使用Qiagen公司的小量制备试剂盒的细菌菌落纯化质粒DNA

摘要

摘要

大肠杆菌质粒DNA纯化是分子克隆的核心技术。小规模小于5毫升细菌培养纯化（小量）为进一步酶促反应（聚合酶链反应和限制性内切酶消化），克隆验证或DNA分离的快捷方式。在这里，我们录像通过QIAGEN的QIAprep 8小量制备试剂盒小量的一般程序，旨在引进这种高效的技术，分子生物学技术的一般初学者。整个过程是基于碱裂解大肠杆菌细胞，在高盐存在的DNA吸附到硅。它包括三个步骤：）1，编制和结算的一种细菌裂解液，2）的DNA吸附到QIAprep膜，3）洗涤和质粒DNA洗脱。所有步骤都没有使用苯酚，氯仿，氯化铯，溴化乙锭，无酒精沉淀。它通常需要不到2个小时，以完成整个过程。