drosophila-larval-nmj-immunohistochemistry

<em>Drosophila</em> Larval NMJ Immunohistochemistry

The Drosophila neuromuscular junction (NMJ) is an established model system used for the study of synaptic development and plasticity. The widespread use ...

Columbia University College of Physicians and Surgeons

&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x9999;&#x70DF;&#x70DF;&#x96FE;&#x957F;&#x6302;&#x94A9;&#x764C;&#x53D8;&#xFF0C;&#x4F46;&#x91CD;&#x70B9;&#x5DF2;&#x653E;&#x5728;&#x70DF;&#x6C14;&#x4E2D;&#x7684;&#x81F4;&#x764C;&#x7269;&#x8D28;&#x6240;&#x9020;&#x6210;&#x7684; DNA &#x5E8F;&#x5217;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x53D1;&#x6325;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x9999;&#x70DF;&#x70DF;&#x96FE;&#x66B4;&#x9732;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7578;&#x53D8;&#x4F5C;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x9999;&#x70DF;&#x70DF;&#x96FE;&#x51DD; (CSC) &#x8BF1;&#x5BFC;&#x540E;&#x671F;&#x6865;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5728;&#x77ED;&#x65F6;&#x95F4;&#x5185;&#x5BFC;&#x81F4;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x4E0D;&#x5E73;&#x8861;&#x3002;&#x968F;&#x7740;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x63A8;&#x79FB;&#xFF0C;&#x964D;&#x4F4E;&#x4E86;&#x6574;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4E2D;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6865;&#x6881;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x4E0B;&#x964D;&#x662F;&#x4E0D;&#x4F9D;&#x8D56; p53 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; CSC &#x5728;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684; DNA &#x8BF1;&#x5BFC; DNA &#x53CC;&#x7EDE;&#x7684;&#x65AD; &#xFF08;DSBs&#xFF09;&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27; (ROS) &#x7269;&#x79CD;&#x6E05;&#x9053;&#x592B;&#xFF0C;2&#39; &#x8131;&#x6C27; 5&#39;-&#x78F7;&#x9178; &#xFF08;dGMP&#xFF09; &#x53EF;&#x4EE5;&#x9632;&#x6B62; CSC &#x8BF1;&#x5BFC; DSBs&#x3001; &#x540E;&#x671F;&#x6865;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x4E0D;&#x5E73;&#x8861;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; CSC &#x8BF1;&#x4F7F;&#x6865;&#x6881;&#x548C;&#x901A;&#x8FC7; DNA DSBs &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E0D;&#x5E73;&#x8861;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5230;&#x6587;&#x5316;&#x7684; CSC &#x7684;&#x91CF;&#x8FDC;&#x4F4E;&#x4E8E;&#x5355;&#x4E2A;&#x9999;&#x70DF;&#x63D0;&#x53D6;&#x7269;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x5373;&#x4FBF;&#x662F;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x5377;&#x70DF;&#x70DF;&#x6C14;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x8F6C;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x57F9;&#x517B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x5BAA;&#x6CD5;&#x4E2D;&#x3002;

&#x9999;&#x70DF;&#x70DF;&#x96FE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x540E;&#x671F;&#x6865;&#x548C;&#x6B63;&#x5E38;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E0D;&#x5E73;&#x8861;&#x3002;

Exposure to cigarette smoke has long been linked to carcinogenesis, but the emphasis has been placed on mutational changes in the DNA sequence caused by the carcinogens in smoke. Here, we report an additional role for cigarette smoke exposure in contributing to chromosomal aberrations in cells. We have found that cigarette smoke condensate (CSC) induces anaphase bridges in cultured human cells, which in a short time lead to genomic imbalances. The frequency of the induced bridges within the entire population decreases with time, and this decrease is not dependent upon the p53-mediated apoptotic pathway. Additionally, we show that CSC induces DNA double stranded breaks (DSBs) in cultured cells and purified DNA. The reactive oxygen species (ROS) scavenger, 2' deoxyguanosine 5'-monophosphate (dGMP) prevents CSC-induced DSBs, anaphase bridge formation and genomic imbalances. Therefore, we propose that CSC induces bridges and genomic imbalances via DNA DSBs. Furthermore, since the amount of CSC added to the cultures was substantially less than that extracted from a single cigarette, our results show that even low levels of cigarette smoke can cause irreversible changes in the chromosomal constitution of cultured cells.

Cigarette smoke induces anaphase bridges and genomic imbalances in normal cells.

L&#39;exposition &agrave; la fum&eacute;e de cigarette a longtemps &eacute;t&eacute; li&eacute;e &agrave; carcinogen&egrave;se, mais l&#39;accent a &eacute;t&eacute; mis sur changements mutations dans la s&eacute;quence de l&#39;ADN caus&eacute;es par les substances canc&eacute;rig&egrave;nes dans la fum&eacute;e. Nous rapportons ici un r&ocirc;le suppl&eacute;mentaire pour l&#39;exposition de la fum&eacute;e de cigarette en contribuant &agrave; des aberrations chromosomiques dans les cellules. Nous avons trouv&eacute; que ce condensat de fum&eacute;e de cigarette (CSC) induit des ponts de l&#39;anaphase dans des cellules humaines cultiv&eacute;es, qui, en peu de temps, conduire &agrave; des d&eacute;s&eacute;quilibres g&eacute;nomiques. La fr&eacute;quence des ponts induites dans l&#39;ensemble de la population diminue avec le temps, et cette diminution n&#39;est pas d&eacute;pendante de la voie apoptotique m&eacute;di&eacute;e par la p53. En outre, nous montrons que SCC induit l&#39;ADN doubles brin pauses (DSBs) dans des cellules et l&#39;ADN purifi&eacute;. Le pi&egrave;ge de r&eacute;actives de l&#39;oxyg&egrave;ne (DRO), d&eacute;soxyguanosine 2&#39; 5&#39;-monophosphate (DGPM) emp&ecirc;che DSBs induite par le CSC, la formation de ponts de l&#39;anaphase et d&eacute;s&eacute;quilibres g&eacute;nomiques. Par cons&eacute;quent, nous proposons que SCC induit des ponts et d&eacute;s&eacute;quilibres g&eacute;nomiques via l&#39;ADN BBD. En outre, &eacute;tant donn&eacute; que le montant du SCC ajout&eacute; aux cultures a &eacute;t&eacute; sensiblement inf&eacute;rieur &agrave; celui extrait une seule cigarette, nos r&eacute;sultats montrent que m&ecirc;me de faibles niveaux de fum&eacute;e de cigarette peuvent causer des changements irr&eacute;versibles dans la constitution chromosomique des cellules en culture.

La fum&eacute;e de cigarette provoque des ponts de l&#39;anaphase et d&eacute;s&eacute;quilibres g&eacute;nomiques dans les cellules normales.

Zigarettenrauch induziert Anaphase Br&#xFC;cken und genomischer Ungleichgewichte in normalen Zellen.

L&#39;esposizione al fumo di sigaretta lungo &egrave; stato collegato alla cancerogenesi, ma l&#39;accento &egrave; stato posto su mutazionale cambiamenti nella sequenza del DNA, causate da cancerogeni in fumo. Riportiamo un ruolo aggiuntivo per esposizione a fumo di sigaretta nel contribuire ad aberrazioni cromosomiche nelle cellule. Abbiamo trovato che quel condensato di fumo di sigaretta (CSC) induce ponti anafase in cellule umane coltivate, che in breve tempo portano a squilibri genomici. La frequenza dei ponti indotti all&#39;interno di tutta la popolazione diminuisce con il tempo, e questa diminuzione non &egrave; dipendente il pathway dell&#39;apoptosi mediata da p53. Inoltre, mostriamo che CSC induce interruzioni di doppi filamento del DNA (DSBs) in cellule in coltura e DNA purificato. The scavenger (ROS) di specie reattive dell&#39;ossigeno, deossiguanosina 2&#39; 5&#39;-monofosfato (dGMP) impedisce DSBs indotta da CSC, formazione di ponte anafase e squilibri genomici. Pertanto, proponiamo che la CSC induce ponti e squilibri genomici tramite DNA DSBs. Inoltre, poich&eacute; la quantit&agrave; di CSC aggiunto alle culture era sostanzialmente inferiore a quella estratta da una singola sigaretta, i nostri risultati mostrano che anche bassi livelli di fumo di sigaretta possono causare cambiamenti irreversibili nella costituzione cromosomica delle cellule in coltura.

Il fumo di sigaretta induce anafase ponti e squilibri genomici in cellule normali.

&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x306E;&#x7159;&#x3078;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x306F;&#x9577;&#x304F;&#x767A;&#x764C;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x7159;&#x306E;&#x767A;&#x304C;&#x3093;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B; DNA &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x91CD;&#x8996;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x306E;&#x7159;&#x66DD;&#x9732;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7570;&#x5E38;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x306E;&#x7159;&#x51DD;&#x7E2E; (CSC) &#x5F8C;&#x671F;&#x6A4B;&#x306F;&#x77ED;&#x6642;&#x9593;&#x3067;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x4E0D;&#x5747;&#x8861;&#x306B;&#x5C0E;&#x304F;&#x3072;&#x3068;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30B8;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x5185;&#x306E;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3059;&#x308B;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x3053;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306F; p53 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x305F; DNA &#x306B; CSC DNA &#x4E8C;&#x91CD;&#x9396;&#x5207;&#x65AD; &#xFF08;Dsb&#xFF09; &#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E; (ROS) &#x30B9;&#x30AB;&#x30D9;&#x30F3; &#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x3001;2&#39; &#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3; 5&#39;-&#x30E2;&#x30CE;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178; (dGMP) &#x3092;&#x9632;&#x304E;&#x307E;&#x3059; CSC &#x8A98;&#x8D77;&#x306E;&#x504F;&#x5411;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30B8;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x4E0D;&#x5747;&#x8861;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;CSC &#x304C;&#x6A4B;&#x3068;&#x767A;&#x304C;&#x3093;&#x7D4C;&#x7531;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x4E0D;&#x5747;&#x8861;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30C1;&#x30E3;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0; CSC &#x306E;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x305F;&#x3070;&#x3053;&#x304B;&#x3089;&#x62BD;&#x51FA;&#x3088;&#x308A;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x61B2;&#x6CD5;&#x3067;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x306E;&#x7159;&#x306E;&#x3082;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x306E;&#x7159;&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x6A4B;&#x3068;&#x6B63;&#x5E38;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x4E0D;&#x5747;&#x8861;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB2F4;&#xBC30; &#xC5F0;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C;&#xC740; &#xBC1C;&#xC554;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xAE34; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC5F0;&#xAE30;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC554; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; mutational &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC911;&#xC810; &#xBC30;&#xCE58; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xCC29;&#xC624;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xC5D0; &#xB2F4;&#xBC30; &#xC5F0;&#xAE30; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD94;&#xAC00; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; &#xB2F4;&#xBC30; &#xC5F0;&#xAE30; &#xC751;&#xCD95; (CSC) &#xC720;&#xB3C4; anaphase &#xAD50;&#xB7C9; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xC778;&#xAC04; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC9E7;&#xC740; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xAC8C;&#xB188; &#xBD88;&#xADE0;&#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DC;&#xAC04;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8;, &#xC804;&#xCCB4; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xB2E8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xAD50;&#xB7C9;&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xAC10;&#xC18C; p53 &#xC911;&#xC7AC; apoptotic &#xD1B5;&#xB85C; &#xB530;&#xB77C; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; CSC&#xB294; &#xACBD;&#xC791;&#xB41C; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; DNA &#xC815;&#xC81C; DNA &#xC774;&#xC911; &#xC88C;&#xCD08; &#xB098;&#xB204;&#xAE30; (DSBs)&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; (&#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;) &#xD3D0;&#xD488; 2&#39; deoxyguanosine 5&#39;-monophosphate (dGMP) CSC &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; DSBs, anaphase &#xBE0C;&#xB9AC;&#xC9C0; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xAC8C;&#xB188; &#xBD88;&#xADE0;&#xD615;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; CSC &#xC720;&#xB3C4; &#xAD50;&#xB7C9; &#xBC0F; &#xAC8C;&#xB188; &#xBD88;&#xADE0;&#xD615; DNA Dsbs&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC774;&#xD6C4; CSC &#xCD94;&#xAC00; &#xAE08;&#xC561;&#xC740; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB2F4;&#xBC30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xB354; &#xC801;&#xC740;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xB2F4;&#xBC30; &#xC5F0;&#xAE30;&#xB3C4; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xBC30;&#xC591;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xD5CC;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC774;&#xD0AC; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB2F4;&#xBC30; &#xC5F0;&#xAE30;&#xB294; anaphase &#xB2E4;&#xB9AC;&#xC640; &#xC815;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xBD88;&#xADE0;&#xD615;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Exposici&oacute;n al humo de cigarrillo durante mucho tiempo ha estado vinculada a la carcinog&eacute;nesis, pero se ha puesto el &eacute;nfasis en cambios mutacionales en la secuencia de ADN causado por los agentes carcin&oacute;genos en el humo. Aqu&iacute;, Divulgamos un papel adicional para la exposici&oacute;n del humo del cigarrillo en contribuir a aberraciones cromos&oacute;micas en las c&eacute;lulas. Hemos encontrado que condensado de humo de cigarrillo (CSC) induce puentes anafase en cultivos de c&eacute;lulas humanos, que en poco tiempo conducir a desequilibrios gen&oacute;micos. La frecuencia de los puentes inducidos dentro de toda la poblaci&oacute;n disminuye con el tiempo, y esta disminuci&oacute;n no es dependiente sobre la v&iacute;a apopt&oacute;tica mediada por p53. Adem&aacute;s, mostramos que CSC induce ADN dobles trenzados rupturas (consejos escolares distritales) en cultivos de c&eacute;lulas y el ADN purificado. El carro&ntilde;ero de (ROS) las especies reactivas del ox&iacute;geno, 2&#39; desoxiguanosina 5&#39;-monofosfato (dGMP) previene inducida por CSC consejos escolares distritales, formaci&oacute;n de puente de anafase y desequilibrios gen&oacute;micos. Por lo tanto, proponemos que el CSC induce desequilibrios gen&oacute;micos v&iacute;a ADN consejos escolares distritales y puentes. Adem&aacute;s, puesto que la cantidad de CSC ha a&ntilde;adido a las culturas era sustancialmente menor que la se extrae de un solo cigarrillo, nuestros resultados muestran que a&uacute;n bajos niveles de humo del cigarrillo pueden causar cambios irreversibles en la Constituci&oacute;n cromos&oacute;mica de las c&eacute;lulas cultivadas.

El humo del cigarrillo induce anafase puentes y los desequilibrios gen&oacute;micos en las c&eacute;lulas normales.

&Alpha;/&beta; &#x5E72;&#x6270;&#x7D20; (&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7248;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;-&alpha;) &#x662F;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x89E3;&#x4EBA;&#x7684;&#x5148;&#x5929;&#x514D;&#x75AB;&#x548C;&#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x514D;&#x75AB;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x8C03;&#x8282;&#x5242;&#x3002;&#x88AB;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;-&alpha;/&beta; &#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x53D8;&#x5F97;&#x65E5;&#x76CA;&#x5F97;&#x5230;&#x5145;&#x5206;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; Toll &#x6837;&#x53D7;&#x4F53; 7 &#x548C; 8&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x7531;&#x6D46;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6837;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE; (Pdc) &#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x89E3;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; RNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x4F20;&#x5165;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50; 88 (MyD88) &#x8BC6;&#x522B; endosomal&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;-&alpha;/&beta; &#x751F;&#x4EA7;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x7684;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5C0F;&#x9F20; DCs &#xFF08;mDCs&#xFF09; &#x7684;&#x8981;&#x6C42;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x91CD;&#x7EC4; Semliki &#x68EE;&#x6797;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x6B65;&#x9AA4;&#x963B;&#x6B62;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x751F;&#x547D;&#x5468;&#x671F;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x590D;&#x5236;&#x7F3A;&#x9677;&#x578B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;-&alpha;/&beta; mDCs &#x867D;&#x7136;&#x878D;&#x5408;&#x7F3A;&#x9677;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E0D;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;-&alpha;/&beta;&#x3002;&#x590D;&#x5236;&#x7F3A;&#x9677;&#x578B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x54CD;&#x5E94;&#x662F; MyD88/mDC &#x6587;&#x5316;&#x5728;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x4FDD;&#x6301;&#x4E0D;&#x53D8;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4ECE;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; 3 &#x7684;&#x5C0F;&#x9F20; mDC &#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x4E25;&#x91CD;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x89C2;&#x5BDF;&#x8868;&#x660E; mDCs &#x54CD;&#x5E94;&#x4F20;&#x5165;&#x75C5;&#x6BD2;&#x901A;&#x8FC7;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;-&alpha;/&beta; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; Pdc &#x4E2D;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3001; MyD88 &#x4ECB;&#x5BFC; endosomal &#x901A;&#x8DEF;&#x4ECE;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x671F;&#x95F4;&#x6216;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E4B;&#x524D;&#x590D;&#x5236;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728; mDCs &#x6FC0;&#x6D3B;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;-&alpha;/&beta;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;mDCs &#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5728;&#x65E9;&#x671F;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x70B9;&#x540E;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

&#x65E9;&#x671F; alpha/&beta; &#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x751F;&#x4EA7;&#x7531;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x706D;&#x6D3B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x54CD;&#x5E94;&#x8981;&#x6C42;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x6761;&#x76EE;&#x548C;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; 3 &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; MyD88&#x3002;

Alpha/beta interferons (IFN-alpha/beta) are key mediators of innate immunity and important modulators of adaptive immunity. The mechanisms by which IFN-alpha/beta are induced are becoming increasingly well understood. Recent studies showed that Toll-like receptors 7 and 8 expressed by plasmacytoid dendritic cells (pDCs) mediate the endosomal recognition of incoming viral RNA genomes, a process which requires myeloid differentiation factor 88 (MyD88). Here we investigate the requirements for virus-induced IFN-alpha/beta production in cultures of bone marrow-derived murine myeloid DCs (mDCs). Using recombinant Semliki Forest virus blocked at different steps in the viral life cycle, we show that replication-defective virus induced IFN-alpha/beta in mDCs while fusion-defective virus did not induce IFN-alpha/beta. The response to replication-defective virus was largely intact in MyD88-/- mDC cultures but was severely reduced in mDC cultures from mice lacking IFN regulatory factor 3. Our observations suggest that mDCs respond to incoming virus via a pathway that differs from the fusion-independent, MyD88-mediated endosomal pathway described for the induction of IFN-alpha/beta in pDCs. We propose that events during or downstream of viral fusion, but prior to replication, can activate IFN-alpha/beta in mDCs. Thus, mDCs may contribute to the antiviral response activated by the immune system at early time points after infection.

Early alpha/beta interferon production by myeloid dendritic cells in response to UV-inactivated virus requires viral entry and interferon regulatory factor 3 but not MyD88.

Interf&eacute;rons alpha/b&ecirc;ta (IFN-alpha/b&ecirc;ta) sont les principaux m&eacute;diateurs de l&#39;immunit&eacute; inn&eacute;e et les modulateurs importants de l&#39;immunit&eacute; adaptative. Les m&eacute;canismes par lequel IFN-alpha/b&ecirc;ta sont induites sont devient de mieux en mieux compris. Des &eacute;tudes r&eacute;centes ont montr&eacute; que les r&eacute;cepteurs Toll-like 7 et 8, exprim&eacute;e par les cellules dendritiques plasmacytoides (PDC) m&eacute;dient la reconnaissance endosomale des g&eacute;nomes de RNA virales entrants, un processus qui exige que le facteur de diff&eacute;renciation my&eacute;lo&iuml;de 88 (MyD88). Ici, nous &eacute;tudions les exigences pour la production de IFN-alpha/b&ecirc;ta de Viro-induites dans les cultures de la moelle osseuse murines DCs my&eacute;lo&iuml;des (CAM). &Agrave; l&#39;aide de virus recombinant de Semliki Forest bloqu&eacute; &agrave; diff&eacute;rentes &eacute;tapes du cycle de vie viral, nous montrons que pr&eacute;sentant un d&eacute;faut de la r&eacute;plication du virus induite IFN-alpha/b&ecirc;ta en Cam, alors que les virus pr&eacute;sentant un d&eacute;faut de fusion n&#39;a pas induit d&#39;IFN-alpha/b&ecirc;ta. La r&eacute;ponse aux virus replication d&eacute;fectueux a &eacute;t&eacute; en grande partie intacte dans les cultures de MyD88-/-mDC, mais a &eacute;t&eacute; s&eacute;v&egrave;rement r&eacute;duite dans les cultures du mDC de souris d&eacute;pourvues de facteur r&eacute;gulateur IFN 3. Nos observations sugg&egrave;rent que les CAM r&eacute;ponde aux virus entrants via une voie diff&eacute;rente de la voie endosomale fusion ind&eacute;pendante, MyD88-mediated d&eacute;crite pour l&#39;induction de l&#39;IFN-alpha/b&ecirc;ta aux PDC. Nous proposons que les &eacute;v&eacute;nements au cours ou en aval de fusion virale, mais avant la r&eacute;plication, peuvent activer IFN-alpha/b&ecirc;ta en cam. Ainsi, Cam peut contribuer &agrave; la r&eacute;ponse antivirale activ&eacute;e par le syst&egrave;me immunitaire aux premiers moments apr&egrave;s l&#39;infection.

Production d&#39;interf&eacute;ron alpha/b&ecirc;ta au d&eacute;but par des cellules dendritiques my&eacute;lo&iuml;des en r&eacute;ponse &agrave; virus inactiv&eacute;s par UV n&eacute;cessite l&#39;entr&eacute;e virale et le facteur de normalisation interf&eacute;ron 3 mais pas MyD88.

Fr&#xFC;he Alpha / Beta-Interferon-Produktion durch myeloide dendritische Zellen als Reaktion auf UV-inaktivierte Virus erfordert das Eindringen des Virus und Interferon Regulatory Factor 3, aber nicht MyD88.

Interferoni alfa/beta (IFN-alfa/beta) sono i principali mediatori dell&#39;immunit&agrave; innata e importanti modulatori dell&#39;immunit&agrave; adattativa. I meccanismi da cui IFN-alfa/beta sono indotte sono diventando sempre pi&ugrave; ben inteso. Recenti studi hanno dimostrato che i recettori Toll-like 7 e 8 espresso dalle cellule dendritiche plasmacytoid (pDCs) mediano il riconoscimento endosomal dei genomi di RNA virali in arrivo, un processo che richiede fattore di differenziazione mieloide 88 (MyD88). Qui indaghiamo i requisiti per la produzione IFN-alfa/beta virus-indotta in colture derivate da midollo osseo murino DCS mieloide (MDC). Usando ricombinante Semliki Forest virus bloccato in diverse fasi del ciclo di vita virale, ci mostrano che il virus replica-difettoso indotta da IFN-alfa/beta in MDC mentre difettosa fusione virus non ha indotto l&#39;IFN-alfa/beta. La risposta al virus replica-difettoso era in gran parte intatta nelle culture MyD88/mDC ma era gravemente ridotto nelle culture di mDC da topi privi di fattore regolatore IFN 3. Le nostre osservazioni suggeriscono che MDC rispondere al virus in arrivo attraverso un percorso che si differenzia dal percorso indipendente dalla fusione, MyD88-mediata endosomal descritto per l&#39;induzione di IFN-alfa/beta in PDC. Proponiamo che gli eventi durante o a valle della fusione virale, ma prima della replica, possono attivare IFN-alfa/beta di MDC. Cos&igrave;, MDC possono contribuire alla risposta antivirale attivata dal sistema immunitario nei primi punti di tempo dopo l&#39;infezione.

Produzione precoce di interferone alfa/beta di cellule dendritiche mieloidi in risposta a virus inattivati UV richiede entrata virale e fattore regolatore interferone 3 ma non MyD88.

&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;/&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3; &#xFF08;IFN-&alpha;/&beta;) &#x306F;&#x3001;&#x30AD;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x3068;&#x9069;&#x5FDC;&#x514D;&#x75AB;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x5909;&#x8ABF;&#x5668;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x306E; IFN-&alpha;/&beta; &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x307E;&#x3059;&#x307E;&#x3059;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;Toll &#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; 7 &#x3068;&#x5F62;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x69D8;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE; (Pdc) &#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; 8 &#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x8A8D;&#x8B58;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x5206;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50; 88 (MyD88) &#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x53D7;&#x4FE1;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; RNA &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8A98;&#x767A;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x6027; Dc (Mdc) &#x306E; IFN-&alpha;/&beta; &#x751F;&#x7523;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8981;&#x4EF6;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30BB;&#x30E0;&#x30EA;&#x30AD;&#x68EE;&#x6797;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D5; &#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3067;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306B;&#x306F;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x878D;&#x5408;&#x4E0D;&#x826F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; IFN-&alpha;/&beta; &#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x4E00;&#x65B9;&#x305D;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6B20;&#x9665;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; IFN-&alpha;/&beta; Mdc &#x3067;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;MyD88/mDC &#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3067;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x53B3;&#x3057;&#x304F; mDC &#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3067;&#x306F; IFN &#x898F;&#x5236;&#x8981;&#x56E0; 3 &#x306B;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306F; Mdc &#x306E; Pdc &#x306E; IFN-&alpha;/&beta; &#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3001;MyD88 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7740;&#x4FE1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x4E2D;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x878D;&#x5408;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x524D; IFN-&alpha;/&beta; Mdc &#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;Mdc &#x306F;&#x611F;&#x67D3;&#x5F8C;&#x65E9;&#x3044;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

&#x9AA8;&#x9AC4;&#x7CFB;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066; UV &#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7523;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x521D;&#x671F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;/&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x5236;&#x5FA1;&#x56E0;&#x5B50; 3 &#x304C;&#x306A;&#x3044; MyD88 &#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC54C;&#xD30C;/&#xBCA0;&#xD0C0; interferons (IFN-&#xC54C;&#xD30C;/&#xBCA0;&#xD0C0;)&#xB294; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC81C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC911;&#xC7AC;&#xC790; &#xBC0F; &#xC801;&#xC751; &#xBA74;&#xC5ED;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBCC0;&#xC870;&#xAE30;. IFN-&#xC54C;&#xD30C;/&#xBCA0;&#xD0C0; &#xC5EC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC720;&#xBC1C;&#xC744; &#xC810;&#xC810; &#xB354; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xB418; &#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; 7, 8 plasmacytoid &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; (pDCs)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xC218;&#xC2E0;&#xC790; &#xAC19;&#xC740; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC911;&#xC7AC; endosomal &#xC778;&#xC2DD; &#xB4E4;&#xC5B4;&#xC624;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; RNA &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xC694;&#xC778; 88 (MyD88)&#xB97C; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC720;&#xB3C4; IFN-&#xC54C;&#xD30C;/&#xBCA0;&#xD0C0; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE8; &#xC218; &#xC720;&#xB798; murine &#xACE8;&#xC218;&#xC131; Dc (mDCs)&#xC758; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC218;&#xBA85; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xB294; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; Semliki &#xC232; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD4E8;&#xC804; &#xACB0;&#xD568; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; IFN-&#xC54C;&#xD30C;/&#xBCA0;&#xD0C0;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8; &#xBCF5;&#xC81C; &#xACB0;&#xD568; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; Mdcs&#xC5D0; IFN-&#xC54C;&#xD30C;/&#xBCA0;&#xD0C0;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xC5EC;. &#xBCF5;&#xC81C; &#xACB0;&#xD568; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; &#xD06C;&#xAC8C; MyD88/mDC &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xC788;&#xC5C8;&#xC9C0;&#xB9CC; IFN &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C; 3 &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; mDC &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2EC;&#xAC01; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAD00;&#xCE21; mDCs Pdc&#xC5D0;&#xC11C; IFN-&#xC54C;&#xD30C;/&#xBCA0;&#xD0C0;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; &#xC124;&#xBA85; &#xD4E8;&#xC804; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;, MyD88 &#xC911;&#xC7AC; endosomal &#xACBD;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB4E4;&#xC5B4;&#xC624;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300;&#xC751; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xAE30;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xB610;&#xB294; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xD4E8;&#xC804;&#xC758; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBCF5;&#xC81C;, &#xC774;&#xC804; mDCs IFN-&#xC54C;&#xD30C;/&#xBCA0;&#xD0C0; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xD560; &#xC218; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, mDCs &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC751;&#xB2F5; &#xAC10;&#xC5FC; &#xD6C4; &#xCD08;&#xAE30; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

UV inactivated &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCD08;&#xAE30; &#xC54C;&#xD30C;/&#xBCA0;&#xD0C0; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD56D;&#xBAA9; &#xBC0F; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C; 3 MyD88 &#xD558;&#xC9C0; &#xD574;&#xC57C;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Interferones Alfa/beta (IFN-alfa/beta) son los principales mediadores de la inmunidad innata y moduladores importantes de inmunidad adaptativa. Los mecanismos por los cual IFN-alfa/beta son inducidos son convertirse en cada vez m&aacute;s bien entendidos. Estudios recientes demostraron que los receptores Toll-like 7 y 8 expresada por las c&eacute;lulas dendr&iacute;ticas plasmocitoides (PDC) median el reconocimiento endosomal de genomas de RNA virales entrantes, un proceso que requiere el factor de diferenciaci&oacute;n mieloide 88 (MyD88). Aqu&iacute; investigamos los requisitos para inducido por virus IFN-alfa/beta producci&oacute;n en cultivos de m&eacute;dula &oacute;sea murinas DCs mieloides (MDC). Usando el virus recombinante de Semliki Forest bloqueado en distintas etapas en el ciclo de vida viral, mostramos virus de replicaci&oacute;n defectuoso inducida por IFN-alfa/beta en MDC mientras virus defectuoso de fusi&oacute;n no indujo la IFN-alfa/beta. La respuesta al virus de replicaci&oacute;n defectuoso fue en gran parte intacta en MyD88-/-mDC culturas pero se redujo severamente en las culturas de mDC de ratones que carecen de factor regulador de IFN 3. Nuestras observaciones sugieren que el MDC responde a virus entrantes v&iacute;a un camino que difiere de la v&iacute;a independiente de la fusi&oacute;n, mediada por MyD88 endosomal descrita para la inducci&oacute;n de IFN-alfa/beta en PDC. Proponemos que los acontecimientos durante o aguas abajo de fusi&oacute;n viral, pero antes de la replicaci&oacute;n, pueden activar IFN-alfa/beta en MDC. As&iacute;, el MDC puede contribuir a la respuesta antiviral activada por el sistema inmune en los primeros momentos despu&eacute;s de la infecci&oacute;n.

Producci&oacute;n de interfer&oacute;n alfa/beta temprana por c&eacute;lulas dendr&iacute;ticas mieloides en respuesta a virus inactivado con UV requiere entrada viral y factor regulador de interfer&oacute;n 3 pero no MyD88.

&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x662F;&#x5BF9;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x5927;&#x8111;&quot;&#x672C;&#x8EAB;&#xFF0C;&quot;&#x7535;&#x7EBF;&#x7136;&#x540E;&quot;&#x4E0A;&#x884C;&quot;&#x671F;&#x95F4;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x6B65;&#x9AA4;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x6700;&#x65B0;&#x8FDB;&#x5C55;&#x5DF2;&#x7814;&#x7A76;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x89C4;&#x6A21;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4E0A;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x80FD;&#x679C;&#x8747;&#x795E;&#x7ECF;&#x808C;&#x8089;&#x63A5;&#x5934; &#xFF08;NMJ&#xFF09; &#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7504;&#x522B; 2185 P &#x5143;&#x7D20;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4EE3;&#x8868;&#x6574;&#x4E2A;&#x679C;&#x8747;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x5927;&#x7EA6; 16%&#x63D2;&#x5165;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x9996;&#x5148;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x9690;&#x6027;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5047;&#x8BF4;&#x5728;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x9020;&#x6210;&#x4E25;&#x91CD;&#x6DF7;&#x4E71;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x5F88;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x516D;&#x767E;&#x4E8C;&#x5341;&#x4E00; &#xFF08;10%&#xFF09; &#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x63D2;&#x5165;&#x4E86;&#x7EAF;&#x5408;&#x81F4;&#x6B7B;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x767E;&#x4E94; (93%) &#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x53D1;&#x8FBE;&#x56FD;&#x5BB6;&#x81F3;&#x5C11;&#x901A;&#x8FC7;&#x540E;&#x671F;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x751F;&#x548C;&#x5F62;&#x6210; neuromusculature&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x80DA;&#x80CE;/&#x5E7C;&#x866B;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x548C;&#x5171;&#x7126;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EAF;&#x5408;&#x7A81;&#x53D8; 202 NMJs&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5206;&#x7C7B; 88 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x6539;&#x53D8; NMJ &#x5F62;&#x6001;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7684;&#x63D2;&#x5165;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x51E0;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; ATP &#x548C;&#x9176;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;&#x3001; &#x6FC0;&#x9176;&#x3001; &#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x3001; RNA &#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x3001; &#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5F62;&#x6210;&#x3001; &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x3002;&#x5728;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x6216;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x63D2;&#x5165;&#x7684; 13%&#x3002;&#x4E92;&#x8865;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x53CA; RT-pcr &#x5EFA;&#x8BAE;&#x7EA6; 51%&#x7684;&#x63D2;&#x5165;&#x884C;&#x8FDB;&#x884C;&#x80CC;&#x666F;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A;&#xFF0C;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x9700;&#x8981;&#x91C7;&#x53D6;&#x534F;&#x8C03;&#x7684;&#x884C;&#x52A8;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;--&#x53EF;&#x80FD;&#x9AD8;&#x8FBE; 44%&#x7684;&#x6574;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; &mdash; &mdash; &#x548C;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50; mutageneses &#x8FDB;&#x884C;&#x89E3;&#x91CA;&#x7ED3;&#x679C;&#x751F;&#x6210;&#x4F7F;&#x7528;&#x6B64;&#x65B9;&#x6CD5;&#x65F6;&#x5FC5;&#x987B;&#x5C0A;&#x91CD;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6CE8;&#x610F;&#x4E8B;&#x9879;&#x3002;

&#x679C;&#x8747;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x7A81;&#x53D8;&#x682A;&#x7684;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; P &#x5143;&#x7D20;&#x5C4F;&#x5E55;&#x3002;

A molecular understanding of synaptogenesis is a critical step toward the goal of understanding how brains "wire themselves up," and then "rewire" during development and experience. Recent genomic and molecular advances have made it possible to study synaptogenesis on a genomic scale. Here, we describe the results of a screen for genes involved in formation and development of the glutamatergic Drosophila neuromuscular junction (NMJ). We screened 2185 P-element transposon mutants representing insertions in approximately 16% of the entire Drosophila genome. We first identified recessive lethal mutants, based on the hypothesis that mutations causing severe disruptions in synaptogenesis are likely to be lethal. Two hundred twenty (10%) of all insertions were homozygous lethal. Two hundred five (93%) of these lethal mutants developed at least through late embryogenesis and formed neuromusculature. We examined embryonic/larval NMJs in 202 of these homozygous mutants using immunocytochemistry and confocal microscopy. We identified and classified 88 mutants with altered NMJ morphology. Insertion loci in these mutants encode several different types of proteins, including ATP- and GTPases, cytoskeletal regulators, cell adhesion molecules, kinases, phosphatases, RNA regulators, regulators of protein formation, transcription factors, and transporters. Thirteen percent of insertions are in genes that encode proteins of novel or unknown function. Complementation tests and RT-PCR assays suggest that approximately 51% of the insertion lines carry background mutations. Our results reveal that synaptogenesis requires the coordinated action of many different types of proteins--perhaps as much as 44% of the entire genome--and that transposon mutageneses carry important caveats that must be respected when interpreting results generated using this method.

Genome-wide P-element screen for Drosophila synaptogenesis mutants.

Une compr&#xE9;hension mol&#xE9;culaire de la synaptogen&#xE8;se est une &#xE9;tape cruciale vers l&#x26;#39;objectif de comprendre comment le cerveau se &#xAB;c&#xE2;bler&#xBB;, puis &#xAB;rec&#xE2;bler&#xBB; au cours du d&#xE9;veloppement et de l&#x26;#39;exp&#xE9;rience. Les r&#xE9;cents progr&#xE8;s de la g&#xE9;nomique et mol&#xE9;culaire ont permis d&#x26;#39;&#xE9;tudier la synaptogen&#xE8;se &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;chelle g&#xE9;nomique. Ici, nous d&#xE9;crivons les r&#xE9;sultats d&#x26;#39;un &#xE9;cran pour les g&#xE8;nes impliqu&#xE9;s dans la formation et le d&#xE9;veloppement de la jonction glutamatergique Drosophila neuromusculaire (JNM). Nous avons examin&#xE9; 2185 mutants de transposons P-&#xE9;l&#xE9;ment repr&#xE9;sentant insertions dans environ 16% de l&#x26;#39;ensemble du g&#xE9;nome chez la drosophile. Nous avons d&#x26;#39;abord identifi&#xE9; r&#xE9;cessifs mutants l&#xE9;taux, bas&#xE9;e sur l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se que les mutations qui causent de graves perturbations dans la synaptogen&#xE8;se sont susceptibles d&#x26;#39;&#xEA;tre mortel. Deux cent vingt (10%) de toutes les insertions &#xE9;taient homozygotes l&#xE9;tale. Deux cent cinq (93%) de ces mutants l&#xE9;taux d&#xE9;velopp&#xE9;s au moins jusqu&#x26;#39;&#xE0; la fin de l&#x26;#39;embryogen&#xE8;se et neuromusculature form&#xE9;. Nous avons examin&#xE9; NMJs embryonnaires / larvaires dans 202 de ces mutants homozygotes en utilisant la microscopie confocale et immunocytochimie. Nous avons identifi&#xE9; et class&#xE9; 88 mutants avec NMJ morphologie alt&#xE9;r&#xE9;e. Loci d&#x26;#39;insertion dans ces mutants coder pour plusieurs types diff&#xE9;rents de prot&#xE9;ines, y compris ATP et GTPases, les r&#xE9;gulateurs du cytosquelette, mol&#xE9;cules d&#x26;#39;adh&#xE9;sion cellulaire, les kinases, les phosphatases, r&#xE9;gulateurs d&#x26;#39;ARN, des r&#xE9;gulateurs de la formation des prot&#xE9;ines, des facteurs de transcription, et les transporteurs. Treize pour cent des insertions sont dans les g&#xE8;nes qui codent pour des prot&#xE9;ines de fonction inconnue roman ou. Tests de compl&#xE9;mentation et RT-PCR sugg&#xE8;rent qu&#x26;#39;environ 51% des lign&#xE9;es d&#x26;#39;insertion sont porteuses de mutations de fond. Nos r&#xE9;sultats r&#xE9;v&#xE8;lent que la synaptogen&#xE8;se n&#xE9;cessite l&#x26;#39;action coordonn&#xE9;e des diff&#xE9;rents types de prot&#xE9;ines - peut-&#xEA;tre autant que 44% de la totalit&#xE9; du g&#xE9;nome - et que mutag&#xE9;n&#xE8;ses transposons effectuer importantes mises en garde qui doivent &#xEA;tre respect&#xE9;s lors de l&#x26;#39;interpr&#xE9;tation des r&#xE9;sultats g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;s par cette m&#xE9;thode.

L&#x26;#39;&#xE9;chelle du g&#xE9;nome P-&#xE9;l&#xE9;ment d&#x26;#39;&#xE9;cran pour Mutants synaptog&#xE9;n&#xE8;se drosophile

Ein molekularen Verst&auml;ndnis der Synaptogenese ist ein entscheidender Schritt auf das Ziel zu verstehen, wie Gehirne &quot;Draht selbst oben&quot;, und dann &quot;rewire&quot;, w&auml;hrend Entwicklung und Erfahrung. Die j&uuml;ngsten Fortschritte der genomischen und Molekulare haben Synaptogenese auf genomischer Ebene zu studieren erm&ouml;glicht. Hier beschreiben wir die Ergebnisse eines Bildschirms f&uuml;r Gene, die Entstehung und Entwicklung von Glutamat Drosophila neuromuskul&auml;rer Synapsen (NMJ) beteiligt. Wir geschirmt 2185 P-Elements Transposon Mutanten, die Einf&uuml;gungen in etwa 16 % des gesamten Genoms Drosophila darstellt. Wir haben zun&auml;chst identifiziert, rezessive letale Mutanten, basierend auf der Hypothese, dass Mutationen verursachen gravierende St&ouml;rungen im Synaptogenese t&ouml;dlich sein d&uuml;rften. Zwei hundert zwanzig (10 %) von allen Einf&uuml;gungen waren homozygot letal. Zwei hundert f&uuml;nf (93 %) diese letale Mutanten entwickelt mindestens durch sp&auml;ten Embryogenese und Neuromusculature gebildet. Wir untersuchten embryonale/larvalen NMJs 202 diese homozygoten Mutanten mit Immunzytochemie und confocal Mikroskopie. Wir identifiziert und klassifiziert 88 Mutanten mit ver&auml;nderten NMJ-Morphologie. Einf&uuml;gung Loci in diese Mutanten codieren, verschiedene Arten von Proteine, einschlie&szlig;lich ATP- und GTPasen, Zytoskelett Regulatoren, Zelladh&auml;sionsmolek&uuml;le, Kinasen, Phosphatasen, RNA-Regulatoren, die Regler der Protein-Formation, Transkriptionsfaktoren und Transporter. Dreizehn Prozent der Einf&uuml;gungen sind Gene, die Proteine des Romans oder unbekannte Funktion codieren. Komplementation Pr&uuml;fungen und RT-PCR-Assays zufolge etwa 51 % der Einf&uuml;gung Linien Hintergrund Mutationen tragen. Unsere Ergebnisse zeigen, dass Synaptogenese erfordert koordinierte Vorgehen der viele verschiedene Arten von Proteinen--vielleicht weniger als 44 % des gesamten Genoms-- und dass die Transposon Mutageneses wichtige Vorsichtsma&szlig;nahmen durchf&uuml;hren, die eingehalten werden m&uuml;ssen, bei der Interpretation der Ergebnisse, die mit dieser Methode generiert.

Genomweiten P-Elements Bildschirm f&uuml;r Drosophila Synaptogenese Mutanten.

Una comprensione molecolare di pervasivi &egrave; un passaggio fondamentale verso l&#39;obiettivo di comprendere come il cervello &quot;cablare stessi&quot; e quindi &quot;rewire&quot; durante lo sviluppo e l&#39;esperienza. Recenti progressi genomici e molecolari hanno reso possibile lo studio pervasivi su scala genomica. Qui, descriviamo i risultati di uno schermo per i geni coinvolti nella formazione e sviluppo della giunzione neuromuscolare (NMJ) drosofila glutamatergico. Abbiamo proiettato mutanti trasposone 2185 P-elemento che rappresenta gli inserimenti in circa il 16% dell&#39;intero genoma di Drosophila. Abbiamo dapprima identificato mutanti letali recessivi, basati sull&#39;ipotesi che le mutazioni causando gravi perturbazioni in pervasivi sono suscettibili di essere letale. Due cento venti (10%) di tutti gli inserimenti sono stati omozigoti letale. Due cento cinque (93%) di questi mutanti letali sviluppato almeno attraverso l&#39;embriogenesi tardiva e formata neuromusculature. Abbiamo esaminato embrionale/larvale NMJs in 202 di questi omozigoti mutanti mediante immunocitochimica e microscopia confocal. Abbiamo individuato e classificato 88 mutanti con alterata morfologia NMJ. Loci di inserimento in questi mutanti codificano diversi tipi di proteine, tra cui ATP - e GTPases, regolatori del citoscheletro, molecole di adesione cellulare, chinasi, fosfatasi, RNA regolatori, regolatori della formazione di proteine, fattori di trascrizione e trasportatori. Tredici per cento di inserimenti sono in geni che codificano proteine del romanzo o della funzione sconosciuta. Test di complementazione e dosaggi di RT-PCR suggeriscono che circa il 51% delle linee di inserimento trasportano mutazioni di sfondo. I nostri risultati rivelano che pervasivi richiede l&#39;azione coordinata dei diversi tipi di proteine - forse quanto il 44% dell&#39;intero genoma - e che mutageneses trasposone portare importanti avvertenze che devono essere rispettate quando si interpretano i risultati generati utilizzando questo metodo.

Genome-wide screen P-elemento per mutanti pervasivi della drosofila.

&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x306F;&#x3001;&#x8133;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x7D4C;&#x9A13;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x3001; &#x26;quot;&#x81EA;&#x5206;&#x81EA;&#x8EAB;&#x3092;&#x7D50;&#x3073;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x26;quot;&#x3068;&#x3057;&#x3001; &#x26;quot;ReWire&#x3092;&#x26;quot;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x306F;&#x3001;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x898F;&#x6A21;&#x3067;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7B4B;&#x63A5;&#x5408;&#x90E8;&#xFF08;NMJ&#xFF09;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x767A;&#x5C55;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x753B;&#x9762;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x7D04;16&#xFF05;&#x3067;&#x3001;&#x633F;&#x5165;&#x3092;&#x8868;&#x3059;2185&#x5E74;&#x306E;P&#x8981;&#x7D20;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x5909;&#x7570;&#x682A;&#x3092;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305A;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x6DF7;&#x4E71;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x81F4;&#x6B7B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x52A3;&#x6027;&#x81F4;&#x6B7B;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x633F;&#x5165;&#x306E;&#x4E8C;&#x767E;20&#xFF08;10&#xFF05;&#xFF09;&#x304C;&#x30DB;&#x30E2;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;&#x81F4;&#x6B7B;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x5F8C;&#x671F;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x3001;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7B4B;&#x8089;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x958B;&#x767A;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7684;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x4E8C;&#x767E;&#x4E94;&#xFF08;93&#xFF05;&#xFF09;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x3068;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30DB;&#x30E2;&#x63A5;&#x5408;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;202&#x5185;&#x306B;&#x80DA;/&#x5E7C;&#x866B;NMJs&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x305F;NMJ&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3067;88&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x5206;&#x985E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x633F;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;ATP&#x3068;GTP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50;&#x3001;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;RNA&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x633F;&#x5165;&#x306E;13&#xFF05;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x898F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x76F8;&#x88DC;&#x6027;&#x8A66;&#x9A13;&#x304A;&#x3088;&#x3073;RT-PCR&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x633F;&#x5165;&#x884C;&#x306E;&#x7D04;51&#xFF05;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B0;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x540C;&#x3058;&#x304F;&#x3089;&#x3044;&#x306E;44&#xFF05; -   - &#x3068;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;mutageneses&#x306F;&#x3001;&#x89E3;&#x91C8;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x5C0A;&#x91CD;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x3051;&#x308C;&#x3070;&#x306A;&#x3089;&#x306A;&#x3044;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6CE8;&#x610F;&#x4E8B;&#x9805;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x5354;&#x8ABF;&#x884C;&#x52D5;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x30EF;&#x30A4;&#x30C9;&#x306A;P-&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x753B;&#x9762;

Synaptogenesis&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC774;&#xD574; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xB450;&#xB1CC; &quot;&#xB97C;, &#xC790;&#xC2E0;&#xC744; &#xC5F0;&#xACB0;&quot;&#xC640; &quot;&#xD574;&#xD0B9;&quot; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xACBD;&#xD5D8;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xD5A5;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC774;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xAC8C;&#xB188;&#xACFC; &#xBD84;&#xC790; &#xBC1C;&#xC804; &#xAC8C;&#xB188; &#xADDC;&#xBAA8;&#xB85C; synaptogenesis &#xACF5;&#xBD80;&#xB97C; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; glutamatergic Drosophila &#xC2E0;&#xACBD; &#xADFC;&#xC721; &#xD559; &#xAD50;&#xCC28;&#xB85C; (NMJ)&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2A4;&#xD06C;&#xB9B0;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC124;&#xBA85;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC0C1;&#xC601; 2185 P &#xC694;&#xC18C; transposon &#xBBA4;&#xD134;&#xD2B8; &#xB300;&#xD45C; &#xC804;&#xCCB4; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xC57D; 16%&#xC5D0; &#xC0BD;&#xC785; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBA3C;&#xC800; synaptogenesis&#xC5D0; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xD63C;&#xB780;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;&#xB294; &#xAC00;&#xC124;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC5F4;&#xC131; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC1C;&#xACAC;. 2 &#xBC31; 20 (10%)&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC0BD;&#xC785; &#xD588;&#xB2E4; homozygous &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778;. 2 &#xBC31; 5 (93%)&#xC774; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xB2A6;&#xAC8C; embryogenesis&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; neuromusculature&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC30;&#xC544;/&#xC560;&#xBC8C;&#xB808; NMJs immunocytochemistry confocal &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; homozygous &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; 202&#xC5D0; &#xAC80;&#xC0AC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xBD84;&#xB958; &#xBCC0;&#xACBD;&#xB41C; NMJ &#xD615;&#xD0DC;&#xC640; 88 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0; &#xC0BD;&#xC785; loci &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD615;&#xC131;&#xACFC; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;, &#xC804;&#xC1A1;&#xAE30;&#xC758; ATP&#xC640; GTPases, cytoskeletal &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790;, kinases, &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574;, RNA &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;, &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;. &#xC0BD;&#xC785;&#xC758; 13 %&#xB294; &#xC18C;&#xC124; &#xC774;&#xB098; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xBD80;&#xD638;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCF4;&#xC644;&#xC131; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xACFC; RT-PCR &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC0BD;&#xC785; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xC57D; 51% &#xBC30;&#xACBD; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xACF5;&#xAC1C;&#xB294; synaptogenesis &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;--&#xC804;&#xCCB4; &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; 44% &#xC218;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; &#xACE0; transposon mutageneses&#xC774;&#xC774; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0DD;&#xC131; &#xB418;&#xB294; &#xACB0;&#xACFC; &#xD574;&#xC11D;&#xD560; &#xB54C; &#xC874;&#xC911; &#xB418;&#xC5B4;&#xC57C; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC8FC;&#xC758; &#xC0AC;&#xD56D; &#xC218;&#xD589;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xC870;&#xC815;&#xB41C; &#xC791;&#xC5C5;&#xC774; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Drosophila synaptogenesis &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xAC8C;&#xB188; &#xC218;&#xC900;&#xC758; P &#xC694;&#xC18C; &#xD654;&#xBA74;.

Una comprensi&#xF3;n molecular de la sinaptog&#xE9;nesis es un paso cr&#xED;tico hacia el objetivo de comprender c&#xF3;mo el cerebro &#x26;quot;a s&#xED; mismos cablear,&#x26;quot; y luego &#x26;quot;recableado&#x26;quot; durante el desarrollo y la experiencia. Recientes avances de la gen&#xF3;mica y molecular han hecho posible el estudio de la sinaptog&#xE9;nesis en una escala gen&#xF3;mica. A continuaci&#xF3;n, describimos los resultados de una pantalla de genes implicados en la formaci&#xF3;n y el desarrollo de la Drosophila glutamat&#xE9;rgica uni&#xF3;n neuromuscular (UNM). Se seleccionaron 2185 P-elemento transpos&#xF3;n mutantes que representan inserciones en aproximadamente el 16% de todo el genoma de Drosophila. En primer lugar, identificar mutantes recesivos letales, sobre la base de la hip&#xF3;tesis de que las mutaciones que causan graves trastornos en la sinaptog&#xE9;nesis es probable que sean letales. Doscientos veinte (10%) de todas las inserciones eran homocigotos letal. Doscientos cinco (93%) de estos mutantes letales desarrollados al menos durante la embriog&#xE9;nesis tard&#xED;a y neuromusculatura formado. Hemos examinado NMJs embriones / larvas en 202 de estos mutantes homocigotos mediante microscop&#xED;a confocal y la inmunocitoqu&#xED;mica. Se identificaron y clasificaron 88 mutantes con alteraci&#xF3;n de la morfolog&#xED;a NMJ. Loci de inserci&#xF3;n en estos mutantes codificar los diferentes tipos de prote&#xED;nas, incluyendo ATP y GTPasas, reguladores del citoesqueleto, las mol&#xE9;culas de adhesi&#xF3;n celular, quinasas, fosfatasas, reguladores de ARN, los reguladores de la formaci&#xF3;n de prote&#xED;nas, factores de transcripci&#xF3;n, y los transportistas. El trece por ciento de las inserciones en los genes que codifican prote&#xED;nas de funci&#xF3;n nueva o desconocida. Pruebas y ensayos de complementaci&#xF3;n de RT-PCR indican que aproximadamente el 51% de las l&#xED;neas de inserci&#xF3;n son portadores de mutaciones de fondo. Nuestros resultados revelan que la sinaptog&#xE9;nesis requiere la acci&#xF3;n coordinada de muchos tipos diferentes de prote&#xED;nas, tal vez tanto como el 44% de la totalidad del genoma - mutag&#xE9;nesis de transposones y que llevan advertencias importantes que deben respetarse a la hora de interpretar los resultados generados mediante este m&#xE9;todo.

Kristen Werner

Department of Physiology and Cellular Biophysics

Columbia University College of Physicians and Surgeons

Drosophila Larval NMJ Immunohistochemistry

Kristen Werner

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Physiology and Cellular Biophysics

Columbia University College of Physicians and Surgeons

Drosophila Larval NMJ Immunohistochemistry

Department of Physiology and Cellular Biophysics