筛选 DIO 对正常 DAKIKI 细胞的安全浓度和影响的测定

首先，以每孔 40 万个细胞的密度将 DAKIKI 细胞接种在 96 孔板中。设置不同的实验组，然后根据分组方法进行相应的处理。将板在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳下孵育 24 小时。

对于乳酸脱氢酶细胞毒性测定，向高对照组的每个孔中加入 5 μL 裂解物。并将板在 5% 二氧化碳和 37 摄氏度下孵育 15 分钟。然后，向每个孔中加入 100 μL 反应混合物。

为了淬灭反应，每孔加入 50 μL 终止反应溶液。对于细胞计数试剂盒-8 或 CCK-8 检测，在初始孵育 24 小时后，向每个孔中加入 20 μL CCK-8 试剂。并将板放回 5% 二氧化碳和 37 摄氏度的培养箱中 2 小时。

乳酸脱氢酶细胞毒性测定结果显示，地奥霉素在浓度为 0.25 至 1.0 μg/mL 时诱导的细胞毒性不显著，乳酸脱氢酶释放率低于 10%CCK-8 测定显示，与模型组相比，地奥霉素以浓度依赖性方式抑制 LPS 诱导的 DAKIKI 细胞增殖，浓度为 0.5 和 1.0 μg/mL。