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Microfluidic Chip Fabrication and Method to Detect Influenza

Fast  and effective diagnostics play an important role in controlling infectious  disease by enabling effective patient management and treatment. Here, we ...

Boston University 

J&eacute;junostomie tubes peuvent &ecirc;tre plac&eacute;s par voie endoscopique par gastrostomie percutan&eacute;e avec extension j&eacute;junale (PEG-J) ou en direct j&eacute;junostomie percutan&eacute;e. R&eacute;trospectivement, ces 2 techniques ont &eacute;t&eacute; compar&eacute;es chez les patients n&eacute;cessitant d&#39;alimentation j&eacute;junale &agrave; long terme.

Comparaison directe j&eacute;junostomie endoscopique percutan&eacute;e et PEG avec extension j&eacute;junale.

Tubi Digiunostomia possono essere posizionate endoscopicamente mediante gastrostomia percutanea con estensione digiunale (PEG-J) o da Digiunostomia percutanea diretta. Queste 2 tecniche sono state confrontate a posteriori in pazienti che richiedono alimentazione digiunale a lungo termine.

Confronto diretto Digiunostomia percutanea endoscopica e PEG con estensione digiunale.

&#x543B;&#x5408;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x306F;&#x3001;&#x7D4C;&#x76AE;&#x7684;&#x80C3;&#x763B;&#x7A7A;&#x8178;&#x62E1;&#x5F35;&#x5B50; (PEG J) &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x7D4C;&#x76AE;&#x7684;&#x543B;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5185;&#x8996;&#x93E1;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089; 2 &#x306E;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x306F;&#x9061;&#x53CA;&#x7684;&#x7A7A;&#x8178;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x4F9B;&#x7D66;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x60A3;&#x8005;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x7D4C;&#x76AE;&#x7684;&#x5185;&#x8996;&#x93E1;&#x304A;&#x3088;&#x3073; PEG &#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7A7A;&#x8178;&#x62E1;&#x5F35;&#x5B50;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3002;

&#xACBD; &#xD53C; &#xC801;&#xC778; gastrostomy jejunal &#xD655;&#xC7A5; (&#xD398;&#xADF8; &#xC81C;) &#xB610;&#xB294; &#xC9C1;&#xC811; &#xACBD; &#xD53C; &#xC801;&#xC778; jejunostomy&#xC5D0; &#xC758;&#xD558;&#xC5EC; &#xB77C;&#xACE0; Jejunostomy &#xD29C;&#xBE0C;&#xB97C; &#xC0BD;&#xC785;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; 2 &#xAE30;&#xC220;&#xC740; &#xC18C;&#xAE09; &#xC7A5;&#xAE30; jejunal &#xBA39;&#xC774; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44;&#xAD50; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;.

Jejunal &#xD655;&#xC7A5;&#xBA85;&#xC774; &#xC9C1;&#xC811; &#xACBD; &#xD53C; &#xC801;&#xC778; &#xB0B4; &#xC2DC;&#xACBD; jejunostomy&#xC640; &#xBABB;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;.

Tubos de yeyunostom&iacute;a pueden colocarse endosc&oacute;picamente mediante gastrostom&iacute;a percut&aacute;nea con extensi&oacute;n yeyunal (PEG-J) o por yeyunostom&iacute;a percut&aacute;nea directa. Estas 2 t&eacute;cnicas se compararon retrospectivo en pacientes que requieren a largo plazo que alimentaci&oacute;n yeyunal.

Comparaci&oacute;n de yeyunostom&iacute;a endosc&oacute;pica percut&aacute;nea directa y PEG con extensi&oacute;n yeyunal.

&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ECF;&#x76AE;&#x80C3;&#x9020;&#x7618;&#x672F;&#x7A7A;&#x80A0;&#x6269;&#x5C55;&#x540D; (PEG-J) &#x6216;&#x901A;&#x8FC7;&#x76F4;&#x63A5;&#x7ECF;&#x76AE;&#x7A7A;&#x80A0;&#x9020;&#x53E3;&#x5185;&#x955C;&#x4E0B;&#x653E;&#x7F6E;&#x7A7A;&#x80A0;&#x9020;&#x53E3;&#x7BA1;&#x3002;&#x8FFD;&#x6EAF;&#x9700;&#x8981;&#x957F;&#x671F;&#x7A7A;&#x80A0;&#x5582;&#x517B;&#x7684;&#x75C5;&#x4EBA;&#x4E2D;&#x6BD4;&#x8F83;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B; 2 &#x6280;&#x672F;&#x3002;

&#x76F4;&#x63A5;&#x7ECF;&#x76AE;&#x5185;&#x955C;&#x4E0B;&#x7A7A;&#x80A0;&#x9020;&#x53E3;&#x53CA;&#x805A;&#x4E59;&#x4E8C;&#x9187;&#x4E0E;&#x7A7A;&#x80A0;&#x6269;&#x5C55;&#x540D;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;

Jejunostomy tubes can be placed endoscopically by means of percutaneous gastrostomy with jejunal extension (PEG-J) or by direct percutaneous jejunostomy. These 2 techniques were retrospectively compared in patients requiring long-term jejunal feeding.

Comparison of direct percutaneous endoscopic jejunostomy and PEG with jejunal extension.

&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6C14;&#x7BA1;&#x652F;&#x6C14;&#x7BA1;&#x963B;&#x585E;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x7EB5;&#x9694;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624;&#x662F;&#x4E0D;&#x51E1;&#x7684;&#x548C;&#x6076;&#x6027;&#x6C14;&#x7BA1;&#x98DF;&#x7BA1;&#x7618;&#x7684;&#x7EB5;&#x9694;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x4E2D;&#x662F;&#x7F55;&#x89C1;&#x7684;&#x3002;&#x6076;&#x6027;&#x98DF;&#x7BA1;&#x6C14;&#x7BA1;&#x7618;&#x662F;&#x53D1;&#x51FA;&#x97F3;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x548C;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E00;&#x4E2A;&#x75C5;&#x4EBA;&#x9020;&#x6210;&#x6C14;&#x7BA1;&#x963B;&#x585E;&#x3001; &#x98DF;&#x7BA1;&#x6897;&#x963B;&#x548C;&#x88AB;&#x6210;&#x529F;&#x5730;&#x4E0E;&#x5408;&#x5E76;&#x6C14;&#x9053;&#x548C;&#x98DF;&#x7BA1;&#x652F;&#x67B6;&#x7F6E;&#x5165;&#x672F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7F13;&#x89E3;&#x7684;&#x6C14;&#x7BA1;&#x98DF;&#x7BA1;&#x7618;&#x7684;&#x7EB5;&#x9694;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624;&#x6D78;&#x6DA6;&#x3002;

&#x8054;&#x5408;&#x6C14;&#x7BA1;&#x548C;&#x98DF;&#x7BA1;&#x652F;&#x67B6;&#x7F6E;&#x5165;&#x6C14;&#x7BA1;&#x98DF;&#x7BA1;&#x7EB5;&#x9694;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624;&#x7684;&#x75C7;&#x72B6;&#x7F13;&#x89E3;&#x3002;

Mediastinal lymphoma as a cause of tracheobronchial obstruction is uncommon, and a malignant tracheoesophageal fistula in the setting of mediastinal lymphoma is rare. Malignant tracheoesophageal fistulas are associated with pronounced morbidity and mortality. We describe a patient with mediastinal lymphomatous infiltration resulting in tracheal obstruction, esophageal obstruction, and tracheoesophageal fistula that were successfully palliated with combined airway and esophageal stent placement.

Combined tracheal and esophageal stenting for palliation of tracheoesophageal symptoms from mediastinal lymphoma.

Lymphomes m&eacute;diastinaux comme une cause d&#39;obstruction trach&eacute;o-bronchique est rare, et une fistule trach&eacute;o-oesophagienne maligne dans le cadre des lymphomes m&eacute;diastinaux est rare. Fistule trach&eacute;o-oesophagienne maligne est associ&eacute;es &agrave; forte morbidit&eacute; et de mortalit&eacute;. Nous d&eacute;crivons un patient avec une infiltration m&eacute;diastinale lymphomateuses entra&icirc;nant une obstruction trach&eacute;ale, obstruction oesophagienne et fistule trach&eacute;o-oesophagienne qui ont palli&eacute; avec succ&egrave;s avec des voies a&eacute;riennes combin&eacute;es et oesophagienne mise en place.

Combin&eacute; stenting trach&eacute;al et oesophagienne pour soins palliatifs trach&eacute;o sympt&ocirc;mes du lymphome m&eacute;diastinal.

Linfoma mediastinico come causa di ostruzione tracheo-bronchiale &egrave; raro, e una fistola tracheo-esofagea maligna nella cornice del linfoma mediastinico &egrave; rara. Fistole tracheo maligne sono associate con pronunciata morbilit&agrave; e mortalit&agrave;. Descriviamo un paziente con infiltrazione lymphomatous mediastino con conseguente ostruzione tracheale, ostruzione esofagea e fistola tracheo-esofagea che con successo sono state alleviate con combinata delle vie aeree e posizionamento di stent esofageo.

Combinato stenting esofageo e trachea per la palliazione dei sintomi tracheoesofagea da linfoma mediastinico.

&#x7E26;&#x9694;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x816B;&#x6C17;&#x7BA1;&#x30FB;&#x6C17;&#x7BA1;&#x652F;&#x9589;&#x585E;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x7E26;&#x9694;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x816B;&#x3067;&#x60AA;&#x6027;&#x6C17;&#x7BA1;&#x98DF;&#x9053;&#x763B;&#x306F;&#x307E;&#x308C;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x60AA;&#x6027;&#x6C17;&#x7BA1;&#x98DF;&#x9053;&#x763B;&#x306F;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x7F79;&#x60A3;&#x7387;&#x3068;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x60A3;&#x8005;&#x3068;&#x7E26;&#x9694;&#x30EA; &#x30F3; &#x30D1; lymphomatous &#x6D78;&#x6F64;&#x3067;&#x6C17;&#x7BA1;&#x9589;&#x585E;&#x3001;&#x98DF;&#x9053;&#x9589;&#x585E;&#x3068;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6C17;&#x9053;&#x3068;&#x98DF;&#x9053;&#x30B9;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C8;&#x5148;&#x7AEF;&#x3044;&#x305F;&#x6C17;&#x7BA1;&#x98DF;&#x9053;&#x763B;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7E26;&#x9694;&#x578B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x816B;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6C17;&#x7BA1;&#x98DF;&#x9053;&#x75C7;&#x72B6;&#x306E;&#x7DE9;&#x548C;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6C17;&#x7BA1;&#x3068;&#x98DF;&#x9053;&#x30B9;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C8;&#x7559;&#x7F6E;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Tracheobronchial &#xC7A5;&#xC560;&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; mediastinal &#xB9BC;&#xD504; &#xC885; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778;, &#xC774;&#xBA70; mediastinal &#xB9BC;&#xD504; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC545;&#xC131; tracheoesophageal &#xB204; &#xAD00;&#xC740; &#xB4DC;&#xBB3C;&#xB2E4;. &#xC545;&#xC131; tracheoesophageal &#xB204; &#xAD00; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xBCD1; &#xC801; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC640; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; mediastinal lymphomatous &#xCE68;&#xD22C; tracheal &#xBC29;&#xD574;, &#xC2DD;&#xB3C4; &#xBC29;&#xD574;&#xC640; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xAE30;&#xB3C4;&#xC640; &#xC2DD;&#xB3C4; &#xD150;&#xD2B8; &#xBC30;&#xCE58; palliated &#xD588;&#xB2E4; tracheoesophageal &#xB204; &#xAD00; &#xACB0;&#xACFC;&#xC640; &#xD658;&#xC790;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Mediastinal &#xB9BC;&#xD504; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; tracheoesophageal &#xC99D;&#xC0C1;&#xC758; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801; &#xC644;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; tracheal &#xBC0F; &#xC2DD;&#xB3C4; stenting&#xC744; &#xACB0;&#xD569;.

Linfoma mediast&iacute;nico como causa de obstrucci&oacute;n traqueobronquial es infrecuente, y una f&iacute;stula traqueoesof&aacute;gica maligna en el ajuste del linfoma mediast&iacute;nico es rara. F&iacute;stulas traqueoesof&aacute;gicas malignas se asocian a morbimortalidad pronunciadas. Describimos a un paciente con la infiltraci&oacute;n linfomatosa mediast&iacute;nica dando por resultado la obstrucci&oacute;n traqueal, obstrucci&oacute;n esof&aacute;gica y f&iacute;stula traqueoesof&aacute;gica que fueron paliados con &eacute;xito con el combinado de las v&iacute;as respiratorias y colocaci&oacute;n de stent esof&aacute;gico.

Combinado el stent traqueal y esof&aacute;gico para el alivio de s&iacute;ntomas traqueoesof&aacute;gicas de linfoma mediast&iacute;nico.

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Diarrhea and weight loss are common after pancreaticoduodenectomy, and arise from varying etiologies. An uncommon but important cause for these symptoms is the postoperative activation of silent celiac disease. We sought to describe the clinical presentation, diagnosis, treatment, and follow-up of a series of patients with silent celiac disease unmasked after pancreaticoduodenectomy, and to summarize the existing case reports on this association. A search of the electronic medical record at our institution was performed cross-referencing terms associated with celiac disease and pancreaticoduodenectomy for the years 1976-2004. Cases were then reviewed to ensure that no signs or symptoms attributable to celiac disease were present preoperatively. Seven patients were identified; five were male, and the median age was 56. All patients underwent surgery for a presumed pancreatic or ampullary malignancy. Six patients developed symptoms ultimately attributable to celiac disease immediately after pancreaticoduodenectomy, most commonly diarrhea and weight loss. A single patient had silent celiac disease incidentally diagnosed at pancreaticoduodenectomy that remained silent postoperatively on an unrestricted diet. Symptoms completely resolved in 4 of 6 patients after initiation of a gluten-free diet, with partial improvement in the remaining 2 patients. The median delay from pancreaticoduodenectomy to diagnosis of celiac disease in the 6 symptomatic patients was 6 months. Clinicians should consider celiac disease as a potential diagnosis in patients with failure to thrive and diarrhea after pancreaticoduodenectomy. This entity is uncommon, but may be under-recognized. The underlying mechanism may relate to an increased antigenic load secondary to postsurgical changes in intestinal physiology.

Silent celiac disease activated by pancreaticoduodenectomy.

Diarrh&eacute;e et perte de poids sont fr&eacute;quentes apr&egrave;s pancreaticoduodenectomy et proviennent de diff&eacute;rentes &eacute;tiologies. Une cause rare mais importante pour ces sympt&ocirc;mes est l&#39;activation postop&eacute;ratoire de maladie c&oelig;liaque silencieuse. Nous avons cherch&eacute; &agrave; d&eacute;crire la pr&eacute;sentation clinique, diagnostic, traitement et suivi d&#39;une s&eacute;rie de patients avec la maladie coeliaque silencieuse d&eacute;masqu&eacute;e apr&egrave;s pancreaticoduodenectomy et pour r&eacute;sumer les rapports de cas existants sur cette association. Une recherche du dossier m&eacute;dical &eacute;lectronique &agrave; notre institution s&#39;est d&eacute;roul&eacute;e recoupement des termes associ&eacute;s &agrave; la maladie coeliaque et pancreaticoduodenectomy pour les ann&eacute;es 1976-2004. Puis, cas ont &eacute;t&eacute; examin&eacute;s pour s&#39;assurer qu&#39;aucun signe ou sympt&ocirc;me attribuables &agrave; la maladie coeliaque n&#39;&eacute;tait pr&eacute;sents avant l&#39;op&eacute;ration. Sept patients ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s ; cinq &eacute;taient des hommes, et l&#39;&acirc;ge m&eacute;dian &eacute;tait de 56. Tous les patients ont subi une intervention chirurgicale pour un cancer du pancr&eacute;as ou ampullaire pr&eacute;sum&eacute;e. Six patients d&eacute;velopp&eacute;s les sympt&ocirc;mes finalement attribuable &agrave; la maladie coeliaque maladie imm&eacute;diatement apr&egrave;s pancreaticoduodenectomy, plus souvent diarrh&eacute;e et perte de poids. Un seul patient a la maladie coeliaque silencieuse diagnostiqu&eacute;e incidemment &agrave; pancreaticoduodenectomy qui est rest&eacute; silencieux apr&egrave;s l&#39;op&eacute;ration sur une alimentation sans restriction. Sympt&ocirc;mes compl&egrave;tement r&eacute;solues dans 4 des 6 patients apr&egrave;s le d&eacute;but d&#39;un r&eacute;gime sans gluten, avec une am&eacute;lioration partielle dans 2 autres patients. Le d&eacute;lai m&eacute;dian de pancreaticoduodenectomy au diagnostic de la maladie coeliaque chez les patients symptomatiques 6 a 6 mois. Cliniciens devraient consid&eacute;rer la maladie coeliaque comme un diagnostic potentiel chez les patients atteints de retard de croissance et de la diarrh&eacute;e apr&egrave;s pancreaticoduodenectomy. Cette entit&eacute; est rare, mais peut &ecirc;tre mal reconnu. Le m&eacute;canisme sous-jacent peut se rapporter &agrave; une charge accrue d&#39;antig&eacute;nique secondaire &agrave; postchirurgicale changements dans la physiologie intestinale.

Maladie coeliaque silencieuse activ&eacute;e par pancreaticoduodenectomy.

Diarrea e perdita di peso sono comune dopo pancreaticoduodenectomy e derivano da eziologie diverse. Una causa rara ma importante per questi sintomi &egrave; l&#39;attivazione post-operatoria della malattia celiaca Silente. Abbiamo cercato di descrivere la presentazione clinica, diagnosi, trattamento e follow-up di una serie di pazienti con malattia celiaca silenziosa smascherata dopo pancreaticoduodenectomy e per riassumere il case report esistenti su questa associazione. &Egrave; stata eseguita una ricerca di electronic medical record presso la nostra istituzione i riferimenti incrociati termini associati con la malattia celiaca e pancreaticoduodenectomy per gli anni 1976-2004. Casi poi sono stati riesaminati per assicurare che nessun segni o sintomi attribuibili alla malattia celiaca erano presenti preoperatoria. Sono stati identificati sette pazienti; cinque erano maschi, e l&#39;et&agrave; mediana era di 56. Tutti i pazienti sub&igrave; un intervento chirurgico per un presunto tumore maligno al pancreas o ampolla. Sei pazienti sviluppati sintomi in definitiva imputabile alla celiachia malattia subito dopo pancreaticoduodenectomy, pi&ugrave; comunemente diarrea e perdita di peso. Un singolo paziente era silenziosa malattia celiaca diagnosticata incidentalmente a pancreaticoduodenectomy che rimase in silenzio dopo l&#39;intervento su una dieta senza restrizione. Sintomi completamente risolti in 4 dei 6 pazienti dopo l&#39;avvio di una dieta priva di glutine, con parziale miglioramento nei restanti 2 pazienti. Il ritardo mediano da pancreaticoduodenectomy alla diagnosi della malattia celiaca nei pazienti sintomatici 6 era 6 mesi. I clinici dovrebbero considerare la malattia celiaca come una potenziale diagnosi nei pazienti con difetto di crescita e diarrea dopo pancreaticoduodenectomy. Questa entit&agrave; &egrave; rara, ma pu&ograve; essere sotto-riconosciuto. Il meccanismo sottostante pu&ograve; riferirsi a un aumento del carico antigenico secondario post-chirurgica cambiamenti nella fisiologia intestinale.

Malattia celiaca silenziosa attivata da pancreaticoduodenectomy.

&#x4E0B;&#x75E2;&#x3068;&#x4F53;&#x91CD;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306F;&#x81B5;&#x982D;&#x5341;&#x4E8C;&#x6307;&#x8178;&#x5207;&#x9664;&#x5F8C;&#x5171;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x304B;&#x3089;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x75C5;&#x56E0;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x75C7;&#x72B6;&#x306F;&#x73CD;&#x3057;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x539F;&#x56E0;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8; &#x30BB;&#x30EA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30AF;&#x75C5;&#x306E;&#x8853;&#x5F8C;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x81B5;&#x982D;&#x5341;&#x4E8C;&#x6307;&#x8178;&#x5207;&#x9664;&#x5F8C;&#x306E;&#x30DE;&#x30B9;&#x30AF; &#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8; &#x30BB;&#x30EA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30AF;&#x75C5;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x81E8;&#x5E8A;&#x75C7;&#x72B6;&#x3001;&#x8A3A;&#x65AD;&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E00;&#x9023;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30ED;&#x30FC; &#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9; &#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x8981;&#x7D04;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x6C42;&#x3081;&#x305F;&#x3002;&#x5F53;&#x9662;&#x3067;&#x306E;&#x96FB;&#x5B50;&#x30AB;&#x30EB;&#x30C6;&#x306E;&#x691C;&#x7D22;&#x30BB;&#x30EA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30AF;&#x75C5;&#x3068;&#x81B5;&#x982D;&#x5341;&#x4E8C;&#x6307;&#x8178;&#x5207;&#x9664; 1976&#x5E74;-2004 &#x5E74;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x7528;&#x8A9E;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x53C2;&#x7167;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4F8B;&#x306F;&#x3001;&#x5146;&#x5019;&#x3084;&#x75C7;&#x72B6;&#x30BB;&#x30EA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30AF;&#x75C5;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x8853;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x5834;&#x5408;&#x3092;&#x78BA;&#x4FDD;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;.7 &#x4EBA;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x304C;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;5 &#x7537;&#x6027;&#x3068;&#x5E74;&#x9F62;&#x306E;&#x4E2D;&#x592E;&#x5024;&#x306F; 56 &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x306F;&#x63A8;&#x5B9A;&#x81B5;&#x81D3;&#x3084;&#x5341;&#x4E8C;&#x6307;&#x8178;&#x4E73;&#x982D;&#x306E;&#x60AA;&#x6027;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x624B;&#x8853;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x3002;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F; 6 &#x4EBA;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x75C7;&#x72B6;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x8179;&#x8154;&#x75BE;&#x60A3;&#x76F4;&#x5F8C;&#x81B5;&#x982D;&#x5341;&#x4E8C;&#x6307;&#x8178;&#x5207;&#x9664;&#x3001;&#x3088;&#x304F;&#x4E0B;&#x75E2;&#x3068;&#x4F53;&#x91CD;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3002;1 &#x4EBA;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x306F;&#x3001;&#x3061;&#x306A;&#x307F;&#x306B;&#x8853;&#x5F8C;&#x306F;&#x7121;&#x5236;&#x9650;&#x306E;&#x98DF;&#x4E8B;&#x7642;&#x6CD5;&#x306B;&#x9ED9;&#x3063;&#x3066;&#x81B5;&#x982D;&#x5341;&#x4E8C;&#x6307;&#x8178;&#x5207;&#x9664;&#x3067;&#x8A3A;&#x65AD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8; &#x30BB;&#x30EA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30AF;&#x75C5;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x75C7;&#x72B6;&#x90E8;&#x5206;&#x6539;&#x826F;&#x6B8B;&#x308A; 2 &#x4F8B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30C6;&#x30F3; &#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x98DF;&#x4E8B;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x5F8C; 6 &#x60A3;&#x8005;&#x306E; 4 &#x3067;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x81B5;&#x982D;&#x5341;&#x4E8C;&#x6307;&#x8178;&#x5207;&#x9664;&#x304B;&#x3089;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x9045;&#x5EF6;&#x30BB;&#x30EA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30AF;&#x75C5; 6 &#x75C7;&#x5019;&#x6027;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x8A3A;&#x65AD;&#x3078;&#x306E; 6 &#x30F6;&#x6708;&#x9593;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x81E8;&#x5E8A;&#x533B;&#x30BB;&#x30EA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30AF;&#x75C5;&#x4E0B;&#x75E2;&#x3068;&#x767A;&#x80B2;&#x4E0D;&#x5168;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x8A3A;&#x65AD;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x81B5;&#x982D;&#x5341;&#x4E8C;&#x6307;&#x8178;&#x5207;&#x9664;&#x5F8C;&#x3092;&#x8003;&#x616E;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306F;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x4E0B;&#x3067;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x57FA;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x8CA0;&#x8377;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x6297;&#x539F;&#x30BB;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x6D88;&#x5316;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x306E;&#x8853;&#x5F8C;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x4FC2;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8; &#x30BB;&#x30EA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30AF;&#x75C5;&#x81B5;&#x982D;&#x5341;&#x4E8C;&#x6307;&#x8178;&#x5207;&#x9664;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC124;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xCCB4;&#xC911; &#xAC10;&#xC18C; &#xD6C4;&#xC5D0; pancreaticoduodenectomy, &#xC77C;&#xBC18;&#xC801; &#xC774;&#xBA70; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; etiologies&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC99D;&#xC0C1;&#xC774; &#xD754;&#xD788; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC6D0;&#xC778;&#xC774;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCE68;&#xBB35; celiac &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xC218;&#xC220; &#xD6C4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;. &#xC6B0;&#xB9AC; pancreaticoduodenectomy, &#xD6C4; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD06C; &#xCE68;&#xBB35; celiac &#xC9C8;&#xD658; &#xC784;&#xC0C1; &#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158;, &#xC9C4;&#xB2E8;, &#xCE58;&#xB8CC;, &#xBC0F; &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988;&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xD611;&#xD68C;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC874; &#xC0AC;&#xB840; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; &#xC694;&#xC57D;&#xC744; &#xCC3E;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAE30;&#xAD00;&#xC5D0; &#xC804;&#xC790; &#xC758;&#xB8CC; &#xAE30;&#xB85D;&#xC758; &#xAC80;&#xC0C9; 1976-2004 &#xB144; &#xBCF5; &#xAC15; &#xC9C8;&#xD658;&#xACFC; pancreaticoduodenectomy&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC6A9;&#xC5B4;&#xB97C; &#xC0C1;&#xD638; &#xCC38;&#xC870;&#xB97C; &#xC218;&#xD589; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACBD;&#xC6B0; &#xB2E4;&#xC74C; &#xADF8; &#xC9D5;&#xD6C4; &#xB610;&#xB294; &#xC99D;&#xC0C1; celiac &#xC9C8;&#xD658;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4; &#xD604;&#xC7AC; preoperatively &#xB418;&#xB3C4;&#xB85D; &#xAC80;&#xD1A0; &#xD588;&#xB2E4;. 7 &#xBA85;&#xC758; &#xD658;&#xC790;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. 5 &#xB0A8;&#xC131;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD3C9;&#xADE0; &#xB098;&#xC774; 56. &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD658;&#xC790;&#xB294; &#xCD94;&#xC815; &#xB41C; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xB610;&#xB294; ampullary &#xC545;&#xC131; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC218;&#xC220;&#xC744; &#xBC1B;&#xC558;&#xB2E4;. &#xAC1C;&#xBC1C; 6 &#xD658;&#xC790; &#xC99D;&#xC0C1; &#xAD81;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xC778; celiac &#xC9C8;&#xD658; &#xC9C1;&#xD6C4; pancreaticoduodenectomy, &#xAC00;&#xC7A5; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC124;&#xC0AC;&#xC640; &#xCCB4;&#xC911; &#xAC10;&#xC18C;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xD658;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35; celiac &#xC9C8;&#xD658; &#xB367;&#xBD99;&#xC5EC; postoperatively &#xBB34;&#xC81C;&#xD55C; &#xB2E4;&#xC774;&#xC5B4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xCE68;&#xBB35; pancreaticoduodenectomy&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC99D;&#xC0C1;&#xC774; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xB098;&#xBA38;&#xC9C0; 2 &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC778; &#xAC1C;&#xC120; &#xAE00;&#xB8E8;&#xD150; &#xBB34;&#xB8CC; &#xB2E4;&#xC774;&#xC5B4;&#xD2B8;&#xC758; &#xAC1C;&#xC2DC; &#xD6C4; 6 &#xD658;&#xC790; 4&#xC5D0;&#xC11C; &#xD574;&#xACB0;. 6 &#xC99D;&#xC0C1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5; &#xAC15; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xC9C4;&#xB2E8;&#xC744; &#xC704;&#xD574; pancreaticoduodenectomy&#xC5D0;&#xC11C; &#xBA54;&#xB514;&#xC544; &#xC9C0;&#xC5F0; 6 &#xB2EC; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC784;&#xC0C1; pancreaticoduodenectomy &#xD6C4; &#xBC88; &#xCC3D; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E4;&#xD328;&#xC640; &#xC124;&#xC0AC; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC9C4;&#xB2E8;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF5; &#xAC15; &#xC9C8;&#xD658;&#xC744; &#xACE0;&#xB824;&#xD574; &#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5D4;&#xD130;&#xD2F0;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBC11;&#xC5D0; &#xC778;&#xC2DD; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC99D;&#xAC00; &#xD56D; &#xC6D0; &#xB85C;&#xB4DC; &#xBCF4;&#xC870; postsurgical &#xBCC0;&#xD654; &#xC7A5;&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC870;&#xC6A9;&#xD55C; celiac &#xC9C8;&#xBCD1; pancreaticoduodenectomy&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Diarrea y p&eacute;rdida de peso son comunes despu&eacute;s de pancreaticoduodenectomy y surgen de diferentes etiolog&iacute;as. Una causa infrecuente pero importante para estos s&iacute;ntomas es la activaci&oacute;n postoperatoria de la enfermedad cel&iacute;aca silenciosa. Buscamos para describir la presentaci&oacute;n cl&iacute;nica, diagn&oacute;stico, tratamiento y seguimiento de una serie de pacientes cel&iacute;acos silencioso desenmascarado despu&eacute;s pancreatoduodenectom&iacute;a y para resumir los informes del caso existentes en esta asociaci&oacute;n. Referencias cruzadas de t&eacute;rminos asociados con la enfermedad celiaca y pancreatoduodenectom&iacute;a durante los a&ntilde;os 1976-2004, se realiz&oacute; una b&uacute;squeda de la historia cl&iacute;nica electr&oacute;nica en nuestra instituci&oacute;n. Luego se revisaron casos para asegurar que no hay signos o s&iacute;ntomas atribuibles a la enfermedad celiaca estaban presentes preoperatorio. Se identificaron siete pacientes; cinco eran hombre, y la edad promedio fue de 56. Todos los pacientes experimentaron cirug&iacute;a para una presunta malignidad pancre&aacute;tica o ampular. Seis pacientes desarrollados s&iacute;ntomas enfermedad finalmente atribuible a celiacos pancreatoduodenectom&iacute;a inmediatamente despu&eacute;s, com&uacute;nmente diarrea y p&eacute;rdida de peso. Un solo paciente ten&iacute;a silenciosa enfermedad cel&iacute;aca diagnosticada por cierto en pancreatoduodenectom&iacute;a que guardaron silencio postoperatoriamente en una dieta sin restricci&oacute;n. S&iacute;ntomas resueltos totalmente en 4 de 6 pacientes despu&eacute;s de la iniciaci&oacute;n de una dieta libre de gluten, con la mejora parcial en los 2 pacientes restantes. El retraso promedio de pancreaticoduodenectomy para diagn&oacute;stico de enfermedad cel&iacute;aca en los 6 pacientes sintom&aacute;ticos fue de 6 meses. Los cl&iacute;nicos deben considerar la enfermedad cel&iacute;aca como un potencial diagn&oacute;stico en pacientes con falta de prosperar y diarrea despu&eacute;s de pancreaticoduodenectomy. Esta entidad es infrecuente, pero puede ser poco reconocidos. El mecanismo subyacente puede relacionarse con una mayor carga antig&eacute;nica secundaria a cambios postquir&uacute;rgicos en fisiolog&iacute;a intestinal.

Enfermedad cel&iacute;aca silenciosa activada por pancreaticoduodenectomy.

L&#39;activation de l&#39;eucaryote r&eacute;plicative ADN h&eacute;licase, le complexe Mcm2-7, requiert la phosphorylation par Cdc7/Dbf4 (kinase d&eacute;pendante Dbf4 ou DDK), qui, &agrave; son tour, d&eacute;pend de la phosphorylation pr&eacute;alable de Mcm2-7 par une kinase inconnue (ou kinases). Nous avons identifi&eacute; des sites de phosphorylation DDK sur Mcm4 et Mcm6 et trouv&eacute; que la phosphorylation d&#39;une sous-unit&eacute; suffit pour la prolif&eacute;ration cellulaire. Ce qui est important, phosphorylation pr&eacute;alable de S/T-P ou des motifs sur ces sous-unit&eacute;s S/T-Q est n&eacute;cessaire pour la phosphorylation DDK de Mcm2-7 et passage de phase S normal. Phosphomimetic mutations des sites cibles DDK contournement les fonction DDK et mutation des sites de phosphorylation d&#39;amor&ccedil;age. Mrc1 facilite Mec1 phosphorylation des motifs S/T-Q de la chromatine li&eacute; aux Mcm2-7 au cours de la phase S pour activer la r&eacute;plication. Des interactions g&eacute;n&eacute;tiques entre les mutations aux sites d&#39;amor&ccedil;age et suppression MRC1 ou TOF1 supportent un r&ocirc;le pour ces modifications dans la stabilit&eacute; de fourche de r&eacute;plication. Ces constatations identifient des m&eacute;canismes r&eacute;gulateurs qui modulent l&#39;origine tir et assemblage de fourche de r&eacute;plication au cours de la progression du cycle cellulaire.

Mec1 est l&#39;un des kinases multiples qui s&#39;amorce l&#39;h&eacute;licase Mcm2-7 pour la phosphorylation de Cdc7.

&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x89E3;&#x65CB;&#x771F;&#x6838;&#x590D;&#x5236; DNA &#x9176;&#xFF0C;Mcm2-7 &#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x7531; Cdc7/Dbf4 &#xFF08;Dbf4-&#x4F9D;&#x8D56;&#x6FC0;&#x9176;&#x6216; DDK&#xFF09;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#xFF0C;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x4E8B;&#x5148;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; Mcm2-7 &#x7531;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x6FC0;&#x9176; &#xFF08;&#x6216;&#x6FC0;&#x9176;&#xFF09; &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86; Mcm4 &#x548C; Mcm6 &#x7684; DDK &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x90A3;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x6216;&#x8005;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x4E3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E8B;&#x5148;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684; S/T-P &#x6216; S/T-Q &#x56FE;&#x6848;&#x4E0A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E9A;&#x57FA;&#x9700; DDK &#x78F7;&#x9178;&#x5316; Mcm2-7 &#x548C; S &#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x901A;&#x884C;&#x3002;Phosphomimetic &#x7A81;&#x53D8;&#x7684; DDK &#x76EE;&#x6807;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7ED5;&#x8FC7; DDK &#x51FD;&#x6570;&#x548C;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x98DE;&#x6CAB;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;Mrc1 &#x65B9;&#x4FBF; Mec1 &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684; S/T-Q &#x56FE;&#x6848;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7ED1;&#x5B9A; Mcm2-7 S &#x9636;&#x6BB5;&#x8981;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x590D;&#x5236;&#x3002;&#x9057;&#x4F20;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8D77;&#x7206;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x548C; MRC1 &#x6216; TOF1 &#x5220;&#x9664;&#x652F;&#x6301;&#x4F5C;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4FEE;&#x6539;&#x5728;&#x590D;&#x5236;&#x53C9;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x786E;&#x5B9A;&#x8C03;&#x5236;&#x53D1;&#x5C04;&#x7684;&#x8D77;&#x6E90;&#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x590D;&#x5236;&#x53C9;&#x5927;&#x4F1A;&#x671F;&#x95F4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;

Mec1 &#x662F;&#x603B;&#x7406;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7531; Cdc7 Mcm2-7 &#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x6FC0;&#x9176;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;

Activation of the eukaryotic replicative DNA helicase, the Mcm2-7 complex, requires phosphorylation by Cdc7/Dbf4 (Dbf4-dependent kinase or DDK), which, in turn, depends on prior phosphorylation of Mcm2-7 by an unknown kinase (or kinases). We identified DDK phosphorylation sites on Mcm4 and Mcm6 and found that phosphorylation of either subunit suffices for cell proliferation. Importantly, prior phosphorylation of either S/T-P or S/T-Q motifs on these subunits is required for DDK phosphorylation of Mcm2-7 and for normal S phase passage. Phosphomimetic mutations of DDK target sites bypass both DDK function and mutation of the priming phosphorylation sites. Mrc1 facilitates Mec1 phosphorylation of the S/T-Q motifs of chromatin-bound Mcm2-7 during S phase to activate replication. Genetic interactions between priming site mutations and MRC1 or TOF1 deletion support a role for these modifications in replication fork stability. These findings identify regulatory mechanisms that modulate origin firing and replication fork assembly during cell cycle progression.

Mec1 is one of multiple kinases that prime the Mcm2-7 helicase for phosphorylation by Cdc7.

Attivazione del helicase del DNA replicativa negli eucarioti, il complesso Mcm2-7, richiede la fosforilazione di Cdc7/Dbf4 (chinasi Dbf4-dipendente o DDK), che, a sua volta, dipende dalla previa fosforilazione di Mcm2-7 da una chinasi sconosciuta (o chinasi). Abbiamo identificato siti di fosforilazione DDK Mcm4 e Mcm6 e trovato che la fosforilazione di una subunit&agrave; &egrave; sufficiente per la proliferazione cellulare. Importante, previa fosforilazione di T/S-P o di motivi di S/T-Q su queste subunit&agrave; &egrave; richiesta per la fosforilazione di DDK Mcm2-7 e per il normale passaggio di fase S. Phosphomimetic mutazioni di siti bersaglio DDK bypassare sia funzione DDK e mutazione dei siti di fosforilazione di adescamento. Mrc1 facilita Mec1 fosforilazione dei motivi della cromatina-bound Mcm2-7 S/T-Q durante la fase S per attivare la replica. Interazioni genetiche tra mutazioni sito adescamento ed eliminazione MRC1 o TOF1 supportano un ruolo per queste modifiche nella stabilit&agrave; forcella replica. Questi risultati identificano meccanismi regolatori che modulano l&#39;origine di infornamento e montaggio forcella replica durante la progressione del ciclo cellulare.

Mec1 &egrave; uno dei pi&ugrave; chinasi che adescare l&#39;elicasi Mcm2-7 per la fosforilazione di Cdc7.

&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x8907;&#x88FD; DNA &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC; Mcm2 7 &#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B; Cdc7/&#x306F;&#x3001;&#x9806;&#x756A;&#x306B;&#x3001;&#x4E0D;&#x660E;&#x306A;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;) Mcm2 7 &#x306E;&#x524D;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x4F9D;&#x5B58; Dbf4 Dbf4 &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (DDK)&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; DDK &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; Mcm4 &#x3068; Mcm6 &#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306F;&#x3001;S/T-P &#x307E;&#x305F;&#x306F; S/T-Q &#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x4E0A;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x4E8B;&#x524D;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F; DDK &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316; Mcm2 7 &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x901A;&#x5E38;&#x306E; S &#x671F;&#x901A;&#x904E;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;DDK &#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; &#x30FB; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E; Phosphomimetic &#x5909;&#x7570; DDK &#x95A2;&#x6570;&#x3068;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0; &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D1;&#x30B9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Mrc1 Mec1 &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; Mcm2 7 S/T-Q &#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B; S &#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;&#x4E2D;&#x306B;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3068; MRC1 &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8CEA; TOF1 &#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3001;&#x5F79;&#x5272;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x713C;&#x6210;&#x306E;&#x8D77;&#x6E90;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x5236;&#x5FA1;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x4E2D;&#x306B;&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF; &#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Mec1 &#x9996;&#x76F8;&#x306E; Mcm2 7 &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC; Cdc7 &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC77C;&#xCC28; &#xC9C4; &#xD575; DNA helicase, Mcm2 7 &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD544;&#xC694; Cdc7/Dbf4 Dbf4 &#xC885;&#xC18D; &#xD0A4; (DDK), &#xCC28;&#xB840; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C;, &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xD0A4; (&#xB610;&#xB294; kinases) Mcm2 7&#xC758; &#xC0AC;&#xC804; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC5D0; &#xB2EC;&#xB824; &#xC788;&#xB294; &#xC5EC; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; DDK Mcm4 &#xBC0F; Mcm6 &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCDA9;&#xBD84;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, S/T-P &#xB610;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC5D0; S/T-Q &#xBAA8;&#xD2F0;&#xD504;&#xC758; &#xC0AC;&#xC804; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB294; DDK Mcm2 7&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC640; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; S &#xB2E8;&#xACC4; &#xD1B5;&#xACFC; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. DDK &#xB300;&#xC0C1; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; Phosphomimetic &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC6B0;&#xD68C; DDK &#xAE30;&#xB2A5;&#xACFC; &#xBABB;&#xC4F0;&#xAC8C; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;. Mrc1 &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; S &#xB2E8;&#xACC4; chromatin &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; Mcm2-7 S/T-Q &#xBAA8;&#xD2F0;&#xD504;&#xC758; Mec1 &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xD504;&#xB77C;&#xC774; &#xBC0D; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; MRC1 &#xB610;&#xB294; TOF1 &#xC0AD;&#xC81C; &#xC0AC;&#xC774; &#xC720;&#xC804; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC218;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xADDC;&#xC81C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xC6D0;&#xC0B0;&#xC9C0; &#xBCC0;&#xC870; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC9C4;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Mec1 &#xD504;&#xB77C;&#xC784; Mcm2-7 helicase cdc7&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; kinases &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Activaci&oacute;n de la eucariota helicasa replicativa de ADN, el complejo de Mcm2-7, requiere fosforilaci&oacute;n por Cdc7/Dbf4 (quinasa dependiente de Dbf4 o DDK), que, a su vez, depende de la previa fosforilaci&oacute;n de Mcm2-7 por un desconocido quinasa (o quinasas). Se identificaron sitios de fosforilaci&oacute;n de DDK en Mcm4 y Mcm6 y encontr&oacute; que la fosforilaci&oacute;n de cualquier subunidad es suficiente para la proliferaci&oacute;n celular. Lo importante, previa fosforilaci&oacute;n de S/T-P o motivos S/T-Q en estas subunidades se requiere fosforilaci&oacute;n de DDK de Mcm2-7 y paso de fase S normal. Phosphomimetic las mutaciones de los sitios de destino DDK puente funci&oacute;n DDK y mutaci&oacute;n de los sitios de fosforilaci&oacute;n de cebado. Mrc1 facilita Mec1 fosforilaci&oacute;n de los motivos de S/T-Q de cromatina-limite Mcm2-7 durante la fase de S para activar la replicaci&oacute;n. Interacciones gen&eacute;ticas entre mutaciones del sitio de cebado y eliminaci&oacute;n MRC1 o TOF1 apoyan un papel para estas modificaciones en la estabilidad de la horquilla de replicaci&oacute;n. Estos resultados identifican mecanismos que modulan el origen de la le&ntilde;a y el conjunto de la horquilla de replicaci&oacute;n durante la progresi&oacute;n del ciclo celular.

Mec1 es una de varias quinasas que prime la helicasa Mcm2-7 por fosforilaci&oacute;n por Cdc7.

&#x901A;&#x5E38;&#xFF0C;&#x73B0;&#x4EE3;&#x8BCA;&#x65AD;&#x6280;&#x672F;&#x8981;&#x6C42;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x548C;&#x7EAF;&#x5316;&#x6838;&#x9178;&#x76F4;&#x63A5;&#x4ECE;&#x75C5;&#x4EBA;&#x6837;&#x672C;&#x5982;&#x8840;&#x6DB2;&#x6216;&#x7CAA;&#x4FBF;&#x3002;&#x8BB8;&#x591A;&#x8BCA;&#x65AD;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x6B63;&#x5728;&#x5230;&#x5FAE;&#x7C73;&#x7EA7;&#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#x4E0A;&#x5C0F;&#x578B;&#x5316;&#x548C;&#x96C6;&#x6210;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#x7531;&#x4E8E;&#x4ECE;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7684;&#x6837;&#x54C1;&#x548C;&#x8BD5;&#x5242;&#x5377;&#x6240;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x7ECF;&#x6D4E;&#x3002;&#x901A;&#x5E38;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8BBE;&#x5907;&#x6837;&#x54C1;&#x5236;&#x5907;&#x7CFB;&#x5217;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x6267;&#x884C;&#x8BCA;&#x65AD;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;&#x6837;&#x54C1;&#x5236;&#x5907;&#x6B65;&#x9AA4;&#x975E;&#x5E38;&#x91CD;&#x8981;&#xFF0C;&#x51C0;&#x5316;&#x4ECE;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x53EF;&#x5E72;&#x6270;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x6750;&#x6599;&#x3002;&#x6709;&#x7528;&#x4E8E;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x5730;&#x6355;&#x83B7;&#x6838;&#x9178;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x6D17;&#x53BB;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x6C61;&#x67D3; &#xFF08;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3001; &#x9176;&#x3001; &#x8102;&#x7C7B;&#x7B49;&#xFF09; &#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x6280;&#x672F;&#x3002;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6355;&#x83B7;&#x7684;&#x6700;&#x5E38;&#x89C1;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6838;&#x9178;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7845;&#x80F6;&#x8868;&#x9762;&#x6216;&#x6C89;&#x6DC0;&#x6838;&#x9178;&#x6709;&#x6216;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x627F;&#x8FD0;&#x4EBA;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x6BCF;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6267;&#x884C;&#x5728;&#x6DB2;&#x76F8;&#x6216;&#x56FA;&#x4F53;&#x7684;&#x652F;&#x6301;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x63D0;&#x53D6;&#x5217;&#x4E2D;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x65B9;&#x6CD5;&#x548C;&#x5730;&#x5740;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;

&#x5206;&#x79BB;&#x7EAF;&#x5316; DNA/RNA &#x5728;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7684;&#x8BBE;&#x5907;&#x4E2D;&#x3002;

Often, modern diagnostic techniques require the isolation and purification of nucleic acids directly from patient samples such as blood or stool. Many diagnostic tests are being miniaturized onto micro-sized platforms and integrated into microfluidic devices due to the economies resulting from smaller sample and reagent volumes. Often, these devices perform sample preparation in series with the diagnostic tests. The sample preparation steps are vital in order to purify the desired genetic material from potential inhibitors that can interfere with the outcome of the test. There are various techniques used to selectively capture the nucleic acids while washing away potential contamination (proteins, enzymes, lipids, etc.). Two of the most common forms of selective capture are based on nucleic acid binding to silica surface or on the precipitation of nucleic acids with or without the presence of a carrier species. Each of these methods can be performed in liquid phase or in a solid support such as an extraction column. Here we discuss both methods and address microfluidic applications.

Purification of DNA/RNA in a microfluidic device.

Souvent, les techniques modernes de diagnostic exigent l&#39;isolement et la purification des acides nucl&eacute;iques directement &agrave; partir des &eacute;chantillons de patients comme le sang ou les selles. Nombreux tests diagnostiques sont &ecirc;tre miniaturis&eacute;s sur des plates-formes de micro-entreprises et int&eacute;gr&eacute;s dans les dispositifs microfluidiques en raison des &eacute;conomies r&eacute;sultant de petits volumes d&#39;&eacute;chantillon et r&eacute;actif. Souvent, ces dispositifs effectuent la pr&eacute;paration des &eacute;chantillons en s&eacute;rie avec les tests de diagnostic. Les &eacute;tapes de pr&eacute;paration d&#39;&eacute;chantillon sont essentiels afin de purifier le mat&eacute;riel g&eacute;n&eacute;tique d&eacute;sir&eacute; d&#39;inhibiteurs potentiels qui peuvent interf&eacute;rer avec le r&eacute;sultat du test. Il existe diverses techniques utilis&eacute;es pour capturer s&eacute;lectivement les acides nucl&eacute;iques, tout en emportant la contamination potentielle (enzymes, prot&eacute;ines, lipides, etc..). Deux des formes plus courantes de capture s&eacute;lective reposent sur la liaison de l&#39;acide nucl&eacute;ique &agrave; la surface de la silice, soit sur la pr&eacute;cipitation des acides nucl&eacute;iques avec ou sans la pr&eacute;sence d&#39;une esp&egrave;ce porteuse. Chacune de ces m&eacute;thodes peut &ecirc;tre effectu&eacute;e en phase liquide ou dans un support solide par exemple une colonne d&#39;extraction. Nous discutons des m&eacute;thodes et des applications microfluidic adresse.

Purification de l&#39;ADN/ARN dans un dispositif microfluidique.

Moderne tecniche diagnostiche richiedono spesso, l&#39;isolamento e la purificazione degli acidi nucleici direttamente da campioni come sangue o feci. Molti test diagnostici sono stati miniaturizzati su piattaforme di micro-imprese e integrato in dispositivi microfluidici dovuto le economie derivanti da piccoli volumi di campione e reagente. Spesso, questi dispositivi eseguono preparazione del campione in serie con i test diagnostici. La procedura di preparazione del campione &egrave; vitale al fine di purificare il materiale genetico desiderato da inibitori potenziali che possono interferire con l&#39;esito del test. Ci sono varie tecniche utilizzate per catturare selettivamente gli acidi nucleici, mentre lavare via potenziale contaminazione (proteine, enzimi, lipidi, ecc.). Due delle pi&ugrave; comuni forme di cattura selettiva sono basati su acidi nucleici associazione alla superficie di silice o la precipitazione degli acidi nucleici con o senza la presenza di una specie di vettore. Ciascuno di questi metodi pu&ograve; essere eseguita in fase liquida o in un supporto solido come una colonna di estrazione. Qui discutiamo sia metodi e applicazioni di microfluidica indirizzo.

Purificazione di DNA/RNA in un dispositivo microfluidico.

&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x8FD1;&#x4EE3;&#x7684;&#x306A;&#x8A3A;&#x65AD;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x9694;&#x96E2;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x76F4;&#x63A5;&#x8840;&#x6DB2;&#x3084;&#x4FBF;&#x306A;&#x3069;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x6838;&#x9178;&#x306E;&#x6D44;&#x5316;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x8A3A;&#x65AD;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x304C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x4E0A;&#x306B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x5C0F;&#x578B;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3068;&#x8A66;&#x85AC;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x7D4C;&#x6E08;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306B;&#x7D71;&#x5408;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x8A66;&#x6599;&#x30B7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30BA;&#x3067;&#x8A3A;&#x65AD;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x6E96;&#x5099;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x5E72;&#x6E09;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x304B;&#x3089;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7269;&#x8CEA;&#x3092;&#x6D44;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6C5A;&#x67D3; &#xFF08;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x3001;&#x8102;&#x8CEA;&#x7B49;&#xFF09; &#x3092;&#x6D17;&#x3044;&#x6D41;&#x3059;&#x4E2D;&#x306E;&#x6838;&#x9178;&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2 &#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x6838;&#x9178;&#x7D50;&#x5408;&#x30B7;&#x30EA;&#x30AB;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6838;&#x9178;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x7A2E;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306E;&#x6709;&#x7121;&#x306E;&#x964D;&#x6C34;&#x91CF;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5404;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x6DB2;&#x76F8;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x62BD;&#x51FA;&#x5854;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x56FA;&#x4F53;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x5B9F;&#x884C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3068;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30B9; &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

DNA &#x306E; RNA &#x306E;&#x6D44;&#x5316;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3067;&#x3002;

&#xC885;&#xC885;, &#xD604;&#xB300; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xACA9;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xD608;&#xC561; &#xC774;&#xB098; &#xB300;&#xBCC0; &#xB4F1; &#xD658;&#xC790; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C1;&#xC811; &#xD575; &#xC0B0;&#xC758; &#xC815;&#xD654; &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9CE;&#xC740; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB418; &#xACE0; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xC18C;&#xD615;&#xD654;&#xC640; &#xC791;&#xC740; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBC0F; &#xC2DC; &#xC57D; &#xBCFC;&#xB968;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC81C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xBBF8;&#xC138; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569;. &#xC885;&#xC885;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC7A5;&#xCE58; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC900;&#xBE44;&#xB97C; &#xC218;&#xD589;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0D8;&#xD50C; &#xC900;&#xBE44; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB294; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC29;&#xD574;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC744; &#xC815;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC218;&#xC801;. &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC624;&#xC5FC; (&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xD6A8;&#xC18C;, &#xC9C0;&#xC9C8;, &#xB4F1;)&#xC744; &#xBA40;&#xB9AC; &#xC138;&#xCC99; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD575; &#xC0B0;&#xC744; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD3EC;&#xCC29; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xAE30;&#xC220;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC778; &#xCEA1;&#xCC98;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xB450; &#xC2E4;&#xB9AC; &#xCE74; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xD575; &#xC0B0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB610;&#xB294; &#xD575; &#xC0B0; &#xCE90;&#xB9AC;&#xC5B4; &#xC885;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC758; &#xC720;&#xBB34;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xAC15; &#xC218; &#xB530;&#xB77C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAC01; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; &#xCD94;&#xCD9C; &#xC5F4; &#xB4F1; &#xACE0;&#xCCB4; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xB610;&#xB294; &#xC561;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xD589;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95; &#xBC0F; &#xC8FC;&#xC18C; &#xBBF8;&#xC138; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xD1A0;&#xB860;.

&#xBBF8;&#xC138; &#xC18C;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; DNA/RNA&#xC758; &#xC815;&#xD654;.

T&eacute;cnicas de diagn&oacute;stico modernas exigen a menudo, el aislamiento y purificaci&oacute;n de &aacute;cidos nucleicos directamente de las muestras como sangre o heces del paciente. Muchas pruebas diagn&oacute;sticas est&aacute;n miniaturizados en plataformas de tama&ntilde;o micro e integrado en dispositivos microflu&iacute;dicos debido a las econom&iacute;as resultantes de peque&ntilde;os vol&uacute;menes de muestra y reactivo. A menudo, estos dispositivos realizan preparaci&oacute;n de muestras en serie con las pruebas diagn&oacute;sticas. Los pasos de preparaci&oacute;n de la muestra son vitales para purificar el material gen&eacute;tico de inhibidores potenciales que pueden interferir con el resultado de la prueba. Hay diversas t&eacute;cnicas utilizadas para capturar selectivamente los &aacute;cidos nucleicos mientras lavando posible contaminaci&oacute;n (prote&iacute;nas, enzimas, l&iacute;pidos, etc.). Dos de las formas m&aacute;s comunes de la captura selectiva se basan en el &aacute;cido nucleico que ataba a la superficie de s&iacute;lice o en la precipitaci&oacute;n de los &aacute;cidos nucleicos con o sin la presencia de una especie de portador. Cada uno de estos m&eacute;todos puede realizarse en fase l&iacute;quida o en un soporte s&oacute;lido como una columna de extracci&oacute;n. Aqu&iacute; discutimos m&eacute;todos y aplicaciones de microflu&iacute;dica de direcci&oacute;n.

Purificaci&oacute;n de ADN/ARN en un dispositivo microflu&iacute;dico.

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The ability to increase the concentration of target analytes in a fixed sample volume can potentially lower the limit of detection for many biosensing techniques, and thus is key in sample preparation for infectious disease diagnosis. Concentration by evaporation is an effective method to achieve target enrichment. However, concentrating human samples, including blood and plasma, by evaporation-based methods is made challenging by high concentrations of proteins and electrolytes. Dehydration of the proteins causes the sample to turn into a gel, hindering further analysis. At the same time, decreasing the volume increases the overall concentration of electrolytes, causing bacterial or viral particle lysis, and making them more difficult to detect in affinity-based biosensors. Thus, we fabricated a microfluidic chip that incorporates both dialysis and concentration in a single design. The chip dialyzes the proteins from the plasma, while maintaining an appropriate concentration of electrolytes and concentrating the sample targets. The process to concentrate plasma or serum samples by a factor of 10 takes less than 30 minutes. As a proof-of-concept, we demonstrated the chip using a defective Human Immunodeficiency Virus (HIV). To distinguish patients on antiretroviral therapy who are failing therapy from those who are not, a diagnostic must be able to detect HIV in plasma down to at least 1000 particles per milliliter. For a number of technical reasons, it is difficult to get on-chip PCR reactions to reach this level of sensitivity, so concentration of HIV from lower viral load samples has the potential to improve the sensitivity of many types of molecular point-of-care viral load tests.

Sample concentration and purification for point-of-care diagnostics.

La capacit&eacute; d&#39;augmenter la concentration des compos&eacute;s &agrave; analyser dans un volume d&#39;&eacute;chantillon fixe peut potentiellement abaisser le seuil de d&eacute;tection pour les nombreuses techniques de biod&eacute;tection et est donc la cl&eacute; dans la pr&eacute;paration de l&#39;&eacute;chantillon pour le diagnostic de maladies infectieuses. Concentration par &eacute;vaporation est une m&eacute;thode efficace pour obtenir &agrave; un enrichissement de la cible. Cependant, concentration d&#39;&eacute;chantillons humains, y compris de sang et plasma, de m&eacute;thodes ax&eacute;es sur l&#39;&eacute;vaporation sont complexifi&eacute; par de fortes concentrations de prot&eacute;ines et d&#39;&eacute;lectrolytes. D&eacute;shydratation des prot&eacute;ines entra&icirc;ne l&#39;&eacute;chantillon &agrave; se transformer en un gel, qui entravent encore l&#39;analyse. Dans le m&ecirc;me temps, diminuer le volume augmente la concentration globale des &eacute;lectrolytes, provoquant la lyse de la particule virale ou bact&eacute;rienne et ce qui les rend plus difficiles &agrave; d&eacute;tecter dans les biocapteurs ax&eacute;e sur l&#39;affinit&eacute;. Ainsi, nous avons fabriqu&eacute; une puce microfluidique qui incorpore la dialyse et la concentration en un seul dessin. La puce dialyzes les prot&eacute;ines du plasma, tout en maintenant une concentration appropri&eacute;e d&#39;&eacute;lectrolytes et de concentrer les cibles de l&#39;&eacute;chantillon. Le processus de concentrer des &eacute;chantillons de s&eacute;rum ou de plasma d&#39;un facteur 10 prend moins de 30 minutes. Comme une preuve de concept, nous avons d&eacute;montr&eacute; la puce en utilisant un Virus de l&#39;immunod&eacute;ficience humaine (VIH d&eacute;fectueux). Pour distinguer les patients sous traitement antir&eacute;troviral qui ne parviennent pas &agrave; une th&eacute;rapie de ceux qui ne le sont pas, un diagnostic doit &ecirc;tre capable de d&eacute;tecter le VIH dans le plasma jusqu&#39;&agrave; au moins 1000 particules par millilitre. Pour un certain nombre de raisons techniques, il est difficile d&#39;obtenir des r&eacute;actions de PCR sur puce pour atteindre ce niveau de sensibilit&eacute;, donc la concentration du VIH provenant d&#39;&eacute;chantillons de charge virale inf&eacute;rieures a le potentiel d&#39;am&eacute;liorer la sensibilit&eacute; de nombreux types de tests de charge virale de mol&eacute;culaire point-of-care.

Concentration de l&#39;&eacute;chantillon et de purification pour le diagnostic de point-of-care.

La capacit&agrave; di aumentare la concentrazione di analiti di destinazione in un volume di campione fisso potenzialmente pu&ograve; abbassare il limite di rilevazione per molte tecniche di biosensori e quindi &egrave; fondamentale nella preparazione del campione per la diagnosi di malattia infettiva. Concentrazione per evaporazione &egrave; un metodo efficace per ottenere arricchimento di destinazione. Tuttavia, concentrandosi campioni umani, inclusi sangue e plasma, dai metodi basati su evaporazione fatta impegnativo da alte concentrazioni di proteine ed elettroliti. Disidratazione delle proteine fa s&igrave; che il campione di trasformare in un gel, impedendo ulteriori analisi. Allo stesso tempo, diminuendo il volume aumenta la concentrazione complessiva degli elettroliti, causando lisi delle particelle virali o batteriche e rendendoli pi&ugrave; difficili da rilevare in biosensori basati su affinit&agrave;. Cos&igrave;, abbiamo inventato un chip microfluidico che incorpora la dialisi e la concentrazione in un unico disegno. Il chip dialyzes le proteine dal plasma, mantenendo un&#39;adeguata concentrazione di elettroliti e concentrando gli obiettivi del campione. Il processo di concentrare i campioni di plasma o siero di un fattore 10 prende meno di 30 minuti. Come un proof-of-concept, abbiamo dimostrato il chip utilizzando un difettoso Virus dell&#39;immunodeficienza umana (HIV). Per distinguere i pazienti in terapia antiretrovirale che stanno fallendo terapia da coloro che non sono, una diagnostica deve essere in grado di rilevare HIV nel plasma fino ad almeno 1000 particelle per millilitro. Per una serie di ragioni tecniche, &egrave; difficile ottenere reazioni PCR on-chip per raggiungere questo livello di sensibilit&agrave;, quindi la concentrazione del virus HIV da campioni di carica virale bassa ha il potenziale per migliorare la sensibilit&agrave; di molti tipi di test molecolari carica virale point-of-care.

Concentrazione del campione e purificazione per la diagnostica point-of-care.

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&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x96E3;&#x3057;&#x304F;&#x3001;&#x96FB;&#x89E3;&#x8CEA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x900F;&#x6790;&#x3068;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x8A2D;&#x8A08;&#x304C;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3068;&#x96FB;&#x89E3;&#x8CEA;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x305F;&#x307E;&#x307E; dialyzes &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8840;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x304B;&#x8840;&#x6E05;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB; 10 &#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;30 &#x5206;&#x672A;&#x6E80;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x306E;&#x6982;&#x5FF5;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x3072;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#xFF08;HIV&#xFF09; &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7642;&#x6CD5;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x4EBA;&#x304B;&#x3089;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x6297;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7642;&#x6CD5;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x8A3A;&#x65AD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 1000&#x5E74;&#x306E;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E; 1 &#x30DF;&#x30EA;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EB;&#x3042;&#x305F;&#x308A;&#x307E;&#x3067;&#x306B; hiv &#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6280;&#x8853;&#x7684;&#x306A;&#x7406;&#x7531;&#x306E;&#x756A;&#x53F7;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3001;HIV &#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3088;&#x308A;&#x4F4E;&#x3044;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30ED;&#x30FC;&#x30C9; &#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8; &#x30AA;&#x30D6; &#x30B1;&#x30A2; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8CA0;&#x8377;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x611F;&#x5EA6;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x5230;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7; PCR &#x306E;&#x53CD;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x56F0;&#x96E3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x6D44;&#x5316;&#x306E;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30AA;&#x30D6;&#x30B1;&#x30A2;&#x8A3A;&#x65AD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3002;

&#xB300;&#xC0C1; analytes &#xACE0;&#xC815;&#xB41C; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBCFC;&#xB968;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9CE;&#xC740; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xC13C; &#xC2F1; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC80;&#xC0C9;&#xC758; &#xD55C;&#xACC4;&#xB97C; &#xB0AE;&#xCD9C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xC704;&#xD55C; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC900;&#xBE44;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC99D;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB18D;&#xB3C4; &#xB300;&#xC0C1; &#xB18D;&#xCD95;&#xC744; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC778;&#xAC04; &#xC0D8;&#xD50C;, &#xC9D1;&#xC911; &#xB4F1; &#xD608;&#xC561; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xB9C8;, &#xC99D;&#xBC1C; &#xAE30;&#xBC18; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB3C4;&#xC804; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xACFC; &#xC804;&#xD574;&#xC9C8;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD0C8;&#xC218; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xB354; &#xBC29;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xC824;&#xC73C;&#xB85C; &#xC124;&#xC815; &#xD558;&#xBA74; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0;, &#xC804;&#xD574;&#xC9C8;, &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xB610;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC785;&#xC790; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6A9; &#xD574;&#xB97C; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294; &#xC6D0;&#xC778;&#xC774; &#xB418; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC774; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xAE30;&#xBC18; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xC13C;&#xC11C;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCFC;&#xB968; &#xAC10;&#xC18C;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBBF8;&#xC138; &#xCE69; &#xD22C; &#xC11D;&#xACFC; &#xD55C; &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC5D0; &#xC9D1;&#xC911; &#xD558;&#xB294; &#xC870;&#xC791;. &#xCE69; &#xC804;&#xD574;&#xC9C8;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC0D8;&#xD50C; &#xB300;&#xC0C1; &#xC9D1;&#xC911; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C;&#xB294; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; dialyzes. &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xB9C8; &#xB610;&#xB294; &#xD608; &#xCCAD; &#xC0D8;&#xD50C; 10&#xC758; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD558;&#xC5EC; &#xC9D1;&#xC911; &#xACFC;&#xC815; 30 &#xBD84; &#xBBF8;&#xB9CC; &#xC18C;&#xC694; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC758; &#xC99D;&#xAC70;-&#xAC1C;&#xB150;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xC778;&#xAC04; &#xBA74;&#xC5ED; &#xACB0;&#xD54D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (HIV)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCE69;&#xC744; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC790;&#xB4E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC2E4;&#xD328;&#xB294; &#xD56D; &#xB808;&#xD2B8;&#xB85C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xD658;&#xC790;&#xB97C; &#xAD6C;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xBC00;&#xB9AC; &#xB9AC;&#xD130; &#xB2F9; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 1000 &#xC785;&#xC790; &#xC544;&#xB798;&#xB85C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xC5D0; HIV&#xB97C; &#xAC80;&#xCD9C; &#xD558;&#xAE30; &#xC218; &#xC788;&#xC5B4;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xC220;&#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xC720;&#xB85C; &#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB3C4;&#xB2EC;&#xC774; &#xC815;&#xB3C4;&#xC758; &#xAC10;&#xB3C4;, &#xB0AE;&#xC740; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBD80;&#xD558; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; HIV&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBD84;&#xC790; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8;&#xC758; &#xCF00;&#xC5B4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBD80;&#xD558; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xAC10;&#xB3C4; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC774; &#xCE69;&#xC5D0; PCR &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC5BB;&#xC73C;&#xBA74; &#xD558;&#xAE30;&#xAC00; &#xC5B4;&#xB835;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC0D8;&#xD50C; &#xB18D;&#xB3C4; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8;&#xC758; &#xCF00;&#xC5B4; &#xC9C4;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xD654;.

La capacidad de aumentar la concentraci&oacute;n de analitos en un volumen de muestra fijo potencialmente puede reducir el l&iacute;mite de detecci&oacute;n para muchas t&eacute;cnicas Biosensibles y as&iacute; es clave en la preparaci&oacute;n de muestras para diagn&oacute;stico de enfermedades infecciosas. Concentraci&oacute;n por evaporaci&oacute;n es un m&eacute;todo eficaz para lograr el enriquecimiento de destino. Sin embargo, concentrando muestras humanas, incluyendo sangre y plasma, por m&eacute;todos basados en la evaporaci&oacute;n se hace dif&iacute;cil por altas concentraciones de prote&iacute;nas y electrolitos. Deshidrataci&oacute;n de las prote&iacute;nas hace que la muestra en un gel, lo que dificulta a&uacute;n m&aacute;s an&aacute;lisis. Al mismo tiempo, disminuyendo el volumen aumenta la concentraci&oacute;n total de electrolitos, causando lisis de part&iacute;cula viral o bacteriana y hacerlos m&aacute;s dif&iacute;ciles de detectar en biosensores basados en la afinidad. As&iacute;, hemos fabricado un chip microflu&iacute;dico que incorpora la di&aacute;lisis y la concentraci&oacute;n en un solo dise&ntilde;o. El chip dialyzes las prote&iacute;nas del plasma, mientras mantiene una concentraci&oacute;n adecuada de electrolitos y concentrarse en los objetivos de la muestra. El proceso de concentrar las muestras de plasma o suero por un factor de 10 toma menos de 30 minutos. Como una prueba de concepto, demostramos el chip con un defectuoso Virus de inmunodeficiencia humana (VIH). Para distinguir a pacientes en terapia antirretroviral que est&aacute;n fallando terapia de aquellos que no son, un diagn&oacute;stico debe ser capaces de detectar el VIH en el plasma hasta por lo menos 1000 part&iacute;culas por mililitro. Para un n&uacute;mero de razones t&eacute;cnicas, es dif&iacute;cil conseguir reacciones de PCR de la en-viruta para llegar a este nivel de sensibilidad, por lo que la concentraci&oacute;n del VIH de las muestras de carga viral inferiores tiene el potencial para mejorar la sensibilidad de muchos tipos de pruebas de carga viral de point-of-care molecular.

Andy Fan

Department of Biomedical Engineering

Boston University

Microfluidic Chip Fabrication and Method to Detect Influenza