从搅拌罐生物反应器容器中，暂时停止生物反应器控制器上的温度 pH 值和溶解氧控制，并将容器中的所有 PBS 完全分配到废物瓶中。将一次性过滤模块焊接到 10 升一次性储物袋上的端口。过滤完整的无血清MSC培养基并将其转移到储存袋中。
将泵的一个速度设置为 300 RPM。并将一升培养基从饲料袋中分配到容器中。停止泵。
并按照制造商的说明再次开始温度 pH 值并溶解至 DO。密封并断开将反馈连接到进料管的管子。将分散的微型载体瓶中的管子焊接到进料管上。
并将瓶子中的所有内容物泵入容器中。接下来，在无血清培养基中将 2.5 乘以 10 重悬于 8 个 HMC 中，并将它们转移到先前含有微载体悬浮液的空瓶中。在瓶内加入无血清培养基至总共 500 毫升，并混合细胞悬液。
将瓶子中的所有内容物泵入容器中。密封并断开连接奶瓶和饲料管的管子，然后焊接回饲料袋。调整控制器上的搅拌设置，以启动对微载体的细胞接种。
并建立自动化培养基补充和交换制度。将一次性采样袋焊接到采样管上。并在所需的时间点收集样本。
在控制器上收获细胞时，将搅拌速度设置为零，以使微载体沉降。并将上清液分配到进料方案中，在容器中留下约一升培养悬浮液。将装有 50 毫升新鲜制备的消化液的袋子焊接到 500 毫升 HBSS 中进行稀释。
并通过进料管将所有溶液泵入容器中。将搅拌速度设置在 40 到 45 RPM 之间以溶解微载体。微载体在 40 至 60 分钟内溶解后，将一次性 3 升储存袋焊接到收获管上，并完全抽出细胞悬浮液。
在细胞收获期间打开细胞处理系统。并根据制造商的说明在仪器上安装一次性电池处理套件。将细胞悬液袋、洗涤缓冲液和培养基焊接到试剂盒上。
输入操作参数并启动自动清洗和重新悬浮过程。从离心机室中收集细胞样品，如细胞处理系统所示，用于细胞密度计算。计数后，使用完全无血清培养基将细胞密度重新调整至每毫升 6 个细胞的 2 倍 10。
对于 15 升生物反应器中的细胞制剂过程，使用制剂缓冲液重新悬浮收获的细胞。将 250 毫升重新悬浮的细胞焊接到细胞填充物上。将一次性填充和整理耗材套件组装到细胞填充系统上。
在电池重新悬浮之前，按照制造商的说明打开预冷系统。按照系统上的说明进行操作，并将其设置为每袋填充 30 毫升，每组总共填充 20 袋。将新的 20 个冷冻保存袋焊接到一次性填充和整理耗材套件上，并重复填充和整理，直到所有细胞等分。
对于hMSCs，当细胞活力高于90%时，累积扩增了128倍葡萄糖摄入量与细胞扩增呈负相关，显示出与健康细胞生长相关的代谢。新鲜收获的间充质干细胞保留了经典的表型标记物，阳性标记物的表达率超过 95%，阴性标记物的表达率低于 2%。冻存细胞在解冻并重新铺至2D烧瓶后表现出良好的粘附性、正常的膨胀行为和典型的纺锤形，呈螺旋状生长。
此外，这些细胞还保持了分化成骨、成脂和成软骨谱系的能力。该平台也可用于培养其他锚定依赖性细胞，例如 HEK293T 和 Vero 细胞。在 15 升生物反应器中进行 B2B 转移过程后，HEK293T细胞达到峰值细胞浓度 1.68 乘以每毫升 7 个细胞中的 10 个。
而 Vero 细胞的浓度达到 1.08 乘以 10 到 7 个细胞。两种细胞类型都保持了高活力。
