Two-Photon Calcium Imaging of Mouse Superior Colliculus Neurons

植入头板和塞子后，将动物固定在带有头板的旋转跑步机上。将跑步机放在双光子显微镜下方，并将高度调整到合适的位置。在物镜和头板之间放置一个黑色铝制锥体，以防止显示器的光污染，从而进行视觉刺激。

要进行双光子成像，请在 20 到 80 毫瓦之间调整样品平面的激光功率。以 4.8 赫兹扫描 600 x 600 微米的视场，空间分辨率为每像素 2.4 微米，图像神经活动深度可达 350 微米。使用旋转编码器，记录鼠标在跑步机上的运动。

使用带有 50 毫米镜头的相机记录其瞳孔大小和位置。最后，通过记录刺激计算机发送的触发器，将这些记录和图像采集与视觉刺激同步。给出了野生型小鼠SC神经元的钙反应和荧光在图像中的标准偏差投影。