xC2DC; &#xBD80;&#xBD84; &#xB179; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC774;&#xC774; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xB178;&#xCD9C;&#xB7C9;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0;&#xC774; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; ligands &#xAC19;&#xC740; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xAE30; &#xD588;&#xB2E4; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; Neogenin &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xBD84;&#xC790;&#xB294; &#xCCAB;&#xBC88;&#xC9F8; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC5D0; &#xC758;&#xD558;&#xC5EC; Neogenin &#xD45C;&#xD604; axons &#xC751;&#xB2F5; &#xC778;&#xB825;&#xACFC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBCF5; &#xBD80; &#xADA4;&#xC801;&#xC744; &#xD0D0;&#xC0C9; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0;.

Neogenin RGMa &#xBC0F; netrin 1 &#xBC30;&#xC544; &#xCC99;&#xCD94; &#xAC1C; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC744; &#xC778;&#xB3C4;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

En el prosenc&eacute;falo embrionario, axones pioneros establecen una topograf&iacute;a simple de dorsoventral y longitudinal. Las se&ntilde;ales utilizadas por estos axones durante la formaci&oacute;n inicial del andamio axon todav&iacute;a siguen sin conocerse. Hemos investigado el papel de gu&iacute;a del axon de Neogenin, un miembro de la superfamilia de inmunoglobulinas (Ig) que se une el ligando chemoattractive Netrin-1, as&iacute; como la mol&eacute;cula de orientaci&oacute;n repulsiva ligando chemorepulsive (RGMa). Aqu&iacute;, mostramos la expresi&oacute;n fuerte de Neogenin y de sus supuestas ligandos en el forebrain Xenopus en desarrollo. Mutantes de p&eacute;rdida de funci&oacute;n de Neogenin revelaron que este receptor es esencial para la orientaci&oacute;n del ax&oacute;n en un camino de cerebro dorsoventral formaci&oacute;n temprana. Fenotipos mutantes similares tambi&eacute;n fueron observada siguiente p&eacute;rdida de RGMa o Netrin-1. Downs knock parcial simult&aacute;nea de estas mol&eacute;culas revelaron interacciones sensibles a la dosis y confirmaron que estos receptores y ligandos estaban actuando en la misma v&iacute;a. Los resultados proporcionan la primera evidencia que Neogenin act&uacute;a como una mol&eacute;cula de orientaci&oacute;n del ax&oacute;n en vivo y apoyan un modelo por el que Neogenin-expresando axones responden a una combinaci&oacute;n de los est&iacute;mulos atractivas y repulsivas como navegan su trayectoria ventral.

Neogenin interact&uacute;a con RGMa y netrin-1 para gu&iacute;a de axones en el prosenc&eacute;falo embrionario de vertebrados.

Neogenin &#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x8DE8;&#x819C;&#x53D7;&#x4F53;&#x5C5E;&#x4E8E;&#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x8D85;&#x5BB6;&#x65CF;&#x3002;&#x5B83;&#x5C06;&#x663E;&#x793A;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x4E8C;&#x7EA7;&#x7ED3;&#x6784;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x764C; (DCC)&#xFF0C;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8F74;&#x7A81;&#x6307;&#x5BFC;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x7684; netrin &#x53D7;&#x4F53;&#x4E2D;&#x5220;&#x9664;&#x3002;&#x50CF; DCC&#xFF0C;neogenin &#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x6362;&#x80FD;&#x5668;&#x8BF1;&#x53D1; netrin &#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; neogenin netrin &#x4EA4;&#x4E92;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5F62;&#x6001;&#x3001; &#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x3001; &#x6210;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x6700;&#x8FD1;&#x5728;&#x8F74;&#x7A81;&#x5BFC;&#x5411;&#x3002;Neogenin &#x4E5F;&#x662F;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x538C;&#x6076;&#x7684;&#x6307;&#x5BFC;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x53C2;&#x4E0E;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3001; &#x51CB;&#x4EA1;&#x548C;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x538C;&#x6076;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x6307;&#x5BFC; glycosylphosphatidylinositol &#x94FE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x4E3A;&#x6F84;&#x6E05;&#x7684; neogenin&#xFF0C;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x5B83;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x7A33;&#x6001;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x542F;&#x52A8;&#x4E86;&#x65E0;&#x6570;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

Neogenin&#xFF1A; &#x4E00;&#x4E2A;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8BB8;&#x591A;&#x804C;&#x80FD;&#x3002;

Neogenin is a multifunctional transmembrane receptor belonging to the immunoglobulin superfamily. It displays identical secondary structure to deleted in colorectal cancer (DCC), a netrin receptor that is involved in axon guidance and cell survival. Like DCC, neogenin is able to transduce signals elicited by netrin. These neogenin-netrin interactions have been implicated in tissue morphogenesis, angiogenesis, myoblast differentiation and most recently in axon guidance. Neogenin is also a receptor for repulsive guidance molecule, a glycosylphosphatidylinositol-linked protein involved in neuronal differentiation, apoptosis and repulsive axon guidance. Numerous studies have been started to elucidate the in vivo functions of neogenin, and its role in multiple aspects of development and homeostasis.

Neogenin: one receptor, many functions.

Neogenin est un r&eacute;cepteur transmembranaire multifonctionnel, appartenant &agrave; la superfamille des immunoglobulines. Il affiche une structure secondaire identique supprim&eacute; dans le cancer colorectal (DCC), un r&eacute;cepteur de la n&eacute;trine qui participe &agrave; la survie d&#39;orientation et de la cellule d&#39;axone. Comme la DCC, neogenin est capable de transmettre des signaux induites par la n&eacute;trine. Ces interactions n&eacute;trine-neogenin ont &eacute;t&eacute; impliqu&eacute;es dans la morphogen&egrave;se des tissus, l&#39;angiogen&egrave;se, la diff&eacute;renciation des myoblastes et, plus r&eacute;cemment, en guidage axonal. Neogenin est aussi un r&eacute;cepteur de la mol&eacute;cule r&eacute;pulsive de guidance, une prot&eacute;ine li&eacute;e glycosylphosphatidylinositol impliqu&eacute;e dans la diff&eacute;renciation neuronale, l&#39;apoptose et guidage axonal r&eacute;pulsif. De nombreuses &eacute;tudes ont &eacute;t&eacute; lanc&eacute;s pour &eacute;lucider les fonctions in vivo de neogenin et son r&ocirc;le dans plusieurs aspects du d&eacute;veloppement et l&#39;hom&eacute;ostasie.

Neogenin : un r&eacute;cepteur, nombreuses fonctions.

Neogenin ist ein multifunktionaler Transmembran Rezeptor, geh&ouml;ren der Immunglobulin-Superfamilie. Es zeigt identische Sekund&auml;rstruktur gel&ouml;scht bei Dickdarmkrebs (DCC), ein Netrin-Rezeptor, die Axon Anleitung und Zelle &uuml;berleben beteiligt ist. Wie DCC ist Neogenin in der Lage, Signale von Netrin entlockt zur&uuml;ckwirken. Diese Neogenin-Netrin-Interaktionen haben im Gewebe Morphogenese, Angiogenese, Myoblast Differenzierung und zuletzt im Axon Anleitung verwickelt. Neogenin ist auch ein Rezeptor f&uuml;r absto&szlig;ende Anleitung Molek&uuml;l, ein Glykosylphosphatidyl-chromosomal Protein neuronale Differenzierung, Apoptosis und absto&szlig;end Axon Anleitung beteiligt. Zahlreiche Studien haben die in-vivo Funktionen der Neogenin und seine Rolle in mehreren Aspekten von Entwicklung und Hom&ouml;ostase zu erhellen begonnen worden.

Neogenin: ein Rezeptor, viele Funktionen.

Neogenin &egrave; un recettore transmembrana multifunzionale appartenendo alla Superfamiglia delle immunoglobuline. Visualizza identica struttura secondaria a eliminato nel cancro del colon-retto (DCC), un recettore netrina che &egrave; coinvolta nella sopravvivenza delle cellule e di orientamento assone. Come DCC, neogenin &egrave; in grado di trasdurre segnali elicitate da netrina. Queste interazioni neogenin-netrina sono state implicate nella morfogenesi dei tessuti, l&#39;angiogenesi, myoblast differenziazione e, pi&ugrave; recentemente, nella guida di assone. Neogenin &egrave; anche un recettore per molecola guida ripugnante, una proteina legata glicosilfosfatidilinositolo coinvolta nel differenziamento neuronale, apoptosi e orientamento assone ripugnante. Numerosi studi sono stati avviati per delucidare le funzioni in vivo di neogenin e il suo ruolo nei molteplici aspetti dello sviluppo e dell&#39;omeostasi.

Neogenin: un recettore, molte funzioni.

Neogenin &#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; &#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x5C5E;&#x3059;&#x308B;&#x591A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x578B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x5927;&#x8178;&#x764C; (DCC), &#x8EF8;&#x7D22;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30CD;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x4E8C;&#x6B21;&#x69CB;&#x9020;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;DCC &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; neogenin &#x306F;&#x3001;&#x30CD;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x4F1D;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089; neogenin &#x30CD;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;, &#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;, &#x7B4B;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x6700;&#x3082;&#x6700;&#x8FD1;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Neogenin &#x3082;&#x53CD;&#x767A;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x5206;&#x5B50;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3001;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068;&#x53CD;&#x767A;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x4E00;&#x7A2E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6570;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;neogenin &#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x767A;&#x9054;&#x3068;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x59CB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Neogenin: 1 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

Neogenin&#xB294; &#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE00;&#xB85C;&#xBD88;&#xB9B0; superfamily&#xC5D0; &#xC18D;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC870; &#xAD6C;&#xC870; &#xB300; &#xC7A5; &#xC554; (DCC), &#xCD95; &#xC0AD; &#xC9C0;&#xCE68;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; netrin &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AD;&#xC81C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. DCC &#xAC19;&#xC740; neogenin &#xC2E0;&#xD638; netrin&#xB85C; elicited transduce &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; neogenin netrin &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC870;&#xC9C1; morphogenesis, &#xC2E0;&#xC0DD;, myoblast &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xAC00;&#xC7A5; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC9C0;&#xCE68;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;. Neogenin&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xBD88;&#xCF8C; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xBD84;&#xC790;, glycosylphosphatidylinositol &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; apoptosis&#xC640; &#xBD88;&#xCF8C; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB2E4; &#xC218;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; neogenin, in vivo &#xAE30;&#xB2A5; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558; &#xAC8C; &#xC2DC;&#xC791; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Neogenin: 1 &#xAC1C;&#xC758; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, &#xB9CE;&#xC740; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Neogenin es un receptor transmembrana multifuncional pertenecientes a la superfamilia de inmunoglobulinas. Muestra id&eacute;ntica estructura secundaria que eliminar&aacute;n en c&aacute;ncer colorrectal (DCC), un receptor de netrin que est&aacute; involucrado en la supervivencia de orientaci&oacute;n y celular del ax&oacute;n. Como DCC, neogenin son capaces de transducir se&ntilde;ales sacadas por netrin. Estas interacciones neogenin-netrin han sido implicadas en la morfog&eacute;nesis del tejido, la angiog&eacute;nesis, la diferenciaci&oacute;n de mioblastos y m&aacute;s recientemente en la orientaci&oacute;n del ax&oacute;n. Neogenin es tambi&eacute;n un receptor para la mol&eacute;cula de orientaci&oacute;n repulsivo, una prote&iacute;na glicosilfosfatidilinositol-ligado en la diferenciaci&oacute;n neuronal, apoptosis y orientaci&oacute;n del ax&oacute;n repulsivo. Numerosos estudios han comenzado a aclarar las funciones en vivo de neogenin y su papel en m&uacute;ltiples aspectos del desarrollo y homeostasis.

Neogenin: un receptor, muchas funciones.

&#x4EE4;&#x4EBA;&#x538C;&#x6076;&#x7684;&#x6307;&#x5BFC;&#x5206;&#x5B50; (rgm &#x8584;&#x819C;) &#x662F; glycosylphosphatidylinositol (GPI)-&#x951A;&#x5B9A;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE; chemorepulsive &#x8F74;&#x7A81;&#x5BFC;&#x5411;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x867D;&#x7136; RGMa &#x7ED1;&#x5B9A;&#x8DE8;&#x819C;&#x53D7;&#x4F53; Neogenin&#xFF0C;&#x7531;&#x4F53;&#x5185; RGMa Neogenin &#x4EA4;&#x4E92;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x4ECD;&#x7136;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x672A;&#x77E5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x514B;&#x9686;&#x5168;&#x957F; RGMa &#x4ECE;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x5317;&#x6781;&#x5E76;&#x786E;&#x5B9A;&#x79F0;&#x4E3A; RGMa1 &#x548C; RGMa2 &#x4E24;&#x4E2A;&#x540C;&#x6E90;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; RGMa1 2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x8FC7;&#x8868;&#x8FBE;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5BFC;&#x81F4;&#x80DA;&#x80CE;&#x65E9;&#x671F;&#x80DA;&#x80CE;&#x81F4;&#x547D;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x5EF6;&#x65F6; photomicroscopy &#x900F;&#x9732;&#x80DA;&#x80CE;&#x5F00;&#x59CB;&#x663E;&#x793A;&#x521D;&#x59CB;&#x5F62;&#x6001;&#x7F3A;&#x9677;&#x4ECE;&#x5927;&#x7EA6; 5 h post-fertilization (hpf)&#xFF0C;&#x800C;&#x540E;&#x7531;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x5375;&#x88C2;&#x7403;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x5728;&#x5927;&#x7EA6; 11 hpf&#x3002;&#x6B64;&#x8868;&#x578B;&#x7531;&#x6551;&#x51FA;&#x540C;&#x65F6;&#x6572;&#x4E0B;&#x6765;&#x7684; RGMa &#x4F7F;&#x7528;&#x963B;&#x6B62;&#x53CD;&#x4E49; morpholinos &#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x3002;RGMa1 &#x53D7;&#x4F53; Neogenin &#x5728; RGMa1 &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x62C6;&#x88C5;&#x4E5F;&#x80FD;&#x591F;&#x62EF;&#x6551;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;RGMa1 &#x901A;&#x8FC7; Neogenin &#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; Neogenin &#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x4F9D;&#x8D56;&#x53D7;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684; rgm &#x8584;&#x819C;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x7684;&#x6211;&#x4EEC;&#x53CD;&#x800C;&#x663E;&#x793A; Neogenin rgm &#x8584;&#x819C;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4FC3;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x3002;RGMa1 &#x548C; Neogenin &#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FBF;&#x5176;&#x7EDF;&#x7B79;&#x53CA;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x662F;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;

&#x4EE4;&#x4EBA;&#x538C;&#x6076;&#x7684;&#x6307;&#x5BFC;&#x5206;&#x5B50; (rgm &#x8584;&#x819C;&#xFF09; &#x7684;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x8868;&#x8FBE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7; Neogenin &#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#x3002;

Repulsive guidance molecule (RGM) a is a glycosylphosphatidylinositol (GPI)-anchored plasma membrane protein that has been implicated in chemorepulsive axon guidance. Although RGMa binds the transmembrane receptor Neogenin, the developmental events controlled by the RGMa-Neogenin interactions in vivo remain largely unknown. We have cloned full-length RGMa from Xenopus borealis for the first time and identified two homologous genes referred to as RGMa1 and RGMa2. Here we show RGMa1 overexpression at 2-cell-stage resulted in cell death, which lead to an early embryonic lethal phenotype of the embryos. Time-lapse photomicroscopy revealed that embryos began to show initial morphological defects from approximately 5 h post-fertilization (hpf) which was then followed by extensive blastomere cell death at approximately 11 hpf. This phenotype was rescued by simultaneous knock down of RGMa using translation blocking anti-sense morpholinos. Knock down of the RGMa1 receptor Neogenin in RGMa1 overexpressing embryos was also able to rescue the phenotype. Together these results indicated that RGMa1 was signalling through Neogenin to induce cell death in the early embryo. While previous studies have suggested that Neogenin is a dependence receptor that induces cell death in the absence of RGM, we have instead shown that Neogenin-RGM interactions induce cell death in the early embryo. The roles of RGMa1 and Neogenin appear to be context specific so that their co-ordinated and regulated expressions are essential for normal development of the vertebrate embryo.

Overexpression of repulsive guidance molecule (RGM) a induces cell death through Neogenin in early vertebrate development.

Mol&eacute;cule r&eacute;pulsive guidance (RGM) une est un glycosylphosphatidylinositol (GPI)-ancr&eacute; des prot&eacute;ines de la membrane plasmique qui a &eacute;t&eacute; impliqu&eacute; dans le guidage axonal chemorepulsive. Bien que RGMa se lie &agrave; des r&eacute;cepteurs transmembranaires Neogenin, les &eacute;v&eacute;nements du d&eacute;veloppement contr&ocirc;l&eacute;s par l&#39;interaction de RGMa-Neogenin in vivo demeurent largement inconnus. Nous avons clon&eacute; RGMa pleine longueur de Xenopus borealis pour la premi&egrave;re fois et identifi&eacute; deux g&egrave;nes homologues appel&eacute;s RGMa1 et RGMa2. Nous d&eacute;montrons surexpression de RGMa1 &agrave; 2-cellule-&eacute;tape conduit &agrave; la mort cellulaire, qui conduisent &agrave; un ph&eacute;notype l&eacute;tal embryonnaire pr&eacute;coce des embryons. Time-Lapse photomicrographie r&eacute;v&egrave;le que les embryons a commenc&eacute; &agrave; montrer les anomalies morphologiques initiales d&#39;environ de post-fertilization de 5 h (hpf) qui a &eacute;t&eacute; suivie de la mort cellulaire blastom&egrave;re &eacute;tendu &agrave; environ 11 hpf. Ce ph&eacute;notype a &eacute;t&eacute; secouru par frapper simultan&eacute;ment vers le bas du RGMa &agrave; l&#39;aide de traduction blocage anti-sens morpholinos. D&eacute;mantelez du r&eacute;cepteur RGMa1 Neogenin dans RGMa1 embryons sur-exprimant a &eacute;galement pu sauver le ph&eacute;notype. Ensemble, ces r&eacute;sultats indiquent que le RGMa1 &eacute;tait signalisation par Neogenin pour induire la mort cellulaire dans l&#39;embryon pr&eacute;coce. Alors que des &eacute;tudes ant&eacute;rieures ont sugg&eacute;r&eacute; que le Neogenin est un r&eacute;cepteur de d&eacute;pendance qui induit la mort des cellules en l&#39;absence de RGM, nous avons montr&eacute; au contraire que les interactions Neogenin-RGM induisent la mort cellulaire dans l&#39;embryon pr&eacute;coce. Les r&ocirc;les de RGMa1 et Neogenin semblent contexte sp&eacute;cifique afin que leurs expressions coordonn&eacute;es et r&eacute;glement&eacute;es sont essentielles au d&eacute;veloppement normal de l&#39;embryon des vert&eacute;br&eacute;s.

La surexpression de la mol&eacute;cule r&eacute;pulsive guidance (RGM) a induit la mort des cellules par l&#39;interm&eacute;diaire de Neogenin dans le d&eacute;veloppement pr&eacute;coce de vert&eacute;br&eacute;s.

Absto&szlig;ende Anleitung Molek&uuml;l (RGM) ein ist ein Glykosylphosphatidyl (GPI)-verankert Plasmamembran-Protein, das in Chemorepulsive Axon Anleitung verwickelt hat. Obwohl RGMa Transmembran Rezeptor Neogenin bindet, bleiben die Entwicklungsbiologie Ereignisse gesteuert durch die RGMa-Neogenin-Interaktionen in-vivo weitgehend unbekannt. Wir haben in RGMa von Xenopus Borealis erstmals geklont und identifiziert zwei homologe Gene, die als RGMa1 und RGMa2 bezeichnet. Hier zeigen wir, dass RGMa1 eine &Uuml;berexpression in 2-Zellen-Stadium Zelltod, f&uuml;hrten zu einer fr&uuml;hen embryonalen t&ouml;dliche Ph&auml;notyp der Embryonen f&uuml;hren. Zeitraffer photomicroscopy ergab, dass Embryonen begannen erste morphologische Defekte von ca. 5 h Post-fertilization (hpf) zeigen dem dann umfangreiche Blastomer Zelltod bei ungef&auml;hr 11 folgte hpf. Dieser Ph&auml;notyp wurde durch gleichzeitige Knock nach unten von RGMa &Uuml;bersetzung blockiert Anti-Sense Morpholinos gerettet. Knock down des RGMa1-Rezeptors Neogenin in RGMa1 overexpressing Embryonen konnte auch der Ph&auml;notyp zu retten. Zusammen ergab diese Ergebnisse, dass RGMa1 durch Neogenin Signalisierung wurde, Zellentod im fr&uuml;hen Embryo zu veranlassen. W&auml;hrend fr&uuml;here Studien vorgeschlagen haben, da&szlig; Neogenin eine Abh&auml;ngigkeit-Rezeptor ist, der Zellentod in Ermangelung RGM bedingt, haben wir stattdessen gezeigt, dass Neogenin-RGM Interaktionen Zelltod im fr&uuml;hen Embryo hervorrufen. Die Rollen von RGMa1 und Neogenin scheinen Kontext spezifische damit ihre koordiniert und reguliert Ausdr&uuml;cke f&uuml;r die normale Entwicklung des vertebrate Embryos unerl&auml;sslich sind.

Eine &Uuml;berexpression von absto&szlig;ende Anleitung Molek&uuml;l (RGM) eine induziert Zelltod durch Neogenin in der fr&uuml;hen Entwicklung der Wirbeltiere.

Molecola guida repulsiva (RGM) una &egrave; un glicosilfosfatidilinositolo (GPI)-ancorata la proteina di membrana plasmatica che &egrave; stata implicata nell&#39;orientamento axon chemorepulsive. Anche se RGMa si lega al recettore transmembrana Neogenin, gli eventi dello sviluppo controllati dalle interazioni RGMa-Neogenin in vivo rimangono in gran parte sconosciuti. Abbiamo clonato full-length RGMa da Xenopus borealis per la prima volta e abbiamo identificato due geni omologhi denominati RGMa1 e RGMa2. Qui vi mostriamo sovraespressione di RGMa1 2-cella-fase risult&ograve; nella morte delle cellule, che conducono a un fenotipo di letale embrionale precoce degli embrioni. Time-lapse photomicroscopy rivelato che gli embrioni ha cominciato a mostrare difetti morfologici iniziali da circa 5 h post-fertilization (hpf) che fu poi seguita da morte cellulare blastomeri estesa a circa 11 hpf. Questo fenotipo fu salvato dalla simultanea bussare gi&ugrave; di RGMa usando traduzione bloccando morpholinos anti-senso. Abbattere del recettore RGMa1 Neogenin in RGMa1 ciclo embrioni &egrave; stato anche in grado di salvare il fenotipo. Insieme questi risultati hanno indicato che RGMa1 era segnalazione attraverso Neogenin per indurre la morte delle cellule nell&#39;embrione precoce. Mentre gli studi precedenti hanno suggerito che la Neogenin &egrave; un recettore di dipendenza che induce la morte delle cellule in assenza di RGM, invece abbiamo dimostrato che le interazioni Neogenin-RGM inducono la morte delle cellule nell&#39;embrione precoce. I ruoli di RGMa1 e Neogenin sembrano essere contesto specifico, in modo che le loro espressioni coordinati e regolamentati sono essenziali per lo sviluppo normale dell&#39;embrione vertebrato.

Sovraespressione di molecola guida repulsiva (RGM) un induce la morte cellulare attraverso Neogenin nello sviluppo iniziale di vertebrati.

&#x53CD;&#x767A;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x5206;&#x5B50; (RGM)&#x3001;&#x4E00;&#x7A2E; (GPI) &#x3067;&#x3059;-chemorepulsive &#x8EF8;&#x7D22;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x56FA;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;RGMa &#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x578B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; Neogenin &#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;RGMa Neogenin &#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x4E0D;&#x660E;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3002;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x306E; RGMa &#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB; borealis &#x304B;&#x3089;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x3057;&#x3001;RGMa1 &#x3068; RGMa2 &#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B; 2 &#x3064;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005; 2 &#x7D30;&#x80DE;&#x671F;&#x3067; RGMa1 &#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3067;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x81F4;&#x6B7B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x80DA;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x80DA;&#x306F;&#x3001;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x5272;&#x7403;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3067;&#x7D04; 11 &#x5206;&#x7D9A;&#x3044;&#x305F;&#x7D04; 5 h post-fertilization (hpf) &#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x59CB;&#x3081;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30E9;&#x30D7;&#x30B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x64AE;&#x5F71;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B; hpf&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x540C;&#x6642;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x3067;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3; &#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9; morpholinos &#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; RGMa &#x306E;&#x6551;&#x52A9;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;RGMa1 mn-sod &#x3092;&#x9AD8;&#x767A;&#x73FE;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; RGMa1 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; Neogenin &#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B; RGMa1 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066; Neogenin &#x304C;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76; Neogenin RGM &#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B; Neogenin RGM &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;RGMa1 &#x3068; Neogenin &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30CD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x898F;&#x5236;&#x5BFE;&#x8C61;&#x5F0F;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x80DA;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x767A;&#x9054;&#x306B;&#x6B20;&#x304B;&#x305B;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x53CD;&#x767A;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x5206;&#x5B50; (RGM) &#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x767A;&#x751F;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; Neogenin &#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBD88;&#xCF8C; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xBD84;&#xC790; (RGM)&#xB294; glycosylphosphatidylinositol (GPI)&#xB294;-chemorepulsive &#xCD95; &#xC0AD; &#xC9C0;&#xCE68;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xACE0;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xB85D; RGMa &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; Neogenin, vivo&#xC5D0;&#xC11C; RGMa Neogenin &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C0;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xB0A8;&#xC544;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; Xenopus &#xB9AC;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; Rgma&#xC744; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB3D9;&#xC885; &#xC720;&#xC804;&#xC790; Rgma1&#xC640; Rgma2&#xB85C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;, &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4; RGMa1 overexpression 2 &#xC140; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xBC30;&#xC544; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8;. &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC57D; 5 h post-fertilization (hpf) &#xC57D; 11&#xC5D0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; blastomere &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xD6C4; &#xB4A4;&#xB97C; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;&#xB294; &#xCD08;&#xAE30; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xAE30; &#xC2DC;&#xC791; &#xD588;&#xB2E4; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; photomicroscopy &#xACF5;&#xAC1C; hpf. &#xC774; &#xD615; anti-sense morpholinos&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xB294; &#xBC88;&#xC5ED;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; Rgma&#xC758; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xB179;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. RGMa1 overexpressing &#xBC30;&#xC544;&#xC758; RGMa1 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; Neogenin&#xC758; &#xC544;&#xB798;&#xB85C; &#xB178;&#xD06C; phenotype &#xAD6C;&#xC870; &#xB610;&#xD55C; &#xC788;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xCD08;&#xAE30; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; RGMa1 Neogenin&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; Neogenin RGM &#xC5C6;&#xC73C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xC758;&#xC874; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;, &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB300;&#xC2E0; Neogenin RGM &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xCD08;&#xAE30; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC8FC;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. RGMa1 &#xBC0F; Neogenin&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD611;&#xC870;&#xC640; &#xADDC;&#xC81C; &#xC2DD;&#xC774; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xBC1C;&#xC804;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xD2B9;&#xC815; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xAC83; &#xAC19;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBD88;&#xCF8C; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xBD84;&#xC790; (RGM)&#xC758; overexpression&#xB294; &#xCD08;&#xAE30; &#xCC99;&#xCD94; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; Neogenin &#xD1B5;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4;.

Mol&eacute;cula de orientaci&oacute;n repulsivo (RGM) una es una glicosilfosfatidilinositol (GPI)-anclado prote&iacute;na de membrana plasm&aacute;tica que se ha implicado en la orientaci&oacute;n del ax&oacute;n de chemorepulsive. Aunque RGMa une al receptor transmembrana Neogenin, los eventos de desarrollo controlados por las interacciones de la RGMa-Neogenin in vivo todav&iacute;a siguen sin conocerse. Hemos clonado RGMa larga duraci&oacute;n de Xenopus borealis por primera vez e identificado dos genes hom&oacute;logos denominados RGMa1 y RGMa2. A continuaci&oacute;n os mostramos sobreexpresi&oacute;n RGMa1 en 2-c&eacute;lula-etapa result&oacute; en la muerte celular, que conducen a un fenotipo letal embrionario temprano de los embriones. Time-lapse photomicroscopy revel&oacute; que embriones comenzaron a mostrar defectos morfol&oacute;gicos iniciales de aproximadamente 5 horas post-fertilizaci&oacute;n (hpf) que luego fue seguido por la muerte de la c&eacute;lula blast&oacute;mero extensa en aproximadamente 11 hpf. Este fenotipo fue rescatado por golpe simult&aacute;neo abajo de RGMa con traducci&oacute;n bloqueo morfolinos anti-sentido. Derribar del receptor RGMa1 Neogenin en RGMa1 sobreexpresando embriones tambi&eacute;n pudo rescatar el fenotipo. Juntos, estos resultados indicaron que RGMa1 fue se&ntilde;alizaci&oacute;n a trav&eacute;s de Neogenin para inducir la muerte celular en el embri&oacute;n. Mientras que estudios previos han sugerido que el Neogenin es un receptor de dependencia que induce muerte celular en la ausencia de RGM, por el contrario hemos demostrado que las interacciones Neogenin-RGM inducen muerte celular en el embri&oacute;n. Las funciones de RGMa1 y Neogenin parecen ser espec&iacute;fico de contexto para que sus expresiones coordinadas y regulados son esenciales para el desarrollo normal del embri&oacute;n vertebrado.

Sobreexpresi&oacute;n de mol&eacute;cula de orientaci&oacute;n repulsivo (RGM) un induce muerte celular a trav&eacute;s de Neogenin en el desarrollo temprano de vertebrados.

&#x8BB8;&#x591A;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0A;&#x6709;&#x51E0;&#x4E2A;&#xFF0C;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x671F;&#x95F4;&#x6709;&#x65F6;&#x4E0D;&#x540C;&#x804C;&#x80FD;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x57FA;&#x56E0;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x671F;&#x95F4;&#x53D1;&#x5C55;&#x65F6;&#x673A;&#x505A;&#x4E86;&#x4E0E;&#x7CBE;&#x786E;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x63A7;&#x5236;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5728;&#x65E9;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E27;&#x5931;&#x5C06;&#x4F7F;&#x5176;&#x540E;&#x6765;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;RNAi&#xFF0C;&#x9E21;&#x80DA;&#x7684;&#x53EF;&#x8BBF;&#x95EE;&#x6027;&#x7ED3;&#x5408;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x662F;&#x6682;&#x65F6;&#x63A7;&#x5236;&#x5206;&#x6790;&#x57FA;&#x56E0;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x6709;&#x6548;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5305;&#x542B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7279;&#x5B9A;&#x5BA3;&#x4F20;&#x5458;/&#x5242;&#x5F00;&#x8F66;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x76F4;&#x63A5;&#x8DDF; miR30 RNAi &#x8A8A;&#x672C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x65B0;&#x9896;&#x8D28;&#x7C92;&#x8F7D;&#x4F53;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5A92;&#x4ECB;&#x5141;&#x8BB8;&#x76F4;&#x63A5;&#x8FFD;&#x67E5;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51FA;&#x73B0;&#x660E;&#x4EAE;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x3002;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x91CD;&#x73B0;&#x9884;&#x671F;&#x7684;&#x5BFB;&#x8DEF;&#x7F3A;&#x9677;&#x540E;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0E;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x6307;&#x5BFC;&#x804C;&#x80FD;&#x6444;&#x52A8;&#x3002;&#x6DF7;&#x5408;&#x524D;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x8F7D;&#x4F53;&#x4F7F;&#x810A;&#x9AD3;&#x72EC;&#x7ACB;&#x5730;&#x533A;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x540C;&#x65F6;&#x6572;&#x3002;&#x8FD9;&#x5C31;&#x5141;&#x8BB8;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5FEB;&#x901F;&#x548C;&#x7CBE;&#x786E;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x8981;&#x68C0;&#x67E5;&#x3002;&#x5728;&#x86CB;&#x7C7B;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5C06; RNAi &#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x8FDB;&#x6B65;&#x4E0D;&#x53EA;&#x663E;&#x8457;&#x589E;&#x5F3A;&#x529F;&#x80FD;&#x57FA;&#x56E0;&#x5206;&#x6790;&#x5728;&#x9E21;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x80FD;&#x9002;&#x5E94;&#x5176;&#x4ED6;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x3002;

&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x3001; &#x53EF;&#x8FFD;&#x6EAF;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x529F;&#x80FD;&#x57FA;&#x56E0;&#x5206;&#x6790;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x795E;&#x7ECF;&#x53D1;&#x80B2;&#x671F;&#x95F4;&#x3002;

Many genes have several, sometimes divergent functions during development. Therefore, timing of gene knockdown for functional analysis during development has to be done with precise temporal control, as loss of a gene's function at early stages prevents its analysis later in development. RNAi, in combination with the accessibility of chicken embryos, is an effective approach for temporally controlled analysis of gene function during neural development. Here, we describe novel plasmid vectors that contain cell type-specific promoters/enhancers to drive the expression of a fluorescent marker, followed directly by a miR30-RNAi transcript for gene silencing. These vectors allow for direct tracing of cells experiencing gene silencing by the bright fluorescence. The level of knockdown is sufficient to reproduce the expected pathfinding defects upon perturbation of genes with known axon guidance functions. Mixing different vectors prior to electroporation enables the simultaneous knockdown of multiple genes in independent regions of the spinal cord. This permits complex cellular and molecular interactions to be examined during development, in a fast and precise manner. The advancements of the in ovo RNAi technique that we describe will not only markedly enhance functional gene analysis in the chicken, but also could be adapted to other organisms in developmental studies.

Cell type specific, traceable gene silencing for functional gene analysis during vertebrate neural development.

Plusieurs g&egrave;nes ont plusieurs fonctions parfois divergentes au cours du d&eacute;veloppement. Par cons&eacute;quent, calendrier de pr&eacute;cipitation de g&egrave;ne pour l&#39;analyse fonctionnelle au cours du d&eacute;veloppement doit &ecirc;tre fait avec un contr&ocirc;le temporel pr&eacute;cis, car la perte de fonction d&#39;un g&egrave;ne &agrave; un stade pr&eacute;coce emp&ecirc;che son analyse plus tard dans le d&eacute;veloppement. Arni, en combinaison avec l&#39;accessibilit&eacute; des embryons de poulet, est une approche efficace pour l&#39;analyse de la fonction du g&egrave;ne temporellement contr&ocirc;l&eacute;e au cours du d&eacute;veloppement neuronal. Nous d&eacute;crivons ici des vecteurs de plasmide roman qui contiennent des cellules sp&eacute;cifiques au type promoteurs/enrichisseurs pour conduire l&#39;expression d&#39;un marqueur fluorescent, suivi directement par une transcription miR30-Arni de silen&ccedil;age g&eacute;nique. Ces vecteurs permettent le suivi direct des cellules &eacute;prouvant de silen&ccedil;age g&eacute;nique par la fluorescence lumineuse. Le niveau de pr&eacute;cipitation est suffisant pour reproduire les d&eacute;fauts de pathfinding attendus sur la perturbation des g&egrave;nes avec des fonctions d&#39;orientation axon connus. M&eacute;lange de diff&eacute;rents vecteurs avant &eacute;lectroporation permet la pr&eacute;cipitation simultan&eacute;e de plusieurs g&egrave;nes dans les r&eacute;gions ind&eacute;pendantes de la moelle &eacute;pini&egrave;re. Cela permet des interactions cellulaires et mol&eacute;culaires complexes &agrave; examiner au cours du d&eacute;veloppement, de mani&egrave;re rapide et pr&eacute;cise. Les progr&egrave;s de l&#39;ovo en technique de RNAi que nous d&eacute;crivons la volont&eacute; non seulement nettement am&eacute;liorent l&#39;analyse fonctionnelle de g&egrave;nes chez le poulet, mais pourraient &eacute;galement &ecirc;tre adapt&eacute;s &agrave; d&#39;autres organismes dans les &eacute;tudes sur le d&eacute;veloppement.

Cellule type g&egrave;ne sp&eacute;cifique et retra&ccedil;able silencieux pour l&#39;analyse du g&egrave;ne fonctionnel au cours du d&eacute;veloppement neuronal des vert&eacute;br&eacute;s.

Viele Gene haben mehrere, manchmal unterschiedlicher Funktionen w&auml;hrend der Entwicklung. Timing der Gen-Knockdown f&uuml;r Funktionalanalysis w&auml;hrend der Entwicklung muss daher mit pr&auml;zise zeitliche Steuerung, erfolgen, da ein Gen Funktionsverlust in fr&uuml;hen Stadien ihrer Analyse sp&auml;ter in Entwicklung verhindert. RNAi, ist in Kombination mit der Zug&auml;nglichkeit von H&uuml;hnerembryos, ein wirksames Konzept f&uuml;r zeitlich gesteuerte Analyse der Genfunktion w&auml;hrend der neuronalen Entwicklung. Hier beschreiben wir neuartige Plasmidvektoren, die Zelle typspezifische Promotoren/Geschmacksverst&auml;rker, um den Ausdruck von fluoreszierenden Marker, gefolgt von einem miR30-RNAi-Abschrift f&uuml;r gen-silencing direkt fahren enthalten. Diese Vektoren erm&ouml;glichen direkte Ablaufverfolgung von Zellen, die gen-silencing durch die helle Fluoreszenz zu erleben. Der Niederschlag ist ausreichend, um die erwarteten Pathfinding-M&auml;ngel bei einer St&ouml;rung der Gene mit bekannten Axon Guidance Funktionen reproduzieren. Mischen von verschiedene Vektoren vor Electroporation erm&ouml;glicht die gleichzeitige Niederschlag von mehreren Genen in unabh&auml;ngige Regionen des R&uuml;ckenmarks. Dies erm&ouml;glicht komplexe zellul&auml;re und Molekulare Interaktionen w&auml;hrend der Entwicklung eine schnelle und pr&auml;zise Weise untersucht werden. Die Zuf&uuml;hrungen der in Ovo RNAi-Technik, dass wir Will beschreiben nicht nur deutlich erh&ouml;hen funktionale Genanalyse in das Huhn, sondern auch auf andere Organismen in der Entwicklungsbiologie Studien angepasst werden konnte.

Handy-Typ spezifischen, nachvollziehbare gen Unterdr&uuml;ckender f&uuml;r funktionale Genanalyse w&auml;hrend vertebrate neuralen Entwicklung.

Molti geni sono diversi, a volte divergenti funzioni durante lo sviluppo. Pertanto, tempi di atterramento del gene per l&#39;analisi funzionale durante lo sviluppo ha da fare con un preciso controllo temporale, come perdita della funzione di un gene in fasi iniziali impedisce l&#39;analisi pi&ugrave; avanti nello sviluppo. RNAi, in combinazione con l&#39;accessibilit&agrave; degli embrioni di pollo, &egrave; un approccio efficace per analisi temporaneamente controllata di funzione del gene durante lo sviluppo neurale. Qui, descriviamo vettori del plasmide romanzo che contengono cellule specifiche per il tipo promotori/Enhancer per guidare l&#39;espressione di un marcatore fluorescente, seguito direttamente da una trascrizione miR30-RNAi per silenziamento genico. Questi vettori consentono analisi diretta delle cellule vivendo silenziamento genico per la fluorescenza brillante. Il livello di atterramento &egrave; sufficiente a riprodurre i difetti di path-finding previsto su perturbazione di geni con funzioni di orientamento noto assone. Mescolando diversi vettori prima di elettroporazione consente l&#39;atterramento simultanea di pi&ugrave; geni nelle regioni indipendenti del midollo spinale. Questo permette di complesse interazioni cellulari e molecolari per essere esaminati durante lo sviluppo, in modo veloce e preciso. Avanzamenti dell&#39;ovo in RNAi tecnica che descriviamo la volont&agrave; non solo notevolmente migliorano analisi del gene funzionale nel pollo, ma potrebbero anche essere adattati ad altri organismi in studi dello sviluppo.

Cella tipo silenziamento genico specifico, tracciabile per analisi del gene funzionale durante lo sviluppo neurale vertebrato.

&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x6642;&#x3005; &#x767A;&#x6563;&#x6A5F;&#x80FD;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x5F8C;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;RNAi&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B7;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x3068;&#x9D8F;&#x80DA;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3067;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306B;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x7279;&#x7570;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;/&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x76F4;&#x63A5;&#x3001;miR30 RNAi &#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3; &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x304C;&#x7D9A;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306F;&#x660E;&#x308B;&#x3044;&#x86CD;&#x5149;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30B8;&#x30FC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6442;&#x52D5;&#x6642;&#x306B;&#x4E88;&#x60F3;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x63A2;&#x7D22;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x518D;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; &#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x524D;&#x6DF7;&#x5408;&#x540C;&#x6642;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x810A;&#x9AC4;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x5730;&#x57DF;&#x3067;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x3001;&#x9AD8;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30FB;&#x5206;&#x5B50;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Ovo &#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x610F;&#x5FD7;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B; RNAi &#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x307F;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x89E3;&#x6790;&#x3001;&#x9D8F;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x304C;&#x767A;&#x9054;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x306B;&#x3082;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3001;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B5;&#x30D6;&#x30EB;&#x306A;&#x7279;&#x5B9A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x6A5F;&#x80FD;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x89E3;&#x6790;&#x7528;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x3002;

&#xB9CE;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294;, &#xBA87;&#xBA87; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB54C;&#xB85C;&#xB294; &#xBD84;&#xAE30; &#xAE30;&#xB2A5;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC190;&#xC2E4; &#xBC29;&#xC9C0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB4B7;&#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758;&#xC758; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. RNAi, &#xB2ED; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xBC95;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC18C;&#xC124; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xBCA1;&#xD130; &#xC140; &#xC720;&#xD615;&#xBCC4; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;/&#xC99D;&#xAC15; &#xD615;&#xAD11; &#xB9C8;&#xCEE4;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; miR30 RNAi &#xC0AC;&#xBCF8;&#xC744; &#xC9C1;&#xC811; &#xB4A4; &#xC2DD; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCA1;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35; &#xBC1D;&#xC740; &#xD615;&#xAD11;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xCD94;&#xC801;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD5C8;&#xC6A9;. &#xCD5C;&#xC800; &#xC218;&#xC900;&#xC740; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC12D; &#xB3D9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC608;&#xC0C1;&#xB41C; pathfinding &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xC7AC;&#xD604; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xBCA1;&#xD130; electroporation &#xC804;&#xC5D0; &#xD63C;&#xD569; &#xCC99;&#xC218;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xAC80;&#xC0AC;&#xD560; &#xC218; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC774; &#xACE0; &#xBD84;&#xC790; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DC;&#xB0B4; &#xBE44;&#xCF1C; RNAi &#xAE30;&#xC220; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC9C0; &#xAE30;&#xC220; &#xBC1C;&#xC804;&#xB9CC; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xAC8C; &#xD558;&#xC9C0; &#xB2ED;&#xACE0;&#xAE30;, &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC801;&#xC751; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC140; &#xC720;&#xD615; &#xD2B9;&#xC815; &#xCD94;&#xC801; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC99;&#xCD94; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;.

Muchos genes tienen varios, a veces divergentes funciones durante el desarrollo. Por lo tanto, tiempo de ca&iacute;da del gene para el an&aacute;lisis funcional durante el desarrollo tiene que hacerse con el control preciso del temporal, como previene la p&eacute;rdida de funci&oacute;n de un gen en las primeras etapas de su an&aacute;lisis m&aacute;s adelante en el desarrollo. Arni, en combinaci&oacute;n con la accesibilidad de embriones de pollo, es un enfoque eficaz para el an&aacute;lisis temporal controlada de funciones de los genes durante el desarrollo neuronal. Aqu&iacute;, describimos vectores nuevos pl&aacute;smidos que contienen c&eacute;lulas espec&iacute;ficas del tipo promotores/potenciadores para impulsar la expresi&oacute;n de un marcador fluorescente, seguido directamente por una transcripci&oacute;n de miR30-RNAi para silenciamiento g&eacute;nico. Estos vectores permitan el seguimiento directo de las c&eacute;lulas que experimentan el silenciamiento del gen de la fluorescencia brillante. El nivel de ca&iacute;da es suficiente para reproducir los defectos de pathfinding esperado sobre la perturbaci&oacute;n de genes con funciones de direcci&oacute;n conocida del ax&oacute;n. Mezcla de diferentes vectores antes de electroporaci&oacute;n permite la ca&iacute;da simult&aacute;nea de m&uacute;ltiples genes en regiones independientes de la m&eacute;dula espinal. Esto permite complejas interacciones celulares y moleculares que se examinar&aacute;n durante el desarrollo, en forma r&aacute;pida y precisa. Los avances de la ovo en t&eacute;cnica de ARNi que describimos la voluntad no s&oacute;lo marcado mejoran el an&aacute;lisis funcional del gen en el pollo, pero tambi&eacute;n podr&iacute;an adaptarse a otros organismos en estudios del desarrollo.

Celular tipo silenciamiento de genes espec&iacute;ficos, trazable para el an&aacute;lisis funcional del gen durante el desarrollo neural de vertebrados.

&#x5206;&#x6CCC;&#x7684; morphogens&#xFF0C;&#x5982;&#x58F0;&#x6CE2;&#x523A;&#x732C; (Shh) Wnt &#x548C; TGF&beta;/Bmp&#xFF0C;&#x6E10;&#x53D8;&#x7ECF;&#x5178;&#x5DF2;&#x8868;&#x660E;&#x63A7;&#x5236;&#x65E9;&#x671F;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x65B9;&#x9762;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x547D;&#x8FD0;&#x51B3;&#x5B9A;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5206;&#x5B50;&#x4E5F;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x91CD;&#x8981;&#x548C;&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x5B88;&#x5728;&#x7A0D;&#x540E;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6839;&#x636E;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5206;&#x5B50;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F15;&#x8D77;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x539F;&#x5B50;&#x6838;&#xFF0C;&#x6216;&#x6216;&#x8005;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5728;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x542F;&#x53D1;&#x6027;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5730;&#x65B9;&#x548C;&#x5FEB;&#x901F;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x5618;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x66FF;&#x4EE3; hiv &#x611F;&#x67D3;&#x6291;&#x5236;&#x7269;&#x6216;&#x53EA;&#x662F;&#x7531;&#x5176;&quot;&#x7ECF;&#x5178;&quot;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x9002;&#x5E94;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x53CA;&#x5176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#xFF0C;Shh &#x4E0D;&#x4F1A;&#x4E0D;&#x5355;&#x72EC;&#x884C;&#x52A8;&#xFF0C;&#x800C;&#x662F;&#x5728;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6; morphogens&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F; Wnts &#x7684;&#x97F3;&#x4E50;&#x4F1A;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x68C0;&#x8BA8;&#x63D0;&#x4F9B;&#x54EA;&#x4E9B; Shh &#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x6982;&#x8FF0;&#x4FE1;&#x53F7; Wnts &#x8C03;&#x89E3;&#x65E0;&#x6570;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x7535;&#x8DEF;&#x5F62;&#x6210;&#x534F;&#x540C;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;

&#x97F3;&#x901F;&#x523A;&#x732C;&#x795E;&#x7ECF;&#x7535;&#x8DEF;&#x5F62;&#x6210;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x8C03;&#x8282; Wnt &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;

Gradients of secreted morphogens, such as Sonic hedgehog (Shh), Wnt, and TGFÎ²/Bmp, have classically been shown to control many aspects of early development by regulating cell proliferation and determining cell fate. However, recent studies demonstrate that these molecules also play important and evolutionarily conserved roles in later aspects of neural development. Depending on the context, these molecules can elicit gene transcription in the nucleus, or alternatively can provide instructive signals at the growth cone that induce local and rapid changes in cytoskeletal organization. Shh can activate different cellular transduction pathways via its binding to alternative coreceptor complexes or simply by adaptation of its "classical" signaling pathway. However, in most of its activities during neural development, Shh does not act alone but rather in concert with other morphogens, particularly the Wnts. This review provides an overview of the mechanisms by which Shh signaling acts in concert with Wnts to mediate a myriad of cellular processes that are required for neural circuit formation.

Sonic Hedgehog regulates Wnt activity during neural circuit formation.

Des gradients de morphog&egrave;nes s&eacute;cr&eacute;t&eacute;es, tels que Sonic hedgehog (Shh), Wnt et TGF&beta;/Bmp, classiquement montrent pour contr&ocirc;ler de nombreux aspects du d&eacute;veloppement pr&eacute;coce de r&eacute;guler la prolif&eacute;ration cellulaire et le sort de cellule d&eacute;terminant. Toutefois, des &eacute;tudes r&eacute;centes d&eacute;montrent que ces mol&eacute;cules jouent aussi importants et &eacute;volutivement conserv&eacute;s des r&ocirc;les dans des aspects plus tard du d&eacute;veloppement neuronal. Selon le contexte, ces mol&eacute;cules peuvent induire la transcription du g&egrave;ne dans le noyau, ou alternativement peuvent fournir des signaux instructifs sur le c&ocirc;ne de croissance qui induisent des changements les et rapides dans l&#39;organisation du cytosquelette. SHH peut activer des voies de transduction cellulaire diff&eacute;rent via sa liaison aux complexes cor&eacute;cepteur alternatives ou simplement par l&#39;adaptation de sa voie de signalisation &laquo; classique &raquo;. Toutefois, dans la plupart de ses activit&eacute;s au cours du d&eacute;veloppement neuronal, Shh n&#39;agit pas seul mais plut&ocirc;t de concert avec les autres morphog&egrave;nes, particuli&egrave;rement le Wnts. Cet examen donne un aper&ccedil;u des m&eacute;canismes par lequel Shh signalisation actes en concert avec Wnts d&#39;arbitrer une myriade de processus cellulaires qui sont requises pour la formation des circuits neuronaux.

Sonic Hedgehog r&eacute;glemente l&#39;activit&eacute; de Wnt au cours de la formation des circuits neuronaux.

Steigungen von sezernierte Morphogens, wie Sonic Hedgehog (Shh), Wnt und TGF&beta;/Bmp, klassisch nachweislich viele Aspekte der fr&uuml;hen Entwicklung Steuern durch regulierende Zellproliferation und entscheidende Zelle Schicksal. Neuere Studien zeigen jedoch, dass diese Molek&uuml;le auch wichtige spielen und evolution&auml;r Rollen in sp&auml;teren Aspekte der neuronalen Entwicklung konserviert. Je nach Kontext k&ouml;nnen diese Molek&uuml;le gen-Transkription im Zellkern entlocken k&ouml;nnen, oder alternativ lehrreich Signale an den Wachstumskegel, die lokale und rasche Ver&auml;nderungen im Zytoskelett Organisation herbeif&uuml;hren. SHH k&ouml;nnen verschiedene Zellul&auml;re Signaltransduktion Wege &uuml;ber seine Bindung alternative Coreceptor-komplexen oder einfach durch Anpassung der seine &quot;klassischen&quot; Signalweg aktivieren. Jedoch in den meisten seiner T&auml;tigkeiten w&auml;hrend der neuronalen Entwicklung handelt Shh alleine sondern im Konzert mit anderen Morphogens, besonders die Wnts nicht. Diesen Bericht bietet einen &Uuml;berblick &uuml;ber die Mechanismen, durch welche Shh Signalisierung Rechtsakte gemeinsam mit Wnts eine Vielzahl zellul&auml;rer Prozesse zu vermitteln, die f&uuml;r Bildung Neuronaler Schaltkreis.

Sonic Hedgehog regelt Wnt T&auml;tigkeit bei neuralen Schaltkreis Bildung.

Gradienti di morfogeni secreta, come Sonic hedgehog (Shh), Wnt e TGF&beta;/Bmp, hanno classicamente dimostrati di controllare molti aspetti dello sviluppo precoce di regolazione della proliferazione cellulare e destino delle cellule determinante. Tuttavia, recenti studi dimostrano che queste molecole svolgono anche importanti ed evolutivamente conservano ruoli nei successivi aspetti dello sviluppo neurale. A seconda del contesto, queste molecole possono suscitare la trascrizione del gene nel nucleo, o in alternativa in grado di fornire segnali istruttivi presso il cono di crescita che inducono locali e rapidi cambiamenti nell&#39;organizzazione del citoscheletro. SHH pu&ograve; attivare vie di trasduzione del cellulare diverso tramite la sua associazione a complessi coreceptor alternativo o semplicemente da un adattamento del suo &quot;classica&quot; via di segnalazione. Tuttavia, nella maggior parte delle sue attivit&agrave; durante lo sviluppo neurale, Shh non agiscono da soli ma piuttosto in concerto con altri morfogeni, specialmente il Wnts. Questa recensione fornisce una panoramica dei meccanismi da cui Shh agisce in concerto con Wnts per mediare una miriade di processi cellulari che sono necessari per la formazione di circuiti neurali di segnalazione.

Sonic Hedgehog regola l&#39;attivit&agrave; di Wnt durante la formazione del circuito neurale.

&#x30BD;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0; (Shh) Wnt &#x3068; TGF&beta;/Bmp &#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x30E2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A9;&#x30B2;&#x30F3;&#x52FE;&#x914D;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x904B;&#x547D;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x518D;&#x751F;&#x3057;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x9762;&#x3067;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306F;&#x6838;&#x5185;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x3068;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x6709;&#x76CA;&#x306A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Shh &#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x4EE3;&#x66FF;&#x30B3;&#x30EC;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x932F;&#x4F53;&#x306B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5358;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x300C;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;&#x300D;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Shh &#x5358;&#x72EC;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30C8;&#x4ED6;&#x30E2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A9;&#x30B2;&#x30F3;&#x3001;&#x7279;&#x306B; Wnts &#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;&#x884C;&#x70BA;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x7121;&#x6570;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x56DE;&#x8DEF;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B; Wnts &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3069;&#x306E; Shh &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x6982;&#x8981;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BD;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0; Wnt &#x6D3B;&#x52D5;&#x4E2D;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x56DE;&#x8DEF;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC18C;&#xB2C9; &#xB354; &#xD5E4;&#xC9C0;&#xD638;&#xADF8; (&#xC26C;), Wnt, &#xBC0F; TGF&beta;/Bmp &#xB4F1; &#xBE44; morphogens&#xC758; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8; &#xACE0;&#xC804;&#xC801;&#xC778; &#xADDC;&#xC81C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC6B4;&#xBA85; &#xACB0;&#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xCE21;&#xBA74;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC785;&#xC99D;&#xC774; &#xBD84;&#xC790;&#xB3C4; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xB098;&#xC911; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;. &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790;&#xB294; &#xD575;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC; &#xC720;&#xB3C4; &#xC218; &#xB610;&#xB294; &#xB610;&#xB294; cytoskeletal &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xBC0F; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xCD94;&#xC5D0; &#xC720;&#xC775;&#xD55C; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC26C;&#xC774; &#xC787;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB300;&#xCCB4; coreceptor &#xB2E8;&#xC9C0; &#xB610;&#xB294; &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xAC8C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &quot;&#xD074;&#xB798;&#xC2DD;&quot; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC801;&#xC751;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC; &#xC804;&#xB2EC; &#xACBD;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC740;&#xC5D0; &#xC26C;&#xC774; &#xC787; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD63C;&#xC790; &#xB2E4;&#xB978; morphogens, &#xD2B9;&#xD788; Wnts&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xCF58;&#xC11C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC624;&#xD788;&#xB824;. &#xC774; &#xAC80;&#xD1A0; &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1; &#xC911;&#xC7AC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD68C;&#xB85C; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xBB34;&#xC218; &#xD55C; Wnts&#xC640; &#xD611;&#xB825; &#xD558;&#xB294; &#xD589;&#xC704;&#xB294; &#xC26C;&#xC774; &#xC787; &#xD558; &#xC5EC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xAC1C;&#xC694;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC18C;&#xB2C9; &#xD5E4; &#xC9C0; &#xD638; &#xADF8; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD68C;&#xB85C; &#xD615;&#xC131; &#xB3D9;&#xC548; Wnt &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;.

Gradientes de morf&oacute;genos secretada, como Sonic hedgehog (Shh), Wnt y TGF&beta;/Bmp, cl&aacute;sico han mostrado para controlar muchos aspectos del desarrollo temprano por regular la proliferaci&oacute;n celular y determinante sino de la c&eacute;lula. Sin embargo, estudios recientes demuestran que estas mol&eacute;culas tambi&eacute;n juegan importantes y evolutivamente conservaron papeles en m&aacute;s aspectos de desarrollo neuronal. Dependiendo del contexto, estas mol&eacute;culas pueden provocar la transcripci&oacute;n del gen en el n&uacute;cleo, o alternativamente pueden proporcionar se&ntilde;ales instructivas en el cono de crecimiento que inducen cambios locales y r&aacute;pidos en la organizaci&oacute;n del citoesqueleto. SHH puede activar v&iacute;as de transducci&oacute;n celular diferentes mediante su uni&oacute;n a complejos coreceptor alternativos o simplemente por la adaptaci&oacute;n de su v&iacute;a de se&ntilde;alizaci&oacute;n &quot;cl&aacute;sica&quot;. Sin embargo, en la mayor&iacute;a de sus actividades durante el desarrollo neural, Shh no actuar solos sino en concierto con otros morf&oacute;genos, particularmente el Wnts. Esta revisi&oacute;n proporciona un Resumen de los mecanismos por los cual Shh act&uacute;a en concierto con Wnts para mediar una mir&iacute;ada de procesos celulares que se requieren para la formaci&oacute;n del circuito neural de la se&ntilde;alizaci&oacute;n.

Nicole H. Wilson

Institute of Molecular Life Sciences

University of Zurich

In ovo Electroporation of miRNA-based Plasmids in the Developing Neural Tube and Assessment of Phenotypes by DiI Injection in Open-book Preparations

Nicole H. Wilson

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University of Zurich

In ovo Electroporation of miRNA-based Plasmids in the Developing Neural Tube and Assessment of Phenotypes by DiI Injection in Open-book Preparations

Institute of Molecular Life Sciences