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Obtaining Highly Purified <em>Toxoplasma gondii</em> Oocysts by a Discontinuous Cesium Chloride Gradient

Toxoplasma gondii is an obligate intracellular protozoan pathogen that commonly infects humans. It is a well characterized apicomplexan associated with ...

University of Cincinnati, McMicken College of Arts and Science

&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x6709;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x6297;&#x836F;&#x6027;&#x5F88;&#x591A;&#x5316;&#x5B66;&#x6740;&#x83CC;&#x5242;&#x5395;&#x3002;&#x7528;&#x4E8E;&#x786E;&#x5B9A;&#x5375;&#x56CA;&#x611F;&#x67D3;&#x529B;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E3B;&#x8981;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x9F20;&#x6807;&#x3001; &#x9E21;&#x548C;&#x732B;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x9EC4;&#x91D1;&#x6807;&#x51C6;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5B83;&#x4EEC;&#x53EA;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5375;&#x56CA;&#x6D3B;&#x529B;&#x7684;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x8BC4;&#x4F30;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E24;&#x79CD;&#x5907;&#x9009;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x91CF;&#x5316;&#x540E;&#x6CBB;&#x7597;&#x51E0;&#x79CD;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x6740;&#x83CC;&#x5242;&#x5395;&#x7684;&#x53EF;&#x884C; T.&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x3002;&#x9996;&#x5148;&#x662F;&#x9488;&#x5BF9; ACT1 &#x548C; SporoSAG &#x57FA;&#x56E0;&#x6765;&#x679A;&#x4E3E;&#x53EF;&#x884C; T.&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x5B9A;&#x91CF;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x9176;&#x5B9E;&#x65F6;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94; (RT-qPCR) &#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;RT qPCR C(T) &#x503C; Wescodyne(R)&#x3001; &#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x4E59;&#x9187;&#x6216;&#x70ED;&#x5904;&#x7406;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5DEE;&#x522B;&#x4E0D;&#x5927;&#x800C;&#x672A;&#x7ECF;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x63A7;&#x4EF6;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x7528;&#x798F;&#x5C14;&#x9A6C;&#x6797;&#x6216; Clorox(R) &#x6CBB;&#x7597;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684; C(T) &#x503C; 2-log(10) &#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4F53;&#x5916;&#x7684; T.&#x866B;&#x56CA;&#x7A7A;&#x6591;&#x8BD5;&#x9A8C; &#xFF08;&#x9876;&#x90E8;&#x6D4B;&#x5B9A;)&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8861;&#x91CF;&#x5375;&#x56CA;&#x6D3B;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4F7F;&#x7528;&#x73E0;&#x94E3;&#x524A;&#x548C;&#x80C6;&#x6C41;&#x6D88;&#x5316;&#xFF0C;&#x5176;&#x6B21;&#x662F; excysted &#x866B;&#x5B50;&#x5728;&#x5408;&#x6D41;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5355;&#x5C42;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x9178;&#x5316;&#x4E59;&#x9187;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x7684;&#x5B50;&#x5B62;&#x5B50;&#x6D3B;&#x529B;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x51CF;&#x5C11;&#x6216; Wescodyne(R) &#x6CBB;&#x7597;&#x866B;&#x5375;&#x867D;&#x7136;&#x81F3;&#x5C11; 2-log(10) &#x51CF;&#x5C11;&#x6591;&#x5757;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x7684;&#x6709;&#x4EBA;&#x6307;&#x51FA;&#x4E0E; Clorox(R) &#x6CBB;&#x7597;&#x866B;&#x5375;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x798F;&#x5C14;&#x9A6C;&#x6797;&#x6216;&#x70ED;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x866B;&#x5375;&#x56CA;&#x5BFC;&#x81F4;&#x81F3;&#x5C11; 5-log(10) &#x51CF;&#x5C11;&#x6591;&#x5757;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x57FA;&#x4E8E; mRNA &#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x6027; pcr &#x9488;&#x5BF9; ACT1 &#x6216; SporoSAG &#x57FA;&#x56E0;&#x662F;&#x76F8;&#x5BF9;&#x5FEB;&#x901F;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x9876;&#x90E8;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x8BC1;&#x660E;&#x975E;&#x5E38;&#x6709;&#x6548;&#x548C;&#x654F;&#x611F;&#x91CF;&#x5316;&#x5375;&#x56CA;&#x6D3B;&#x529B;&#x4E0E;&#x52A8;&#x7269;&#x751F;&#x7269;&#x9274;&#x5B9A;&#x76F8;&#x6BD4;&#x3002;

&#x4F7F;&#x7528;&#x5B9A;&#x91CF;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x83CC;&#x6591;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x5BF9;&#x5316;&#x5B66;&#x6740;&#x83CC;&#x5242;&#x5395;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x7684;&#x6297;&#x6027;&#x3002;

Toxoplasma gondii oocysts are highly resistant to many chemical sanitizers. Methods used to determine oocyst infectivity have relied primarily on mouse, chicken, and feline bioassays. Although considered gold standards, they only provide a qualitative assessment of oocyst viability. In this study, two alternative approaches were developed to quantitate viable T. gondii oocysts following treatment with several common sanitizers. The first is a quantitative reverse transcriptase real-time PCR (RT-qPCR) assay targeting the ACT1 and SporoSAG genes to enumerate viable T. gondii oocysts. RT-qPCR C(T) values between Wescodyne(R), acidified ethanol, or heat treated oocysts were not significantly different as compared with untreated controls. By contrast, treatment with formalin or Clorox(R) resulted in a 2-log(10) reduction in C(T) values. An in vitro T. gondii oocyst plaque assay (TOP-assay) was also developed to measure oocyst viability. This assay used a combination of bead milling and bile digestion, followed by culturing the excysted sporozoites in a confluent fibroblast cell monolayer. Results showed that no significant reduction in sporozoite viability was detected in acidified ethanol or Wescodyne(R) treated oocysts while at least a 2-log(10) reduction in plaques formed was observed with Clorox(R) treated oocysts. Moreover, formalin or heat treatment of oocysts resulted in at least a 5-log(10) reduction in plaques formed. This study demonstrates that an mRNA-based PCR viability assay targeting the ACT1 or SporoSAG genes is a relatively rapid technique compared to in vitro and in vivo assays. In addition, the TOP-assay proved very effective and sensitive at quantifying oocyst viability when compared with animal bioassays.

Using quantitative reverse transcriptase PCR and cell culture plaque assays to determine resistance of Toxoplasma gondii oocysts to chemical sanitizers.

Toxoplasma gondii oocystes sont tr&#xE8;s r&#xE9;sistants &#xE0; de nombreux produits chimiques d&#xE9;sinfectants. Les m&#xE9;thodes utilis&#xE9;es pour d&#xE9;terminer l&#x26;#39;infectiosit&#xE9; des oocystes sont appuy&#xE9;s principalement sur la souris, le poulet, et des essais biologiques f&#xE9;lins. Bien que consid&#xE9;r&#xE9; comme l&#x26;#39;&#xE9;talon-or, ils ne fournissent une &#xE9;valuation qualitative de la viabilit&#xE9; des oocystes. Dans cette &#xE9;tude, deux approches alternatives ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;velopp&#xE9;es pour quantifier viables T. gondii oocystes apr&#xE8;s le traitement avec plusieurs d&#xE9;sinfectants communs. La premi&#xE8;re est une transcriptase inverse quantitative PCR en temps r&#xE9;el (RT-qPCR) test ciblant les g&#xE8;nes RET1 et SporoSAG d&#x26;#39;&#xE9;num&#xE9;rer viables T. gondii oocystes. RT-qPCR C (T) des valeurs comprises entre Wescodyne (R), l&#x26;#39;&#xE9;thanol acidifi&#xE9;, ou de chaleur oocystes trait&#xE9;s n&#x26;#39;&#xE9;taient pas significativement diff&#xE9;rents par rapport aux t&#xE9;moins non trait&#xE9;s. En revanche, le traitement avec du formol ou Clorox (R) a entra&#xEE;n&#xE9; une 2-log (10) de r&#xE9;duction de C (T) des valeurs. Une in vitro de T. gondii dosage de plaque d&#x26;#39;oocystes (TOP-test) a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;velopp&#xE9; pour mesurer la viabilit&#xE9; des oocystes. Ce test a utilis&#xE9; une combinaison de fraisage talon et la digestion bile, suivie par la culture des sporozo&#xEF;tes excysted dans une monocouche de cellules fibroblastes confluents. Les r&#xE9;sultats ont montr&#xE9; qu&#x26;#39;aucune r&#xE9;duction significative de la viabilit&#xE9; des sporozo&#xEF;tes a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9; dans de l&#x26;#39;&#xE9;thanol acidifi&#xE9; ou Wescodyne (R) des oocystes trait&#xE9;s tout au moins une r&#xE9;duction de 2 log (10) dans les plaques form&#xE9;es a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e avec Clorox (R) des oocystes trait&#xE9;s. En outre, le traitement au formol ou la chaleur d&#x26;#39;oocystes a fait au moins une r&#xE9;duction de 5 log (10) dans les plaques form&#xE9;es. Cette &#xE9;tude d&#xE9;montre que l&#x26;#39;ARNm d&#x26;#39;un dosage bas&#xE9; sur la viabilit&#xE9; PCR ciblant les g&#xE8;nes Act1 ou SporoSAG est une technique relativement rapide par rapport &#xE0; l&#x26;#39;in vitro et in vivo. En outre, le TOP-test s&#x26;#39;est av&#xE9;r&#xE9; tr&#xE8;s efficace et sensible &#xE0; quantifier la viabilit&#xE9; des oocystes par rapport &#xE0; des essais biologiques d&#x26;#39;origine animale.

Utilisation de la transcriptase inverse quantitative des dosages PCR et culture cellulaire Plaque pour d&#xE9;terminer la r&#xE9;sistance des oocystes de Toxoplasma gondii &#xE0; d&#xE9;sinfectants chimiques

Toxoplasma Gondii Oozysten sind sehr widerstandsf&auml;hig gegen viele chemische Sanitizers. Methoden zur Bestimmung der Oozyste Infektiosit&auml;t haben in erster Linie auf Maus, Huhn und katzenartige Bioassays verlassen. Obwohl Gold Standards, bieten sie nur eine qualitative Bewertung der Oozyste Lebensf&auml;higkeit. In dieser Studie wurden zwei alternative Ans&auml;tze entwickelt, um tragf&auml;hige T. Gondii Oozysten nach Behandlung mit mehreren gemeinsamen Sanitizers Quantifizierung. Die erste ist eine quantitative Reverse Transkriptase Echtzeit-PCR (RT-qPCR) Assay gezielt die Gene ACT1 und SporoSAG um tragf&auml;hige T. Gondii Oozysten aufzulisten. RT-qPCR C(T) Werte zwischen Wescodyne(R), ges&auml;uerte Ethanol oder w&auml;rmebehandelt Oozysten waren nicht signifikant im Vergleich zu unbehandelten Kontrollen. Behandlung mit Formalin oder Clorox(R) f&uuml;hrte hingegen eine Verringerung 2-log(10) C(T) Werte. Ein in-vitro-T. Gondii Oozyste Plakette Assay (TOP-Assay) wurde auch entwickelt, um Oozyste Lebensf&auml;higkeit zu messen. Diese Probe verwendet eine Kombination aus Perlen-Fr&auml;sen und Galle Verdauung, gefolgt von der Kultivierung der Excysted Sporozoites in einem konfluierende Fibroblast Zellen Monolage. Ergebnisse zeigten, dass keine signifikante Verringerung der Sporozoite Lebensf&auml;higkeit in anges&auml;uertem &Auml;thanol festgestellt oder Wescodyne(R) behandelt Oozysten w&auml;hrend mindestens einem 2-log(10) R&uuml;ckgang der Plaketten gebildet mit Clorox(R) beobachtet wurde behandelt Oozysten. Dar&uuml;ber hinaus f&uuml;hrte Formalin oder W&auml;rmebehandlung von Oozysten in mindestens einem 5-log(10) R&uuml;ckgang der Plaketten gebildet. Diese Studie zeigt, dass eine mRNA basierende PCR Entwicklungsf&auml;higkeit-Probe ACT1 oder SporoSAG Gene targeting eine relativ rasche Technik im Vergleich zur in-vitro- und in-vivo-Tests. Dar&uuml;ber hinaus erwies sich der TOP-Assay, sehr effektiv und sensibler auf die Quantifizierung der Oozyste Rentabilit&auml;t im Vergleich zu tierischen Bioassays.

Mit quantitative Reverse-Transkriptase-PCR und Zelle-Kultur-Plaque-Proben Widerstand von Toxoplasma Gondii Oozysten zu chemischen Sanitizers zu bestimmen.

Le oocisti di Toxoplasma gondii sono altamente resistenti a molti disinfettanti chimici. Metodi utilizzati per determinare l&#39;infettivit&agrave; di oocisti hanno contato principalmente sul mouse, pollo e biotest felino. Anche se considerato il gold standard, che forniscono solo una valutazione qualitativa della redditivit&agrave; di oocisti. In questo studio, sono stati sviluppati due approcci alternativi per quantificare vitali oocisti di T. gondii dopo il trattamento con disinfettanti comuni diversi. Il primo &egrave; un transcriptase d&#39;inversione quantitativa Real-Time PCR (RT-qPCR) dosaggio targeting dei geni ACT1 e SporoSAG per enumerare vitali oocisti di T. gondii. RT-qPCR c (t) i valori tra Wescodyne(R), acidificato etanolo o trattate termicamente oocisti non erano significativamente differenti rispetto ai controlli non trattati. Al contrario, trattamento con formalina o Clorox(R) ha provocato una riduzione dei valori di c (t) 2-log(10). Un&#39;analisi in vitro T. gondii oocisti placca (TOP-saggio) &egrave; stata sviluppata anche per misurare la redditivit&agrave; di oocisti. Questo dosaggio utilizzato una combinazione di digestione fresatura e bile perlina, seguita da coltura gli sporozoiti excysted in un monostrato di cellule confluenti del fibroblasto. I risultati hanno mostrato che nessuna riduzione significativa redditivit&agrave; sporozoite &egrave; stato rilevato in etanolo acidificato o Wescodyne(R) trattati oocisti mentre &egrave; stata osservata almeno una riduzione 2-log(10) in placche formate con Clorox(R) trattati oocisti. Inoltre, formalina o trattamento termico di oocisti ha provocato almeno una riduzione 5-log(10) in placche formate. Questo studio dimostra che un mRNA-based PCR targeting dei geni ACT1 o SporoSAG &egrave; una tecnica relativamente rapida rispetto ai saggi in vitro e in vivo. Inoltre, il TOP-saggio si dimostr&ograve; molto efficace e sensibile a quantificare la redditivit&agrave; oocisti quando confrontato con analisi biologiche animali.

Utilizzando quantitativi reverse transcriptase PCR e cellula placca cultura dosaggi per determinare la resistenza delle oocisti di Toxoplasma gondii a disinfettanti chimici.

&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x6D88;&#x6BD2;&#x5264;&#x306B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x8010;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;&#x30CB;&#x30EF;&#x30C8;&#x30EA;&#x3001;&#x30CD;&#x30B3;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x983C;&#x3063;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x91D1;&#x306E;&#x6A19;&#x6E96;&#x3068;&#x898B;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x3060;&#x3051;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x306E;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x306A;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x6D88;&#x6BD2;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C;&#x306B;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x5217;&#x6319;&#x3059;&#x308B;ACT1&#x3068;SporoSAG&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;PCR&#xFF08;RT-QPCR&#xFF09;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; RT-qPCR&#x306B;C&#xFF08;T&#xFF09;Wescodyne&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x5024;&#xFF08;R&#xFF09;&#x3001;&#x9178;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x30A8;&#x30BF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x71B1;&#x51E6;&#x7406;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x672A;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x5BFE;&#x7167;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30DB;&#x30EB;&#x30DE;&#x30EA;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;R&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;&#x3001;C&#xFF08;T&#xFF09;&#x5024;&#x306E;2  - &#x30ED;&#x30B0;&#xFF08;10&#xFF09;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#xFF08;TOP-&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#xFF09;&#x306B;&#x3082;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x5358;&#x5C64;&#x3067;&#x8131;&#x56A2;&#x3057;&#x305F;&#x30B9;&#x30DD;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x304C;&#x7D9A;&#x3044;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x30DF;&#x30EB;&#x3084;&#x80C6;&#x6C41;&#x3001;&#x6D88;&#x5316;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;2&#x30ED;&#x30B0;&#xFF08;10&#xFF09;&#x6E1B;&#x5C11;&#x304C;&#x30AF;&#x30ED;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;R&#xFF09;&#x51E6;&#x7406;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B9;&#x30DD;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x304C;&#x9178;&#x6027;&#x30A8;&#x30BF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;Wescodyne&#xFF08;R&#xFF09;&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x305F;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x30DB;&#x30EB;&#x30DE;&#x30EA;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x71B1;&#x51E6;&#x7406;&#x306F;&#x3001;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;5&#x30ED;&#x30B0;&#xFF08;10&#xFF09;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;ACT1&#x307E;&#x305F;&#x306F;SporoSAG&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;mRNA&#x306E;PCR&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x6280;&#x8853;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;TOP-&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x304B;&#x3064;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x8A3C;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x5316;&#x5B66;&#x6D88;&#x6BD2;&#x306B;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;PCR&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;

Toxoplasma gondii oocysts&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xD654;&#xD559; &#xC18C;&#xB3C5; &#xC81C;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAC15;&#xD558;&#xB2E4;. Oocyst infectivity &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;, &#xB2ED;, &#xACE0;&#xC591;&#xC774; bioassays&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC758;&#xC874; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACE8;&#xB4DC; &#xD45C;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB2E8;&#xC9C0; oocyst &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC758; &#xC9C8;&#xC801; &#xD3C9;&#xAC00; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB300;&#xCCB4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xB2E4;&#xC74C;&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC0B4; &#xADE0; &#xC81C;&#xC640; &#xCE58;&#xB8CC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; T. gondii oocysts quantitate&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC5F4;&#xAC70; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; T. gondii oocysts ACT1 &#xBC0F; SporoSAG &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xB7C9; &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR (RT qPCR) &#xC2DC;&#xD5D8; &#xC774;&#xB2E4;. RT qPCR C(T) &#xAC12;&#xC774; Wescodyne(R), acidified &#xC5D0;&#xD0C4;&#xC62C; &#xB610;&#xB294; &#xC5F4; &#xCC98;&#xB9AC; oocysts &#xC0AC;&#xC774; &#xCE58;&#xB8CC; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xD3EC; &#xB974; &#xB9D0;&#xB9B0; &#xB610;&#xB294; Clorox(R) &#xCE58;&#xB8CC; C(T) &#xAC12;&#xC5D0; 2-log(10) &#xAC10;&#xC18C; &#xACB0;&#xACFC;. &#xCCB4; &#xC678; T. gondii oocyst &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C; &#xC2DC;&#xD5D8; (&#xC704;&#xCABD;-&#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;) &#xB610;&#xD55C; oocyst &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; confluent fibroblast &#xC138;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xCE35;&#xC5D0; excysted sporozoites &#xBC30;&#xC591; &#xC774;&#xC5B4;&#xC11C; &#xBE44;&#xB4DC; &#xBC00;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xB2F4; &#xC999; &#xC18C;&#xD654;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4; acidified &#xC5D0;&#xD0C4;&#xC62C; sporozoite &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C;&#xB294; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB610;&#xB294; Wescodyne(R) &#xCE58;&#xB8CC; oocysts &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 2-log(10) &#xAC10;&#xC18C; clorox(r)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; oocysts &#xCDE8;&#xAE09;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD3EC; &#xB974; &#xB9D0;&#xB9B0; &#xB610;&#xB294; &#xC5F4; &#xCC98;&#xB9AC; oocysts &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 5-log(10) &#xAC10;&#xC18C; &#xACB0;&#xACFC;. &#xC774; &#xD559;&#xBB38;&#xC740; &#xC124;&#xBA85; &#xD55C;&#xB2E4; mRNA &#xAE30;&#xBC18; PCR &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xBD84;&#xC11D; ACT1 &#xB610;&#xB294; SporoSAG &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE60;&#xB978; &#xAE30;&#xC220; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC704; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xB3D9;&#xBB3C; bioassays&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; oocyst &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC785;&#xC99D; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xD654;&#xD559; &#xC18C;&#xB3C5; &#xC81C;&#xC5D0; Toxoplasma gondii oocysts&#xC758; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC815;&#xB7C9; &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; PCR &#xBC0F; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; &#xD328;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;.

Ooquistes de Toxoplasma gondii son altamente resistentes a muchos desinfectantes qu&#xED;micos. Los m&#xE9;todos utilizados para determinar la infectividad de ooquistes se han basado principalmente en el rat&#xF3;n, el pollo, y bioensayos de felinos. Aunque se consideran las normas de oro, que s&#xF3;lo proporcionan una evaluaci&#xF3;n cualitativa de la viabilidad de los ooquistes. En este estudio, dos enfoques alternativos se han desarrollado para cuantificar viables de T. gondii ooquistes despu&#xE9;s del tratamiento con varios desinfectantes comunes. La primera es una transcriptasa inversa cuantitativa en tiempo real PCR (RT-PCR cuantitativa) de ensayo dirigido a los genes ACT1 y SporoSAG para enumerar viables de T. gondii ooquistes. RT-qPCR C (T) valores entre Wescodyne (R), etanol acidificado, o calor oocistos tratados no fueron significativamente diferentes en comparaci&#xF3;n con los controles no tratados. Por el contrario, el tratamiento con formalina o Clorox (R) result&#xF3; en un 2-log (10) reducci&#xF3;n en C (T) valores. Una in vitro de T. gondii ensayo de placa de ooquistes (TOP-ensayo) tambi&#xE9;n fue desarrollado para medir la viabilidad de los ooquistes. Este ensayo utiliza una combinaci&#xF3;n de molienda con perlas y la digesti&#xF3;n biliar, seguido por cultivo de los esporozoitos excysted en una monocapa de c&#xE9;lulas de fibroblastos confluente. Los resultados mostraron que ninguna reducci&#xF3;n significativa en la viabilidad esporozoito se detect&#xF3; en etanol acidificado o Wescodyne (R) oocistos tratados mientras que al menos una reducci&#xF3;n de 2-log (10) en las placas formadas se observ&#xF3; con Clorox (R) oocistos tratados. Adem&#xE1;s, el tratamiento con formalina o calor de ooquistes result&#xF3; en al menos una reducci&#xF3;n de 5-log (10) en placas formadas. Este estudio demuestra que un ensayo basado en la PCR ARNm viabilidad orientaci&#xF3;n de los genes ACT1 o SporoSAG es una t&#xE9;cnica relativamente r&#xE1;pida en comparaci&#xF3;n con in vitro y en ensayos in vivo. Adem&#xE1;s, el TOP-ensayo demostrado ser muy eficaz y sensible a la cuantificaci&#xF3;n de la viabilidad de ooquistes cuando se compara con los bioensayos animales.

Uso de la transcriptasa reversa cuantitativa de PCR y ensayos en cultivos celulares de placa para determinar la resistencia de los ooquistes de Toxoplasma gondii a los desinfectantes qu&#xED;micos

&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x5BF9;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x7167;&#x5C04;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x5C1A;&#x672A;&#x5B8C;&#x5168;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7528;&#x4E8E;&#x6C34;&#x6D88;&#x6BD2;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x4E09;&#x79CD;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x7167;&#x5C04;&#x866B;&#x5375;&#xFF1A; SCID &#x5C0F;&#x9F20;&#x751F;&#x7269;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3001; &#x4F53;&#x5916; T.&#x866B;&#x56CA;&#x6591; &#xFF08;&#x9876;&#x90E8;&#xFF09; &#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94; (RT-qPCR&#xFF09; &#x5B9E;&#x65F6;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;&#x4ECE;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5; 1 &#x548C; 3-log(10) &#x7684;&#x706D;&#x6D3B;&#x5206;&#x522B;&#x53D6;&#x5F97; 4 mJ/cm(2) UV&#x3001; 10 mJ/cm(2) &#x4F4E;&#x538B; UV&#x3001;&#x3002;&#x9876;&#x90E8;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; RT qPCR &#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x4E0E;&#x751F;&#x7269;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7ED3;&#x679C;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;T.&#x866B;&#x866B;&#x5375; 3-log(10) &#x706D;&#x6D3B;&#x901A;&#x8FC7; 10-mJ/cm(2) &#x4F4E;&#x538B;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x9876;&#x90E8;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x662F;&#x6709;&#x5E0C;&#x671B;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x9F20;&#x6807;&#x751F;&#x7269;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;

&#x786E;&#x5B9A;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x548C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x751F;&#x7269;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x706D;&#x6D3B;&#x7684;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x866B;&#x5375;&#x3002;

The effect of UV exposure on Toxoplasma gondii oocysts has not been completely defined for use in water disinfection. This study evaluated UV-irradiated oocysts by three assays: a SCID mouse bioassay, an in vitro T. gondii oocyst plaque (TOP) assay, and a quantitative reverse transcriptase real-time PCR (RT-qPCR) assay. The results from the animal bioassay show that 1- and 3-log(10) inactivation is achieved with 4 mJ/cm(2) UV and 10 mJ/cm(2) low-pressure UV, respectively. TOP assay results, but not RT-qPCR results, correlate well with bioassay results. In conclusion, a 3-log(10) inactivation of T. gondii oocysts is achieved by 10-mJ/cm(2) low-pressure UV, and the in vitro TOP assay is a promising alternative to the mouse bioassay.

Determining UV inactivation of Toxoplasma gondii oocysts by using cell culture and a mouse bioassay.

L&#x26;#39;effet de l&#x26;#39;exposition aux UV sur les oocystes de Toxoplasma gondii n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; compl&#xE8;tement d&#xE9;fini pour une utilisation dans la d&#xE9;sinfection de l&#x26;#39;eau. Cette &#xE9;tude a &#xE9;valu&#xE9; UV-irradi&#xE9;s oocystes par trois essais: un essai biologique sur souris SCID, un essai in vitro T. gondii oocystes plaque (TOP) test, et une transcriptase inverse quantitative PCR en temps r&#xE9;el (RT-qPCR) dosage. Les r&#xE9;sultats de l&#x26;#39;exp&#xE9;rimentation animale montrent que 1 - et 3-log (10) l&#x26;#39;inactivation est r&#xE9;alis&#xE9;e avec 4 mJ / cm (2) UV et 10 mJ / cm (2) &#xE0; basse pression UV, respectivement. Les r&#xE9;sultats d&#x26;#39;analyse TOP, mais pas de RT-qPCR r&#xE9;sultats, une bonne corr&#xE9;lation avec les r&#xE9;sultats des essais biologiques. En conclusion, un 3-log (10) l&#x26;#39;inactivation des oocystes de T. gondii est r&#xE9;alis&#xE9; par 10-mJ/cm (2) &#xE0; basse pression UV, et le dosage in vitro TOP est une alternative prometteuse &#xE0; l&#x26;#39;essai biologique sur souris.

D&#xE9;terminer l&#x26;#39;inactivation des oocystes UV Toxoplasma gondii par culture cellulaire et d&#x26;#39;un essai biologique sur souris

Die Wirkung der UV-Exposition auf Toxoplasma Gondii Oozysten wurde f&uuml;r den Einsatz im Wasserdesinfektion nicht vollst&auml;ndig definiert. Diese Studie UV-bestrahltes Oozysten von drei Proben ausgewertet: ein SCID-Maus-Bioassay, eines in vitro T. Gondii Oozyste Plakette (oben) Tests und eine quantitative Reverse Transkriptase Echtzeit-PCR (RT-qPCR) Assay. Die Ergebnisse aus tierischen Bioassays zeigen, dass die Inaktivierung von 1- und 3-log(10) mit 4 mJ/cm(2), UV- und 10 mJ/cm(2) Niederdruck UV, bzw. erreicht wird. TOP Untersuchungsergebnisse, aber nicht RT-qPCR Ergebnisse korrelieren gut mit Bioassay Ergebnisse. Abschlie&szlig;end eine Inaktivierung der 3-log(10) von T. Gondii Oozysten erfolgt durch 10-mJ/cm(2) Niederdruck UV und der in-vitro-TOP-Assay ist eine vielversprechende Alternative zu den Maus-Bioassay.

Bestimmen mithilfe von Zellkultur und ein Maus-Bioassay UV Inaktivierung von Toxoplasma Gondii Oozysten.

L&#39;effetto dell&#39;esposizione ai raggi UV su oocisti di Toxoplasma gondii non &egrave; stato completamente definito per l&#39;uso nella disinfezione dell&#39;acqua. Questo studio ha valutato le oocisti UV-irradiati da tre saggi: un biotest SCID, un&#39;analisi in vitro T. gondii oocisti placca (in alto) e un dosaggio di transcriptase d&#39;inversione quantitativa Real-Time PCR (RT-qPCR). I risultati di analisi biologica animale mostrano che tale inattivazione 1 e 3-log(10) &egrave; raggiunto con 4 mJ/cm(2) UV e UV a bassa pressione di 10 mJ/cm(2), rispettivamente. Risultati alto dosaggio, ma non risultati RT-qPCR, correlano bene con risultati di analisi biologica. In conclusione, un&#39;inattivazione 3-log(10) di T. gondii oocisti &egrave; raggiunto da 10-mJ/cm(2) UV a bassa pressione, e l&#39;analisi in vitro TOP &egrave; una promettente alternativa per il biotest.

Determinare inattivazione UV di oocisti di Toxoplasma gondii mediante coltura cellulare e un biotest.

&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x7D2B;&#x5916;&#x7DDA;&#x200B;&#x200B;&#x66DD;&#x9732;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6C34;&#x306E;&#x6D88;&#x6BD2;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; SCID&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#xFF08;TOP&#xFF09;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;PCR&#xFF08;RT-QPCR&#xFF09;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#xFF1A;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;3&#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;UV&#x7167;&#x5C04;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x305D;&#x306E;1&#x306E;&#x7D50;&#x679C; - &#x304A;&#x3088;&#x3073;3  - &#x30ED;&#x30B0;&#xFF08;10&#xFF09;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;4 MJ / CM&#xFF08;2&#xFF09;UV&#x3001;10 MJ / CM&#xFF08;2&#xFF09;&#x4F4E;&#x5727;UV&#x3092;&#x5B9F;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; TOP&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;RT-&#x5B9A;&#x91CF;PCR&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3088;&#x304F;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;3&#x30ED;&#x30B0;&#xFF08;10&#xFF09;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;10-mJ/cm&#xFF08;2&#xFF09;&#x4F4E;&#x5727;UV&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vitro TOP&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x4EE3;&#x66FF;&#x624B;&#x6BB5;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;UV&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;

Toxoplasma gondii oocysts&#xC5D0; &#xC790;&#xC678;&#xC120; &#xB178;&#xCD9C;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5; &#xBB3C; &#xC18C;&#xB3C5;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC815;&#xC758; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; UV &#xBC18;&#xAD6C; oocysts &#xD3C9;&#xAC00;: SCID &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; bioassay, &#xCCB4; &#xC678; T. gondii oocyst &#xD328; (&#xB9E8; &#xC704;) &#xBD84;&#xC11D;, &#xBC0F; &#xC815;&#xB7C9; &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR (RT qPCR) &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;. &#xB3D9;&#xBB3C; bioassay&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC; 1-&#xBC0F; 3-log(10) &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; &#xAC01;&#xAC01; 4 mJ/cm(2) UV&#xC640; 10 mJ/cm(2) &#xC800;&#xC555; UV&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xACE0; &#xC2DC;&#xD5D8; &#xACB0;&#xACFC;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; RT qPCR &#xACB0;&#xACFC; bioassay &#xACB0;&#xACFC; &#xC798; &#xC0C1;&#xAD00;. &#xB05D;&#xC73C;&#xB85C;, T. gondii oocysts&#xC758; 3-log(10) &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; 10-mJ/cm(2) &#xC800;&#xC555; UV&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xCCB4; &#xC678; &#xCD5C;&#xACE0; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; bioassay&#xC5D0; &#xC720;&#xB9DD;&#xD55C; &#xB300;&#xC548; &#xC774;&#xB2E4;.

&#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591; &#xBC0F; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; bioassay &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; Toxoplasma gondii oocysts&#xC758; UV &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El efecto de la exposici&#xF3;n UV en ooquistes de Toxoplasma gondii no ha sido completamente definidos para su uso en la desinfecci&#xF3;n del agua. Este estudio evalu&#xF3; la radiaci&#xF3;n UV-irradiados ooquistes por tres ensayos: un bioensayo en ratones SCID, una placa in vitro de ooquistes de T. gondii (TOP) de ensayo, y una transcriptasa inversa cuantitativa en tiempo real PCR (RT-qPCR). Los resultados de la serie de bioensayo animal que 1 - y 3-log (10) inactivaci&#xF3;n se consigue con 4 mJ / cm (2) UV y 10 mJ cm / (2) de baja presi&#xF3;n UV, respectivamente. TOP resultados del ensayo, pero no de RT-qPCR resultados, se correlacionan bien con los resultados del bioensayo. En conclusi&#xF3;n, un 3-log (10) la inactivaci&#xF3;n de T. gondii ooquistes se logra 10-mJ/cm (2) bajo la presi&#xF3;n de los rayos UV, y el ensayo TOP in vitro es una alternativa prometedora para el bioensayo en ratones.

La determinaci&#xF3;n de la inactivaci&#xF3;n UV de los ooquistes de Toxoplasma gondii mediante cultivo celular y un bioensayo en ratones

&#x5207;&#x5411;&#x6D41;&#x4E2D;&#x7A7A;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8D85;&#x6EE4; &#xFF08;HFUF&#xFF09; &#x662F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x548C;&#x9690;&#x5B62;&#x5B50;&#x866B;&#x5B62;&#x5B50;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4ECE;&#x6C34;&#x8BC4;&#x4F30;&#x3002;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5728;&#x4F4E;&#x6EE4;&#x8FC7;&#x7387;&#x6062;&#x590D;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x662F;&#x660E;&#x663E;&#x8981;&#x6BD4;&#x5728;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x6EE4;&#x8FC7;&#x7387;&#xFF0C;&#x56DE;&#x6536;&#x7387;&#x7684;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53; MS2 &#x5728;&#x9AD8;&#x3001; &#x4F4E;&#x8FC7;&#x6EE4;&#x7387;&#x6240;&#x793A;&#x5206;&#x522B;&#x4E3A; 64.7%&#x548C; 98.7%&#x3002;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6062;&#x590D;&#x4ECE;&#x81EA;&#x6765;&#x6C34;&#x8FC7;&#x6EE4;&#x7684;&#x7387;&#x9AD8;&#x548C;&#x4F4E;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; MS2&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6062;&#x590D;&#x7684; 62.9%&#x548C; 104.5%&#x3002;C.&#x5B62;&#x5B50;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x5728;&#x9AD8;&#x6EE4;&#x6C34;&#x7387;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4E86;&#x5E73;&#x5747;&#x6062;&#x590D;&#x4E3A; 105.1%&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x4E3B;&#x6D53;&#x5EA6;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x4F18;&#x5316;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD8;&#x6BD4;&#x8F83;&#x4E2D;&#x7B49;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6B65;&#x9AA4;&#x3002;&#x725B;&#x8089;&#x63D0;&#x53D6;&#x7269;&#x7845;&#x85FB;&#x571F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x90FD;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E86;&#x548C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4ECE;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x7F13;&#x51B2;&#x76D0;&#x6C34;&#xFF0C;ph &#x503C; 9.0 &#x7845;&#x85FB;&#x571F;&#x6D17;&#x8131;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5C06;&#x83B7;&#x5F97;&#x4ECE;&#x81EA;&#x6765;&#x6C34;&#x7CBE;&#x77FF;&#x6700;&#x9AD8;&#x56DE;&#x6536; (89.5%) &#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4F20;&#x64AD;&#x3002;HFUF &#x4E3B;&#x8981;&#x96C6;&#x4E2D;&#x548C;&#x4F18;&#x5316;&#x4E2D;&#x7B49;&#x6D53;&#x5EA6;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F7F;&#x7528;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5E73;&#x5747;&#x6062;&#x590D; 97.0 &plusmn; 35.6%&#x6216; 89.3 &plusmn; 19.3%&#xFF0C;&#x6839;&#x636E;&#x7A57;&#x7EA7;&#x522B;&#xFF0C;&#x5B9E;&#x73B0;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4F20;&#x64AD;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; HFUF &#x4E3B;&#x8981;&#x96C6;&#x4E2D;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x6709;&#x6548;&#x7684; MS2&#x3001; &#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x548C; C.&#x5B62;&#x5B50;&#x56DE;&#x6536;&#x5927;&#x91CF;&#x6C34;&#x725B;&#x8089;&#x63D0;&#x53D6;&#x7269;&#x7845;&#x85FB;&#x571F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x4E2D;&#x7B49;&#x6D53;&#x5EA6;&#x810A;&#x9AD3;&#x7070;&#x8D28;&#x708E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x65B9;&#x6CD5; &#x300B;&#x3002;

&#x4E2D;&#x7A7A;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8D85;&#x6EE4;&#x4E3B;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x548C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4ECE;&#x6C34;&#x4E2D;&#x7B49;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x3002;

Tangential flow hollow-fiber ultrafiltration (HFUF) was evaluated for virus and Cryptosporidium parvum concentration from water. Recovery of viruses at a low filtration rate was found to be significantly greater than at a higher filtration rate, with the recoveries of bacteriophage MS2 at high and low filtration rates shown to be 64.7% and 98.7%, respectively. Poliovirus recoveries from tap water were similar to MS2, with recoveries of 62.9% and 104.5% for high and low filtration rates, respectively. C. parvum, which was only tested at high filtration rates, had an average recovery was 105.1%. In addition to the optimization of the primary concentration technique, this study also compared several secondary concentration procedures. The highest recovery (89.5%) of poliovirus from tap water concentrates was obtained when a beef extract-celite method was used and the virus was eluted from the celite with phosphate buffered saline, pH 9.0. When HFUF primary concentration and the optimal secondary concentration methods were combined, an average recovery of 97.0 Â± 35.6% or 89.3 Â± 19.3%, depending on spike level, was achieved for poliovirus. This study demonstrated that HFUF primary concentration method is effective at recovering MS2, poliovirus and C. parvum from large volumes of water and that beef extract-celite method is an effective secondary concentration method for the poliovirus tested.

Evaluation of hollow-fiber ultrafiltration primary concentration of pathogens and secondary concentration of viruses from water.

Ultrafiltration en fibres creuses tangentiels (HFUF) a &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;e pour les virus et Cryptosporidium parvum concentration de l&#39;eau. R&eacute;cup&eacute;ration de virus &agrave; un taux faible de filtration s&#39;est av&eacute;r&eacute;e pour &ecirc;tre significativement plus &eacute;lev&eacute;e &agrave; un taux plus &eacute;lev&eacute; de filtration, avec les r&eacute;cup&eacute;rations du bact&eacute;riophage MS2 &agrave; haute et basse de filtration taux indiqu&eacute;e &agrave; 64,7 % et 98,7 %, respectivement. Recouvrements de poliovirus d&#39;eau du robinet &eacute;taient semblables &agrave; MS2, avec recouvrements de 62,9 % et 104,5 % pour haut et bas taux de filtration, respectivement. C. parvum, qui a &eacute;t&eacute; test&eacute;e uniquement au taux de filtration &eacute;lev&eacute;e, avait une moyenne &eacute;tait de r&eacute;cup&eacute;ration 105,1 %. En plus de l&#39;optimisation de la technique de concentration primaire, cette &eacute;tude a aussi compar&eacute; diverses m&eacute;thodes de concentration secondaire. Le recouvrement plus &eacute;lev&eacute; (89,5 %) du poliovirus de concentr&eacute;s d&#39;eau du robinet a &eacute;t&eacute; obtenu lorsqu&#39;une boeuf extrait-C&eacute;lite m&eacute;thode a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e et le virus a &eacute;t&eacute; &eacute;lu&eacute; de la C&eacute;lite avec la solution saline tamponn&eacute;e au phosphate, pH 9,0. Lorsque la concentration principale HFUF et les m&eacute;thodes de concentration optimale en secondaire ont &eacute;t&eacute; combin&eacute;es, un moyen de r&eacute;cup&eacute;ration de 97,0 &plusmn; 35,6 % ou &plusmn; 89,3 19,3 %, selon le niveau de pointe, a &eacute;t&eacute; atteint pour les poliovirus. Cette &eacute;tude a d&eacute;montr&eacute; que HFUF concentration principale m&eacute;thode est efficace &agrave; r&eacute;cup&eacute;rer MS2, antipoliomy&eacute;litique et C. parvum de grandes quantit&eacute;s d&#39;eau, et cette m&eacute;thode de C&eacute;lite-extrait de boeuf est une m&eacute;thode de concentration secondaire efficace pour le poliovirus test&eacute;.

&Eacute;valuation de la concentration primaire d&#39;ultrafiltration en fibres creuses des pathog&egrave;nes et secondaire concentration du virus dans l&#39;eau.

Tangentialen Fluss Mulde-Faser Ultrafiltration (HFUF) wurde f&uuml;r Viren- und Cryptosporidium Parvum Konzentration von Wasser ausgewertet. Verwertung von Viren auf eine niedrige Filtrationsrate erwies sich deutlich gr&ouml;&szlig;er als bei einer h&ouml;heren Filtrationsrate mit den Wiederherstellungen der Bakteriophage MS2 bei hoch und niedrig, dass Filtrierung gezeigt auf 64,7 % bzw. 98,7 %, Preise. Polioviren Wiederherstellungen von Leitungswasser &auml;hnelten MS2, mit R&uuml;ckforderungen von 62,9 % und 104,5 % f&uuml;r hohe und niedrige Filtrierung, bzw. Preise. C. Parvum, die nur auf hohe Preise getestet wurde, waren durchschnittlich Wiederherstellung war 105,1 %. Neben der Optimierung der Technik prim&auml;re Konzentration verglichen diese Studie auch mehrere sekund&auml;re Konzentration Verfahren. Die h&ouml;chste Erholung (89,5 %) des Poliovirus aus Leitungswasser Konzentrate wurde erhalten, wenn eine Rindfleisch-Extrakt-Celite-Methode verwendet wurde und das Virus wurde aus der Celite mit phosphatgepufferter Kochsalzl&ouml;sung, pH-Wert 9.0 eluiert. Wenn HFUF prim&auml;re Konzentration und die optimale sekund&auml;re Konzentration Methoden kombiniert wurden, wurde eine durchschnittliche Recovery 97,0 &plusmn; 35,6 % oder 89,3 &plusmn; 19,3 %, je nach Spitze f&uuml;r Polioviren erreicht. Diese Studie zeigte, dass HFUF prim&auml;re Konzentration Methode effektiv ist bei der Wiederherstellung von MS2, Polioviren und C. Parvum aus gro&szlig;e Mengen an Wasser und die Rindfleisch-Extrakt-Celite-Methode eine wirksame sekund&auml;re Konzentration-Methode f&uuml;r die Polioviren getestet ist.

Evaluierung der Mulde-Faser Ultrafiltration prim&auml;re Konzentration von Krankheitserregern und sekund&auml;ren Konzentration von Viren aus dem Wasser.

Ultrafiltrazione hollow-fibra di flusso tangenziale (HFUF) &egrave; stata valutata per virus e Cryptosporidium parvum concentrazione dall&#39;acqua. Recupero di virus ad un tasso basso di filtrazione &egrave; stato trovato per essere significativamente maggiore rispetto a un pi&ugrave; alto tasso di filtrazione, con i recuperi del batteriofago MS2 a alti e bassi tassi di filtrazione indicato per essere 64,7% e 98,7%, rispettivamente. Recuperi di poliovirus da acqua del rubinetto erano simili a MS2, con recuperi di 62,9% e % 104,5 per alta e bassa velocit&agrave; di filtrazione, rispettivamente. C. parvum, che &egrave; stato testato solo a tariffe alta filtrazione, aveva una media recupero era 105,1%. Oltre l&#39;ottimizzazione della tecnica di concentrazione primario, questo studio ha confrontato anche diverse procedure di concentrazione secondaria. Quando &egrave; stato utilizzato un metodo di celite Estratto di carne bovina e il virus &egrave; stato eluito dalla celite con soluzione salina tamponata con fosfato, pH 9.0, &egrave; stato ottenuto il recupero pi&ugrave; alto (89,5%) del poliovirus da concentrati di acqua di rubinetto. Quando HFUF concentrazione primario e i metodi di concentrazione ottimale secondaria sono stati combinati, un recupero medio di 97,0 &plusmn; 35,6% o &plusmn; 89,3 19,3%, a seconda del livello di picco, &egrave; stato raggiunto per poliovirus. Questo studio ha dimostrato che HFUF concentrazione primario metodo &egrave; efficacia al recupero di MS2, poliovirus e C. parvum da grandi volumi di acqua e quel metodo di celite Estratto di carne bovina &egrave; un metodo efficace concentrazione secondaria per il poliovirus testato.

Valutazione di ultrafiltrazione hollow-fibra primaria concentrazione di agenti patogeni e concentrazione secondaria di virus da acqua.

&#x63A5;&#x7DDA;&#x6D41;&#x4E2D;&#x7A7A;&#x7CF8;&#x9650;&#x5916;&#x308D;&#x904E; &#xFF08;HFUF&#xFF09; &#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3068;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x6C34;&#x304B;&#x3089;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x56DE;&#x5FA9;&#x4F4E;&#x308D;&#x904E;&#x901F;&#x5EA6;&#x3067;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x9AD8;&#x4F4E;&#x308D;&#x904E;&#x306F; 64.7 &#xFF05; &#x3068; 98.7 &#xFF05;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6599;&#x91D1;&#x306F;&#x9AD8;&#x3044;&#x308D;&#x904E;&#x7387;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; MS2 &#x3067;&#x306E;&#x56DE;&#x53CE;&#x7387;&#x3067;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x308D;&#x904E;&#x7387;&#x306E;&#x9AD8;&#x4F4E;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x6C34;&#x9053;&#x6C34;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30EA;&#x30AB;&#x30D0;&#x30EA; MS2 &#x306B;&#x985E;&#x4F3C; 62.9% &#x3068; 104.5% &#x30EA;&#x30AB;&#x30D0;&#x30EA;&#x3092;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x306E;&#x307F;&#x9AD8;&#x6FFE;&#x904E;&#x7387;&#x3067;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3001;C. &#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3044;&#x305F;&#x5E73;&#x5747;&#x56DE;&#x5FA9; 105.1% &#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30BB;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E3;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x9AD8;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9; (89.5%) &#x30DD;&#x30EA;&#x30AA; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x6C34;&#x9053;&#x6C34;&#x306E;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x725B;&#x8089;&#x30A8;&#x30AD;&#x30B9; &#x30BB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C8; &#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x304C;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x7DE9;&#x885D;&#x751F;&#x7406;&#x98DF;&#x5869;&#x6C34;&#x3001;pH 9.0 &#x30BB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x6EB6;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;HFUF &#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x30BB;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x304C;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3001;97.0 &plusmn; 35.6% &#x307E;&#x305F;&#x306F; 89.3 &plusmn; 19.3% &#x30B9;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AF; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x5E73;&#x5747;&#x56DE;&#x5FA9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x5B9F;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;HFUF &#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x304B;&#x3089;&#x5927;&#x91CF;&#x306E;&#x6C34;&#x306E; MS2&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AA; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304A;&#x3088;&#x3073; C &#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306B;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x3067;&#x3059;&#x725B;&#x8089;&#x30A8;&#x30AD;&#x30B9; &#x30BB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C8; &#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9; &#x30C6;&#x30B9;&#x30C8; &#x30DD;&#x30EA;&#x30AA; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x4E8C;&#x6B21;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x6CD5;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3002;

&#x6C34;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x9650;&#x5916;&#x308D;&#x904E;&#x4E2D;&#x7A7A;&#x7CF8;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x30BB;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x306E;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3002;

&#xC811;&#xC120; &#xD750;&#xB984; &#xC18D;&#xC774; &#xBE48; &#xC12C;&#xC720; &#xD55C; (HFUF) &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBC0F; &#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6C0; parvum &#xB18D;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xBC1B;&#xC558;&#xB2E4;. &#xB0AE;&#xC740; &#xC5EC;&#xACFC; &#xC18D;&#xB3C4;&#xB85C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xB192;&#xACE0; &#xB0AE;&#xC740; &#xC5EC;&#xACFC; &#xC18D;&#xB3C4; &#xAC01;&#xAC01; 64.7%, 98.7% &#xB418;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC624;&#xD30C;&#xC9C0; ms2&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xC5EC;&#xACFC; &#xC18D;&#xB3C4;&#xB85C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xD070; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. &#xC218;&#xB3D7;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xB192;&#xACE0; &#xB0AE;&#xC740; &#xC5EC;&#xACFC; &#xC18D;&#xB3C4;, &#xAC01;&#xAC01; 62.9%, 104.5%&#xC758; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC640; MS2, &#xC720;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB192;&#xC740; &#xC5EC;&#xACFC; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xB9CC;, C. parvum &#xD588;&#xB2E4; &#xD3C9;&#xADE0; &#xBCF5;&#xAD6C; 105.1% &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xBCF8; &#xB18D;&#xB3C4; &#xAE30;&#xC220; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBCF4;&#xC870; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC808;&#xCC28; &#xBE44;&#xAD50;. &#xC218;&#xB3C4; &#xBB3C; &#xAD11;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB192;&#xC740; &#xBCF5;&#xAD6C; (89.5%) &#xB54C; &#xC1E0;&#xACE0;&#xAE30; &#xCD94;&#xCD9C; celite &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB294; &#xBC84;&#xD37C;&#xB9C1; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xBD84;, pH 9.0&#xC73C;&#xB85C; celite&#xC5D0;&#xC11C; eluted &#xC5BB;&#xC740; &#xD588;&#xB2E4;. HFUF &#xAE30;&#xBCF8; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xBCF4;&#xC870; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBC29;&#xBC95; &#xACB0;&#xD569; &#xB418;&#xC5C8;&#xC744; &#xB54C; 97.0 &plusmn; 35.6% &#xB610;&#xB294; &#xC2A4;&#xD30C;&#xC774;&#xD06C; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; 89.3 &plusmn; 19.3%&#xC758; &#xD3C9;&#xADE0; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2EC;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; HFUF &#xAE30;&#xBCF8; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xBB3C;&#xC758; &#xD070; &#xBCFC;&#xB968;&#xC5D0;&#xC11C; MS2, &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44;&#xC640; C. parvum &#xD68C;&#xBCF5;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801; &#xC774;&#xBA70; &#xADF8; &#xC1E0;&#xACE0;&#xAE30; &#xCD94;&#xCD9C; celite &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC18C;&#xC544;&#xB9C8;&#xBE44;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xBCF4;&#xC870; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBC29;&#xBC95; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC758; &#xC18D;&#xC774; &#xBE48; &#xC12C;&#xC720; &#xD55C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; 2 &#xCC28; &#xC9D1;&#xC911;&#xB825;&#xC758; &#xD3C9;&#xAC00;.

Ultrafiltraci&oacute;n de fibra hueca de flujo tangencial (HFUF) se evalu&oacute; para virus y Cryptosporidium parvum concentraci&oacute;n de agua. Recuperaci&oacute;n de virus a una velocidad de filtraci&oacute;n baja result&oacute; para ser significativamente superior a una velocidad de filtraci&oacute;n superior, con las recuperaciones de bacteri&oacute;fago MS2 en altas y bajas tasas de filtraci&oacute;n se muestra que el 64,7% y 98.7%, respectivamente. Recuperaciones de poliovirus de agua eran similares a MS2, con recuperaciones de 62,9% y 104.5% para altas y bajas tasas de filtraci&oacute;n, respectivamente. C. parvum, que s&oacute;lo fue probado en las tasas de filtraci&oacute;n de alta, tuvo un promedio fue de recuperaci&oacute;n 105.1%. Adem&aacute;s de la optimizaci&oacute;n de la t&eacute;cnica de concentraci&oacute;n primaria, este estudio tambi&eacute;n compar&oacute; varios procedimientos de concentraci&oacute;n secundaria. La recuperaci&oacute;n m&aacute;s alta (89,5%) de poliovirus de concentrados de agua del grifo se obtuvo cuando se utiliz&oacute; un m&eacute;todo de celite-Extracto de carne de res y el virus fue eluido de la celite con tamp&oacute;n fosfato salino, pH 9,0. Cuando se combinaron la principal concentraci&oacute;n de HFUF y los m&eacute;todos de concentraci&oacute;n &oacute;ptima de secundaria, se logr&oacute; una recuperaci&oacute;n promedio de 97,0 &plusmn; 35,6% o &plusmn; 89.3 19,3%, dependiendo del nivel de pico, para poliovirus. Este estudio demostr&oacute; que el m&eacute;todo de concentraci&oacute;n principal de HFUF es eficaz en la recuperaci&oacute;n MS2, poliovirus y C. parvum de grandes vol&uacute;menes de agua y ese m&eacute;todo de celite-Extracto de carne es un m&eacute;todo de concentraci&oacute;n secundaria efectiva para el virus de la poliomielitis probado.

Evaluaci&oacute;n de concentraci&oacute;n principal de ultrafiltraci&oacute;n de fibra hueca de pat&oacute;genos y concentraci&oacute;n secundaria de virus del agua.

Mary Jean See

Department of Biological Sciences

University of Cincinnati, McMicken College of Arts and Science

Obtaining Highly Purified Toxoplasma gondii Oocysts by a Discontinuous Cesium Chloride Gradient

Mary Jean See

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University of Cincinnati, McMicken College of Arts and Science

Obtaining Highly Purified Toxoplasma gondii Oocysts by a Discontinuous Cesium Chloride Gradient

Department of Biological Sciences