Monitoring the Reductive and Oxidative Half-Reactions of a Flavin-Dependent Monooxygenase using Stopped-Flow Spectrophotometry

Aspergillus fumigatus siderophore A (SidA) is an FAD-containing monooxygenase that catalyzes the hydroxylation of ornithine in the biosynthesis of ...

Virginia Polytechnic Institute and State University

Geotrichum &#x6837;&#x771F;&#x83CC;&#x7684; biodeteriorated &#x5149;&#x76D8; (CD) &#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x964D;&#x89E3;&#x4E0D;&#x540C; CD &#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3002;CD &#x7247;&#x6BB5;&#x5185;&#x7684;&#x771F;&#x83CC;&#x83CC;&#x4E1D;&#x901A;&#x8FC7;&#x94DD;&#x5C42;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x548C;&#x751F;&#x4EA7;&#x8FD9;&#x79CD;&#x91D1;&#x5C5E;&#x7684;&#x6EB6;&#x89E3;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;CDs &#x7684;&#x626B;&#x63CF;&#x7535;&#x955C;&#x68C0;&#x67E5;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x771F;&#x83CC;&#x80FD;&#x591F;&#x7834;&#x574F;&#x5728;&#x805A;&#x78B3;&#x9178;&#x916F;&#x5C42;&#xFF0C;&#x786E;&#x8BA4;&#x6B64;&#x82B3;&#x9999;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x964D;&#x89E3;&#x69FD;&#x5751;&#x548C;&#x5730;&#x653F;&#x603B;&#x7F72;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x771F;&#x83CC;&#x5206;&#x6CCC;&#x82B3;&#x57FA;&#x9187;&#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x548C; Mn2 +-&#x6C27;&#x5316;&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x7269;&#x9176;&#x3001; &#x6C27;&#x5316;&#x8FD8;&#x539F;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7279;&#x5F81;&#x7684;&#x62C5;&#x5B50;&#x83CC;&#x6728;&#x8D28;&#x7D20;&#x964D;&#x89E3;&#x4E24;&#x79CD;&#x3002;&#x6838;&#x7CD6;&#x4F53; DNA&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x7279;&#x5F81;&#x53CA;&#x5176;&#x533A;&#x57DF;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x6027;&#x5F62;&#x5F0F;&#x548C;&#x9176;&#x5206;&#x6CCC;&#x6DB2;&#x4F53;&#x57F9;&#x517B;&#x57FA;&#x4E2D;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x786E;&#x5B9A;&#x771F;&#x83CC;&#x4E3A;&#x7C7B;&#x4F3C; Geotrichum &#x7684;&#x65E0;&#x6027;&#x578B;&#x7684;&#x70DF;&#x7BA1;&#x83CC;&#x57F9;&#x517B;&#x57FA; (&#x4E2D;)&#x3002;P.&#x5CA9;&#x6EB6;&#x3002;

&#x65E0;&#x6027;&#x578B;&#x7684;&#x767D;&#x8150;&#x83CC;&#x70DF;&#x7BA1;&#x83CC;&#x57F9;&#x517B;&#x57FA;&#x80FD;&#x591F;&#x5F00;&#x62D3;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x548C;&#x6709;&#x8FB1;&#x4EBA;&#x683C;&#x7684;&#x5149;&#x76D8;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3002;

A Geotrichum-like fungus isolated from a biodeteriorated compact disc (CD) was able to degrade in vitro the components of different CD types. The fungal hyphae inside the CD fragments grew through the aluminium layer and produced the solubilization of this metal. Furthermore, examination of CDs by scanning electron microscopy showed that the fungus was able to destroy the pits and lands structures grooved in the polycarbonate layer, confirming degradation of this aromatic polymer. The fungus secretes aryl-alcohol oxidase and Mn2+-oxidizing peroxidase, two kinds of oxidoreductases characteristic of ligninolytic basidiomycetes. Analysis of the ITS region of ribosomal DNA, as well as the morphological characteristics, the lack of sexual forms and the profile of enzymes secreted in liquid medium identified the fungus as a Geotrichum-like anamorph of Bjerkandera adusta (Willd.) P. Karst.

An anamorph of the white-rot fungus Bjerkandera adusta capable of colonizing and degrading compact disc components.

Un champignon Geotrichum isol&eacute; &agrave; partir d&#39;un disque compact de biodeteriorated (CD) a &eacute;t&eacute; capable de d&eacute;grader, in vitro, les composants de diff&eacute;rents types de CD. Les hyphes fongiques dans les fragments de CD est pass&eacute; &agrave; travers la couche d&#39;aluminium et produit la solubilisation de ce m&eacute;tal. En outre, l&#39;examen des CDs par microscopie &eacute;lectronique &agrave; balayage a montr&eacute; que le champignon est capable de d&eacute;truire les structures de stands et terres rainur&eacute;es dans la couche de polycarbonate, confirmant la d&eacute;gradation de ce polym&egrave;re aromatique. Le champignon s&eacute;cr&egrave;te aryl-alcool oxydase et Mn2 +-peroxydase oxydante, deux sortes d&#39;oxydor&eacute;ductases caract&eacute;ristiques de ligninolytique basidiomyc&egrave;tes. Analyse de la r&eacute;gion ITS de l&#39;ADN ribosomique, ainsi que les caract&eacute;ristiques morphologiques, l&#39;absence de formes sexuelles et le profil des enzymes s&eacute;cr&eacute;t&eacute;es dans le milieu liquide identifi&eacute; le champignon comme un anamorphe de type Geotrichum de Bjerkandera adusta (Willd.) P. karst.

Un anamorphe du champignon de la pourriture blanche Bjerkandera adusta capable de coloniser et d&eacute;gradant les composants du disque compact.

Geotrichum-&auml;hnlichen Pilzen isoliert von einer Biodeteriorated-CD (CD) konnte in Vitro die Komponenten der verschiedenen CD beeintr&auml;chtigen. Die Pilz-Hyphen innerhalb der CD-Fragmente wuchsen durch die Aluminiumschicht und produzierte die Solubilization dieses Metalls. Pr&uuml;fung der CDs durch Rasterelektronenmikroskopie zeigte dar&uuml;ber hinaus, dass der Pilz die Pits und Lands Strukturen in der Polycarbonat-Schicht, best&auml;tigt Abbau dieses aromatische Polymer gerillt zerst&ouml;ren konnte. Der Pilz sondert Aryl-Alkohol Oxidase und Mn2 +-oxidierenden Peroxydase, zwei Arten von Oxidoreduktase charakteristisch f&uuml;r Ligninolytic Basidiomyceten. Analyse der Region ITS ribosomal DNA als auch die morphologische Merkmale, die mangelnde sexuelle Formen und das Profil der Enzyme abgesondert im fl&uuml;ssigen Medium identifiziert den Pilz als eine Geotrichum-wie Anamorph von Bjerkandera Adusta (Willd.) P. Karst.

Ein Anamorph von der wei&szlig;-Rot-Pilz Bjerkandera Adusta kolonisieren und erniedrigende CD-Komponenten.

Un fungo Geotrichum-come isolato da un biodeteriorated compact disc (CD) &egrave; stato in grado di degradare in vitro i componenti dei diversi tipi di CD. Le ife fungine all&#39;interno dei frammenti di CD &egrave; cresciuta attraverso lo strato di alluminio e prodotto la solubilizzazione di questo metallo. Inoltre, esame dei CD di microscopia elettronica a scansione hanno dimostrato che il fungo &egrave; stato in grado di distruggere le strutture cave e terreni scanalate nello strato di policarbonato, confermando la degradazione di questo polimero aromatico. Il fungo secerne aril-alcol ossidasi e Mn2 +-perossidasi ossidanti, due tipi di putativa caratteristica dei funghi basidiomiceti ligninolytic. Analisi della regione ITS ribosomal DNA, cos&igrave; come le caratteristiche morfologiche, la mancanza di forme sessuali e il profilo di enzimi secernuti in mezzo liquido identificato il fungo come un simil-Geotrichum anamorph di Bjerkandera adusta (Willd.) P. karst.

Un anamorph del fungo del marciume bianco Bjerkandera adusta in grado di colonizzare e degradante componenti compact disc.

Biodeteriorated &#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8; &#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF; (CD) &#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x751F;&#x7523;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x83CC;&#x306F;&#x8A66;&#x9A13;&#x7BA1;&#x5185;&#x3067;&#x5225;&#x306E; CD &#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x7CF8;&#x72B6;&#x83CC;&#x306E;&#x83CC;&#x7CF8; CD &#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x5185;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A2;&#x30EB;&#x30DF;&#x30CB;&#x30A6;&#x30E0;&#x5C64;&#x3092;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x91D1;&#x5C5E;&#x306E;&#x53EF;&#x6EB6;&#x5316;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x8D70;&#x67FB;&#x578B;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B; Cd &#x306E;&#x691C;&#x8A0E;&#x83CC;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30DC;&#x30CD;&#x30FC;&#x30C8;&#x5C64;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x82B3;&#x9999;&#x65CF;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x52A3;&#x5316;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;&#x6E9D;&#x30D4;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068; mn 2 + &#x306E;&#x83CC;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;-&#x9178;&#x5316;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x9178;&#x5316;&#x9084;&#x5143;&#x9175;&#x7D20;&#x30EA;&#x30B0;&#x30CB;&#x30F3;&#x5206;&#x89E3;&#x62C5;&#x5B50;&#x83CC;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306E; 2 &#x7A2E;&#x985E;&#x3002;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x30EA;&#x30DC;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0; DNA &#x306E; ITS &#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x3001;&#x6DB2;&#x4F53;&#x57F9;&#x5730;&#x4E2D;&#x306B;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3068;&#x6027;&#x7684;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x83CC; Bjerkandera adusta &#x5F53;&#x4EE3;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30A2;&#x30CA;&#x30E2;&#x30EB;&#x30D5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;P. &#x30AB;&#x30EB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3002;

&#x30A2;&#x30CA;&#x30E2;&#x30EB;&#x30D5;&#x767D;&#x8272;&#x8150;&#x673D;&#x83CC; Bjerkandera adusta &#x306E;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x3068;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8; &#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF; &#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x3002;

Biodeteriorated &#xCEF4;&#xD329;&#xD2B8; &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C; (CD)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC808;&#xC5F0; Geotrichum &#xAC19;&#xC740; &#xADE0; &#xB958; CD &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC800;&#xD558; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. CD &#xC870;&#xAC01; &#xC548;&#xC5D0; &#xACF0; &#xD321;&#xC774; &#xADE0;&#xC740; &#xC54C;&#xB8E8;&#xBBF8;&#xB284; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC810;&#xC810;&#xC774; &#xAE08;&#xC18D;&#xC758; &#xAC00;&#xC6A9; &#xD654; &#xC81C;&#xC791;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD558; &#xC5EC; Cd&#xC758; &#xC2DC;&#xD5D8; &#xADE0; &#xD655;&#xC778;&#xC774; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC871; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xD3F4; &#xB9AC; &#xCE74;&#xBCF4; &#xB124;&#xC774;&#xD2B8; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xD648;&#xC774; &#xAD6C; &#xB369;&#xC774; &#xBC0F; &#xD1A0;&#xC9C0; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xD30C;&#xAD34; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xACF0; &#xD321;&#xC774; secretes aryl &#xC54C;&#xCF5C; &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; Mn2 +-&#xC0B0;&#xD654; &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C;, oxidoreductases ligninolytic basidiomycetes&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC758; 2 &#xC885;&#xB958;. &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xD2B9;&#xC131; ribosomal DNA&#xC758; ITS &#xC601;&#xC5ED; &#xBD84;&#xC11D;, &#xC131;&#xC801;&#xC778; &#xD615;&#xD0DC; &#xBD80;&#xC871;&#xACFC; &#xC561;&#xCCB4; &#xB9E4;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84; &#xBE44; &#xD558;&#xB294; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; Geotrichum &#xAC19;&#xC740; anamorph Bjerkandera adusta (Willd)&#xC758; &#xACF0; &#xD321;&#xC774; &#xD655;&#xC778; P. karst&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC815;&#xCC29; &#xD558; &#xACE0; &#xCEF4;&#xD329;&#xD2B8; &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC800;&#xD558; &#xC2DC; &#xD0A4; &#xC9C0; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD654;&#xC774;&#xD2B8; &#xBD80;&#xD328; &#xADE0; Bjerkandera adusta&#xC758; anamorph.

Un hongo Geotrichum-como aislado de biodeteriorated disco compacto (CD) fue capaz de degradar in vitro los componentes de los distintos tipos de CD. Las hifas de los hongos dentro de los fragmentos de CD a trav&eacute;s de la capa de aluminio y producci&oacute;n la solubilizaci&oacute;n de este metal. Adem&aacute;s, la examinaci&oacute;n de CD por microscop&iacute;a electr&oacute;nica de barrido demostr&oacute; que el hongo era capaz de destruir las estructuras de los huesos y tierras acanaladas en la capa de policarbonato, confirmando la degradaci&oacute;n de este pol&iacute;mero arom&aacute;tico. El hongo segrega aril-alcohol oxidasa y Mn2 +-peroxidasa oxida, dos clases de Oxidorreductasas caracter&iacute;sticos de ligninol&iacute;ticas basidiomicetos. An&aacute;lisis de la regi&oacute;n ITS de ADN ribosomal, as&iacute; como las caracter&iacute;sticas morfol&oacute;gicas, la falta de formas sexuales y el perfil de enzimas segregadas en medio l&iacute;quido identifican el hongo como un anamorfo de Geotrichum-como de Bjerkandera adusta (Willd.) P. karst.

Un anamorfo del hongo blanco-rot Bjerkandera adusta capaz de colonizar y degradar componentes del disco compacto.

&#x65B0;&#x7684; flavooxidase &#x662F;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x70DF;&#x7BA1; arthroconidial &#x65E0;&#x6027;&#x3002;&#x5176;&#x7406;&#x5316;&#x6027;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5305;&#x542B;&#x975E;&#x5171;&#x4EF7;&#x952E;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x9EC4;&#x7D20;&#x817A;&#x560C;&#x5464;&#x4E8C;&#x6838;&#x82F7;&#x9178; (&#x65F6;&#x5C1A;) &#x548C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x50AC;&#x5316;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#xFF0C;&#x5982;&#x82B3;&#x70C3;&#x548C;&#x591A;&#x4E0D;&#x9971;&#x548C;&#x8102;&#x80AA;&#x9187;&#x4E3B;&#xFF0C;&#x6C27;&#x5316;&#x5355;&#x4F53;&#x9176;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x5E73;&#x83C7;&#x674F;&#x9C8D;&#x83C7;&#x82B3;&#x57FA;&#x9187;&#x6C27;&#x5316;&#x9176; (AAO)&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x6C27;&#x5316;&#x915A;&#x82C4;&#x57FA;&#x548C;&#x8089;&#x6842;&#x9187;&#x662F;&#x5178;&#x578B;&#x5E95;&#x7269;&#x9999;&#x5170;&#x57FA;&#x9187;&#x6C27;&#x5316;&#x9176; (&#x7231;&#x6ECB;&#x75C5;)&#xFF0C;&#x6765;&#x81EA;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5BB6;&#x5EAD;&#xFF0C;flavooxidase multimeric &#x6027;&#x8D28;&#x53CA;&#x5176;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x5171;&#x4EF7;&#x952E;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x65F6;&#x5C1A;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x4E5F;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E8E;&#x4F53;&#x80B2;&#x674F;&#x9C8D;&#x83C7; AAO &#x7531;&#x5177;&#x6709;&#x6781;&#x9AD8;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2F;&#x5316;&#x82C4;&#x9187; (1000&#x5E74;-1500 s(-1) mM(-1))&#xFF0C;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x9152;&#x7CBE;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4EA7;&#x7269;&#x5206;&#x6CCC;&#x4FA7;&#x8033;&#x548C;&#x70DF;&#x7BA1;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; chloroaromatics &#x548C;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x82B3;&#x9999;&#x919B;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x66F4;&#x8010;&#x4EBA;&#x5BFB;&#x5473;&#x7684;&#x662F;&#x65B0;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x662F;&#x4EE5;&#x6700;&#x4F73;&#x65B9;&#x5F0F;&#x6D3B;&#x8DC3;&#x5728; ph &#x503C; 6.0 p anisyl &#x548C;&#x9999;&#x5170;&#x57FA;&#x9187;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x4E00;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#x662F;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x8BFE;&#x578B;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6536;&#x76CA;&#x901A;&#x8FC7;&#x886C;&#x5E95;&#x915A;&#x76D0;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x57FA;&#x672C;&#x7684; ph &#x503C;&#x5728;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x915A;&#x82C4;&#x9187;&#x6C27;&#x5316;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E00;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x4E0A;&#x8FF0;&#x5C5E;&#x6027;&#x548C; ADP &#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E3B;&#x9898;&#xFF0C;&#x90E8;&#x5206;&#x540E; N &#x603B;&#x7AD9;&#x6D4B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x65B0;&#x578B;&#x9176;&#x5236;&#x5242;&#x88AB;&#x5217;&#x4E3A;&#x6C27;&#x5316;&#x6C27;&#x5316;&#x94DD;&#x548C;&#x8BFE;&#x578B;&#x57FA;&#x5E95;&#x7684; GMC (&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;-&#x7532;&#x9187;-&#x80C6;&#x78B1;&#x6C27;&#x5316;&#x9176;) &#x6C27;&#x5316;&#x8FD8;&#x539F;&#x9176;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#x3002;

&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7684;&#x915A;&#x919B;&#x548C; nonphenolic &#x82C4;&#x9187;&#x6C27;&#x5316;&#x7684;&#x70DF;&#x7BA1; arthroconidial &#x65E0;&#x6027;&#x7684;&#x65B0;&#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x3002;

A new flavooxidase is described from a Bjerkandera arthroconidial anamorph. Its physicochemical characteristics, a monomeric enzyme containing non-covalently bound flavin adenine dinucleotide (FAD), and several catalytic properties, such as oxidation of aromatic and polyunsaturated aliphatic primary alcohols, are similar to those of Pleurotus eryngii aryl-alcohol oxidase (AAO). However, it also efficiently oxidizes phenolic benzyl and cinnamyl alcohols that are typical substrates of vanillyl-alcohol oxidase (VAO), a flavooxidase from a different family, characterized by its multimeric nature and presence of covalently-bound FAD. The enzyme also differs from P. eryngii AAO by having extremely high efficiency oxidizing chlorinated benzyl alcohols (1000-1500 s(-1) mM(-1)), a feature related to the different alcohol metabolites secreted by the Pleurotus and Bjerkandera species including chloroaromatics, and higher activity on aromatic aldehydes. What is even more intriguing is the fact that, the new oxidase is optimally active at pH 6.0 on both p-anisyl and vanillyl alcohols, suggesting a mechanism for phenolic benzyl alcohol oxidation that is different from that described in VAO, which proceeds via the substrate phenolate anion formed at basic pH. Based on the above properties, and its ADP-binding motif, partially detected after N-terminus sequencing, the new enzyme is classified as a member of the GMC (glucose-methanol-choline oxidase) oxidoreductase family oxidizing both AAO and VAO substrates.

New oxidase from Bjerkandera arthroconidial anamorph that oxidizes both phenolic and nonphenolic benzyl alcohols.

Un nouveau flavooxidase est d&eacute;crite &agrave; partir d&#39;un anamorphe arthroconidiale de Bjerkandera. Ses caract&eacute;ristiques physico-chimiques, une enzyme monom&egrave;re contenant non covalente flavine ad&eacute;nine dinucl&eacute;otide (FAD), ainsi que plusieurs propri&eacute;t&eacute;s catalytiques, tels que l&#39;oxydation des alcools aliphatiques primaires aromatiques et polyinsatur&eacute;s, sont semblables &agrave; celles de Pleurotus eryngii aryl-alcool oxydase (AAO). Toutefois, il s&#39;oxyde aussi efficacement benzyle ph&eacute;nolique et des alcools de cinnamyle qui sont des substrats typiques de vanillyl-alcool oxydase (VAO), un flavooxidase d&#39;une famille diff&eacute;rente, caract&eacute;ris&eacute;e par sa nature multim&eacute;riques et la pr&eacute;sence de FAD li&eacute; par covalence. L&#39;enzyme diff&egrave;re aussi eryngii P. AAO en ayant extr&ecirc;mement haute efficacit&eacute; oxydants chlor&eacute;s alcools benzyliques (1000-1500 s(-1) mM(-1)), une caract&eacute;ristique li&eacute;e &agrave; des m&eacute;tabolites diff&eacute;rents alcool s&eacute;cr&eacute;t&eacute;es par l&#39;esp&egrave;ce Pleurotus et Bjerkandera, y compris les chloroaromatics et une activit&eacute; plus &eacute;lev&eacute;e sur les ald&eacute;hydes aromatiques. Ce qui est encore plus fascinant est le fait que le nouveau oxydase est une activit&eacute; optimale &agrave; pH 6.0 sur p-anisyle tant vanillyl alcools, sugg&eacute;rant un m&eacute;canisme pour l&#39;oxydation de l&#39;alcool benzylique ph&eacute;nolique qui est diff&eacute;rente de celle d&eacute;crite dans VAO, qui proc&egrave;de par l&#39;interm&eacute;diaire de l&#39;anion ph&eacute;nolate de substrat form&eacute;e &agrave; pH basique. Bas&eacute; sur les propri&eacute;t&eacute;s ci-dessus et son motif de liaison ADP, partiellement d&eacute;tect&eacute; apr&egrave;s le s&eacute;quen&ccedil;age de l&#39;extr&eacute;mit&eacute; N-terminale, la nouvelle enzyme est class&eacute; en tant que membre de la famille d&#39;oxydor&eacute;ductase (choline-m&eacute;thanol-glucose oxydase) GMC oxydation des substrats AAO tant de VAO.

Nouveau oxydase de Bjerkandera arthroconidiale anamorphe qui oxyde les deux alcools ph&eacute;noliques et non-ph&eacute;noliques de benzyle.

Eine neue Flavooxidase wird von einem Bjerkandera Arthroconidial Anamorph beschrieben. Seine physikalisch-chemischen Eigenschaften, ein Monomer Enzym mit nicht-kovalent gebundenen Flavin-adenin-dinucleotid (FAD) und mehreren katalytischen Eigenschaften, z. B. Oxidation von aromatischen und mehrfach unges&auml;ttigte aliphatische prim&auml;re Alkohole, &auml;hneln denen von Pleurotus Kr&auml;uterseitlinge Aryl-Alkohol Oxidase (AAO). Aber es oxidiert auch effizient phenolischen Benzyl und Cinnamyl Alkohole, die typische Substrate von Vanillinmandels&auml;ure-Alkohol Oxidase (VAO), ein Flavooxidase aus einer anderen Familie sind gekennzeichnet durch ihre werden Natur und Vorhandensein von kovalent gebundene FAD. Das Enzym unterscheidet sich auch von p. Kr&auml;uterseitlinge AAO mit extrem hohem Wirkungsgrad oxidierende, Benzyl-Alkohole (1000-1500 s(-1) mM(-1)), ein Feature mit Bezug zu den verschiedenen Alkohol-Metaboliten gechlort, abgesondert von der Pleurotus und Bjerkandera Arten, einschlie&szlig;lich Chloroaromatics und h&ouml;here Aktivit&auml;t auf aromatischen Aldehyden. Was ist noch interessanter die Tatsache, dass die neue Oxydase engagiert sich optimal bei pH 6.0 auf p-Anisyl und Vanillinmandels&auml;ure Alkohole, schl&auml;gt einen Mechanismus f&uuml;r phenolische Benzyl Alkohol-Oxidation, die unterscheidet sich von beschrieben VAO, der &uuml;ber das Substrat Natriumphenolat Anion gebildet bei grundlegenden pH &uuml;bergeht. Basierend auf den oben genannten Eigenschaften und seine ADP-Bindung-Motiv, nach der N-Terminus Sequenzierung teilweise erkannt, wird das neue Enzym als Mitglied der GMC (Glukose-Methanol-Cholin Oxydase) Oxidoreduktase Familie oxidierende AAO und VAO Substrate klassifiziert.

Neue Oxydase aus Bjerkandera Arthroconidial Anamorph, die beiden phenolischen und nonphenolic Benzyl-Alkoholen oxidiert.

Un nuovo flavooxidase &egrave; descritto da un Bjerkandera arthroconidial anamorph. Le sue caratteristiche fisico-chimiche, un enzima monomerico contenente non covalentemente Flavina adenina dinucleotide (FAD) e diverse propriet&agrave; catalitiche, come ossidazione di aromatici e poli-insaturi alifatici alcoli primari, sono simili a quelli di Pleurotus eryngii aril-alcol ossidasi (AAO). Tuttavia, si ossida in maniera efficiente anche fenolico benzilico e alcool cinnamico che sono tipici substrati di Vanillil-alcol ossidasi (VAO), un flavooxidase da una famiglia diversa, caratterizzato dalla sua natura multimerica e presenza di FAD associato a legame covalente. L&#39;enzima differisce anche da p. eryngii AAO avendo estremamente alta efficienza ossidante clorurati alcoli benzilici (1000-1500 s(-1) mM(-1)), una caratteristica imparentato con i metaboliti di alcool diversi secernuti dalle specie Pleurotus e Bjerkandera tra cui chloroaromatics e maggiore attivit&agrave; su aldeidi aromatiche. Che cosa &egrave; ancora pi&ugrave; intrigante &egrave; il fatto che, il nuovo ossidasi &egrave; attivo in modo ottimale a pH 6.0 su p-anisyl sia vanillil alcool, suggerendo un meccanismo per ossidazione di alcool benzilico fenolico che &egrave; diverso da quello descritto in VAO, che procede attraverso l&#39;anione fenolato substrato costituito a base pH. Il nuovo enzima basato sulle propriet&agrave; sopra e il suo motivo di ADP-associazione, parzialmente rilevato dopo sequenziamento N-terminale, &egrave; classificato come un membro della famiglia di ossidoreduttasi (glucosio-metanolo-Colina ossidasi) GMC ossidanti substrati sia AAO e VAO.

Nuovo ossidasi da Bjerkandera arthroconidial anamorph che ossida entrambi alcoli benzilici fenolici e nonphenolic.

&#x65B0;&#x3057;&#x3044; flavooxidase Bjerkandera arthroconidial &#x30A2;&#x30CA;&#x30E2;&#x30EB;&#x30D5;&#x304B;&#x3089;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3001;&#x975E;&#x5171;&#x6709;&#x7D50;&#x5408;&#x9023;&#x7D50;&#x30D5;&#x30E9;&#x30D3;&#x30F3;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; &#xFF08;FAD&#xFF09; &#x3068;&#x82B3;&#x9999;&#x65CF;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x591A;&#x4FA1;&#x4E0D;&#x98FD;&#x548C;&#x8102;&#x80AA;&#x65CF;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5358;&#x91CF;&#x4F53;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30E9;&#x30BF;&#x30B1; &#x30A8;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AE; &#x30A2;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;AAO&#xFF09; &#x3068;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3082;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB; &#x30D9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30EB;&#x3068;&#x30D0;&#x30CB;&#x30EA;&#x30EB;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;&#x30D0;&#x30AA;&#xFF09; &#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x5BB6;&#x65CF;&#x304B;&#x3089;&#x306E; flavooxidase &#x306E;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A;&#x57FA;&#x677F;&#x306F;&#x30B7;&#x30F3;&#x30CA;&#x30DF;&#x30EB; &#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x9178;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x4F1A;&#x5408;&#x81EA;&#x7136;&#x3068;&#x7D50;&#x5408;-&#x5171;&#x6709;&#x7D50;&#x5408; FAD &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9175;&#x7D20;&#x3082;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x9AD8;&#x52B9;&#x7387;&#x9178;&#x5316;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B; AAO &#x30D9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30EB; &#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB; (1000&#x5E74;-1500 s(-1) mM(-1))&#x3001;&#x82B3;&#x9999;&#x3068;&#x82B3;&#x9999;&#x65CF;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x9AD8;&#x3044;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D2;&#x30E9;&#x30BF;&#x30B1;&#x3068; Bjerkandera &#x306E;&#x7A2E;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5225;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3002; &#x5869;&#x7D20;&#x30A8;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AE;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x4F55;&#x304C;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x306A;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x304C;&#x6700;&#x9069; pH 6.0 &#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A; pH &#x3067;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x57FA;&#x677F; phenolate &#x9670;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x9032;&#x3080;&#x30D0;&#x30AA;&#x306E;&#x8AAC;&#x660E;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB; &#x30D9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30EB; &#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3001;p &#x30A2;&#x30CB;&#x30B7;&#x30EB;&#x3068;&#x30D0;&#x30CB;&#x30EA;&#x30EB;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x4E0A;&#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4E8B;&#x5B9F;&#x3067;&#x3059;&#x3002;N &#x672B;&#x7AEF;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x5F8C;&#x306F;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x305D;&#x306E; ADP &#x7D50;&#x5408;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3001;&#x4E0A;&#x8A18;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x9175;&#x7D20; AAO &#x3068;&#x30F4;&#x30A1;&#x30AA;&#x57FA;&#x677F;&#x3092;&#x9178;&#x5316; GMC &#xFF08;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;-&#x30E1;&#x30BF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB; - &#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;) &#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x30EC;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x4E00;&#x54E1;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5206;&#x985E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x4E21;&#x65B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068; nonphenolic &#x306E;&#x30D9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30EB; &#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x9178;&#x5316; Bjerkandera arthroconidial &#x30A2;&#x30CA;&#x30E2;&#x30EB;&#x30D5;&#x304B;&#x3089;&#x3002;

&#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; flavooxidase Bjerkandera arthroconidial anamorph&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294;. &#xBB3C;&#xB9AC; &#xD654;&#xD559;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131;, monomeric &#xD6A8;&#xC18C; &#xBE44; &#x70AD; &#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xD50C; &#xB77C;&#xBE48; &#xC544;&#xB370;&#xB2CC; &#xB514;&#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; (&#xC720;&#xD589;)&#xACFC; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC871; &#xBC0F; &#xBD88;&#xD3EC;&#xD654; &#xC9C0;&#xBC29; &#xC871; 1 &#xCC28; &#xC54C;&#xCF5C;, &#xC0B0;&#xD654; &#xB4F1;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC0C8; &#xC1A1;&#xC774; aryl &#xC54C;&#xCF5C; &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; (AAO)&#xC758; &#xAC83;&#xACFC; &#xC720;&#xC0AC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB610;&#xD55C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD398; &#xB180; &#xBCA4; &#xC9C8; &#xBC0F; vanillyl &#xC54C;&#xCF5C; &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; (&#xAC00;&#xBCC0;), &#xB2E4;&#xB978; &#xAC00;&#xC871;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC11C; flavooxidase&#xC758; &#xC804;&#xD615;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xD310;&#xC740; cinnamyl &#xC54C;&#xCF5C; &#xC0B0;&#xD654; multimeric &#xC790;&#xC5F0;&#xACFC; &#x70AD; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xC720;&#xD589;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB192;&#xC740; &#xD6A8;&#xC728; &#xC0B0;&#xD654; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; AAO &#xC5FC;&#xD654; &#xBCA4; &#xC9C8; &#xC54C;&#xCF5C; (1000-1500 s(-1) mM(-1)), &#xB2E4;&#xB978; &#xC54C;&#xCF54;&#xC62C; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0B0;&#xBB3C; &#xB290;&#xD0C0;&#xB9AC;&#xC18D; Bjerkandera &#xC885; chloroaromatics, &#xB4F1; &#xB192;&#xC740; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC871; &#xC54C;&#xB370;&#xD558;&#xC774;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84; &#xBE44;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xAE30;&#xB2A5; P. &#xC1A1;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB354;&#xC6B1; &#xD765;&#xBBF8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; p-anisyl &#xBC0F; vanillyl &#xC54C;&#xCF5C;, &#xD398; &#xB180; &#xBCA4; &#xC9C8; &#xC54C;&#xCF54;&#xC62C; &#xC0B0;&#xD654;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC0B0;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xC131; &#xB41C; &#xAE30;&#xD310; phenolate &#xC74C;&#xC774;&#xC628;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC9C4;&#xD589; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBD10;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; pH 6.0&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB418;&#xC5B4;, &#xD558;&#xB294; &#xC0AC;&#xC2E4; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC704;&#xC758; &#xC18D;&#xC131; &#xBC0F; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; N-&#xB9D0;&#xB2E8; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD6C4; &#xAC10;&#xC9C0;&#xB294; ADP &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD6A8;&#xC18C; AAO&#xC640; &#xAC00;&#xBCC0; &#xAE30;&#xD310; &#xC0B0;&#xD654; GMC (&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;-&#xBA54;&#xD0C4;&#xC62C;-&#xCF5C;&#xB9B0; &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C;) oxidoreductase &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC77C; &#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xB958; &#xB41C;&#xB2E4;.

&#xBAA8;&#xB450; &#xD398; &#xB180; &#xBC0F; nonphenolic &#xBCA4; &#xC9C8; &#xC54C;&#xCF5C; &#xC0B0;&#xD654; Bjerkandera arthroconidial anamorph&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C;.

Se describe un nuevo flavooxidase de un Bjerkandera arthroconidial anamorfo. Sus caracter&iacute;sticas fisicoqu&iacute;micas, una enzima monom&eacute;rica que contiene no covalente FLAVINA adenina dinucle&oacute;tido (FAD) y varias propiedades catal&iacute;ticas, tales como la oxidaci&oacute;n de alcoholes primarios alif&aacute;ticos arom&aacute;ticos y poliinsaturados, son similares a los de Pleurotus eryngii aril-alcohol oxidasa (AAO). Sin embargo, tambi&eacute;n eficientemente oxida benc&iacute;lico fen&oacute;lico y cinnamyl alcohol que es sustratos t&iacute;picos de vanillyl-alcohol oxidasa (VAO), un flavooxidase de una familia diferente, caracterizado por su naturaleza multim&eacute;ricas y presencia de FAD covalentemente enlazados. La enzima tambi&eacute;n difiere de p. eryngii AAO por tener eficacia extremadamente alta oxidantes clorados alcohol benc&iacute;lico (1000-1500 s(-1) mM(-1)), una caracter&iacute;stica que se relaciona con los metabolitos diferentes alcohol secretados por las especies de Pleurotus y Bjerkandera como cloroarom&aacute;ticos y una mayor actividad en Aldeh&iacute;dos arom&aacute;ticos. Lo que es a&uacute;n m&aacute;s intrigante es el hecho que el nueva oxidasa es &oacute;ptimamente activa a pH 6,0 en alcoholes p-anisyl tanto vanillyl, sugiriendo un mecanismo para la oxidaci&oacute;n de alcohol benc&iacute;lico fen&oacute;licos que es diferente de la descrita en VAO, que procede por el ani&oacute;n de phenolate sustrato formado en pH b&aacute;sico. Basado en las propiedades anteriores y su motivo de uni&oacute;n a ADP, parcialmente detectados despu&eacute;s de la secuencia N-terminal, la enzima nueva se clasifica como miembro de la familia de oxidorreductasa (glucosa-metanol-colina oxidasa) GMC oxidar sustratos AAO tanto VAO.

Elvira Romero

Department of Biochemistry

Virginia Polytechnic Institute and State University

Monitoring the Reductive and Oxidative Half-Reactions of a Flavin-Dependent Monooxygenase using Stopped-Flow Spectrophotometry

Elvira Romero

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Biochemistry

Virginia Polytechnic Institute and State University

Monitoring the Reductive and Oxidative Half-Reactions of a Flavin-Dependent Monooxygenase using Stopped-Flow Spectrophotometry

Department of Biochemistry