首先用新鲜的碳化Ames替换含有小鼠视网膜的培养皿中的Ames培养基。使用广口移液管将一块解剖的小鼠视网膜放在载玻片上,神经节细胞面朝上。用精细的任务擦拭将其抹平,去除多余的液体。
如有必要,使用细尖画笔在解剖显微镜下轻轻拉动视网膜边缘。用镊子将一块干燥的硝酸纤维素膜放在视网膜上,将其粘附在神经节细胞侧。将视网膜翻转过来,将硝酸纤维素放在载玻片上,然后在视网膜的感光侧放置另一片干燥的膜片。
现在,用艾姆斯介质润湿画笔的尖端。对上膜施加轻微的向下压力,以帮助均匀粘附。接下来,用一对镊子将下膜固定在玻璃上。
然后小心地使用另一对以缓慢、稳定的动作剥离上膜。处理含有感光器的上膜。最后,将含有内视网膜的下膜放回碳化的Ames培养基中。