Electroporation of Agrobacterium tumefaciens for Genetic Engineering of Microalgal Cells

首先将 50 微升电感受态根癌农杆菌细胞加入预冷的 0.1 毫米 Q-vet 中。向 Q-vet 中加入 2 微升 pCAMBIA1302。现在使用 2， 400 伏的电穿孔仪对细胞进行电穿孔。

立即向 Q-vet 中加入 1 毫升 LB 培养基，然后上下移液以轻轻混合。接下来，将重悬的细胞转移到 1.5 毫升微管中。然后在 24 至 30 摄氏度下孵育至少一小时以恢复。

现在将细胞铺在补充抗生素的LB螺旋钻上。将培养板在 28 至 30 摄氏度下孵育 2 至 3 天。最后，在LB肉汤中接种单个菌落。

让文化在一夜之间成长。然后用 50% 甘油溶液在 80 摄氏度下冷冻保存含质粒的菌株以备将来使用。