Lectin-based Isolation and Culture of Mouse Embryonic Motoneurons

Spinal motoneurons develop towards postmitotic stages through early embryonic nervous system development and subsequently grow out dendrites and axons. ...

Ruhr-University Bochum

&Alpha;-synuclein &#x79EF;&#x7D2F;&#x662F;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x9000;&#x884C;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x5982;&#x5E15;&#x91D1;&#x68EE;&#x75C5;&#x3001; &#x591A;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x840E;&#x7F29;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x3002;&#x5728;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0; C57BL/6 &#x5C0F;&#x9F20; &alpha;-synuclein &#x643A;&#x5E26;&#x7A81;&#x53D8; A53T &#x548C; A30P &#x5728;&#x5E15;&#x91D1;&#x68EE;&#x75C5;&#x4E2D;&#x627E;&#x5230;&#x6216; parkin null &#x80CC;&#x666F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4E25;&#x91CD;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x635F;&#x4F24;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8111;&#x4E2D;&#x66F4;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x5C0F;&#x9F20;&#x884C;&#x4E3A;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x4E25;&#x91CD;&#x8FD0;&#x52A8;&#x969C;&#x788D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x5728;&#x810A;&#x9AD3;&#xFF0C;&#x4F34;&#x968F;&#x7740;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x751F;&#x548C;&#x5C0F;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x67D3;&#x8272;&#x53CA;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x5316;&#x663E;&#x793A;&#x3002;&#x8D85;&#x5FAE;&#x7ED3;&#x6784;&#x5206;&#x6790;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E25;&#x91CD;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x635F;&#x4F24;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x5728;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x5C11;&#x7A81;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#xFF0C;&#x5230;&#x5F88;&#x5C0F;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5728;&#x810A;&#x9AD3;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x6DF1;&#x523B;&#x7684;&#x75C5;&#x7406;&#x3002;

&Alpha;-synuclein &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x810A;&#x9AD3;&#x75C5;&#x7406;&#x3002;

Accumulation of Î±-synuclein is observed in neurodegenerative diseases like Parkinson's disease and Multiple System Atrophy. In previous studies with transgenic C57BL/6 mice overexpressing Î±-synuclein carrying the mutations A53T and A30P found in Parkinson's disease or with a parkin-null background, we reported severe mitochondrial impairments in neurons and to a larger extent in glial cells of the mesencephalon. Neuron death was not observed in the brain. Here we show that the mice show severe motor impairments in behavioral tests. In addition, these mice exhibit astrocytic cell death in the spinal cord, accompanied by extensive gliosis and microglial activation. This is shown by cell death staining and immunohistochemistry. Ultrastructural analyses revealed severe mitochondrial impairments not only in astrocytes, but also in oligodendrocytes and, to a small extent, in neurons. Thus, the transgenic mice show a profound pathology in glial cells of the spinal cord.

Spinal cord pathology in alpha-synuclein transgenic mice.

Accumulation de la synucl&eacute;ine &alpha; est observ&eacute;e dans des maladies neurod&eacute;g&eacute;n&eacute;ratives comme la maladie de Parkinson et d&#39;atrophie. Dans des &eacute;tudes ant&eacute;rieures avec les souris C57BL/6 transg&eacute;niques surexprimant la synucl&eacute;ine &alpha; portant les mutations A53T et A30P dans la maladie de Parkinson, ou sur un fond de parkin null, nous avons rapport&eacute; de graves d&eacute;ficiences mitochondriales dans les neurones et d&#39;une plus importante dans les cellules gliales du m&eacute;senc&eacute;phale. La mort de neurones dans le cerveau n&#39;a pas &eacute;t&eacute; observ&eacute;e. Ici, nous montrons que les souris montrent des graves d&eacute;ficiences moteurs en tests comportementaux. En outre, ces souris pr&eacute;sentent un mort des cellules astrocytaires dans la moelle &eacute;pini&egrave;re, accompagn&eacute;e par activation de gliose et microgliales vaste. Ceci est illustr&eacute; par la coloration de la mort cellulaire et l&#39;immunohistochimie. Analyses ultrastructurales ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; de graves d&eacute;ficiences mitochondriales non seulement dans les astrocytes, mais aussi dans les oligodendrocytes et, dans une moindre mesure, dans les neurones. Ainsi, les souris transg&eacute;niques montrent une pathologie profonde dans les cellules gliales de la moelle &eacute;pini&egrave;re.

Pathologie de la moelle &eacute;pini&egrave;re chez la souris transg&eacute;nique alpha-synucl&eacute;ine.

Akkumulation von &alpha;-Synuclein ist bei neurodegenerativen Erkrankungen wie Morbus Parkinson und Multiple Systematrophie beobachtet. In fr&uuml;heren Studien mit transgenen C57BL/6 M&auml;usen &uuml;berexprimierenden &alpha;-Synuclein mit A53T und A30P gefunden bei Parkinson-Krankheit-Mutationen oder mit einem Parkin-Null-Hintergrund berichteten wir schwere mitochondriale Beeintr&auml;chtigungen in Neuronen und gr&ouml;&szlig;erem Umfang in Gliazellen des dem Zwischenhirn. Neuron Tod wurde nicht im Gehirn beobachtet. Hier zeigen wir, dass die M&auml;use schwere motorische Beeintr&auml;chtigungen in Verhaltens-Tests zeigen. Dar&uuml;ber hinaus zeigen solche M&auml;use astrozytische Zelltod im R&uuml;ckenmark, begleitet von umfangreichen Gliose und Microglial Aktivierung. Dies zeigt Zelle Tod, und Immunhistochemie. Ultrastrukturelle Analyse ergab schwere mitochondriale Beeintr&auml;chtigungen nicht nur in Astrozyten, sondern auch in Oligodendrozyten und, in geringem Umfang, in Neuronen. So zeigen die transgenen M&auml;usen eine profunde Pathologie in Gliazellen des R&uuml;ckenmarks.

R&uuml;ckenmark Pathologie in Alpha-Synuclein transgenen M&auml;usen.

Accumulo di &alpha;-synuclein &egrave; osservata in malattie neurodegenerative come il morbo di Parkinson ed atrofia multisistemica. In precedenti studi con topi C57BL/6 con sovraesprimono relativa &alpha;-synuclein che trasportano le mutazioni A53T e A30P trovato nel morbo di Parkinson o con uno sfondo di parkin-null, abbiamo riportato gravi menomazioni mitocondriale nei neuroni e, in misura maggiore nelle cellule gliali del mesencefalo. Neurone la morte non &egrave; stata osservata nel cervello. Qui dimostriamo che i topi mostrano gravi motorie nei test comportamentali. Inoltre, questi topi mostrano morte astrocitari delle cellule del midollo spinale, accompagnata da ampia attivazione gliosi e microglia. Ci&ograve; &egrave; dimostrato dalla colorazione di cellule morte e immunoistochimica. Analisi ultrastrutturale ha rivelato gravi menomazioni mitocondriale non solo negli astrociti, ma anche negli oligodendrociti e, in piccola misura, nei neuroni. Cos&igrave;, i topi transgenici mostrano una patologia profonda nelle cellule gliali del midollo spinale.

Patologia del midollo spinale di topi transgenici alfa-sinucleina.

&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30BD;&#x30F3;&#x75C5;&#x3068;&#x591A;&#x7CFB;&#x7D71;&#x840E;&#x7E2E;&#x75C7;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; &alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&Alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3; A53T &#x3068;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30BD;&#x30F3;&#x75C5;&#x306E; A30P &#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x904E;&#x5270;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; c57bl/6 &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3; null &#x80CC;&#x666F;&#x306E;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x969C;&#x5BB3;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x4E2D;&#x8133;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x6B7B;&#x306E;&#x8133;&#x306F;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304C;&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x969C;&#x5BB3;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x884C;&#x52D5;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x81A0;&#x75C7;&#x3068;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x810A;&#x9AC4;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x6B7B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x67D3;&#x8272;&#x3084;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5FAE;&#x7D30;&#x69CB;&#x9020;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x969C;&#x5BB3;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3001;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x3082;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x810A;&#x9AC4;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6DF1;&#x9060;&#x306A;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&Alpha;-&#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x810A;&#x9AC4;&#x75C5;&#x5909;&#x3002;

&Alpha;-synuclein&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC740; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC704;&#xCD95; &#xC99D;&#xACFC; &#xD30C; &#xD0A8; &#xC2A8; &#xBCD1; &#xAC19;&#xC740; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD1F4;&#xD589; &#xC131; &#xC9C8;&#xD658;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &alpha;-synuclein A53T &#xBC0F; A30P &#xD30C; &#xD0A8; &#xC2A8; &#xBCD1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC6B4;&#xBC18; overexpressing &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; C57BL/6 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB610;&#xB294; null&#xC774; parkin &#xBC30;&#xACBD;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC2EC;&#xD55C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xC7A5;&#xC560; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640;&#xB294; mesencephalon&#xC758; glial &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB354; &#xD070; &#xC815;&#xB3C4;. &#xC2E0;&#xACBD; &#xC8FD;&#xC74C; &#xD558;&#xC9C0; &#xB450;&#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC950; &#xD589;&#xB3D9; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC2EC;&#xD55C; &#xBAA8;&#xD130; &#xC7A5;&#xC560; &#xD45C;&#xC2DC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC950; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; gliosis &#xBC0F; microglial &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xCC99;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; astrocytic &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC;. &#xC774; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xC5BC;&#xB8E9;&#xC774; &#xC9C0; &#xACE0; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ultrastructural &#xBD84;&#xC11D; &#xBC1D;&#xD600; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xC7A5;&#xC560; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC774;&#xB2E4;, &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB610;&#xD55C; oligodendrocytes&#xC5D0; &#xACE0;, &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xC740; &#xC815;&#xB3C4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC950; &#xCC99;&#xC218;&#xC758; glial &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xAE4A;&#xC740; &#xBCD1; &#xB9AC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC54C;&#xD30C; synuclein &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC99;&#xC218; &#xBCD1; &#xB9AC;.

Acumulaci&oacute;n de &alpha;-sinucle&iacute;na se observa en enfermedades neurodegenerativas como la enfermedad de Parkinson y la atrofia multisist&eacute;mica. En estudios previos con ratones C57BL/6 transg&eacute;nicos overexpressing &alpha;-sinucle&iacute;na que portan mutaciones de A53T y A30P en la enfermedad de Parkinson o con un fondo de parkin nulo, reportamos severas deficiencias mitocondriales en las neuronas y en mayor medida en las c&eacute;lulas gliales del mesenc&eacute;falo. No se observ&oacute; la muerte de neuronas en el cerebro. Aqu&iacute; mostramos que los ratones presentan graves deficiencias motoras en pruebas de comportamiento. Adem&aacute;s, estos ratones exhiben muerte astroc&iacute;ticos celular en la m&eacute;dula espinal, acompa&ntilde;ada por la activaci&oacute;n microglial y el gliosis extensa. Esto queda demostrado por la tinci&oacute;n de muerte celular e inmunohistoqu&iacute;mica. An&aacute;lisis ultraestructurales revelaron graves deficiencias mitocondriales no s&oacute;lo en los astrocitos, pero tambi&eacute;n en oligodendrocitos y, en peque&ntilde;a medida, en las neuronas. As&iacute;, los ratones transg&eacute;nicos muestran una patolog&iacute;a profunda en c&eacute;lulas gliales de la m&eacute;dula espinal.

Patolog&iacute;a de la m&eacute;dula espinal en ratones transg&eacute;nicos de la alfa-sinucle&iacute;na.

&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x4E0E;&#x5E15;&#x91D1;&#x68EE;&#x75C5; (PD) &#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x75C5;&#x7406;&#x3002;&#x73B0;&#x5728;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E25;&#x91CD;&#x643A;&#x5E26; parkin (PaKO) &#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x5730;&#x7684;&#x5220;&#x9664;&#x6216;&#x8D85;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x53CC;&#x91CD;&#x7A81;&#x53D8;&#x4EBA;&#x7C7B; &alpha;-synuclein (pps &#x89C4;&#x5212;&#x670D;&#x52A1;&#xFF09; &#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8111;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x635F;&#x4F24;&#x3002;&#x53F7;&#x7801;&#x4E0E;&#x6539;&#x53D8;&#x5F62;&#x6001;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x76F8;&#x5173;&#xFF0C;&#x4F46;&#x59CB;&#x7EC8;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x635F;&#x4F24;&#x4E5F;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4E2D;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x643A;&#x5E26;&#x7A81;&#x53D8; pps &#x89C4;&#x5212;&#x670D;&#x52A1;&#x7531;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7F9F;&#x5316;&#x9176;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x663E;&#x793A;&#x76F8;&#x90BB;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5F3A;&#x70C8;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; pps &#x89C4;&#x5212;&#x670D;&#x52A1;&#x4E2D;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8001;&#x9F20;&#x3002;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x65E2;&#x4E0D;&#x663E;&#x793A;&#x4E5F;&#x589E;&#x5F3A; pps &#x89C4;&#x5212;&#x670D;&#x52A1;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0D;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x635F;&#x4F24;&#x3002;&#x8015;&#x5730;&#x4E2D;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE;&#x65B0;&#x751F;&#x513F;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x663E;&#x793A;&#x5404;&#x79CD;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5F62;&#x6001;&#x5B66;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#xFF0C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; Ca(2+) &#x5B58;&#x50A8;&#x5BB9;&#x91CF;&#x662F;&#x4ECE; PaKO &#x51CF;&#x5C11; pps &#x89C4;&#x5212;&#x670D;&#x52A1;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x661F;&#x5F62;&#x4E2D;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#xFF0C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D; pten &#x57FA;&#x56E0;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6307;&#x8BA4;&#x6FC0;&#x9176;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x662F;&#x4E00;&#x589E;&#x52A0; pps &#x89C4;&#x5212;&#x670D;&#x52A1;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5728; PaKO &#x7684;&#x8D85;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x8FD9;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5176;&#x4ED6;&#x76F8;&#x5173;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5B83;&#x53CD;&#x5E94;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E09;&#xFF0C;&#x65BD;&#x52A0;&#x63A7;&#x5236;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x523A;&#x6FC0;&#x76AE;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4ECE;&#x5065;&#x5EB7;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5236;&#x5B9A;&#x8F83;&#x957F;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x548C;&#x8F83;&#x5927;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5730;&#x533A;&#xFF0C;&#x5F71;&#x54CD;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x83CC;&#x7FA4;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8111;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x663E;&#x793A;&#x5F62;&#x6001;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x53CD;&#x6620;&#x4E86;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x80FD;&#x5728; PD &#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x3002;

&#x5E15;&#x91D1;&#x68EE;&#x75C5;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x5728;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x4E25;&#x91CD;&#x7684;&#x75C5;&#x7406;&#x3002;

We recently described mitochondrial pathology in neurons of transgenic mice with genes associated with Parkinson's disease (PD). Now we describe severe mitochondrial damage in glial cells of the mesencephalon in mice carrying a targeted deletion of parkin (PaKO) or overexpressing doubly mutated human alpha-synuclein (asyn). The number of mitochondria with altered morphology in glial cells is cell type-dependent, but always higher than in neurons. Interestingly, mitochondrial damage also occurs in mesencephalic glia of mice carrying mutated asyn controlled by the tyrosine hydroxylase promoter. Such mice do not show glial expression of the transgene, but show expression in neighboring neurons. However, we found strong overexpression of endogenous asyn in mesencephalic astrocytes from these mice. Cortical astrocytes neither display enhanced asyn expression nor mitochondrial damage. Cultivated mesencephalic astrocytes from newborn transgenic mice display various functional defects along with the morphological damage of mitochondria. First, the mitochondrial Ca(2+)-storage capacity is reduced in asyn transgenic mesencephalic astrocytes, but not in astrocytes from PaKO. Second, the expression of the mitochondrial protein PTEN-induced putative kinase is constitutively increased in asyn transgenic mice, while in PaKO it reacts to oxidative stress by overexpressing this protein along with other mitochondria-related proteins. Third, the neurotrophic effects exerted by control astrocytes, stimulating cortical neurons from healthy mice to develop longer processes and larger neuronal areas, are lacking in co-cultures with transgenic mesencephalic astrocytes. In summary, glial mitochondria from transgenic mice display morphological and functional alterations. Such transgenic astrocytes fail to influence neuronal differentiation, reflecting an important role that glia may play in PD pathogenesis.

Genetic mouse models for Parkinson's disease display severe pathology in glial cell mitochondria.

Nous avons r&eacute;cemment d&eacute;crit pathologie mitochondriale dans les neurones des souris transg&eacute;niques dont les g&egrave;nes associ&eacute;s &agrave; la maladie de Parkinson (MP). Maintenant, nous d&eacute;crivons des dommages graves de mitochondries dans les cellules gliales du m&eacute;senc&eacute;phale chez les souris portant une suppression cibl&eacute;e de parkin (PaKO) ou surexprimant doublement mut&eacute; humaine alpha-synucl&eacute;ine (asynchrone). Le nombre de mitochondries avec morphologie alt&eacute;r&eacute;e dans les cellules gliales est cellulaire d&eacute;pendant du type, mais toujours plus &eacute;lev&eacute; que dans les neurones. Fait int&eacute;ressant, mitochondrial dommage se produit &eacute;galement dans glia m&eacute;senc&eacute;phalique de souris transportant mut&eacute; asynchrone contr&ocirc;l&eacute;e par la tyrosine hydroxylase promoteur. Ces souris ne montrent pas de gliale expression du transg&egrave;ne, mais montrent l&#39;expression dans les neurones voisins. Cependant, nous avons trouv&eacute; forte surexpression d&#39;asynchrone endog&egrave;ne dans les astrocytes m&eacute;senc&eacute;phaliques de ces souris. Les astrocytes corticaux affichent ni expression asynchrone am&eacute;lior&eacute;e ni dommages mitochondrial. Les astrocytes m&eacute;senc&eacute;phaliques cultiv&eacute;s de souris transg&eacute;niques nouveau-n&eacute;es affichent divers d&eacute;fauts fonctionnels ainsi que les dommages morphologiques des mitochondries. Tout d&#39;abord, la capacit&eacute; de stockage Ca(2+) mitochondriale est r&eacute;duite dans les astrocytes m&eacute;senc&eacute;phalique transg&eacute;niques asynchrone, mais pas dans les astrocytes de PaKO. Deuxi&egrave;mement, l&#39;expression de la prot&eacute;ine mitochondriale induite par le g&egrave;ne PTEN putatif kinase constitutivement augmente chez les souris transg&eacute;niques asynchrone, tandis que dans PaKO, il r&eacute;agit au stress oxydatif en surexprimant cette prot&eacute;ine ainsi que d&#39;autres prot&eacute;ines li&eacute;es &agrave; la mitochondrie. Troisi&egrave;mement, les effets neurotrophiques exerc&eacute;es par les astrocytes contr&ocirc;le, stimulant des neurones corticaux des souris saine pour d&eacute;velopper des processus plus longs et plus vastes zones neuronales, manquent de co-cultures avec les astrocytes m&eacute;senc&eacute;phaliques transg&eacute;niques. En r&eacute;sum&eacute;, les mitochondries gliales des souris transg&eacute;niques affichent alt&eacute;rations morphologiques et fonctionnelles. Ces astrocytes transg&eacute;niques en cas d&#39;&eacute;chec &agrave; influencer la diff&eacute;renciation neuronale, refl&eacute;tant un r&ocirc;le important cette glie peut jouer dans la pathogen&egrave;se de PD.

Des mod&egrave;les de souris g&eacute;n&eacute;tique pour la maladie de Parkinson affichent une pathologie s&eacute;v&egrave;re dans les mitochondries des cellules gliales.

K&uuml;rzlich beschrieben wir mitochondriale Pathologie in Neuronen des transgenen M&auml;usen mit Genen, die Parkinson-Krankheit (PD) zugeordnet. Nun beschreiben wir schwere mitochondriale Sch&auml;den in Gliazellen des Zwischenhirn in M&auml;use tragen das gezieltes L&ouml;schen von Parkin (PaKO) oder &uuml;berexprimierenden doppelt mutierten menschlichen Alpha-Synuclein (Asyn). Die Zahl ist der Mitochondrien mit ver&auml;nderten Morphologie in Gliazellen Zelle typabh&auml;ngig, aber immer h&ouml;her als in den Neuronen. Interessanterweise tritt mitochondriale Sch&auml;den auch in selten Glia M&auml;use tragen mutierte Asyn von der Tyrosin-Hydroxylase-Promoter gesteuert. Solche M&auml;use Gliazellen Ausdruck der Transgene nicht anzeigen, sondern Ausdruck in benachbarte Neuronen zeigen. Allerdings fanden wir eine starke &Uuml;berexpression von endogenen Asyn im Aquaeductus Astrozyten von diesen M&auml;usen. Kortikale Astrozyten zeigen weder verbesserte Asyn Ausdruck noch mitochondriale Sch&auml;den. Kultivierte Aquaeductus Astrozyten aus Neugeborenen transgenen M&auml;usen zeigen verschiedene Funktionsst&ouml;rungen zusammen mit der morphologischen Sch&auml;den der Mitochondrien. Zun&auml;chst wird die mitochondriale Ca(2+)-Speicherkapazit&auml;t von PaKO in Asyn transgene Aquaeductus Astrozyten, aber nicht in Astrozyten reduziert. Zweitens ist der Ausdruck der mitochondrialen Protein PTEN-induzierte mutma&szlig;lichen Kinase konstitutiv in Asyn transgene M&auml;use, zugenommen, w&auml;hrend in PaKO es auf oxidativen Stress reagiert durch &uuml;berexprimierenden dieses Protein zusammen mit anderen Mitochondrien-&auml;hnliche Proteine. Drittens ist die neurotrophe Effekte ausge&uuml;bt durch Kontrolle Astrozyten, anregende kortikale Neuronen von gesunden M&auml;usen Entwicklung l&auml;ngere Prozesse und gr&ouml;&szlig;ere neuronalen Bereiche, Co-cultures mit transgenen Aquaeductus Astrozyten unzureichend. Zusammenfassend zeigen die Gliazellen Mitochondrien von transgenen M&auml;usen morphologische und funktionelle Ver&auml;nderungen. Solche transgenen Astrozyten scheitern, neuronale Differenzierung, reflektieren eine wichtige Rolle, dass Glia beeinflussen kann in PD Pathogenese spielen.

Genetischer Mausmodelle f&uuml;r Morbus Parkinson zeigen schwere Pathologie in Gliazelle Mitochondrien.

Abbiamo recentemente descritto patologia mitocondriale nei neuroni di topi transgenici con geni associati alla malattia di Parkinson (MdP). Ora descriviamo il grave danno mitocondriale nelle cellule gliali del mesencefalo nei topi che trasportano un&#39;eliminazione mirata di parkin (PaKO) o con sovraesprimono relativa doppiamente umano alfa-synuclein mutato (asyn). Il numero di mitocondri con morfologia alterata in cellule gliali &egrave; cella dipendente dal tipo, ma sempre superiore nei neuroni. &Egrave; interessante notare che, danno mitocondriale si verifica anche in Itaglia mesencefaliche di topi portatori mutato asyn controllato dal promotore tirosina idrossilasi. Questi topi non mostrano gliali espressione del transgene, ma mostrano espressione nei neuroni vicini. Tuttavia, abbiamo trovato forte sovraespressione di asyn endogena negli astrociti mesencefaliche da questi topi. Astrociti corticali visualizzano n&eacute; asyn avanzata espressione n&eacute; danno mitocondriale. Gli astrociti mesencefaliche coltivati da neonato topi transgenici visualizzano vari difetti funzionali insieme con il danno morfologico dei mitocondri. In primo luogo, la capacit&agrave; di archiviazione Ca(2+) mitocondriale &egrave; ridotto in asyn transgenici mesencefaliche astrociti, ma non negli astrociti da PaKO. In secondo luogo, l&#39;espressione della proteina mitocondriale indotta da PTEN putativo chinasi di costitutivamente &egrave; aumentato in topi transgenici asyn, mentre in PaKO reagisce a stress ossidativo da con sovraesprimono relativa questa proteina insieme ad altre proteine correlate mitocondri. In terzo luogo, gli effetti neurotrofici esercitati da astrociti controllo, stimolando i neuroni corticali da topi sani di sviluppare processi pi&ugrave; lunghi e pi&ugrave; grandi aree neuronali, sono privi di co-cultures con gli astrociti mesencefaliche transgenici. In sintesi, i mitocondri gliali da topi transgenici visualizzano alterazioni morfologiche e funzionali. Tali astrociti transgenici non riescono a influenzare la differenziazione neuronale, riflettendo un ruolo importante che glia pu&ograve; svolgere nella patogenesi del PD.

Modelli di mouse genetico per la malattia di Parkinson visualizzare patologia grave nei mitocondri delle cellule gliali.

&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30BD;&#x30F3;&#x75C5; (PD) &#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x6700;&#x8FD1;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3002;&#x4ECA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3; (&#x30A2;&#x30AD;&#x30DB;) &#x306E;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x524A;&#x9664;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x304B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4E8C;&#x91CD;&#x5909;&#x7570;&#x30D2;&#x30C8; &alpha; &#x30B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3; (&#x975E;&#x540C;&#x671F;) &#x904E;&#x5270;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x4E2D;&#x8133;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x88AB;&#x5BB3;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x756A;&#x53F7;&#x5909;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x5F62;&#x614B;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3067;&#x5E38;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x3082;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x6C34;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x904B;&#x3076;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x4E2D;&#x8133;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;transgene &#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x5F0F;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x8FD1;&#x96A3;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5F0F;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x304B;&#x3089;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x4E2D;&#x8133;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x306E;&#x5F37;&#x3044;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x76AE;&#x8CEA;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306F;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x3082;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x5F0F;&#x3067;&#x3082;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; &#x30FB; &#x30C0;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x683D;&#x57F9;&#x306E;&#x4E2D;&#x8133;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x65B0;&#x751F;&#x5150;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x640D;&#x50B7;&#x3068;&#x5171;&#x306B;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305A;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E; Ca(2+) &#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B8;&#x5BB9;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x4E2D;&#x8133;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306F; PaKO &#x304B;&#x3089;&#x524A;&#x6E1B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30AD;&#x30DB;&#x3067;&#x305D;&#x308C;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x5171;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; PTEN &#x8A98;&#x8D77;&#x63A8;&#x5B9A;&#x306E;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x975E;&#x540C;&#x671F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x6052;&#x5E38;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E09;&#x306B;&#x3001;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x9577;&#x3044;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x76AE;&#x8CEA;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x306F;&#x305F;&#x3089;&#x304D;&#x304B;&#x3051;&#x795E;&#x7D4C;&#x6804;&#x990A;&#x52B9;&#x679C;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x4E2D;&#x8133;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;&#x7CFB;&#x3067;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8981;&#x7D04;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2; &#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x5F62;&#x614B;&#x3084;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x5931;&#x6557; PD &#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x518D;&#x751F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D1;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30BD;&#x30F3;&#x75C5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x91CD;&#x5EA6;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x3067;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCD5C;&#xADFC; &#xD30C; &#xD0A8; &#xC2A8; &#xBCD1; (PD)&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC950;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xBCD1; &#xB9AC;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C0;&#xAE08; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xC190;&#xC0C1; glial &#xC138;&#xD3EC; &#xC950; &#xB4E4;&#xACE0; parkin (PaKO)&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xC0AD;&#xC81C; &#xB610;&#xB294; &#xC774;&#xC911; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC778;&#xAC04; &#xC54C;&#xD30C;-synuclein (asyn) overexpressing mesencephalon&#xC758; &#xC124;&#xBA85;. &#xC22B;&#xC790; glial &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xD615;&#xD0DC;&#xC640; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC758;&#xC740; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD56D;&#xC0C1; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC774;&#xC0C1;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xC190;&#xC0C1; &#xC950; &#xB4E4;&#xACE0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; asyn &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; hydroxylase &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; mesencephalic &#xBA85;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB294; transgene&#xC758; &#xAD50; &#xC2DD; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC2DD; &#xC778;&#xC811; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; mesencephalic &#xC774;&#xB2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD; asyn&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; overexpression &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; asyn &#xC2DD;&#xACFC; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC544; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xBC30; mesencephalic &#xC774;&#xB2E4; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xD53C;&#xD574; &#xD568;&#xAED8; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC624;&#xB958;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCAB;&#xC9F8;, &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; Ca(2+) &#xC800;&#xC7A5; &#xC6A9;&#xB7C9; Pako&#xC5D0;&#xC11C; asyn &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; mesencephalic &#xC774;&#xB2E4;, &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC774;&#xB2E4; &#xAC10;&#xC18C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB458;&#xC9F8;, asyn &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; PTEN &#xC720;&#xB3C4; &#xC0C1; &#xB2C8; &#xC2DD; &#xC99D;&#xAC00; constitutively Pako&#xC5D0; &#xADF8;&#xAC83; overexpressing &#xD568;&#xAED8; &#xB2E4;&#xB978; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBC18;&#xC751; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. &#xC14B;&#xC9F8;, &#xC81C;&#xC5B4; &#xC774;&#xB2E4;, &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC640; &#xD070; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC790;&#xADF9; &#xD558; &#xC5EC;&#xAC00; &#xD574;&#xC9C0; &#x79D1; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC640; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; mesencephalic &#xC774;&#xB2E4; co-cultures &#xBD80;&#xC871;. &#xC694;&#xC57D; &#xD558;&#xC790;&#xBA74;, &#xAD50; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xD0DC;&#xC18C;&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD45C;&#xC2DC;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8; &#xBA85;&#xACFC; &#xBC18;&#xC601; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xAC19;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC774;&#xB2E4; &#xC2E4;&#xD328; PD pathogenesis&#xC5D0; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD30C; &#xD0A8; &#xC2A8; &#xBCD1;&#xC758; &#xC720;&#xC804; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378; glial &#xC138;&#xD3EC; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC5D0; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xBCD1; &#xB9AC;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hemos descrito recientemente patolog&iacute;a mitocondrial en las neuronas de ratones transg&eacute;nicos con genes asociados con la enfermedad de Parkinson (EP). Ahora describimos severo da&ntilde;o mitocondrial en c&eacute;lulas gliales del mesenc&eacute;falo en ratones con una eliminaci&oacute;n dirigida de parkin (PaKO) o overexpressing doblemente mutado humana alfa-sinucle&iacute;na (vinagre). El n&uacute;mero de mitocondrias con morfolog&iacute;a alterada en c&eacute;lulas gliales es c&eacute;lula depende del tipo, pero siempre m&aacute;s alto que en las neuronas. Curiosamente, el da&ntilde;o mitocondrial tambi&eacute;n ocurre en glia mesencef&aacute;lica de ratones portando mutado asyn controlado por el promotor de tirosina hidroxilasa. Estos ratones no muestran glial expresi&oacute;n del transg&eacute;n, pero muestran la expresi&oacute;n en las neuronas vecinas. Sin embargo, encontramos fuerte sobreexpresi&oacute;n de asyn end&oacute;gena en astrocitos mesencef&aacute;licas de estos ratones. Astrocitos corticales ni Mostrar asyn mayor expresi&oacute;n ni da&ntilde;o mitocondrial. Astrocitos cultivados mesencef&aacute;licas de ratones transg&eacute;nicos reci&eacute;n Mostrar varios defectos funcionales junto con los da&ntilde;os morfol&oacute;gicos de las mitocondrias. En primer lugar, la capacidad de almacenamiento de Ca(2+) mitocondrial se reduce en asyn transg&eacute;nicos mesencef&aacute;lico astrocitos, pero no en astrocitos de PaKO. En segundo lugar, la expresi&oacute;n de la prote&iacute;na mitocondrial inducida por PTEN putativos quinasa constitutivamente aumenta en ratones transg&eacute;nicos asyn, mientras en PaKO reacciona al estr&eacute;s oxidativo por overexpressing esta prote&iacute;na junto con otras prote&iacute;nas relacionadas con las mitocondrias. En tercer lugar, los efectos neurotr&oacute;ficos ejercidos por astrocitos control, estimulando las neuronas corticales de ratones sanos para desarrollar procesos m&aacute;s largos y m&aacute;s grandes &aacute;reas neuronales, carecen de co-cultivos con transg&eacute;nicos astrocitos mesencef&aacute;licas. En Resumen, las mitocondrias gliales de ratones transg&eacute;nicos Mostrar alteraciones morfol&oacute;gicas y funcionales. Tal astrocitos transg&eacute;nicos no influyen en la diferenciaci&oacute;n neuronal, reflejando un importante papel glia puede desempe&ntilde;ar en la patogenesia de PD.

Modelos de rat&oacute;n gen&eacute;tica para la enfermedad de Parkinson mostrar&aacute;n patolog&iacute;a severa en la mitocondria de la c&eacute;lula glial.

Teresa Sczepan

Institute for Cellmorphology and molecular Neurobiology,
Group for Cellbiology,
Institute for Cellmorphology and molecular Neurobiology, Group for Cellbiology

Ruhr-University Bochum

Lectin-based Isolation and Culture of Mouse Embryonic Motoneurons

Teresa Sczepan

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Ruhr-University Bochum

Lectin-based Isolation and Culture of Mouse Embryonic Motoneurons

Institute for Cellmorphology and molecular Neurobiology,
Group for Cellbiology,
Institute for Cellmorphology and molecular Neurobiology, Group for Cellbiology