Preparation of <em>Drosophila</em> S2 cells for Light Microscopy

The ideal experimental system would be cheap and easy to maintain, amenable to a variety of techniques, and would be supported by an extensive literature ...

University of Arizona (UOA)

&#x5F25;&#x6F2B;&#x6027;&#x8F74;&#x7D22;&#x4F20;&#x8F93;&#x901F;&#x5EA6;&#x6162;&#x7684;&#x662F;&#x7ECF;&#x5178;&#x89C6;&#x56FE;&#x7EF4;&#x62A4;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x3001; &#x795E;&#x7ECF;&#x4E1D;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x4E0B;&#x79FB;&#x8F74;&#x7A81;&#x76F8;&#x5BF9;&#x8FDE;&#x8D2F;&#x5730;&#x7387;&#x663E;&#x8457;&#x4F4E;&#x4E8E;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x9A6C;&#x8FBE;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x662F;&#x5176;&#x5B9E;&#x5FEB;&#x901F;&#x3001; &#x5F02;&#x6B65;&#x3001; &#x65AD;&#x65AD;&#x7EED;&#x7EED;&#x7684;&#x548C;&#x6700;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x71C3;&#x6599;&#x7531;&#x719F;&#x6089;&#x9A6C;&#x8FBE;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x808C;&#x7B49;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x89C6;&#x56FE;&#xFF0C;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x548C;&#x673A;&#x7406;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x5219;&#x8868;&#x660E;&#x7F13;&#x6162;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x8FD0;&#x8F93;&#x662F;&#x5FEB;&#x901F;&#x548C;&#x5851;&#x6599;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x57FA;&#x7840;&#x4E2D;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5F62;&#x6001;&#x7684;&#x8F6C;&#x6362;&#x3002;

&#x5F25;&#x6F2B;&#x6027;&#x8F74;&#x7D22;&#x4F20;&#x8F93;&#x901F;&#x5EA6;&#x6162;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5F62;&#x6001;&#x7684;&#x6210;&#x56E0;&#x3002;

The classic view of slow axonal transport maintains that microtubules, neurofilaments, and actin filaments move down the axon relatively coherently at rates significantly slower than those characteristic of known motor proteins. Recent studies indicate that the movement of these cytoskeletal polymers is actually rapid, asynchronous, intermittent, and most probably fueled by familiar motors such as kinesins, myosins, and cytoplasmic dynein. This new view, which is supported by both live-cell imaging and mechanistic analyses, suggests that slow axonal transport is both rapid and plastic, and hence could underlie transformations in neuronal morphology.

Slow axonal transport and the genesis of neuronal morphology.

La vue classique du transport axonal lent maintient que microtubules, des neurofilaments et des filaments d&#39;actine, d&eacute;placent vers le bas de l&#39;axone relativement coh&eacute;rente &agrave; des taux significativement plus lents que ceux qui caract&eacute;risent les prot&eacute;ines motrices connus. Des &eacute;tudes r&eacute;centes indiquent que le mouvement de ces polym&egrave;res du cytosquelette est r&eacute;ellement rapide, asynchrone, intermittent et tr&egrave;s probablement aliment&eacute;e par des moteurs familiers tels que les kin&eacute;sines myosines et dyn&eacute;ine cytoplasmique. Cette nouvelle vue, qui est pris en charge par imagerie de cellules vivantes et analyses m&eacute;canistes, sugg&egrave;re que transport axonal lent est rapide et en plastique et donc pourrait sous-tendre des transformations dans la morphologie neuronale.

Transport axonal lent et la gen&egrave;se de la morphologie neuronale.

Langsam axonalen Transport und die Genese der neuronalen Morphologie.

La visualizzazione classica del trasporto assonale lento mantiene che microtubuli, filamenti di actina e neurofilaments Sposta gi&ugrave; l&#39;assone relativamente coerentemente a tassi significativamente pi&ugrave; lenti rispetto a quelli caratteristici delle proteine motore note. Studi recenti indicano che il movimento di questi polimeri citoscheletrici &egrave; realmente rapido, asincrono, intermittente e probabilmente alimentato da motori familiari come kinesins, myosins e dineina citoplasmatica. Questa nuova vista, che &egrave; supportato da entrambi live cell imaging e analisi meccanicistiche, suggerisce che trasporto assonale lento &egrave; rapida e in plastica e quindi potrebbe sottendono le trasformazioni nella morfologia neuronale.

Trasporto assonale lento e la genesi della morfologia neuronale.

&#x9045;&#x3044;&#x8EF8;&#x7D22;&#x8F38;&#x9001;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B7;&#x30C3;&#x30AF;&#x8868;&#x793A;&#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3001;&#x88AB;&#x308F;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8; &#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x8EF8;&#x7D22;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x30B3;&#x30D2;&#x30FC;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8; &#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x65E2;&#x77E5;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x9045;&#x304F;&#x79FB;&#x52D5;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x304C;&#x5B9F;&#x969B;&#x306B;&#x8FC5;&#x901F;&#x3001;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x3001;&#x65AD;&#x7D9A;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x6700;&#x3082;&#x8EAB;&#x8FD1;&#x306A;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;, &#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x306A;&#x3069;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x652F;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F4F;&#x30BB;&#x30EB;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x6295;&#x5C04;&#x3068;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306A;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4F4E;&#x901F;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x8F38;&#x9001;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x3001;&#x3067;&#x3059;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3086;&#x3048;&#x5909;&#x63DB;&#x795E;&#x7D4C;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4F4E;&#x901F;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x8F38;&#x9001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x5275;&#x4E16;&#x8A18;&#x3002;

&#xB290;&#xB9B0; axonal &#xC804;&#xC1A1;&#xC758; &#xACE0;&#xC804;&#xC801;&#xC778; &#xBCF4;&#xAE30;&#xB294; microtubules, neurofilaments, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8; &#xC544;&#xB798;&#xB85C; &#xC774;&#xB3D9; &#xCD95; &#xC0AD; &#xBE44;&#xAD50;&#xC801; coherently &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xBAA8;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC131; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB290;&#xB9B0; &#xC18D;&#xB3C4;&#xB85C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB974;&#xBA74; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; cytoskeletal &#xACE0;&#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;, &#xBE44;&#xB3D9;&#xAE30;, &#xAC04;&#xD5D0;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC544;&#xB9C8; kinesins, myosins, &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD68C; &#xB4F1; &#xCE5C;&#xC219; &#xD55C; &#xC790;&#xB3D9;&#xCC28; &#xC5F0;&#xB8CC;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBCF4;&#xAE30; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xBC0F; &#xAE30;&#xACC4; &#xB860; &#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xB418;&#xB294; &#xB290;&#xB9B0; axonal &#xC804;&#xC1A1; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xD2F1;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD615;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xBCC0;&#xD658;&#xC5D0; &#xAE30;&#xCD08; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB290;&#xB9B0; axonal &#xAD50;&#xD1B5;&#xACFC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;&#xC758; &#xCC3D;&#xC138;&#xAE30;.

La vista cl&aacute;sica de transporte axonal lento mantiene que los microt&uacute;bulos, neurofilamentos y filamentos de actina bajar el ax&oacute;n relativamente coherente a tasas significativamente m&aacute;s lentas que &eacute;sos caracter&iacute;stica de las prote&iacute;nas conocidas del motores. Estudios recientes indican que el movimiento de estos pol&iacute;meros del citoesqueleto es realmente r&aacute;pido, asincr&oacute;nica, intermitente y probablemente impulsada por motores conocidos como kinesins, miosinas y dine&iacute;na citoplasm&aacute;tica. Esta nueva vista, que es compatible con las im&aacute;genes de c&eacute;lulas vivas y an&aacute;lisis mecanicistas, sugiere que la lentitud del transporte axonal es r&aacute;pida y pl&aacute;stico y por lo tanto podr&iacute;a ser la base de transformaciones en morfolog&iacute;a neuronal.

Transporte axonal lento y la g&eacute;nesis de morfolog&iacute;a neuronal.

Kif15 &#x662F;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x5BF9;&#x4EA4;&#x8054;&#x548C;&#x56FA;&#x5B9A;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x83B7;&#x5F97;&#x9F20;&#x60A3;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684; Kif15&#xFF0C;&#x5E76;&#x7814;&#x7A76;&#x8FC7;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x5206;&#x5E03;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;Kif15 &#x7684;&#x786E;&#x8868;&#x793A;&#x79EF;&#x6781;&#x5212;&#x5206;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#x4E5F;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E86;&#x8EAB;&#x60A3; postmitotic &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;Kif15 &#x5728;&#x80DE;&#x8D28;&#x5206;&#x88C2;&#x671F;&#x95F4;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x5230;&#x4E3B;&#x8F74;&#x6746;&#x5B50;&#x548C;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x671F;&#x95F4;&#x5230;&#x65E9;&#x524D;&#x7684;&#x540E;&#x671F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x7136;&#x540E;&#x5230;&#x57FA;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5288;&#x88C2;&#x6C9F;&#x3002;&#x76F8;&#x95F4;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;Kif15 &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x675F;&#x4F46;&#x4E0D;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x3002;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;Kif15 &#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#xFF0C;&#x4F46;&#x663E;&#x793A;&#x6CA1;&#x6709;&#x660E;&#x663E;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x4E0E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x5F53;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x6346;&#x7ED1;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x5BCC;&#x96C6;&#x7684; Kif15 &#x5360;&#x636E;&#x505C;&#x6EDE;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x548C;&#x6811;&#x7A81;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5305;&#x65F6;&#xFF0C;Kif15 &#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x518D;&#x5230;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x4E5F;&#x7279;&#x522B;&#x597D;&#x3002;&#x53D1;&#x5C55;&#x9F20;&#x8111;&#x7814;&#x7A76;&#x663E;&#x793A; Kif15 &#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x6D53;&#x7F29;&#x6D04;&#x6E38;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E0E;&#x5176;&#x5B83;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x76F8;&#x6BD4;&#x3002;&#x503C;&#x5F97;&#x6CE8;&#x610F;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6D04;&#x6E38;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6709;&#x94FE;&#x63A5;&#x5230;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x9635;&#x5217;&#x5185;&#x9886;&#x5148;&#x7684;&#x5DE5;&#x827A;&#xFF0C;&#x5176;&#x539F;&#x5B50;&#x6838;&#x5468;&#x56F4;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x7B3C;&#x72B6;&#x914D;&#x7F6E;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x6837;&#x6574;&#x4E2A;&#x9635;&#x5217;&#x79FB;&#x52A8;&#x9F50;&#x58F0;&#x4E3A;&#x8BE5;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5C06;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x5F7C;&#x6B64;&#x79FB;&#x52A8;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x88AB;&#x9650;&#x5236;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; Kif15 &#x53CD;&#x5BF9;&#x751F;&#x6210;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x533A;&#x57DF;&#x5185;&#x5176;&#x4ED6;&#x7535;&#x673A;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;

Postmitotic &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x9A71;&#x52A8; Kif15 &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF1A; &#x5BF9;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Kif15 is a kinesin-related protein whose mitotic homologues are believed to crosslink and immobilize spindle microtubules. We have obtained rodent sequences of Kif15, and have studied their expression and distribution in the developing nervous system. Kif15 is indeed expressed in actively dividing fibroblasts, but is also expressed in terminally postmitotic neurons. In mitotic cells, Kif15 localizes to spindle poles and microtubules during prometaphase to early anaphase, but then to the actin-based cleavage furrow during cytokinesis. In interphase fibroblasts, Kif15 localizes to actin bundles but not to microtubules. In cultured neurons, Kif15 localizes to microtubules but shows no apparent co-localization with actin. Localization of Kif15 to microtubules is particularly good when the microtubules are bundled, and there is a notable enrichment of Kif15 in the microtubule bundles that occupy stalled growth cones and dendrites. Studies on developing rodent brain show a pronounced enrichment of Kif15 in migratory neurons compared to other neurons. Notably, migratory neurons have a cage-like configuration of microtubules around their nucleus that is linked to the microtubule array within the leading process, such that the entire array moves in unison as the cell migrates. Since the capacity of microtubules to move independently of one another is restricted in all of these cases, we propose that Kif15 opposes the capacity of other motors to generate independent microtubule movements within key regions of developing neurons.

Expression of the mitotic kinesin Kif15 in postmitotic neurons: implications for neuronal migration and development.

Kif15 est une prot&eacute;ine li&eacute;e &agrave; la kin&eacute;sine dont homologues mitotiques sont cens&eacute;s crosslink et immobiliser les microtubules du fuseau. Nous avons obtenu des s&eacute;quences rongeurs de Kif15 et ont &eacute;tudi&eacute; leur expression et leur distribution dans le d&eacute;veloppement du syst&egrave;me nerveux. Kif15 est en effet exprim&eacute; en divisant activement des fibroblastes, mais est aussi exprim&eacute; dans les neurones en phase terminale mitotiques. Dans les cellules mitotiques, Kif15 se localise aux p&ocirc;les du fuseau et des microtubules au cours de l&#39;anaphase prom&eacute;taphase au d&eacute;but, mais ensuite pour le sillon de clivage actine au cours de la cytokin&egrave;se. Dans les fibroblastes de l&#39;interphase, Kif15 se localise &agrave; faisceaux d&#39;actine, mais pas aux microtubules. Dans les cultures de neurones, Kif15 localise aux microtubules, mais ne montre aucune apparente co-localisation avec l&#39;actine. Localisation de Kif15 aux microtubules est particuli&egrave;rement bonne quand les microtubules sont regroup&eacute;s, et il y a un enrichissement notable de Kif15 dans les faisceaux de microtubules qui occupent les c&ocirc;nes de croissance bloqu&eacute;e et les dendrites. &Eacute;tudes sur le d&eacute;veloppement de cerveau de rongeur montrent un enrichissement prononc&eacute; de Kif15 dans les neurones migrateurs par rapport &agrave; d&#39;autres neurones. En particulier, neurones migrateurs ont une configuration de type cage de microtubules autour de leur noyau qui est li&eacute;e &agrave; la matrice des microtubules dans le processus de premier plan, tels que le tableau entier se d&eacute;place &agrave; l&#39;unisson comme migre de la cellule. &Eacute;tant donn&eacute; que la capacit&eacute; de microtubules se d&eacute;placer ind&eacute;pendamment l&#39;un de l&#39;autre est limit&eacute;e dans tous les cas, nous proposons que les Kif15 s&#39;oppose &agrave; la capacit&eacute; des autres moteurs pour g&eacute;n&eacute;rer des mouvements ind&eacute;pendants de microtubules dans des r&eacute;gions cl&eacute;s du d&eacute;veloppement des neurones.

Expression de la KINESINE mitotique Kif15 dans les neurones postmitotiques : implications pour le d&eacute;veloppement et la migration neuronale.

Die Expression des mitotischen Kinesin Kif15 in postmitotischen Neuronen: Implikationen f&#xFC;r die neuronale Migration und Entwicklung.

Kif15 &egrave; una proteina chinesina correlati cui omologhi mitotici sono creduti di reticolazione e immobilizzano i microtubuli del fuso. Abbiamo ottenuto roditore sequenze di Kif15 e hanno studiato la loro espressione e la distribuzione nel sistema nervoso in via di sviluppo. Kif15 infatti &egrave; espressa nella proliferazione dei fibroblasti, ma si esprime anche nei neuroni terminalmente postmitotic. Nelle cellule mitotic, Kif15 localizza mandrino polacchi e microtubuli durante l&#39;anafase prometafase all&#39;inizio, ma poi nel solco di clivaggio basati su actina durante la Citocinesi in. Nei fibroblasti di interfase, Kif15 si localizza a fasci di actina ma non ai microtubuli. Nei neuroni coltivati, Kif15 localizza ai microtubuli ma non mostra nessun apparente collocazione con actina. Localizzazione del Kif15 di microtubuli &egrave; particolarmente buona quando i microtubuli sono in bundle, e c&#39;&egrave; un notevole arricchimento di Kif15 nei fasci di microtubuli che occupano i coni di crescita in stallo e dendriti. Studi sullo sviluppo cerebrale roditore mostrano un pronunciato arricchimento di Kif15 nei neuroni migratori rispetto ad altri neuroni. In particolare, i neuroni migratori hanno una configurazione gabbia-come dei microtubuli intorno loro nucleo che &egrave; legata alla matrice dei microtubuli all&#39;interno del processo principale, tale che l&#39;intero array si muove all&#39;unisono come cellula migra. Dal momento che in tutti questi casi &egrave; limitata la capacit&agrave; dei microtubuli a muoversi indipendentemente uno da altro, noi proponiamo che Kif15 si oppone la capacit&agrave; di altri motori per generare movimenti indipendenti dei microtubuli all&#39;interno di aree chiave di sviluppo di neuroni.

Espressione della chinesina mitotica Kif15 in neuroni postmitotic: implicazioni per lo sviluppo e la migrazione neuronale.

Kif15 &#x305D;&#x306E;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x671F;&#x76F8;&#x540C;&#x67B6;&#x6A4B;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3092;&#x52D5;&#x3051;&#x306A;&#x304F;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x95A2;&#x9023;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E; Kif15&#x3001;&#x9F67;&#x6B6F;&#x985E;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3057;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3068;&#x767A;&#x5C55;&#x9014;&#x4E0A;&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Kif15 &#x306F;&#x78BA;&#x304B;&#x306B;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;, &#x9664;&#x7B97;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x672B;&#x671F;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3082;&#x3002;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x5206;&#x88C2;&#x4E2D;&#x306B; Kif15 &#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x6975;&#x3068;&#x65E9;&#x671F;&#x306B; prometaphase &#x5F8C;&#x671F;&#x6642;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x304C;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x6E9D;&#x90E8;&#x3092;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E2D;&#x9593;&#x671F;&#x306E;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x675F;&#x304C;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306B; Kif15 &#x3092;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x57F9;&#x990A;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; Kif15 &#x306F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x898B;&#x304B;&#x3051;&#x5185;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Kif15 &#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;, &#x3068; Kif15 &#x306E;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x5931;&#x901F;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x3068;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x3092;&#x5360;&#x3081;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x675F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x7279;&#x306B;&#x826F;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x9F67;&#x6B6F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x7814;&#x7A76; Kif15 &#x306E;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x6E21;&#x308A;&#x9CE5;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x4ED6;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x6E21;&#x308A;&#x9CE5;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x30E0;&#x30FC;&#x30D6; &#x30BB;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4E00;&#x6589;&#x306B;&#x914D;&#x5217;&#x5168;&#x4F53;&#x3092;&#x79FB;&#x52D5;&#x306A;&#x3069;&#x4E00;&#x6D41;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x5185;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x539F;&#x5B50;&#x6838;&#x306E;&#x307E;&#x308F;&#x308A;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x69CB;&#x6210;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E92;&#x3044;&#x306B;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x5BB9;&#x91CF;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x5730;&#x57DF;&#x5185;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x4ED6;&#x306E;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5BB9;&#x91CF; Kif15 &#x306B;&#x53CD;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.

&#x5206;&#x88C2;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3; Kif15 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;: &#x795E;&#x7D4C;&#x79FB;&#x884C;&#x3068;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x542B;&#x610F;&#x3002;

Kif15&#xC740; &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; mitotic homologues crosslink &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD94;&#xC815; &#xB41C;&#xB2E4; &#xACE0; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; microtubules &#xBB34;&#xB825;&#xD654; kinesin &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. &#xC6B0;&#xB9AC; Kif15, &#xC124;&#xCE58;&#xB958; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC5BB;&#xC740; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0; &#xBD84;&#xD3EC;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. Kif15&#xC740; &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C; &#xC801;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC8C;&#xC7AC;, &#xB098;&#xB204;&#xC5B4; &#xD45C;&#xD604; &#xB418;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB9D0;&#xAE30; postmitotic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xD45C;&#xD604;. Mitotic &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; Kif15 cytokinesis &#xB3D9;&#xC548; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xAE30;&#xB465;&#xACFC; &#xCD08;&#xAE30;&#xC5D0; prometaphase anaphase &#xB3D9;&#xC548; microtubules &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB2E4;&#xC74C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC5F4; &#xBA85;&#xC529; localizes. &#xACC4;&#xBA74; &#xAC8C;&#xC7AC;&#xC5D0; Kif15 &#xD558;&#xC9C0; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC88;&#xB4E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; microtubules localizes. &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xB274;&#xB7F0; Kif15 microtubules localizes &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB9D0;&#xB77C;&#xC640; &#xC544;&#xBB34; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; co-localization&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Microtubules&#xC5D0; kif15&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xB294; microtubules &#xBC88;&#xB4E4;&#xB85C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xCC28;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xC2E4;&#xC18D;&#xB41C; &#xC131;&#xC7A5; &#xCF58;&#xACFC; dendrites microtubule &#xBC88;&#xB4E4;&#xC5D0; kif15&#xC758; &#xC8FC;&#xBAA9;&#xD560; &#xB9CC;&#xD55C; &#xB18D;&#xCD95;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; &#xC88B;&#xB2E4;. &#xC124;&#xCE58;&#xB958; &#xB450;&#xB1CC; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xCCA0;&#xC0C8; &#xB274;&#xB7F0; &#xB2E4;&#xB978; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; kif15&#xC758; &#xBC1C;&#xC74C;&#xB41C; &#xB18D;&#xCD95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788;, &#xCCA0;&#xC0C8; &#xB274;&#xB7F0; &#xC140; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C; &#xC804;&#xCCB4; &#xBC30;&#xC5F4; &#xD55C; &#xB9C8;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB3D9; &#xB418;&#xB3C4;&#xB85D; &#xCD5C;&#xACE0;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xB0B4; microtubule &#xBC30;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD575; &#xC8FC;&#xC704; microtubules&#xC758; &#xCF00;&#xC774;&#xC9C0; &#xAC19;&#xC740; &#xAD6C;&#xC131;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4;&#xB2E4;. &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC11C;&#xB85C; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB3D9; microtubules &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0;&#xC774; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;, &#xC81C;&#xD55C; Kif15 &#xBC18;&#xB300; &#xB274;&#xB7F0; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; microtubule &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB2E4;&#xB978; &#xBAA8;&#xD130;&#xC758; &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Mitotic kinesin Kif15 postmitotic &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;: &#xC2E0;&#xACBD; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC758;&#xBBF8;.

Kif15 es una prote&iacute;na relacionada con la quinesina cuyos hom&oacute;logos mit&oacute;ticos se creen que la reticulaci&oacute;n e inmovilizan los microt&uacute;bulos del huso. Hemos obtenido roedores secuencias de Kif15 y han estudiado su expresi&oacute;n y distribuci&oacute;n en el desarrollo del sistema nervioso. Kif15 se expresa en efecto separa activamente a los fibroblastos, pero tambi&eacute;n se expresa en neuronas terminal postmitotic. En c&eacute;lulas mit&oacute;ticas, Kif15 se localiza a polos de huso y microt&uacute;bulos durante la anafase Prometafase a temprano, pero luego al surco escote basadas en actina durante la citocinesis. En los fibroblastos de la interfase, Kif15 localiza a paquetes de actina pero no a los microt&uacute;bulos. En las neuronas cultivadas, Kif15 localiza a microt&uacute;bulos pero no muestra aparente co-localizaci&oacute;n con la actina. Localizaci&oacute;n de Kif15 de los microt&uacute;bulos es particularmente bueno cuando los microt&uacute;bulos se l&iacute;an, y hay un notable enriquecimiento de Kif15 en los paquetes de microt&uacute;bulos que ocupan los conos de crecimiento estancado y las dendritas. Estudios sobre el desarrollo cerebral de roedor muestran un pronunciado enriquecimiento de Kif15 en neuronas migratorias en comparaci&oacute;n con otras neuronas. En particular, las neuronas migratorias tienen una configuraci&oacute;n de jaula de microt&uacute;bulos alrededor de su n&uacute;cleo que est&aacute; vinculada a la matriz de microt&uacute;bulos en el proceso principal, tal que la matriz completa se mueve al un&iacute;sono como migra de la c&eacute;lula. Puesto que se limita la capacidad de los microt&uacute;bulos moverse independientemente el uno del otro en todos estos casos, proponemos que el Kif15 se opone a la capacidad de otros motores para generar movimientos de microt&uacute;bulos independiente dentro de las regiones claves de desarrollo de las neuronas.

Expresi&oacute;n de la quinesina mit&oacute;tico Kif15 en neuronas postmitotic: implicaciones para la migraci&oacute;n neuronal y el desarrollo.

&#x9700;&#x8981;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x53D1;&#x5C55;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x805A;&#x5408;&#x548C;&#x89E3;&#x805A;&#x7684;&#x89C4;&#x4F8B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x679C;&#x8747;&#x679C;&#x8747;-&#x80DE;&#x819C;&#xFF0C;KLP10A &#x548C; KLP59C&#xFF0C;&#x5408;&#x4F5C;&#x5230;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x95F4;&#x671F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#x3002;S2 &#x8017;&#x5C3D;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x523A;&#x6FC0;&#x89E3;&#x805A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6539;&#x53D8;&#x4E0D;&#x540C;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A; &#xFF1B;KLP10A &#x523A;&#x6FC0;&#x707E;&#x96BE; &#xFF08;&#x4EA4;&#x6362;&#x673A;&#x4ECE;&#x589E;&#x957F;&#x5230;&#x6536;&#x7F29;&#xFF09; &#x800C; KLP59C &#x53D6;&#x6D88;&#x6551;&#x63F4; &#xFF08;&#x4EA4;&#x6362;&#x673A;&#x4ECE;&#x6536;&#x7F29;&#x5230;&#x589E;&#x957F;&#xFF09;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x548C;&#x8868;&#x793A;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x805A;&#x5408;&#x548C;&#x89E3;&#x805A;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x518D;&#x52A0;&#x4E0A;&#x4E24;&#x7AEF;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x4E3A; KLP10A &#x548C; KLP59C &#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x4E5F;&#x8868;&#x660E; KLP10A &#x6C89;&#x79EF;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x52A0;&#x53F7;&#x7ED3;&#x675F;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;EB1&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x652F;&#x6301;&#x4E00;&#x79CD;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E24;&#x4F4D;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x80DE;&#x819C;&#x5212;&#x5206;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#x7684;&#x52B3;&#x5DE5;&#x3002;

&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-13 &#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x5408;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x8C03;&#x8282;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x95F4;&#x671F;&#x3002;

Regulation of microtubule polymerization and depolymerization is required for proper cell development. Here, we report that two proteins of the Drosophila melanogaster kinesin-13 family, KLP10A and KLP59C, cooperate to drive microtubule depolymerization in interphase cells. Analyses of microtubule dynamics in S2 cells depleted of these proteins indicate that both proteins stimulate depolymerization, but alter distinct parameters of dynamic instability; KLP10A stimulates catastrophe (a switch from growth to shrinkage) whereas KLP59C suppresses rescue (a switch from shrinkage to growth). Moreover, immunofluorescence and live analyses of cells expressing tagged kinesins reveal that KLP10A and KLP59C target to polymerizing and depolymerizing microtubule plus ends, respectively. Our data also suggest that KLP10A is deposited on microtubules by the plus-end tracking protein, EB1. Our findings support a model in which these two members of the kinesin-13 family divide the labour of microtubule depolymerization.

Functionally distinct kinesin-13 family members cooperate to regulate microtubule dynamics during interphase.

R&#xE8;glement de la polym&#xE9;risation des microtubules et de d&#xE9;polym&#xE9;risation est n&#xE9;cessaire pour le d&#xE9;veloppement des cellules bonne. Ici, nous d&#xE9;clarons que deux prot&#xE9;ines de la Drosophila melanogaster kin&#xE9;sine-13 de la famille, et KLP10A KLP59C, coop&#xE9;rer pour conduire d&#xE9;polym&#xE9;risation des microtubules dans les cellules en interphase. Les analyses de la dynamique des microtubules dans les cellules S2 &#xE9;puis&#xE9;s de ces prot&#xE9;ines indiquent que les deux prot&#xE9;ines stimulent la d&#xE9;polym&#xE9;risation, mais modifier les param&#xE8;tres distincts de l&#x26;#39;instabilit&#xE9; dynamique; KLP10A stimule la catastrophe (un commutateur de la croissance au retrait), tandis que KLP59C supprime sauvetage (un commutateur de retrait &#xE0; la croissance). En outre, les analyses d&#x26;#39;immunofluorescence et en direct de cellules exprimant kin&#xE9;sines marqu&#xE9;s r&#xE9;v&#xE8;lent que KLP10A et cible KLP59C &#xE0; la polym&#xE9;risation et la d&#xE9;polym&#xE9;risation des microtubules, plus fins, respectivement. Nos donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent &#xE9;galement que KLP10A est d&#xE9;pos&#xE9; sur les microtubules par la prot&#xE9;ine de suivi plus-fin, EB1. Nos r&#xE9;sultats appuient un mod&#xE8;le dans lequel ces deux membres de la kin&#xE9;sine-13 de la famille de diviser le travail de d&#xE9;polym&#xE9;risation des microtubules.

Fonctionnellement distinct Membres kin&#xE9;sine-13 visant &#xE0; r&#xE9;glementer la famille Coop&#xE9;rer la dynamique des microtubules durant l&#x26;#39;interphase

Funktionell unterschiedlichen Kinesin-13 Familienmitglieder zusammen, um die Dynamik der Mikrotubuli w&#xE4;hrend der Interphase zu regulieren.

Regolamento di polimerizzazione dei microtubuli e depolimerizzazione &egrave; necessaria per lo sviluppo corretto delle cellule. Riportiamo qui, che due proteine della Drosophila melanogaster chinesina-13 famiglia, KLP10A e KLP59C, cooperano alla depolimerizzazione dei microtubuli in auto nelle cellule in interfase. Analisi della dinamica dei microtubuli nelle cellule S2 impoverite di queste proteine indicano che entrambe le proteine stimolano la depolimerizzazione, ma modificare diversi parametri di instabilit&agrave; dinamica; KLP10A stimola la catastrofe (un interruttore dalla crescita di restringimento) considerando che la KLP59C sopprime rescue (un interruttore dal ritiro di crescita). Inoltre, immunofluorescenza e analisi diretta delle cellule che esprimono tagged kinesins rivelano quel target KLP10A e KLP59C per polimerizzazione e depolymerizing ai microtubuli pi&ugrave; finisce, rispettivamente. I nostri dati suggeriscono anche che KLP10A &egrave; depositato su microtubuli dalla proteina plus-fine tracking, EB1. I nostri risultati supportano un modello in cui questi due membri della famiglia chinesina-13 dividono il lavoro di depolimerizzazione dei microtubuli.

Funzionalmente distinti chinesina-13 membri della famiglia collaborano per regolare la dinamica dei microtubuli durante l&#39;interfase.

&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x91CD;&#x5408;&#x3068;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306F;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30AD;&#x30A4;&#x30ED;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;-13&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x3001;KLP10A&#x3068;KLP59C&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x9593;&#x671F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5354;&#x529B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;S2&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x52D5;&#x7684;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;KLP59C&#x306F;&#xFF08;&#x6210;&#x9577;&#x3078;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x304B;&#x3089;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#xFF09;&#x6551;&#x52A9;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;KLP10A&#xFF08;&#x6210;&#x9577;&#x304B;&#x3089;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3078;&#x306E;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x3048;&#xFF09;&#x7834;&#x5C40;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x304D;&#x306E;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x3084;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7AEF;&#x3092;&#x91CD;&#x5408;&#x3068;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x306B;&#x305D;&#x306E;KLP10A&#x3068;KLP59C&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;KLP10A&#x306F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;EB1&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x306B;&#x5806;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x4ECA;&#x56DE;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;-13&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x304C;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x306E;&#x52B4;&#x50CD;&#x3092;&#x5206;&#x5272;&#x3057;&#x305F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;-13&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x9593;&#x671F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5354;&#x529B;&#x3059;&#x308B;

Microtubule &#xC911; &#xD569; &#xBC0F; depolymerization&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC740; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC804;&#xC9C0; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; Drosophila melanogaster kinesin 13 &#xAC00;&#xC871;, KLP10A &#xBC0F; KLP59C, &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACC4;&#xBA74; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; microtubule depolymerization&#xC5D0; &#xD611;&#xC870; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. S 2 &#xC140;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xACE0;&#xAC08; microtubule &#xC5ED;&#xD559; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; depolymerization, &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB3D9;&#xC801; &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC131;;&#xC758; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB97C; &#xBCC0;&#xACBD; KLP10A KLP59C &#xAD6C;&#xC870; (&#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC218;&#xCD95;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58;)&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xC7AC;&#xC559;&#xC744; (&#xC218;&#xCD95;&#xC5D0; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58;)&#xB97C; &#xC790;&#xADF9; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD0DC;&#xADF8; kinesins&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC758; polymerizing &#xBC0F; depolymerizing microtubule &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB05D;, &#xAC01;&#xAC01; KLP10A &#xBC0F; KLP59C &#xB300;&#xC0C1; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xB610;&#xD55C; EB1 &#xB354;&#xD558;&#xAE30; &#xC5D4;&#xB4DC; &#xCD94;&#xC801; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; KLP10A microtubules&#xC5D0; &#xC785;&#xAE08; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC;&#xB294; kinesin 13 &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xB450; &#xBA64;&#xBC84;&#xAC00; &#xBD84;&#xD560; microtubule depolymerization &#xB178;&#xB3D9; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0;.

&#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; kinesin 13 &#xAC00;&#xC871; &#xACC4;&#xBA74; &#xC911; microtubule &#xC5ED;&#xD559; &#xADDC;&#xC81C; &#xD611;&#xC870;.

Reglamento de la polimerizaci&#xF3;n y despolimerizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos se requiere para el desarrollo adecuado de las c&#xE9;lulas. En este caso, nos informan de que dos prote&#xED;nas de la Drosophila melanogaster kinesina-13 de la familia, y KLP10A KLP59C, cooperar para impulsar la despolimerizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos en las c&#xE9;lulas en interfase. Los an&#xE1;lisis de din&#xE1;mica de los microt&#xFA;bulos en las c&#xE9;lulas S2 agotados de estas prote&#xED;nas indica que ambas prote&#xED;nas estimulan la despolimerizaci&#xF3;n, pero sin alterar los par&#xE1;metros distintos de la inestabilidad din&#xE1;mica; KLP10A estimula la cat&#xE1;strofe (un cambio de crecimiento a la contracci&#xF3;n), mientras que suprime KLP59C de rescate (un cambio de la contracci&#xF3;n del crecimiento). Por otra parte, los an&#xE1;lisis de inmunofluorescencia y en vivo de las c&#xE9;lulas que expresan kinesins etiquetados revelan que KLP10A y el objetivo KLP59C de polimerizaci&#xF3;n y despolimerizaci&#xF3;n de microt&#xFA;bulos m&#xE1;s extremos, respectivamente. Nuestros datos tambi&#xE9;n sugieren que KLP10A se deposita sobre los microt&#xFA;bulos por la prote&#xED;na de seguimiento, m&#xE1;s extremo, EB1. Nuestros resultados apoyan un modelo en el que estos dos miembros de la familia kinesin-13 se dividen el trabajo de la despolimerizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos.

Funcionalmente distintas Kinesin-13 miembros de la familia Cooperar para regular la din&#xE1;mica de microt&#xFA;bulos durante la interfase

&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-13 &#x4E32;&#x662F;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#x7684;&#x4EA7;&#x751F;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-13 &#x4E32;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x4E2D;&#x6240;&#x626E;&#x6F14;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x51FA;&#x8272; KLP10A &#x548C; KLP59C &#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x534F;&#x8C03;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x9488;&#x5BF9;&#x54EA;&#x4E9B;&#x53D8;&#x5316;&#x5141;&#x8BB8;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x53C2;&#x4E0E;&#x663E;&#x8457;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4EFB;&#x52A1;&#xFF0C;&#x5728;&#x8BE5;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x70B9;&#x5468;&#x671F;&#x3002;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;KLP10A &#x548C; KLP59C &#x5E73;&#x884C;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x7684;&#x9776;&#x5411;&#x548C;&#x89E3;&#x805A;&#x7EBA;&#x9524;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x4E24;&#x7AEF;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x7528; Pacman-&#x901A;&#x91CF;&#x673A;&#x5236;&#x9A71;&#x52A8;&#x5411;&#x6781;&#x67D3;&#x8272;&#x5355;&#x4F53;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;&#x6216;&#x8005;&#xFF0C;&#x95F4;&#x671F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5411;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x4F46;&#x7CFB;&#x5217;&#x6765;&#x5212;&#x5206;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#x52B3;&#x52A8;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x540C;&#x6837;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x3002;&#x867D;&#x7136; KLP59C &#x5EF6;&#x7EED;&#x89E3;&#x805A;&#x53CA;&#x5176;&#x542F;&#x52A8;&#x540E;&#x7684;&#xFF0C;KLP10A &#x5C06;&#x542F;&#x52A8;&#x89E3;&#x805A;&#x3002;&#x4E0B;&#x9762;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x8BF4;&#x660E;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x68C0;&#x67E5;&#x53CA;&#x5176;&#x6240;&#x6D89;&#x95EE;&#x9898;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x3002;

KLP10A &#x548C; KLP59C&#xFF1A; &#x52A8;&#x6001;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#x7684;&#x4E24;&#x540D;&#x7537;&#x5B50;&#x3002;

Kinesin-13s are important effectors of microtubule depolymerization in cells. In a recent series of studies, we examined the roles played by kinesin-13s throughout the cell cycle in Drosophila. Our findings have revealed remarkable coordination between two family members, KLP10A and KLP59C, in which alterations in the relative targeting of these proteins allows them to participate in markedly different tasks at distinct points in the cell cycle. During mitosis, KLP10A and KLP59C function in parallel by targeting to and depolymerizing the opposite ends of kinetochore-associated microtubules, thereby driving poleward chromatid motility by a Pacman-Flux mechanism. Alternatively, during interphase, both proteins target to the same end of the microtubule but act in series to divide the labor of microtubule depolymerization. KLP10A initiates depolymerization while KLP59C perpetuates depolymerization after its initiation. Below, we detail these findings and examine some of their implications.

KLP10A and KLP59C: the dynamic duo of microtubule depolymerization.

Kin&eacute;sine-13 s sont importants effecteurs de la d&eacute;polym&eacute;risation des microtubules dans les cellules. Dans une r&eacute;cente s&eacute;rie d&#39;&eacute;tudes, nous avons examin&eacute; les r&ocirc;les jou&eacute;s par la kin&eacute;sine-13 s tout au long du cycle cellulaire chez la drosophile. Nos r&eacute;sultats ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; une coordination remarquable entre deux membres de la famille, KLP10A et KLP59C, dans quelles alt&eacute;rations dans le ciblage relatif de ces prot&eacute;ines leur permet de participer &agrave; des t&acirc;ches sensiblement diff&eacute;rentes &agrave; des moments distincts dans la cellule du cycle. Au cours de la mitose, KLP10A et KLP59C fonctionnent en parall&egrave;le par ciblage et d&eacute;polym&eacute;risation les extr&eacute;mit&eacute;s oppos&eacute;es du kin&eacute;tochore associ&eacute;es aux microtubules, ainsi conduire la motilit&eacute; de chromatides s&oelig;urs vers le p&ocirc;le par un m&eacute;canisme de Pacman-Flux. Sinon, pendant l&#39;interphase, les deux prot&eacute;ines ciblent jusqu&#39;&agrave; la fin m&ecirc;me du microtubule, mais act en s&eacute;rie pour diviser le travail de d&eacute;polym&eacute;risation des microtubules. KLP10A lance la d&eacute;polym&eacute;risation tandis que KLP59C perp&eacute;tue la d&eacute;polym&eacute;risation apr&egrave;s son initiation. Ci-dessous, nous pr&eacute;ciser ces constatations et examiner certaines de leurs implications.

KLP10A et KLP59C : le duo dynamique de d&eacute;polym&eacute;risation des microtubules.

Kinesin-13 s sind wichtige Effektoren des Microtubule Depolymerisation in Zellen. In einer ganzen Serie von Studien wurden die Rollen gespielt von Kinesin-13 s w&auml;hrend des Zellzyklus in Drosophila. Unsere Erkenntnisse haben bemerkenswerte Koordinierung zwischen zwei Familienmitglieder, KLP10A und KLP59C ergeben, in welche Ver&auml;nderungen die relative Ausrichtung dieser Proteine erm&ouml;glicht ihnen die Teilnahme deutlich unterschiedliche Aufgaben an unterschiedlichen Punkten in der Zelle Zyklus. Mitose funktionieren w&auml;hrend KLP10A und KLP59C parallel-targeting und depolymerizing von die entgegengesetzten Enden der Kinetochor-assoziierte Mikrotubuli, damit fahren Mantelkante Chromatid Motilit&auml;t durch einen Pacman-Flux-Mechanismus. Alternativ w&auml;hrend der Interphase Zielen beide Proteine zu dem gleichen Zweck des Microtubule aber Akt in Serie, die Arbeit der Microtubule Depolymerisation zu unterteilen. KLP10A initiiert Depolymerisation, w&auml;hrend KLP59C Depolymerisation nach seiner Einleitung verewigt. Unten, wir detailliert diese Erkenntnisse und einige ihrer Auswirkungen zu untersuchen.

KLP10A und KLP59C: das dynamische Duo von Microtubule Depolymerisation.

Chinesina-13s sono importanti effettori della depolimerizzazione dei microtubuli nelle cellule. In una recente serie di studi, abbiamo esaminato il ruolo svolto da chinesina-13s per tutto il ciclo cellulare in drosofila. I nostri risultati hanno rivelato notevole coordinamento tra due membri della famiglia, KLP10A e KLP59C, nella quale alterazioni la relativa destinazione di queste proteine permette loro di partecipare a ciclo marcatamente diversi compiti in distinti punti della cella. Durante la mitosi, KLP10A e KLP59C funzionano in parallelo di targeting per e depolymerizing le estremit&agrave; opposte dei microtubuli associati al cinetocore, il guida quindi motilit&agrave; Cromatidio perturbato da un meccanismo di Pacman-Flux. In alternativa, durante l&#39;interfase, entrambe le proteine bersaglio per la stessa estremit&agrave; del microtubulo, ma atto in serie a dividere il lavoro di depolimerizzazione dei microtubuli. KLP10A avvia la depolimerizzazione mentre KLP59C perpetua depolimerizzazione dopo la sua iniziazione. Qui di seguito, abbiamo questi risultati di dettaglio ed esaminare alcune delle loro implicazioni.

KLP10A e KLP59C: il dinamico duo di depolimerizzazione dei microtubuli.

&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3; 13 &#x79D2;&#x306F;&#x3001;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x30B7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30BA;&#x3067;&#x306F;&#x3001;13 &#x79D2;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3; - &#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x5168;&#x4F53;&#x3067;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3067;&#x30BB;&#x30EB;&#x5185;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x70B9;&#x3067;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30BF;&#x30B9;&#x30AF; &#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F; 2 &#x3064;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3001;KLP10A &#x3068; KLP59C &#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x8ABF;&#x6574;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x9593;&#x306B; KLP10A &#x3068; KLP59C &#x4E26;&#x5217;&#x3067;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3001;&#x30AD;&#x30CD;&#x30C8;&#x30B3;&#x30A2;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x306E;&#x4E21;&#x7AEF;&#x3092;&#x91CD;&#x5408;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3; &#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6975;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x3051;&#x4F53;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x904B;&#x8EE2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x4E2D;&#x9593;&#x671F;&#x4E2D;&#x306B;&#x4E21;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x304C;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x306E;&#x52B4;&#x50CD;&#x3092;&#x5206;&#x5272;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30BA;&#x3067;&#x884C;&#x70BA;&#x306E;&#x540C;&#x3058;&#x7AEF;&#x306B;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;KLP59C &#x91CD;&#x5408;&#x305D;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x5F8C; perpetuates &#x306A;&#x304C;&#x3089; KLP10A &#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8A73;&#x3057;&#x304F;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x3002;

KLP10A &#x3068; KLP59C: &#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x30C7;&#x30E5;&#x30AA;&#x3002;

Kinesin 13s microtubule depolymerization &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xB294;. &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; kinesin-13s&#xAC00; &#xC5F0;&#xAE30;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xAC80;&#xC0AC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC1D;&#xD600; &#xB450; &#xAC00;&#xC871;, KLP10A &#xBC0F; KLP59C &#xC0AC;&#xC774; &#xB180;&#xB77C;&#xC6B4; &#xC870;&#xC815;,&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBCC0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD5C8;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC140;&#xC5D0; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC9C0;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC791;&#xC5C5; &#xC8FC;&#xAE30;. &#xB3D9;&#xC548; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;, KLP10A &#xBC0F; KLP59C &#xC791;&#xB3D9; &#xBCD1;&#xB82C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC744; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305;&#xACFC; microtubules kinetochore &#xC5F0;&#xACB0;&#xC758; &#xBC18;&#xB300;&#xCABD; &#xB05D;&#xC744; depolymerizing &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; poleward chromatid &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xD329; &#xB9E8;-&#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC6B4;&#xC804;. &#xB610;&#xB294;, &#xACC4;&#xBA74;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; microtubule &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB098;&#xB20C; microtubule depolymerization &#xB178;&#xB3D9; &#xC9C1;&#xB82C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC95; &#xAC19;&#xC740; &#xB05D;&#xC5D0; &#xB300;&#xC0C1;. KLP10A KLP59C depolymerization&#xC758; &#xAC1C;&#xC2DC; &#xD6C4; &#xACC4;&#xC18D; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; depolymerization&#xB97C; &#xC2DC;&#xC791; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xB798;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC790;&#xC138;&#xD788; &#xC124;&#xBA85; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC758;&#xBBF8;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC;.

KLP10A &#xBC0F; KLP59C: microtubule depolymerization&#xC758; &#xB2E4;&#xC774;&#xB098;&#xBBF9; &#xB4C0;&#xC624;.

Kinesin-13s son importantes generadores de despolimerizaci&oacute;n de microt&uacute;bulos en las c&eacute;lulas. En una reciente serie de estudios, examinamos los roles desempe&ntilde;ados por kinesin-13s durante todo el ciclo celular en Drosophila. Nuestros resultados han revelado notable coordinaci&oacute;n entre dos miembros de la familia, KLP10A y KLP59C, en que alteraciones en la orientaci&oacute;n relativa de estas prote&iacute;nas les permite participar en el ciclo marcadamente diferentes tareas en distintos puntos de la c&eacute;lula. Durante la mitosis, KLP10A y KLP59C trabajar en paralelo por orientaci&oacute;n a y depolymerizing los extremos opuestos de los microt&uacute;bulos cinetocoros asociada, tal modo conducci&oacute;n motilidad de crom&aacute;tidas hermanas hacia los polos por un mecanismo de flujo Pacman. Por otra parte, durante la interfase, ambas prote&iacute;nas objetivo hasta el final mismo de los microt&uacute;bulos pero ley en serie para dividir la labor de despolimerizaci&oacute;n de microt&uacute;bulos. KLP10A inicia despolimerizaci&oacute;n mientras KLP59C perpet&uacute;a despolimerizaci&oacute;n despu&eacute;s de su iniciaci&oacute;n. A continuaci&oacute;n detallan estos resultados y examinan algunas de sus implicaciones.

KLP10A y KLP59C: el d&uacute;o din&aacute;mico de despolimerizaci&oacute;n de microt&uacute;bulos.

&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7EBA;&#x9524;&#x6746;&#x7531; Pacman-&#x901A;&#x91CF;&#x673A;&#x5236;&#x8D70;&#x5411;&#x94FE;&#x63A5;&#x5230;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#xFF1A; &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x79EF;&#x6781; depolymerize &#x9644;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A0;&#x4E0A;&#x4E24;&#x7AEF; (Pacman&#xFF09; &#x540C;&#x65F6;&#x7F29;&#x56DE;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x8F74;&#x7531;&#x4E0D;&#x65AD;&#x5411;&#x6781;&#x6D41;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x8D1F;&#x7AEF;&#x89E3;&#x805A; &#xFF08;&#x5149;&#x901A;&#x91CF;) &#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7535;&#x6746;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A; Pacman-&#x901A;&#x91CF;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x4E2D;&#x5305;&#x542B;&#x4E86;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5272;&#x65AD;&#x9176;&#x3001; Spastin&#x3001; Fidgetin &#x548C; Katanin &#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;Spastin &#x548C; Fidgetin &#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x523A;&#x6FC0;&#x8D1F;&#x7AEF;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#x548C;&#x901A;&#x91CF;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x96C6;&#x4E2D;&#x4E2D;&#x5FC3;&#xFF0C;&#x5728;&#x90A3;&#x91CC;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x50AC;&#x5316; &gamma;-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x91CA;&#x653E;&#x7A33;&#x5B9A; &gamma;-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x73AF;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x4ECE;&#x51CF;&#x53BB;&#x4E24;&#x7AEF;&#x65BD;&#x52A0;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;Katanin &#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x5728;&#x540E;&#x671F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#xFF0C;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x5B83;&#x523A;&#x6FC0;&#x52A0;&#x7AEF;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#x548C;&#x57FA;&#x4E8E; Pacman &#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x5355;&#x4F53;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x548C;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5207;&#x65AD;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5185;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x53CA;&#x6269;&#x9614;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7528;&#x4E8E;&#x79FB;&#x52A8;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;

&#x4E09;&#x79CD;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5272;&#x65AD;&#x9176;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x79FB;&#x52A8;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&quot;Pacman-&#x901A;&quot;&#x673A;&#x68B0;&#x3002;

Chromosomes move toward mitotic spindle poles by a Pacman-flux mechanism linked to microtubule depolymerization: chromosomes actively depolymerize attached microtubule plus ends (Pacman) while being reeled in to spindle poles by the continual poleward flow of tubulin subunits driven by minus-end depolymerization (flux). We report that Pacman-flux in Drosophila melanogaster incorporates the activities of three different microtubule severing enzymes, Spastin, Fidgetin, and Katanin. Spastin and Fidgetin are utilized to stimulate microtubule minus-end depolymerization and flux. Both proteins concentrate at centrosomes, where they catalyze the turnover of gamma-tubulin, consistent with the hypothesis that they exert their influence by releasing stabilizing gamma-tubulin ring complexes from minus ends. In contrast, Katanin appears to function primarily on anaphase chromosomes, where it stimulates microtubule plus-end depolymerization and Pacman-based chromatid motility. Collectively, these findings reveal novel and significant roles for microtubule severing within the spindle and broaden our understanding of the molecular machinery used to move chromosomes.

Three microtubule severing enzymes contribute to the "Pacman-flux" machinery that moves chromosomes.

Les chromosomes se d&#xE9;placer vers les p&#xF4;les du fuseau mitotique par un m&#xE9;canisme de Pacman-flux li&#xE9;s &#xE0; la d&#xE9;polym&#xE9;risation des microtubules: chromosomes activement d&#xE9;polym&#xE9;riser microtubules ci-joint ainsi que les extr&#xE9;mit&#xE9;s (Pacman) tout en &#xE9;tant enroul&#xE9; pour p&#xF4;les du fuseau par le flux continu vers le p&#xF4;le de sous-unit&#xE9;s de tubuline entra&#xEE;n&#xE9;e par la fin de d&#xE9;polym&#xE9;risation moins (flux ). Nous signalons que Pacman-flux dans Drosophila melanogaster int&#xE8;gre les activit&#xE9;s de trois diff&#xE9;rentes enzymes de sectionnement des microtubules, SPASTIN, Fidgetin, et Katanin. Spastin et Fidgetin sont utilis&#xE9;s pour stimuler la microtubules moins la fin de d&#xE9;polym&#xE9;risation et de flux. Les deux prot&#xE9;ines se concentrer &#xE0; centrosomes, o&#xF9; ils catalysent le chiffre d&#x26;#39;affaires de la gamma-tubuline, compatible avec l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se selon laquelle ils exercent leur influence en lib&#xE9;rant de stabilisation complexes annulaires gamma-tubuline &#xE0; partir des extr&#xE9;mit&#xE9;s moins. En revanche, Katanin semble fonctionner principalement sur les chromosomes en anaphase, o&#xF9; elle stimule des microtubules ainsi que la fin de d&#xE9;polym&#xE9;risation et de Pacman bas&#xE9; sur la motilit&#xE9; des chromatides. Collectivement, ces r&#xE9;sultats r&#xE9;v&#xE8;lent de nouveaux r&#xF4;les et significatif pour rupture des microtubules dans la broche et d&#x26;#39;&#xE9;largir notre compr&#xE9;hension de la machinerie mol&#xE9;culaire utilis&#xE9;e pour d&#xE9;placer les chromosomes.

Trois enzymes Severing microtubules Contribuer &#xE0; la &#x26;quot;Pacman-flux&#x26;quot; Machines That Moves chromosomes

Chromosomen einen Schritt in Richtung mitotische Spindel Polen durch einen Pacman-Flux-Mechanismus verbunden Microtubule Depolymerisation: Chromosomen depolymerize aktiv angeschlossenen Microtubule zuz&uuml;glich enden (Pacman) zwar wieder zu Polen durch die kontinuierliche Mantelkante Str&ouml;mung Tubulin-Untereinheiten, die angetrieben von Minus-Ende Depolymerisation (Fluss)-Spindel, eingefangen. Wir berichten, dass Pacman-Flux in Drosophila Melanogaster die Aktivit&auml;ten der drei verschiedenen Microtubule ausgel&ouml;st Enzyme, Spastin, Fidgetin und Katanin umfasst. Spastin und Fidgetin werden eingesetzt, um Microtubule Minus-Ende Depolymerisation und Flussmittel zu stimulieren. Beide Proteine konzentrieren auf Centrosomes, wo sie katalysieren den Umsatz der Gamma-Tubulin, untermauern die Hypothese, dass sie ihren Einfluss nehmen, indem Sie freigeben, Gamma-Tubulin-Ring-komplexe aus abz&uuml;glich enden zu stabilisieren. Im Gegensatz dazu scheint Katanin Funktion in erster Linie bei Anaphase Chromosomen, wo es stimuliert Microtubule Plus-End Depolymerisation und Pacman-basierte Chromatid Motilit&auml;t. Gemeinsam diese Befunde zeigen, Roman und bedeutende Rollen f&uuml;r Microtubule Abbruch innerhalb der Spindel und erweitern unser Verst&auml;ndnis der molekularen Maschinerie verwendet, um Chromosomen zu verschieben.

Drei Microtubule ausgel&ouml;st Enzyme dazu beitragen, die &quot;Pacman-Flux&quot;-Maschinerie, die Chromosomen bewegt.

Cromosomi sposta verso i poli del fuso mitotico da un meccanismo di Pacman-flusso legato alla depolimerizzazione dei microtubuli: cromosomi depolymerize attivamente associato ai microtubuli plus finisce (Pacman) pur essendo annaspato in al mandrino polacchi dal flusso perturbato continuo di subunit&agrave; di tubulina guidato da minus-fine depolimerizzazione (flusso). Segnaliamo che Pacman-flux in Drosophila melanogaster incorpora le attivit&agrave; dei tre enzimi rottura microtubuli diversi, Spastin, Fidgetin e Katanin. Spastin e Fidgetin sono utilizzate per stimolare il flusso e depolimerizzazione minus-fine dei microtubuli. Entrambe le proteine concentrano a cntrosome, dove essi catalizzano il fatturato della gamma-tubulina, coerenza con l&#39;ipotesi che esercitano la loro influenza rilasciando stabilizzazione complessi di anello gamma-tubulina da meno le estremit&agrave;. Al contrario, Katanin appare ai cromosomi di anafase principalmente in funzione, dove stimola la depolimerizzazione plus-fine dei microtubuli e motilit&agrave; basati su Pacman Cromatidio. Collettivamente, questi risultati rivelano romanzo e ruoli significativi per microtubule recisione all&#39;interno del mandrino e ampliano la nostra comprensione di macchine molecolari utilizzate per spostare i cromosomi.

Tre enzimi rottura microtubuli contribuiscono al macchinario &quot;Pacman-flux&quot; che si muove di cromosomi.

&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#xFF1A;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#xFF08;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x6975;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x306B;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EB;&#x308C;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306F;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7AEF;&#xFF08;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#xFF09;&#x3092;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#x3002;&#xFF09;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30AD;&#x30A4;&#x30ED;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x3067;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;3&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x5207;&#x65AD;&#x9175;&#x7D20;&#x3001;Spastin&#x3001;Fidgetin&#x3001;&#x3068;Katanin&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3093;&#x3060;&#x3068;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; Spastin&#x3068;Fidgetin&#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x7AEF;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#x3068;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x7AEF;&#x304B;&#x3089;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3B3;-&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x89E3;&#x653E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x529B;&#x3092;&#x884C;&#x4F7F;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3001;&#x3B3;-&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x58F2;&#x4E0A;&#x9AD8;&#x3092;&#x89E6;&#x5A92;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306B;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;Katanin&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7AEF;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#x3068;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x4F53;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x3067;&#x4E3B;&#x306B;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x308B;&#x3002;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x5185;&#x3067;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x5207;&#x65AD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3084;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x3092;&#x79FB;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x5E83;&#x3052;&#x308B;&#x3002;

&#x4E09;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x5207;&#x65AD;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x3092;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x3001; &#x26;quot;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#xB7;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x26;quot;&#x6A5F;&#x68B0;&#x3078;&#x306E;&#x8CA2;&#x732E;

&#xD329; &#xB9E8;-&#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xAE30;&#xB465;&#xC744; &#xD5A5;&#xD574; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC774;&#xB3D9; microtubule depolymerization&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0;: &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xB294; &#xC801;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; microtubule depolymerize &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB05D; (&#xD329; &#xB9E8;) &#xB418;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD3F4;&#xB780;&#xB4DC;&#xC758; tubulin subunits &#xBE7C;&#xAE30; &#xC5D4;&#xB4DC; depolymerization (&#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4;)&#xC5D0; &#xD798;&#xC785;&#xC5B4; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; poleward &#xD750;&#xB984;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;&#xC5D0; reeled. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; Drosophila melanogaster&#xC758; &#xD329; &#xB9E8;-&#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xC138; &#xB2E4;&#xB978; microtubule severing &#xD6A8;&#xC18C;, Spastin, Fidgetin, &#xBC0F; Katanin&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD569; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Spastin &#xBC0F; Fidgetin microtubule &#xBE7C;&#xAE30; &#xC5D4;&#xB4DC; depolymerization &#xBC0F; &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xC790;&#xADF9;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; centrosomes, &#xC5B4;&#xB514; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xAC10;&#xB9C8;-tubulin, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xAC10;&#xB9C8; tubulin &#xBC18;&#xC9C0; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB05D;&#xC744; &#xBE80; &#xC548;&#xC815;&#xD654;&#xB97C; &#xBC29;&#xCD9C; &#xD558; &#xC5EC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xB825;&#xC744; &#xBC1C;&#xD718; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC124;&#xACFC; &#xC77C;&#xCE58;&#xC758; &#xB9E4;&#xCD9C; &#xC9C4;&#xC791; &#xC9D1;&#xC911;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, Katanin &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; anaphase &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; microtubule &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC5D4;&#xB4DC; depolymerization&#xC640; &#xD329; &#xB9E8; &#xAE30;&#xBC18; chromatid &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xC790;&#xADF9; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD1D;&#xCE6D; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC18C;&#xC124; &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; severing microtubule &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xACC4;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC774;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xAE30;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xD655;&#xB300;.

3 Microtubule severing &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC774;&#xB3D9; &quot;&#xD329; &#xB9E8;-&#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4;&quot; &#xAE30;&#xACC4;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;.

Los cromosomas se mueven hacia los polos del huso mit&#xF3;tico mediante un mecanismo de Pacman de flujo relacionado con la despolimerizaci&#xF3;n de microt&#xFA;bulos: cromosomas activamente despolimerizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos incorporado, extremos (Pacman), mientras que se tambale&#xF3; en el que los polos del huso por el flujo continuo hacia el polo de las subunidades de tubulina impulsado por menos de fin de despolimerizaci&#xF3;n (flujo de ). Nos informan de que Pacman de flujo en la Drosophila melanogaster incorpora las actividades de las tres enzimas diferentes microt&#xFA;bulos cortar las Spastin, Fidgetin y Katanin. Spastin y Fidgetin se utilizan para estimular microt&#xFA;bulos menos extremo despolimerizaci&#xF3;n y fundente. Ambas prote&#xED;nas se concentran en los centrosomas, que catalizan la cifra de negocios de la gamma-tubulina, en consonancia con la hip&#xF3;tesis de que ejercen su influencia mediante la liberaci&#xF3;n de la estabilizaci&#xF3;n de la gamma-tubulina complejos de anillos de los extremos de menos. Por el contrario, Katanin parece funcionar principalmente en los cromosomas en anafase, donde estimula los microt&#xFA;bulos m&#xE1;s extremo despolimerizaci&#xF3;n y Pacman con sede en la motilidad de crom&#xE1;tidas. En conjunto, estos resultados revelan nuevos roles y significativo para la ruptura de los microt&#xFA;bulos en el huso y ampliar nuestra comprensi&#xF3;n de la maquinaria molecular utilizada para mover los cromosomas.

Tres enzimas Severing microt&#xFA;bulos Contribuir al &#x26;quot;Pacman-flux&#x26;quot; La maquinaria que mueve los cromosomas

&#x5411;&#x6781;&#x901A;&#x91CF;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x4E9A;&#x57FA;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x662F;&#x5F15;&#x4EBA;&#x6CE8;&#x76EE;&#x548C;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x73B0;&#x8C61;&#xFF0C;&#x5176;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4ECD;&#x7136;&#x77E5;&#x4E4B;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;&#x5C4F;&#x5E55;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x901A;&#x91CF;&#x673A;&#x68B0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5229;&#x7528; RNA &#x5E72;&#x6270;&#x6280;&#x672F;&#x8981;&#x5355;&#x72EC;&#x5730;&#x548C;&#x4E0E;&#x5404;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#xFF0C;&#x4ECE; S2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x6D88;&#x8017;&#x81ED;&#x6C27;&#x5C42;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A8;&#x6001;&#x3001; &#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x548C;&#x5BA1;&#x67E5;&#x5BF9;&#x901A;&#x7387;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8FD9;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E86;&#x4E24;&#x79CD;&#x4EE5;&#x524D;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x901A;&#x91CF;&#x6291;&#x5236;&#x5242; KLP59C &#x548C; KLP67A &#x548C;&#x901A;&#x91CF;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x3001; &#x8FF7;&#x4F60;&#x5FC3;&#x8F74;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8FD9;&#x901A;&#x7387;&#x53D7;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7A33;&#x5B9A;&#x5242;&#x548C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5728; destabilizers &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x52A0;&#x4E0A;&#x7ED3;&#x675F;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x68C0;&#x67E5;&#x78C1;&#x76D8;&#x8F74;&#x7684;&#x52A9;&#x710A;&#x5242;&#x5DF2;&#x5411;&#x4E0A;&#x6216;&#x5411;&#x4E0B;&#x8C03;&#x8282;&#x6216;&#x8FD8;&#x539F;&#x540E;&#x7684;&#x62EE;&#x6297;&#x901A;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#xFF0C;codepletion &#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x901A;&#x91CF;&#x4E0A;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x540E;&#x671F; A &#x7684;&#x6574;&#x4F53;&#x8D21;&#x732E;&#x4F46;&#x4E0D;&#x8D1F;&#x8D23;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x53D1;&#x6563;&#x3001; interkinetochore &#x5F20;&#x529B;&#x6216;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x4E3B;&#x8F74;&#x957F;&#x5EA6;&#x671F;&#x95F4;&#x524D;/&#x4E2D;&#x665A;&#x671F;&#x3002;

&#x4E2D;&#x8F74;&#x5411;&#x6781;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x52A9;&#x710A;&#x5242;&#xFF1A; &#x8C03;&#x8282;&#x4E0E;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

The poleward flux of tubulin subunits through spindle microtubules is a striking and conserved phenomenon whose function and molecular components remain poorly understood. To screen for novel components of the flux machinery, we utilized RNA interference to deplete regulators of microtubule dynamics, individually and in various combinations, from S2 cells and examined the resulting impact on flux rate. This led to the identification of two previously unknown flux inhibitors, KLP59C and KLP67A, and a flux promoter, Mini-spindles. Furthermore, we find that flux rate is regulated by functional antagonism among microtubule stabilizers and destabilizers specifically at plus ends. Finally, by examining mitosis on spindles in which flux has been up- or down-regulated or restored after the codepletion of antagonistic flux regulators, we show that flux is an integral contributor to anaphase A but is not responsible for chromosome congression, interkinetochore tension, or the establishment of normal spindle length during prometaphase/metaphase.

Poleward tubulin flux in spindles: regulation and function in mitotic cells.

Le flux vers le p&ocirc;le de sous-unit&eacute;s de tubuline par les microtubules du fuseau est un ph&eacute;nom&egrave;ne frappant et conserv&eacute;, dont la fonction et les composants mol&eacute;culaires reste mal compris. Pour d&eacute;pister les nouveaux composants de la machinerie de flux, nous utilis&eacute; l&#39;interf&eacute;rence ARN pour &eacute;puiser les r&eacute;gulateurs de la dynamique des microtubules, individuellement et dans diverses combinaisons, des cellules S2 et examin&eacute; l&#39;incidence sur le taux de flux. Cela a conduit &agrave; l&#39;identification des deux inhibiteurs de flux inconnu, KLP59C et KLP67A et un promoteur de flux, Mini broches. En outre, nous constatons que le taux de flux est r&eacute;gul&eacute; par un antagonisme fonctionnel entre les stabilisateurs de microtubules et destabilizers sp&eacute;cifiquement &agrave; plus se termine. Enfin, en examinant la mitose sur des axes o&ugrave; flux a &eacute;t&eacute; vers le haut ou vers le bas-r&eacute;gl&eacute; ou restaur&eacute;e apr&egrave;s la codepletion des r&eacute;gulateurs de flux antagonistes, nous montrons que le flux est un contributeur int&eacute;gral &agrave; l&#39;anaphase A, mais n&#39;est pas responsable de chromosome congression, interkinetochore tension ou la mise en place de la longueur de l&#39;axe normal au cours de la prom&eacute;taphase/m&eacute;taphase.

Flux de tubuline vers le p&ocirc;le en fuseaux : r&eacute;gulation et fonction des cellules mitotiques.

Der Mantelkante Flux Tubulin-Untereinheiten durch Spindel Mikrotubuli ist ein auffallend und konservierten Ph&auml;nomen, dessen Funktion und molekularen Bestandteilen weitgehend unverstanden bleiben. Um f&uuml;r neuartige Komponenten der Maschine Flussmittel Bildschirm, wir RNA-Interferenz um Regulierungsbeh&ouml;rden Microtubule Dynamik, einzeln und in verschiedenen Kombinationen aus S2-Zellen zum Abbau genutzt und untersucht die daraus resultierenden Auswirkungen auf Flussmittel Rate. Dies f&uuml;hrte zur Identifikation von zwei bisher unbekannten Fluss-Hemmer, KLP59C und KLP67A, und Flussmittel F&ouml;rderer, Mini-Spindeln. Dar&uuml;ber hinaus finden wir, dass Flussmittel wird durch funktionale Antagonismus zwischen Microtubule Stabilisatoren und Destabilizers speziell auf zuz&uuml;glich endet. Schlie&szlig;lich durch Untersuchen der Mitose auf Spindeln in dem Fluss oben oder unten-geregelt oder wiederhergestellt wurde nach der Codepletion der antagonistischen Flussmittel Regulierungsbeh&ouml;rden, wir zeigen, dass Flussmittel ist ein wesentlicher Beitrag zur Anaphase A ist jedoch nicht verantwortlich f&uuml;r Chromosom Congression, interkinetochore Spannung oder die Einrichtung von normalen Spindel L&auml;nge w&auml;hrend Spindelapparat/Metaphase.

Mantelkante Tubulin Flussmittel in Spindeln: Verordnung und Funktion in der mitotischen Zellen.

Il flusso perturbato di subunit&agrave; di tubulina attraverso i microtubuli del fuso &egrave; un fenomeno sorprendente e conservato cui funzione e componenti molecolari rimanga scarsamente comprensibile. Per lo schermo per nuovi componenti del macchinario flux, abbiamo utilizzato interferenza del RNA per esaurire i regolatori della dinamica dei microtubuli, individualmente e in varie combinazioni, dalle celle S2 e ha esaminato il conseguente impatto sul tasso di flusso. Questo ha portato all&#39;identificazione di due inibitori di flusso precedentemente sconosciuti, KLP59C e KLP67A e un promotore di disossidante, Mini-mandrini. Inoltre, troviamo che il tasso di flusso &egrave; regolato da antagonismo funzionale tra microtubule stabilizzanti e destabilizers in particolare a plus termina. Infine, esaminando mitosi su mandrini in cui flusso &egrave; stato regolato in su o gi&ugrave; o ripristinato dopo la codepletion di regolatori di flusso antagonistico, mostriamo quel flusso &egrave; un contributore integrale di anafase A ma non &egrave; responsabile per il cromosoma congression, tensione interkinetochore o la creazione di lunghezza normale mandrino durante la metafase/prometafase.

Flux tubulina perturbato in fusi: regolamento e funzione nelle cellule mitotic.

&#x6975;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x307E;&#x307E;&#x5370;&#x8C61;&#x7684;&#x306A;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x73FE;&#x8C61;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x6A5F;&#x68B0;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x9078;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x500B;&#x5225;&#x306B;&#x3001;S2 &#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3067;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3059;&#x308B; RNA &#x5E72;&#x6E09;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x78C1;&#x675F;&#x901F;&#x5EA6;&#x306B;&#x7D50;&#x679C;&#x3078;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F; 2 &#x3064;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306F;&#x3001;KLP59C &#x3068; KLP67A &#x3068;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;&#x30DF;&#x30CB; &#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5264;&#x3001;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B; destabilizers &#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7D42;&#x4E86;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x3092;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x304C;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x62EE;&#x6297;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E; codepletion &#x5F8C;&#x306E;&#x5FA9;&#x5143;&#x306E;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F8C;&#x671F; A &#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;prometaphase/&#x4E2D;&#x671F;&#x4E2D;&#x306F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x6574;&#x5217;&#x3001;interkinetochore &#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x901A;&#x5E38;&#x4E3B;&#x8EF8;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x3092;&#x8CA0;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x6975;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; &#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;: &#x898F;&#x5236;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3002;

&#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; microtubules &#xD1B5;&#xD574; tubulin subunits&#xC758; poleward &#xC18D;&#xC740; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xD558; &#xACE0; &#xBCF4;&#xC874; &#xD604;&#xC0C1;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xACFC; &#xBD84;&#xC790; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC720;&#xC9C0; &#xC800;&#xC870;&#xD55C; &#xC774;&#xD574;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xAE30;&#xACC4;&#xB958;&#xC758; &#xC18C;&#xC124; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD654;&#xBA74;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; RNA &#xAC04;&#xC12D; &#xAC1C;&#xBCC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; S2 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC870;&#xD569;&#xC744; microtubule &#xC5ED;&#xD559;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB97C; &#xACE0;&#xAC08; &#xD558; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xB3D9; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83; &#xB450; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C0;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, KLP59C &#xBC0F; KLP67A, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;, &#xBBF8;&#xB2C8; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; &#xC720;&#xB7C9; &#xC18D;&#xB3C4; microtubule &#xC548;&#xC815;&#xAE30;&#xC640; &#xD2B9;&#xD788; destabilizers &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xBC18;&#xBAA9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC885;&#xB8CC; &#xCC3E;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4;&#xAC00; &#xC5C5; &#xB610;&#xB294; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xADDC;&#xC81C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xADF8; &#xC720;&#xB7C9; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB300;&#xB9BD; &#xC18D; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;, codepletion &#xD6C4; &#xBCF5;&#xC6D0;&#xC5D0; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xC5EC; anaphase A&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; prometaphase/&#xBD84;&#xC5F4; &#xC2DC; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; congression, interkinetochore &#xAE34;&#xC7A5; &#xB610;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xAE38;&#xC774; &#xC124;&#xB9BD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC744; &#xC9C0;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2A4;&#xD540;&#xC5D0; Poleward tubulin &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4;: &#xADDC;&#xC815;&#xACFC; mitotic &#xC140;&#xC5D0; &#xD568;&#xC218;.

El flujo hacia los polos de las subunidades de tubulina a trav&eacute;s de los microt&uacute;bulos del huso es un fen&oacute;meno sorprendente y conservado cuya funci&oacute;n y componentes moleculares siguen siendo mal entendido. Para detectar nuevos componentes de la maquinaria de flujo, nos utilizaron ARN de interferencia para agotar los reguladores de la din&aacute;mica de los microt&uacute;bulos, individualmente y en varias combinaciones, de c&eacute;lulas S2 y examin&oacute; el impacto resultante en la tasa de flujo. Esto condujo a la identificaci&oacute;n de dos inhibidores de flujo previamente desconocido, KLP59C y KLP67A y un promotor de flujo, Mini-husos. Adem&aacute;s, encontramos que la tasa de flujo est&aacute; regulada por antagonismo funcional entre estabilizadores de microt&uacute;bulos y desestabilizadores espec&iacute;ficamente en m&aacute;s extremos. Finalmente, mediante el examen de la mitosis en ejes que flujo ha sido regulado para arriba o abajo o restaurado despu&eacute;s de la codepletion de reguladores de flujo antag&oacute;nicos, mostramos ese flujo es un colaborador integral anafase A pero no es responsable de cromosoma congression, tensi&oacute;n interkinetochore o el establecimiento de la longitud del eje normal durante la Prometafase/metafase.

Flujo de tubulina hacia los polos en husos: regulaci&oacute;n y funci&oacute;n en c&eacute;lulas mit&oacute;ticas.

&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FDB;&#x5165;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#x5927;&#x5C0F;&#x548C;&#x6838;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6210;&#x719F;&#xFF0C;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x548C; &gamma;-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x86CB;&#x767D; G2/&#x524D;&#x671F;&#x5BF9;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6784;&#x6210;&#x7684; pericentriolar &#x6750;&#x6599;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684; centrosomal &#x86CB;&#x767D;&#x3001; Cep192 (centrosomal &#x86CB;&#x767D;&#x7684; 192 kDa)&#xFF0C;&#x662F;&#x6210;&#x719F;&#x673A;&#x68B0;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x5177;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x6709; Cep192 &#x4E2D;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E27;&#x5931;&#x529F;&#x80FD;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x5728;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x90A3;&#x4E2A; siRNA &#x67AF;&#x7AED;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; interphase &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x5728;&#x7F3A;&#x4E4F; Cep192 &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x6210;&#x4E3A;&#x56F4;&#x7ED5;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5F88;&#x5C11;&#x83B7;&#x5F97;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E24;&#x6781;&#x914D;&#x7F6E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5305;&#x542B;&#x6B63;&#x5E38;&#x6570;&#x5B57;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x80FD;&#x88C5;&#x914D;&#x5230;&#x6709;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684; PCM &gamma;-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; pericentrin &#x6216;&#x5176;&#x4ED6; pericentriolar &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x53E6;&#x5916;&#xFF0C;Cep192 &#x7684;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x8868;&#x8FBE;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x591A;&#x3001; &gamma;-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x548C; pericentrin extracentriolar &#x7076;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x652F;&#x6301; Cep192 &#x523A;&#x6FC0;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x540E;&#x54EA;&#x4E9B; &gamma;-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x73AF;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6838;&#x4E0E;&#x4E3B;&#x8F74;&#x88C5;&#x914D;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x671F;&#x95F4;&#x6210;&#x4E3A;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x7684;&#x811A;&#x624B;&#x67B6;&#x7684;&#x5047;&#x8BF4;&#x3002;

&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x548C;&#x4E3B;&#x8F74;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x9700;&#x8981;&#x4EBA;&#x7C7B; Cep192&#x3002;

As cells enter mitosis, centrosomes dramatically increase in size and ability to nucleate microtubules. This process, termed centrosome maturation, is driven by the accumulation and activation of gamma-tubulin and other proteins that form the pericentriolar material on centrosomes during G2/prophase. Here, we show that the human centrosomal protein, Cep192 (centrosomal protein of 192 kDa), is an essential component of the maturation machinery. Specifically, we have found that siRNA depletion of Cep192 results in a complete loss of functional centrosomes in mitotic but not interphase cells. In mitotic cells lacking Cep192, microtubules become organized around chromosomes but rarely acquire stable bipolar configurations. These cells contain normal numbers of centrioles but cannot assemble gamma-tubulin, pericentrin, or other pericentriolar proteins into an organized PCM. Alternatively, overexpression of Cep192 results in the formation of multiple, extracentriolar foci of gamma-tubulin and pericentrin. Together, our findings support the hypothesis that Cep192 stimulates the formation of the scaffolding upon which gamma-tubulin ring complexes and other proteins involved in microtubule nucleation and spindle assembly become functional during mitosis.

Human Cep192 is required for mitotic centrosome and spindle assembly.

Comme les cellules dans la mitose, les centrosomes augmentent consid&eacute;rablement en taille et en capacit&eacute; de noyaux de microtubules. Ce processus, appel&eacute; maturation du centrosome, repose sur l&#39;accumulation et l&#39;activation de gamma-tubuline et autres prot&eacute;ines qui forment le mat&eacute;riel p&eacute;ricentriolaire sur centrosomes durant la prophase/G2. Ici, nous montrons que la prot&eacute;ine humaine de centrosomes, Cep192 (prot&eacute;ine centrosomal de 192 kDa), est une composante essentielle de la machinerie de la maturation. Plus pr&eacute;cis&eacute;ment, nous ont trouv&eacute; cette d&eacute;pl&eacute;tion siRNA de Cep192 entra&icirc;ne une perte compl&egrave;te des centrosomes fonctionnelles en mitose mais pas interphase de cellules. Dans des cellules mitotiques manque Cep192, microtubules sont organisent autour de chromosomes mais rarement acqu&eacute;rir des configurations bipolaires stables. Ces cellules contiennent des nombres normaux de centrioles mais ne peuvent assembler des gamma-tubuline, pericentrin ou autres prot&eacute;ines p&eacute;ricentriolaire dans un PCM organis&eacute;e. Alternativement, la surexpression de Cep192 provoque la formation de multiples, extracentriolar foyers de gamma-tubuline et pericentrin. Ensemble, nos r&eacute;sultats soutiennent l&#39;hypoth&egrave;se que la Cep192 stimule la formation de l&#39;&eacute;chafaudage sur lequel gamma-tubuline complexes d&#39;anneau et d&#39;autres prot&eacute;ines impliqu&eacute;es dans l&#39;assemblage des microtubules nucl&eacute;ation et de la tige devenue fonctionnelle au cours de la mitose.

Cep192 humaine est obligatoire pour les assemblys centrosome et du fuseau mitotique.

Eingeben von Zellen Mitose erh&ouml;hen Centrosomes in Gr&ouml;&szlig;e und F&auml;higkeit zu Mikrotubuli nucleate drastisch. Dieser Prozess, genannt Zentrosom Reifung, wird angetrieben von der Anh&auml;ufung und Aktivierung von Gamma-Tubulin und andere Proteine, die das Pericentriolar Material auf Centrosomes w&auml;hrend G2/Prophase bilden. Hier zeigen wir, dass das menschliche centrosomal Protein, Cep192 (centrosomal Protein von 192 kDa) ist ein wesentlicher Bestandteil der Reifung-Maschine. Speziell, wir haben festgestellt, dass SiRNA-Ersch&ouml;pfung der Cep192 Ergebnisse zu einem vollst&auml;ndigen Verlust der funktionellen Centrosomes in mitotische aber nicht interphase Zellen. In mitotischen Zellen fehlt Cep192, Mikrotubuli geworden um Chromosomen organisiert, sondern erwerben selten stabile bipolare Konfigurationen. Diese Zellen enthalten normale Zahlen von Centrioles aber k&ouml;nnen nicht das Montieren von Gamma-Tubulin, Pericentrin oder andere Pericentriolar-Proteine in einer organisierten PCM. Alternativ f&uuml;hrt eine &Uuml;berexpression von Cep192 die Bildung von mehreren, Extracentriolar Herde von Gamma-Tubulin und Pericentrin. Zusammen, unterst&uuml;tzen unsere Erkenntnisse die Hypothese, dass Cep192 die Bildung des Ger&uuml;sts stimuliert auf die Gamma-Tubulin Ring-komplexe und andere Proteine Microtubule Keimbildung und Spindel Baugruppe werden funktionelle w&auml;hrend der Mitose beteiligt.

Menschliche Cep192 ist mitotische Zentrosom und Spindel Montage erforderlich.

Come cellule entra in mitosi, cntrosome drammaticamente aumentano in dimensioni e la capacit&agrave; di nucleazione microtubuli. Questo processo, definito maturazione centrosoma, &egrave; guidato dall&#39;accumulo e l&#39;attivazione della gamma-tubulina e altre proteine che formano il materiale pericentriolar sul cntrosome durante la profase/G2. Qui, ci mostrano che la proteina umana centrosomal, Cep192 (centrosomal proteina di kDa 192), &egrave; un componente essenziale della macchina, maturazione. In particolare, ci hanno trovato quel siRNA deplezione di Cep192 si traduce in una perdita completa di cntrosome funzionale in mitotica ma non interfase cellule. In cellule mitotic manca Cep192, microtubuli diventano organizzati intorno a cromosomi ma raramente acquisiscono configurazioni bipolare stabile. Queste cellule contengono un numero normale di centrioli ma non &egrave; possibile assemblare gamma-tubulina, pericentrin o altre proteine di pericentriolar in un PCM organizzato. In alternativa, sovraespressione di Cep192 provoca la formazione di multipli, extracentriolar foci di gamma-tubulina e pericentrin. Insieme, i nostri risultati supportano l&#39;ipotesi che Cep192 stimola la formazione del ponteggio su quale gamma-tubulina anello complessi e altre proteine coinvolte nella nucleazione e mandrino microtubuli diventare funzionale durante la mitosi.

Cep192 umana &egrave; necessaria per mitotic centrosoma e mandrino di montaggio.

&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3084;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x6838;&#x6CB8;&#x9A30;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6210;&#x719F;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3068; &gamma; &#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068; G2/&#x524D;&#x671F;&#x4E2D;&#x306B;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306B;&#x4E00;&#x5206;&#x6750;&#x6599;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x4ED6;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; centrosomal &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;Cep192 &#x30B7;&#x30E7;&#x30FC; &#xFF08;192 kDa &#x306E; centrosomal &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF09; &#x6210;&#x719F;&#x6A5F;&#x68B0;&#x306E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x304C;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x640D;&#x5931;&#x3067; Cep192 &#x7D50;&#x679C;&#x306E; siRNA &#x67AF;&#x6E07;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x4E2D;&#x9593;&#x671F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Cep192 &#x306B;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x56DE;&#x907F;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x3081;&#x3063;&#x305F;&#x306B;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30D0;&#x30A4;&#x30DD;&#x30FC;&#x30E9;&#x69CB;&#x6210;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x756A;&#x53F7;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x304C;&#x3001;&gamma; &#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x30DA;&#x30EA;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;&#x4E00;&#x5206;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x7684; PCM &#x306B;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EB;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;Cep192 &#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x7D50;&#x679C;&#x304C;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;extracentriolar &#x5DE3; &gamma; &#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30DA;&#x30EA;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x3067;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F; Cep192 &#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x304C;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x6838;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB; &#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA; &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x932F;&#x4F53;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3069;&#x306E; &gamma; &#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x6642;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x8DB3;&#x5834;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x652F;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; Cep192 &#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x3068;&#x4E3B;&#x8EF8;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC140; &#xC785;&#xB825; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;, centrosomes &#xD06C;&#xAE30;&#xC640; &#xB2A5;&#xB825; microtubules nucleate&#xC744; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Centrosome &#xC131;&#xC219; &#xB418; &#xB098; &#xD558;&#xB294;&#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB294; &#xB204;&#xC801; &#xAC10;&#xB9C8; tubulin &#xBC0F; g 2/&#xC758;&#xD5A5; &#xC911; centrosomes&#xC5D0; pericentriolar &#xBB3C;&#xC790;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; centrosomal &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Cep192 &#xD45C;&#xC2DC; (192 Kda&#xC758; centrosomal &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;) &#xC644;&#xC131; &#xAE30;&#xACC4;&#xB958;&#xC758; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; siRNA &#xACE0;&#xAC08;&#xC758; cep192&#xB294; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; mitotic &#xAE30;&#xB2A5; centrosomes &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; interphase &#xC140;. Cep192 &#xBD80;&#xC871; mitotic &#xC140; microtubules &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC8FC;&#xC704; &#xC870;&#xC9C1;&#xC774; &#xB420; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAC70;&#xC758; &#xC548;&#xC815; &#xB41C; &#xBC14;&#xC774; &#xD3F4;&#xB77C; &#xAD6C;&#xC131;&#xC744; &#xD68D;&#xB4DD;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; centrioles&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC22B;&#xC790;&#xAC00; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAC10;&#xB9C8; tubulin, pericentrin, &#xB610;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; pericentriolar &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC870;&#xC9C1;&#xB41C; PCM&#xC73C;&#xB85C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, cep192&#xC758; overexpression &#xB2E4;&#xC911;&#xC758; &#xD615;&#xC131;, &#xAC10;&#xB9C8; tubulin &#xBC0F; pericentrin&#xC758; extracentriolar foci &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; Cep192 &#xBE44; &#xACC4;&#xB294; &#xAC10;&#xB9C8; tubulin &#xC2DC; &#xBC18;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC911; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xB420; microtubule nucleation &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; cep192&#xB294; mitotic centrosome &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Como las c&eacute;lulas de entran en mitosis, centrosomas aumentan dram&aacute;ticamente en tama&ntilde;o y capacidad nuclear microt&uacute;bulos. Este proceso, denominado maduraci&oacute;n del centrosoma, es conducido por la acumulaci&oacute;n y activaci&oacute;n de gamma-tubulina y otras prote&iacute;nas que forman el material pericentriolar en centrosomas durante G2/profase. Aqu&iacute;, demostramos que la prote&iacute;na se humano, Cep192 (prote&iacute;na centros&oacute;micas de 192 kDa), es un componente esencial de la maquinaria de maduraci&oacute;n. Espec&iacute;ficamente, ha encontrado que el agotamiento de Cep192 da lugar a una p&eacute;rdida completa de centrosomas funcionales en mit&oacute;tico siRNA pero no interfase c&eacute;lulas. En c&eacute;lulas mit&oacute;ticas que carecen de Cep192, los microt&uacute;bulos organizarse alrededor de los cromosomas, pero rara vez adquirir configuraciones bipolares estables. Estas c&eacute;lulas contienen una cantidad normal de centriolos pero no pueden montar gamma-tubulina, pericentrin u otras prote&iacute;nas de pericentriolar en un PCM organizada. Alternativamente, la sobreexpresi&oacute;n de Cep192 resulta en la formaci&oacute;n de m&uacute;ltiples focos de extracentriolar de la gamma-tubulina y pericentrin. Juntos, nuestros resultados apoyan la hip&oacute;tesis que Cep192 estimula la formaci&oacute;n de los andamios sobre que gamma-tubulina anillo complejos y otras prote&iacute;nas involucradas en Asamblea de nucleaci&oacute;n y huso de microt&uacute;bulos ser funcional durante la mitosis.

Cep192 humano es necesario para montaje centrosoma y del huso mit&oacute;tico.

&#x9002;&#x5EA6;&#x662F;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684;&#x6B63;&#x786E;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x3001; &#x8FD0;&#x52A8;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x9694;&#x79BB;&#x3002;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EBA;&#x9524;&#x8FD0;&#x52A8;&#x4E3B;&#x8F74;&#x4E0A;&#x5206;&#x6790;&#x89E3;&#x5256;&#x57FA;&#x7840;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7EBA;&#x9524;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x5F53;&#x4EE3;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x64CD;&#x7EB5;&#x6D3B;&#x679C;&#x8747;&#x5408;&#x80DE;&#x86CB;&#x6E05;&#x9636;&#x6BB5;&#x80DA;&#x80CE;&#x548C; S2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7EBA;&#x9524;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7814;&#x7A76;&#x679C;&#x8747;&#x4E2D;&#x7684;&#x52A8;&#x7C92;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

Kinetochores are essential for the proper positioning, movement and segregation of chromosomes on spindle microtubules. Live cell analyses of kinetochore movements on the spindle provide an important tool for dissecting the molecular machinery underlying kinetochore-based chromosome motility. Here, we describe contemporary techniques for studying and manipulating kinetochore function in live Drosophila syncytial blastoderm-stage embryos and S2 cells.

Live cell approaches for studying kinetochore-microtubule interactions in Drosophila.

Kin&eacute;tochores sont essentiels pour le bon positionnement, mouvement et la s&eacute;gr&eacute;gation des chromosomes sur les microtubules du fuseau. Cellules vivantes analyses des mouvements du kin&eacute;tochore sur la broche constituer un outil important pour diss&eacute;quer les m&eacute;canismes mol&eacute;culaires qui sous-tendent la motilit&eacute; du chromosome ax&eacute;e sur les kin&eacute;tochores. Nous d&eacute;crivons ici les techniques contemporaines pour &eacute;tudier et manipuler la fonction kin&eacute;tochore chez des embryons de drosophile syncytial blastoderme-stade direct et cellules S2.

Approches de cellules vivantes pour &eacute;tudier les interactions du kin&eacute;tochore-microtubules chez la drosophile.

Kinetochores sind entscheidend f&uuml;r die richtige Positionierung, Bewegung und Segregation von Chromosomen auf Spindel Mikrotubuli. Live Zelle Analysen Kinetochor Bewegungen auf der Spindel vorsehen, dass ein wichtiges Instrument die molekulare Maschinerie, die zugrunde liegenden Kinetochor-basierte Chromosom Motilit&auml;t sezieren. Hier beschreiben wir zeitgen&ouml;ssische Techniken zur Untersuchung und Manipulation von Kinetochor-Funktion im Leben Drosophila-syncytial-Blastoderm-Stadium eines Embryos und S2-Zellen.

Live Zelle Ans&auml;tze f&uuml;r das Studium Kinetochor-Microtubule Interaktionen in Drosophila.

Cinetocori sono essenziali per il corretto posizionamento, movimento e segregazione dei cromosomi sui microtubuli del fuso. Analisi diretta delle cellule dei movimenti cinetocore sul mandrino forniscono uno strumento importante per macchine molecolari sottostanti motilit&agrave; basati su cinetocore cromosoma di dissezione. Qui, descriviamo tecniche contemporanee per studiare e manipolare funzione cinetocore in diretta della drosofila blastoderma sinciziale-fase embrioni e cellule S2.

Live cell approcci per lo studio delle interazioni microtubulo-cinetocore in drosofila.

&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6C7A;&#x3081;&#x3001;&#x52D5;&#x304D;&#x3068;&#x504F;&#x6790;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x5F15;&#x3063;&#x3071;&#x308A;&#x304C;&#x6B20;&#x304B;&#x305B;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x89E3;&#x6790;&#x30AD;&#x30CD;&#x30C8;&#x30B3;&#x30A2;&#x52D5;&#x304D;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x904B;&#x52D5;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x68B0;&#x89E3;&#x5256;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x52C9;&#x5F37;&#x3068;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x306E;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x80DE;&#x80DA;&#x671F;&#x306E;&#x80DA;&#x3068; S2 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x73FE;&#x4EE3;&#x7684;&#x306A;&#x6280;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30BB;&#x30EB; &#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AD;&#x30CD;&#x30C8;&#x30B3;&#x30A2;-&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8FD1;&#x3065;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Kinetochores &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC704;&#xCE58;, &#xC6B4;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; microtubules&#xC5D0; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;&#xC5D0; kinetochore&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xBD84;&#xC11D; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; kinetochore &#xAE30;&#xBC18; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xBD84;&#xC790; &#xAE30;&#xACC4; &#xD574; &#xBD80;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; Drosophila syncytial blastoderm &#xB2E8;&#xACC4; &#xBC30;&#xC544;&#xC640; S2 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; kinetochore &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xC870;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xD604;&#xB300; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC;&#xC5D0; kinetochore microtubule &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC811;&#xADFC;.

Cinetocoros son esenciales para la correcta colocaci&oacute;n, movimiento y segregaci&oacute;n de los cromosomas a los microt&uacute;bulos del huso. An&aacute;lisis de c&eacute;lulas vivas de los movimientos del cinetocoro en el eje constituyen una herramienta importante para la disecci&oacute;n de la maquinaria molecular subyacente motilidad basadas en cinetocoro cromosoma. Aqu&iacute;, describimos t&eacute;cnicas contempor&aacute;neas para estudiar y manipular la funci&oacute;n del cinetocoro en S2 c&eacute;lulas y embriones en fase blastodermo sincitial Drosophila vivos.

Enfoques para el estudio de las interacciones del cinetocoro-microt&uacute;bulos en Drosophila en c&eacute;lulas vivas.

&#x4E25;&#x683C;&#x76D1;&#x7BA1;&#x7684;&#x7EBA;&#x9524;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x662F;&#x751F;&#x6210;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x548C;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5728;&#x7EBA;&#x9524;&#x4E0A;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x3002;&#x672C;&#x89C4;&#x4F8B;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x4F46;&#x795E;&#x79D8;&#x65B9;&#x9762;&#x65F6;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4E2D;&#x671F;&#x671F;&#x95F4;&#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A0;&#x7AEF;&#x5E73;&#x8861;&#x70B9;&#x5E73;&#x8861;&#x7684;&#x51CF;&#x53F7;&#x4E24;&#x7AEF;&#x5176;&#x964D;&#x89E3;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x52A8;&#x7C92;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x4FDD;&#x6301;&#x6052;&#x5B9A;&#x7684;&#x51C0;&#x957F;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8981;&#x575A;&#x6301;&#x5728;&#x4E3B;&#x8F74;&#x8D64;&#x9053;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x65AD;&#x5730;&#x671D;&#x5411;&#x4E3B;&#x8F74;&#x4E24;&#x6781;&#x52A9;&#x710A;&#x5242;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6784;&#x9020;&#x63A7;&#x5236;&#x7EBA;&#x9524;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A0;&#x7AEF;&#x52A8;&#x6001;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x5408;&#x8499;&#x7279;&#x5361;&#x7F57;&#x7B97;&#x6CD5;&#x6765;&#x6A21;&#x62DF;&#x4E2D;&#x665A;&#x671F;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x6D41;&#x91CF;&#x8C03;&#x8282;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x7F51;&#x7EDC;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x901A;&#x8FC7;&#x5C06;&#x5B83;&#x4E0E;&#x663E;&#x5F0F;&#x8003;&#x8651;&#x529B;&#x53D1;&#x7535;&#x673A;&#x7684;&#x529B;&#x5E73;&#x8861;&#x6A21;&#x578B;&#x7EC4;&#x5408;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684;&#x7F51;&#x7EDC;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#x5982;&#x4F55;&#x76F8;&#x5BF9;&#x7B80;&#x5355;&#x76F8;&#x4E92;&#x5173;&#x7CFB;&#x523A;&#x6FC0;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A0;&#x7AEF;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x805A;&#x5408;&#x3001; &#x89E3;&#x805A;&#x548C; dynamicity &#x53EF;&#x4EE5;&#x51C6;&#x786E;&#x5730;&#x9884;&#x6D4B;&#x663E;&#x7136;&#x662F;&#x76F8;&#x4E92;&#x77DB;&#x76FE;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x51FB;&#x5012;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#x4FC3;&#x4F7F;&#x9C81;&#x68D2;&#x901A;&#x91CF;&#x3002;&#x8BE5;&#x6A21;&#x578B;&#x8FD8;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x7B80;&#x5355;&#x548C;&#x53EF;&#x9760;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BE5;&#x76D1;&#x7BA1;&#x7F51;&#x7EDC;&#x5728;&#x7EBA;&#x9524;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A0;&#x53F7;&#x548C;&#x51CF;&#x53F7;&#x7AEF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8FDB;&#x884C;&#x901A;&#x4FE1;&#x3002;

&#x76D1;&#x7BA1;&#x7F51;&#x7EDC;&#x63A7;&#x5236;&#x52A8;&#x7C92;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A0;&#x7AEF;&#xFF0C;&#x5411;&#x6781;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x6A21;&#x578B;&#x901A;&#x5728;&#x4E2D;&#x665A;&#x671F;&#x3002;

Tight regulation of kinetochore microtubule dynamics is required to generate the appropriate position and movement of chromosomes on the mitotic spindle. A widely studied but mysterious aspect of this regulation occurs during metaphase when polymerization of kinetochore microtubule plus-ends is balanced by depolymerization at their minus-ends. Thus, kinetochore microtubules maintain a constant net length, allowing chromosomes to persist at the spindle equator, but consist of tubulin subunits that continually flux toward spindle poles. Here, we construct a feasible network of regulatory proteins for controlling kinetochore microtubule plus-end dynamics, which was combined with a Monte Carlo algorithm to simulate metaphase tubulin flux. We also test the network model by combining it with a force-balancing model explicitly taking force generators into account. Our data reveal how relatively simple interrelationships among proteins that stimulate microtubule plus-end polymerization, depolymerization, and dynamicity can induce robust flux while accurately predicting apparently contradictory results of knockdown experiments. The model also provides a simple and robust physical mechanism through which the regulatory networks at kinetochore microtubule plus- and minus-ends could communicate.

A model for the regulatory network controlling the dynamics of kinetochore microtubule plus-ends and poleward flux in metaphase.

R&egrave;glement serr&eacute; de la dynamique des microtubules kin&eacute;tochores est requis pour g&eacute;n&eacute;rer la position appropri&eacute;e et le mouvement des chromosomes sur le fuseau mitotique. Un aspect largement &eacute;tudi&eacute; mais myst&eacute;rieux du pr&eacute;sent r&egrave;glement se produit au cours de la m&eacute;taphase, lors de la polym&eacute;risation des microtubules kin&eacute;tochores plus fin est &eacute;quilibr&eacute;e par d&eacute;polym&eacute;risation &agrave; leurs extr&eacute;mit&eacute;s de moins. Ainsi, les microtubules kin&eacute;tochores maintiennent une longueur nette constante, permettant aux chromosomes &agrave; persister &agrave; l&#39;&Eacute;quateur du fuseau, mais sont constitu&eacute;s de sous-unit&eacute;s de tubuline qui continuellement de flux vers les p&ocirc;les du fuseau. Ici, nous construisons un r&eacute;seau possible des prot&eacute;ines r&eacute;gulatrices pour contr&ocirc;ler le kin&eacute;tochore microtubule en bout plus dynamique qui a &eacute;t&eacute; combin&eacute;e avec un algorithme de Monte-Carlo pour simuler les flux de tubuline m&eacute;taphase. Nous testons &eacute;galement le mod&egrave;le de r&eacute;seau en le combinant avec un mod&egrave;le d&#39;&eacute;quilibrage de force explicitement compte des g&eacute;n&eacute;rateurs de force. Nos donn&eacute;es r&eacute;v&egrave;lent comment relativement simples corr&eacute;lations parmi les prot&eacute;ines qui stimulent le plus fin de microtubules polym&eacute;risation et d&eacute;polym&eacute;risation dynamicit&eacute; peuvent induire des flux robuste tout en pr&eacute;disant avec pr&eacute;cision des r&eacute;sultats apparemment contradictoires des exp&eacute;riences d&eacute;montable. Le mod&egrave;le fournit &eacute;galement un m&eacute;canisme physique simple et robuste, qui pouvaient communiquer les r&eacute;seaux r&eacute;gulateurs au kin&eacute;tochore microtubule plus et moins-embouts.

Un mod&egrave;le pour le r&eacute;seau de r&eacute;gulation contr&ocirc;le la dynamique des microtubules kin&eacute;tochores plus fin et vers le p&ocirc;le flux en m&eacute;taphase.

Enge Verordnung Kinetochor Microtubule Dynamik wird ben&ouml;tigt, um die geeignete Position und Bewegung der Chromosomen auf die mitotische Spindel zu generieren. Ein weithin Studium aber mysteri&ouml;ser Aspekt dieser Verordnung tritt w&auml;hrend der Metaphase, wenn Polymerisation von Kinetochor Microtubule Plus-Enden durch Depolymerisation an ihren Minus-enden ausgeglichen ist. Auf diese Weise beibehalten Kinetochor-Mikrotubuli eine Konstante L&auml;nge, so dass Chromosomen bestehen am &Auml;quator Spindel, sondern bestehen aus Tubulin-Untereinheiten, die st&auml;ndig in Richtung zu Spindel Pfosten Flussmittel. Hier bauen wir ein machbar Netzwerk von regulatorischen Proteine f&uuml;r die Steuerung von Kinetochor Microtubule Plus-End Dynamik, die mit einer Monte-Carlo-Algorithmus Metaphase Tubulin Flussmittel simulieren kombiniert wurde. Wir testen auch das Netzwerkmodell durch die Kombination mit einem Kraft-balancing Modell Ber&uuml;cksichtigung explizit Kraft-Generatoren. Unsere Daten zeigen, wie relativ einfache Zusammenh&auml;nge zwischen Proteinen, die Microtubule Plus-Ende stimulieren Polymerisation und Depolymerisation Dynamik k&ouml;nnen robuste Flussmittel ausl&ouml;sen, w&auml;hrend genaue Vorhersage scheinbar widerspr&uuml;chlichen Ergebnisse der Niederschlag Experimente. Das Modell bietet auch einen einfachen und robusten physikalischen Mechanismus, durch den die regulatorische Netzwerke am Kinetochor Microtubule Plus - und Minus-enden kommunizieren k&ouml;nnte.

Ein Modell f&uuml;r die regulatorischen Netzwerk steuern die Dynamik der Kinetochor Microtubule Plus-enden und Mantelkante flux in Metaphase.

Stretto regolamento della dinamica dei microtubuli cinetocore &egrave; necessaria per generare la posizione appropriata e il movimento dei cromosomi sul fuso mitotico. Un aspetto ampiamente studiato ma misterioso di questo regolamento si verifica durante la metafase quando polimerizzazione del cinetocore microtubule plus-estremit&agrave; &egrave; bilanciata dalla depolimerizzazione delle minus-estremit&agrave;. Cos&igrave;, microtubuli del cinetocoro mantengono una lunghezza netta costante, permettendo di cromosomi a persistere all&#39;equatore mandrino, ma costituiti da subunit&agrave; di tubulina che continuamente flusso verso poli mandrino. Qui, costruiamo una rete di proteine regolatorie per controllare le dinamiche di cinetocore microtubule plus-fine, che &egrave; stato combinato con un algoritmo Montecarlo per simulare il flusso di tubulina metafase fattibile. Testiamo anche il modello di rete attraverso la combinazione con un forza di bilanciamento del modello esplicitamente in generatori di forza tenendo conto. I nostri dati rivelano come relativamente semplice interrelazioni tra le proteine che stimolano il microtubulo plus-fine polimerizzazione e depolimerizzazione dinamicit&agrave; pu&ograve; indurre il flusso robusto mentre predire con precisione apparentemente contraddittori risultati di esperimenti di atterramento. Il modello include anche un semplice e robusto meccanismo fisico attraverso il quale le reti regolamentari al cinetocore microtubule plus-minus-estremit&agrave; e potrebbero comunicare.

Un modello per la rete regolamentare controllando la dinamica del cinetocore microtubule plus-estremit&agrave; e mitigazione di flusso in metafase.

&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x53B3;&#x683C;&#x306A;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3068;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7AEF;&#x306E;&#x91CD;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x7AEF;&#x3067;&#x30D0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x304C;&#x53D6;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x5E83;&#x304F;&#x52C9;&#x5F37;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x79D8;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x3053;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x4E2D;&#x671F;&#x4E2D;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x8D64;&#x9053;&#x3067;&#x3082;&#x4FDD;&#x6301;&#x304C;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306B;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x6975;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x7D14;&#x9577;&#x3055;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x671F;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; &#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x30B7;&#x30DF;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30E2;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AB;&#x30EB;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4F75;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7AEF;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5B9F;&#x73FE;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x660E;&#x793A;&#x7684;&#x306B;&#x529B;&#x767A;&#x96FB;&#x6A5F;&#x3092;&#x8003;&#x616E;&#x529B;&#x5206;&#x6563;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7AEF;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x9593;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x76F8;&#x4E92;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x91CD;&#x5408;&#x30FB;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x3001;dynamicity &#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x77DB;&#x76FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3067;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;-&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x304C;&#x901A;&#x4FE1;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x30B7;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304B;&#x3064;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x7269;&#x7406;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7AEF;&#x3068;&#x6975;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x671F;&#x306B;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xAF49; &#xADDC;&#xC81C; kinetochore microtubule &#xC5ED;&#xD559;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC704;&#xCE58; &#xBC0F; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;&#xC758; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xADDC;&#xC815;&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC2E0;&#xBE44;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCE21;&#xBA74; kinetochore microtubule &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4;-&#xB05D;&#xC758; &#xC911; &#xD569; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBE7C;&#xAE30; &#xB05D;&#xC5D0; depolymerization&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADE0;&#xD615;&#xC740; &#xBD84;&#xC5F4; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, kinetochore microtubules &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xC801;&#xB3C4; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xAE30;&#xB465;&#xC744; &#xD5A5;&#xD574; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xCD9C; tubulin subunits &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC77C;&#xC815; net &#xAE38;&#xC774; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBD84;&#xC5F4; tubulin &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xC2DC;&#xBBAC;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBAAC;&#xD14C;&#xCE74;&#xB97C;&#xB85C; &#xC54C;&#xACE0;&#xB9AC;&#xC998;&#xC73C;&#xB85C; &#xACB0;&#xD569; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; kinetochore microtubule &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC5D4;&#xB4DC; &#xC5ED;&#xD559;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xADDC;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC2E4;&#xD604; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xAD6C;&#xC131;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xBA85;&#xC2DC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xACE0;&#xB824; &#xAC15;&#xC81C; &#xBC1C;&#xC804;&#xAE30; &#xD798; &#xBD84;&#xC0B0; &#xBAA8;&#xB378;&#xACFC; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xACF5;&#xAC1C; microtubule &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4;-&#xB05D;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xAD00;&#xACC4; &#xC911; &#xD569;, depolymerization, &#xBC0F; dynamicity &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xBD84;&#xBA85;&#xD788; &#xBAA8;&#xC21C; &#xB41C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xC608;&#xCE21; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB378;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xADDC;&#xC81C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC5D0;&#xC11C; kinetochore microtubule &#xB354;&#xD558;&#xAE30; &#xBC0F; &#xBE7C;&#xAE30;-&#xC5D4;&#xB4DC; &#xD1B5;&#xC2E0; &#xC218;&#xB294; &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xACE0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC81C;&#xC5B4; kinetochore microtubule &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB05D; &#xC5ED;&#xD559; poleward &#xADDC;&#xC81C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xBAA8;&#xB378; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xC720;&#xCD9C;.

Regulaci&oacute;n apretado de la din&aacute;mica de microt&uacute;bulos cinetocoros es necesaria para generar la posici&oacute;n adecuada y el movimiento de los cromosomas en el huso mit&oacute;tico. Un aspecto ampliamente estudiado pero misterioso de este Reglamento se presenta durante la metafase cuando polimerizaci&oacute;n de microt&uacute;bulos cinetocoros plus fines es balanceada por despolimerizaci&oacute;n en sus extremos menos. As&iacute;, los microt&uacute;bulos cinetocoros mantienen una longitud neta constante, permitiendo que los cromosomas a persistir en el Ecuador del huso, pero consisten en subunidades de tubulina que continuamente el flujo hacia los polos del huso. Aqu&iacute;, construimos una red viable de prote&iacute;nas reguladoras para controlar la din&aacute;mica de plus-final de microt&uacute;bulos cinetocoros, que fue combinada con un algoritmo de Monte Carlo para simular el flujo de tubulina de metafase. Tambi&eacute;n probamos el modelo de red al combinarlo con un modelo de equilibrio de fuerza expl&iacute;citamente habida cuenta de los generadores de fuerza. Nuestros datos revelan c&oacute;mo relativamente simples interrelaciones entre prote&iacute;nas que estimulan los microt&uacute;bulos plus-final polimerizaci&oacute;n y despolimerizaci&oacute;n dinamismo pueden inducir flujo robusto mientras predecir con precisi&oacute;n resultados aparentemente contradictorios de experimentos de precipitaci&oacute;n. El modelo tambi&eacute;n proporciona un mecanismo f&iacute;sico simple y robusto, a trav&eacute;s del cual las redes reguladoras en cinetocoro microt&uacute;bulos plus-minus-extremos y pudieran comunicarse.

Un modelo para la red regulador controla la din&aacute;mica del cinetocoro microt&uacute;bulos plus-extremos y hacia los polos del flujo en metafase.

&#x679C;&#x8747; Augmin &#x590D;&#x6742;&#x672C;&#x5730;&#x5316; &gamma;-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x5BF9;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x7EBA;&#x9524;&#xFF0C;&#x8C03;&#x8282;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5728;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x57F9;&#x517B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A; Msd1 &#x5FAE;&#x7BA1;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x4F5C;&#x4E3A; Augmin &#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x65B0;&#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5E76;&#x76F4;&#x63A5;&#x8868;&#x660E;&#x5B83;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x6210;&#x6838;&#x5185;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x4E3B;&#x8F74;&#x4ECE;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x3002;Msd1 &#x662F;&#x80DA;&#x80CE;&#x5408;&#x80DE; mitoses &#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x62E5;&#x6709;&#x4E00;&#x79CD;&#x7A81;&#x53D8; msd1 &#x82CD;&#x8747;&#x662F;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x4E3B;&#x8F74;&#x4E2D;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6838;&#x6210;&#x4E3A;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x590D;&#x6742;&#x7684; Augmin &#x5728;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x6709;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x65B0;&#x7684; Augmin &#x4E9A;&#x57FA;&#xFF0C;Msd1&#xFF0C;&#x6F14;&#x793A;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x4E3B;&#x8F74;&#x6A21;&#x677F;&#x5316;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6838;&#x6CA1;&#x6709;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;

The Drosophila Augmin complex localizes gamma-tubulin to the microtubules of the mitotic spindle, regulating the density of spindle microtubules in tissue culture cells. Here, we identify the microtubule-associated protein Msd1 as a new component of the Augmin complex and demonstrate directly that it is required for nucleation of microtubules from within the mitotic spindle. Although Msd1 is necessary for embryonic syncytial mitoses, flies possessing a mutation in msd1 are viable. Importantly, however, in the absence of centrosomes, microtubule nucleation from within the spindle becomes essential. Thus, the Augmin complex has a crucial role in the development of the fly.

A new Augmin subunit, Msd1, demonstrates the importance of mitotic spindle-templated microtubule nucleation in the absence of functioning centrosomes.

Le complexe de Drosophila Augmin localise gamma-tubuline pour les microtubules du fuseau mitotique, r&eacute;gulation de la densit&eacute; des microtubules du fuseau dans les cellules de culture de tissus. Ici, nous identifions les prot&eacute;ines associ&eacute;es aux microtubules Msd1 comme une nouvelle composante du complexe Augmin et d&eacute;montrer directement qu&#39;il est n&eacute;cessaire pour la nucl&eacute;ation des microtubules de dans le fuseau mitotique. Bien que Msd1 est n&eacute;cessaire pour les mitoses syncytiales embryonnaires, mouches poss&eacute;dant une mutation msd1 sont viables. Ce qui est important, cependant, en l&#39;absence des centrosomes, nucl&eacute;ation des microtubules au sein de l&#39;axe devient indispensable. Ainsi, le complexe de Augmin a un r&ocirc;le crucial dans le d&eacute;veloppement de la mouche.

Une nouvelle Augmin sous-unit&eacute;, Msd1, d&eacute;montre l&#39;importance de la nucl&eacute;ation mitotique microtubulaire broche-bas&eacute; sur un mod&egrave;le en l&#39;absence de fonctionnement centrosomes.

Der Taufliege Augmin Komplex lokalisiert Gamma-Tubulin an die Mikrotubuli der mitotischen Spindel, die Dichte der Spindel Mikrotubuli in Gewebekultur Zellen regulieren. Hier, wir identifizieren das Microtubule-assoziierte Protein Msd1 als neue Komponente des Augmin komplexes und zeigen direkt, dass es f&uuml;r die Erforschung der Mikrotubuli aus innerhalb der mitotischen Spindel erforderlich ist. Obwohl Msd1 embryonalen syncytial-Mitosen erforderlich ist, sind die fliegen besitzen eine Mutation in msd1 brauchbar. Wichtig ist, wird jedoch in Ermangelung Centrosomes, Microtubule Keimbildung von innerhalb der Spindel notwendig. So hat die komplexe Augmin eine entscheidende Rolle bei der Entwicklung der Fliege.

Eine neue Augmin-Untereinheit, Msd1, zeigt die Bedeutung der mitotische Spindel-vorlagenbasierten Microtubule Keimbildung in Ermangelung von funktionierenden Centrosomes.

Il complesso della drosofila Augmin localizza gamma-tubulina ai microtubuli del fuso mitotico, che regolano la densit&agrave; dei microtubuli del fuso in cellule di coltura del tessuto. Qui, ci identifichiamo il microtubule-associated protein Msd1 come un nuovo componente del complesso Augmin e dimostrare direttamente che &egrave; richiesto per nucleazione dei microtubuli da entro il fuso mitotico. Sebbene Msd1 &egrave; necessaria per mitosi embrionale sinciziale, che possiedono una mutazione msd1 le mosche sono vitali. Importante, tuttavia, in assenza di cntrosome, nucleazione microtubuli all&#39;interno del mandrino diventa essenziale. Cos&igrave;, il complesso di Augmin ha un ruolo cruciale nello sviluppo della Mosca.

Una nuova subunit&agrave; Augmin, Msd1, testimonia l&#39;importanza della nucleazione mitotica microtubule basato su mandrino in assenza di funzionamento cntrosome.

&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8; Augmin &#x30B3;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &gamma; &#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; &#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x7D44;&#x7E54;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x898F;&#x5236;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; Augmin &#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x95A2;&#x9023;&#x86CB;&#x767D; Msd1 &#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x304B;&#x3089;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x5185;&#x306E;&#x6838;&#x5F62;&#x6210;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Msd1 &#x80DA;&#x6027;&#x5DE8;&#x7D30;&#x80DE;&#x5F62;&#x6210;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;msd1 &#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30CF;&#x30A8;&#x306F;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3053;&#x3068;, &#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x5185;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x304B;&#x3089;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; Augmin &#x30D5;&#x30E9;&#x30A4;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3067;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x65B0;&#x3057;&#x3044; Augmin &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3001;Msd1&#x3001;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318; template &#x5BA3;&#x8A00;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Drosophila Augmin &#xBCF5;&#xD569; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;, &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; microtubules &#xC870;&#xC9C1; &#xBC30;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xBC00;&#xB3C4; &#xC870;&#xC808; microtubules&#xC5D0; &#xAC10;&#xB9C8;-tubulin localizes. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; Augmin &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCEF4;&#xD3EC;&#xB10C;&#xD2B8;&#xB85C; microtubule &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Msd1 &#xC2DD;&#xBCC4; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; microtubules nucleation &#xD544;&#xC694;&#xB294; &#xC9C1;&#xC811; &#xC124;&#xBA85; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Msd1 &#xBC30;&#xC544; syncytial mitoses&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD30C;&#xB9AC; msd1&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBCF4;&#xC720; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C;&#xAC00;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;,, centrosomes&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;, &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; microtubule nucleation &#xADFC;&#xBCF8;&#xC801; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; Augmin &#xBE44;&#xD589;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;.

&#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; Augmin &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;, Msd1, &#xC791;&#xB3D9; centrosomes&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF; microtubule nucleation&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El complejo Augmin de Drosophila localiza gamma-tubulina en los microt&uacute;bulos del huso mit&oacute;tico, regulaci&oacute;n de la densidad de los microt&uacute;bulos del huso en c&eacute;lulas de cultivo de tejidos. Aqu&iacute;, identificamos la prote&iacute;na asociada a microt&uacute;bulos Msd1 como un nuevo componente del complejo Augmin y demostrar directamente que se requiere para la nucleaci&oacute;n de microt&uacute;bulos del huso mit&oacute;tico dentro de. Aunque Msd1 es necesaria para la mitosis sincitial embrionaria, moscas que poseen una mutaci&oacute;n en msd1 son viables. Lo importante, sin embargo, en ausencia de centrosomas, nucleaci&oacute;n de microt&uacute;bulos desde dentro el eje resulta esencial. As&iacute;, el complejo de Augmin tiene un papel crucial en el desarrollo de la mosca.

Una nueva subunidad Augmin, Msd1, demuestra la importancia de la nucleaci&oacute;n de microt&uacute;bulos del huso-plantilla mit&oacute;tica en la ausencia de funcionamiento centrosomas.

&#x5FAE;&#x7BA1; (MT)-&#x7834;&#x574F;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D; 13 &#x5148;&#x4EE4;&#x6267;&#x884C;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x9A71;&#x52A8;&#x679C;&#x8747;&#x679C;&#x8747;&#x86CB;&#x767D; 13&#xFF0C;KLP10A&#xFF0C;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x4F53;&#x5185;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x5185; 5 &#x963F;&#x5C14;&#x6CD5;&#x87BA;&#x65CB;&#x7535;&#x673A;&#x57DF;&#x7684;&#x5B88;&#x6052;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178; (S573)&#x3002;&#x5728;&#x8BD5;&#x7BA1;&#x91CC;&#xFF0C;phosphomimic KLP10A S573E &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x663E;&#x793A; depolymerize MTs &#x4F46;&#x6B63;&#x5E38;&#x4EB2;&#x5C71;&#x683C;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x51CF;&#x5F31;&#x3002;&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x66F4;&#x6362;&#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; KLP10A &#x4E0E; KLP10A S573E &#x6291;&#x5236;&#x4E86;&#x5C71;&#x52A0;&#x7ED3;&#x675F;&#x6574;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x52A8;&#x6001;&#xFF0C;&#x800C; nonphosphorylatable S573A &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x663E;&#x7136;&#x662F;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x671F;&#x95F4;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x8868;&#x660E; KLP10A S573 &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x6539;&#x53D8;&#x5176;&#x534F;&#x4F1A;&#x4E0E;&#x5C71;&#x683C;&#xFF0C;&#x800C;&#x5206;&#x5B50;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x6A21;&#x62DF;&#x63ED;&#x793A;&#x5982;&#x4F55; KLP10A &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6539;&#x53D8;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-MT &#x754C;&#x9762;&#xFF0C;&#x800C;&#x65E0;&#x9700;&#x66F4;&#x6539;&#x7684;&#x9A6C;&#x8FBE;&#x6838;&#x5FC3;&#x5185;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x7ED3;&#x6784;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x916A;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; 1alpha &#x4F5C;&#x4E3A; KLP10A &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4E2D;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684; KLP10A &#x7535;&#x673A;&#x57DF;&#x63D0;&#x4F9B;&#x76D1;&#x7BA1;&#x5F00;&#x5173;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x548C;&#x5730;&#x70B9;&#x5C71;&#x89E3;&#x805A;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

&#x7535;&#x673A;&#x57DF;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x548C;&#x679C;&#x8747;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D; 13&#xFF0C;KLP10A &#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;

Microtubule (MT)-destabilizing kinesin 13s perform fundamental roles throughout the cell cycle. In this study, we show that the Drosophila melanogaster kinesin 13, KLP10A, is phosphorylated in vivo at a conserved serine (S573) positioned within the alpha-helix 5 of the motor domain. In vitro, a phosphomimic KLP10A S573E mutant displays a reduced capacity to depolymerize MTs but normal affinity for the MT lattice. In cells, replacement of endogenous KLP10A with KLP10A S573E dampens MT plus end dynamics throughout the cell cycle, whereas a nonphosphorylatable S573A mutant apparently enhances activity during mitosis. Electron microscopy suggests that KLP10A S573 phosphorylation alters its association with the MT lattice, whereas molecular dynamics simulations reveal how KLP10A phosphorylation can alter the kinesin-MT interface without changing important structural features within the motor's core. Finally, we identify casein kinase 1alpha as a possible candidate for KLP10A phosphorylation. We propose a model in which phosphorylation of the KLP10A motor domain provides a regulatory switch controlling the time and place of MT depolymerization.

Motor domain phosphorylation and regulation of the Drosophila kinesin 13, KLP10A.

Microtubules (MT)-d&eacute;stabiliser la kin&eacute;sine 13 s jouent des r&ocirc;les fondamentaux tout au long du cycle cellulaire. Dans cette &eacute;tude, nous montrons que la Drosophila melanogaster kin&eacute;sine 13, KLP10A, est phosphoryl&eacute;e in vivo &agrave; une s&eacute;rine conserv&eacute;e (S573) positionn&eacute;e au sein de l&#39;h&eacute;lice alpha 5 du domaine automobile. In vitro, un mutant phosphomimic KLP10A S573E affiche une capacit&eacute; r&eacute;duite &agrave; d&eacute;polym&eacute;riser MTs mais affinit&eacute; normale pour le r&eacute;seau de la MT. Dans les cellules, remplacement d&#39;endog&egrave;nes KLP10A avec KLP10A S573E amortit MT plus fin dynamique tout au long du cycle cellulaire, alors qu&#39;un mutant nonphosphorylatable S573A apparemment am&eacute;liore l&#39;activit&eacute; au cours de la mitose. Microscopie &eacute;lectronique sugg&egrave;rent que la phosphorylation KLP10A S573 modifie sa liaison avec le r&eacute;seau de la MT, alors que les simulations de dynamique mol&eacute;culaire r&eacute;v&egrave;lent comment la phosphorylation de KLP10A peut modifier l&#39;interface de kin&eacute;sine-MT sans changer les caract&eacute;ristiques structurelles importantes au sein de la base du moteur. Enfin, nous identifions cas&eacute;ine kinase 1alpha comme candidat possible &agrave; la phosphorylation de KLP10A. Nous proposons un mod&egrave;le dans lequel la phosphorylation de la KLP10A domaine moteur fournit un commutateur de r&eacute;glementation contr&ocirc;lant l&#39;heure et le lieu de la d&eacute;polym&eacute;risation de la MT.

Phosphorylation du domaine automobile et la r&eacute;glementation de la kin&eacute;sine drosophile 13, KLP10A.

Microtubule (MT)-destabilisierende Kinesin 13 s elementare Aufgaben im gesamten Zellzyklus durchf&uuml;hren. In dieser Studie zeigen wir, dass die Drosophila Melanogaster Kinesin 13, KLP10A, phosphoryliert ist in-vivo bei einer konservierten Serin (S573) innerhalb der Alpha-Helix 5 der motor Dom&auml;ne positioniert. In vitro zeigt eine Phosphomimic KLP10A S573E-Mutante eine reduzierte Kapazit&auml;t von MTs aber normalen Affinit&auml;t f&uuml;r das MT-Gitter depolymerize. In Zellen, d&auml;mpft die Ersetzung der endogenen KLP10A mit KLP10A S573E MT plus Dynamik w&auml;hrend des Zellzyklus zu beenden, w&auml;hrend eine Nonphosphorylatable S573A-Mutante offenbar erh&ouml;ht die Aktivit&auml;t w&auml;hrend der Mitose. Elektronenmikroskopie, zufolge KLP10A S573 Phosphorylierung &auml;ndert seine Verkn&uuml;pfung mit dem MT-Gitter, w&auml;hrend Molekulardynamik-Simulationen zu offenbaren, wie KLP10A Phosphorylierung die Muskelkontraktion-MT-Schnittstelle &auml;ndern kann, ohne wichtige Strukturmerkmale innerhalb des Motors. Schlie&szlig;lich identifizieren wir Kasein-Kinase-1alpha als m&ouml;gliche Kandidaten f&uuml;r die Phosphorylierung von KLP10A. Wir schlagen ein Modell in die Phosphorylierung von der KLP10A motor-Dom&auml;ne einen regulatorischen Schalter steuern, Zeit und Ort des MT Depolymerisation bietet.

Motor-Dom&auml;ne Phosphorylierung und Regulierung von der Taufliege Kinesin 13, KLP10A.

Microtubuli (MT)-destabilizzante chinesina 13s svolgono ruoli fondamentali per tutto il ciclo cellulare. In questo studio, ci mostra che la Drosophila melanogaster chinesina 13, KLP10A, &egrave; fosforilata in vivo a serina conservata (S573) posizionata all&#39;interno dell&#39;alfa-elica 5 del dominio motore. In vitro, un mutante phosphomimic KLP10A S573E Visualizza una ridotta capacit&agrave; di depolymerize MTs ma normale affinit&agrave; per il reticolo di MT. Nelle cellule, sostituzione di KLP10A endogeni con KLP10A S573E smorza MT plus fine dinamica per tutto il ciclo cellulare, considerando che un mutante nonphosphorylatable S573A a quanto pare migliora attivit&agrave; durante la mitosi. Microscopia elettronica suggerisce che la fosforilazione KLP10A S573 altera la sua associazione con il reticolo di MT, mentre le simulazioni dinamiche molecolari rivelano come KLP10A fosforilazione pu&ograve; alterare l&#39;interfaccia chinesina-MT senza modificare le caratteristiche strutturali importanti all&#39;interno del nucleo del motore. Infine, ci identifichiamo caseina chinasi 1alpha come un possibile candidato per la fosforilazione della KLP10A. Vi proponiamo un modello in cui la fosforilazione dei KLP10A dominio motore fornisce un regolamentazione switch controllando il tempo e il luogo di depolimerizzazione MT.

La fosforilazione del dominio motore e regolamento della drosofila chinesina 13, KLP10A.

&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1; (MT)-&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3; 13 &#x79D2;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8; &#x30AD;&#x30A4;&#x30ED;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8; &#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3; 13&#x3001;KLP10A&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068; in vivo &#x3067;&#x306E; &alpha;-&#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5185; 5 &#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x914D;&#x7F6E;&#x4FDD;&#x5B58;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3; (S573) &#x3067;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;In vitro phosphomimic KLP10A S573E &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3067;&#x306F;&#x3001;MTs &#x304C; MT &#x683C;&#x5B50;&#x306E;&#x901A;&#x5E38;&#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x8033;&#x4E0B;&#x817A;&#x5BB9;&#x91CF;&#x3092;&#x4F4E;&#x6E1B;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E; KLP10A &#x3068; KLP10A S573E &#x306E;&#x4EA4;&#x63DB;&#x6E7F;&#x3089;&#x305B;&#x308B; MT &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9; nonphosphorylatable S573A &#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3069;&#x3046;&#x3084;&#x3089;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x7D42;&#x4E86;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x30B7;&#x30DF;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B; KLP10A &#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x304C;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x5185;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x305B;&#x305A;&#x3001;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3; MT &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x3092;&#x5909;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1; KLP10A S573 &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316; MT &#x683C;&#x5B50;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x304C;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;KLP10A &#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x5019;&#x88DC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30AB;&#x30BC;&#x30A4;&#x30F3; &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;-1 &alpha; &#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;KLP10A &#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x6642;&#x9593;&#x3068;&#x5834;&#x6240;&#x306E; MT &#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x898F;&#x5236;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.

&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3068;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8; &#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3; 13&#x3001;KLP10A&#x3002;

Microtubule (&#xC0B0;)-&#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC804;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADFC;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC218;&#xD589; kinesin 13s &#xBD88;&#xC548;&#xC815;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; Drosophila melanogaster kinesin 13, KLP10A, phosphorylated vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; (S573) &#xBAA8;&#xD130; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC54C;&#xD30C;-&#xD5EC;&#xB9AD;&#xC2A4; 5 &#xB0B4;&#xC5D0;. &#xCCB4; &#xC678;, phosphomimic KLP10A S573E &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; depolymerize MTs &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC0B0; &#xACA9;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;&#xB97C; &#xAC10;&#xC18C; &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC140;, KLP10A s573e&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC0DD; klp10a&#xC758; &#xAD50;&#xCCB4; &#xB530; &#xC708; &#xC0B0; &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; nonphosphorylatable S573A &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBD84;&#xBA85;&#xD788; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC804;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC5ED;&#xD559;&#xC744; &#xB05D;. &#xBD84;&#xC790; &#xB3D9;&#xC5ED;&#xD559; &#xC2DC;&#xBBAC;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xACF5;&#xAC1C; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; KLP10A &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xBAA8;&#xD130;&#xC758; &#xCF54;&#xC5B4; &#xB0B4;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; kinesin MT &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xB97C; &#xBCC0;&#xACBD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; KLP10A S573 &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC0B0; &#xACA9;&#xC790;&#xC640;&#xC758; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; KLP10A &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xC790;&#xB85C; &#xCE74; &#xC138; &#xC778; &#xC544; 1alpha&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; klp10a&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB294; &#xBAA8;&#xD130; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC81C;&#xACF5; &#xADDC;&#xC81C; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xB9C8;&#xC6B4;&#xD2B8; depolymerization&#xC758; &#xC7A5;&#xC18C;&#xC640; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBAA8;&#xD130; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC640; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; kinesin 13, klp10a&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;.

Microt&uacute;bulos (MT)-desestabilizar kinesin 13s realizar papeles fundamentales a lo largo del ciclo celular. En este estudio, mostramos que la Drosophila melanogaster kinesin 13, KLP10A, es fosforilado en vivo en una serina conservada (S573) colocada dentro de la h&eacute;lice alfa 5 del dominio motor. In vitro, un mutante de phosphomimic KLP10A S573E muestra una capacidad reducida para despolimerizar MTs pero afinidad normal para el entramado de MT. En las c&eacute;lulas, reemplazo de KLP10A end&oacute;geno con KLP10A S573E amortigua MT m&aacute;s extremo din&aacute;mica a lo largo del ciclo celular, mientras que un mutante de nonphosphorylatable S573A al parecer mejora la actividad durante la mitosis. La microscopia electr&oacute;nica sugiere que la fosforilaci&oacute;n de KLP10A S573 altera su asociaci&oacute;n con el entramado de MT, mientras que simulaciones de din&aacute;mica molecular revelan c&oacute;mo KLP10A fosforilaci&oacute;n puede alterar la interfaz kinesin-MT sin cambiar las caracter&iacute;sticas estructurales importantes dentro de la base del motor. Finalmente, identificamos case&iacute;na quinasa 1alpha como un posible candidato para KLP10A la fosforilaci&oacute;n. Se propone un modelo en el que la fosforilaci&oacute;n de la KLP10A dominio motor proporciona un interruptor regulador controla la hora y lugar de despolimerizaci&oacute;n de MT.

Fosforilaci&oacute;n de dominio motor y regulaci&oacute;n de la Drosophila kinesin 13, KLP10A.

&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8FD0;&#x52A8;&#x76F8;&#x8FDE;&#x6D3B;&#x52A8;&#x964D;&#x89E3;&#x7684;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5FAE;&#x7BA1; (MT) &#x7ED3;&#x675F;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC6;&#x522B;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-13 &#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#xFF0C;KLP59D&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x548C;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5C71;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x679C;&#x8747;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x91CD;&#x8981;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x3002;&#x671F;&#x95F4;&#x524D;&#x548C;&#x4E2D;&#x665A;&#x671F;&#x3001; &#x67AF;&#x7AED;&#x7684; KLP59D&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5BF9;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x548C;&#x5916;&#x9002;&#x5EA6;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x964D;&#x89E3;&#x7684;&#x4E3B;&#x8F74;&#x6746;&#x5173;&#x8054;&#x5C71;&#x51CF;&#x53BB;&#x4E24;&#x7AEF;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x6291;&#x5236;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x5411;&#x6781;&#x901A;&#x91CF;&#x3002;&#x968F;&#x540E;&#xFF0C;&#x5728;&#x540E;&#x671F;&#xFF0C;&#x671F;&#x95F4;&#x635F;&#x5931; KLP59D &#x5F3A;&#x70C8;&#x8870;&#x51CF;&#x67D3;&#x8272;&#x5355;&#x4F53;&#x5230;&#x6781;&#x70B9;&#x7684;&#x8BAE;&#x6848;&#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236;&#x4E24;&#x4E2A;&#x51CF;&#x53F7;&#x7684;&#x89E3;&#x805A;&#x548C;&#x52A0;&#x7EBA;&#x9524;&#x5173;&#x8054; MTs &#x7684;&#x4E24;&#x7AEF;&#x3002;&#x5BF9;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5C71;&#x52A0;&#x548C;&#x51CF;&#x4E24;&#x7AEF;&#x7684; KLP59D &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x673A;&#x5236;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x5B58;&#x5728;&#x5206;&#x6B67;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x89E3;&#x805A;&#x7684; KLP59D &#x76F4;&#x63A5;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x52A0;&#x4E0A;&#x4E24;&#x7AEF;&#x7684;&#x7EBA;&#x9524;&#x76F8;&#x5173;&#x671F;&#x95F4;&#x540E;&#x671F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x51CF;&#x53BB;&#x95F4;&#x63A5;&#x901A;&#x8FC7;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x6746;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x5C71;&#x7ED3;&#x675F;&#x5F71;&#x54CD; depolymerase KLP10A &#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x6307;&#x793A;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x679C;&#x8747;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-13 &#x4E32;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x662F; KLP59D &#x662F; oligomerizing &#x6210;&#x5C71;&#x76F8;&#x5173;&#x73AF;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x80FD;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7ED3;&#x6784;&#x5E76;&#x4E0D; MT &#x7EBA;&#x9524;&#x53CD;&#x6C47;&#x7F16;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8FD0;&#x52A8;&#x5FC5;&#x8981;&#x7279;&#x5F81;&#x3002;

&#x679C;&#x8747;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-13&#xFF0C;KLP59D&#xFF0C;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x57FA;&#x4E8E; Pacman &#x548C;&#x901A;&#x91CF;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3002;

Chromosome movements are linked to the active depolymerization of spindle microtubule (MT) ends. Here we identify the kinesin-13 family member, KLP59D, as a novel and uniquely important regulator of spindle MT dynamics and chromosome motility in Drosophila somatic cells. During prometaphase and metaphase, depletion of KLP59D, which targets to centrosomes and outer kinetochores, suppresses the depolymerization of spindle pole-associated MT minus ends, thereby inhibiting poleward tubulin Flux. Subsequently, during anaphase, loss of KLP59D strongly attenuates chromatid-to-pole motion by suppressing the depolymerization of both minus and plus ends of kinetochore-associated MTs. The mechanism of KLP59D's impact on spindle MT plus and minus ends appears to differ. Our data support a model in which KLP59D directly depolymerizes kinetochore-associated plus ends during anaphase, but influences minus ends indirectly by localizing the pole-associated MT depolymerase KLP10A. Finally, electron microscopy indicates that, unlike the other Drosophila kinesin-13s, KLP59D is largely incapable of oligomerizing into MT-associated rings in vitro, suggesting that such structures are not a requisite feature of kinetochore-based MT disassembly and chromosome movements.

The Drosophila kinesin-13, KLP59D, impacts Pacman- and Flux-based chromosome movement.

Mouvements chromosomiques sont li&#xE9;s &#xE0; la d&#xE9;polym&#xE9;risation des microtubules active de broche (MT) extr&#xE9;mit&#xE9;s. Ici nous identifions la kin&#xE9;sine-13 membre de la famille, KLP59D, comme un roman et un r&#xE9;gulateur unique et important de la dynamique des MT broche et de la motilit&#xE9; des chromosomes dans les cellules somatiques de Drosophila. Au cours de la m&#xE9;taphase et prom&#xE9;taphase, l&#x26;#39;&#xE9;puisement des KLP59D, qui vise &#xE0; centrosomes et kin&#xE9;tochores ext&#xE9;rieures, supprime la d&#xE9;polym&#xE9;risation de la broche p&#xF4;le associ&#xE9; MT moins extr&#xE9;mit&#xE9;s, ce qui inhibe la tubuline Flux vers les p&#xF4;les. Par la suite, lors de l&#x26;#39;anaphase, la perte de KLP59D att&#xE9;nue fortement chromatides-p&#xF4;le de mouvement en supprimant la d&#xE9;polym&#xE9;risation des extr&#xE9;mit&#xE9;s &#xE0; la fois moins et plus de kin&#xE9;tochore-MTS Associated. Le m&#xE9;canisme de l&#x26;#39;impact sur KLP59D MT broche en plus et se termine moins semble diff&#xE9;rer. Nos donn&#xE9;es appuient un mod&#xE8;le dans lequel KLP59D d&#xE9;polym&#xE9;rise directement kin&#xE9;tochore-associ&#xE9; ainsi que se termine lors de l&#x26;#39;anaphase, mais les influences se termine moins indirectement, par la localisation du p&#xF4;le associ&#xE9; d&#xE9;polym&#xE9;rase MT KLP10A. Enfin, la microscopie &#xE9;lectronique indique que, contrairement &#xE0; l&#x26;#39;autre chez la drosophile kin&#xE9;sine-13s, KLP59D est en grande partie incapable de oligom&#xE9;risation dans MT-associ&#xE9;s anneaux in vitro, ce qui sugg&#xE8;re que ces structures ne sont pas une caract&#xE9;ristique requise de d&#xE9;montage MT kin&#xE9;tochore base et les mouvements des chromosomes.

La drosophile Kinesin-13, KLP59D, Impacts Pacman et le mouvement des chromosomes fond&#xE9;e sur les flux

Chromosom Bewegungen sind verbunden mit der aktiven Depolymerisation der Spindel Microtubule (MT) enden. Hier erkennen wir das Kinesin-13 Familienmitglied, KLP59D, als neuartige, eindeutig wichtiger Regulator der Spindel MT Dynamik und Chromosom Motilit&auml;t Drosophila somatischer Zellen. W&auml;hrend der Spindelapparat und Metaphase, Ersch&ouml;pfung der KLP59D, die Centrosomes und &auml;u&szlig;ere Kinetochores abzielt, unterdr&uuml;ckt die Depolymerisation der Spindel Pol-assoziierte MT abz&uuml;glich enden, was wiederum behindert Mantelkante Tubulin Flux. Sp&auml;ter, w&auml;hrend Anaphase, Verlust des KLP59D stark d&auml;mpft Chromatid-zu-Pol-Bewegung durch die Unterdr&uuml;ckung der Depolymerisation von beiden Minus und plus Enden der Kinetochor-assoziierte MTs. Der Mechanismus der KLP59Ds Auswirkungen auf Spindel MT plus und minus enden scheint zu unterscheiden. Unsere Daten unterst&uuml;tzen ein Modell in der KLP59D direkt w&auml;hrend der Anaphase depolymerizes Kinetochor-assoziierte zuz&uuml;glich enden, sondern Einfl&uuml;sse abz&uuml;glich enden indirekt durch Lokalisierung von die Pole Position-assoziierte MT depolymerase KLP10A. Schlie&szlig;lich gibt Elektronenmikroskopie, dass, wie 13 der anderen Drosophila Kinesin-s, KLP59D oligomerizing in MT-assoziierte Ringe in vitro weitgehend unf&auml;hig darauf hindeutet, dass solche Strukturen keine erforderliche Funktion Kinetochor-basierte MT Demontage und Chromosom Bewegungen sind.

Die Drosophila Kinesin-13, KLP59D, wirkt Pacman und Flux-basierte Chromosom Bewegung.

Movimenti del cromosoma sono legati per la depolimerizzazione attivo del mandrino microtubulo (MT) finisce. Qui ci identifichiamo il chinesina-13 membro della famiglia, KLP59D, come un romanzo e univocamente importante regolatore del mandrino motilit&agrave; di dinamiche e cromosoma MT nelle cellule somatiche della drosofila. Durante l&#39;analisi e la metafase, deplezione di KLP59D, che si rivolge a cntrosome ed esterni cinetocori, sopprime la depolimerizzazione dei MT di associato al palo della mandrino meno finisce, inibendo implicando tubulina Flux. Successivamente, durante l&#39;anafase, perdita di KLP59D fortemente attenua Cromatidio-Polo movimento sopprimendo la depolimerizzazione di entrambi minus e plus le estremit&agrave; del cinetocore associati MTs. Il meccanismo dell&#39;impatto di KLP59D sul mandrino MT plus e minus finisce sembra differire. I nostri dati supportano un modello in cui KLP59D depolymerizes direttamente associato al cinetocore pi&ugrave; estremit&agrave; durante l&#39;anafase, ma influenze meno finisce indirettamente da localizzare la MT associato al Polo depolymerase KLP10A. Infine, la microscopia elettronica indica che, a differenza di altro drosofila chinesina-13s, KLP59D &egrave; in gran parte incapace di oligomerizing in MT-associated anelli in vitro, suggerendo che tali strutture non sono una caratteristica necessaria del cinetocore MT smontaggio e cromosoma movimenti.

La drosofila chinesina-13, KLP59D, effetti movimento cromosoma Pacman e Flux-based.

&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#xFF08;MT&#xFF09;&#x306E;&#x7AEF;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x89E3;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x306E;MT&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x904B;&#x52D5;&#x306E;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3068;&#x4E00;&#x610F;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;-13&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x4E00;&#x54E1;&#x3001;KLP59D&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x3068;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x524D;&#x4E2D;&#x671F;&#x3001;&#x4E2D;&#x671F;&#x3001;KLP59D&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x3001;&#x4E2D;&#x306B;&#x3001;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;MT&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x304C;&#x7D42;&#x4E86;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x963B;&#x5BB3;&#x6975;&#x5074;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x675F;&#x306E;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x3001;KLP59D&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x5F37;&#x304F;&#x52D5;&#x539F;&#x200B;&#x200B;&#x4F53;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;MT&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x3068;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x306E;&#x4E21;&#x7AEF;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x67D3;&#x8272;&#xB7;&#x30C4;&#x30FC;&#xB7;&#x30DD;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x6E1B;&#x8870;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002; KLP59D&#x306E;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;MT&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x7AEF;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304C;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x4E2D;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x95A2;&#x9023;depolymerizes&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7AEF;&#x3092;KLP59D&#x3059;&#x308B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x6975;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;MT&#x30C7;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;KLP10A&#x3092;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9593;&#x63A5;&#x7684;&#x306B;&#x7D42;&#x4E86;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;-13S&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;KLP59D&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x304C;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;MT&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x3068;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x306E;&#x5FC5;&#x9808;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;MT&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x5316;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3001;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;-13&#x3001;KLP59D&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#x3068;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;

&#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; microtubule (MT) &#xB05D;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; depolymerization &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; kinesin 13 &#xAC00;&#xC871;, KLP59D, &#xC18C;&#xC124;&#xACFC; &#xC2A4;&#xD540; Drosophila &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xC758; MT &#xC5ED;&#xD559; &#xBC0F; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xB4E4;&#xC758; &#xC720;&#xC77C; &#xD558; &#xAC8C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB85C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Prometaphase &#xC911; &#xACE0; &#xBD84;&#xC5F4;, KLP59D, centrosomes &#xBC0F; &#xC678;&#xBD80; kinetochores&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC758; &#xACE0;&#xAC08; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xADF9; &#xAD00;&#xB828; &#xC0B0; &#xB05D;, &#xB9C8;&#xC774;&#xB108;&#xC2A4; poleward tubulin &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; depolymerization. &#xADF8; &#xD6C4;, anaphase, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; klp59d&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xC57D;&#xD654; chromatid &#xD3F4; &#xBAA8;&#xC158; &#xBAA8;&#xB450; &#xB9C8;&#xC774;&#xB108;&#xC2A4; depolymerization &#xC5B5;&#xC81C; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#xACE0; &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; kinetochore &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; Mts&#xC758; &#xB05D;. Klp59d&#xC758; &#xC601;&#xD5A5; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; MT &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBC0F; &#xB9C8;&#xC774;&#xB108;&#xC2A4; &#xB05D;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xB2E4;&#xB97C; &#xB4EF;&#xD558;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; KLP59D &#xC9C1;&#xC811; depolymerizes &#xB05D; &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; kinetochore &#xC5F0;&#xACB0; anaphase, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC9C1;&#xC811; &#xADF9; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB9C8;&#xC6B4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xB05D; &#xB9C8;&#xC774;&#xB108;&#xC2A4; &#xC601;&#xD5A5; depolymerase KLP10A &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;, &#xB2EC;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; kinesin-13s, KLP59D &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC74C;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C8;&#xC6B4;&#xD2B8; &#xC5F0;&#xACB0; &#xACE0;&#xB9AC;&#xC5D0; oligomerizing &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; kinetochore &#xAE30;&#xBC18; &#xC0B0; &#xBD84;&#xD574; &#xBC0F; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC758; &#xD544;&#xC218; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC81C;&#xC548;.

Drosophila kinesin-13, KLP59D, &#xD329; &#xB9E8; &#xBC0F; &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xAE30;&#xBC18;&#xC758; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC6B4;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Movimientos de los cromosomas est&#xE1;n vinculados a la despolimerizaci&#xF3;n activa de microt&#xFA;bulos (MT) extremos. Aqu&#xED; identificamos la quinesina-13 miembro de la familia, KLP59D, como una novela y un regulador de una importancia excepcional de la din&#xE1;mica de MT del huso y la motilidad de cromosomas en las c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas de Drosophila. Durante prometafase y metafase, el agotamiento de KLP59D, que se dirige a los centrosomas y cinetocoros exteriores, suprime la despolimerizaci&#xF3;n del eje polar asociada MT menos extremos, flujo hacia el polo tubulina inhibiendo de este modo. Posteriormente, durante la anafase, la p&#xE9;rdida de fuerza KLP59D aten&#xFA;a crom&#xE1;tidas a polo movimiento por la supresi&#xF3;n de la despolimerizaci&#xF3;n de los extremos, tanto menos y m&#xE1;s de kinetochore asociada a MT. El mecanismo de impacto KLP59D en el Monte del eje de m&#xE1;s y menos extremos parece diferir. Nuestros datos apoyan un modelo en el que KLP59D directamente despolimeriza kinetochore asociada m&#xE1;s extremos durante la anafase, pero las influencias menos termina indirectamente, mediante la localizaci&#xF3;n del polo asociado a MT despolimerasa KLP10A. Por &#xFA;ltimo, la microscop&#xED;a electr&#xF3;nica indica que, a diferencia de la otra Drosophila kinesina de 13 a&#xF1;os, KLP59D es en gran medida incapaces de oligomerizaci&#xF3;n en la MT-asociados anillos in vitro, lo que sugiere que estas estructuras no son una caracter&#xED;stica necesaria de desmontaje MT cinetocoro y basado en los movimientos de los cromosomas.

La Drosophila Kinesin-13, KLP59D, Impactos Pacman y flujo basado en el cromosoma movimiento

&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76AE;&#x5C42;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x89C4;&#x5F8B;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3001; &#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x548C;&#x53F8;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x679C;&#x8747; katanin &#x5FB7;&#x56FD;&#x9A6C;&#x514B; Kat60 &#x51FD;&#x6570;&#x5728;&#x95F4;&#x671F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x751F;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x76AE;&#x5C42;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x63A5;&#x53E3;&#x3002;Dm Kat60 &#x95F4;&#x671F;&#xFF0C;&#x5728; S2 &#x679C;&#x8747;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76AE;&#x5C42;&#x7CBE;&#x77FF;&#x90A3;&#x91CC;&#x5B83;&#x6291;&#x5236;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A0;&#x7AEF;&#x70B9;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x9632;&#x6B62;&#x5F62;&#x6210;&#x95ED;&#x5408;&#x5BC6;&#x96C6;&#x76AE;&#x8D28;&#x9635;&#x5217;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x3002;Dm Kat60 &#x8FD8;&#x5904;&#x4E8E;&#x524D;&#x6CBF;&#x7684;&#x6D04;&#x6E38; D17 &#x679C;&#x8747;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x548C;&#x6D88;&#x6781;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5176;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x53C2;&#x6570;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x5728;&#x8BD5;&#x7BA1;&#x91CC;&#xFF0C;Dm Kat60 &#x670D;&#x52A1;&#x5668;&#x548C;&#x4ECE;&#x5176;&#x4E24;&#x7AEF;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6839;&#x636E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; Dm Kat60 &#x4ECE;&#x5FAE;&#x70B9;&#x9635;&#x6216;&#x8054;&#x7CFB;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x76AE;&#x8D28;&#x7AD9;&#x70B9;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x9632;&#x6B62;&#x7A33;&#x5B9A;&#x548C;/&#x6216;&#x6A2A;&#x5411;&#x9644;&#x4EF6;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x4E24;&#x7AEF;&#x5220;&#x9664;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x4E0D;&#x5BF9;&#x79F0;&#x7684;&#x5206;&#x914D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5E2E;&#x52A9;&#x5728;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x4E2D;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x4E2D;&#x751F;&#x6210;&#x533A;&#x57DF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;

&#x679C;&#x8747; katanin &#x662F;&#x5FAE;&#x7BA1; depolymerase&#xFF0C;&#x8C03;&#x8282;&#x76AE;&#x5C42;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A0;&#x7AEF;&#x4EA4;&#x4E92;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3002;

Regulation of microtubule dynamics at the cell cortex is important for cell motility, morphogenesis and division. Here we show that the Drosophila katanin Dm-Kat60 functions to generate a dynamic cortical-microtubule interface in interphase cells. Dm-Kat60 concentrates at the cell cortex of S2 Drosophila cells during interphase, where it suppresses the polymerization of microtubule plus-ends, thereby preventing the formation of aberrantly dense cortical arrays. Dm-Kat60 also localizes at the leading edge of migratory D17 Drosophila cells and negatively regulates multiple parameters of their motility. Finally, in vitro, Dm-Kat60 severs and depolymerizes microtubules from their ends. On the basis of these data, we propose that Dm-Kat60 removes tubulin from microtubule lattice or microtubule ends that contact specific cortical sites to prevent stable and/or lateral attachments. The asymmetric distribution of such an activity could help generate regional variations in microtubule behaviours involved in cell migration.

Drosophila katanin is a microtubule depolymerase that regulates cortical-microtubule plus-end interactions and cell migration.

R&egrave;glement de la dynamique des microtubules dans le cortex de la cellule est importante pour la division, la morphog&eacute;n&egrave;se et la motilit&eacute; cellulaire. Ici, nous montrons que les fonctions de katanin Dm-Kat60 de drosophile pour g&eacute;n&eacute;rer une interface de microtubules corticaux dynamique dans les cellules en interphase. DM-Kat60 se concentre sur le cortex cellulaire des cellules de drosophile S2 pendant l&#39;interphase, o&ugrave; il supprime la polym&eacute;risation des microtubules plus embouts, emp&ecirc;chant ainsi la formation de baies corticales anormalement denses. DM-Kat60 aussi se localise &agrave; la fine pointe des cellules migratrices de Drosophila D17 et r&eacute;gule n&eacute;gativement les multiples param&egrave;tres de leur motilit&eacute;. Enfin, in vitro, Dm-Kat60 rompt et depolymerizes des microtubules de leurs extr&eacute;mit&eacute;s. Sur la base de ces donn&eacute;es, nous proposons que les Dm-Kat60 supprime tubuline de trellis de microtubules ou extr&eacute;mit&eacute;s de microtubules qui contacter sites corticales sp&eacute;cifiques afin d&#39;&eacute;viter les pi&egrave;ces jointes stables et/ou lat&eacute;rales. La r&eacute;partition asym&eacute;trique d&#39;une telle activit&eacute; pourrait aider &agrave; g&eacute;n&eacute;rer des variations r&eacute;gionales des comportements de microtubules impliqu&eacute;s dans la migration cellulaire.

Katanin de la drosophile est un microtubule d&eacute;polym&eacute;rase qui r&eacute;gule les interactions de plus-fin-microtubules corticaux et la migration cellulaire.

Regulierung des Microtubule Dynamik bei der Zelle Kortex ist wichtig f&uuml;r Zelle Motilit&auml;t, Morphogenese und Spaltung. Hier zeigen wir, dass die Drosophila Katanin Dm-Kat60-Funktionen, eine dynamische kortikale Microtubule-Schnittstelle in Interphase Zellen zu generieren. DM-Kat60 konzentriert sich auf die Zelle Kortex S2 Drosophila Zellen w&auml;hrend der Interphase, wo es unterdr&uuml;ckt die Polymerisation von Microtubule Plus-enden, und verhindert die Bildung von abnorm dichten kortikalen Arrays. DM-Kat60 auch an die Spitze der wandernden D17 Drosophila-Zellen lokalisiert und negativ reguliert mehrere Parameter des ihre Motilit&auml;t. Schlie&szlig;lich, in vitro, Dm-Kat60 trennt und depolymerizes Mikrotubuli aus ihren Enden. Auf der Grundlage dieser Daten schlagen wir vor, dass Dm-Kat60 Tubulin aus Microtubule Gitter oder Microtubule-enden, die bestimmte kortikale Websites entfernt damit stabil und/oder seitliche Anh&auml;nge nicht kontaktieren. Die asymmetrische Verteilung einer solchen T&auml;tigkeit k&ouml;nnte helfen, regionale Variationen in Microtubule Verhaltensweisen Zellwanderung beteiligt zu generieren.

Taufliege-Katanin ist eine Microtubule depolymerase die kortikale Microtubule Plus-End Interaktionen und Zellmigration.

Regolamento della dinamica dei microtubuli presso la corteccia delle cellule &egrave; importante per la divisione, la morfogenesi e la motilit&agrave; cellulare. Qui vi mostriamo che le funzioni di katanin Dm-Kat60 drosofila per generare un&#39;interfaccia dinamica dei microtubuli corticali nelle cellule in interfase. DM-Kat60 si concentra presso la corteccia cellulare delle cellule della drosofila S2 durante l&#39;interfase, dove sopprime la polimerizzazione dei microtubuli plus-estremit&agrave;, impedendo cos&igrave; la formazione di modo anomalo folte schiere di corticale. DM-Kat60 anche si localizza all&#39;avanguardia di celle D17 drosofila migratori e regola negativamente pi&ugrave; parametri della loro motilit&agrave;. Infine, in vitro, Dm-Kat60 taglia e depolymerizes microtubuli dalla loro estremit&agrave;. Sulla base di questi dati, proponiamo che Dm-Kat60 rimuove tubulina dal reticolo microtubule o le estremit&agrave; dei microtubuli che contattare siti specifici corticale per evitare collegamenti stabili e/o laterale. La distribuzione asimmetrica di tale attivit&agrave; potrebbe contribuire a generare variazioni regionali nei comportamenti dei microtubuli coinvolti nella migrazione cellulare.

Daniel W. Buster

Department of Cell Biology and Anatomy

University of Arizona (UOA)

Preparation of Drosophila S2 cells for Light Microscopy

Daniel W. Buster

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University of Arizona (UOA)

Preparation of Drosophila S2 cells for Light Microscopy

Department of Cell Biology and Anatomy