亲和色谱法是一种强大的技术,广泛用于从复杂混合物中分离和纯化特定生物分子。它利用分析物与其对应物之间的高度选择性结合,例如抗体-抗原相互作用。对应物固定在固定相上,形成亲和柱。固定相通常由固体载体组成,例如琼脂糖或多孔玻璃珠,用于固定亲和配体。流动相具有双重用途 - 既能支持分析物和配体之间的强结合,随后又能削弱相互作用以洗脱分析物。当含有目标分析物的混合物通过色谱柱时,只有分析物会结合,而其他物质则被冲洗掉。然后可以通过改变 pH 值或离子强度等条件来洗脱结合的分析物,从而削弱其结合力。
这种方法在生物化学中特别有价值,因为它具有特异性,可用于分离蛋白质、酶、底物、抗体、抗原、受体和激素。亲和色谱法也可用于分离药物的单个光学异构体,这些异构体可能表现出不同的治疗效果。该过程涉及使用针对每种立体异构体的单克隆抗体。
亲和色谱法的主要优势在于其出色的特异性,这使其成为制备工作中快速分离生物分子的理想选择。
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