Live Imaging of Cell Extrusion from the Epidermis of Developing Zebrafish

Homeostatic maintenance of epithelial tissues requires the continual removal of damaged cells without disrupting barrier function.  Our studies have found ...

University of Utah

&#x57FA;&#x56E0;&#x82AF;&#x7247;&#x6742;&#x4EA4;&#x6280;&#x672F;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5141;&#x8BB8;&#x6DF7;&#x5408;&#x5377;&#x6240;&#x7528;&#x7684;&#x73BB;&#x7483;&#x6298;&#x5C04;&#x7387;&#x76F8;&#x5AB2;&#x7F8E;&#x7684;&#x88AB;&#x63D0;&#x4EA4;&#x3002;&#x6B64;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x7528;&#x5B8C;&#x5373;&#x5F03;&#x7684;&#x7075;&#x6D3B;&#x76D6;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; 1 &#x82F1;&#x5BF8; x 3 &#x82F1;&#x5BF8;&#x73BB;&#x7483;&#x5E7B;&#x706F;&#x7247;&#x901A;&#x8FC7;&#x80F6;&#x57AB;&#x7247;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7EDF;&#x4E00; 25 microm &#x539A;&#x6742;&#x4EA4;&#x5206;&#x5EAD;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x6B64;&#x5206;&#x5EAD;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x5355;&#x4F4D;&#x3002;&#x76D6;&#x5305;&#x542B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8FDE;&#x7EED;&#x6DF7;&#x5408;&#x6742;&#x4EA4;&#x6DB2;&#x7684;&#x7A7A;&#x6C14;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x8180;&#x80F1;&#x3002;&#x4ECE;&#x5178;&#x578B;&#x82AF;&#x7247;&#x5B9E;&#x9A8C; 2-3 &#x500D;&#x7684;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4E86;&#x6DF7;&#x5408;&#x3002;&#x6DF7;&#x5408;&#x662F;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5728;&#x9AD8;&#x6591;&#x70B9;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x6709;&#x6548;&#x548C;&#x4F4E;&#x6807;&#x6709;&#x76EE;&#x6807;&#x6D53;&#x5EA6;&#x548C;&#x514B;&#x670D;&#x65F6;&#x53D1;&#x751F;&#x540C;&#x6E90;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x53D1;&#x73B0;&#x8FD1;&#x5728;&#x54AB;&#x5C3A;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x76EE;&#x6807;&#x67AF;&#x7AED;&#x3002;&#x6DF7;&#x5408;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x7B26;&#x5408;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x6742;&#x4EA4;&#x6280;&#x672F;&#x6761;&#x4EF6; &#xFF1B;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5E94;&#x6267;&#x884C;&#x4E0E;&#x65E0;&#x6DF7;&#x5408;&#x63A7;&#x5236;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#x8986;&#x76D6;&#x6709;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x95EE;&#x9898;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x5236;&#x9020;&#x3001; &#x704C;&#x88C5;&#x3001; &#x6DF7;&#x5408;&#x548C;&#x5305;&#x88C5;&#x3002;

&#x5728;&#x4E0E;&#x6DF7;&#x5408;&#x57FA;&#x56E0;&#x82AF;&#x7247;&#x6742;&#x4EA4;&#x6280;&#x672F;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848; 25 microm &#x539A;&#x5BA4;&#x4E2D;&#x7684;&#x8BBE;&#x5907;&#x7684;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x7684;&#x6536;&#x76CA;&#x3002;

A microarray hybridization system that allows mixing in volumes comparable to those used by glass coverslips is presented. This system is composed of a disposable flexible lid that binds to 1 in. x 3 in. glass slides via an adhesive gasket, forming a uniform 25-microm-thick hybridization chamber. This chamber rests on a base unit for temperature control. The lid contains two air-driven bladders that continuously mix the hybridization fluid. Mixing enhances sensitivity from a typical microarray experiment 2-3-fold. Mixing is particularly effective at high spotted probe and low labeled target concentrations and overcoming local target depletion that occurs when homologous probes are spotted in close proximity. Mixing appears to be compatible with most hybridization conditions; however, mix versus no-mix control experiments should be performed. Also covered are a number of microfluidic issues related to manufacturing, filling, mixing, and packaging.

Gains in sensitivity with a device that mixes microarray hybridization solution in a 25-microm-thick chamber.

Un syst&egrave;me d&#39;hybridation de microarray qui permet le m&eacute;lange en quantit&eacute;s comparables &agrave; celles utilis&eacute;es par les lamelles en verre est pr&eacute;sent&eacute;. Ce syst&egrave;me est compos&eacute; d&#39;un couvercle souple jetable qui se lie aux lames de verre de 1 po x 3 po via un joint adh&eacute;sif, formant une chambre l&#39;hybridation microm-25 d&#39;&eacute;paisseur uniforme. Cette chambre s&#39;appuie sur une unit&eacute; de base pour le contr&ocirc;le de la temp&eacute;rature. Le couvercle contient deux boudins pneumatiques qui se m&eacute;langent en permanence le fluide de l&#39;hybridation. M&eacute;lange am&eacute;liore la sensibilit&eacute; d&#39;un typique microarray experiment 2 &agrave; 3 fois. Le m&eacute;lange est particuli&egrave;rement efficace pour sonde tachet&eacute; haute et basse marqu&eacute;e des concentrations cibles et surmonter l&#39;&eacute;puisement local cible qui se produit lorsque les sondes homologues sont rep&eacute;r&eacute;s &agrave; proximit&eacute;. M&eacute;lange semble &ecirc;tre compatible avec la plupart des conditions de l&#39;hybridation ; Toutefois, m&eacute;lange par rapport aux exp&eacute;riences de contr&ocirc;le no-mix doit &ecirc;tre effectu&eacute;e. Sont &eacute;galement couverts les quelques points de la microfluidique li&eacute;es &agrave; la fabrication, remplissage, m&eacute;lange et conditionnement.

Gain en sensibilit&eacute; avec un dispositif qui m&ecirc;le la solution d&#39;hybridation de microarray en chambre microm-25 d&#39;&eacute;paisseur.

Gewinne in der Empfindlichkeit mit einem Ger&#xE4;t, das Microarray Hybridisierungsl&#xF6;sung mischt in einem 25-microm dicken Kammer.

Viene presentato un sistema di ibridazione del microarray che permette il mescolamento in volumi paragonabili a quelli utilizzati da lamelle di vetro. Questo sistema &egrave; composto da un coperchio flessibile monouso che si lega ai vetrini 1 pollici x 3 pollici tramite una guarnizione adesiva, formando una camera di ibridazione 25 microm di spessore uniforme. Questa camera si riposa su un&#39;unit&agrave; di base per il controllo della temperatura. Il coperchio contiene due vesciche pneumatica che mescolano continuamente il fluido di ibridazione. Miscelazione migliora la sensibilit&agrave; da un esperimento microarray tipico 2-3-fold. Miscelazione &egrave; particolarmente efficace a sonda maculato ad alta e bassa etichettati concentrazioni target e superare deplezione di destinazione locale che si verifica quando le sonde omologhe sono avvistate nelle immediate vicinanze. Miscelazione sembra essere compatibile con la maggior parte delle condizioni di ibridazione; Tuttavia, mix versus no-mix-esperimenti di controllo deve essere eseguito. Anche coperti sono un certo numero di microfluidica questioni relative alla produzione, riempimento, miscelazione e confezionamento.

Guadagni in sensibilit&agrave; con un dispositivo che mescola la soluzione di ibridazione di microarray in una camera di 25 microm-spessore.

&#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0; &#x30AC;&#x30E9;&#x30B9; coverslips &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x306B;&#x5339;&#x6575;&#x3059;&#x308B;&#x3067;&#x6DF7;&#x5408;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x4EA4;&#x914D;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x304C;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x5747;&#x4E00; 25 microm &#x539A;&#x4EA4;&#x914D;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x63A5;&#x7740;&#x30AC;&#x30B9;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9; &#x30AC;&#x30E9;&#x30B9; 1 &#x30A4;&#x30F3;&#x30C1; x 3 &#x30A4;&#x30F3;&#x30C1;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x4F7F;&#x3044;&#x6368;&#x3066;&#x306E;&#x67D4;&#x8EDF;&#x306A;&#x84CB;&#x306E;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x6E29;&#x5EA6;&#x5236;&#x5FA1;&#x7528;&#x57FA;&#x672C;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x304B;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3075;&#x305F;&#x4EA4;&#x914D;&#x6D41;&#x4F53;&#x3092;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306B;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7A7A;&#x6C17;&#x99C6;&#x52D5;&#x30D6;&#x30E9;&#x30C0;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x30DF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x5B9F;&#x9A13; 2-3 &#x500D;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6DF7;&#x5408;&#x76EE;&#x6A19;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x76F8;&#x540C;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x8FD1;&#x63A5;&#x3067;&#x6591;&#x70B9;&#x3092;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x514B;&#x670D;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x67AF;&#x6E07;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x4ED8;&#x3044;&#x305F;&#x7279;&#x306B;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B;&#x6591;&#x70B9;&#x3092;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x306E;&#x9AD8;&#x3068;&#x4F4E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6DF7;&#x5408;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x4EA4;&#x914D;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x3068;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x5BFE;&#x3044;&#x3044;&#x3048;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5236;&#x5FA1;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x8986;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x30DF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5305;&#x88C5;&#x306E;&#x88FD;&#x9020;&#x3001;&#x5145;&#x586B;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x554F;&#x984C;&#x306E;&#x6570;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x611F;&#x5EA6;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x4EA4;&#x914D;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; 25 microm &#x539A;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x5185;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3067;&#x5229;&#x76CA;&#x3002;

Microarray &#xAD50; &#xC7A1; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBCFC;&#xB968; &#xC720;&#xB9AC; coverslips&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xBE44;&#xAD50;&#xC5D0; &#xD63C;&#xD569; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC81C;&#xACF5; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC740; &#xC811;&#xCC29; &#xAC00;&#xC2A4; &#xCF13;, &#xAD50; &#xC7A1; 25 microm &#xB450;&#xAED8; &#xADE0;&#xC77C; &#xD55C; &#xCC54;&#xBC84;&#xB97C; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; 1 &#xC778;&#xCE58; x 3 &#xC778;&#xCE58; &#xC720;&#xB9AC; &#xC2AC;&#xB77C;&#xC774;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xC77C;&#xD68C;&#xC6A9; &#xC720;&#xC5F0;&#xD55C; &#xB69C;&#xAED1;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xCC54;&#xBC84; &#xC628;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xB2E8;&#xC704;&#xC5D0; &#xB2EC;&#xB824;&#xC788;&#xB2E4;. &#xB69C;&#xAED1;&#xC5D0;&#xB294; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD50; &#xC7A1; &#xC561;&#xCCB4;&#xB97C; &#xC11E;&#xC5B4; &#xB450; &#xACF5;&#xAE30; &#xAD6C;&#xB3D9; bladders &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD63C;&#xD569; &#xD55C; &#xC804;&#xD615;&#xC801;&#xC778; microarray &#xC2E4;&#xD5D8; 2 3 &#xBC30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xB3C4;&#xB97C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD63C;&#xD569;&#xC740; &#xD2B9;&#xD788; &#xB192;&#xC740; &#xBAA9;&#xACA9;&#xB41C; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xB0AE;&#xC740; &#xB300;&#xC0C1; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xB3D9;&#xC885; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xB294; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC774;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB420; &#xB54C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD558; &#xACE0; &#xB85C;&#xCEEC; &#xB300;&#xC0C1; &#xACE0;&#xAC08;. &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xAD50; &#xC7A1; &#xC870;&#xAC74;;&#xACFC; &#xD638;&#xD658; &#xB418;&#xB3C4;&#xB85D; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD63C;&#xD569; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB178; &#xBBF9;&#xC2A4; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB300; &#xD63C;&#xD569;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C; &#xBBF8;&#xC138; &#xBB38;&#xC81C; &#xC791;&#xC131;, &#xC81C;&#xC870; &#xAD00;&#xB828; &#xD63C;&#xD569;, &#xBC0F; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xC218;&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

25 Microm &#xB450;&#xAED8; &#xCC54;&#xBC84;&#xC5D0; microarray &#xAD50; &#xC7A1; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xD63C;&#xD569; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC640; &#xAC10;&#xB3C4; &#xD5A5;&#xC0C1;.

Se presenta un sistema de hibridaci&oacute;n de microarray que permite mezclar en vol&uacute;menes comparables a los utilizados por cubreobjetos de vidrio. Este sistema se compone de una tapa flexible desechable que se une a laminas de vidrio de 1 pulg. x 3 pulgadas mediante una junta adhesiva, formando una c&aacute;mara de hibridaci&oacute;n de 25-microm de espesor uniforme. Esta c&aacute;mara se basa en una unidad de base para el control de la temperatura. La tapa contiene dos vejigas de aire comprimido que mezclan continuamente el l&iacute;quido de la hibridaci&oacute;n. Mezcla incrementa la sensibilidad de un microarray t&iacute;pico experimento 2-3 veces. Mezcla es particularmente eficaz en el sondeo manchado alto y baja las concentraciones de destino y superaci&oacute;n agotamiento de destino local que se produce cuando las sondas hom&oacute;logas en proximidad cercana. Mezcla parece ser compatible con la mayor&iacute;a de las condiciones de la hibridaci&oacute;n; sin embargo, debe realizarse la mezcla frente a experimentos de control no-mix. Tambi&eacute;n son una serie de microfluidos temas relacionados con la fabricaci&oacute;n, llenado, mezcla y envasado.

Ganancias en sensibilidad con un dispositivo que mezcla la soluci&oacute;n de hibridaci&oacute;n de microarrays en una c&aacute;mara de 25-microm-gruesas.

In adult planarians, the replacement of cells lost to physiological turnover or injury is sustained by the proliferation and differentiation of stem cells known as neoblasts. Neoblast lineage relationships and the molecular changes that take place during differentiation into the appropriate cell types are poorly understood. Here we report the identification and characterization of a cohort of genes specifically expressed in neoblasts and their descendants. We find that genes with severely downregulated expression after irradiation molecularly define at least three discrete subpopulations of cells. Simultaneous BrdU labeling and in situ hybridization experiments in intact and regenerating animals indicate that these cell subpopulations are related by lineage. Our data demonstrate not only the ability to measure and study the in vivo population dynamics of adult stem cells during tissue homeostasis and regeneration, but also the utility of studies in planarians to broadly inform stem cell biology in adult organisms.

Molecular analysis of stem cells and their descendants during cell turnover and regeneration in the planarian Schmidtea mediterranea.

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&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x66F4;&#x66FF;&#x548C;&#x6DA1;&#x866B; Schmidtea &#x5730;&#x4E2D;&#x6D77;&#x5728;&#x518D;&#x751F;&#x671F;&#x95F4;&#x53CA;&#x5176;&#x540E;&#x4EE3;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Dans les adultes Platyhelminthes, le remplacement des cellules perdues au chiffre d&#39;affaires physiologique ou des blessures est soutenu par la prolif&eacute;ration et la diff&eacute;renciation des cellules souches appel&eacute;es n&eacute;oblastes. Relations de lign&eacute;e n&eacute;oblastes et les changements mol&eacute;culaires qui ont lieu au cours de la diff&eacute;renciation dans les types de cellules appropri&eacute;es sont mal compris. Nous rapportons ici l&#39;identification et la caract&eacute;risation d&#39;une cohorte de g&egrave;nes sp&eacute;cifiquement exprim&eacute; dans les n&eacute;oblastes et leurs descendants. Nous trouvons que les g&egrave;nes avec s&eacute;v&egrave;rement r&eacute;prim&eacute;s expression apr&egrave;s irradiation mol&eacute;culairement d&eacute;finissent au moins trois sous-populations discr&egrave;tes des cellules. &Eacute;tiquetage de BrdU simultan&eacute;e et des exp&eacute;riences d&#39;hybridation in situ chez les animaux intacts et r&eacute;g&eacute;n&eacute;rantes indiquent que ces sous-populations de cellules sont reli&eacute;es par la lign&eacute;e. Nos r&eacute;sultats d&eacute;montrent non seulement la capacit&eacute; de mesurer et d&#39;&eacute;tudier la dynamique des populations in vivo de cellules souches adultes au cours de l&#39;hom&eacute;ostasie tissulaire et r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration, mais aussi l&#39;utilit&eacute; des &eacute;tudes en Australie pour informer largement biologie des cellules souches dans les organismes adultes.

Analyse mol&eacute;culaire des cellules souches et leurs descendants pendant le renouvellement cellulaire et la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration dans le planaire Schmidtea mediterranea.

Bei Erwachsenen Planarians ist die Ersetzung der Zellen unterlag physiologische Umsatz oder Verletzungen von Proliferation und Differenzierung von Stammzellen, die als Neoblasts bekannt erlitt. Neoblast &Uuml;bertragungslinie Beziehungen und die molekularen Ver&auml;nderungen, die w&auml;hrend der Differenzierung in den entsprechenden Zelltypen stattfinden werden oft missverstanden. Hier berichten wir die Identifizierung und Charakterisierung von einer Kohorte von Genen, die speziell in Neoblasts und ihre Nachkommen ausgedr&uuml;ckt. Wir finden, dass Gene mit stark Downregulated Ausdruck nach Bestrahlung molekular mindestens drei diskrete Subpopulationen von Zellen definieren. Gleichzeitige BrdU beschriften und in situ Hybridisierung Experimente intakt und regenerierenden Tieren zeigen, dass diese Zelle Unterpopulationen durch Linie verbunden sind. Unsere Daten zeigen: nicht nur zu messen und die in-vivo Populationsdynamik von adulten Stammzellen zu studieren, w&auml;hrend Gewebe Hom&ouml;ostase und Regenerierung, sondern auch das Dienstprogramm Studien in Planarians, Stammzellbiologie in Erwachsenen Organismen weitgehend zu informieren.

Molekulare Analyse von Stammzellen und deren Nachkommen w&auml;hrend Zelle Umsatz und Regeneration in der Planarian Schmidtea Mediterranea.

Nel planarians adulto, la sostituzione delle cellule perduto al fisiologico turnover o lesioni &egrave; sostenuta dalla proliferazione e la differenziazione delle cellule staminali, conosciuto come neoblasts. Neoblast lignaggio relazioni e i cambiamenti molecolari che avvengono durante la differenziazione nei tipi di cella appropriata sono capiti male. Qui riportiamo l&#39;identificazione e la caratterizzazione di una coorte di geni espressi specificamente neoblasts e i loro discendenti. Troviamo che geni con gravemente downregolata espressione dopo irradiazione molecolarmente definiscano almeno tre sottopopolazioni discrete delle cellule. Etichettatura di BrdU simultanea ed esperimenti di ibridazione in situ in animali intatti e rigeneranti indicano che queste sottopopolazioni cellulari sono correlate da lignaggio. I nostri dati dimostrano non solo la capacit&agrave; di misurare e studiare la dinamica della popolazione in vivo delle cellule staminali adulte durante l&#39;omeostasi dei tessuti e rigenerazione, ma anche l&#39;utilit&agrave; degli studi in planarians per informare ampiamente biologia delle cellule staminali in organismi adulti.

Analisi molecolare delle cellule staminali e loro discendenti durante il turnover cellulare e della rigenerazione la Planarium Planarie mediterranea.

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&#xC131;&#xC778; planarians, &#xD655;&#xC0B0; &#xBC0F; neoblasts&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xB9E4;&#xCD9C; &#xC774;&#xB098; &#xBD80;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC190;&#xC2E4; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAD50;&#xCCB4; &#xC720;&#xC9C0;. Neoblast &#xD608;&#xD1B5; &#xAD00;&#xACC4; &#xBC0F; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC744; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC774;&#xD574; &#xD558; &#xACE0;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; neoblasts &#xBC0F; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC790;&#xC190;&#xC5D0; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xCF54; &#xD638;&#xD2B8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC870;&#xC0AC; &#xD6C4; &#xC2EC;&#xAC01; downregulated &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBD84;&#xC790;&#xB85C; &#xC140;&#xC758; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04; &#xC815;&#xC758; &#xCC3E;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xB3D9;&#xC2DC; BrdU &#xB77C;&#xBCA8; &#xBC0F; &#xC190;&#xC0C1;&#xACFC; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC140; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04; &#xD608;&#xD1B5;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xCE21;&#xC815; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131;, &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC131;&#xC778; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC744; &#xB4DC;&#xB9AC;&#xACE0;&#xC790; planarians&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0; &#xC911; &#xC131;&#xCCB4; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; in vivo &#xC778;&#xAD6C; &#xC5ED;&#xD559;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;.

&#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xD68C;&#xC804;&#xC728; &#xBC0F; planarian Schmidtea mediterranea&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD6C4;&#xC190;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xBD84;&#xC11D;.

En planarias adultos, la sustituci&oacute;n de c&eacute;lulas perdido rotaci&oacute;n fisiol&oacute;gica o las lesiones se sustenta en la proliferaci&oacute;n y diferenciaci&oacute;n de c&eacute;lulas madre, conocida como neoblasts. Neoblast linaje relaciones y los cambios moleculares que ocurren durante la diferenciaci&oacute;n en los tipos de c&eacute;lulas apropiadas son poco conocidos. Aqu&iacute; divulgamos la identificaci&oacute;n y caracterizaci&oacute;n de una cohorte de genes expresados espec&iacute;ficamente en neoblasts y sus descendientes. Encontramos que genes con severamente o expresi&oacute;n despu&eacute;s de la irradiaci&oacute;n molecularmente definan al menos tres discretas subpoblaciones de c&eacute;lulas. Etiquetado simult&aacute;nea de BrdU y experimentos de hibridaci&oacute;n in situ en animales intactos y regeneraci&oacute;n indican que estas subpoblaciones celulares est&aacute;n relacionadas por linaje. Nuestros datos demuestran no s&oacute;lo la capacidad de medir y estudiar la din&aacute;mica poblacional en vivo de las c&eacute;lulas madre adultas en la homeostasis del tejido y la regeneraci&oacute;n, sino tambi&eacute;n la utilidad de los estudios en planarias informar ampliamente a Biolog&iacute;a de c&eacute;lulas madre en organismos adultos.

An&aacute;lisis molecular de las c&eacute;lulas madre y sus descendientes durante el recambio celular y la regeneraci&oacute;n en la planaria Schmidtea mediterranea.

&#x6574;&#x4E2A;&#x88C5;&#x8F7D;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4; (&#x5E0C;&#x671B;) &#x662F;&#x7528;&#x4E8E;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x5F3A;&#x5927;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x6A21;&#x5F0F;&#x751F;&#x7269;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86;&#x81EA;&#x5DF1;&#x7279;&#x6709;&#x7684;&#x5B9E;&#x73B0;&#x5F3A;&#x5065;&#x548C;&#x53EF;&#x91CD;&#x73B0;&#x67D3;&#x8272;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51B3;&#x8BAE;&#x4E0E;&#x9762;&#x4E34;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7532;&#x919B;&#x7684;&#x613F;&#x671B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5730;&#x6BD4;&#x8F83;&#x548C;&#x4F18;&#x5316;&#x56FA;&#x5B9A;&#x3001; &#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x9AD8;&#x3001; &#x6742;&#x4EA4;&#x548C;&#x540E;&#x5904;&#x7406;&#x6280;&#x672F;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x6DE1;&#x6C34;&#x6DA1;&#x866B; Schmidtea &#x5730;&#x4E2D;&#x6D77;&#x3002;&#x65B0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7ED9;&#x51FA;&#x5065;&#x58EE;&#x7684;&#x3001; &#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7CBE;&#x7EC6;&#x7684;&#x89E3;&#x5256;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x6807;&#x7B7E;&#x3001; &#x5141;&#x8BB8;&#x4E0E;&#x8367;&#x5149;&#x63A2;&#x9488;&#xFF0C;co-labeling &#x548C;&#x8DB3;&#x591F;&#x654F;&#x611F;&#xFF0C;&#x8981;&#x89E3;&#x51B3; microRNA &#x5728;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x613F;&#x671B;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x91CD;&#x5927;&#x8FDB;&#x5C55;&#xFF0C;&#x5728;&#x5F53;&#x524D;&#x534F;&#x8BAE;&#x6DA1;&#x866B;&#x793E;&#x533A;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x6709;&#x4EF7;&#x503C;&#x7684;&#x8D44;&#x4EA7;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x5E94;&#x5728;&#x5E0C;&#x671B;&#x5728;&#x5176;&#x4ED6;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E2D;&#x627E;&#x5230;&#x9002;&#x7528;&#x6027;&#x5E7F;&#x3002;

&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7EC4;&#x7684;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7532;&#x919B;&#x7684;&#x6574;&#x4E2A;&#x88C5;&#x8F7D;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

Whole-mount in situ hybridization (WISH) is a powerful tool for visualizing gene expression patterns in specific cell and tissue types. Each model organism presents its own unique set of challenges for achieving robust and reproducible staining with cellular resolution. Here, we describe a formaldehyde-based WISH method for the freshwater planarian Schmidtea mediterranea developed by systematically comparing and optimizing techniques for fixation, permeabilization, hybridization, and postprocessing. The new method gives robust, high-resolution labeling in fine anatomical detail, allows co-labeling with fluorescent probes, and is sufficiently sensitive to resolve the expression pattern of a microRNA in planarians. Our WISH methodology not only provides significant advancements over current protocols that make it a valuable asset for the planarian community, but should also find wide applicability in WISH methods used in other systems.

Formaldehyde-based whole-mount in situ hybridization method for planarians.

Entier-Montez l&#39;hybridation in situ (WISH) est un puissant outil de visualisation des profils d&#39;expression g&eacute;nique dans des types sp&eacute;cifiques de cellules et de tissus. Chaque organisme mod&egrave;le pr&eacute;sente son propre ensemble unique de d&eacute;fis pour atteindre une coloration robustes et reproductibles avec r&eacute;solution cellulaire. Nous d&eacute;crivons ici une m&eacute;thode de souhait de formald&eacute;hyde pour la planaire d&#39;eau douce Schmidtea mediterranea d&eacute;velopp&eacute; en comparant syst&eacute;matiquement et en optimisant les techniques de fixation, perm&eacute;abilisation, hybridation et post-traitement. La nouvelle m&eacute;thode donne robuste et &agrave; haute r&eacute;solution d&#39;&eacute;tiquetage dans les moindres d&eacute;tails anatomiques, permet co-labeling avec sondes fluorescentes et est suffisamment sensible pour r&eacute;soudre le mod&egrave;le d&#39;expression d&#39;un micro-ARN en Australie. Notre m&eacute;thodologie de souhait fournit non seulement des progr&egrave;s importants sur les protocoles actuels qui font un atout pr&eacute;cieux pour la communaut&eacute; planaire, mais doivent &eacute;galement trouver large applicabilit&eacute; &agrave; souhait les m&eacute;thodes utilis&eacute;es dans d&#39;autres syst&egrave;mes.

M&eacute;thode de formald&eacute;hyde entier-Montez l&#39;hybridation in situ pour l&#39;Australie.

Ganz-Mount-in situ-Hybridisierung (Wunsch) ist ein leistungsf&auml;higes Werkzeug zur Visualisierung von Genausdruck Muster bei einzelnen Zellen und Gewebe. Jede Modellorganismus pr&auml;sentiert eine eigene einzigartige Reihe von Herausforderungen f&uuml;r stabile und reproduzierbare F&auml;rbung mit zellul&auml;ren Aufl&ouml;sung zu erreichen. Hier beschreiben wir eine Formaldehyd-basierte Wunsch-Methode f&uuml;r das S&uuml;&szlig;wasser Planarian Schmidtea Mediterranea entwickelt, indem systematisch verglichen und Optimierung von Techniken zur Fixierung, Permeabilization, Hybridisierung und Nachbearbeitung. Die neue Methode bietet robuste, hochaufl&ouml;sende Kennzeichnung in feinen anatomischen Details und erm&ouml;glicht co-labeling mit fluoreszierende Sonden ist ausreichend empfindlich die Muster des Ausdrucks der eine MicroRNA in Planarians aufl&ouml;sen. Unsere Wunsch-Methodik bietet nicht nur bedeutende Verbesserungen &uuml;ber aktuelle Protokolle, die machen es ein wertvolles gut f&uuml;r die Gemeinschaft Planarian, sondern sollte auch breite Anwendbarkeit in Wunsch-Methoden, die in anderen Systemen verwendet.

Formaldehyd basierende Gesamtheit-Mount in situ Hybridisierung Methode f&uuml;r Planarians.

Intero-monta l&#39;ibridazione in situ (WISH) &egrave; un potente strumento per visualizzare i modelli di espressione genica in specifici tipi di cellule e tessuti. Ogni organismo modello presenta un proprio set unico di sfide per raggiungere robusto e riproducibile di colorazione con risoluzione cellulare. Qui, descriviamo un metodo desiderio formaldeide-based per l&#39;acqua dolce Planarium Planarie mediterranea sviluppato sistematicamente confrontando e ottimizzazione delle tecniche per la fissazione, permeabilization, ibridazione e postprocessing. Il nuovo metodo d&agrave; robusto, ad alta risoluzione di etichettatura in dettagli anatomici, permette di co-labeling con sonde fluorescenti ed &egrave; sufficientemente sensibile per risolvere il pattern di espressione di un microRNA in planarians. La nostra metodologia di desiderio non solo fornisce significativi avanzamenti negli attuali protocolli che ne fanno uno strumento prezioso per la comunit&agrave; Planarium, ma dovrebbero anche trovare ampia applicabilit&agrave; nel desiderio metodi utilizzati in altri sistemi.

Metodo basato su formaldeide intero-monta ibridazione in situ per planarians.

&#x5168;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8; in situ &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; (WISH) &#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5404;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x751F;&#x7269;&#x306B;&#x72EC;&#x81EA;&#x4E00;&#x610F;&#x5805;&#x7262;&#x304B;&#x3064;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x306E;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3067;&#x67D3;&#x8272;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8AB2;&#x984C;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7684;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x56FA;&#x5B9A;&#x3001;&#x900F;&#x904E;&#x3001;&#x4EA4;&#x914D;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5F8C;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x3067;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x6DE1;&#x6C34;&#x30D7;&#x30E9;&#x30CA;&#x30EA;&#x30A2; Schmidtea &#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30C6;&#x30E9;&#x30CD;&#x30A2; &#x30DB;&#x30EB;&#x30E0;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9; &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9; &#x30A6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; &#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x9AD8;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x306B;&#x7D30;&#x90E8;&#x3092;&#x89E3;&#x5256;&#x5B66;&#x7684;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x86CD;&#x5149;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3092; co-labeling &#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30CA;&#x30EA;&#x30A2; microRNA &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x306F;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x9858;&#x3044;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x30D7;&#x30E9;&#x30CA;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x8CC7;&#x7523;&#x3092;&#x4F5C;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x5E83;&#x3044;&#x9069;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x4ED6;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30A6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; &#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3067;&#x3082;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x4E0A;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x9032;&#x6B69;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D7;&#x30E9;&#x30CA;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E0;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9; &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x5168;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8; in situ &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6CD5;&#x3002;

&#xC804;&#xCCB4; &#xB9C8;&#xC6B4;&#xD2B8; &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; (&#xC18C;&#xC6D0;) &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xC815; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC01; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xACE0; &#xC7AC;&#xD604;&#xD560; &#xC218; &#xC5BC;&#xB8E9; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xACFC;&#xC81C;&#xC758; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xC9D1;&#xD569;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xACE0; &#xACE0;&#xC815;, permeabilization, &#xAD50; &#xC7A1; &#xBC0F; &#xD6C4; &#xCC98;&#xB9AC; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB41C; &#xB2F4; &#xC218; planarian Schmidtea mediterranea&#xB294; &#xD3EC; &#xB984; &#xC54C; &#xB370;&#xD788;&#xB4DC; &#xAE30;&#xBC18; &#xC18C;&#xC6D0; &#xBC29;&#xBC95; &#xC124;&#xBA85;. &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xACE0;, &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xD574; &#xBD80; &#xC138;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB77C;&#xBCA8;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xD615;&#xAD11; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; co-labeling &#xD5C8;&#xC6A9; planarians&#xC5D0;&#xC11C; Microrna&#xC758; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134; &#xD574;&#xACB0; &#xCDA9;&#xBD84;&#xD788; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC18C;&#xC6D0; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; planarian &#xCEE4;&#xBBA4;&#xB2C8;&#xD2F0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADC0;&#xC911; &#xD55C; &#xC790;&#xC0B0;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC18C;&#xC6D0; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC801;&#xC6A9; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xB610;&#xD55C; &#xCC3E;&#xC544;&#xC57C;&#xD55C;&#xB2E4;&#xB294; &#xD604;&#xC7AC; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xBC1C;&#xC804;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xD3EC; &#xB984; &#xC54C; &#xB370;&#xD788;&#xB4DC; &#xAE30;&#xBC18; &#xC804;&#xCCB4; &#xB9C8;&#xC6B4;&#xD2B8; &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xBC29;&#xBC95; planarians.

Conjunto de montaje hibridaci&oacute;n in situ (deseo) es una poderosa herramienta para la visualizaci&oacute;n de patrones de expresi&oacute;n g&eacute;nica en tipos espec&iacute;ficos de c&eacute;lulas y tejidos. Cada organismo modelo presenta su propio conjunto de desaf&iacute;os para lograr coloraci&oacute;n robusta y reproducibles con resoluci&oacute;n celular. Aqu&iacute; se describe un m&eacute;todo de deseo basadas en formaldeh&iacute;do para la planaria de agua dulce Schmidtea mediterranea desarrollado sistem&aacute;ticamente comparando y optimizaci&oacute;n de t&eacute;cnicas de fijaci&oacute;n, permeabilizaci&oacute;n, hibridaci&oacute;n y post-procesamiento. El nuevo m&eacute;todo da robusta, alta resoluci&oacute;n de etiquetado en detalle anat&oacute;mico, permite Co-etiquetado con sondas fluorescentes y es lo suficientemente sensible para resolver el patr&oacute;n de expresi&oacute;n de un microARN en planarias. Nuestra metodolog&iacute;a de deseo no s&oacute;lo ofrece avances significativos sobre los protocolos actuales que hacen un activo valioso para la comunidad de la planaria, pero deben encontrar amplia aplicabilidad en deseo m&eacute;todos utilizados en otros sistemas.

George T. Eisenhoffer

Department of Oncological Sciences,
Huntsman Cancer Institute,
Department of Oncological Sciences, Huntsman Cancer Institute

University of Utah

Live Imaging of Cell Extrusion from the Epidermis of Developing Zebrafish

George T. Eisenhoffer

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Oncological Sciences,Huntsman Cancer Institute,Department of Oncological Sciences, Huntsman Cancer Institute

University of Utah

Live Imaging of Cell Extrusion from the Epidermis of Developing Zebrafish

Department of Oncological Sciences,
Huntsman Cancer Institute,
Department of Oncological Sciences, Huntsman Cancer Institute