In Vivo Visible Light Optical Coherence Tomography (OCT) Mouse Retinal Imaging

首先将麻醉的鼠标放在动物支架上，并用两条魔术贴带固定。打开电脑，打开软件激活激光器。调整动物支架，使激光在鼠标眼睛中居中。

通过面部预览、浅血管丛的视野、B 扫描和视野内的视网膜横截面来可视化后部。在对光学焦点进行细微调整后，获取可见光光学相干断层扫描或可见光 OCT 体积。将视神经头对准视野的四个角，以覆盖不同的视网膜区域。

使用基于强度的阈值方法检测视网膜表面，并从体积中生成 vis-OCT 纤维克数。通过选择前 16 微米的深度来裁剪视网膜神经纤维层或 RNFL。接下来，计算沿轴向的平均强度投影，以生成由视网膜神经节细胞轴突束和周围脉管系统组成的纤维革兰氏图像。

使用图形编辑器对齐血管，对四个图像进行蒙太奇后处理。将复合的 vs-OCT 纤维革兰氏与用 TUJ1 免疫染色的平坦视网膜的相应共聚焦图像进行比较，用于 RGC 轴突。血管表现出可区分的分支结构，可以与共聚焦图像上的ICAM II标记的血管相匹配。

体外共聚焦显微镜和体内 vs-OCT 之间的并排比较揭示了相同的 RGC 外显子束网络和周围的视网膜脉管系统。