在您开始之前<ol><li>准备了以下解决方案：PBT（0.1％海卫X100在1X PBS），PBTB（0.2％BSA在PBT），和PBTN（在PBTB 2％的农工商超市）。 </li><li>解剖果蝇幼虫。请参阅果蝇幼虫NMJ夹层。 </li></ol>免疫组织化学<ol><li>移动到1.5 ml管中含有PBT的幼虫。幼虫洗净两次15分钟的PBT。注意：洗净，放在一个nutator混频器1.5 ml管。与pippetor取出的液体，并用新鲜的液体取代它。 </li><li>卸下的PBT。 30分钟，在PBTB两次清洗。 </li><li>取出的PBTB。在PBTN清洗两次15分钟。 </li><li>孵育在稀释后在室温中PBTN 1小时或4 ° C过夜的主要抗体。 </li><li>冲洗两次PBTB。注：冲洗添加解决方案，并迅速删除。 </li><li> PBTB 15分钟两次清洗。 </li><li>在PBTN洗为30分钟。 </li><li>孵育在二次抗体稀释在PBTN（和标记的抗体，如果你正在使用的一个）。 </li><li>在锡纸孵育盖在室温下为1.5小时。 </li><li>冲洗两次PBTB。 </li><li> PBTB 15分钟两次清洗。 </li><li>继续安装。 </li></ol>安装注：如果样本将被立即成像甘油山。如果样品将被保存一个多星期前成像，或者如果样品必须成像多次延长黄金山。若要使用，延长2-3分钟，在65℃水浴中放置一个瓶子。延长黄金等份，并保持在45-50 º C的热块<ol><li>在PBT倒在一块手表玻璃染色PREPS。 </li><li>一些甘油放在一个洁净的载玻片进行处理。 </li><li>手表玻璃挑选出来一个角落使用镊子，将动物处理幻灯片。确保他们是角质层的一面朝下。 </li><li>删除处理载玻片上的新鲜刀片的头部和尾部。这exacto刀与刀片＃16。 </li><li>在另一张幻灯片（幻灯片安装），把一个小滴甘油/延长和蔓延，用干净的镊子。 </li><li>将解剖的动物，其边缘安装的幻灯片，照顾，而不是反转。尝试安装在相同的方向行。山6-8动物每张幻灯片。 </li><li>下降上盖玻片放入甘油EDGE /延长，慢慢地释放它。 </li><li>指甲油密封的幻灯片。注[不要形象，直到清漆干燥。这通常需要10分钟。安装在延长黄金样品，让幻灯片的干燥密封或成像前至少三个小时。] </li></ol>

<ol>
	<li>Jan, L. Y., Jan, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Properties+of+the+larval+neuromuscular+junction+in+Drosophila+Melanogaster.">Properties of the larval neuromuscular junction in Drosophila Melanogaster.</a> J. Physiol. 262, 189-214 (1976).</li><li>Johansen, J., Halpern, M. E., Johansen, K. M., Keshishian, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereotypic+morphology+of+glutamatergic+synapses+on+identified+muscle+cells+of+Drosophila+larvae.">Stereotypic morphology of glutamatergic synapses on identified muscle cells of Drosophila larvae.</a> J Neurosci. 9, 710-725 (1989).</li><li>Kesheshian, H., Broadie, K., Chiba, A., Bate, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+neuromuscular+junction:+a+model+system+for+studying+synaptic+development+and+function.">The Drosophila neuromuscular junction: a model system for studying synaptic development and function.</a> Annu Rev Neurosci. 19, 545-575 (1996).</li><li>Collins, C. A., DiAntonio, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+development:+insights+from+Drosophila.">Synaptic development: insights from Drosophila.</a> Curr Opin Neurobiol. 17 (1), 35-42 (2007).</li></ol>

免疫组织化学（IHC）NMJ生物学研究是至关重要的，因为它使可视化的NMJ。这是通过使用的抗体，承认神经细胞膜（如辣根过氧化物酶），突触前（例如，CSP，SYT），和/或postsynapse（例如，DLG）。信号分子，结构蛋白，或利益的新的蛋白质，也可以染色。然后，基因突变或missexpressed，和IHC检测突触的结构和/或神经信号的扰动。 果蝇 NMJ年初以来，照亮它的基本结构和功?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Stereomicroscope &#x201C;Stemi&#x201D; 2000</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Carl Zeiss MicroImaging Inc.</td>
<td>495101-9804-000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Light Source KL 1500 LCD</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Carl Zeiss MicroImaging Inc. </td>
<td>000000-1063-181</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dumont SS Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools Inc.</td>
<td>11200-33</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dumont #5 Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools Inc.</td>
<td>11252-20</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Adams&#x2122; Nutator Mixer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Becton, Dickinson and Company</td>
<td>421105</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>No.1 Precision knife</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>X-Acto</td>
<td>3201</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>No. 16 Blades</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>X-Acto</td>
<td>216</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>ProLong Gold Antifade reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen Corporation</td>
<td>36930</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

drosophila larval nmj immunohistochemistry

“<em&gt;果蝇</em神经肌肉接头（NMJ）是一个建立的模型系统，用于研究突触发展和可塑性。广泛使用<em&gt;果蝇</em&gt;电机系统由于其高的无障碍。它可以分析单细胞的分辨率。有30％hemisegment肌肉的已知其安排在外围的体壁。在高保真的模式，共有31个运动神经元连接到这些肌肉。利用分子生物学和遗传学，可以建立转基因动物或突变体。然后，可以研究的NMJ的形态和功能上的发展后果。免疫组织化学可以用来明确形象的NMJ组件。在这篇文章中，我们将演示如何使用抗体染色的可视化<em&gt;果蝇</em&gt;幼虫NMJ。

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Drosophila Larval NMJ Immunohistochemistry

此协议表明如何执行解剖果蝇幼虫的免疫组织化学。

果蝇幼虫NMJ免疫

The Drosophila neuromuscular junction (NMJ) is an established model system used for the study of synaptic development and plasticity. The widespread use ...

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Drosophila Larval NMJ Immunohistochemistry

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