Preparation of a Suction Cup and Plugs for Calcium Imaging in Mouse

通过将一滴 PBS 沉积在亚克力盘中来开始制作吸盘的过程。使用 21 号扁平针通过毛细作用用 PBS 填充针尖。用半透明的硅胶粘合剂覆盖针尖，并放置约 10 分钟。

用剪刀将硅胶粘合剂剪成直径为两毫米的圆盘。要准备塞子，请取一个 0.75 毫米厚的塑料垫片，并在中心切出一个 1 厘米的正方形。用酒精清洁垫片和两个亚克力块，然后用镜头纸擦拭。

将垫片放在一个丙烯酸块上，将硅胶粘合剂沉积到中心以填充 90% 的开口。再添加一个亚克力块。施加大约一公斤的力，然后等待 20 分钟。

在手术显微镜下，用手术刀将硅胶粘合剂切成一个 1.5 毫米的三棱柱。用粘性塑料胶带清除三棱镜上的所有灰尘，然后将它们放在玻璃盖玻片上。将带有三棱镜的盖玻片放在电晕处理机下并打开它。

将电晕处理机靠近盖玻片，直到出现闪电， 并将其保持在该位置几分钟，直到安装棱镜和盖玻片.将塞子放入培养皿中后，在 70 摄氏度下孵育过夜。