Gastric Fluid Sampling, DNA Extraction, and qPCR for H. pylori Detection and its Antibiotic Resistance

首先，指导患者在样本采集前禁食过夜。第二天，打开字符串测试套件。拿起胶囊并握住绳子末端的环。

将绳子粘在患者的脸颊上。然后引导患者将胶囊放在喉咙后部附近的舌头上，然后用一口水吞咽。胶囊在患者胃中溶解一小时后，指示训练有素的助手小心地从患者身上拉出绳子。

接下来，将浸泡在胃液中的末端放入TSE样品保存溶液中，并切断绳子的下端。将携带收集管的标记标本放在试管架上并涡旋10秒钟。将32孔板倒置数次以重悬磁珠，涡旋10秒钟。

然后小心地从板上取下铝箔天花板。将每个样品和幽门螺杆菌DNA中的200微升胃液作为阳性对照转移到单独的孔中。将32孔板置于核酸提取机的相应样品槽中，进行DNA提取确认后自动提取DNA。

将多余的胃液和提取的DNA样品置于零下20摄氏度直至使用，将qPCR反应混合物解冻在冰上并通过轻弹和旋转混合以避免试剂损失对于32孔板中的每个样品，将20微升PCR反应混合物与尿素正向和反向引物混合， 尿素探针和五微升提取的DNA。将板放在qPCR仪上并设置热循环仪程序。将荧光信号采集设置为FAM数据采集，以扩增延长期开始运行，反应完成后。

保存数据以供分析。使用专门的 qPCR 软件分析数据，因为仪器会自动选择基线阈值。如果测试结果为h.

幽门螺杆菌阳性者将试剂盒更换为针对幽门螺杆菌试剂盒中23S rRNA基因和gyrA基因突变的检测试剂盒，并开始对样品进行耐药性测试。这项研究显示了h的检测。

幽门螺杆菌及其在胃液中的抗生素耐药性通过qPCR。在幽门螺杆菌阳性样本中。

S2的CT值在检测范围内，表明对克拉霉素和左氧氟沙星具有双重耐药性。S3 CT值在幽门螺杆菌感染和左氧氟沙星耐药的检测范围内，但克拉霉素耐药性不大，表明左氧氟沙星耐药。

同样，S4对幽门螺杆菌感染和克拉霉素耐药性具有可检测的CT值，但对左氧氟沙星耐药性没有检测到，表明克拉霉素耐药。S5 仅在 h 时具有可检测到的 CT 值。

幽门螺杆菌感染表明对两种抗生素均敏感，并允许使用任何一种药物治疗。