首先，将8至10周龄的麻醉C57黑6小鼠放在手术台上。使用钝镊子，拉出舌头并握住它。将喉镜插入口腔并观察声带。
将导丝插入 20 号静脉导管。然后轻轻地将导管推入气管，直到其翼部与鼻尖齐平。将鼠标连接到呼吸机，并将其置于加热灯下的仰卧位。
将直肠温度保持在37摄氏度。剃须和消毒手术区域后，在左右腹股沟区域做一个1厘米的皮肤切口，以进入股动脉。然后对股动脉远端进行消毒和结扎，并滴一滴利多卡因。
在股动脉近端放置一个夹子，并在夹子远端的动脉上做一个小切口。将聚乙烯 10 导管插入股动脉左动脉和右股动脉。将 50 μL 的 1 至 10 肝素化盐水注射到每条动脉管路中。
为防止线中凝血，请将鼠标转到俯卧位置，并将其安装在立体定位头架上。将三个针电极连接到左臂、左腿和右臂进行心电图监测。然后剃掉头顶，用三轮交替的碘和酒精棉签消毒。
做一个2.5厘米的中线皮肤切口，用四个小牵开器暴露整个颅骨表面进行脑成像。然后在头顶上方放置一个激光散斑对比成像仪。调整激光散斑成像仪以查看心脏骤停前脑血管的基线。
在诱发心脏骤停之前，用 26 微升复苏鸡尾酒储备液填充 1 毫升塑料注射器。一旦体温达到37摄氏度，将血氧仪调至100%，为血液充氧两分钟。然后通过右股动脉将多达 200 微升的血液吸入装有复苏混合物的塑料注射器中。
要诱发心脏骤停，请关闭氧气并将氮气增加到 100% 以诱导缺氧。关闭呼吸机、异氟烷汽化器、温度控制器和氮气流量计。确认心脏骤停期间没有脑血流。
通过观察激光散斑图像，将氧气调节至100%，并在心脏骤停发作8分钟后打开呼吸机。立即在一分钟内将抽出的含氧血液与复苏混合物混合，通过右股动脉注入血液循环，以恢复心率和血压等生命体征。查看激光散斑图像以确认大脑再灌注成功。
对于术后恢复，从头部取下牵开器，将 0.25% 布比卡因涂抹在皮肤切口上，并使用 6-0 尼龙缝合线闭合切口。然后在闭合的皮肤切口表面涂抹抗生素软膏。小鼠心脏骤停的诱导导致45秒内出现严重的心动过缓。
缺氧两分钟后，心率明显降低。血压下降到20毫米汞柱以下，脑血流停止。此外，在心脏骤停结束时，体温缓慢下降到32摄氏度左右。
注射血液复苏混合物后，所有重要功能开始恢复。激光散斑对比成像证实，在心脏骤停期间大脑中完全没有血流，光声图像能够识别心脏骤停过程中血流、结构和氧合的变化。
