在制造金碳点复合纳米颗粒后,将无菌蓝宝石芯片放入24孔板中,并将带有1毫升培养基的种子细胞放入单个孔中。在潮湿的环境中孵育板以达到70%至80%的汇合度。将金碳点复合纳米颗粒加入单孔中,孵育四至六个小时。
在孵育结束时,从蓝宝石碎片中取出培养基。用 PBS 轻轻冲洗芯片,然后将蓝宝石芯片浸入 PBS 中进行 SERS 检测。要执行SERS实验,请打开计算机,拉曼光谱仪和785纳米激光器。
接下来,启动随附的软件并使用硅晶圆执行校准。单击新测量,然后单击光谱采集并调整光谱范围。然后转到采集选项卡,调整曝光时间和激光功率,然后单击确定以启动新的光谱采集。
使用20倍物镜获得清晰的细胞图像。然后切换到 50 倍镜头。在细胞上选择一个点进行测量后,单击运行以启动该过程,然后保存光谱。
要获得A549细胞的SERS成像,请单击新建流线图像采集,选择要拍摄的范围,然后单击确定。将边缘流线设置为785纳米中心为1,200厘米反转,曝光持续时间设置为5秒,激光功率设置为50%参数可根据需要修改。单击实时成像的新,选择信号到基线,并将第一个限制设置为 725,将第二个限制设置为 1, 700。然后转到区域设置,设置正确的步骤并单击确定。最后,单击“运行”开始执行 SERS 映像。
SERS Spectra显示,即使亚甲蓝的浓度低至10至零下9摩尔,与金纳米颗粒相比,金碳点复合纳米颗粒也表现出优异的SERS性能。在20个点上获得的SERS光谱表现出很高的相似性。在4摄氏度下放置金碳点复合纳米粒子一个月后,在950、1、185和1, 620厘米逆处的平均SERS活性分别显示出约5.43%11.44%和13.94%的衰减程度。
金碳点复合纳米颗粒对A549细胞几乎没有细胞毒性。给出了A549细胞的平均光谱。金碳点复合纳米颗粒聚集体在A549细胞的SERS映射中表现出明显的SERS信号,没有噪声背景。
来自不同细胞点的光谱证明了不同细胞质区域中组分的异质性。