朗伯比尔定律描述了吸光度和浓度之间的关系,它综合了科学家约翰·海因里希·朗伯和奥古斯特·比尔提出的原理。朗伯定律指出,当光穿过介质时,其强度的损失与光的原始强度和穿过介质的路径长度成正比。比尔定律提出,如果溶液的浓度和光线穿过溶液的路径长度的乘积为常数,则溶液的透射率将保持不变。现代的朗伯比尔定律结合了这两个定律,将光的吸光度、浓度和路径长度这三个参数关联起来。
根据朗伯比尔定律,吸光度是浓度、摩尔吸光系数和路径长度的乘积。在单一波长下,吸光度可以用以下公式给出:
其中 A 为吸光度,ε 为溶液中化合物或分子的摩尔吸光度 (单位为M^-1cm^-1), l 为比色皿的路径长度,c 为溶液的浓度 (单位为M)。溶液的吸光度是入射光强度 I_0 与透射光强度 I 之比的对数函数。
摩尔吸光度,也称为摩尔吸光系数 ε,它表示在路径长度为1.00cm的比色皿中,1.00M的溶液所产生的吸光度。溶液的吸光度与其浓度成正比。吸光度和浓度之间的线性关系使我们可以通过绘制吸光度与已知浓度的关系图(即校准曲线)来确定未知浓度。
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