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Agrobacterium tumefaciens-Médié par le génie génétique des microalgues vertes, Chlorella vulgaris

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3.0K Views

•

08:00 min

•

October 27th, 2023

DOI :

10.3791/65382-v

October 27th, 2023

•

M. Reza Roushan¹, Chuchi Chen¹, Parisa Ahmadi¹, Valerie C. A. Ward¹

¹Department of Chemical Engineering, University of Waterloo

Transcription

Le champ de la recherche s’est concentré sur le développement et l’optimisation d’un protocole de transformation de la chlorella vulgaris. Nous avons cherché à créer une souche transgénique stable de chlorella vulgaris à l’aide d’Agrobacterium tumefaciens et d’un plasmide spécifique, pCAMBIA1302, qui leur a permis d’insérer un gène d’intérêt et le potentiel d’applications biotechnologiques. Ingénierie métabolique et biologie synthétique, microscopie et imagerie, édition de gènes CRISPR-Cas9, bioinformatique, modélisation informatique, télédétection et imagerie satellitaire, nanotechnologie, bioprocédés et traitement en aval.

Cette étude présente un protocole optimisé de transformation du milieu d’Agrobacterium tumefaciens pour la microalgue chlorella vulgaris à l’aide d’un plasmide et d’un marqueur spécifiques. Il jette les bases de l’amélioration des microalgues par la technologie, en surmontant les limites précédentes des outils de transformation fiables pour C. vulgaris.

Résumé

Ce protocole décrit l’utilisation de la transformation médiée par Agrobacterium tumefaciens (AMT) pour intégrer le(s) gène(s) d’intérêt dans le génome nucléaire de la microalgue verte Chlorella vulgaris, conduisant à la production de transformants stables.

Explorer plus de vidéos

Transformation m di e par Agrobacterium Tumefaciens

G nie g n tique

Microalgues vertes

Chlorella vulgaris

G ne rapporteur

Prot ine fluorescente verte mGFP5

Marqueur de r sistance aux antibiotiques

S lection des mutants

Milieu de tris ac tate phosphate TAP

Transformation stable

Cassette d ADN T

Colonies transg niques PCAMBIA1302 Vecteur d expression v g tale

Chapitres dans cette vidéo

0:00

Introduction

1:13

Preparation of Electrocompetent Agrobacterium tumefaciens Culture for Microalgal Genetic Engineering

2:49

Electroporation of Agrobacterium tumefaciens for Genetic Engineering of Microalgal Cells

4:01

Agrobacterium‐Mediated Transformation of Chlorella vulgaris and Confirmation of Gene Integration via Colony PCR (cPCR)

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