首先,记录每只老鼠的重量,然后将安乐死的老鼠仰卧放置,并用胶带固定其四肢。使用70%异丙醇对手术区域进行消毒。接下来,在皮肤上创建一个从中腹部到颈椎前部的中线切口。
要进入气管,请小心地缩回脂肪垫,横向移动带状肌肉并将气管与周围的结缔组织分开。使用镊子,在气管和食道之间创造一个空间。然后抬起剑突并切断横膈膜。
插入止血钳以抬高胸骨,以便从胸骨到颈部区域畅通无阻。夹住两侧的肋骨,切开穿过颈部肌肉延伸的胸骨。现在去除胸腺和任何阻塞气管的脂肪或肌肉,露出气管分叉处。
切开主支气管并小心地将气道与食道分开。之后,切开喉部并将其取出。用无菌盐水溶液或保存溶液喷洒解剖的气管。
使用浸泡在无菌盐水或保存溶液中的无菌纱布,并将其放在冰上以保持活力。轻度麻醉小鼠和诱导室后,腹膜内注射由甲苯噻嗪和氯胺酮组成的混合物。将小鼠放回诱导室,保持2至3%异氟烷。
然后在手术部位剃掉皮毛。在经口气管插管前确认对脚趾捏合没有反射反应。使用 20 号静脉导管,经口气管插管小鼠并将其连接到含有 50% 氧气和 2% 异氟烷的呼吸机。
现在,激活加热垫并将鼠标放置在加热垫上的右侧位置,头部远离外科医生,尾巴朝向外科医生。然后用胶带固定四肢。在眼睛上涂抹兽药膏,以防止麻醉时干燥。
首先用 7.5 聚维酮碘擦洗手术区域,然后用 70% 异丙醇擦洗,最后用 10% 聚维酮碘擦洗。在此期间,将供体气管加载到 16 号静脉导管中。在接受者的皮肤上切开切口后,烧灼肌肉和结缔组织。
使用两个牵开器,打开第五或第六肋间隙并保持肋骨保持打开。然后用棉签和剪刀解剖下肺韧带。模拟供体气管通路的创建。
为了固定呼吸机流出管,用三通旋塞阀将其部分闭塞,以促进左肺的充气。用 20 号针刺穿左肺以创建通路。然后将 16 号静脉导管插入左肺并将供体气管挤出其中。
插入气管同种异体移植物后,松开三通旋塞阀,使呼气流畅通无阻地通过流出管。要闭合胸膜注射部位,请将夹子精确定位在穿刺部位,其边缘与肺边缘的轮廓对齐。然后用生理盐水填充胸腔,并用纱布吸收生理盐水。
对左肺进行再充气,并使用缝合线闭合肋骨。用中断的缝合线闭合肌肉和皮肤。现在,关闭异氟醚并在手术结束时皮下注射美洛昔康镇痛药。
观察接收鼠标,直到它醒来。然后取出气管插管,将受体小鼠放入笼子中。气管同种异体移植物与成纤维细胞组织完全阻塞,上皮细胞明显破坏。
相反,气管同工移植物保持通畅,上皮细胞被保留。移植气管同种异体移植物在肺中观察到淋巴聚集。